專利名稱：作為GABA A受體調(diào)節(jié)劑的咪唑并[1,5－a]嘧啶并[5,4－d][1]苯并氮雜衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有以下通式的取代的咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜衍生物及其可藥用的酸加成鹽 其中，R1為鹵素或低級(jí)烷基；R2為氫、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、-(CH2)m-苯基，其中苯環(huán)可以被低級(jí)烷氧基取代，或是-(CH2)m-吲哚基；R3為-C(O)O-低級(jí)烷基、-C(O)OH或五元雜芳基，其中的雜環(huán)可以被低級(jí)烷基或環(huán)烷基取代；N 為0、1或2；M 為0、1或2。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)此類化合物對(duì)γ-氨基丁酸(GABA)Aα5受體結(jié)合位點(diǎn)可顯示高度的親和力和選擇性，并可用于增強(qiáng)認(rèn)知的治療或治療認(rèn)知障礙如阿爾茨海默病。
主要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基丁酸(GABA)的受體被分為兩大類(1)GABA A受體，為配體門(mén)控性離子通道超家族的成員，和(2)GABAB受體，其為G-蛋白偶聯(lián)受體家族的成員。GABA A受體復(fù)合物為與膜結(jié)合的雜五聚體蛋白聚合體，主要由α、β和γ亞單位組成。
到目前為止，已克隆出共21個(gè)GABA A受體亞單位并進(jìn)行了測(cè)序。為構(gòu)建可最為接近地模擬源自哺乳動(dòng)物腦細(xì)胞的天然GABA A受體的生化、電生理學(xué)和藥理學(xué)功能的重組GABA A受體，需要三種類型的亞單位(α、β和γ)。有力的證據(jù)顯示苯并二氮雜結(jié)合位點(diǎn)位于α和γ亞單位之間。在重組GABA A受體中，α1β2γ2可模擬典型的I型BzR(苯二氮雜受體)亞型的許多功能，而α2β2γ2、α3β2γ2和α5β2γ2離子通道被定義為II型BzR。
McNamara和Skelton在Psychobiology，21101-108中表明苯并二氮雜受體反向激動(dòng)劑β-CCM在莫氏水迷宮(Morris watermaze)模型中可增強(qiáng)空間學(xué)習(xí)能力。但是，β-CCM和其它傳統(tǒng)的苯并二氮雜反向激動(dòng)劑有促進(jìn)驚厥或引起驚厥的作用，這限制了它們作為人用認(rèn)知增強(qiáng)劑的使用。此外，這些化合物在GABA A受體各亞單位之間沒(méi)有選擇性，而GABA Aα5受體的部分或完全的反向激動(dòng)劑在GABA Aα1和/或α2和/或α3受體結(jié)合位點(diǎn)卻相對(duì)沒(méi)有活性，所以可用于提供用來(lái)增強(qiáng)認(rèn)知能力并且促驚厥作用減輕或消失的藥物。也可以使用對(duì)GABA Aα1和/或α2和/或α3受體結(jié)合位點(diǎn)不是完全沒(méi)有活性但對(duì)含有α5的亞單位有功能選擇性的GABA Aα5反向激動(dòng)劑。但是，優(yōu)選對(duì)GABA Aα5亞單位有選擇性并且對(duì)GABA Aα1、α2和α3受體結(jié)合位點(diǎn)相對(duì)無(wú)活性的反向激動(dòng)劑。
本發(fā)明涉及通式I化合物及其可藥用鹽、上述化合物的制備、包含它們的藥物及藥物的制備，以及上述化合物在控制或預(yù)防疾病、特別是前面所提及的類型的疾病中的用途，或在制備相關(guān)藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明，最優(yōu)選的適應(yīng)癥是認(rèn)知障礙，如阿爾茨海默病。
無(wú)論所討論的術(shù)語(yǔ)是單獨(dú)還是聯(lián)合出現(xiàn)，本說(shuō)明書(shū)中所使用的下列常見(jiàn)術(shù)語(yǔ)的定義均適用。
這里使用的術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烷基”指的是含有1至7個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基等。
優(yōu)選的低級(jí)烷基為具有1至4個(gè)碳原子的烷基。
術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烷氧基”指的是其中烷基殘基如上所定義且經(jīng)氧原子連接的基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“鹵素”指的是氯、碘、氟和溴。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”指的是具有3至7個(gè)碳環(huán)原子的環(huán)烷基，例如環(huán)丙基、環(huán)戊基或環(huán)己基。
術(shù)語(yǔ)“五元雜芳基”指的是例如1，2，4-噁二唑基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、咪唑基、吡唑基、異噻唑基、異噁唑基等。優(yōu)選1，2，4-噁二唑基和異噁唑基。
術(shù)語(yǔ)“可藥用的酸加成鹽”包括與無(wú)機(jī)酸和有機(jī)酸如鹽酸、硝酸、硫酸、磷酸、檸檬酸、甲酸、富馬酸、馬來(lái)酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、對(duì)甲苯磺酸等形成的鹽。
典型的優(yōu)選化合物是那些結(jié)合活性(Ki)低于15nM、對(duì)GABA Aα5亞單位具有選擇性且對(duì)GABA Aα1、α2和α3受體結(jié)合位點(diǎn)相對(duì)無(wú)活性的化合物。
優(yōu)選的通式I化合物為其中R3為基團(tuán)-C(O)O-低級(jí)烷基的那些化合物。典型的優(yōu)選化合物是其中R1為氫且R2如上所述的一組化合物，例如以下化合物9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，6-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，6-(1-甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，6-環(huán)丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，6-[(4-甲氧基苯基)甲基]-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯或6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯。
更優(yōu)選的通式I化合物是其中R3為-C(O)O-低級(jí)烷基，R2如上所述且R1為鹵素的那些化合物，例如以下化合物3-氟-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，3-氟-6-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，3-氟-6-(1-甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，6-環(huán)丙基-3-氟-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯或3-溴-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯。
更優(yōu)選的通式I化合物是其中R3為1，2，4-噁二唑基或異噁唑基，R2為低級(jí)烷基，n為0或1且R1為鹵素的那些化合物，例如以下化合物10-(3-環(huán)丙基-1，2，4-噁二唑-5-基)-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜或2-溴-11-甲基-7-(5-甲基-異噁唑-3-基)-8H-4b，6，10，12-四氮雜二苯并[e，g]薁。
這里的通式I化合物及其可藥用鹽可以按照本領(lǐng)域已知的方法，例如通過(guò)以下所述的工藝制備a)使通式II化合物
與三氯氧化磷反應(yīng)得到通式III化合物 其中取代基R1和R2及n具有以上所給出的定義，并使該化合物與通式IV化合物反應(yīng)， 得到通式V化合物， 再將此化合物用乙酸MeCO2H環(huán)化，得到通式I化合物，
其中R1至R3和n具有以上所給出的定義，或b)使通式III化合物， 其中取代基R1和R2和n具有權(quán)利要求1中所給出的定義，與通式IVa化合物反應(yīng)， 得到通式I化合物，或c)在以上給出的定義范圍內(nèi)對(duì)一個(gè)或多個(gè)取代基R1至R3進(jìn)行修飾，并且在需要時(shí)將所得的化合物轉(zhuǎn)化為可藥用的酸加成鹽。
鹽的制備是按照本身已知的、本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法于室溫下進(jìn)行。不僅可以制備與無(wú)機(jī)酸形成的鹽，也可以制備與有機(jī)酸形成的鹽。這種鹽的例子有鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、馬來(lái)酸鹽、琥珀酸鹽、甲磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽等。
以下

圖1、1a、2、3、4、5和6更詳細(xì)地描述了通式I化合物和/或它們的中間體的制備工藝。通式IV、VI、XVI、XX和XXVII化合物的原料為已知化合物或可以根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法制備。
圖1 圖1中的取代基如上所述。
圖1a圖1中第7步的通式I化合物的制備。
圖1a中的取代基如上所述。
