專利名稱：用于多種藥物抗性逆轉(zhuǎn)劑的二苯并[b,f][1,4]氧氮雜-11(10H)酮類的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及取代的二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
11(10H)酮類，它們對逆轉(zhuǎn)癌細(xì)胞對多種細(xì)胞毒藥物的多種藥物抗性是有用的。因此本發(fā)明化合物可用于對多種藥物有抗藥性的腫瘤的輔助化療。
用細(xì)胞毒藥物治療人體腫瘤是現(xiàn)代臨床癌癥治療中的重要部分。影響癌癥化療的主要障礙為腫瘤細(xì)胞對抗腫瘤藥物的抗性。在人體惡性腫瘤中的藥物抗性可來自多種機(jī)理，具有特別重要性的是癌細(xì)胞對帶有非相關(guān)結(jié)構(gòu)和功能的親脂性藥物的多種多樣基團(tuán)的交叉抗性，該現(xiàn)象稱為多種藥物抗性(MDR)。
在早期研究中測定所有MDR細(xì)胞，得出的共同特征為相對于敏感細(xì)胞穩(wěn)定態(tài)藥物在細(xì)胞內(nèi)的積累減少。后來發(fā)現(xiàn)此表現(xiàn)型常伴有原生質(zhì)膜糖蛋白(P-gp分子量為170KDa)的增多。在MDR中這種蛋白質(zhì)的含意是通過被克隆了的P-gp基因(MDR-1)轉(zhuǎn)染到敏感細(xì)胞中以授與藥物抗性的能力而得到確認(rèn)。參見
Grace Bradley，Peter F.Juranka & Victor Ling-Mechanisms of multidrug resistance，Bioch.Biophys.Acta，948，pp 87-128(1988);Jane A.Endicott & Victor Ling-The biochemistry of p-glycoprotein-mediated multidrug resistance，Ann.Rev.Biochem，58，pp 137-171(1989);James M.Ford & William N.Hait-Pharmacology of drugs that alter multidrug resistance in cancer，Pharmacological Reviews，42，pp 155-199(1990).
P-gp由兩個對稱的部分組成，每一部分有一個ATP結(jié)合區(qū)域。有證據(jù)表明它起到具有廣泛的底物特異性的能量依賴泵的功用。也已在某些正常人體組織中，如腎上腺，腎，結(jié)腸和胎盤，發(fā)現(xiàn)了相對高水平的P-gp。然而，其生理作用及其天然底物仍未弄清楚。P-gp可能是作為解毒機(jī)理將正常存在的毒素和異常生物排出。臨床實例調(diào)查業(yè)已發(fā)現(xiàn)，得自通常過分表達(dá)MDR-1信息的組織中的腫瘤，P-gp水平是提高了。此外，明顯的是，用某些藥物難以治療的血液惡性腫瘤與早期軟組織肉瘤的P-gp表達(dá)之間有直接的相關(guān)性，而它們在正常情況下并不表達(dá)P-gp。
參見Mace Rothenberg & Victor Ling-Multidrug ResistanceMolecular Biology and Clinical Relevance，J.Nat.Cancer Inst.，81，pp 907-910，(1989);Helen S.L.Chan，Paul S.Thorner，George Haddad and Victor Ling-Immunohistochemical Detection of P-glycoproteinPrognostic Correlation in Soft Tissue Sarcoma of Childhood，J.Clin.Oncol.，8，pp 689-704(1990).
這些發(fā)明有力地支持了P-gp在固有的及后天性的MDR中所起的潛在臨床作用，而MDR最大極限地使得某些癌癥治療無效。
已設(shè)計了一些方法策略來得到臨床性MDR。一個有希望的途徑為利用化學(xué)敏感劑，它能抑制抗性細(xì)胞中藥物的主動流出。包括鈣拮抗劑，鈣調(diào)節(jié)蛋白抑制劑及其某些藥物類似物在內(nèi)的，為數(shù)眾多的化合物已顯示出不同程度的MDR逆轉(zhuǎn)能力，這些制劑大部分為脂溶性，且可能作為P-gp底物起到作用，從而競爭性地抑制藥物流失效應(yīng)。為在癌癥中改變多種藥物抗性的藥劑所著的卓越的文獻(xiàn)綜述最近已被出版。
參見James M.Ford & William N.Hait-Pharmacology of Drugs that Alter Multidrug Resistance in Cancer，Pharmacological Reviews，42，pp 155-199(1990);David J.Stewart & William K.Evans-Non-chemotherapeutic Agents that Potentiate Chemotherapy Efficacy，Cancer Treatment Reviews，16，pp 1-40(1989).
