專利名稱：抗病毒劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有雜多鎢酸鹽的藥物組合物及其藥物上可以接受的衍生物，以及這些化合物在治療或預(yù)防病毒感染上的應(yīng)用，該病毒是黃熱病病毒科(Flavivirridae)的確知的或者是可能的一員，這類病毒感染例如是黃熱病、登革熱、澳州腦炎、日本腦炎，及肝炎C。
已經(jīng)知道黃熱病病毒是無數(shù)人類疾病的起因，這些疾病包括人類最重要的肢節(jié)動(dòng)物承受的病毒折磨-登革、黃熱病、及日本腦炎。此外，八種黃熱病病毒在有重要經(jīng)濟(jì)意義的馴養(yǎng)或野生動(dòng)物中可引起疾病。黃熱病和登革熱很普遍，并且已知是蚊子傳播引起的熱帶國家疾病。每年有3千萬至4千萬而黃熱病病毒感染者，其中包括1百萬日本腦炎感染者。肝炎C的感染范圍不能確切知道，因?yàn)樵诓∪藳]有感到癥狀的情況下感染可以存在許多年，比起肝炎B，肝炎C產(chǎn)生慢性肝感染的速率要高得多，而肝炎B在許多國家已經(jīng)是公認(rèn)的危險(xiǎn)病了。與受肝炎B感染為5至10%相比較，大約有50%的病人發(fā)生慢性感染。慢性感染引起肝硬化，損傷肝功能，并在20-30年之后引起肝的衰竭。已經(jīng)估計(jì)到，其感染的速率已經(jīng)達(dá)到和可能超過澳大利亞人口的1%。對于肝炎C來說，沒有已證實(shí)的治療方法或疫苗。
供應(yīng)的某些疫苗只對某些病毒有效例如黃熱病，日本腦炎和蜱傳播的腦炎。治療登革熱和澳州腦炎取決于病人自身的免疫保護(hù)能力;感染有可能是致死的。
因此強(qiáng)烈地需要一種抗病毒藥物以控制由黃熱病病毒造成的感染。能控制或抑制復(fù)制的藥物已經(jīng)證明在控制某些其它的病毒中是有效果的。然而，由于難以達(dá)到在抑制病毒的同時(shí)還能使非感染的細(xì)胞不受損害。因此，近來還沒有在臨床中廣泛使用的抗病毒藥物。
該黃熱病病毒科(Flaviviridae)是近來被確認(rèn)的較小的已包封病毒的一個(gè)大組(超過70種)，這種病毒含有一個(gè)10千基正覺RNA的單股，由于上述提到的困難和近來確認(rèn)黃熱病病素是具有獨(dú)特復(fù)制對策的獨(dú)特的一組，因此沒有對控制黃熱病病毒感染抗病毒化合物加以注意。
所有的黃熱病病毒科具有獨(dú)特的復(fù)制對策，而該復(fù)制對策可以被本發(fā)明的組合物所抑制。已被提出包括在復(fù)制過程中的非結(jié)構(gòu)性基因NS3和NS5，占有大部分的種間順序相似性，因此，復(fù)制過程的抑制劑應(yīng)對所有的黃熱病病毒有效。
對于雜多鎢酸鹽化合物類人們知悉已有100多年了，其大部分用途是由于它們的氧化還原化學(xué)和它們的高離子重量和離子電荷而引起的。它們的氧化還原導(dǎo)致它們作為有機(jī)物質(zhì)的氧化反應(yīng)的催化劑來使用，例如，使丙烯變成丙烯酸，使乙烯變成乙醛。在生物領(lǐng)域中，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)雜多鎢酸鹽作為電子顯微鏡的電子反差強(qiáng)染色劑來使用，用作蛋白質(zhì)的分析試劑，并且有幾種已經(jīng)表現(xiàn)出可以抑制病毒的DNA和RNA聚合酶(J.C.Cherman等人，BiochemBiophys.ResCommun.，1975，65，1229;M，Herve等人，Ibid，1983，116，222.)。
在本發(fā)明范圍中的雜多鎢酸鹽包括Keggin和Dawson(也稱之為Wells-Dawson)型結(jié)構(gòu)和基于這些結(jié)構(gòu)的化合物，在其中的一種或多種，鎢原子被除去，并且，在多數(shù)情況下，鎢原子被其它的金屬原子所交換，在這些結(jié)構(gòu)中的空位，通常由于從Keggin(XW12O40n-)或Dawson(P2W18O626-)類中萃取出WO4+或W3O66+而產(chǎn)生了。由于空位的配置，這些不飽和的(空隙)多陰離子的異構(gòu)物是可能的(R.Massart R.Contant，J.M.Fruchart，J.M.Ciabrini，M.Fournier，Inorg.Chem.1977，16，2916;T.L.Jorris，M.Kozik，N.Casan-Pastor，P.J.Domaille，R.G.Finke，W.K.Miller和L.C.W.Baker，J.Am.Chem.Soc.1987，109，7402;T.J.R.Weakley，Polyhedron 1987，6，931R.Contant和J.P.Ciabrini，J.Chem.Res.(S)，1977，222;R.G.Finke，M.W.Droege和P.J.Domaille，Inorg.Chem.，，1987，26，3886;M.T.Pope，“Heteropoly and Isopoly Oxometalates”，Springer-Verlag，Berlin，1983.)在P2W17O6110-中的空缺位置，用詞頭α1-來定義帶式空位，或用詞頭α2-來定義蓋式空位。在該結(jié)構(gòu)中，W3-氧化物三原子的轉(zhuǎn)動(dòng)導(dǎo)出許多異構(gòu)體。因此，W3三原子蓋的60℃轉(zhuǎn)動(dòng)能夠例如將α-異構(gòu)體轉(zhuǎn)化成β-異構(gòu)體。在XW9O34n-，型三空位多陰離子中，得到了A-或B-型，這取決于與角落連接的W3氧化物三原子是失去(A-型)，或者與邊緣連接的W3氧化物三原子是否已經(jīng)除去(B-型)。