根據(jù)以下文獻(xiàn)J.Heterocycl.Chem.，1978，15，577-583J.Org.Chem.，1976，41，2724-2727J.Org.Chem.，1976，41，2720-2724或Synthesis，1987，162，三氯氧化磷可以用下列等同的化合物替代 或 或 或二甲硫根據(jù)圖1和1a，通式I化合物可按如下方式制備在標(biāo)準(zhǔn)條件下以適當(dāng)取代的鄰氨基苯甲酸(VI)為原料制備酯(VII)。用適當(dāng)?shù)膲A和單乙酯琥珀酰氯處理酯(VII)而得到產(chǎn)物(VIII)，然后使該產(chǎn)物發(fā)生分子內(nèi)迪克曼環(huán)合而得到β-酮酯產(chǎn)物(IX)。然后在酸性或堿性條件下使(IX)脫乙氧羰基，得到適當(dāng)取代的苯并氮雜二酮(X)。用二甲基甲酰胺二甲氧縮醛處理產(chǎn)物，得到產(chǎn)物烯胺酮化合物(XI)，接下來(lái)在甲醇鈉存在下用適當(dāng)取代的脒(有時(shí)以鹽的形式)將此產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮(II)。然后將所得化合物溶解在三氯氧化磷中，將溶液加熱，隨后蒸發(fā)。然后將此產(chǎn)品的溶液加入到1)異氰基乙酸乙酯和叔丁醇鉀或2)二異丙基氨基鋰和(E)-(二甲基氨基-亞甲氨基)-乙酸酯的冷溶液中，加入乙酸后加熱進(jìn)一步環(huán)化。最終的通式I化合物用常規(guī)方法純化。
圖2通式VII的中間體化合物的備選制備方法。
此方法也已在J.Heterocyclic Chem.，1965，2，459中述及。
圖3 圖3中的取代基如上所述。
將通式XVI的α-四氫萘酮、羥胺、乙酸鈉與水/乙醇的混合物回流處理約20分鐘，然后冷卻至0℃。將所得產(chǎn)物加入約120℃的多磷酸溶液中并加熱。然后將生成的內(nèi)酰胺化合物溶解于BuOH和水中，隨后依次加入高錳酸鉀和硝酸鎂六水合物。反應(yīng)在室溫下進(jìn)行約48小時(shí)。經(jīng)過(guò)圖1的步驟5、6和7后得到通式Ia化合物。
圖4 圖4中的取代基如上所述。
這些中間體的制備在工作實(shí)施例中有更詳細(xì)的描述。
圖5 根據(jù)圖5制備了通式IVb化合物，其用于其中R3為異噁唑基的通式I化合物的制備。此反應(yīng)在圖6中述及。
根據(jù)圖5，對(duì)以下反應(yīng)步驟進(jìn)行更詳細(xì)的描述步驟15-甲基-異噁唑基-3-甲酸乙酯向2，4-二氧代戊酸乙酯的乙醇溶液中加入鹽酸羥胺和碳酸氫鈉。然后將反應(yīng)混合物加熱回流1小時(shí)。冷卻后，將混合物蒸發(fā)得到透明液體，將其蒸餾得到標(biāo)題化合物。
步驟2(5-甲基-異噁唑-3-基)-甲醇在0℃、氬氣環(huán)境下，于30分鐘內(nèi)將NaBH4分批加入到5-甲基-異噁唑基-3-甲酸乙酯的乙醇溶液中。使反應(yīng)溫度自然升溫至室溫。3小時(shí)后，用HCl稀釋反應(yīng)混合物，然后冷卻至室溫。混合物用醚洗滌，合并萃取液并使之干燥、蒸發(fā)。
步驟33-溴甲基-5-甲基-異噁唑在-10℃下，向PBr3和吡啶的甲苯溶液中加入羥甲基-3-甲基-5-異噁唑的吡啶溶液。然后在-10℃下將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，并在室溫下攪拌約14小時(shí)。然后，用水稀釋反應(yīng)混合物并用醚萃取。合并萃取液，隨后干燥、蒸發(fā)。殘余物通過(guò)色譜法進(jìn)行純化。
步驟43-疊氮基甲基-5-甲基-異噁唑在室溫下向3-溴甲基-5-甲基-異噁唑的丙酮溶液中加入NaN3。然后將反應(yīng)混合物攪拌約48小時(shí)。隨后將反應(yīng)混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取，干燥并蒸發(fā)。
步驟5(5-甲基-異噁唑-3-基)-甲胺在室溫下向劇烈攪拌的3-疊氮基甲基-5-甲基-異噁唑的異丙醇溶液中加入三乙胺、1，3-丙二硫醇和硼氫化鈉。在室溫下攪拌混合物。約19小時(shí)后，再加入0.5當(dāng)量以上的硼氫化鈉并在室溫下繼續(xù)攪拌至少7小時(shí)。然后在真空下使溶劑蒸發(fā)，將殘余物用10％檸檬酸水溶液溶解并洗滌。用NaOH水溶液將水層堿化至pH12、用氯化鈉飽和、用DCM萃取。合并DCM萃取液并使之干燥、濃縮。
步驟6N，N-二甲基-N’-(5-甲基-異噁唑-3-基-甲基)-甲脒將(5-甲基-異噁唑-3-基)-甲胺的N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛溶液加熱回流3小時(shí)。冷卻至室溫后，將溶劑蒸發(fā)得到通式IVb化合物。
根據(jù)圖1a和6，隨后可以將通式IVb化合物加入到通式III化合物中。
圖6 R1、R2和n如上所述。
如前所述，通式I化合物和它們的可藥用鹽具有重要的藥理學(xué)特性。已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物是含有α5亞單位的GABA A受體的配體，因此可用于需要增強(qiáng)認(rèn)知能力的治療中。
根據(jù)下面的試驗(yàn)對(duì)化合物進(jìn)行了研究。
膜的制備及結(jié)合試驗(yàn)化合物對(duì)GABA A受體各亞型的親和力是通過(guò)對(duì)結(jié)合于可表達(dá)組成為α1β3γ2、α2β3γ2、α3β3γ2和α5β3γ2的大鼠受體的SP9細(xì)胞的[3H]標(biāo)記的氟馬西尼([3H]Ro15-1788)(85Ci/mmol；Amersham)的競(jìng)爭(zhēng)能力而測(cè)定。
將細(xì)胞沉淀懸浮于Krebs-tris緩沖液(4.8mM KCl，1.2mM CaCl2，1.2mM MgCl2，120mM NaCl，15mM Tris；pH7.5；結(jié)合試驗(yàn)緩沖液)中，在冰上用polytron勻漿約15秒并在4℃下于UZ中離心30分鐘(100000g；轉(zhuǎn)速TFT4594＝300000rpm)。將細(xì)胞沉淀重新懸浮于Krebs-tris緩沖液中，并在冰上用polytron勻漿約15秒。制備每份1ml的等分試樣，測(cè)定蛋白質(zhì)(Bradford方法)并將所得的等分膜試樣貯存于-70℃下。
放射配體結(jié)合試驗(yàn)的試驗(yàn)體積為200μL(96孔板)，含有100μL的細(xì)胞。對(duì)于α1、α2、α3亞單位，所用的[3H]Ro 15-1788的濃度為1nM，對(duì)于α5亞單位，濃度為0.5nM，試驗(yàn)化合物的濃度范圍為10-10至3×10-6M。非特異性結(jié)合用10-5M地西泮確定，通常占總結(jié)合的不到5％。在4℃下將試樣孵育至平衡達(dá)1小時(shí)，并使用Packard收集器將其過(guò)濾收集至GF/C單層濾器上(Packard)并用冰冷的洗滌緩沖液(50mM Tris；pH7.5)洗滌。干燥后，用液體閃爍計(jì)數(shù)法測(cè)定保留于濾器上的放射活性。使用Excel-Fit(微軟)計(jì)算Ki值，取兩次測(cè)量的平均值。
按照上述方法對(duì)所附實(shí)施例中的化合物進(jìn)行了測(cè)定，發(fā)現(xiàn)所有化合物取代大鼠GABA A受體α5亞單位的[3H]Ro 15-1788的Ki值均不高于100nM。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物對(duì)α5亞單位相對(duì)于α1、α2亞單位具有結(jié)合選擇性，對(duì)α1亞單位的親和力小于15nM。
已經(jīng)獲得了特別優(yōu)選化合物的以下具體數(shù)據(jù)
通式I化合物及其可藥用的酸加成鹽可以例如以藥物制劑的形式用作藥物。藥物制劑可以口服施用，例如以片劑、包衣片、糖衣丸、硬和軟明膠膠囊、溶液劑、乳劑或混懸劑的形式施用。但是，也可以經(jīng)直腸(例如以栓劑的形式)或經(jīng)胃腸外(例如以注射溶液的形式)進(jìn)行施用。
通式I化合物及其可藥用的酸加成鹽可以與藥學(xué)隋性的無(wú)機(jī)或有機(jī)賦形劑共同加工，以制備片劑、包衣片、糖衣丸和硬明膠膠囊。乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其鹽等可用作例如片劑、糖衣丸和硬明膠膠囊的賦形劑。適宜的用于軟明膠膠囊的賦形劑為例如植物油、蠟、脂肪、半固體及液體多元醇等。
用于制備溶液劑和糖漿劑的適宜的賦形劑為例如水、多元醇、蔗糖、轉(zhuǎn)化糖、葡萄糖等。
用于注射液的適宜的賦形劑為例如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。
用于栓劑的適宜的賦形劑為例如天然油或硬化油、蠟、脂肪、半液體或液體多元醇等。
而且，藥物制劑可以含有防腐劑、增溶劑、穩(wěn)定劑、潤(rùn)濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、矯味劑、調(diào)節(jié)滲透壓的鹽、緩沖劑、掩避劑或抗氧化劑。它們還可含有其它對(duì)治療有益的物質(zhì)。
劑量可在寬范圍內(nèi)變化，當(dāng)然應(yīng)根據(jù)個(gè)例的個(gè)體需要進(jìn)行調(diào)整。通常在口服施用的情況下，通式I化合物的適宜的日劑量為約10至1000mg/人，但必要時(shí)劑量也可超過(guò)上述的上限。
以下實(shí)施例用以解釋本發(fā)明而不是對(duì)它進(jìn)行限制。所有溫度均以攝氏度形式給出。
實(shí)施例19H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)2-氨基苯甲酸乙酯(鄰氨基苯甲酸乙酯)，通式VII化合物根據(jù)圖1的步驟1、按照文獻(xiàn)(Bamberger，Goldberger，J.LiebigsAnn.Chem.，1899，362，305)制備。
將乙醇(500mL)冰浴冷卻并用HCl氣體飽和。然后加入2-氨基苯甲酸(50g)，將得到的混合物加熱回流13小時(shí)。然后將熱溶液倒入1.5L冰水中，將溶液過(guò)濾，用碳酸氫鈉中和。然后將溶液蒸發(fā)并用乙醚(3×200mL)萃取。合并萃取液、干燥、蒸發(fā)，得到液體，將該液體蒸餾，得到的產(chǎn)物為透明液狀(49g，82％)；m/z 165(M)。
b)2-[(4-乙氧基-1，4-二氧代丁基)氨基]-苯甲酸乙酯(通式VIII化合物)根據(jù)圖1的步驟2制備。
在0℃下，向攪拌狀態(tài)下的鄰氨基苯甲酸乙酯(50.0g)的干燥甲苯(250mL)溶液中加入碳酸鈣(60.6g)，然后加入單乙酯琥珀酰氯(59.8g)的干燥甲苯(400mL)溶液，使反應(yīng)混合物在30分鐘內(nèi)升溫至室溫。然后將所得的混合物加熱回流1小時(shí)并將熱混懸液過(guò)濾。然后將溶液蒸發(fā)，得到白色固體，用EtOH對(duì)其進(jìn)行重結(jié)晶，得到的產(chǎn)物為白色晶體(82.1g，93％)，m/z 293(M)。
c)2，3-二氫-5-羥基-2-氧代-1H-苯并氮雜-4-甲酸乙酯(通式IX化合物)根據(jù)圖1的步驟3制備。
在氬氣環(huán)境下，向KH在油中的懸浮液(20％，39.6g)中加入甲苯(60mL)。于30分鐘內(nèi)向冷卻至10℃的該懸浮液中加入步驟2的產(chǎn)物的甲苯(90mL)溶液(10-20℃)后加入干燥DMF(12mL)。待氫氣的產(chǎn)生停止后，將所得混合物在70℃加熱2小時(shí)。冷卻后，在攪拌下加入乙酸(15mL)，然后加入水(120mL)。將混合物過(guò)濾，使所得固體在60℃、10毫巴的真空爐中干燥30分鐘。然后將固體(7.98g)用乙醇重結(jié)晶，得到白色針狀物(6.7g，84％)，m/z 247(M)。
