專利名稱：見血清提取物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及見血清提取物及其用途。
背景技術(shù)：
見血清為蘭科植物脈羊耳蘭Liparis nervosa (Thunb. ) Lindl.的全草,又稱“立地好”、“黑蘭”、“矮胖兒”，性寒，味苦，涼血止血、清熱解毒。見血清常生長(zhǎng)在山野、溪邊等陰濕處，分布于四川、湖北、臺(tái)灣等地，目前民間用藥材均為野生。
迄今，國(guó)內(nèi)外對(duì)見血清的研究報(bào)道較少，文獻(xiàn)記載也不夠詳盡。在對(duì)見血清的止血研究上，周繼銘等使用見血清與其他藥材進(jìn)行組方，發(fā)現(xiàn)復(fù)方見血清止血藥對(duì)臨床 14類54例手術(shù)切口有顯著止血效果，藥物能被機(jī)體吸收，無繼發(fā)性出血，傷口快速愈合 (周繼銘，劉常五，冉崇行等.復(fù)方見血清外用止血藥的初步研究[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，1983，3(3) :101-2.)。
目前，還未見有見血清有效部位和活性成分的相關(guān)報(bào)道。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種見血清提取物，以及該提取物的用途。
本發(fā)明提供了一種見血清乙醇提取物，它是由如下方法制成取見血清藥材，將其粉碎后用60、5%的乙醇提取，提取液回收溶劑后，即得見血清乙醇提取物。
上述提取方法包括冷浸、回流、超聲或微波提取。
本發(fā)明還提供了一種見血清乙醚提取物，它是由如下方法制成取上述見血清乙醇提取物，加水混懸后依次用石油醚、乙醚萃取，取乙醚萃取液，回收溶劑后，即得見血清乙醚提取物。將乙醚提取物經(jīng)過反復(fù)硅膠柱層析，采用不同比例的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，石油醚乙酸乙酯(30:1)得到β-谷甾醇，石油醚乙酸乙酯(20:1)得到木栓酮，石油醚乙酸乙酯(10:1)得到乙酰胺。
本發(fā)明還提供了一種見血清乙酸乙酯提取物，它是由如下方法制成取上述見血清乙醇提取物，加水混懸后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取液，回收溶劑后，即得見血清乙酸乙酯提取物。
本發(fā)明還提供了一種見血清正丁醇提取物，它是由如下方法制成取上述見血清乙醇提取物，加水混懸后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，取正丁醇萃取液，回收溶劑后，即得見血清正丁醇提取物。將正丁醇提取物加入蒸餾水后上DlOl大孔吸附樹脂，用包括濃度為60%的乙醇進(jìn)行梯度洗脫，回收60%部位浸膏，然后通過硅膠短柱層析，分別以不同比例的氯仿-甲醇梯度洗脫，氯仿甲醇(15:1)得到3，5- 二(3-甲基-2- 丁烯) 苯甲酸-4-0- β -D-吡喃木糖-(I — 2) - β -D-吡喃葡萄糖苷，氯仿甲醇(10:1)得到腺苷。
本發(fā)明還提供 了一種見血清水相提取物，它是由如下方法制成取上述見血清乙醇提取物，加水混懸后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，將萃余液濃縮后，即得見血清水相提取物。
本發(fā)明還提供了上述的見血清提取物在制備止血藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供的見血清乙醇提取物、乙醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、 水相提取物或其混合物加上藥學(xué)上可接受的載體形成組合物。
本發(fā)明所提供的見血清提取物均具有良好的止血活性，可廣泛用于治療體內(nèi)、外出血及手術(shù)出血。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1見血清乙醇提取物的制備
取見血清藥材，將其粉碎后加入85%的乙醇回流提取2次，每次3h，每次加入藥材 10倍量(W/V)的乙醇，趁熱過濾，合并濾液，回收至無醇味后干燥，即制得見血清乙醇提取物。
上述用乙醇提取時(shí)還可采用冷浸、回流、超聲或微波提取。
實(shí)施例2 見血清各有效部位的制備
取實(shí)施例1制備的見血清乙醇提取物，加水混懸后，依次用等體積的石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，每種溶劑萃取3次，分別收集石油醚萃取液、乙醚萃取液、乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液以及萃余液，回收溶劑后，60°C減壓干燥，分別得到見血清石油醚部位、乙醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水相部位。
將見血清乙醚提取物經(jīng)過反復(fù)硅膠柱層析，以不同比例的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，石油醚乙酸乙酯(30:1)得到化合物(1)，石油醚乙酸乙酯(20 :1)得到化合物(2)， 石油醚乙酸乙酯(10:1)得到化合物(3)，應(yīng)用多種光譜及波普技術(shù)(IR，UV，MS，NMR)對(duì)化合物(I )、化合物(2 )和化合物(3 )進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，確定化合物(I)為β-谷留醇，化合物(2)為木栓酮，化合物(3)為乙酰胺?；衔?I)、化合物(2)和化合物(3)的結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種見血清乙醇提取物，其特征在于由如下方法制成取見血清藥材，將其粉碎后用60、5%的乙醇提取，提取液回收溶劑后，即得見血清乙醇提取物。
2.—種見血清乙醚提取物，其特征在于由如下方法制成取權(quán)利要求1所述的見血清乙醇提取物，加水混懸后依次用石油醚、乙醚萃取，取乙醚萃取液，回收溶劑后，即得見血清乙醚提取物。
3.—種見血清乙酸乙酯提取物，其特征在于由如下方法制成取權(quán)利要求1所述的見血清乙醇提取物，加水混懸后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取液，回收溶劑后，即得見血清乙酸乙酯提取物。
4.一種見血清正丁醇提取物，其特征在于由如下方法制成取權(quán)利要求1所述的見血清乙醇提取物，加水混懸后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，取正丁醇萃取液， 回收溶劑后，即得見血清正丁醇提取物。
5.一種見血清水相提取物，其特征在于由如下方法制成取權(quán)利要求1所述的見血清乙醇提取物，加水混懸后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，將萃余液濃縮后，即得見血清水相提取物。
6.權(quán)利要求1-5任意一項(xiàng)所述的見血清提取物在制備止血藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種見血清乙醇提取物、乙醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水相提取物以及包括乙醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水相提取物活性成分的提取物，本發(fā)明還公開了上述見血清提取物的用途。本發(fā)明提供的見血清提取物均具有良好的止血活性，可廣泛用于治療體內(nèi)、外出血及手術(shù)出血。
文檔編號(hào)A61P7/04GK103041176SQ20131000612
公開日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2013年1月8日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月8日
發(fā)明者宋芹, 楊偉峰, 茍小軍, 陳封政, 顏軍, 郭曉強(qiáng) 申請(qǐng)人:成都大學(xué)