到目前為止，在癌癥病人身上使用某些MDR逆轉(zhuǎn)劑的主要局限因素為在治療中達(dá)到有效濃度時它們所產(chǎn)生的毒性。因而，面臨的挑戰(zhàn)是尋找理想的MDR逆轉(zhuǎn)劑，它應(yīng)既是高效低毒的，而且在臨床應(yīng)用時是藥理學(xué)上所能接受的。
最近我們發(fā)現(xiàn)了一組取代的二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-11(10H)-酮(在下文內(nèi)簡稱為氧氮雜
)，它們具有高效的MDR逆轉(zhuǎn)能力。與本發(fā)明的氧氮雜
結(jié)構(gòu)相關(guān)的化合物可在英國專利U.K Patent No.1，164，579(1969年9月17日出版)中找到，該發(fā)明發(fā)表了具式Ⅱ的氧氮雜
其中R8為氫或鹵素，R7為氫或C1-6烷基，且R9和R10中的一個表示游離氨基，而另一個表示氫原子。據(jù)報導(dǎo)式Ⅱ氧氮雜
具有止痛，解熱和鎮(zhèn)靜的性質(zhì)。另外，Nagarajan等人在Indian Journal of Experimental Biology 12，pp217-224，(在p229)(1974)，中發(fā)表了式Ⅲ氧氮雜
。式Ⅲ化合物是由式Ⅳ化合物在熱DMF中進(jìn)行分子內(nèi)環(huán)合而制得的。
類似的方法也被用于制備上述式Ⅱ化合物。
經(jīng)鑒定式Ⅱ及式Ⅲ的氧氮雜
均無MDR逆轉(zhuǎn)活性。
本發(fā)明涉及式Ⅰ的二苯并〔b，f〕〔1，4〕-氧氮雜
-11(10H)酮或其藥物可接受的鹽，
其中p為1至3;
R1和R2分別獨立地代表氫或?；鶊F(tuán)R6CO-，其中R6為C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，C2-7鏈烯基，芳基或具有下列通式的基團(tuán)，
R3為氫或氯;
R4和R5分別獨立地代表C1-6烷基。
式Ⅰ化合物在逆轉(zhuǎn)抗癌藥物的多種藥物抗性方面是有用的。因此在另一方面，本發(fā)明涉及采用式Ⅰ化合物作為對多種藥物有抗性的腫瘤的輔助化療藥物。
本發(fā)明涉及式Ⅰ的二苯并〔b，f〕〔1，4〕-氧氮雜
-11(10H)-酮或其藥物可接受的鹽
其中P為1-3;
R1和R2分別獨立地代表氫或?；鶊F(tuán)R6CO-，其中R6為C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，C2-7鏈烯基，芳基或具有下列通式的基團(tuán)
R3為氫或氯;
R4和R5分別獨立地代表C1-6烷基。
優(yōu)選的式Ⅰ化合物為其中P為1，-COR6選自如下基團(tuán)的那些化合物。
其中n為1-4。
能形成式Ⅰ化合物(其中R1和R2為氫，且R3為氯)的式Ⅰ′化合物(路線A)可經(jīng)由多種方法來制備，路線A所示的為優(yōu)選的方法。
在路線A的步驟1中，式Ⅴ化合物上的酚基氫與陽離子M交換生成式Ⅵ化合物。陽離子的實例包括鈉，鉀，四丁基銨，及芐基三乙基銨等。該交換反應(yīng)可用堿達(dá)到目的，如碳酸鉀，氫氧化鉀，氫化鉀，氫化鈉，氫氧化鈉，碳酸鈉，或氫氧化季銨，如氫氧化四丁基銨或氫氧化芐基三乙基銨。該反應(yīng)通常在惰性有機(jī)溶劑中進(jìn)行，如丙酮，乙腈，二氯甲烷，二甲基甲酰胺(DMF)，二甲基乙酰胺，甲醇，2-甲氧基乙醇，乙醇，異丙醇，或二甘醇二甲醚。
路線A的步驟2是將反應(yīng)物式Ⅵ酚鹽與式Ⅶ化合物(其中Y為鹵素，優(yōu)選氟或氯)進(jìn)行反應(yīng)而完成的。該加成反應(yīng)是在堿存在下，如碳酸鉀及在惰性有機(jī)溶劑中，如乙腈，DMF，二甲基乙酰胺，2-甲氧基乙醇，乙醇，異丙醇，或二甘醇二甲醚中進(jìn)行的。優(yōu)選溶劑為正-丙醇，2-甲氧基乙醇或DMF，更可取的溶劑為2-甲氧基乙醇。該反應(yīng)在升溫條件下進(jìn)行，最好是在所用溶劑的回流溫度下進(jìn)行。
如果需要的話，可在式Ⅰ′化合物的游離3-氨基上進(jìn)行單?；螂p?；?，用相同或不同的含義同前所述的R6CO-基團(tuán)取代一或二個氫原子。游離芳香胺的酰化技術(shù)在本領(lǐng)域是十分成熟的。例如，就單?；?，可將式Ⅰ′化合物與等摩爾的R6COOH酸在脫水劑存在下偶合，脫水劑如二環(huán)己基碳化二亞胺或1-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氫喹啉(EEDQ)。其它的脫水劑如Synthesis pp453-463(1972)中所述的那些也是合適的。另外，可將R6COOH的羧基轉(zhuǎn)化為N-?；兴懿捎玫挠蟹磻?yīng)活性的衍生物?？捎玫脑擃愻然苌餅轷；u;?；溥?酰基疊氮;混合酸酐;活性酯，例如與氯甲酸乙酯或氯甲酸異丁酯等形成的酯;苯基氨基甲酸酯;N-羥基酰亞胺，像與N-羥基琥珀酰亞胺或N-羥基苯鄰二甲酰亞胺等形成的酰亞胺;以及與羥基苯并三唑(HBT)或4-甲基四唑-5-硫酮等構(gòu)成的活性衍生物;或類似的活性羧酸衍生物。在形成式Ⅰ化合物，其中R1和R2為相同的?；鶊F(tuán)時，至少應(yīng)加入二倍量的相同的?；瘎Ａ硪环矫?，當(dāng)需要兩個不同的?；鶗r，最好分步用不同的?；瘎┨幚?。
在形成式Ⅰ化合物，其中R3為氫時，式Ⅰ′化合物的2-氯基團(tuán)可被氫解，并且，如果需要的話，可將游離的3-氨基?；?，同上所述。另外，式Ⅰ′化合物首先進(jìn)行酰化，隨后進(jìn)行2-氯基團(tuán)的氫解。
式Ⅴ化合物類的合成在許多專利文獻(xiàn)和出版物中已有充分的描述。較方便的方法為在U.S.專利4，808，624中用以制備該專利化合物的初始原料的那些方法。其它可采用的制備式Ⅴ化合物的方法在同一美國專利的完全公開部分中作了概括。
在另一實施方案中，路線B中所示的一系列步驟可用于得到式Ⅰ″化合物。在該路線中，式Ⅸ化合物中的R1和R2定義同前。如此，當(dāng)R1和R2均為氫時，步驟1不能進(jìn)行。然而，優(yōu)選的是至少R1或R2為同前定義的R6CO-酰基。更好的是R1和R2之一為酰基，另一為氫。該?；勺鳛楸Ｗo(hù)基，可在后面的步驟中經(jīng)堿性水解而除去。在步驟1中的單酰化或雙?；刹捎门c式Ⅰ′化合物中所述的類似方法達(dá)到目的。
