專利名稱：一種水蛭粉的仿生酶解制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種水蛭粉的制備方法。
背景技術(shù)：
水蛭為貴重藥材，一般的勻漿法、水煎煮、水煎醇沉等工藝的得膏率較低，其藥材利用率低，提取后的藥渣仍有較大活性；水蛭細(xì)粉直接口服，只有少部分經(jīng)胃腸道消化吸收，大部分以原型排出體外，大大浪費(fèi)藥材。水蛭水煎液及其醇溶部分含抗凝活性物質(zhì)，水煎液及其非醇溶部分含纖溶活性物質(zhì)。具有很好的藥用價值。但是現(xiàn)有的水蛭制品的各種制備方法均存在各種缺陷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供一種更有效的水蛭粉的仿生酶解制備方法，其得到的水蛭粉仿生酶解產(chǎn)物安全有效。一種水蛭粉的仿生酶解制備方法，包括以下步驟( I)水蛭活體冷凍干燥至含水量5%以下，粉碎成粉狀；(2)加入水均勻攪拌成漿狀，調(diào)節(jié)pH至I. O 3. 0，加入胃蛋白酶于35 45°C保溫酶解O. 5 4小時，再調(diào)節(jié)pH至8. O 8. 6，加入胰蛋白酶于45 50°C保溫酶解7. 5 8小時；(3)酶解產(chǎn)物噴霧干燥。本發(fā)明的制備方法，其中所述步驟(I)中冷凍干燥的溫度是-20 _25°C。本發(fā)明采用水蛭活體直接冷凍干燥得到粉體，保證水蛭體中的營養(yǎng)分子不會分解，保持活性。本發(fā)明的制備方法，其中所述步驟(2)中加水量為8 12倍量。此加水量有利于后續(xù)的酶解過程。本發(fā)明的制備方法，其中所述步驟(2)中胃蛋白酶的加入量為水蛭粉重量的I 2%。可以保證水蛭酶解產(chǎn)物中蛋白質(zhì)大分子的充分水解。本發(fā)明的制備方法，其中所述步驟(2)中胰蛋白酶的加入量為5000NFU 可以保證水蛭酶解產(chǎn)物中蛋白質(zhì)大分子的進(jìn)一步充分水解。本發(fā)明的制備方法，其中所述步驟(2)中加水后先加熱至80 100°C并保溫10 20分鐘后，再冷卻至所需溫度進(jìn)行酶解。此步驟為了使水蛭中的大分子蛋白質(zhì)受熱變性，破壞其空間結(jié)構(gòu)，從而利于后續(xù)過程中蛋白質(zhì)的水解，可使后續(xù)的酶解過程進(jìn)行得更充分。本發(fā)明的制備方法，其中所述步驟(3)中噴霧干燥的溫度是40 60°C。保證水蛭酶解產(chǎn)物中的小分子多肽的結(jié)構(gòu)和活性。本發(fā)明將水蛭活體冷凍干燥后磨粉勻漿，然后模擬人體消化過程，對其采用先以胃蛋白酶酶解、再以胰蛋白酶酶解的仿生酶解方法，將水蛭中的大分子蛋白質(zhì)酶解成水溶性的小分子肽，所得的酶解液同時具有抗凝及纖溶活性，而且較水煎液的活力更強(qiáng)，可更大程度提高生物利用度，降低毒副反應(yīng)發(fā)生率。
本發(fā)明的方法所得的水蛭酶解產(chǎn)物，將大分子的蛋白直接降解為小分子的肽，與人體經(jīng)自身胃腸道消化吸收的物質(zhì)相同，能直接吸收人血，生物利用度高，抗凝血、溶栓作用等生理活性更強(qiáng)。
具體實施例方式為進(jìn)一步說明本發(fā)明，結(jié)合以下實施例具體說明實施例I :一種水蛭粉的仿生酶解制備方法，包括以下步驟(I)養(yǎng)殖或購買的水蛭活體在_22°C條件下冷凍干燥至含水量5%以下，取500g，粉碎成粉狀；(2)加10倍量水勻漿，用檸檬酸或稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.0，加入水蛭粉重量2%的胃蛋白酶(酶活為I :3000)于40°C保溫酶解2. 5小時，再調(diào)節(jié)pH至8. O，加入胰蛋白酶，酶用量5000NFU · g-1，于50°C保溫酶解8小時;(3)加入適量糊精噴霧干燥，溫度40度左右，得成品。