不飽和的雜多陰離子可以通過在其空缺位置與金屬離子的鍵合作用而起配位體的作用。這些金屬離子，當(dāng)不是空間密集時(shí)，則可以帶有配位體例如水，有機(jī)配價(jià)種屬或有機(jī)金屬基團(tuán)。有機(jī)金屬部分也可以與在例如三取代的Keggin或Dawson結(jié)構(gòu)上的暴露的氧原子進(jìn)行反應(yīng)(R.G.Finke和M.W.Droege;J.Am.Chem.Soc.，1984，106，7274;以及R.G.Finke，B.Rapko和P.J.Domaille，Organometallics1986，5，175)在Keggin結(jié)構(gòu)上的某些氧原子也可以用試劑例如三甲基氧鎓鹽進(jìn)行烷基化作用(W.H.Knoth和R.L.Harlow，J.Am，Chem.Soc.1981，103，4265)，在雜多鎢酸鹽中的一些氧原子還可以交換為氟原子(F.Chauveau，P.Doppelt和J.Lefebvre，Inorg，Chem，1980，19，2803;T.J.Jorris，M.Kozik和L.C.W.Baker，Inorg.Chem.1990，29，4584)。
其它的雜多陰離子種屬可以通過將二個(gè)W5O18H5-離子與金屬離子，例如鑭系元素進(jìn)行反應(yīng)而生成(R.D.Peacock和T.J.R.Weakley，J，Chem.Soc.A，1971，1836)具有PW7磷鎢酸鹽基團(tuán)的雜多陰離子(一般用磷酸鹽橋接)是人們所知道的(J.Fuchs和R.Palm，Z.Naturforsch.1988，43b，1529以及R.Acerete，J.Server-Carrio，A.Vegas和M.Martinez-Ripoll，J.Am.Chem.Soc.，1990，112，9386)。
在化合物中的中心原子，特別是在簡單Keggin型結(jié)構(gòu)中的中心原子，可以在很寬的范圍內(nèi)變化。在Dawson型結(jié)構(gòu)中，其中心原子大多數(shù)是磷。
在溶液中，雜多鎢酸鹽通常比相應(yīng)的雜多鉬酸鹽更穩(wěn)定。其它金屬的雜多化合物，例如鈮和釩，也已經(jīng)制備出來，但通常只是在更加受限制的PH范圍內(nèi)是穩(wěn)定的。
目前，我們有了意外的發(fā)現(xiàn)，即含有一個(gè)“中心”(在以下列舉的結(jié)構(gòu)類型實(shí)例中用X表示)的雜多鎢酸鹽多陰離子，對屬于黃熱病病毒科是活潑的，特別是它們能抑制這類病毒的復(fù)制作用，停止某種感染的發(fā)展。
按照本發(fā)明，提供了用于治療和預(yù)防與黃熱病毒有關(guān)系的一類組合物，它們含有由以下的1至12的通式所選擇出的一種或多種雜多鎢酸鹽化合物活性組分，或它們的藥物上可接受的衍生物。本發(fā)明的化合物是多陰離子，以及為了電中性所連接的陽離子(A)，它們是結(jié)晶，含有可變化數(shù)目的結(jié)晶水分子，這取決于產(chǎn)品的回收條件和其后的處理方法，所有的這些水合物都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
“藥物上可接受的衍生物”是指任何的藥物上可接受的鹽類或任何的其它化合物，它們在病者服用時(shí)，能夠提供(直接或間接地)本發(fā)明的化合物或它的活性代謝物或殘留物。
本發(fā)明的藥物組合物可以包括由通式1至12所選擇的一種或多種化合物，以及一種或多種藥物上可接受的載體或稀釋劑，而且也可以包括其它治療劑。每種載體必須是藥物上“可接受的”，即與組合物的其它組分是配伍的并且不會(huì)損傷病人。應(yīng)該理解，除了特別提到的組分，本發(fā)明組合物可以包括所討論的這類組合物現(xiàn)有技術(shù)中所慣用的其他劑類，例如，適用于口服的可以包括這類其它試劑，例如增甜劑、增稠劑及香味劑。
組合物包括了適于口腔、直腸、鼻、局部(包括口內(nèi)和舌下)、陰道或腸胃外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈和皮內(nèi))服用的組合物。該組合物通常可以以單位劑量形式存在，而且可以用藥物領(lǐng)域中已知的任何方法來制備。該方法包括將活性組分與載體相結(jié)合這一步驟。該載體構(gòu)成一種或多種輔助組分。一般，該組合物通過將活性組分與液體載體，或微細(xì)的固體載體，或二者兼有的載體，均勻地和緊密地進(jìn)行結(jié)合，然后，如果必要，將產(chǎn)品成形。
本發(fā)明還提供一種治療或預(yù)防與黃熱病病毒有關(guān)的感染的方法，它包括服以含有有效量的由分子式1-12中選擇出的一種或多種化合物的組合物。
這些化合物可以用文獻(xiàn)中的方法來制備，或者作些改變，即改變?yōu)榈玫皆撃繕?biāo)化合物所需的反應(yīng)物和反應(yīng)條件。說明許多這類化合物的制備方法，結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的一般評論文章包括P.Souchay，“IonsMinérauxCondensés”，Masson，Paris，1969;M.T.Pope，'HeteropolyandIsopolyOxometalates”，Springer-Verlag，Berlin，1983;T.J.R.Weakley，StructureandBonding，Springer-Verlag，Berlin，1974，18，131;M.T.Pope與A.Müller，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1991，30，34.