化合物Ⅸ中的羧基在步驟2中用常規(guī)羧基保護(hù)基R11進(jìn)行保護(hù)。本發(fā)明中可采用的用以阻斷或保護(hù)羧酸功能的常規(guī)羧基保護(hù)基為該領(lǐng)域技術(shù)熟練人員所熟知的那些，并且，如果需要的話，所述基團(tuán)宜為可用對分子中剩余部分不產(chǎn)生任何破壞作用的方法，將其除去的基團(tuán)。例如，用化學(xué)或酶促水解;在溫和條件下用化學(xué)還原劑處理;用紫外線照射或催化氫化等方法。這些易于除去的羧基保護(hù)基的實例包括如下片斷，如C1-6烷基，二苯甲基(benzyhydryl)，2-萘甲基，4-吡啶甲基，苯甲酰甲基，丙酮基，2，2，2-三氯乙基，甲硅烷基如三甲基甲硅烷基和叔-丁基二甲基甲硅烷基，苯基，環(huán)上取代的苯基，如4-氯苯基，甲苯基，和叔-丁基苯基，苯基C1-6烷基，環(huán)上取代的苯基C1-6烷基如芐基，4-甲氧基芐基，4-硝基芐基(對-硝基芐基)，2-硝基芐基和三苯基甲基，甲氧基甲基，2，2，2-三氯乙氧羰基，芐氧甲基，C1-6烷羰氧基(alkanoyloxy)C1-6烷基如乙酰氧甲基，丙酰氧甲基，C2-6鏈烯基，像乙烯基和烯丙基。其他合適的已知的未包括在上面的羧基保護(hù)基可在Theodora W.Greene所著的“有機(jī)合成中的保護(hù)基”(John Wiley & Sons，1981)第5章中找到，在此并入本文作為公開內(nèi)容的一部分。當(dāng)在本發(fā)明中應(yīng)用時，特別有利的羧基保護(hù)基為烯丙基。
在步驟3中，用與路線A步驟1中所述的類似方法，用陽離子M交換游離的酚氫原子。所形成的式Ⅺ化合物在步驟4中與式Ⅶ化合物反應(yīng)，得到式Ⅻ化合物，其中基團(tuán)W表示
步驟4中所采用的條件同路線A步驟2中所用的類似。
步驟5是將常規(guī)羧基保護(hù)基除去，當(dāng)R11為烯丙基時，可用三(二亞芐基丙酮)二鈀(O)和三苯基膦將其除去。
步驟6是胺H2NCH2(CH2)pNR4R5與式ⅩⅢ苯甲酸衍生物縮合得到式ⅩⅣ苯甲酰胺，并隨后經(jīng)堿促進(jìn)重排成式ⅩⅤ化合物。有許多方法可從伯胺和式ⅩⅢ所表示的苯甲酸衍生物來形成苯甲酰胺，例如，U.S.專利4，808，624完全公開部分中闡述了一些代表性的方法。式ⅩⅣ苯甲酰胺通常不分離出來，而是立即用堿如碳酸鉀，將其轉(zhuǎn)變?yōu)槭舰趸衔铩?br> 在加熱下，最好在所用溶劑的回流溫度下，在步驟7中得到式Ⅰ″的苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
，優(yōu)選的溶劑為不干擾分子內(nèi)環(huán)合的那些溶劑，其實例包括乙腈，2-甲氧基乙醇，二甲基乙酰胺，甲醇，異丙醇，或二甘醇二甲醚，特別優(yōu)選的溶劑為2-甲氧基乙醇。
如果需要的話，式Ⅰ″化合物可在步驟8中在2-位上進(jìn)行氯化，該氯化反應(yīng)可用氯化芳環(huán)的標(biāo)準(zhǔn)方法來進(jìn)行，如用氯化亞砜在二氯甲烷中，用氯氣在乙酸中，用N-氯化琥珀酰亞胺，或其它合適的氯化方法。
當(dāng)R1和R2為氫和?；鶗r，該?；赏ㄟ^堿水解而除去，得到式Ⅰ″或Ⅰ′′′化合物，其中-NR1R2為游離氨基，如有需要時，可將該游離氨基用R6CO-基團(tuán)進(jìn)行單?；螂p?；?，以得到本發(fā)明范圍內(nèi)的更多的化合物。
在本申請書中，符號“C”右下角的數(shù)字限定某一特定基團(tuán)可能含有的碳原子的數(shù)目。例如，C1-6烷基系指直鏈或支鏈的含有1至6個碳原子的烷基，這樣的烷基包括甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，叔丁基，正戊基，正己基，3-甲基戊基等烷基基團(tuán);C2-6鏈烯基系指直鏈或支鏈的烯基如，乙烯基，烯丙基，1-丙烯基，異丙烯基，1-丁烯基，2-丁烯基，3-丁烯基，甲基烯丙基，1，1-二甲基烯丙基，1-己烯基，2-己烯基等基團(tuán);C3-7環(huán)烷基系指如，環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，環(huán)丙基甲基，環(huán)丙基乙基，環(huán)丙基丙基，環(huán)丁基甲基，環(huán)丁基乙基，環(huán)戊基甲基等基團(tuán);芳基系指未取代的苯基或分別獨立地被1-3個鹵素，C1-6烷基，C1-6烷氧基或C1-6烷硫基所取代的苯基，如4-甲基苯基，2，3-二甲氧基苯基，2-甲基-3-乙氧基苯基，4-叔丁氧基苯基，4-甲硫基-3-氟苯基，2，4-二氯苯基，2-氯-4-溴苯基等基團(tuán);C1-6烷氧基系指直鏈或支鏈的烷氧基團(tuán)，如甲氧基，乙氧基，正丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，叔-丁氧基，正戊氧基，正己氧基，3-甲基戊氧基，等;C1-6烷硫基系指直鏈或支鏈的烷硫基，如甲硫基，乙硫基，正丙硫基，異丙硫基，正丁硫基，叔丁硫基，正戊硫基，正己硫基，3-甲基戊硫基等基團(tuán);鹵素系指氟，氯，溴或碘。
本文內(nèi)所畫的結(jié)構(gòu)式最能代表本發(fā)明化合物的結(jié)構(gòu)。然而，本發(fā)明中的某些化合物可能以其它互變異構(gòu)形式存在，其中的氫原子轉(zhuǎn)移到分子中的其它部分，且分子中原子間的化學(xué)鍵隨之重排。應(yīng)理解的是這些結(jié)構(gòu)式代表了迄今為止可能存在的所有互變異構(gòu)形式。
下列具體實例用來說明本發(fā)明中代表性化合物的合成，但它們并不被認(rèn)為對本發(fā)明的范圍有任何限制。為制備本發(fā)明包括的化合物，所采用的方法可加以改變而毋須特別說明。而且，為了用稍微不同的方式來制備同一化合物而改變方法，對本領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)熟練的人來說也是容易的。
除非另有指定，所有溫度系指攝氏溫度(℃)。核磁共振(NMR)譜特性系指用四甲基硅烷(TMS)作內(nèi)標(biāo)，以百萬分之一(ppm)表示的化學(xué)位移(δ)。在質(zhì)子NMR光譜數(shù)據(jù)中就不同的位移值記錄的相對面積相應(yīng)于分子中特定功能基上的氫原子數(shù)目。位移的性質(zhì)(就峰裂數(shù)而言)被記錄為寬單峰(bs)，寬雙重峰(bd)，寬三重峰(bt)，寬四重峰(bq)，單峰(s)，多重峰(m)，雙重峰(d)，四重峰(q)，三重峰(t)，雙重雙重峰(dd)，雙重三重峰(dt)以及雙重四重峰(dq)。NMR所用溶劑為DMSO-d6(全氘二甲亞砜)，D2O(重水)，COCl3(氘氯仿)，和其它常規(guī)氘化溶劑。紅外(IR)光譜描述僅僅包括具有功能團(tuán)鑒定值的吸收波數(shù)(cm-1)。