d)3，4-二氫-1H-1-苯并氮雜-2，5-酮(通式X化合物)根據(jù)圖1的步驟4制備。
將步驟3的產(chǎn)物(17.0g)溶于DMSO(610mL)中，加入水(30mL)，將所得的混合物在150℃下加熱1小時(shí)。然后加入水(30mL)并繼續(xù)在150℃下加熱2小時(shí)。再加入水(30mL)并將混合物在150℃再加熱2小時(shí)20分鐘。冷卻后，將混合物倒入水(600mL)中并用DCM(3×250mL)萃取，合并萃取液、用水(250mL)洗滌，然后干燥、蒸發(fā)，得到米色-橙色固體。用乙醇重結(jié)晶得到灰白色固體(6.0g，50％)，m/z 175(M)。
e)4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮(通式XI化合物)根據(jù)圖1的步驟5制備。
將步驟4的產(chǎn)物(3.1g)和N，N-二甲基甲酰胺二甲縮醛(21.1mL)的混合物在115至120℃下加熱1小時(shí)。冷卻后，濾出固體并用醚洗滌，在50℃、1mmHg的真空爐中干燥3小時(shí)，得到淺橙色固體(2.0g，58％)，m/z(ISP)231(MH)。
f)5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮(通式II化合物)根據(jù)圖1的步驟6制備。
向步驟5的產(chǎn)物(4.6g)和含有甲醇鈉(2.34g)的MeOH(160mL)的混合物中加入甲脒鹽酸鹽(2.4g)，將所得的混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。然后向反應(yīng)混合物中加入水(80mL)、用DCM(5×50mL)萃取，合并萃取液，用Na2SO4干燥。蒸發(fā)后，將殘余物用DCM∶MeOH重結(jié)晶，得到灰白色晶體(2.2g，52％)，m/z 211(M)。
g)9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯(通式I化合物)根據(jù)圖1的步驟7制備。
向步驟6的產(chǎn)物(2.2g)的氯仿(15mL)溶液中加入N，N-二甲基-對(duì)甲苯胺(10.3mL)和三氯氧化磷(1.59mL)，將所得的混合物加熱回流1小時(shí)。冷卻后，將混合物倒入NaHCO3(8.2g)的水溶液(40mL)中，用DCM(4×20mL)萃取所得的混合物，合并萃取液，然后用水(40mL)洗滌，干燥并蒸發(fā)，得到偕氯代亞胺。向異氰基乙酸乙酯(1.19g)的干燥DMF(20mL)溶液中加入叔丁醇鉀(1.26g)，并將所得的溶液加入-50℃下的偕氯代亞胺(上述制備的)的干燥DMF(5mL)溶液中。10分鐘后，使反應(yīng)液升至室溫(40分鐘)，加入乙酸(0.5mL)，然后加入冰冷的水(200mL)。用DCM(4×40mL)萃取所得的混合物，合并萃取液并用水(50mL)洗滌、用Na2SO4干燥并使之蒸發(fā)。通過(guò)硅膠色譜法、以乙酸乙酯∶正己烷為洗脫劑分離殘余物，得到的產(chǎn)物為白色晶體(770mg，24％)，mp 285-287℃，m/z 306(M)。
圖1的備選反應(yīng)步驟將步驟6的產(chǎn)物(1mmol)和N，N-二甲基-對(duì)甲苯胺(2mmol)混合物與甲苯(5ml)混合，加熱至100℃。然后滴加三氯氧化磷(1.1mmol)，并在100℃下繼續(xù)加熱1小時(shí)。將所得的混合物減壓蒸餾，將殘余物溶解于THF(2mL)中。在-75℃的氬氣環(huán)境下，向六甲基二硅胺烷(3.3mmol)的THF溶液(2mL)中緩慢加入BuLi(1.6M的正己烷溶液，3.3mmol)。在-75℃下攪拌1小時(shí)后，加入(E)-(二甲基氨基亞甲氨基)-乙酸乙酯(2.0mmol)的THF溶液(1.0mL)，繼續(xù)在-75℃攪拌1小時(shí)。然后在-75℃下加入適量的偕氯代亞胺(以上制備的)溶液，在-75℃攪拌1小時(shí)，然后加入乙酸(20mmol)，使混合物升溫至0℃，然后加入水(0.5mL)并將混合物加熱回流1小時(shí)。冷卻后，用DCM(2×10mL)萃取混合物，合并萃取液并用水(10mL)洗滌，然后使之蒸發(fā)。殘余物通過(guò)硅膠色譜法或制備HPLC進(jìn)行純化。
根據(jù)圖1和實(shí)施例1制備了實(shí)施例2至7的化合物。
實(shí)施例26-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯
a)5，7-二氫-2-丙基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和丁脒鹽酸鹽為原料制備。收率84％。
白色固體，m/z 253(M)。
b)6-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-2-丙基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 180℃，m/z(ISP)349(MH)。
實(shí)施例36-(1-甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)5，7-二氫-2-(1-甲基乙基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和異丁脒鹽酸鹽為原料制備。收率87％。
白色固體，m/z 253(M)。
b)6-(1-甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-2-(1-甲基乙基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 190℃，m/z(ISP)349(MH)。
實(shí)施例46-環(huán)丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)2-環(huán)丙基-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和環(huán)丙烷甲脒鹽酸鹽為原料制備。收率62％。
白色固體，m/z(ISP)252(MH)。
b)6-環(huán)丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以2-環(huán)丙基-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 110℃，m/z(ISP)347(MH)。
實(shí)施例56-(1，1-二甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)2-(1，1-二甲基乙基)-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和2，2-二甲基丙脒鹽酸鹽為原料制備。收率90％。
白色固體，m/z 267(M)。
b)6-(1，1-二甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以2-(1，1-二甲基乙基)-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 250℃，m/z(ISP)363(MH)。
實(shí)施例66-[(4-甲氧基苯基)甲基]-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)5，7-二氫-2-[4-甲氧基苯基)甲基]-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和2-(4-甲氧基苯基)-乙脒鹽酸鹽為原料制備。收率31％。
白色固體，m/z(ISP)332(MH)。
b)6-[(4-甲氧基苯基)甲基]-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 200℃，m/z(ISP)427(MH)。
實(shí)施例76-(1H-吲哚-3-基甲基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)5，7-二氫-2-(1H-吲哚-3-基甲基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和2-(1H-吲哚-3-基)-乙脒鹽酸鹽為原料制備。收率80％。
白色固體，m/z 340(M)。
b)6-(1H-吲哚-3-基甲基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-2-(1H-吲哚-3-基甲基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 120℃，m/z(ISP)436(MH)。
實(shí)施例83-氟-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)2-氨基-5-氟-苯甲酸乙酯(通式VII化合物)根據(jù)圖1或2制備。
淺黃色液體，bp 68-70℃(0.4毫巴)。
b)2-[(4-乙氧基-1，4-二氧代丁基)氨基]-5-氟-苯甲酸乙酯(通式VIII化合物)根據(jù)圖1步驟2、以2-氨基-5-氟-苯甲酸乙酯為原料制備。
收率100％。
白色固體，m/z 311(M)。
c)7-氟-2，3-二氫-5-羥基-2-氧代-1H-苯并氮雜-4-甲酸乙酯(通式IX化合物)根據(jù)圖1步驟3、以2-[(4-乙氧基-1，4-二氧代丁基)氨基]-5-氟-苯甲酸乙酯為原料制備。收率69％。
白色固體，m/z 265(M)。
d)7-氟-3，4-二氫-1H-1-苯并氮雜-2，5-二酮(通式X化合物)根據(jù)圖1步驟4、以7-氟-2，3-二氫-5-羥基-2-氧代-1H-苯并氮雜-4-甲酸乙酯為原料制備。收率67％。
白色固體，m/z 193(M)。
e)4-[(二甲基氨基)亞甲基]-7-氟-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮(通式XI化合物)根據(jù)圖1步驟5、以7-氟-3，4-二氫-1H-1-苯并氮雜-2，5-二酮為原料制備。收率75％。
淺橙色固體，m/z 248(M)。
f)10-氟-5，7-二氫-2-甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮(通式II化合物)按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-7-氟-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和乙脒鹽酸鹽為原料制備。收率50％。
白色固體，m/z(ISP)244(MH)。
g)3-氟-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯(通式I化合物)根據(jù)圖1步驟7、以10-氟-5，7-二氫-2-甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 230℃，m/z 338(M)。
