專利名稱：一種治療腎病的藥物及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于祖國醫(yī)學技術領域，特別涉及一種治療腎病的藥物及其制備方法。
背景技術：
目前臨床上有85%的腎病患者是因細菌、病毒感染，形成的免疫復合物堵塞導致的腎病，進而導致血尿、蛋白尿、水腫、高血壓等多種臨床表現(xiàn)，如腎炎以及腎病綜 合癥。目前臨床治療腎炎、腎病綜合癥，多采用免疫抑制劑，通過抑制免疫反應達到控 制臨床癥狀的作用。但免疫抑制劑會降低患者免疫力，增加感染機會，增加免疫復合物 的形成，使患者病情反復，加重，不僅不能從根本上解決患者痛苦，最終還會發(fā)展到腎 功能衰竭。尿毒癥，實際上是指人體不能通過腎臟產生尿液，將體內代謝產生的廢物和過 多的水分排出體外，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫鈉，酸堿平 衡失常等，還有腎臟的內分泌功能等，腎臟的衰竭隨著病情進展代謝失常引起的毒害。 患尿毒癥的主要原因是腎病，隨著腎病患者腎功能的衰竭，患者的體力也會隨著衰退， 所有腎病最終都會演變成尿毒癥，尿毒癥的治療目前主要是透析，但是這種方法副作用 很大，一般在做過透析后，腎臟萎縮，只能靠換腎來存活了。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種治療腎病的藥物，以克服現(xiàn)有腎病治療時副作用 大，治療效果甚微的缺陷。本發(fā)明采用的技術方案如下一種治療腎病的藥物，所述腎病為急慢性腎炎、腎病綜合癥或早期尿毒癥，所 述中藥由下列質量份的原料藥制成黃芪10-60份當歸6-15份天麻6_15份車前子3_6份香菇6_15份冬蟲夏草 0.5-3 份。本發(fā)明原料藥中的黃芪，性甘、溫，歸肺、脾經；補氣固表，利尿托毒，排 膿，斂瘡生肌。當歸，性甘、辛、溫，歸肝、心、脾經；補血活血，潤腸通便。天麻， 性甘、平，歸肝經；平肝息風止痙。車前子，性甘，微寒；歸肝、腎、肺、小腸經； 清熱利尿，滲濕通淋，明目，祛痰。香菇，味甘，性平；味道鮮美，香氣沁人，營養(yǎng)豐 富，素有“植物皇后”美譽；富含維生素B群、鐵、鉀、維生素D原(經日曬后轉成維 生素D)，主要作為營養(yǎng)物質以供腎細胞吸收。冬蟲夏草，性甘，平歸肺、腎經；補肺 益腎，止血，化痰。本發(fā)明各原料藥配伍后可以提高免疫力，增強免疫反應，激活補體，促進免疫 復合物的分解，擴張腎臟血管，促進腎細胞吸收營養(yǎng)物質達到增生的目的，從而達到治 療腎炎、腎病綜合癥、早期尿毒癥的目的，標本兼治。但是本發(fā)明藥物對因紅斑狼瘡引 起的免疫紊亂性腎病無效。
本發(fā)明還提供了一種制備所述治療腎病的藥物的方法，可如下進行按照所述 質量比例取各原料藥，混合后加入原料藥質量總和12-18倍的水于75-95°C的條件下提取 3-6h；提取液固液分離后將液體部分濃縮；利用Sevag法脫去濃縮液中的游離蛋白，將 脫蛋白后的清液進行醇沉，收集沉淀物后洗滌、干燥即得所述治療腎病的中藥。進一步，原料藥在水提前先粉碎至過40-60目篩。濃縮的條件優(yōu)選如下真空度為0.08 O.lMPa，溫度為80_90°C。脫蛋白時加入Sevag試劑的量以能脫去其中的蛋白量為準，以濃縮4-5h計的 話，優(yōu)選加入濃縮液體積的1/4-1/2。加入Sevag試劑后靜置30-60min，收集下層水相后以3000r/min的轉速離心
IOmin,收集上層清液。醇沉時加入乙醇沉淀，直至沉淀液中乙醇體積濃度達到65-75%時止。醇沉的沉淀物在50_70°C干燥20_24h。得到的醇沉物與藥用輔料制成片劑，獲得的成品為深棕色片劑，純度約為 90%。制備方法并不僅限于如上進行，僅將原料藥研末混合或者按照其他常規(guī)方法制 備也是可行的。本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術，有以下優(yōu)點本發(fā)明藥物通過提高免疫力，激活補體來分解免疫復合物，擴張腎臟血管，營 養(yǎng)腎細胞，降低蛋白尿，血尿，利尿，消腫通便排毒，達到了標本兼治的目的，無副作用。