Celite為Johns-Manuille產(chǎn)品公司硅藻土的注冊商標(biāo)。
本文所用的縮寫符號為本技術(shù)領(lǐng)域里廣泛使用的常規(guī)縮寫，其中一些是MS質(zhì)譜HRMS高分辨質(zhì)譜DMF二甲基甲酰胺
Ac乙?；鵄DR阿霉素ActD放線菌素DDMSO二甲亞砜Ph苯基實施例13-氨基-2-氯-10〔2-(二乙氨基)乙基〕-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-11(10H)-酮(Ⅰa)
于氮氣氛下，用80ml正丙醇處理于礦物油中的60%氫化鈉的懸浮液(1.76g，44mmol，用正戊烷洗滌過)。向此液中加入6.44g(20mmol)4-氨基-5-氯-N-〔2-(二乙氨基)乙基〕-2-羥基苯甲酰胺鹽酸鹽及4.51g(20mmol)4-氯-3-硝基三氟甲苯?；旌衔镉诨亓飨路磻?yīng)6小時，然后于真空下濃縮。殘渣在NaHCO3水溶液及以1∶1∶1的二氯甲烷，乙醚和正己烷組成的混合物之間進(jìn)行分配。有機(jī)相依次用1NNaOH和水洗滌，然后用20ml 1N HCl處理。濾集沉淀的固體，用丙酮洗滌，得1.65g3-氨基-2-氯-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-11(10H)-酮(Ⅰa)二鹽酸鹽的粗品，其為淺黃色固體。合并母液，用NaHCO3水溶液中和，并用CH2Cl2提取。提取物干燥并濃縮，殘渣在硅石上作色譜分析，以含2-8%甲醇的CH2Cl2作洗脫液，得下列三個組份a)第一組份為430mg4-氨基-5-氯-N-〔2-(二乙氨基)乙基〕-N-〔2-硝基-4-(三氟甲基)苯氧基〕苯甲酰胺，其為黃色無定形固體，m.p.＞60℃。
1H NMR(CDCl3)δ8.0-8.3(m，3H)，7.7-7.9(m，4H)，7.02(s，1H)，6.11(s，1H)，4.26(m，2H)，2.2-2.8(m，6H)，0.80(m，6H);
MS(m/e)663;
元素分析 C27H24ClF6N5O6計算值C 48.84，H 3.64，N 10.55實驗值C 50.75，H 4.00，N 9.85b)第二組份為359mg3-氨基-2-氯-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-7-(三氟甲基)-二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-11(10H)-酮(Ⅰa)，其為游離堿。
1H NMR(CDCl3)δ7.72(s，1H)，7.63(d，1H)，7.42(d，1H)，4.42(s，1H)，6.52(s，1H)，4.45(s，2H)，4.09(+2H)，2.77(t，3H)，2.52(q，4H)，6.96(t，6H);
Ms(m/e)428相應(yīng)于M+H+用溶于甲醇中的無水HCl處理樣品，產(chǎn)品與先前得到的1.65g固體合并，用甲醇-乙醚重結(jié)晶，得1.85g淡米色固體，m.p.＞130℃。
元素分析 C20H21ClF3N3O2·2HCl計算值C 47.97，H 4.63，N 8.39實驗值C 47.74，H 4.58，N 8.33.
c)第三組份為68mg4-氨基-5-氯-N-〔2-(二乙氨基)乙基〕-2-羥基-N-〔2-硝基-4-(三氟甲基)苯基〕苯甲酰胺，其為黃色固體，m.p.＞100℃。
1H NMR(CDCl3)δ8.10(s，1H)，7.96(s，2H)，6.38(s，1H)，6.21(s，1H)，4.39(s，2H)，4.2-4.4(m，2H)，2.7-3.2(m，6H)，1.2(m，6H);
MS(m/e)474.
在另一個實驗中，可按下法制備3-氨基-2-氯-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-7-(三氟甲基)-二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-11(10H)-酮二鹽酸鹽將4-氨基-5-氯-N-〔2-(二乙氨基)乙基〕-2-羥基苯甲酰胺(13.182g，25mmol)的四丁基銨鹽，K2CO3(1.73g，12.5mmol)及4-氯-3-硝基三氟甲苯(5.63g，25mmol)于100ml正丙醇溶液中的混合物回流14小時，然后于真空下濃縮。殘渣在Na2CO3水溶液及乙酸乙酯(300ml)之間進(jìn)行分配。有機(jī)相依次用3×200ml水、0.5NaOH溶液(50ml)和水進(jìn)行洗滌，然后用正戊烷處理，直至有深棕色的小滴狀物分離出來。潷析上清液，用30ml 2N鹽酸處理，產(chǎn)生沉淀。濾集固體，用乙酸乙酯洗滌，干燥后得5.84g(46.6%)標(biāo)題化合物的二鹽酸鹽。
在又一個實驗中，將4-氨基-5-氯-N-〔2-(二乙氨基)乙基〕-2-羥基苯甲酰胺的四丁基銨鹽(52.73g)，4-氯-3-硝基三氟甲苯(22.56g，0.1mol)及K2CO3(6.92g，50mmol)于300ml2-甲氧基乙醇中的混合物攪拌并加熱回流17小時?；旌衔镉谡婵障聺饪s，殘渣在水和乙酸乙酯之間分配。有機(jī)相依次用2×50ml 1NNaOH，2×100ml水洗滌，然后用50ml 2N HCl處理。濾集固體沉淀物，用CH2Cl2和乙酸乙酯洗滌，空氣中干燥后，得29.44g(58.9%)標(biāo)題化合物的二鹽酸鹽。
實施例2
N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕乙酰胺(Ⅰb)及N-乙?；?N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕乙酰胺(Ⅰc)
將化合物Ⅰa于10ml乙酸酐的溶液加熱回流12分鐘，然后于真空下濃縮。殘渣在硅石上作色譜分析，用含1.5%甲醇的CH2Cl2作洗脫液，首先得到295mg化合物Ⅰc，其為黃色無定形固體。
1H NMR(CDCl3)δ7.97(s，1H)，7.72(d，1H)，7.49(d，1H)，7.45(s，1H)，7.13(s，1H)，4.2(t，2H)，2.89(t，2H);
MS(m/e)511.
