專利名稱：核苷酸類似物組合物及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類具有治療預防病毒性疾病、肝炎的化合物，尤其涉及一種核苷酸類似物組合物及制備方法背景技術(shù)：
膦酰基甲氧基核苷酸類似物是已知物質(zhì)。用于多種病毒的感染治療、預防，參見WO9904774、CN1264387A、CN1347695A，此類物質(zhì)可與有機或無機酸反應(yīng)而成各類具有不同性質(zhì)的組合物，從已公開的文獻看出，這類物質(zhì)主要用于治療、預防病毒感染，而無保肝、護肝作用，對于病毒性感染患者來說，往往既需要抗病毒治療，又需要保肝護肝治療，因而，病人需要同時服用具兩種功能的藥物，并且，這類藥物還有熔點低，易吸濕，固態(tài)穩(wěn)定不太好的缺點，因而開發(fā)新一類組合物、增加新的品種、完善和提高其各種性能，是我們醫(yī)藥界當務(wù)之急。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服上述物質(zhì)的缺點，增加新的品種，本發(fā)明提供一種穩(wěn)定性好，具有抗病毒、保肝護肝雙重作用的核苷酸類似物組合物及制備方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案是以下述方式實現(xiàn)的一種核苷酸類似物組合物，其結(jié)構(gòu)為 R是-CH2-O-C(O)-C(CH3)3或-CH2-O-C(O)-O-CH(CH3)2，R1是-H或-CH3，X是C，當R1為-CH3時，X是手性碳原子。
本發(fā)明包括各異構(gòu)體、對映體混合物或單獨的異構(gòu)體、對映體。也包括各種溶劑化合物。
制備本發(fā)明組合物的反應(yīng)式為 其中II式為腺嘌呤衍生物、III式為齊墩果酸，R是-CH2-O-C(O)-C(CH3)3或-CH2-O-C(O)-O-CH(CH3)2，R1是-H或-CH3，X是C，當R1為-CH3時，X是手性碳原子。
本反應(yīng)一般在30-50℃之間進行，溶媒為氯仿，也可選擇丙酮、異丙醇、乙醇、甲醇。II和III式以等摩爾比例投料。在30-50℃攪拌20-40分鐘，減壓濃縮，干燥即得本發(fā)明化合物。
組合物為固體。
當R1為甲基時，其中含有手性中心碳原子被拆分的化合物，或者富含其中一個異構(gòu)體。
該組合物含有組合物和可接受的載體，把治療上有效量的組合物口服給藥至感染病毒的患者，也可給藥至肝炎患者。齊墩果酸被溶解在氯仿中。本發(fā)明的化合物可與填充劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑，表面活性劑、賦型劑相混合，制成適于口服或非腸胃給藥形式。優(yōu)選的劑量形式是片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、溶液劑。常用的輔料有預膠化淀粉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、乳糖一水合物、硬酯酸鎂、滑石粉、水、乙醇，食用香料。制劑的制備方法是制藥技術(shù)人員容易解決的。根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)，臨床醫(yī)師可以簡單地直接地確定本化合物的正確使用劑量。
該組合物可以是片劑的組合物，片劑含有治療量的9-[2-[[雙(特戊酰氧基)甲氧基]膦?；鵠甲氧基]乙基]腺嘌呤·齊墩果酸(1∶1)；片劑含有治療量的9-[2-(R)-[[雙[[(異丙氧基羰基)氧基]甲氧基]膦?；鵠甲氧基]丙基]腺嘌呤·齊墩果酸(1∶1)。片劑含有適量的預膠化淀粉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、乳糖一水合物、硬酯酸鎂。
