專利名稱：一種藥物組合物的指紋圖譜質(zhì)量檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物(中藥)分析領(lǐng)域，涉及一種含藥物(中藥)組合物的質(zhì)量檢測 方法，特別涉及一種含有薄荷油與香葵油的藥物組合物的指紋圖譜質(zhì)量檢測方法。
背景技術(shù)：
本項(xiàng)專利的申請人于2001年10月29日申請了名稱為一種治療肝膽結(jié)石的溶石 性藥物及其制備方法的中國專利，申請?zhí)枮?1134090. 8，公開號為CN 1358530A。這項(xiàng)專利 申請?zhí)峁┝艘环N由薄荷油與香葵油(又名“香葉油”)為主要有效成分的治療肝膽結(jié)石的藥 物組合物及其制備方法，該藥物被命名為“利膽溶石軟膠囊”。多年來，申請人對上述藥物組合物進(jìn)行不懈地深入研究，已研究制定出一種指紋 圖譜的質(zhì)量檢測方法，對上述藥物組合物進(jìn)行質(zhì)量檢測，可以更為全面、有效地控制該藥物 組合物的質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種含有薄荷油與香葵油(又名“香葉油”)的藥物組合物的 指紋圖譜質(zhì)量檢測方法。該檢測方法適用于所述藥物組合物的所有常規(guī)劑型，如膠囊劑、片劑、丸劑、軟膠
囊劑等。依據(jù)現(xiàn)有技術(shù)，在本發(fā)明中，含有薄荷油與香葵油的藥物組合物繼續(xù)被命名為“利 膽溶石軟膠囊”。本發(fā)明的目的是通過下列方式實(shí)現(xiàn)的一種采用氣相色譜指紋圖譜法對含有薄荷油與香葵油的藥物組合物進(jìn)行質(zhì)量檢 測，其標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜至少包含有7個主要色譜峰，其中各色譜峰與參照峰(S號峰)之間的 相對保留時間為1號峰為0. 20 0. 50、2號峰為0. 30 0. 60、3號峰為0. 40 0. 80、4號 峰為0. 65 1. 15、5號峰為0. 70 1. 20、S號峰為1、6號峰為0. 90 1. 55 ；在上述的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中，包含的主要色譜峰與參照峰(S號峰)之間的相對峰面 積為1號峰為0. 15 0. 35、2號峰為0. 15 0. 35、3號峰為0. 40 0. 75、4號峰為0. 30 0. 60、S號峰為1、6號峰為0. 15 0. 40 ；在本發(fā)明中，S號峰為薄荷腦的色譜峰。所述氣相色譜指紋圖譜檢測方法的檢測步驟為參照氣相色譜法，結(jié)合指紋圖譜的要求進(jìn)行測定(1)色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)采用毛細(xì)管色譜柱，分流，程序升溫法測定；(2)對照品溶液的制備取薄荷腦對照品適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成溶液， 即得；(3)供試品溶液的制備取供試品，稱定，加乙酸乙酯制成溶液，即得。(4)測定法精密吸取參照物溶液與供試品溶液，分別注入氣相色譜儀，測定。上述檢測方法優(yōu)選的步驟為
(1)色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用5%二苯基-95%二甲基硅烷共聚物為固定 相的毛細(xì)管色譜柱；進(jìn)樣口溫度220 260°C ；檢測器溫度220 260°C ；分流比為45 55 1 ；程序升溫初始溫度50°C，保持5分鐘，以每分鐘2°C升至80°C，保持5分鐘，以每分 鐘2°C升至120°C，保持6分鐘，再以每分鐘10°C升至210°C，保持3分鐘，測定；載氣流速 1. 0 2. Oml/min ；(2)對照品溶液的制備取薄荷腦對照品適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成每Iml 含0. 8 1. 2mg的溶液，即得；(3)供試品溶液的制備取供試品約45 55mg，精密稱定，置IOml容量瓶中，加乙 酸乙酯至刻度，搖勻，即得。(4)測定法精密吸取參照物溶液與供試品溶液各1 20 μ 1，分別注入氣相色譜 儀，測定。