用來作為活性組分的本發(fā)明化合物，以如下通式1-12列出，并列出每種副型的適宜制備方法。
A.基于Keggin結(jié)構(gòu)的化合物1.)An[YMXW11O39]其中X＝BⅢ，PⅤ，SiⅣ，GeⅣ，ZnⅡ，CoⅡ，CoⅢ，F(xiàn)eⅢ，GaⅢ，TiⅣ，或ZrⅣ.
M＝MnⅡ，MnⅢ，F(xiàn)eⅡ，F(xiàn)eⅢ，CuⅡ，CoⅡ，CoⅢ，GaⅢ，NiⅡ，ZnⅡ，TiⅣ，ZrⅣ，AlⅢ，InⅢ，VⅣ，VⅤ，MoⅥ，PbⅡ，NbⅤ，Y＝配位體(如H2O，OH-，O2-，NH3，NCS-，NO2-，CN-，SO32-，芳香族/脂肪族胺，或環(huán)戊二烯基。)這些化合物可以按下列文獻(xiàn)中所說明的方法來制備，如
C.M.Tourné，G.F.Tourné，S.A.MalikandT.J.K.Weakley，J.inorg.nucl.Chem.1970，32，3875-3890和其中引用的對比文獻(xiàn);M.Bauchet，C.M.Tourné和G.Tourné，C.R.Acad.Sci.Paris，1972，C275，407;F.Zonnevijlle，C.M.Tourné和G.F.Tourné，Inorg;Chem.1982，21，2742，2750，2751-2757及其中引用的對比文獻(xiàn);P.J.Domaille，J.Am.Chem.Soc.，1984，106，7677;T.J.R.Weakley，J.Chem.Soc.，DaltonTrans.1973，341;L.C.W.BakerandT.P.McCutcheon，J.Am.Chem.Soc.1956，78，4503及其后的文章，;M.Michelon和G.Hervé，C.R.Acad.Sci.Paris，1972，C274，209J.Liu.W.Wag，Z.Zhu，E.Wang和Z.Wang，TransitionMet.Chem.1991，16，169;F.Ortéga和M.T.Pope，Inorg.Chem.1984，23，3292.環(huán)戊二烯基化合物的制備方法見R.K.C.Ho和W.G.Klemperer，J.Am.Chem.Soc.1978，100，6772或W.H.Knoth，J.Am.Chem.Soc.1979，101，2211.
2.)An[M(XW11O39)2]其中X＝GaⅢ，PⅤ，SiⅣ，GeⅣ，or TiⅣ.
M＝LaⅢ，CeⅢ，CeⅣ，PrⅢ，SmⅢ，NdⅢ，EuⅢ，GdⅢ，TbⅢ，DyⅢ，HoⅢ，TmⅢ，或YbⅢ.
該化合物可以按下列文獻(xiàn)給出的方法來制備即J.Liu，W.Wang.Z.Zhu，E.Wang和Z.Wang，TransitionMet.Chem.1991，16，169及其中的參考文獻(xiàn);Gh.Marcu和M.Rusu，Rev.Roum.Chim.1977，22，227;
3.)An[XM2W10O40]式中X＝PⅤ，SiⅣ，或VⅤ.
M＝TiⅣ，ZrⅣ，VⅤ，ZnⅡ，CoⅡ，F(xiàn)eⅡ，或FeⅢ.
這些化合物可以按下列文獻(xiàn)中的方法來制備
P.J.Domaille，Inorg.Synth.，1990，27，102-104.(Ed.A.P.Ginsberg)Whiley-Interscience和在其中引用的對比文獻(xiàn);J.Canny，R，Thouvenot，A.Tézé，G.Hervé，M.Leparulo-Loftus和M.T.Pope，Inorg.Chem.1991，30，976;P.J.Domaille和W.H.Knoth，Inorg.Chem.1983，22，818;C.M.Tourné和G.F.Tourné，J.Chem.Soc.DaltonTrans.1988，2411;C.M.FlynnJr.和M.T.Pope，Inorg.Chem.1971，10，2745.
4.)An[XM3W9O40]其中X＝PⅤ，F(xiàn)eⅢ，SiⅣ，or VⅤ.
M＝VⅤ，F(xiàn)eⅢ，NbⅤ，CrⅢ，ZrⅣ，or TiⅣ.
這類化合物可以按下列給出的方法來制備P.J.DomaiLle，J.Am.Chem.Soc.，1984，106，7677;R.G.Finke，C.A.Green和B.Rapko，Inorg，Synth.，1990，27，129.(Ed.A.P.Ginsoerg)Whiley-Interscience和在其中引用的對比文獻(xiàn)P.Jun，Q.Lun-yu和C.Ya-guang，Inorg.Chim.Acta1991，183，157;D.J.Edlund，R.J.Saxton，D.K.Lyons和R.G.Finke，Organometaliics1988，7，1692;C.M.FlynnJr.和M.T.Pope，Inorg.Chem.1971，10，2745.
B.基于Dawson結(jié)構(gòu)的飽和化合物5.)An[X2MW17O62]式中X＝PⅤ.
M＝CoⅡ，CoⅢ，NiⅡ，ZnⅡ，MnⅡ，MnⅡ，F(xiàn)eⅢ，AlⅢ，GaⅢ，InⅢ，TiⅣ，ZrⅣ，VⅤ，MoⅥ，或η5-RC5H4Ti，其中R＝有機(jī)殘基該化合物可以用下列的反應(yīng)來得到
S.A.Malik和T.J.R.Weakley，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.1967，1094;J.Chem.Soc.(A)，1968，2647;D.K.Lyon，W.K.Miller，T.Novet，P.J.Domaille，E.Evitt，D.C.Johnson和R.G.Finke，J.Am.Chem.Soc.1991，113，7209和在其中引用的對比文獻(xiàn);J.F.W.Keana和M.D.Ogan，J.Am.Chem.Soc.1986，108，7951.
