專利名稱：一種從?？浦参镏刑崛“邹继J醇的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及白藜蘆醇的提取方法，具體涉及一種從桑科植物中提取白藜戸醇的方法。
背景技術：
白藜蘆醇作為一種天然多酚類化合物，顯示出多種生物活性，是一種天然的具有抗腫瘤、 抗心血管疾病、抗突變、抗菌、抗炎、抗氧化、誘導細胞凋亡及雌激素調(diào)節(jié)等功能的物質(zhì)， 被廣泛的應用于醫(yī)藥保健等領域。
白藜蘆醇目前主要通過從某些中藥材，如虎杖中提取。目前從虎杖中提取白藜蘆醇，多 數(shù)采用有機溶劑，如丙酮、乙酸乙酯等提取，用硅膠純化，再通過重結(jié)晶等方法，以此獲得 純度較高的白藜蘆醇產(chǎn)品。有的方法還添加酶制劑和堿性試劑。但是這些方法工藝復雜、周 期長，過程中需添加多種化學和生物試劑，工序過多，增加了生產(chǎn)成本和對設備的占用率。
因此，挖掘其它生物資源并研究其提取工藝具有重要意義。研究發(fā)現(xiàn)，白藜蘆醇在桑資 源中也有存在。我國是桑資源比較豐富的國家，因此從?？浦参镏刑崛“邹紤醮迹瑥馁Y源利 用角度和經(jīng)濟方面都具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的問題就是在于克服現(xiàn)有技術中的不足，提供一種從?？浦参镏刑崛“?藜蘆醇的方法。
為實現(xiàn)發(fā)明目的，本發(fā)明提供的技術方案趙括以下步驟-
(1) 原料選取選擇含有白藜蘆醇的?？浦参餅樘崛≡希?br> (2) 破碎將原料用機械破碎；
(3) 提取將破碎后的原料加入15 25 Kg/L倍的乙醇溶劑，在微沸條件下提取60 120分鐘后過濾，取濾液為提取液；
(4) 純化將提取液上極性大孔吸附樹脂層析柱吸附，用乙醇溶劑洗脫后收集洗脫液， 然后迸行真空濃縮、干燥，得到白藜蘆醇產(chǎn)品。
作為一種改進，所述步驟(4)包括利用極性大孔吸附樹脂進行兩次吸附和洗脫的過程-第一次吸附后的洗脫液再上第二種極性大孔吸附樹脂吸附，第二次的洗脫液進行真空濃縮、干燥，得到白藜蘆醇產(chǎn)品；兩種大孔吸附樹脂中，第一種大孔吸附樹脂為弱極性或非極性的 樹脂，第二種大孔吸附樹脂為中極性或極性樹脂。通過該步驟，可以獲得純度達到92%以上 的白藜蘆醇產(chǎn)品。
作為一種改進，所述步驟(4)包括利用極性大孔吸附樹脂進行兩次吸附和洗脫的過程 第一次吸附后的洗脫液再上第二種極性大孔吸附樹脂吸附，第二次的洗脫液進行濃縮和低溫 放置結(jié)晶，得到白藜蘆醇結(jié)晶產(chǎn)品；兩種大孔吸附樹脂中，第一種大孔吸附樹脂為弱極性或 非極性的樹脂，第二種大孔吸附樹脂為中極性或極性樹脂。通過該步驟，可得到純度達98% 以上的白藜蘆醇結(jié)晶產(chǎn)品。
作為一種改進，作為提取原料的桑科植物為桑枝皮、桑葉、桑果汁或桑果皮中的任意一種。
作為一種改進，用于原料破碎的機械是錘式粉碎或片式破碎機。 作為一種改進，所述乙醇溶劑是乙醇的水溶液，其濃度為60 80%。 作為一種改進，所述濃縮的方法是加溫常壓濃縮或加溫真空濃縮。 作為一種改進，所述干燥的方法是加溫干燥、加溫真空干燥、冷凍干燥或自然干燥中的 一種。
作為一種改進，所述結(jié)晶的方法是室溫結(jié)晶或低溫結(jié)晶。 本發(fā)明的有益效果在于-
本方法制備過程中使用的化學試劑單純，僅僅是乙醇；因為提取過程中使用的材料也 很簡單，因此避免了因使用多種化學試劑可能帶來的風險。
如采用兩種大孔吸附樹脂聯(lián)用的方法，可以大大減少工藝過程的環(huán)節(jié)，操作簡單且便 于控制。如要進一步提高樣品的白藜蘆醇含量，可以通過適當?shù)臐饪s和放置，便可以獲得含 量達到9鄉(xiāng)的白藜戸醇結(jié)晶產(chǎn)品。
具體實施方式