上述檢測方法更為優(yōu)選的步驟為參照氣相色譜法，結(jié)合指紋圖譜的要求進(jìn)行測定(1)色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用5%二苯基-95%二甲基硅烷共聚物為固定相 的毛細(xì)管色譜柱；進(jìn)樣口溫度240°C ；檢測器溫度240°C ；分流比為50 1 ；程序升溫初 始溫度50°C，保持5分鐘，以每分鐘2°C升至80°C，保持5分鐘，以每分鐘2°C升至120°C，保 持6分鐘，再以每分鐘10°C升至210°C，保持3分鐘，測定；載氣流速1. 5ml/min ；理論板數(shù) 按對照品(薄荷腦)峰計算，應(yīng)不低于30000 ；(2)對照品溶液的制備取薄荷腦對照品適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成每Iml 含1. Omg的溶液，即得；(3)供試品溶液的制備取供試品約50mg，精密稱定，置IOml容量瓶中，加乙酸乙 酯至刻度，搖勻，即得。(4)測定法精密吸取參照物溶液與供試品溶液各2μ 1，分別注入氣相色譜儀，測 定；(5)檢測結(jié)果供試品指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜經(jīng)計算軟件計算，相似度應(yīng)大于 0. 85，為合格品。本發(fā)明技術(shù)方案中所述的供試品為利膽溶石軟膠囊的內(nèi)容物。本發(fā)明中所使用的計算軟件為國家藥典委員會提供中藥色譜指紋圖譜相似度評 價系統(tǒng)。對本發(fā)明指紋圖譜質(zhì)量檢測方法的研究與說明一、概述利膽溶石軟膠囊內(nèi)容物由薄荷油、香葵油組成，為了更全面、有效的控制產(chǎn)品內(nèi)在 質(zhì)量，提高質(zhì)量控制水平，和國際接軌，讓臨床用藥安全及療效更加有所保證，發(fā)明人參照 液相指紋圖譜的要求，對利膽溶石軟膠囊指紋圖譜進(jìn)行了研究，因?yàn)槠渲饕煞直『赡X、香 葉醇等均為揮發(fā)性成分，所以采用氣相色譜法進(jìn)行研究。色譜條件優(yōu)選，建立了氣相指紋圖 譜測定條件并進(jìn)行了方法學(xué)考察。在對十批利膽溶石軟膠囊指紋圖譜檢測結(jié)果的基礎(chǔ)上， 逐漸積累數(shù)據(jù)，提出了利膽溶石軟膠囊的指紋圖譜，作為指紋圖譜的標(biāo)準(zhǔn)，從而達(dá)到能夠更 全面、有效地控制制劑質(zhì)量的目的。對所測得的指紋圖譜的辨認(rèn)，發(fā)明人采用中國藥品生物檢定所、浙江大學(xué)、空軍雷
5達(dá)學(xué)院所提供的中藥色譜圖分析和數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)，經(jīng)多次試驗(yàn)研究，且通過與計算相對保 留時間及相對保留峰面積的方法相比較，所得出的評價結(jié)論基本一致，使用中藥色譜圖分 析和數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)評價利膽溶石軟膠囊指紋圖譜的相似度，操作方便、快捷，以其得出的相 似度結(jié)果，對制劑指紋圖譜進(jìn)行評價，結(jié)論較為客觀、準(zhǔn)確。所以，發(fā)明人采用該軟件做為利 膽溶石軟膠囊指紋圖譜相似度計算軟件。二、指紋圖譜質(zhì)量檢測標(biāo)準(zhǔn)的起草說明1、參照物利膽溶石軟膠囊主要內(nèi)容物為薄荷油及香葵油，主要成分都具有揮發(fā)性，發(fā)明人 通過試驗(yàn)研究，選擇薄荷腦作為參照物。薄荷腦由中國藥品生物制品檢定所提供。2、供試品溶液的制備實(shí)驗(yàn)考察了用無水乙醇、乙酸乙酯作為溶劑，制備供試品，經(jīng)過綜合分析，發(fā)現(xiàn)用 乙酸乙酯作為溶劑，樣品分離較好，且重復(fù)性好。該方法能夠較多地保留了樣品中的化學(xué)成 分，從而能夠客觀準(zhǔn)確地對利膽溶石軟膠囊中揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，達(dá)到有效控制質(zhì)量的 目的。經(jīng)研究，供試品溶液的制備方法為取供試品約50mg，精密稱定，置IOml容量瓶 中，加乙酸乙酯至刻度，搖勻，即得。