本化合物具有出人意料的優(yōu)點，熔點高，不易吸濕，固態(tài)穩(wěn)定性好，動物實驗證明本組合物既具有抗病毒作用，又具有保肝護肝作用，因而，病人服用同時具有兩種功能。
具體實施例方式下面結(jié)合實施本發(fā)明實施例對本發(fā)明作進一步說明。
實施例1取9-[2-[[雙(特戊酰氧基)甲氧基]膦酰基]甲氧基]乙基]腺嘌呤1.5g(0.0029mol)于35℃溶于5ml異丙醇，取齊墩果酸1.365g(0.0029mol)加氯仿17ml，加熱使溶解，將9-[2-[[雙(特戊酰氧基)甲氧基]膦?；鵠甲氧基]乙基]腺嘌呤的異丙醇溶液慢慢加入氯仿溶液中，攪拌15分鐘，于40-50℃減壓蒸出溶劑，取出殘留物，在≤50℃，30mmHg柱下干燥至恒重，即得9-[2-[[雙(特戊酰氧基)甲氧基]膦酰基]甲氧基]乙基]腺嘌呤·齊墩果酸鹽(代號為AD·齊墩果酸鹽)。
通過元素分析、紅外、NMR譜說明與假設(shè)的結(jié)構(gòu)式一致。
熔點未測到元素分析理論值C 62.67H 8.35N 7.33實測值C 62.72H 8.39N 7.28實施例2取9-[2-(R)-[[雙[[氧基羰基]氧基]甲氧基]膦?；鵠甲氧基]丙基]腺嘌呤1.5g(0.0028mol)溶于5ml異丙醇，取齊墩果酸1.32g(0.0028mol)加氯仿17ml，加熱使溶解，將9-[2-(R)-[[雙[[氧基羰基]氧基]甲氧基]膦?；鵠甲氧基]丙基]腺嘌呤的異丙醇溶液慢慢加入氯仿溶液中，攪拌15分鐘，于30-40℃減壓蒸出溶劑，取出殘留物，在≤50℃，30mmHg柱下干燥至恒重，即得9-[2-(R)-[[雙[[氧基羰基]氧基]甲氧基]膦?；鵠甲氧基]丙基]腺嘌呤·齊墩果酸鹽(代號為TD·齊墩果酸鹽)。
通過元素分析、紅外、NMR譜說明與假設(shè)的結(jié)構(gòu)式一致。
熔點未測到。
元素分析理論值C 60.28H 8.05N 7.18實測值C 60.21H 8.01N 7.16保肝作用實驗選用180-220g健康大白鼠，分成三組，每組8只，第一組為正常對照組，第二組為肝損傷模型組，第三組為9-[2-[[雙(特戊酰氧基)甲氧基]膦?；鵠甲氧基]乙基]腺嘌呤·齊墩果酸治療組。第二組、第三組于實驗的第一、第五兩天分別皮下注射純四氯化碳5ml/Kg，第三組與第一至第六天皮下注射9-[2-[[雙(特戊酰氧基)甲氧基]膦酰基]甲氧基]乙基]腺嘌呤·齊墩果酸80mg/Kg(用20％吐溫80做成乳劑)，第一組于第一至第六天注射與藥物相同體積的2％吐溫80生理鹽水。于第七天將全部動物斷頭處死取血測定血清谷、丙轉(zhuǎn)氨酶，并取肝臟作病理切片檢查。
結(jié)果表明，9-[2-[[雙(特戊酰氧基)甲氧基]膦?；鵠甲氧基]乙基]腺嘌呤·齊墩果酸80mg/Kg劑量水平能明顯地抑制由四氯化碳所引起的血清谷、丙轉(zhuǎn)氨酶活力的升高。第一組SGPT為130.8±21.8ц/100ml，第二組SGPT為431.1±30.6ц/100ml，第三組SGPT為241.3±18.8ц/100ml，第二組與第三組相比較有顯著差異(P＜0.01)。
病理切片鏡檢觀察，表明9-[2-[[雙(特戊酰氧基)甲氧基]膦?；鵠甲氧基]乙基]腺嘌呤·齊墩果酸對肝細胞空泡變性、災(zāi)性浸潤、壞死等指標有明顯的改善作用。
體外抗乙肝病毒實驗如下將HBV DNA轉(zhuǎn)染的HePG22.2.15細胞株在10％的胎牛血清培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)，分成治療組和對照組，當生長達到70％培養(yǎng)瓶面積(25cm2)時，改用2％的胎牛血清培養(yǎng)液，并開始對治療組給予28ug.ml-1的AD·齊墩果酸鹽進行治療，每2天換培養(yǎng)液一次，治療組補充新的相同濃度的AD·齊墩果酸鹽，共培養(yǎng)10天。培養(yǎng)過程中測定兩組培養(yǎng)液中HBsAg含量，見下表。