圖1 (a)模型對照組免疫復合物C3熒光圖；圖1 (b)地塞米松組免疫復合物C3熒光圖；圖1 (c)本發(fā)明藥物小劑量組免疫復合物C3熒光圖；圖1 (d)本發(fā)明藥物大劑量組免疫復合物C3熒光圖。圖2 (a)模型對照組免疫復合物IgG熒光圖；圖2 (b)地塞米松組免疫復合物IgG熒光圖；圖2 (C)本發(fā)明藥物小劑量組免疫復合物IgG熒光圖；圖2(d)本發(fā)明藥物大劑量組免疫復合物IgG熒光圖。
具體實施例方式以下以具體實施例來說明本發(fā)明的技術方案，但本發(fā)明的保護范圍不限于此實施例1一種治療腎病的藥物，其原料藥質量份組成如下黃芪10份當歸6份天麻6份車前子3份香菇6份 冬蟲夏草0.5份。制備步驟如下①預處理將藥材烘干，進行粉碎，然后過40目篩網，收集過篩網的粉末，置 于提取罐中提取。
②提取向提取罐中加入藥材質量15倍的蒸餾水，在攪拌下向提取罐夾層通入 蒸汽，使物料升溫至85°C，攪拌浸提5h。提取完成后進行離心分離，收集上層清液，進 行濃縮處理。 ③濃縮將收集的離心上層清液置于濃縮機中，控制真空度為O.OSMpa，濃縮 溫度為80°C，濃縮4h。④配制Sevag試劑取5體積份氯仿和1體積份正丁醇，混合均勻即為Sevag試
劑，備用。⑤脫游離蛋白將獲得的濃縮液置于萃取器中，加入其體積1/3的Sevag試劑， 攪拌均勻后，靜置分層40min。收集下層水相，置于離心機中，以3000r/min轉速離心 IOmin,收集上層離心清液，進行沉淀處理。⑥沉淀、分離將收集的上層離心清液，置于沉淀罐中，在攪拌下加入乙醇沉 淀，直至沉淀液中乙醇濃度達到70%時止。靜置過夜，次日虹吸上層乙醇溶液，泵入真 空濃縮機回收乙醇，下層沉淀進行離心分離，離心速度為3000r/min，離心lOmin，收集 下層沉淀，用體積濃度為70%的乙醇反復洗滌兩次，同法離心分離，收集沉淀備用。⑦干燥將獲得的沉淀置于真空干燥器中，控制干燥溫度為60°C干燥24h，獲 得成品；將其進行粉碎，獲得粉末產品，將粉末加入輔料，壓片烘干獲得片劑。片劑的 含量為90%。實施例2一種治療腎病的藥物，其原料藥質量份組成如下黃芪35份當歸10份天麻11份車前子4份香菇10份冬蟲夏草2份。制備步驟如下①預處理將藥材烘干，進行粉碎，然后過40目篩網，收集過篩網的粉末，置 于提取罐中提取。②提取向提取罐中加入藥材質量15倍的蒸餾水，在攪拌下向提取罐夾層通入 蒸汽，使物料升溫至85°C，攪拌浸提5h。提取完成后進行離心分離，收集上層清液，進 行濃縮處理。③濃縮將收集的離心上層清液置于濃縮機中，控制真空度為0.09Mpa，濃縮 溫度為90°C，濃縮4h。④配制Sevag試劑取5體積份氯仿和1體積份正丁醇，混合均勻即為Sevag試
劑，備用。⑤脫游離蛋白將獲得的濃縮液置于萃取器中，加入其體積1/3的Sevag試劑， 攪拌均勻后，靜置分層40min。收集下層水相，置于離心機中，以3000r/min轉速離心 IOmin,收集上層離心清液，進行沉淀處理。⑥沉淀、分離將收集的上層離心清液，置于沉淀罐中，在攪拌下加入乙醇沉 淀，直至沉淀液中乙醇濃度達到70%時止。靜置過夜，次日虹吸上層乙醇溶液，泵入真 空濃縮機回收乙醇，下層沉淀進行離心分離，離心速度為3000r/min，離心lOmin，收集 下層沉淀，用體積濃度為70%的乙醇反復洗滌兩次，同法離心分離，收集沉淀備用。⑦干燥將獲得的沉淀置于真空干燥器中，控制干燥溫度為60°C干燥24h，獲 得成品；將其進行粉碎，獲得粉末產品，將粉末加入輔料，壓片烘干獲得片劑。片劑的含量為90%。