實(shí)施例93-氟-6-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)10-氟-5，7-二氫-2-丙基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-7-氟-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和丁脒鹽酸鹽為原料制備。收率50％。
白色固體，m/z(ISP)272(MH)。
b)3-氟-6-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以10-氟-5，7-二氫-2-丙基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 200℃，m/z(ISP)367(MH)。
實(shí)施例103-氟-6-(1-甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)10-氟-5，7-二氫-2-(1-甲基乙基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-7-氟-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和異丁脒鹽酸鹽為原料制備。收率60％。
白色固體，m/z(ISP)272(MH)。
b)3-氟-6-(1-甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以10-氟-5，7-二氫-2-(1-甲基乙基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 185℃，m/z(ISP)367(MH)。
實(shí)施例116-環(huán)丙基-3-氟-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯
a)2-環(huán)丙基-10-氟-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-7-氟-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和環(huán)丙烷甲脒鹽酸鹽為原料制備。收率88％。
白色固體，m/z(ISP)270(MH)。
b)6-環(huán)丙基-3-氟-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以2-環(huán)丙基-10-氟-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 220℃，m/z(ISP)365(MH)。
實(shí)施例123-氟-6-(1，1-二甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)2-(1，1-二甲基乙基)-10-氟-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-7-氟-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和2，2-二甲基丙脒鹽酸鹽為原料制備。收率54％。
白色固體，m/z(ISP)286(MH)。
b)3-氟-6-(1，1-二甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以2-(1，1-二甲基乙基)-10-氟-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 233℃，m/z(ISP)381(MH)。
實(shí)施例133-氟-6-[(4-甲氧基苯基)甲基]-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯
a)10-氟-5，7-二氫-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-7-氟-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和2-(4-甲氧基苯基)-乙脒鹽酸鹽為原料制備。收率89％。
白色固體，m/z(ISP)350(MH)。
b)3-氟-6-[(4-甲氧基苯基)甲基]-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以10-氟-5，7-二氫-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 185℃，m/z(ISP)445(MH)。
實(shí)施例143-氟-6-(1H-吲哚-3-基甲基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)10-氟-5，7-二氫-2-(1H-吲哚-3-基甲基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-7-氟-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和2-(1H-吲哚-3-基)-乙脒為原料制備。收率87％。
白色固體，m/z(ISP)359(MH)。
b)3-氟-6-(1H-吲哚-3-基甲基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以10-氟-5，7-二氫-2-(1H-吲哚-3-基甲基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 230℃，m/z(ISP)454(MH)。
實(shí)施例153-氯-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)2-氨基-5-氯-苯甲酸乙酯(通式VII化合物)以鄰氨基苯甲酸乙酯和次氯酸鈉(根據(jù)M.Okabe和R-C Sun，Tetrahedron，1995，51，1861)為原料制備，得到灰白色固體，mp 80℃，m/z 199。
b)5-氯-2-[(4-乙氧基-1，4-二氧代丁基)氨基]-苯甲酸乙酯(通式VIII化合物)根據(jù)圖1步驟2、以2-氨基-5-氯-苯甲酸乙酯為原料制備。
收率100％。白色固體，m/z 327(M)。
c)7-氯-2，3-二氫-5-羥基-2-氧代-1H-苯并氮雜-4-甲酸乙酯(通式IX化合物)根據(jù)圖1步驟3、以5-氯-2-[(4-乙氧基-1，4-二氧代丁基)氨基]-苯甲酸乙酯為原料制備。收率81％。
白色固體，m/z 281(M)。
d)7-氯-3，4-二氫-1H-1-苯并氮雜-2，5-二酮(通式X化合物)根據(jù)圖1步驟4、以7-氯-2，3-二氫-5-羥基-2-氧代-1H-苯并氮雜-4-甲酸乙酯為原料制備。收率48％。
白色固體，m/z 209(M)。
e)7-氯-4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮(通式XI化合物)根據(jù)圖1步驟5、以7-氯-3，4-二氫-1H-1-苯并氮雜-2，5-二酮為原料制備。收率79％。
淺橙色固體，m/z 264(M)。
f)10-氯-5，7-二氫-2-甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮(通式II化合物)按照與圖1類似的方法、以7-氯-4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和乙脒鹽酸鹽為原料制備。收率58％。
白色固體，m/z 259(M)。
g)3-氯-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯(通式I化合物)根據(jù)圖1步驟7、以10-氯-5，7-二氫-2-甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 202-204℃，m/z(ISP)355(MH)。
實(shí)施例163-氯-6-(1-甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)10-氯-5，7-二氫-2-(1-甲基乙基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以7-氯-4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和異丁脒鹽酸鹽為原料制備。收率87％。
白色固體，m/z(ISP)288(MH)。
b)3-氯-6-(1-甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸根據(jù)圖1步驟7、以10-氯-5，7-二氫-2-(1-甲基乙基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 192℃，m/z(ISP)383(MH)。
實(shí)施例173-氯-6-環(huán)丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)10-氯-2-環(huán)丙基-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以7-氯-4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和環(huán)丙烷甲脒鹽酸鹽為原料制備。收率83％。
白色固體，m/z(ISP)286(MH)。
b)3-氯-6-環(huán)丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以10-氯-2-環(huán)丙基-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 230℃，m/z(ISP)381(MH)。
實(shí)施例183-氯-6-(1，1-二甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)10-氯-2-(1，1-二甲基乙基)-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以7-氯-4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和2，2-二甲基丙脒鹽酸鹽為原料制備。收率88％。
灰白色固體，m/z(ISP)302(MH)。
b)3-氯-6-(1，1-二甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以10-氯-2-(1，1-二甲基乙基)-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 180℃，m/z(ISP)397(MH)。