然后得820mg單乙?；a(chǎn)物Ⅰb，其為米色固體，mp 143-4℃。
元素分析 C22H23ClF3N3O3·0.5H2O·0.5CH3CO2H計算值C 54.31;H 5.06;N 8.27.
實驗值C 54.68;H 5.11;N 7.93.
1H NMR(CDCl3)δ8.43(s，1H)，7.82(s，1H)，7.74(s，1H)，7.63(d，1H)，7.52(s，1H)，7.44(d，1H)，4.18(t，2H)，2.87(t，3H)，2.63(q，4H)，2.26(s，3H)，2.02(s，2H)，1.02(t，6H);
MS(m/e)469.
實施例3N-〔10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)-二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕乙酰胺(Ⅰd)
向化合物Ⅰb(270mg)與甲酸銨(220mg)于8ml甲醇溶液組成的混合物中，加入10mg 10%的Pd/C。將其攪拌5小時，濾除催化劑。真空濃縮濾液，殘渣在NaHCO3水溶液和CH2Cl2之間進(jìn)行分配。有機(jī)層經(jīng)干燥，減壓濃縮，得190mg標(biāo)題化合物，其為白色固體，mp 75-85℃。
1H NMR(CDCl3)δ8.34(s，1H)，7.75(d，1H)，7.65(t，2H)，7.46(s，1H)，7.40(dd，1H)，7.10(dd，1H)，4.10(t，2H)，2.76(t，2H)，2.49(q，4H)，2.14(s，3H)，0.96(t，6H);
MS(m/e)434;
HRMS分析 C22H24F3N3O3計算值436.1848.
實驗值436.1846.
實施例4N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕苯甲酰胺(Ⅰe)
向化合物Ⅰa(250mg，0.5mmol)及三乙胺(102mg，1mmol)于2ml無水CH2Cl2溶液組成的邊攪拌的溶液中，加入苯甲酰氯(141mg，1mmol)。混合物攪拌1小時，然后在Na2CO3水溶液和CH2Cl2之間進(jìn)行分配。有機(jī)相干燥后減壓濃縮，殘渣進(jìn)行硅膠柱層析，以含5-10%甲醇的CH2Cl2作洗脫液，得182mg(68.3%)的標(biāo)題化合物，其為黃色固體，mp 67-69℃。
1H NMR(CDCl3)δ8.55(s，1H)，7.90(d，1H)，7.55(m，8H)，4.05(m，2H)，2.72(q，2H)，2.50(m，5H)，0.96(m，6H);
HRMS計算值C27H25ClF3N3O3532.1615實驗值532.1627
實施例5N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕巴豆酰胺(Ⅰf)
重復(fù)制備化合物Ⅰe的通用方法，除了用等摩爾量的巴豆酰氯代替苯甲酰氯。標(biāo)題化合物的產(chǎn)率為61.3%，其為黃色固體，mp 106-107℃。
1H NMR(CDCl3)δ8.50(s，1H)，7.87(d，1H)，7.55(m，2H)，7.00(m，2H)，5.82(dd，2H)，4.25(m，3H)，2.95(m，1H)，2.75(m，1H)，1.85(q，6H)，1.10(m，6H).
HRMS計算值C24H26N3O3F3Cl 496.1615.
實驗值496.1605.
實施例6N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕丙酰胺(Ⅰg)
重復(fù)制備化合物Ⅰe的方法，除了用等摩爾量的丙酰氯代替苯甲酰氯，反應(yīng)時間為12小時。標(biāo)題化合物的產(chǎn)率為75.0%，其為黃色油狀物。
1H NMR(CDCl3)δ8.42(s，1H)，7.78(s，1H)，7.75(s，1H)，7.60(d，1H)，7.45(d，1H)，7.35(dd，1H)，4.10(t，2H)，2.80(t，2H)，2.45(m，6H)，1.25(t，3H)，0.95(t，6H).
計算值C23H26ClF3N3O3484.1615.
實驗值484.1612.
實施例7N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕環(huán)丙烷甲酰胺(Ⅰh)
重復(fù)制備化合物Ⅰe的方法，除了用等摩爾量的環(huán)丙烷甲酰氯代替苯甲酰氯，反應(yīng)時間為12小時。標(biāo)題化合物的產(chǎn)率為80.7%，其為黃色固體，mp 115-116℃。
1H NMR(CDCl3)δ8.39(s，1H)，7.80(s，1H)，7.75(s，1H)，7.58(d，1H)，7.42(s，1H)，7.25(q，1H)，4.10(t，2H)，2.70(t，2H)，2.50(q，3H)，1.55(m，3H)，1.07(s，1H)，1.05(m，2H)，0.95(t，6H).
計算值C24H26ClF3N3O3496.1615.
實驗值496.1605.
實施例8N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕-2-甲基異丁酰胺(Ⅰi)
重復(fù)制備化合物Ⅰe的方法，除了用等摩爾量的異丁酰氯代替苯甲酰氯，反應(yīng)時間為2小時。標(biāo)題化合物的產(chǎn)率為81.6%，其為黃色固體，mp 73-75℃。
1H NMR(CDCl3)δ8.42(s，1H)，7.77(s，1H)，7.57(m，3H)，7.35(s，1H)，4.0(m，2H)，2.70(t，2H)，2.5(m，4H)，1.25(d，6H)，1.15(s，1H)，0.95(m，6H).
HRMS計算值C24H28ClF3N3N3O3498.1771.
實驗值498.1761實施例9N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕環(huán)丁烷甲酰胺(Ⅰj)
重復(fù)制備化合物Ⅰe的方法，除了用等摩爾量的環(huán)丁烷甲酰氯代替苯甲酰氯，反應(yīng)時間為2小時。標(biāo)題化合物的產(chǎn)率為54.3%，其為黃色油狀物。
1H NMR(CDCl3)δ8.48(s，1H)，7.80(s，1H)，7.60(m，3H)，7.40(m，1H)，4.04(m，3H)，3.18(m，1H)，2.70(t，3H)，2.48(q，4H)，2.30(m，3H)，1.98(m，1H)，0.97(m，6H).
計算值C25H28ClF3N3O3510.1771.
實驗值510.1760.