6.)An[M(X2W17O61)2]其中X＝PⅤM＝EuⅢ，CeⅢ，CeⅣ，SmⅢ，或其它穩(wěn)定的鑭系金屬離子。
該化合物可以用下列的反應(yīng)來得到R.D.Peacock和T.J.R.Weakley，J.Chem.Soc.(A)，1968，1836;A.V.Botar和Rev.Roum.Chim.1973，18，1155;Gh.Marcu，M.Rusu和A.V.Botar，Rev.Roum.Chim.1974，19，827.
7.)An[X2M3W15O62]其中X＝PⅤ.
M＝VⅤ，TiⅣ，MoⅥ，或NbⅤ當(dāng)M＝V時(shí)，這些化合物可以用下列方法制備，即R.G.Finke，B.Rapko，R.J.Saxton和P.J.Domaille，J.Soc.1986，108，2947，當(dāng)M＝Nb時(shí)，該化合物、該單體和二聚物可以按照下列方法制備D.J.Edlund，R.J.Saxton，D.K.Lyons和R.G.Finke，Organometallics1988，7，1692。
當(dāng)M＝Mo時(shí)，該化合物可以按照下列方法制備J.P.Ciabrini，R.Contant和J.M.Fruchart，Polyhedron1983，2，1229。
C.化合物，其中二種或三種三空位的A或B-XW9O34n-或二個(gè)B-X2W15O56n-多陰離子通過過渡金屬或鑭系金屬離子來連接。
8.)An[M4(H2O)y(XW9O34)2]其中X＝PⅤ，F(xiàn)eⅢ，ZnⅡ，或CoⅡ，M＝MnⅡ，F(xiàn)eⅡ，CoⅡ，NiⅡ，CuⅡ，ZnⅡ，ZrO，[FeCu]1/2，[WZn3]1/4，[WZnMnⅡ2]1/4，[WZnMnⅢ2]1/4，[WMnⅡ3]1/4，[WMnⅢ3]1/4，[WFeⅡ3]1/4，[WFeⅢ3]1/4，[WNiⅡ3]1/4，[WCuⅡ3]1/4，[WZnVⅣ2]1/4，[WZnⅡFeⅡ2]1/4，[WZnⅡCoⅡ2]1/4，WNi3Ⅱ，[WZnⅡNiⅡ2]1/4，[WZnⅡVⅣ2]1/4，[WZnⅡPdⅡ2]1/4，[WCo3Ⅱ]1/4，[WCoⅡMnⅡ2]1/4，[WCoⅡFeⅢ2]1/4，[WCoⅡNiⅡ2]1/4，或[WCoⅡZnⅡ2]1/4.
y是1-6，最通常是2。
這些化合物可以按照下列方法來制備H.T.Evans，C.M.Tourné，G.F.Tourné和T.J.R.Weakley，J.Chem.Soc.DaltonTrans.，1986，2699R.G.Finke，M.W.Droege和P.J.Domaille，Inorg.Chem.，1987，26，3886;S.H.Wasfi，A.L.Reingold，G.F.Kokoszka和A.S.Goldstein，Inorg.Chem.，1987，26，2934;C.M.Tourné，G.F.Tourné和F.Zonnevijlle，J.Chem.Soc.DaltonTrans.1991，143.
9.)An[(FeOA)4(PW9O34)2]這些化合物可以通過將△-Na8HPW9O34與乙酸鐵(Ⅲ)的1∶2摩爾比含水混合物，按照專利申請PCT/AU91/00280所說明的方法，進(jìn)行回流來制備。該多陰離子的結(jié)構(gòu)是尚未知道的。用ICP分析方法，例如鉀化合物的分析，得到K∶P∶F∶W的比例是7∶1∶2∶9。曾經(jīng)試圖測定銨鹽的晶體結(jié)構(gòu)，但是該結(jié)晶質(zhì)量不夠好以使得多陰離子中的原子被確切定位。單位晶格的尺寸經(jīng)測定是32.36×27.30×24.42
，而b＝112.28°。
10.)An[Ma(XW9O34)2]其中X＝PⅤ，或SiⅣ.
如a＝1或2，M＝WO2如a＝3，M＝Zr(OH)，CeO，Cu，Cu(NO3)1/3，Cu(NO2)1/3，WO2，ZnⅡ，MnⅡ，MnⅢ，F(xiàn)eⅡ，F(xiàn)eⅢ，NiⅡ，CoⅡ，[Fe2(WO2)]1/3，[FeCo(WO2)]1/3，[CoⅡCuⅡWO2]1/3，[CuⅡ2CoⅡ]1/3，[CuⅡ2CoⅡNO3]1/3，[Zn2(WO2)]1/3，[Ni2(WO2)]1/3，[Co2(WO2)]1/3，或[η-C5H5TiⅣ(OH2)].
該類化合物可以按照下列說明的方法來制備R.G.Finke，B.Rapko和T.J.R.Weakley，Inorg.Chem.1989，28，1573和在其中引用的對比文獻(xiàn);C.Tourné，A.Revel和G.Tourné，Rev.Chim.Minerale 1977，14，537([Co2(WO2)]1/3);C.M.Tourné和G.F.Tourné，J.Chem.Soc.Dalton Trans.1988，2411.
11.)An[Co9(OH)3(H2O)6(HPO4)2(PW9O34)3]可以按下列給出的方法來制備T.J.R.Weakley，J.Chem.Soc.，Chem.Commun1984，1406;J.Chem.Soc.，DaltonTrans.，1986，2699。
12.)An[M4(H2O)2(X2W15O56)2]WhereinX＝PⅤM＝MnⅡ，F(xiàn)eⅡ，CoⅡ，NiⅡ，CuⅡor，ZnⅡ.