實(shí)施例193-氯-6-[(4-甲氧基苯基)甲基]-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)10-氯-5，7-二氫-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以7-氯-4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和2-(4-甲氧基苯基)-乙脒鹽酸鹽為原料制備。收率87％。
白色固體，m/z(ISP)366(MH)。
b)3-氯-6-[(4-甲氧基苯基)甲基]-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以10-氯-5，7-二氫-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 192℃，m/z(ISP)461(MH)。
實(shí)施例203-氯-6-(1H-吲哚-3-基甲基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)10-氯-5，7-二氫-2-(1H-吲哚-3-基甲基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以7-氯-4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和2-(1H-吲哚-3-基)-乙脒為原料制備。收率46％。
白色固體，m/z 374(M)。
b)3-氯-6-(1H-吲哚-3-基甲基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以10-氯-5，7-二氫-2-(1H-吲哚-3-基甲基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 120℃，m/z(ISP)470(MH)。
實(shí)施例213-溴-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)2-氨基-5-溴-苯甲酸乙酯(通式VII化合物)
根據(jù)圖1步驟1，由2-氨基-5-溴苯甲酸、乙醇和HCl氣體加熱回流16小時(shí)，得到灰白色固體，mp 83℃。
b)5-溴-2-[(4-乙氧基-1，4-二氧代丁基)氨基]-苯甲酸乙酯(通式VIII化合物)根據(jù)圖1步驟2、以2-氨基-5-溴-苯甲酸乙酯為原料制備。收率79％。白色固體，m/z(ISP)371/373(MH)。
c)7-溴-2，3-二氫-5-羥基-2-氧代-1H-苯并氮雜-4-甲酸乙酯(通式IX化合物)根據(jù)圖1步驟3、以5-溴-2-[(4-乙氧基-1，4-二氧代丁基)氨基]-苯甲酸乙酯為原料制備。收率71％。
白色固體，m/z(ISP)325/327(MH)。
d)7-溴-3，4-二氫-1H-1-苯并氮雜-2，5-二酮(通式X化合物)根據(jù)圖1步驟4、以7-溴-2，3-二氫-5-羥基-2-氧代-1H-苯并氮雜-4-甲酸乙酯為原料制備。收率65％。
白色固體，m/z(ISP)253/255(MH)。
e)7-溴-4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮(通式XI化合物)根據(jù)圖1步驟5、以7-溴-3，4-二氫-1H-1-苯并氮雜-2，5-二酮為原料制備。收率90％。
淺橙色固體，m/z(ISP)309/311(MH)。
f)10-溴-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮(通式II化合物)按照與圖1類似的方法、以7-溴-4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和甲脒乙酸鹽為原料制備。收率83％。
白色固體，m/z(ISP)289/291(MH)。
g)3-溴-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以10-溴-5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 210℃，m/z(ISP)385/387(MH)。
實(shí)施例223-溴-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)10-溴-5，7-二氫-2-甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以7-溴-4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和乙脒鹽酸鹽為原料制備。收率87％。
白色固體，m/z(ISP)303/305(MH)。
b)3-溴-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以10-溴-5，7-二氫-2-甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 130℃，m/z(ISP)399/401(MH)。
實(shí)施例233-溴-6-環(huán)丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)10-溴-5，7-二氫-2-環(huán)丙基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以7-溴-4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和環(huán)丙烷甲脒鹽酸鹽為原料制備。收率99％。
白色固體，m/z(ISP)330/332(MH)。
b)3-溴-6-環(huán)丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以10-溴-5，7-二氫-2-環(huán)丙基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 230℃，m/z(ISP)425/427(MH)。
實(shí)施例243-溴-6-[(4-甲氧基苯基)甲基]-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)10-溴-5，7-二氫-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以7-溴-4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和2-(4-甲氧基苯基)-乙脒鹽酸鹽為原料制備。收率99％。
白色固體，m/z(ISP)410/412(MH)。
b)3-溴-6-[(4-甲氧基苯基)甲基]-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以10-溴-5，7-二氫-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 180℃，m/z(ISP)505/507(MH)。
實(shí)施例253，6-二甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)2-氨基-5-甲基-苯甲酸乙酯(通式VII化合物)如圖1步驟1(根據(jù)S.P.Acharya和J.B.Hynes，J.Heterocyclic Chem.，1975，12，1283)，由2-氨基-5-甲基苯甲酸、乙醇和HCl氣體制得產(chǎn)品。收率80％。
白色固體，m/z(ISP)178(M-H)。
b)2-[(4-乙氧基-1，4-二氧代丁基)氨基]-5-甲基-苯甲酸乙酯(通式VIII化合物)根據(jù)圖1步驟2、以2-氨基-5-甲基-苯甲酸乙酯為原料制備。
收率87％。
白色固體，m/z(ISP)308(MH)。
c)2，3-二氫-5-羥基-7-甲基-2-氧代-1H-苯并氮雜-4-甲酸乙酯(通式IX化合物)根據(jù)圖1步驟3、以2-[(4-乙氧基-1，4-二氧代丁基)氨基]-5-甲基-苯甲酸乙酯為原料制備。收率41％。
白色固體，m/z(ISP)262(MH)。
d)3，4-二氫-7-甲基-1H-1-苯并氮雜-2，5-二酮(通式X化合物)根據(jù)圖1步驟4、以2，3-二氫-5-羥基-7-甲基-2-氧代-1H-苯并氮雜-4-甲酸乙酯為原料制備。收率98％。
白色固體，m/z(ISP)190(MH)。
e)4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-7-甲基-1H-苯并氮雜-2，5-二酮(通式XI化合物)根據(jù)圖1步驟5、以3，4-二氫-7-甲基-1H-1-苯并氮雜-2，5-二酮為原料制備。收率74％。淺褐色固體，m/z(ISP)245(MH)。
f)5，7-二氫-2，10-二甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮(通式II化合物)按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-7-甲基-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和乙脒鹽酸鹽為原料制備。收率98％。
白色固體，m/z(ISP)240(MH)。
g)3，6-二甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯(通式I化合物)根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-2，10-二甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 200℃，m/z(ISP)335(MH)。
實(shí)施例263-甲基-6-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)5，7-二氫-10-甲基-2-丙基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-7-甲基-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和丁脒鹽酸鹽為原料制備。收率90％。
白色固體，m/z(ISP)268(MH)。
b)3-甲基-6-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-10-甲基-2-丙基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 250℃，m/z(ISP)363(MH)。
實(shí)施例273-甲基-6-(1-甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)5，7-二氫-10-甲基-2-(1-甲基乙基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-7-甲基-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和異丁脒鹽酸鹽為原料制備。收率91％。