實施例3一種治療腎病的中藥，其原料藥質量份組成如下黃芪60份當歸15份天麻15份車前子6份香菇15份冬蟲夏草3份。制備步驟如下①預處理將藥材烘干，進行粉碎，然后過40目篩網，收集過篩網的粉末，置 于提取罐中提取。②提取向提取罐中加入藥材質量15倍的蒸餾水，在攪拌下向提取罐夾層通入 蒸汽，使物料升溫個85°C，攪拌浸提5h。提取完成后進行離心分離，收集上層清液，進 行濃縮處理。③濃縮將收集的離心上層清液置于濃縮機中，控制真空度為O.lOMpa，濃縮 溫度為85°C，濃縮5h。④配制Sevag試劑取5體積份氯仿和1體積份正丁醇，混合均勻即為Sevag試
劑，備用。⑤脫游離蛋白將獲得的濃縮液置于萃取器中，加入其體積1/3的Sevag試劑， 攪拌均勻后，靜置分層40min。收集下層水相，置于離心機中，以3000r/min轉速離心 IOmin,收集上層離心清液，進行沉淀處理。⑥沉淀、分離將收集的上層離心清液，置于沉淀罐中，在攪拌下加入乙醇沉 淀，直至沉淀液中乙醇濃度達到70%時止。靜置過夜，次日虹吸上層乙醇溶液，泵入真 空濃縮機回收乙醇，下層沉淀進行離心分離，離心速度為3000r/min，離心lOmin，收集 下層沉淀，用體積濃度為70%的乙醇反復洗滌兩次，同法離心分離，收集沉淀備用。⑦干燥將獲得的沉淀置于真空干燥器中，控制干燥溫度為60°C干燥24h，獲 得成品；將其進行粉碎，獲得粉末產品，將粉末加入輔料，壓片烘干獲得片劑。片劑的 含量為90%。藥理學實驗以下為本發(fā)明治療腎病的藥物治療家兔C-BSA腎炎模型的實驗。材料與方法1試驗材料1.1 動物動物品種日本大耳白家兔40只，雌雄各半動物級別普通級，體重2.0_2.5kg飼養(yǎng)條件普通級動物房，每籠一只，溫度20士3°C，濕度40%-70%，光照時間12小時。自由飲食。在實驗室觀察2天，未見異常。1.2 試齊[J牛血清白蛋白(BSA)，Sigma公司。碳化二亞胺(EDC)，Sigma公司。無水乙二胺(EDA)，AR.天津市化學試劑一廠。透析袋中國科學院血液研究所。FITc-IgG抗體碧云天生物技術研究所提供。
FITC-C3抗體中山醫(yī)科大學腎病研究所提供。1.3受試藥物本發(fā)明中藥片劑，規(guī)格0.5*24片，成人用量4片/次，3次/ 日，片劑純度90%。2實驗方法2.1C-BSA的制備及驗證制備取700ml乙二胺(一水)，加上5L雙蒸水，再加6mol/L的鹽酸3.5L， 調pH為4.75攪拌均勻，冷卻至25°C。攪拌中加入300mlBSA(溶60g BSA)水溶液，然 后加24g碳化二亞胺(EDC)，25°C攪拌反應6小時，再加入4mol/L (pH4.75)的醋酸緩沖 溶液300ml，終止反應后，加入粉末硫酸銨使其飽和度達到0.7，攪拌均勻，靜置8小時 以上，離心收集沉淀，溶于500ml水，溶液對水透析除鹽48小時，離心收集上清液，冷凍干燥獲得粉劑成品。取上述粉劑，加pH7.4的磷酸鹽緩沖液至所需濃度，此即陽離子 化牛血清白蛋白(C-BSA，等電點從4.4提高到8.6，在pH7.4時，帶陽離子)，臨用前配 制。2.2腎炎模型的制備預免疫用pH7.4的磷酸鹽緩沖液(內含陽離子化BSAl.Omg+大腸桿菌內毒 索lyg)，經耳緣靜脈緩慢注射給予每只動物，每天ι次，連續(xù)7天。一周后，動物經耳 緣靜脈注射陽離子化BSA IOmg/只，每日1次，6次/周，連續(xù)注射4周。第6周注射 劑量加倍，共注射6次。末次注射后24小時取尿進行尿蛋白定性和定量檢測，取血測血 肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)。2.3動物分組及給藥劑量根據尿蛋白、血肌酐、血尿素氮水平，將動物隨機分 成4組，每組10只，分別為模型對照組，藥物大、小劑量組，陽性對照組，另取同批購 入的家兔8只作為正常對照組。