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大孔樹脂(macroporous resin)又稱全多孔樹脂，聚合物吸附劑，它是一類以吸附為 特點，對有機物具有濃縮、分離作用的高分子聚合物。大孔樹脂是由聚合單體和交聯(lián)劑、致 孔劑、分散劑等添加劑經(jīng)聚合反應制備而成。聚合物形成后，致孔劑被除去，在樹脂中留下 了大大小小、形狀各異、互相貫通的孔穴。因此大孔樹脂在干燥狀態(tài)下其內(nèi)部具有較高的孔 隙率，且孔徑較大，在100-1000nm之間，故稱為大孔吸附樹脂。大孔吸附樹脂按其極性大 小和所選用的單體分子結(jié)構(gòu)不同，可分為非極性、中極性和極性三類。 一般大孔吸附樹脂吸 附符合以下規(guī)律非極性物質(zhì)在極性介質(zhì)(水)內(nèi)被非極性吸附劑吸附，極性物質(zhì)在非極性 介質(zhì)中被極性吸附劑吸附，帶強極性基團的吸附劑在非極性溶劑里能很好的吸附極性化合物。
大孔吸附樹脂為吸附和篩選原理相結(jié)合的分離材料。它的吸附性是由于范德華引力或 生成氫鍵的結(jié)果。篩選原理是由于其本身多孔性結(jié)構(gòu)所決定。由于吸附和篩選原理，有機化 合物根據(jù)吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附脂上經(jīng)一定的溶劑洗脫而分開。這使得 有機化合物尤其是水溶性化合物的提純得以大大簡化。
白藜蘆醇含有3個羥基，是一種多酚類化合物，具有較強的極性，它易溶于極性強的 溶劑，它在濃度為60 80y。的乙醇溶液中有較大的溶解度，因此，用60 80%的乙醇作為溶 劑可以最大限度提取?？浦参镌现械陌邹继J醇。
本方法選用極性大孔吸附樹脂，有利于吸附極性比較強的白藜蘆醇，然后使用同樣極 性較強的乙醇容易作為洗脫劑，有利于白藜蘆醇的洗脫。本方法通過梯度濃度洗脫法，收集 60%和80%乙醇濃度的洗脫液，可以獲得含量達到50%，為了獲得更高濃度的白藜盧醇，本方 法采用了2種樹脂聯(lián)用的方法，即在一種大孔吸附樹脂后，串聯(lián)了另一種大孔吸附樹脂，通 過這2種大孔吸附樹脂的純化，即刻獲得含量不低于92%的白藜蘆醇樣品。 實例l:
取1000g干桑枝皮，用機械切碎成1X0.5ci^碎片，置于不銹鋼提取罐中，加入80%乙 醇水溶液15L，加溫至微沸，保持微沸小攪拌提取lh。提取完成后，用200目濾布過濾，濾 液適當濃縮后，用大孔吸附樹脂(D101或AB-8等)柱層析純化，待溶液全部上柱完畢后， 保持靜置20到30min，然后用洗脫劑(60%乙醇水溶液)洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥，便 可獲得含量為50%的白藜蘆醇樣品。
實例2:
取1000g干桑葉，用粉碎機破碎成1Xlcm2碎片，置于不銹鋼提取罐中，加入60%乙醇 水溶液20L，加溫至微沸，保持微沸小攪拌提取l,5h。提取完成后，用200目濾布過濾，濾 液適當濃縮后，先過第l根大孔吸附樹脂(AB-8或D101等)層析柱，待溶液全部上柱完畢 后，保持靜置20到30min，然后用洗脫劑(7Q。/。乙醇水溶液)洗脫，收集洗脫液，該洗脫液 過第2根大孔吸附樹脂(DM130或HPD-500等)層析柱，待溶液全部上柱完畢后，保持靜置 20到30min，然后用洗脫劑(70%乙醇水溶液)洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥后，便可獲得 較高純度的白藜蘆醇，經(jīng)HPLC測定，其含量達92%。
實例3:
取1000g干桑果皮，置于不銹鋼提取罐中，加入75%乙醇水溶液25L，加溫至微沸，保 持微沸小攪拌提取2h。提取完成后，用200目濾布過濾，濾液適當濃縮后，先過第1根大 孔吸附樹脂(AB-8或D101等)層析柱，待溶液全部上柱完畢后，保持靜置20到30rain，然 后用洗脫劑(80%乙醇水溶液)洗脫，收集洗脫液，該洗脫液過第2根大孔吸附樹脂(DM130或HPD-500等)層析柱，待溶液全部上柱完畢后，保持靜置20到30min，然后用洗脫劑(80% 乙醇水溶液)洗脫，收集洗脫液，濃縮后，放置過夜，便可獲得白藜蘆醇結(jié)晶，經(jīng)HPLC檢 測，其白藜蘆醇含量為98%。
權利要求
1、一種從桑科植物中提取白藜蘆醇的方法，包括以下步驟(1)原料選取選擇含有白藜蘆醇的?？浦参餅樘崛≡希?2)破碎將原料用機械破碎；(3)提取將破碎后的原料加入15～25 Kg/L倍的乙醇溶劑，在微沸條件下提取60～120分鐘后過濾，取濾液為提取液；(4)純化將提取液上極性大孔吸附樹脂層析柱吸附，用乙醇溶劑洗脫后收集洗脫液，然后進行真空濃縮、干燥，得到白藜蘆醇產(chǎn)品。
2、 根據(jù)權利要求1所述的從?？浦参镏刑崛“邹继J醇的方法，其特征在于，所述步驟(4) 包括利用極性大孔吸附樹脂進行兩次吸附和洗脫的過程第一次吸附后的洗脫液再上第二種極 性大孔吸附樹脂吸附，第二次的洗脫液進行真空濃縮、干燥，得到白藜蘆醇產(chǎn)品；兩種大孔吸 附樹脂中，第一種大孔吸附樹脂為弱極性或非極性的樹脂，第二種大孔吸附樹脂為中極性或極 性樹脂。
3、 根據(jù)權利要求1所述的從桑科植物中提取白藜蘆醇的方法，其特征在于，所述步驟(4) 包括利用極性大孔吸附樹脂進行兩次吸附和洗脫的過程第一次吸附后的洗脫液再上第二種極 性大孔吸附樹脂吸附，第二次的洗脫液進行濃縮和低溫放置結(jié)晶，得到白藜蘆醇結(jié)晶產(chǎn)品；兩 種大孔吸附樹脂中，第一種大孔吸附樹脂為弱極性或非極性的樹脂，第二種大孔吸附樹脂為中 極性或極性樹脂。
4、 根據(jù)權利要求1至3所述的任意一種從?？浦参镏刑崛“邹继J醇的方法，其特征在于， 作為提取原料的?？浦参餅樯Ｖζぁ⑸Ｈ~、桑果汁或桑果皮中的任意一種。
5、 根據(jù)權利要求1至3所述的任意一種從?？浦参镏刑崛“邹继J醇的方法，其特征在于， 用于原料破碎的機械是錘式粉碎或片式破碎機。
6、 根據(jù)權利要求1至3所述的任意一種從?？浦参镏刑崛“邹继J醇的方法，其特征在于， 所述乙醇溶劑是乙醇水溶液，其濃度為60 80%。
7、 根據(jù)權利要求1至3所述的任意一種從?？浦参镏刑崛“邹继J醇的方法，其特征在于， 所述濃縮的方法是加溫常壓濃縮或加溫真空濃縮。
8、 根據(jù)權利要求1至3所述的任意一種從?？浦参镏刑崛“邹继J醇的方法，其特征在于， 所述干燥的方法是加溫干燥、加溫真空干燥、冷凍千燥或自然干燥中的一種。
9、 根據(jù)權利要求3所述的從?？浦参镏刑崛“邹继J醇的方法，其特征在于，所述結(jié)晶的 方法是室溫結(jié)晶或低溫結(jié)晶。
全文摘要
本發(fā)明涉及白藜蘆醇的提取方法，旨在提供一種從?？浦参镏刑崛“邹继J醇的方法。包括原料選取、破碎、乙醇溶劑提取和純化，純化是將提取液上極性大孔吸附樹脂層析柱吸附，用乙醇溶劑洗脫后收集洗脫液，然后進行真空濃縮、干燥，得到白藜蘆醇產(chǎn)品。本方法制備過程中使用的化學試劑單純，僅僅是乙醇；因為提取過程中使用的材料也很簡單，因此避免了因使用多種化學試劑可能帶來的風險。如采用兩種大孔吸附樹脂聯(lián)用的方法，可以大大減少工藝過程的環(huán)節(jié)，操作簡單且便于控制。如要進一步提高樣品的白藜蘆醇含量，可以通過適當?shù)臐饪s和放置，便可以獲得含量達到98％的白藜蘆醇結(jié)晶產(chǎn)品。
文檔編號A61P35/00GK101602652SQ20091010052
公開日2009年12月16日 申請日期2009年7月9日 優(yōu)先權日2009年7月9日
發(fā)明者占鵬飛, 朱祥瑞 申請人:浙江大學