這些化合物可以按下列的一般方法來制備R.G.Finke，M.W.Droege和P.J.Domaille，Inorg，Chem.，1987，26，3886。
當(dāng)此鈷化合物(如鈉鹽)在水溶液中加熱至80-90℃幾小時(shí)后，在冷卻到室溫時(shí)由溶液中結(jié)晶出的紅-棕色化合物稱作此化合物的“高溫”型。
在通式為1-12的化合物中，當(dāng)過渡金屬原子取代結(jié)構(gòu)式中的一個(gè)或多個(gè)鎢原子時(shí)，在過渡金屬原子上的氧可以或是雙質(zhì)子化的(H2O)，單質(zhì)子化的(OH)，或是完全脫質(zhì)子的(O)，正如鎢酸鹽化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域熟練人員所知的，這些質(zhì)子的酸性和所得到的化合物，取決于過渡金屬原子的性質(zhì)，它的氧化態(tài)，所形成的多陰子的堿性、以及從其中分離出化合物的溶液的堿性等。在本發(fā)明的化合物中，并不是所有的氧原子都必須成為氧基團(tuán)，并且，在多陰離子上的電荷(從而也是相反的陽離子(A)的數(shù)目)將取決于連接在氧原子上的質(zhì)子數(shù)目。此外，含有基團(tuán)例如MOH的化合物可以通過分子內(nèi)的縮合反應(yīng)而二聚化。所列舉的化合物的二聚物類，若生成的話，也包括在本發(fā)明中。
本發(fā)明的許多化合物可以生成許多種異構(gòu)體。事實(shí)上，為了得到異構(gòu)化的純化合物，有時(shí)是困難的。所有的異構(gòu)體或異構(gòu)體混合物都包括在本發(fā)明中。
很多本發(fā)明的化合物會(huì)發(fā)生-電子還原或多電子還原。已還原化合物也包括在本發(fā)明中。
在多陰離子上的電荷可以變化，這要取決了多陰離子的質(zhì)子化程度(如前面所指出的)和金屬原子的氧化狀態(tài)。所連的相反陽離子(A)的數(shù)目也將相應(yīng)地變化。A可以是質(zhì)子，堿金屬離子，堿土金屬離子，或銨離子，或類型為R4-nHnN+類型的烷基銨離子，其中的R是含1到6個(gè)碳原子的烷基鏈。所需要的陽離子一般或者是利用離子交換樹脂，或者是利用過量的這種陽離子鹽的沉淀作用而引入到化合物中。
雜多陽離子化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域的熟練人員應(yīng)該注意，并不是通式1-12所給出的元素的所有結(jié)合都是可分離的。
適于口服的本發(fā)明的化合物可以以分離的單元提供，如膠囊，小袋或片劑，它們每種形式均含有預(yù)定量的活性組分;也可以作為粉狀或粒狀提供;以溶液，或以在含水液體或非水液體中的懸浮液提供;或以水包油乳化液或油包水乳化液提供。該活性組分也可以作為大丸劑、干藥糖劑或糊劑提供。
片劑可以用壓制或模制來制備，也可帶有一種或多種附加組分。壓制的片劑可以通過在適當(dāng)?shù)臋C(jī)器內(nèi)，將以自由流動(dòng)形式存在的活性組分，如粉末或細(xì)粒壓制而得。該活性組分也可混有粘結(jié)劑(如惰性稀釋劑)，防腐崩解劑(如乙醇酸淀粉鈉、交聯(lián)的povidone，交聯(lián)的羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑。模壓的片劑可以通過在適宜的機(jī)器內(nèi)，將用一種惰性液體稀釋劑潤濕的粉狀化合物的混合物進(jìn)行模壓來制備。該片劑也可以進(jìn)行涂敷或刻上記號，并且也可以進(jìn)行配制以使其中的活性組分緩慢地或控制地釋出，例如，加入不同比例的羥丙基甲基纖維素可以提供所需要的釋放能力。該片劑也可以帶有腸涂層的形式來提供，以使在腸的部分中而不是在胃中釋放。
適于在口中作局部服用的組合物包括以下幾種糖錠，它包含在香味基質(zhì)中的活性組分，香味基質(zhì)通常是蔗糖，阿拉伯膠，或黃蓍膠;錠劑，它包含在惰性基質(zhì)(如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)中的活性組分;以及漱口物，它包含在適當(dāng)液體載體中的活性組分。
適于直腸服用的組合物可以以帶適當(dāng)基質(zhì)的栓劑提供，該基質(zhì)包括例如可可脂或水楊酸鹽。
適于陰道使用的組合物可以作為下列形式提供，例如，陰道栓劑，霜?jiǎng)?，凝膠狀物，糊狀物，泡沫狀物或者是氣霧劑，它們除包含活性組分之外還包含本技術(shù)領(lǐng)域中的人們所知道的適當(dāng)載體。
適于腸胃外服用的組合物包括含水的或非水的等滲無菌注射液，后者可以含有抗氧化劑，緩沖劑;抑菌劑及溶質(zhì)，后者使組合物與病者的血液等滲;并包括含水的或非水的無菌懸浮液，該懸浮液可以含有懸浮劑和增稠劑，該組合物可以放在單位劑量封閉容器中或多劑量封閉容器中，例如安瓿和小瓶，并且可以在冷凍干燥(凍干法)的條件下保存，只需要恰在使用之前加入無菌液體載體，例如注射用水。也可由如前所說的無菌粉末、粒狀物及片劑來制備臨時(shí)的注射液和懸浮液。