實施例10N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕環(huán)己烷甲酰胺(Ⅰk)
重復(fù)制備化合物Ⅰe的方法，除了用環(huán)己烷甲酰氯代替苯甲酰氯，反應(yīng)時間為20小時。標(biāo)題化合物的產(chǎn)率為83%，其為黃色固體，mp 137-138℃。
1H NMR(CDCl3)δ8.50(s，1H)，7.87(s，1H)，7.86(s，1H)，7.68(d，1H)，7.55(s，1H)，7.47(d，1H)，4.15(t，2H)，2.82(t，2H)，2.56(q，4H)，2.35(m，1H)，1.2-2.1(m，10H)，1.00(t，6H).
計算值C27H31ClF3N3O3538.2084.
實驗值538.2076.
實施例11N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕-N-(環(huán)庚羰基)環(huán)庚烷甲酰胺(Ⅰm)及N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕-環(huán)庚烷甲酰胺(Ⅰn)
和
通過環(huán)庚烷甲酸與草酰氯在CH2Cl2中反應(yīng)30分鐘原地生成環(huán)庚烷甲酰氯。減壓下除去過量的草酰氯。然后，重復(fù)制備化合物Ⅰe的方法，除了用等摩爾量的環(huán)庚烷甲酰氯代替苯甲酰氯，反應(yīng)時間為3天。產(chǎn)品進(jìn)行硅膠柱層析，以含0.4%甲醇的CH2Cl2作洗脫液，首先得到化合物Ⅰm(30%)，其為黃色半固體物。
1H NMR(CDCl3)δ7.90(s，1H)，7.74(d，1H)，7.42(d，1H)，7.41(s，1H)，7.01(s，1H)，4.08(t，2H)，2.75(t，3H)，2.48(q，4H)，2.23(m，2H)，1.1-2.0(m，36H)，0.91(t，6H).
計算值C36H45ClF3N3O4676.3129.
實驗值676.3115.
繼續(xù)用含1-4%甲醇的CH2Cl2進(jìn)行洗脫，得含Ⅰn化合物的第二組份，產(chǎn)率為43.9%，其為白色固體，mp 120-125℃?！?H NMR(CDCl3)δ8.40(s，1H)，7.78(s，1H)，7.72(s，1H)，7.59(d，1H)，7.47(s，1H)，7.30(d，2H)，4.08(t，2H)，2.75(t，2H)，2.47(q，4H)，2.41(m，1H)，1.4-2.1(m，12H)，0.93(t，6H).
計算值C28H33ClF3N3O3552.2241.
實驗值552.22413.
實施例12N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕利尿酰胺(Ⅰo)
通過與0.5N二氯甲烷-氯化甲基亞銨的氯仿溶液(Arnolds試劑)(2ml，由草酰氯和DMF的氯仿溶液反應(yīng)制得)反應(yīng)，將于5mlCH2Cl2中的利尿酸(303mg，1mmol)活化30分鐘。向其中加入Ⅰa胺化合物(250mg，0.585mmol)及三乙胺(153mg，115mmol)，將混合物攪拌14小時，反應(yīng)物在NaHCO3水溶液和CH2Cl2中進(jìn)行分配，有機(jī)層用水洗滌，干燥，減壓濃縮。殘渣用準(zhǔn)備好的硅膠薄板進(jìn)行層析，以含20%甲醇的CH2Cl2作流動相，得250mg(69.8%)標(biāo)題化合物，其為黃色固體，m.p.173-175℃。
1H NMR(CDCl3)δ8.46(s，1H)，7.80(s，1H)，7.62(d，1H)，7.50(s，1H)，7.40(d，1H)，7.10(d，2H)，6.85(d，1H)，5.90(s，1H)，5.55(s，1H)，4.70(s，2H)，4.07(m，2H)，2.85(m，1H)，2.60(m，3H)，2.40(t，2H)，1.10(t，3H)，1.0(t，6H).
計算值C33H32ClF3N3O3712.1360.
實驗值712.1346.
實施例13
N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕環(huán)戊烷甲酰胺(Ⅰp)
重復(fù)制備化合物Ⅰo的方法，除了用等摩爾量的環(huán)戊烷甲酸代替利尿酸。標(biāo)題化合物的產(chǎn)率為58.3%，其為黃色油狀物。
1H NMR(CDCl3)δ8.45(s，1H)，7.81(d，2H)，7.7(d，1H)，7.50(d，1H)，7.42(q，1H)，4.15(t，2H)，2.80(m，4H)，2.55(q，5H)，1.85(m，5H)，1.65(m，1H)，0.95(t，6H);
計算值C26H30N3O3F3Cl 524.1928.
實驗值524.1922.
實施例144-乙酰氨基水楊酸(Ⅸa)
在30分鐘內(nèi)向處于攪拌并回流著的4-氨基水楊酸(76.57g，0.5mmol)于250ml無水乙醇的懸浮液中滴加乙酸酐(83.2g，0.815mmol)。加畢后，混合物繼續(xù)回流15分鐘，然后冷卻。濾集產(chǎn)品，用少量乙醇洗滌，空氣中干燥后，得72.3g(74.15%)標(biāo)題化合物，其為灰色固體，mp242-4℃，前人報告值mp為234-5℃(p.Barraclongh等人，Eur.J.Chem.25，P.467，1990)。
實施例154-乙酰氨基水楊酸烯丙酯(Ⅹa)向處于攪拌下的氫化鈉(4.0g，濃度60%，0.1mmol)于25mlDMF的懸浮液中，滴加4-乙酰氨基水楊酸(19.5g，0.1mmol)的50mlDMF溶液。待氫氣逸出完畢，向其中加入烯丙基溴(12.1g，0.1mmol)，將混合物攪拌8.6小時。減壓除去DMF，殘渣用甲醇/水進(jìn)行結(jié)晶，得14.76g(62.76%)標(biāo)題化合物，其為白色固體，m.p.156-8℃。
1H-NMR(CDCl3)δ7.80(d，1H)，7.42(s，1H)，7.16(s，1H)，7.07(d，1H)，5.95-6.08(m，1H)，5.29-5.44(m，2H)4.80-4.83(m，2H)，2.19(s，3H).
MS(m/e)236相應(yīng)于M+H+。
實施例16N-〔4-(烯丙氧羰基)-3-(2-硝基-4-三氟甲基苯氧基)〕苯乙酰胺(Ⅻa)向處于攪拌下的氫化鈉(1.69g，60%，42mmol)的16mlDMF懸浮液中，加入4-乙酰氨基水楊酸烯丙酯(10.0g，42mmol)。待氫氣逸出完畢后，向其中加入4-氯-3-硝基三氟甲苯(9.46g，42mmol)，混合物于回流下加熱45分鐘。減壓除去DMF，殘渣經(jīng)硅膠柱層析純化，以含3%甲醇的二氯甲烷作洗脫液，得13.0g(72.95%)標(biāo)題化合物，其為白色固體，m.p.160-163℃。
1H-NMR(CDCl3)δ8.22(s，1H)，8.03(d，1H)，7.68(s，1H)，7.61-7.65(m，3H)，7.36(d，1H)，6.83(d，1H)，5.65-5.78(m，1H)，5.10-5.21(m，2H)，4.57-4.60(m，2H)，2.18(s，3H).