白色固體，m/z(ISP)268(MH)。
b)3-甲基-6-(1-甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-10-甲基-2-(1-甲基乙基)-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 190℃，m/z(ISP)363(MH)。
實(shí)施例286-環(huán)丙基-3-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)2-環(huán)丙基-5，7-二氫-10-甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-7-甲基-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和環(huán)丙烷甲脒鹽酸鹽為原料制備。收率88％。
白色固體，m/z(ISP)266(MH)。
b)6-環(huán)丙基-3-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以2-環(huán)丙基-5，7-二氫-10-甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 250℃，m/z(ISP)361(MH)。
根據(jù)圖3制備了下列化合物實(shí)施例1的備選方法9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)3，4-二氫-1(2H)-萘酮(E和Z)-肟(通式XVII化合物，步驟1)將α-四氫萘酮(13.4mL)、鹽酸羥胺(7.86g)、乙酸鈉(4.39g)、水(80mL)和乙醇(80mL)的混合物加熱回流20分鐘。然后用冰-甲醇浴將混合物冷卻至0℃，1小時(shí)后將固體濾出，用水∶EtOH(1∶1，100mL)洗滌并將固體在真空下干燥，得到的產(chǎn)物為白色晶體(7.6g，47％)，m/z 161(M)。
b)1，3，4，5-四氫-2H-1-苯并氮雜-2-酮(通式XVIII化合物，步驟1’)該反應(yīng)可根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道(W-Y.Chen和N.W.Gilman，Heterocycles，1983，663-666)進(jìn)行重復(fù)。
將三氯乙酸(502g)在水浴中融化，然后加入α-四氫萘酮(50g)。在90分鐘內(nèi)向此溶液中加入疊氮化鈉(33.4g)，間或用冰浴冷卻和加熱使溶劑融化。將所得混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后在70℃下加熱16小時(shí)。冷卻后將混合物加入到水(1L)中，然后加入固體碳酸氫鈉(400g)。將混合物過(guò)濾，濾液用DCM(4×150mL)萃取，合并萃取液并使之干燥、蒸發(fā)，所得固體用乙醇重結(jié)晶，得到的產(chǎn)物為白色晶體(26.4g，48％)，m/z 161(M)。
b’)1，3，4，5-四氫-2H-1-苯并氮雜-2-酮(通式XVIII化合物，步驟2)在120℃下，于20分鐘內(nèi)將步驟1的產(chǎn)物(108.6g)加入到多磷酸溶液中，將所得的混合物在120℃下加熱30分鐘。冷卻后，將混合物倒入冰水(1L)中，1小時(shí)后沉淀物生成，將其濾出并在70℃下真空干燥，得到的產(chǎn)物為白色晶體(94.8g，87％)，m/z 161(M)。
c)3，4-二氫-1H-1-苯并氮雜-2，5-二酮(通式IXX化合物，步驟3)將內(nèi)酰胺化合物(82.4g)溶解在BuOH(1L)中并加入水(3L)。加入高錳酸鉀(315g)，然后加入六水合硝酸鎂(510g)，將混合物在室溫的水浴中攪拌48小時(shí)。將混合物用鹽酸(3M，745mL)酸化，然后加入亞硫酸氫鈉直至溶液變成橙黃色。用DCM(3×1L)萃取混合物，合并萃取液并用水(1L)洗滌，然后干燥、蒸發(fā)，得到褐色固體。將固體用乙酸乙酯重結(jié)晶，得到淺灰色晶體(30.9g，34％)。
d)4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮(通式XI化合物，步驟4)按照?qǐng)D1步驟5所述的通式XI化合物的制備方法進(jìn)行制備。
e)5，7-二氫-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮(通式II化合物，步驟5)按照與圖1步驟6類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和甲脒乙酸鹽為原料制備。
f)9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯(通式I化合物，實(shí)施例1，步驟6)向步驟5的產(chǎn)物(2.2g)的氯仿(15mL)溶液中加入N，N-二甲基-對(duì)甲苯胺(10.3mL)和POCl3(1.59mL)，將所得混合物加熱回流1小時(shí)。冷卻后，將混合物倒入碳酸氫鈉(8.2g)的水(40mL)溶液中，并用DCM(4×20mL)萃取所得混合物，合并萃取液，用水(40mL)洗滌，干燥并蒸發(fā)，得到偕氯代亞胺。向異氰基乙酸乙酯(1.19g)的干燥DMF(20mL)溶液中加入叔丁醇鉀(1.26g)，并將得到的混合物加入-50℃下的偕氯代亞胺(如上述制備)的干燥DMF(5mL)溶液中。10分鐘后，將反應(yīng)升溫至室溫(40分鐘)，加入乙酸(0.5mL)，然后加入冰冷的水(200mL)。用DCM(4×40mL)萃取所得的混合物，合并萃取液并用水(50mL)洗滌，用硫酸鎂干燥、蒸發(fā)。殘余物用硅膠色譜法、以乙酸乙酯∶正己烷為洗脫劑進(jìn)行處理，得到的產(chǎn)物為白色晶體(770mg，24％)，m/z 306(M)。
實(shí)施例296-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)5，7-二氫-2-甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和乙脒鹽酸鹽為原料制備。收率44％。
白色固體，m/z 225(M)。
b)6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-2-甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 253-254℃，m/z 320(M)。
實(shí)施例306-苯基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯
a)5，7-二氫-2-苯基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和芐脒鹽酸鹽為原料制備。收率83％。
白色固體，m/z 287(M)。
b)6-苯基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-2-苯基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 244-246℃，m/z 382(M)。
實(shí)施例316-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸向6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯(1.6g，5mmol)的乙醇(20mL)溶液中加入氫氧化鈉(0.22g，5.5mmol)和水(3.5mL)，將所得混合物加熱回流20分鐘。然后將混合物冷卻至0℃，加入鹽酸(4N，1.32mL)后將混合物在冰浴下冷卻1小時(shí)。濾出生成的固體，然后真空干燥，得到的產(chǎn)物為白色晶體(1.1g，77％)，mp 285-287℃，m/z 292(M)。
實(shí)施例3210-(3-環(huán)丙基-1，2，4-噁二唑-5-基)-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜向6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸(1.0g，3.4mmol)在DMF(15mL)的混懸液中加入1，1’-羰基二咪唑(0.61g，3.76mmol)，然后加入N-羥基-環(huán)丙烷甲脒，將所得溶液在85℃下加熱1.5小時(shí)。然后加入乙酸(3.4mL)并將所得混合物在130℃下加熱40分鐘。冷卻后，將混合物蒸發(fā)并用DCM(15mL)溶解。用碳酸氫鈉溶液(飽和溶液，40mL)洗滌該DCM萃取物，然后用DCM(20mL)洗滌水相。合并DCM層，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)。殘余物用乙酸乙酯∶正己烷重結(jié)晶，得到的產(chǎn)物為白色晶體(720mg，59％)，mp 216-218℃，m/z 356(M)。
實(shí)施例332，3，6-三甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-7，8-二甲基-1H-苯并氮雜-2，5-二酮(通式XI化合物)根據(jù)圖1步驟5、以3，4-二氫-7，8-二甲基-1H-苯并氮雜-2，5-二酮(通式X化合物)為原料制備。收率84％。
白色固體，m/z 258(M)。
b)5，7-二氫-2，9，10-三甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮(通式II化合物)按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-7，8-二甲基-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和乙脒鹽酸鹽為原料制備。收率88％。
白色固體，m/z 253(M)。
c)2，3，6-三甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯(通式I化合物)根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-2，9，10-三甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 210℃，m/z 348(M)。
實(shí)施例342，3-二甲基-6-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)5，7-二氫-9，10-二甲基-2-丙基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-7，8-二甲基-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和丁脒鹽酸鹽為原料制備。收率67％。