優(yōu)選的單位劑量組合物是那種組合物，它含有活性組分的上述每天劑量或單位每天次級劑量，或含有它的適當(dāng)?shù)牟糠帧?br> 按照本發(fā)明，該組合物也可以制成獸藥組合物的形式，它可以例如通過本技術(shù)領(lǐng)域中的常用方法來制備，這類獸藥組合物的實(shí)例包括適用于以下方面的那些(a)口服，外用，例如，灌藥(如含水或非水溶液或懸浮液);片劑或團(tuán)塊;與飼料相混合的粉狀物、粒狀物、或丸狀物;用于舌內(nèi)的糊狀物。
(b)腸胃外使用，如通過皮下、肌內(nèi)或靜脈注射，例如作為無菌液或懸浮液;或(當(dāng)適當(dāng)時(shí))通過乳房內(nèi)注射，將懸浮液或溶液通過乳頭注射入乳房中;
(c)局部使用，例如用于皮膚的霜?jiǎng)┸浉嗷驓忪F劑。
(d)陰道內(nèi)用，例如陰道藥栓，霜?jiǎng)┗蚺菽?br> 應(yīng)該理解，除了上述特殊提到的組分之外，本發(fā)明的組合物可包括技術(shù)領(lǐng)域中常用的試劑，例如，適于口服的那一類可以包括增甜劑，增稠劑和香味劑這些另外的試劑。
服用和劑量按照本發(fā)明的組合物可以通過任何適當(dāng)?shù)耐緩絹碇委?，包括口服，直腸，鼻，局部(包括口內(nèi)和舌下)，陰道和腸胃外(包括皮下，肌內(nèi)，靜脈及皮內(nèi))，優(yōu)選的是通過口服途徑來治療，然而優(yōu)選的途徑最好隨患者的病況和年齡，組合物的性質(zhì)，以及所選擇的活性組分而變化。
一般，活性組分的適當(dāng)劑量，按患者每公斤體重計(jì)，每天為3.0到120mg的范圍，優(yōu)選的劑量每天按患者每公斤體重計(jì)，每天為6到90mg的范圍，而更為優(yōu)選的是，按患者每公斤體重計(jì)，每天為15到60mg。所需要的劑量最好制成2，3，4，5，6或更多的副劑量，在全天的適當(dāng)間隔內(nèi)服用。這些副劑量可以以單位劑量形式來服用，例如，每單位劑量形式含有10至1500mg，優(yōu)選的是20至1000mg，更為優(yōu)選的是50至700mg的活性成份。
最理想的是，活性成分應(yīng)該如此服用以達(dá)到活性化合物的峰值血漿狀濃度為大約1至100μM，優(yōu)選的為大約2至50μM。這是可以達(dá)到的，例如，可通過靜脈注射0.1至5%活性組分的溶液，優(yōu)選鹽水溶液，或口服含有大約0.1至大約100mg/Kg的活性組分的大藥丸。所需要的血液水平可以通過連續(xù)輸注含大約0.4到大約15mg/mg的活性組分來保持。
下面提供的實(shí)施例只是作為說明，而不是以任何方式對本發(fā)明范圍的限制。在實(shí)施例3到6所用的術(shù)語“活性組分”指的是一種或多種選自分子式1-12的化合物或者其藥物上可以接受的衍生物。
實(shí)施例1本發(fā)明組合物制備了表1所列出的化合物，并按下列實(shí)施例2所說的將它們?nèi)芙庠谧鳛樵囼?yàn)用雙倍蒸餾水中。
表1
實(shí)施例2抗病毒活性對在實(shí)施例1列出的化合物進(jìn)行了在玻璃試管中聚合酶被測物內(nèi)抑制RNA合成能力的檢測(Chu和Westaway，1985，1987;Brun和Brinton，1986)。在該測定物中，通過加入[α-32P]GTP，而檢測出黃熱病病毒RNS，后者含有基因44S RNA，雙股復(fù)制型(RF)，部分雙股復(fù)制中間物(RI)。
A.制備病毒感染的Vero細(xì)胞浸出物用登革2型(DEN-2)病毒(NewGuineaC菌株;Sabin和Schlesinger，1945)或Kunjin病毒(KUN)(菌株MRM61C;Boulton和Westaway，1972)重復(fù)感染7次而將Vero細(xì)胞感染。當(dāng)聚合酶的活性在最大值時(shí)，在30-60hp.i.，制備含有依賴于RNA的RNA聚合酶(RDRP)的由DEN-2病毒感染細(xì)胞得到的浸出液。同樣，在最大聚合物活性時(shí)，在24hp.i.，制備KUN病毒感染細(xì)胞的浸出物(Chu和Westaway，1985)。
將細(xì)胞通過離心作用制成丸狀并再懸浮在10mM的乙酸鈉中，濃度為2×107細(xì)胞/ml，然后將它們通過量器21的針20次，再通過量器26的針20次，以將其破碎。將此已破碎細(xì)胞以800g離心7分鐘，以得到上面的清液部分和與核相聯(lián)系的物質(zhì)的片狀物。用上部的清液部分測定所有的RDRP，此上部清液部分在下文中稱之為細(xì)胞浸取物，將它在-70℃下貯存，并在僅進(jìn)行一次冷凍/熔化循環(huán)之后即使用。