MS(m/e)385相應(yīng)于M+H+實施例17N-〔4-(羥基羰基)-3-(2-硝基-4-三氟甲基-苯氧基)〕苯基乙酰胺(ⅩⅢa)向三(二亞芐基丙酮)二鈀(O)(550mg)及三苯基膦(660mg)組成的混合物中，加入無水二氯甲烷(20ml)，混合物攪拌30分鐘后，向其中加入N-〔4-(烯丙氧羰基)-3-(2-硝基-4-三氟甲基-苯氧基)〕苯乙酰胺(20.0g，47mmol)的200mlCH2Cl2溶液，然后再加入2-乙基己酸的鉀鹽(9.61g，57mmol)該鉀鹽溶于50ml乙酸乙酯和CH2Cl2(3∶1)混合物的溶液。將混合物攪拌16小時后，用75ml 1N HCl酸化，分出水層，有機(jī)層用水洗滌，干燥，減壓濃縮，殘渣用乙醚研粉，得14.91g(82.6%)標(biāo)題化合物，其為白色固體，用乙醚重結(jié)晶，得一樣品，其熔點為196-200℃。
1H-NMR(CDCl3)δ8.06(s，1H)，7.86(d，1H)，7.61(s，1H)，7.49(d，1H)，7.36(d，1H)，6.75(d，1H)，2.01(s，3H).
MS(m/e)385相應(yīng)于M+H+實施例184-乙酰氨基-N-〔2-(二乙氨基)乙基〕-2-(2-硝基-4-三氟甲基苯氧基)苯甲酰胺(ⅩⅣa)向冷的CH2Cl2(20ml)中加入草酰氯(432mg，3.4mmol)，然后于攪拌下向其中滴加DMF(0.3ml)于5mlCH2Cl2溶液。再攪拌15分鐘后，向其中加入N-〔4-(羥基羰基)-3-(2-硝基-4-三氟甲基苯氧基)〕苯基乙酰胺(1.153g，3mmol)，將混合物攪拌30分鐘。向其中再加入N，N-二乙基乙二胺(415mg，3.57mmol)及三乙胺(460mg，4.55mmol)將混合物于室溫攪拌1.5小時，用NaHCO3水溶液洗滌，干燥，減壓濃縮，得標(biāo)題化合物，其為橙色固體。
1H-NMR(CDCl3)δ8.11(s，1H)，7.87(d，1H)，7.82(d，1H)，7.63(s，1H)，7.03(s，1H)，6.72(d，1H)，6.64(d，1H)，2.60-2.80(m，2H)，2.35-2.55(m，6H)，2.08(s，3H)，0.89(t，6H).
MS(m/e)483相應(yīng)于M+H+。
實施例19生物測定細(xì)胞培養(yǎng)HCT116/VM46細(xì)胞選自人類結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞系，用于對VM26抗性的研究，MCF-7/ADR細(xì)胞選自人類乳腺癌MCF-7細(xì)胞系，用于對阿霉素的抗性研究，兩種細(xì)胞類型均顯示MDR表型，且對MDR-1mRNA的高水平有過度表達(dá)。細(xì)胞系于含有McCoy氏5A培養(yǎng)基及10%胎牛血清的組織培養(yǎng)瓶中生長。細(xì)胞保存于37℃下，且在含有5%CO2的濕潤空氣中，每5天進(jìn)行次代培養(yǎng)。
細(xì)胞毒測定將細(xì)胞植于96孔的微滴度平皿中，每孔有5×103個細(xì)胞，并使之于37℃下生長24小時。然后用遞降量的抗腫瘤劑培養(yǎng)細(xì)胞，阿霉素(100uM，最大濃度)或放線菌素D(17.6ng/ml)，它們分別對應(yīng)于MCF-7和HCT-116細(xì)胞。加入化學(xué)增敏劑，濃度變化范圍為0.08uM至40uM。平行地，采用相同濃度的異博定作陽性對照。培養(yǎng)48小時后，洗滌細(xì)胞，固定，并用結(jié)晶紫染色。借助分子裝置(Molecular Devices)的微滴度平皿讀數(shù)器，在595nM波長下讀出其吸收度。IC50值(抑制50%細(xì)胞生長所需濃度)可由兩至三次獨立實驗得出的相對存活率來測定。術(shù)語“倍抗性”(fold resistance)定義為在有或沒有化學(xué)增敏劑存在下，抗性細(xì)胞中抗腫瘤藥物的IC50值被存在于其敏感相應(yīng)物中抗腫瘤藥物的IC50值相除，得到的比率即是。這個值對每種逆轉(zhuǎn)劑在提高藥物功效方面的表觀強(qiáng)度提供了一種估量辦法。
表Ⅰ和表Ⅱ給出了幾種本發(fā)明中有代表性的化學(xué)增敏劑，它和存在于人類結(jié)腸腫瘤HCT-116抗性細(xì)胞中及人類乳腺癌MCF-7抗性細(xì)胞中的異博定相比，分別顯示出更高的MDR逆轉(zhuǎn)活性。
表Ⅰ
上述實驗揭示了本發(fā)明化合物對抗癌藥物的MDR的逆轉(zhuǎn)是有益的。因此，本發(fā)明還涉及具通式Ⅰ化合物作為一種輔助化療劑的用途，其有益于改變腫瘤對多種藥物的抗性。
具通式Ⅰ化合物可以形成藥物可接受的酸加成鹽。所述的鹽應(yīng)是那些其中的陰離子不會對鹽造成大的毒性并可與常規(guī)的藥物載體伍用，采用口服或非腸道途徑給藥的鹽。藥物可接受的酸加成鹽包括具通式Ⅰ化合物與礦酸形成的鹽，如鹽酸，溴氫酸，磷酸，硫酸;也包括與有機(jī)羧酸或有機(jī)磺酸形成的鹽，如乙酸，檸檬酸，馬來酸，琥珀酸，苯甲酸，酒石酸，富馬酸，扁桃酸，抗壞血酸，蘋果酸，甲磺酸，羥乙磺酸，對甲苯磺酸及其它已知的用于草藥藥劑學(xué)方面的酸。因此，本發(fā)明進(jìn)一步涉及具通式Ⅰ化合物的藥物可接受的鹽。
有關(guān)全身給藥的方式，劑量及劑量制度必須針對每一個個體，利用良好的職業(yè)判斷力并在考慮受試者的年齡，體重和身體狀況等因素下認(rèn)真地加以調(diào)節(jié)。通常，當(dāng)口服給藥時，每日的劑量為約0.1g-約10g，較好的是0.5-5g。在某些情況下，在較低劑量下即可獲得足夠的治療效果，但在另外一些情況下，則需要較大劑量。對于熟悉臨床藥理學(xué)的人來說對下面的問題是顯而易見的，即在確定含通式Ⅰ化合物每日劑量是以一次給藥，還是分次給藥時，應(yīng)將技術(shù)熟練的工作者所通曉的，且對他在技術(shù)實踐中是必需的那些原則考慮在內(nèi)。
這里所用的術(shù)語“全身給藥”是指口腔，舌下，頰內(nèi)，鼻腔，皮膚，直腸，肌內(nèi)，靜脈內(nèi)及皮下等給藥途徑。通?？梢园l(fā)現(xiàn)，本發(fā)明化合物經(jīng)口服途徑時，要比經(jīng)非腸道途徑時，給予稍大劑量的活性成份才能產(chǎn)生同樣的效果。根據(jù)可靠的臨床實踐，本發(fā)明化合物較好的給藥濃度水平是其可以產(chǎn)生有效的，有益的作用，同時又不引起任何有害的或不希望有的副作用。