白色固體，m/z(ISP)282(MH)。
b)2，3-二甲基-6-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-9，10-二甲基-2-丙基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 213℃，m/z 376(M)。
實(shí)施例356-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2，3-二甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)5，7-二氫-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-9，10-二甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-7，8-二甲基-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和2-(4-甲氧基苯基)-乙脒鹽酸鹽為原料制備。收率79％。
白色固體，m/z(ISP)360(MH)。
b)6-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2，3-二甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-9，10-二甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 150℃，m/z(ISP)455(MH)。
實(shí)施例366-(1H-吲哚-3-基甲基)-2，3-二甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯a)5，7-二氫-2-[IH-吲哚-3-基甲基]-9，10-二甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮按照與圖1類似的方法、以4-[(二甲基氨基)亞甲基]-3，4-二氫-7，8-二甲基-1H-苯并氮雜-2，5-二酮和2-(1H-吲哚-3-基)-乙脒為原料制備。收率72％。
白色固體，m/z 368(M)。
b)6-(1H-吲哚-3-基甲基)-2，3-二甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯根據(jù)圖1步驟7、以5，7-二氫-2-[1H-吲哚-3-基甲基]-9，10-二甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料制備。
白色固體，mp 135℃，m/z(ISP)464(MH)。
實(shí)施例372-溴-11-甲基-7-(5-甲基-異噁唑-3-基)-8H-4b，6，10，12-四氮雜二苯并[e，g]薁a)5-甲基-異噁唑-3-甲酸乙酯向2，4-二氧代戊酸乙酯(20g，126mmol)的乙醇(85mL)溶液中加入鹽酸羥胺(8.8g，126mmol)和碳酸氫鈉(10.6g，0.126mmol)。將反應(yīng)混合物加熱回流1小時(shí)。冷卻后，使混合物蒸發(fā)得到透明液體，將此透明液體蒸餾，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色液體(13.3g，68％)；m/z(EI)156.0(MH)。
b)(5-甲基-異噁唑-3-基)-甲醇在30分鐘內(nèi)，于0℃、氬氣環(huán)境下向5-甲基-異噁唑-3-甲酸乙酯(13.3g，86mmol)的乙醇(175mL)溶液中分批加入NaBH4(8.8g，231mmol)。使反應(yīng)升溫至室溫。3小時(shí)后用鹽酸(1M，100mL)稀釋反應(yīng)混合物，冷卻至室溫后，用乙醚(2×250mL)洗滌混合物，合并萃取液并使之干燥、蒸發(fā)，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色油狀物(8.1g，84％)。m/z(EI)113.0(M)。
c)3-溴甲基-5-甲基-異噁唑在-10℃下，向PBr3(1.45g，25mmol)和吡啶(0.5mL)的甲苯(12mL)溶液中加入羥甲基-3-甲基-5-異噁唑(2.8g，25mmol)的吡啶(0.2mL)溶液。在-10℃下將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，并在室溫下攪拌14小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用水(50mL)稀釋、用乙醚(2×50mL)萃取。合并萃取液，干燥并蒸發(fā)。殘余物通過(guò)硅膠色譜法、以乙酸乙酯/正己烷1∶9洗脫進(jìn)行純化，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色液體(1.7g，39％)。m/z(EI)175.0/177.0(M)。
d)3-疊氮基甲基-5-甲基-異噁唑在室溫下向3-溴甲基-5-甲基-異噁唑(150mg，0.9mmol)的丙酮(1mL)溶液中加入NaN3(166mg，0.26mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌48小時(shí)。然后，將反應(yīng)混合物倒入水(10mL)中并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取，干燥并蒸發(fā)。產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜法、用乙酸乙酯/正己烷1∶1洗脫進(jìn)行分離，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色液體(87mg，74％)。m/z 138.0(M)。
e)(5-甲基-異噁唑-3-基)-甲胺在室溫下向劇烈攪拌的3-疊氮基甲基-5-甲基-異噁唑(6.2g，44.55mmol)的異丙醇(100mL)溶液中加入三乙胺(12.4mL，89.0mmol)、1，3-丙二硫醇(0.45mL，4.5mmol)和硼氫化鈉(1.7g，44.5mmol)。將混合物在室溫下攪拌，19小時(shí)后再加入0.5當(dāng)量以上的NaBH4(850mg，44.5mmol)并在室溫下繼續(xù)攪拌至少7小時(shí)。然后真空蒸除溶劑并將殘余物溶于10％檸檬酸水溶液(10mL)中，用乙醚/正己烷1∶1(3×150mL)對(duì)其進(jìn)行洗滌。水層用6N的氫氧化鈉水溶液堿化至pH12、用氯化鈉飽和、用DCM(4×200mL)萃取。合并DCM萃取液，干燥并濃縮，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色液體(4.4g，87％)。m/z 112.0(M)。
f)N，N-二甲基-N’-(5-甲基-異噁唑-3-基甲基)-甲脒將N-(5-甲基-異噁唑-3-基)-甲胺(150mg，1.3mmol)的N，N-二甲基甲酰胺二甲縮醛(2mL，14.4mmol)溶液加熱回流3小時(shí)。冷卻至室溫后，將溶劑蒸除，得到的標(biāo)題化合物為黃色油狀物(220mg，98％)。m/z 168.2(MH)。
g)2-溴-11-甲基-7-(5-甲基-異噁唑-3-基)-8H-4b，6，10，12-四氮雜二苯并[e，g]薁根據(jù)圖1步驟7，以10-溴-5，7-二氫-2-甲基-6H-嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-6-酮為原料、使用N，N-二甲基-N’-(5-甲基-異噁唑-3-基甲基)-甲脒代替(E)-(二甲基氨基亞甲基氨基)-乙酸乙酯進(jìn)行制備。
透明膠狀物，m/z(ISP)407/409(MH)。
不包括中間體純化操作的備選路線2-[(4-乙氧基-1，4-二氧代丁基)氨基]-苯甲酸乙酯(通式VIII化合物)在0℃下，向攪拌下的鄰氨基苯甲酸乙酯(5.0g)的干燥甲苯(25mL)溶液中加入碳酸鈣(6.1g)，然后加入單乙酯琥珀酰氯(6.0g)的干燥甲苯(40mL)溶液，使反應(yīng)混合物經(jīng)30分鐘升溫至室溫，然后加熱回流1小時(shí)并將熱混懸液過(guò)濾。將溶液蒸發(fā)，得到白色結(jié)晶性固體(8.9g，100％)，m/z 293(M)。
2，3-二氫-5-羥基-2-氧代-1H-苯并氮雜-4-甲酸乙酯(通式IX化合物)在氬氣環(huán)境下向氫化鈉在油中的混懸液(0.5g)中加入THF(30ml)。在室溫下于5分鐘內(nèi)向混懸液中加入步驟2所得產(chǎn)品的THF(5mL)溶液。待氫氣的生成停止后，將所得混合物在70℃下加熱15分鐘。冷卻后，攪拌下加入乙酸(1mL)，然后加入水(120mL)。將混合物過(guò)濾，所得固體在60℃、10毫巴的真空爐中干燥1小時(shí)，得到白色固體(0.8g，99％)，m/z 247(M)。
3，4-二氫-1H-1-苯并氮雜-2，5-二酮(通式X化合物)將步驟3的產(chǎn)物溶解于DMF(30mL)中，然后加入NaCl(0.28g)和水(0.11mL)，將所得混合物加熱回流3小時(shí)。冷卻后，用DCM(3×5mL)萃取混合物，合并萃取液并用水(10mL)洗滌、干燥、蒸發(fā)，得到米色-橙色固體。用乙醇重結(jié)晶，得到米色固體(0.54g，95％)，m/z 175(M)。
根據(jù)圖4的中間體的制備4-(2-硝基-苯基)-4-三甲基硅烷基氧基-丁酸乙酯(通式XXI化合物)在室溫、氬氣環(huán)境下，在5分鐘內(nèi)向新熔融的碘化鋅(5.28g，16.5mmol)的干燥DCM(2mL)混懸液中加入2-硝基苯甲醛(5.0g，33.0mmol)和(1-乙氧基環(huán)丙氧基)三甲基硅烷(7.50g，43.0mmol)的干燥DCM(20mL)溶液。1.5小時(shí)后，向反應(yīng)混合物中加入鹽酸(1M，50mL)并用DCM(3×50mL)萃取所得混合物。合并有機(jī)萃取液并用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)得到油狀物。用硅膠色譜法、以正己烷∶乙酸乙酯(9∶1)洗脫進(jìn)行純化，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色油狀物(8.3g，77％)；m/z 324(M)。分離得到的4-羥基-4-(2-硝基-苯基)-丁酸乙酯為反應(yīng)副產(chǎn)物[收率10％，m/z 254(MH)]。4-(2-硝基-苯基)-4-氧代-丁酸乙酯(通式XXII化合物)在氬氣環(huán)境下，向4-(2-硝基-苯基)-4-三甲基硅烷基氧基-丁酸乙酯(530mg，1.6mmol)的干燥DCM(5mL)溶液中加入PCC(氯鉻酸吡啶鎓)(878mg，4.1mmol)，將所得混合物劇烈攪拌20小時(shí)。然后加入硅膠(5g)，將混合物過(guò)濾。使濾液蒸發(fā)，并將殘余物通過(guò)硅膠色譜法、用乙酸乙酯∶正己烷(3∶1)洗脫進(jìn)行純化，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色液體(375mg，92％)；m/z 252(MH)。