B，依賴于RNA的RNA聚合酶測定按照前述的方法測定細(xì)胞浸取物中的RDRP的活性，但有下列改進(jìn)(Chu和Westaway，1985)。在每個(gè)RDRP的測定中，該病毒感染細(xì)胞浸取物含有4.5-6mg/ml的蛋白質(zhì)。在加入進(jìn)行RDRP測定所需的其它組份之前10分鐘，將被檢測的化合物溶在雙倍蒸餾水中，并把RNasin(0.5單位/ml，Promaga)加入到細(xì)胞浸出物中。該最終的反應(yīng)混合物(總體積為50μl)含有50mM的三羥甲氨基甲烷-HCl PH為8.0，10mM的乙酸鎂，7.5mM的乙酸鉀，10mM的2-巰基乙醇，6μg的放線菌素D(AMD)，5mM的膦酸烯醇丙酮酸，3單位/μl丙酮酸致活酶，0.5mM ATP，0.5mM CTP，0.5mM UTP，25μM GTP，5μCi[α-32P]GTP(Amersham，specific activity 410 Ci/mmol)，0.5單位/ml的RNasin，30μl已感染的細(xì)胞浸取物，及被檢測化合物(由0.5至100μM)。該反應(yīng)在37℃30分鐘后通過加入EDTA至最終濃度為10mM而使反應(yīng)終止。將等體積的TNE-SDS(50mM的三羥甲氨基甲烷-乙酸鹽PH7.6，0.1M乙酸鈉，1mM的EDTA及2%的SDS)加入其中以破裂其膜，然后用苯酚萃取RNA并用乙醇把它沉淀出來。
C.RNA的電泳將RNA樣品與含有溶在TBE(89mM的三羥甲氨基甲烷-HCl，89mM的硼酸，2.5mM的EDTA)中的7M尿素的緩沖液樣品，以及0.5%的溴酚藍(lán)相混合，然后電泳通過含有溶在TBE中的7M尿素的3%聚丙烯酰胺凝膠而進(jìn)行分離。該凝膠被固定在10%的乙酸中，將其干燥，并利用自動(dòng)射線照相法檢測射線標(biāo)記帶。
結(jié)果進(jìn)行試驗(yàn)的化合物同時(shí)抑制DEN-2和KUNRFRNA的合成，提高藥物濃度則降低了所檢測的RI的量，抑制濃度見于表I。
參考文獻(xiàn)BQULTON，R.W.ANDWESTAWAY，E.G.(1972).
ComparisonsofTogavirusesSindbisvirus(GroupA)andKunjinvirus(GroupB).Virology49，283-289.
CHU，P.W.G.ANDWESTAWAY，E.G.(1985).
ReplicationstrategyofKunjinvirusevidenceforrecycling，roleofthereplicativeformRNAastemplateinsemiconservativeandasymmetricreplication.Virology140，68-79.
CHU，P.W.G.ANDWESTAWAY，E.G.(1987).
CharacterizationofKunjinvirusRNA-dependentRNApolymerasereinitiationofsynthesisinvitro.Virology157，330-337.
GRUN，J.B.ANDBRINTON，M.A.(1986).
CharacterisationofWestNilevirusRNA-dependentRNApolymeraseandcellularadenylylanduridylyltransferasesincell-freeextracts.JournalofVirology60，1113-1124.
SABIN，A.B.ANDSCHLESINGER，R.W.(1945).
Productionofimmunitytodenguewithvirusmodifiedbypropagationinmice.Science101，640-642.
實(shí)施例3片劑配制物下列的配制物A可通過使用Povidone溶液將組分進(jìn)行濕潤成粒，然后加入硬脂酸鎂并壓制而制成。
配制物Amg/片(a)活性組分250250(b)乳糖B.P.21026(c)PovidoneB.P.159(d)乙醇酸淀粉鈉2012(e)硬脂酸鎂53500300下列的配制物B可通過將混合組分直接壓制而制備配制物Bmg/膠囊活性組分250預(yù)膠凝化的NF15150400配制物C(控釋配制物)該配制物可以通過用Povidone溶液將組分(如下)進(jìn)行潤濕造粒，然后加入硬脂酸鎂并壓制而制備。
mg/片劑(a)活性組分500(b)羥丙基甲基纖維素(methocelK4MPremium)112(c)乳糖53(d)PovidoneB.P.C.28(e)硬脂酸鎂7700實(shí)施例4膠囊配制物配制物A膠囊配制物可以通過將上述實(shí)施例3中的配方B的組分進(jìn)行混合，并裝填到雙片式硬凝膠膠囊而制備配制物Bmg/膠囊(a)活性組分250(b)乳糖B.P.143(c)乙醇酸淀粉鈉25(d)硬脂酸鎂2420配制物C(控釋膠囊)下列的控釋膠囊配制物可以通過用擠出機(jī)將a、b、c組分進(jìn)行擠出，然后將擠出物制成粒并干燥而制備。然后，將已干燥的粒子用控釋膜(d)涂復(fù)，并填充到二片硬凝膠膠囊中。
mg/膠囊(a)活性組分250(b)微晶化纖維素125(c)乳糖B.P.125(d)乙基纖維素13513
實(shí)施例5注射用配制物配方活性組分0.200g鹽酸溶液0.1M調(diào)PH為5.0-7.0氫氧化鈉溶液0.1M調(diào)PH為5.0-7.0無菌水調(diào)至10ml可將該活性組分溶于大部分水(35°-40℃)中，并用適量鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)其PH值至5.0至7.0之間。然后可用水使每批達(dá)到其體積，通過無菌微孔過濾器過濾到無菌的10ml安瓿玻璃小瓶(Ⅰ型)中，并用無菌密封物進(jìn)行密封并徹底密封。