表 培養(yǎng)液中HBsAg的濃度(ug.ml-1) 表中可見，治療組培養(yǎng)液中的HBsAg在治療的第2天開始下降，而對照組培養(yǎng)液的HBsAg隨培養(yǎng)時間的進展，穩(wěn)定、持續(xù)地增加，統(tǒng)計學處理表明，兩組之間在第6天開始有顯著性差異(P＜0.05，n＝6)，表明AD·齊墩果酸有抗HBV作用。
權(quán)利要求
1.一種核苷酸類似物組合物，其結(jié)構(gòu)式為式I R是-CH2-O-C(O)-C(CH3)3或-CH2-O-C(O)-O-CH(CH3)2，R1是-H或-CH3，X是C。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核苷酸類似物組合物，其特征在于組合物為固體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核苷酸類似物組合物，其特征在于當R1為甲基時，X是手性碳原子。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的核苷酸類似物組合物，其特征在于當R1為甲基時，其中含有手性中心碳原子被拆分的化合物，或者富含其中一個異構(gòu)體。
5.根據(jù)權(quán)利要求2的核苷酸類似物組合物，其特征在于它含有組合物和可接受的載體。
6.一種如權(quán)利要求1-5所述的核苷酸類似物組合物，其特征在于是以治療上有效量的組合物口服給藥至感染病毒的患者或給藥至肝炎患者。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-5所述的核苷酸類似物組合物的制備方法，其特征在于反應(yīng)式如下
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的核苷酸類似物組合物的制備方法，其特征在于II式為腺嘌呤衍生物、III式為齊墩果酸，R是-CH2-O-C(O)-C(CH3)3或-CH2-O-C(O)-O-CH(CH3)2，R1是-H或-CH3，X是C，當R1為-CH3時，X是手性碳原子；本反應(yīng)一般在30-50℃之間進行，溶媒可選擇氯仿、丙酮、異丙醇、乙醇、甲醇；II和III式以等摩爾比例投料；反應(yīng)在30-50℃進行，減壓濃縮，干燥即可。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核苷酸類似物組合物用于片劑藥物的制備，片劑含有9-[2-[[雙(特戊酰氧基)甲氧基]膦酰基]甲氧基]乙基]腺嘌呤·齊墩果酸或片劑含有9-[2-(R)-[[雙[[(異丙氧基羰基)氧基]甲氧基]膦?；鵠甲氧基]丙基]腺嘌呤·齊墩果酸。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的核苷酸類似物組合物，其特征在于片劑含有治療量的9-[2-[[雙(特戊酰氧基)甲氧基]膦酰基]甲氧基]乙基]腺嘌呤·齊墩果酸或治療量的9-[2-(R-[[雙[[(異丙氧基羰基)氧基]甲氧基]膦?；鵠甲氧基]丙基]腺嘌呤·齊墩果酸，適量的預膠化淀粉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、乳糖一水合物、硬酯酸鎂。
全文摘要
本發(fā)明提供了膦?；籽趸塑账犷愃莆锝M合物的齊墩果酸鹽及其制備方法。該組合物用于患者來進行抗病毒治療、預防，也可用于肝炎治療。本發(fā)明的組合物同時具有抗病毒和保肝護肝雙重作用，且熔點高、不易吸濕、固態(tài)穩(wěn)定性好，其合成方法收率高，可用于規(guī)模合成制造。
文檔編號A61P1/16GK1425680SQ02154160
公開日2003年6月25日 申請日期2002年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月27日
發(fā)明者李志海 申請人:李志海