實施例2 一種水蛭粉的仿生酶解制備方法，包括以下步驟(I)養(yǎng)殖或購買的水蛭活體在_22°C條件下冷凍干燥至含水量5%以下，取500g，粉碎成粉狀；(2)加10倍量水勻漿，用檸檬酸或稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至I. 5，加入水蛭粉重量I. 5%的胃蛋白酶(酶活為I :3000)于45°C保溫酶解I小時，再調(diào)節(jié)pH至8. 5，加入胰蛋白酶，酶用量5000NFU · g-1，于50°C保溫酶解7. 5小時;(3)加入適量糊精噴霧干燥，溫度40度左右，得成品。本發(fā)明的制備方法制備得到的水蛭酶解產(chǎn)物，同時具有抗凝及纖溶活性，而且較水煎液的活力更強(qiáng)，可更大程度提高生物利用度，降低毒副反應(yīng)發(fā)生率。本發(fā)明分別測定了水蛭粉加水后得到的勻漿液、加水后煎煮得到的水煎煮液、加水后煎煮加乙醇沉淀的水煎醇沉液、以及勻漿后只加胃蛋白酶酶解的酶解液和只加胰蛋白酶酶解的酶解液、與本發(fā)明的仿生酶解方法酶解得到的酶解液的抗凝活性與溶纖活性，結(jié)果見下表表I抗凝活性、溶纖活性的測定結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種水蛭粉的仿生酶解制備方法，其特征在于包括以下步驟 (1)水蛭活體冷凍干燥至含水量5%以下，粉碎成粉狀； (2)加入水均勻攪拌成漿狀，調(diào)節(jié)pH至1.0 3.0，加入胃蛋白酶于35 45°C保溫酶解O. 5 4小時，再調(diào)節(jié)pH至8. O 8. 6，加入胰蛋白酶于45 50°C保溫酶解7. 5 8小時； (3)酶解產(chǎn)物噴霧干燥。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在干所述步驟(I)中冷凍干燥的溫度是-20 -25 °C。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中加水量為8 12倍量。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中胃蛋白酶的加入量為水蛭粉重量的I 2%。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中胰蛋白酶的加入量為5000NFU · gベ。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在干所述步驟(2)中加水后先加熱至80 100°C并保溫10 20分鐘后，再冷卻至所需溫度進(jìn)行酶解。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中噴霧干燥的溫度是40 60°C。
8.權(quán)利要求1-7任一項所述的制備方法制備得到的水蛭仿生酶解產(chǎn)物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種水蛭粉的仿生酶解制備方法，包括以下步驟(1)水蛭活體冷凍干燥至含水量5%以下，粉碎成粉狀；(2)加入水均勻攪拌成漿狀，調(diào)節(jié)pH至1.0～3.0，加入胃蛋白酶于35～45℃保溫酶解0.5～4小時，再調(diào)節(jié)pH至8.0～8.6，加入胰蛋白酶于45～50℃保溫酶解7.5～8小時；(3)酶解產(chǎn)物噴霧干燥。本發(fā)明將水蛭活體冷凍干燥后磨粉勻漿，然后模擬人體消化過程，對其采用先以胃蛋白酶酶解、再以胰蛋白酶酶解的仿生酶解方法，將水蛭中的大分子蛋白質(zhì)酶解成水溶性的小分子肽，所得的酶解液同時具有抗凝及纖溶活性，而且較水煎液的活力更強(qiáng)，可更大程度提高生物利用度，降低毒副反應(yīng)發(fā)生率。
文檔編號A61K35/62GK102836416SQ201210335010
公開日2012年12月26日 申請日期2012年9月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月11日
發(fā)明者梁志森, 梁文亮 申請人:鳳臺文亮置業(yè)有限公司