3、檢測方法(1)儀器和試劑儀器Agilent 6890氣相色譜儀色譜柱因揮發(fā)性成分多為非極性成分，且成分復(fù)雜，所以選用非極性固定相的細(xì) 口徑毛細(xì)管色譜柱HP-5(5%二苯基-95%二甲基硅烷共聚物為固定相的毛細(xì)管色譜柱， 30mX0. 32mmX0. 25 μ m)。色譜條件發(fā)明人考察了不同的氣相色譜分析條件，柱溫是色譜條件的重要參數(shù)， 它對各組分分離的影響很大，發(fā)明人摸索了以下幾種程序升溫條件①起始50 °C (維持 5min)，3。C /min 升至 80 °C (維持 5min)，3。C 120°C (維持 3min)，再以 10°C /min 升至 210°C (維持 IOmin)②起始50 °C (維持 5min)，2。C /min 升至 80 °C (維持 5min)，2。C 120°C (維持 3min)，再以 10°C /min 升至 210°C (維持 3min)③起始50°C (維持 5min)，1。C /min 升至 80°C (維持 5min)，1。C 120°C (維持 3min)，再以 20°C /min 升至 210°C (維持 3min)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明起始50°C (維持5min)，2V /min升至80°C (維持5min)，2V /min 升至120°C (維持3min)，再以10°C /min升至210°C (維持3min)的程序升溫條件下，色譜 峰的分離較好，其分離度、拖尾因子均符合規(guī)定。經(jīng)過試驗(yàn)優(yōu)選，最終確定測定條件為進(jìn)樣口溫度240°C ；檢測器溫度(FID) 2400C ；分流比為50 1 ；程序升溫初始溫度50°C，保持5分鐘，以每分鐘2°C升至80°C， 保持6分鐘，再以每分鐘2°C升至130°C，保持10分鐘，再以每分鐘10°C升至210°C，保持3 分鐘，測定；載氣流速1.5ml/min;進(jìn)樣量2μ1;理論板數(shù)按對照品(薄荷腦)峰計算，應(yīng) 不低于30000。(2)穩(wěn)定性試驗(yàn)
/min升至 /min升至 /min升至
取利膽溶石軟膠囊，按供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，每隔3小時測定 指紋圖譜，共測定6次，測定結(jié)果見表1，以0小時進(jìn)樣所得指紋圖譜為對照計算相似度，相 似度結(jié)果均不小于0. 99，表明供試品溶液15小時內(nèi)成分是穩(wěn)定的，符合指紋圖譜的技術(shù)要 求(不小于0. 95)。表1利膽溶石軟膠囊氣相指紋圖譜穩(wěn)定性試驗(yàn)的相似度分析結(jié)果
權(quán)利要求
一種含有薄荷油與香葵油的藥物組合物的質(zhì)量檢測方法，其特征在于采用氣相色譜指紋圖譜法進(jìn)行測定，其標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜至少包含有7個主要色譜峰，其中各色譜峰與參照峰(S號峰)之間的相對保留時間為1號峰為0.20～0.50、2號峰為0.30～0.60、3號峰為0.40～0.80、4號峰為0.65～1.15、5號峰為0.70～1.20、S號峰為1、6號峰為0.90～1.55；S號峰為薄荷腦的色譜峰。
2.如權(quán)利要求1所述的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，其特征在于該指紋圖譜包含的主要色譜峰與參 照峰(S號峰)之間的相對峰面積為1號峰為0. 15 0. 35、2號峰為0. 15 0. 35、3號峰 為0. 40 0. 75、4號峰為0. 30 0. 60,S號峰為1、6號峰為0. 15 0. 40 ；S號峰為薄荷腦 的色譜峰。
3.如權(quán)利要求1或2所述氣相色譜指紋圖譜檢測方法，其特征在于該檢測方法的步驟為參照氣相色譜法，結(jié)合指紋圖譜的要求進(jìn)行測定(1)色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)采用毛細(xì)管色譜柱，分流，程序升溫法測定；(2)對照品溶液的制備取薄荷腦對照品適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成溶液，即得；(3)供試品溶液的制備取供試品，稱定，加乙酸乙酯制成溶液，即得。(4)測定法精密吸取參照物溶液與供試品溶液，分別注入氣相色譜儀，測定。