權(quán)利要求
1.一種為治療和預(yù)防與黃熱病病毒有聯(lián)系的感染的方法，其特征在于，它包括了對需要這種治療和預(yù)防的病人服一種或多種選自通式1至12的化合物，及其二聚物，異構(gòu)體，溶劑化物，或還原態(tài)化合物1.)An[YMXW11O39]其中X=BⅢ，PⅤ，SiⅣ，GeⅣ，ZnⅡ，CoⅡ，CoⅢ，F(xiàn)eⅢ，GaⅢ，TiⅣ，或ZrⅣ，M=MnⅡ，MnⅢ，F(xiàn)eⅡ，F(xiàn)eⅢ，CuⅡ，CoⅡ，CoⅢ，GaⅢ，NiⅡ，ZnⅡ，TiⅣ，ZrⅣ，AlⅢ，InⅢ，VⅣ，VⅤ，MoⅥ，PbⅡ，NbⅤ，Y=配位體2.)An[M(XW11O39)2]其中X=GaⅢ，PⅤ，SiⅣ，GeⅣ，orTiⅣ，M=LaⅢ，CeⅢ，CeⅣ，PrⅢ，SmⅢ，NdⅢ，EuⅢ，GdⅢ，TbⅢ，DyⅢ，HoⅢ，TmⅢ，或YbⅢ，3.)An[XM2W10O40]。其中X=PⅤ，SiⅣ，或VⅤ，M=TiⅣ，ZrⅣ，VⅤ，ZnⅡ，CoⅡ，F(xiàn)eⅡ，或FeⅢ。4.)An[XM3W9O40]其中X=PⅤ，F(xiàn)eⅢ，SiⅣ，或VⅤ。M=VⅤ，F(xiàn)eⅢ，NbⅤ，CrⅢ，ZrⅣ，或TiⅣ。5.)An[X2MW17O62]其中X=PⅤ。M=CoⅡ，CoⅢ，NiⅡ，ZnⅡ，MnⅡ，MnⅢ，F(xiàn)eⅢ，AlⅢ，GaⅢ，InⅢ，TiⅣ，ZrⅣ，VⅤ，MoⅥ，或η5-RC5H4Ti，其中R=有機(jī)基6.)An[M(X2W17O61)2]其中X=PⅤM=EuⅢ，CeⅢ，CeⅣ，SmⅢ，或其它穩(wěn)定的鑭系金屬離子7.)An[X2M3W15O62]其中X=PⅤ。M=VⅤ，TiⅣ，MoⅥ，或NbV8.)An[M4(H2O)y(XW9O34)2]其中X=PⅤ，F(xiàn)eⅢ，ZnⅡ，CoⅡ，M=MnⅡ，F(xiàn)eⅡ，CoⅡ，NiⅡ，CuⅡ，ZnⅡ，ZrO，[FeCu]1/2，[WZn3]1/4，[WZnMnⅡ2]1/4，[WZnMnⅢ2]1/4，[WZnⅡ3]1/4，[WMnⅢ3]1/4，[WFeⅡ3]1/4，[WNiⅡ3]1/4，[WCuⅡ3]1/4，[WZnVⅣ2]1/4，[WZnⅡFeⅡ2]1/4，[WZnⅡCoⅡ2]1/4，WNi3Ⅱ，[WZnⅡNiⅡ2]1/4，[WZnⅡVⅣ2]1/4，[WZnⅡPdⅡ2]1/4，[WCo3Ⅱ]1/4，[WCoⅡMnⅡ2]1/4，[WCoⅡFeⅢ2]1/4，[WCoⅡNiⅡ2]1/4，或[WCoⅡZnⅡ2]1/4.y是1-69.)An[(FeOA)4(PW9O34)2]10.)An[Ma(XW9O34)2]其中X-PⅤ,或SiⅣ。如a=1or2，M=WO2如a=3，M=Zr(OH)，CeO，Cu，Cu(NO3)1/3，Cu(NO2)1/3，WO2，ZnⅡ，MnⅡ，MnⅢ，F(xiàn)eⅡ，F(xiàn)eⅢ，NiⅡ，CoⅡ，[Fe2(WO2)]1/3，[FeCo(WO2)]1/3，[CoⅡCuⅡWO2]1/3，[CuⅡ2CoⅡ]1/3，[CuⅡ2CoⅡNO3]1/3，[Zn2(WO2)]1/3，[Ni2(WO2)]1/3，[Co2(WO2)]1/3，或[η-C5H5TiⅣ(OH2)]。11.)An[Co9(OH)`3(H2O)6(HPO4)2(PW9O34)3]12.)An[M4(H2O)2(X2W15O56)2]其中X=PⅤM=MnⅡ，F(xiàn)eⅡ，CoⅡ，NiⅡ，CuⅡ，或ZnⅡ，并且，在上述每種通式中，A是陽離子，n是使分子電中性所必須的這種陽離子的數(shù)目，或它們的藥物上可接受的衍生物。
2.一種如權(quán)利要求1的方法，其特征在于，A是質(zhì)子、堿金屬、堿土金屬或銨陽離子，或通式為R4-mHmN+的烷基銨陽離子，式中的R是含1至6個(gè)碳原子的烷基鏈，而m是0、1、2或3。
3.一種如權(quán)利要求1或2的方法，其特征在于，該化合物以藥物組合物來服用，而此組合物包括該化合物及藥物上可接受的載體或稀釋劑。
4.如權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所定義的化合物在制造用于治療和預(yù)防與黃熱病病毒有關(guān)的感染的藥物方面的用途。
5.一種用于治療或預(yù)防與黃熱病病毒有關(guān)的感染藥物組合物，其特征在于它包含如權(quán)利要求1所定義的化合物以及藥物上可接受的載體或稀釋劑。
全文摘要
含有雜多鎢酸鹽類及其藥物上可以接受的衍生物的藥物組合物，這類化合物或組合物在治療和預(yù)防病毒感染上的應(yīng)用，該病毒是黃熱病病毒科確定的或者可能的一員。
文檔編號A61K38/22GK1082892SQ93106560
公開日1994年3月2日 申請日期1993年5月1日 優(yōu)先權(quán)日1992年5月1日
發(fā)明者H·韋高爾德, A·I·巴塞洛米厄斯, G·霍蘭, S·M·馬庫斯喬, P·J·賴特 申請人:聯(lián)邦科學(xué)和工業(yè)研究組織