4-(2-氨基-苯基)-4-氧代-丁酸乙酯(通式XXIII化合物)方法1在Pd/C(20mg)存在下，將4-(2-硝基-苯基)-4-氧代-丁酸乙酯(200mg，0.8mmol)的干燥甲醇(5mL)溶液氫化(1atm)3小時(shí)。然后將混合物過(guò)濾、使濾液蒸發(fā)。通過(guò)硅膠過(guò)濾、以DCM洗脫進(jìn)行純化，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色油狀物(140mg，80％)；m/z 222(MH)。
方法2向4-羥基-4-(2-硝基-苯基)-丁酸乙酯(200mg，0.9mmol)的干燥DCM(10mL)溶液中加入4-甲基嗎啉的N-氧化物(157.4mg，1.3mmol)和過(guò)鐐酸四丙基銨(31.5mg，0.09mmol)，將所得混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。將混合物過(guò)濾并用醚洗滌。殘余物經(jīng)硅膠過(guò)濾、用DCM洗脫進(jìn)行純化，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色油狀物(107mg，54％)；m/z 222(MH)。
方法3向4-(2-氨基-苯基)-4-三甲基硅烷基氧基-丁酸乙酯(200mg，0.7mmol)的干燥DCM(10mL)溶液中加入4-甲基嗎啉的N-氧化物(157.4mg，1.3mmol)和過(guò)鐐酸四丙基銨(31.5mg，0.09mmol)，將所得混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。然后將混合物過(guò)濾并用醚洗滌。殘余物用DCM洗脫、經(jīng)硅膠過(guò)濾進(jìn)行純化，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色油狀物(84mg，54％)；m/z222(MH)。
4-(2-氨基-苯基)-4-三甲基硅烷基氧基-丁酸乙酯(通式XXVI化合物)在Pd/C(20mg)存在下，將4-(2-硝基-苯基)-4-三甲基硅烷基氧基-丁酸乙酯(200mg，0.6mmol)的干燥乙酸乙酯(5mL)溶液氫化(1atm)過(guò)夜。然后將混合物過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物溶解于干燥甲醇(5mL)中，并在Pd/C(20mg)存在下進(jìn)一步氫化1小時(shí)。將混合物過(guò)濾，使濾液蒸發(fā)。殘余物用正己烷∶乙酸乙酯(8∶1)洗脫、經(jīng)硅膠過(guò)濾進(jìn)行純化，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色油狀物(130mg，72％)；m/z 295(M)。
4-(2-氨基-苯基)-4-羥基-丁酸乙酯(通式XXV化合物)方法1在Pd/C(20mg)存在下，將4-羥基-4-(2-硝基-苯基)-丁酸乙酯(200mg，0.8mmol)的干燥甲醇(5mL)溶液氫化(1atm)5小時(shí)。然后將混合物過(guò)濾并使濾液蒸發(fā)。殘余物用乙酸乙酯∶正己烷(3∶1)洗脫、經(jīng)硅膠過(guò)濾進(jìn)行純化，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色油狀物(100mg，57％)；m/z 224(M)。
方法2在Pd/C(20mg)存在下，將4-(2-硝基-苯基)-4-三甲基硅烷基氧基-丁酸乙酯(200mg，0.6mmol)的干燥甲醇(5mL)溶液(加入數(shù)滴乙酸乙酯)氫化(1atm)20小時(shí)。將混合物過(guò)濾并使濾液蒸發(fā)。殘余物用DCM∶乙酸乙酯(8∶1)洗脫、經(jīng)硅膠過(guò)濾進(jìn)行純化，得到的標(biāo)題化合物為無(wú)色油狀物(115mg，84％)；m/z 224(M)。
3，4-二氫-1H-1-苯并氮雜-2，5-二酮(通式X化合物)在-40℃下、氬氣環(huán)境下，向氫化鈉(10mg，0.43mmol)的干燥THF(1mL)混懸液中加入4-(2-氨基-苯基)-4-氧代-丁酸乙酯(80mg，0.36mmol)。然后使反應(yīng)混合物經(jīng)3小時(shí)升溫至室溫，隨后加入水(20mL)。用DCM(3×15mL)萃取混合物，合并萃取液并使之干燥(硫酸鈉)、蒸發(fā)，得到灰白色固體。用乙酸乙酯進(jìn)行重結(jié)晶得到白色固體(51mg，81％)，m/z 175(M)。
實(shí)施例A按照常規(guī)方法制備了具有以下組成的片劑毫克/片活性物質(zhì) 5乳糖 45玉米淀粉 15微晶纖維素 34硬脂酸鎂 1片重100實(shí)施例B制備了具有如下組成的膠囊毫克/?；钚晕镔|(zhì) 10乳糖155玉米淀粉 30滑石粉5膠囊填充重量200首先在混合器中將活性物質(zhì)、乳糖和玉米淀粉混合，然后進(jìn)入粉碎機(jī)繼續(xù)混合。重新將混合物放回混合器，向其中加入滑石粉并充分混合。將混合物用機(jī)器填充入硬明膠膠囊中。
實(shí)施例C制備了具有如下組成的栓劑毫克/?；钚晕镔|(zhì)15栓劑基質(zhì) 1285總重1300將栓劑基質(zhì)在玻璃或不銹鋼容器中熔融，充分混合并冷卻至45℃。隨即向其中加入微粉化的活性物質(zhì)并進(jìn)行攪拌直至完全分散。將混合物倒入大小適宜的栓劑模具中，放置冷卻。從模具中取出栓劑并用蠟紙或金屬箔片進(jìn)行獨(dú)立包裝。
權(quán)利要求
1.通式I的化合物及其可藥用的酸加成鹽， 其中R1為鹵素或低級(jí)烷基；R2為氫、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、-(CH2)m-苯基，其中苯環(huán)可被低級(jí)烷氧基取代，或?yàn)?(CH2)m-吲哚基；R3為-C(O)O-低級(jí)烷基、-C(O)OH或五元雜芳基，其中的環(huán)可被低級(jí)烷基或環(huán)烷基取代；n 為0、1或2；m 為0、1或2。
2.權(quán)利要求1的通式I化合物，其中的R3為五元雜芳基，其中的環(huán)可被環(huán)烷基取代。
3.權(quán)利要求1的通式I化合物，其中的R3為-C(O)O-低級(jí)烷基，R1為氫且R2如權(quán)利要求1中所述。
4.權(quán)利要求3的通式I化合物，其為9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，6-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，6-(1-甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，6-環(huán)丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，6-[(4-甲氧基苯基)甲基]-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯或6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯。
5.權(quán)利要求1的通式I化合物，其中的R3為-C(O)O-低級(jí)烷基，R2如權(quán)利要求1所述且R1為鹵素。
6.權(quán)利要求5的通式I化合物，其為3-氟-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，3-氟-6-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，3-氟-6-(1-甲基乙基)-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯，6-環(huán)丙基-3-氟-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯或3-溴-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜-10-甲酸乙酯。
7.權(quán)利要求1的通式I化合物，其中的R3為未取代或被低級(jí)烷基或環(huán)烷基取代的1，2，4-噁二唑基或異噁唑基，R2為低級(jí)烷基，n為0或1且R1為鹵素。
8.權(quán)利要求7的通式I化合物，其為10-(3-環(huán)丙基-1，2，4-噁二唑-5-基)-6-甲基-9H-咪唑并[1，5-a]嘧啶并[5，4-d][1]苯并氮雜或2-溴-11-甲基-7-(5-甲基-異噁唑-3-基)-8H-4b，6，10，12-四氮雜-二苯并[e，g]薁。
9.一種藥物，其包含一種或多種權(quán)利要求1至8所述的通式I化合物以及可藥用的賦形劑。
10.權(quán)利要求9的藥物，其用于治療與GABA Aα5亞單位相關(guān)的疾病。
11.制備權(quán)利要求1至8所述的通式I化合物的方法，所述方法包括a)使通式II化合物 與三氯氧化磷反應(yīng)制備通式III的化合物， 其中取代基R1和R2和n具有權(quán)利要求1中所給出的定義，然后將此化合物與通式IV化合物反應(yīng)， 得到通式V化合物， 并將此化合物與MeCO2H進(jìn)行環(huán)化，得到通式I的化合物， 其中R1至R3及n具有權(quán)利要求1中所給出的定義，或b)使通式III的化合物， 其中取代基R1和R2和n具有權(quán)利要求1中所給出的定義，與通式IVa的化合物反應(yīng) 制得通式I的化合物，或c)在以上所給出的定義范圍內(nèi)對(duì)取代基R1至R3中的一個(gè)或多個(gè)進(jìn)行修飾，并且如果需要將所得的化合物轉(zhuǎn)化為可藥用的酸加成鹽。
12.權(quán)利要求1至8的任一項(xiàng)的通式I化合物，其按照權(quán)利要求11所述的方法或等同的方法制備。
13.權(quán)利要求1至8的通式I化合物用于治療疾病的用途。
14.權(quán)利要求1至8的通式I化合物在制備用于治療認(rèn)知障礙的藥物中的用途。
15.權(quán)利要求1至8的通式I化合物在制備用于治療阿耳茨海默病的藥物中的用途。
16.以上所述的發(fā)明。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(I)化合物和其可藥用的酸加成鹽，其中R
文檔編號(hào)A61K31/55GK1509289SQ02810177
公開(kāi)日2004年6月30日 申請(qǐng)日期2002年5月8日 優(yōu)先權(quán)日2001年5月18日
發(fā)明者R·馬夏德里, A·W·托馬斯, J·維希曼, B, R 馬夏德里, 托馬斯 申請(qǐng)人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司, 弗 哈夫曼-拉羅切有限公司