4.如權(quán)利要求3所述檢測方法，其特征在于 參照氣相色譜法，結(jié)合指紋圖譜的要求進(jìn)行測定(1)色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用5%二苯基-95%二甲基硅烷共聚物為固定相的毛 細(xì)管色譜柱；進(jìn)樣口溫度220 260°C;檢測器溫度220 260°C;分流比為45 55 1 ； 程序升溫初始溫度50°C，保持5分鐘，以每分鐘2°C升至80°C，保持5分鐘，以每分鐘2V 升至120°C，保持6分鐘，再以每分鐘10°C升至210°C，保持3分鐘，測定；載氣流速1. 0 2.Oml/min ；(2)對照品溶液的制備取薄荷腦對照品適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成每Iml含0.8 1. 2mg的溶液，即得；(3)供試品溶液的制備取供試品約45 55mg，精密稱定，置IOml容量瓶中，加乙酸乙 酯至刻度，搖勻，即得。(4)測定法精密吸取參照物溶液與供試品溶液各1 20μ1，分別注入氣相色譜儀，測定。
5.如權(quán)利要求4所述檢測方法，其特征在于 參照氣相色譜法，結(jié)合指紋圖譜的要求進(jìn)行測定(1)色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用5%二苯基-95%二甲基硅烷共聚物為固定相的毛 細(xì)管色譜柱；進(jìn)樣口溫度240°C ；檢測器溫度240°C ；分流比為50 1 ；程序升溫初始溫 度50°C，保持5分鐘，以每分鐘2°C升至80°C，保持5分鐘，以每分鐘2°C升至120°C，保持6 分鐘，再以每分鐘10°C升至210°C，保持3分鐘，測定；載氣流速1. 5ml/min ；理論板數(shù)按對 照品(薄荷腦)峰計算，應(yīng)不低于30000 ；(2)對照品溶液的制備取薄荷腦對照品適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成每Iml含1.Omg的溶液，即得；(3)供試品溶液的制備取供試品約50mg，精密稱定，置IOml容量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，搖勻，即得。(4)測定法精密吸取參照物溶液與供試品溶液各2μ1，分別注入氣相色譜儀，測定；(5)檢測結(jié)果供試品指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜經(jīng)計算軟件計算，相似度應(yīng)大于0.85。
6.如權(quán)利要求5所述計算軟件，該軟件為國家藥典委員會提供中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種含有薄荷油與香葵油的藥物組合物的質(zhì)量檢測方法，其特征在于采用氣相色譜指紋圖譜法進(jìn)行測定，其標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜至少包含有7個主要色譜峰，其中各色譜峰與參照峰(S號峰)之間的相對保留時間為1號峰為0.20～0.50、2號峰為0.30～0.60、3號峰為0.40～0.80、4號峰為0.65～1.15、5號峰為0.70～1.20，S號峰為1、6號峰為0.90～1.55；S號峰為薄荷腦的色譜峰。本發(fā)明提供的質(zhì)量控制方法，準(zhǔn)確，精密，穩(wěn)定性好，能夠有效地控制藥物制劑的質(zhì)量。
文檔編號A61K36/534GK101953884SQ20091014034
公開日2011年1月26日 申請日期2009年7月12日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月12日
發(fā)明者吳云, 畢宇安, 王振中, 竇霞, 章晨峰, 蕭偉, 陳鳳龍 申請人:江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司