給藥劑量見下(1)模型對照組10只等容積的NS，灌胃給藥(2)大劑量組10只1.2g/kg，灌胃給藥(3)小劑量組10只0.3g/kg，灌胃給藥(4)陽性對照組10只，地塞米松O.lmg/kg，灌胃給藥(5)陰性對照組8只，等容積的NS，灌胃給藥各組按以上劑量灌胃給藥，給藥體積5ml/kg，每日1次，連續(xù)給藥5周。2.4主要檢測指標2.4.1生化指標24h尿蛋白定量、血肌酐、血尿素氮測定造模前、造模后及實 驗結束后各測定1次。每次均將兔置代謝籠中收集24h尿，耳中動脈取血測定血肌酐 (Cr)、血尿素氮(BUN)。2.4.2免疫學指標血清循環(huán)免疫復合物(CIC)的測定，測定時間及測定次數(shù)同 2.4.1。2.4.3病理學指標末次給藥后24h，稱量家兔體重及腎濕重，將部分腎臟進行固 定，以供常規(guī)病理學檢查；部分腎臟置液氮中保存，進行相關檢查。2.4.4數(shù)據處理數(shù)據用χ士s表示，用SPSS10.0進行統(tǒng)計，以ρ < 0.05為有顯著性。3實驗結果
3.1藥物對模型兔尿蛋白含量變化的影響造模后各組家兔尿蛋白均明顯升高，說明C-BSA腎炎模型成功。給藥后模型對 照尿蛋白從300.2士26.4變?yōu)?81.9士 19.2 (mg/24h)，無明顯變化；藥物大、小利量組尿 蛋白分別從 297.6 士 24.1、285.9 士 17.5 (mg/24h)降到 89.7 士 10.9、169.8 士 18.4 (mg/24h)， 地塞米松組尿蛋白從289.5士21.3降低為146.8士 15.6 (mg/24h)，詳見表1。表1藥物對實驗各組兔尿蛋白的影響(mg/24h)
權利要求
1.一種治療腎病的藥物，所述腎病為急慢性腎炎、腎病綜合癥或早期尿毒癥，其特 征在于，所述中藥由下列質量份的原料藥制成黃芪10-60份當歸6-15份天麻6-15份車前子3_6份香菇6_15份冬蟲夏草0.5-3份。
2.制備權利要求1所述治療腎病的藥物的方法，其特征在于，按照所述質量比例取各 原料藥，混合后加入原料藥質量總和12-18倍的水于75-95°C的條件下提取3-6h;提取液 固液分離后將液體部分濃縮；利用Sevag法脫去濃縮液中的游離蛋白，將脫蛋白后的清 液進行醇沉，收集沉淀物后洗滌、干燥即得所述治療腎病的藥物。
3.如權利要求2所述的制備治療腎病的藥物的方法，其特征在于，原料藥在水提前先 粉碎至過40-60目篩。
4.如權利要求2所述的制備治療腎病的藥物的方法，其特征在于，濃縮的條件如下 真空度為0.08 O.lMPa,溫度為80-90°C。
5.如權利要求4所述的制備治療腎病的藥物的方法，其特征在于，脫蛋白時加入 Sevag試劑的量為濃縮液體積的1/4-1/2。
6.如權利要求5所述的制備治療腎病的藥物的方法，其特征在于，加入Sevag試劑后 靜置30-60min，收集下層水相后以3000r/min的轉速離心lOmin，收集上層清液。
7.如權利要求6所述的制備治療腎病的藥物的方法，其特征在于，醇沉時加入乙醇沉 淀，直至沉淀液中乙醇體積濃度達到65-75%時止。
8.如權利要求7所述的制備治療腎病的藥物的方法，其特征在于，醇沉的沉淀物在 50-70°C干燥 20-24h。
全文摘要
本發(fā)明屬于相國醫(yī)學技術領域，特別涉及一種治療腎病的藥物及其制備方法。所述腎病為急慢性腎炎、腎病綜合癥或早期尿毒癥，所述中藥由下列質量份的原料藥制成黃芪10-60份 當歸6-15份 天麻6-15份 車前子3-6份 香菇6-15份 冬蟲夏草0.5-3份。本發(fā)明藥物通過提高免疫力，激活補體來分解免疫復合物，擴張腎臟血管，營養(yǎng)腎細胞，降低蛋白尿，血尿，利尿，消腫通便排毒，達到了標本兼治的目的，無副作用。
文檔編號A61P13/12GK102018893SQ201010576879
公開日2011年4月20日 申請日期2010年12月7日 優(yōu)先權日2010年12月7日
發(fā)明者丁德政 申請人:丁德政