從治療上來說，通常給予患者的是包括通式Ⅰ化合物或其藥物可接受的酸加成鹽及藥物可接受的載體在內(nèi)的藥物配方，配方內(nèi)的活性成份的量應(yīng)有效地使MDR逆轉(zhuǎn)。為使得藥物配方對這種治療有效，藥物配方將含有大量或小量(例如，95%-0.5%)的至少一種本發(fā)明化合物及藥物載體，載體包括一種或多種固體，半固體或液體稀釋劑，填充劑及無毒，惰性的，且可用作醫(yī)藥的配方輔助劑。這類藥物配方宜采用劑量單位形式，即物理學(xué)上獨離的單位，其具有相當(dāng)于劑量的分?jǐn)?shù)或倍數(shù)的，預(yù)先決定的藥物量，該藥物劑量是按可以產(chǎn)生所期望的治療效果計算出的。在通常使用中，劑量單位含有1，1/2，1/3或更少的單一劑量。單一劑量優(yōu)選含有能有效產(chǎn)生所需治療效果的量，這是根據(jù)預(yù)先確定的劑量制度一次應(yīng)用一個或多個劑量單位的服用方式得到的，通常為每日劑量(一日給予一次，兩次，三次或多次)的全部，一半，三分之一或少于它?？梢灶A(yù)想，其它治療劑也可以存在這樣的配方中。每單位劑量含有0.1-1g活性成份的藥物配方是較好的，且可方便的制備成片劑，錠劑，膠囊，粉劑，水性或油性懸浮液，糖漿劑，酏劑及水溶液。較好的口服劑型為片劑和膠囊，其可含有常規(guī)的賦形劑，如粘合劑(例如糖漿，阿拉伯膠，明膠，山梨糖醇，黃蓍膠或聚乙烯吡咯烷酮)，填充劑(例如，乳糖，蔗糖，玉米淀粉，磷酸鈣，山梨糖醇或甘氨酸)，潤滑劑(例如，硬脂酸鎂，滑石，聚乙二醇或二氧化硅)，崩解劑(例如，淀粉)及潤濕劑(例如，十二烷基硫酸鈉)。具通式Ⅰ化合物與常規(guī)藥物載體組成的溶液或懸浮液被用作非腸道給藥制劑，如用于靜脈注射的水溶液，或用于肌肉注射的油性懸浮液。這樣的組合物具有用于非腸道給藥所需的透明性，穩(wěn)定性和適應(yīng)性，其可按下法制備將約0.1%-10%(重量比)的活性化合物溶解于水或由多羥基脂肪醇如甘油，丙二醇，聚乙二醇或其混合物組成的賦形劑中。聚乙二醇類由不揮發(fā)的，通常為液態(tài)的，易溶于水和有機(jī)液體的，且分子量約為200-1500的聚乙二醇類的混合物所組成。
權(quán)利要求
1.制備具通式Ⅰ化合物及其藥物可接受的鹽的方法，
其中P為1-3；R1和R2分別獨立地代表氫或?；鶊F(tuán)R6CO-，其中R6為C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，C2-7鏈烯基，芳基或具下列通式的基團(tuán)，
R3為氫或氯；R4和R5分別獨立地代表C1-6烷基；其中包括(a)使具通式Ⅵ的化合物
與具通式Ⅶ的化合物進(jìn)行反應(yīng)，
其中M為陽離子，Y為鹵素，并將具通式Ⅰ′的化合物進(jìn)行分離。
或(b)將具通式XV的化合物在約80-160℃下加熱，并將具通式Ⅰ″的化合物分離。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，制備通式Ⅰ的化合物，其中p為1，且R6CO-選自下列基團(tuán)
其中n為1-4。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，制備N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)-二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕苯甲酰胺。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，制備N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕巴豆酰胺。
5.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，制備N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕丙酰胺。
6.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，制備N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕環(huán)丙烷甲酰胺。
7.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，制備N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕-2-甲基丙酰胺。
8.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，制備N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕環(huán)丁烷甲酰胺。
9.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，制備N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕環(huán)己烷甲酰胺。
10.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，制備N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕-N-(環(huán)庚羰基)環(huán)庚烷甲酰胺。
11.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，制備N-〔2-氯-10，11-二氫-10-〔2-(二乙氨基)乙基〕-11-氧代-7-(三氟甲基)二苯并〔b，f〕〔1，4〕氧氮雜
-3-基〕環(huán)庚烷甲酰胺。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有下列通式I的化合物其中各其團(tuán)及字母的定義詳見說明書。通式I化合物對逆轉(zhuǎn)抗癌藥的多種藥物抗性是有用的。
文檔編號A61K31/55GK1069731SQ92109400
公開日1993年3月10日 申請日期1992年8月14日 優(yōu)先權(quán)日1991年8月26日
發(fā)明者I·蒙闊維克, L·王 申請人:布里斯托爾-米爾斯·斯奎布公司