專利名稱：一種微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于消毒滅菌技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌方法，尤其涉及一種微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌方法。
背景技術(shù)：
裂壺藻又稱裂殖壺菌(Schizochytrium Iimacinum),是一種海洋微藻；由于在藻體內(nèi)能積累大量油脂，在顯微鏡下可看到許多油脂顆粒，油脂含量達(dá)50%以上，超過目前一些油脂作物如大豆、菜籽等，而且這些油脂作物生長周期需要數(shù)月之久，不僅受季節(jié)和地區(qū)的限制，而且需占用大量土地；而裂壺藻生長周期只有4-5天，并且不受季節(jié)、地區(qū)和土地 的制約，裂壺藻的規(guī)模培養(yǎng)已成為一種新興的生物產(chǎn)業(yè)；裂壺藻不僅是生物柴油和食用油的潛在原料，也是保健醫(yī)藥工業(yè)的原料；在裂壺藻所產(chǎn)的油脂中含有大量的不飽和脂肪酸，特別是DHA (二十二碳六烯酸)，俗稱腦黃金，具有益智健腦，促使幼兒大腦及智力發(fā)育，延緩大腦萎縮，預(yù)防老年性癡呆癥，抗凝血減少血栓的形成，預(yù)防心肌梗塞、腦梗塞，降低血脂預(yù)防動(dòng)脈硬化，抗炎、防癌等作用；而且不飽和脂肪酸是海洋水產(chǎn)生物幼體的營養(yǎng)物，因此裂壺藻是良好的海洋生物餌料；但是，裂壺藻目前的異養(yǎng)培育技術(shù)大都依照微生物發(fā)酵工藝，消毒過程需進(jìn)行高溫蒸汽消毒滅菌再進(jìn)行強(qiáng)制冷卻，不僅需要大量的煤炭和冷卻水，而且需要大量的附加設(shè)施，如鍋爐、冷卻塔等；發(fā)酵反應(yīng)器大都為壓力容器，再加上相應(yīng)環(huán)保措施，其基本建設(shè)費(fèi)用和運(yùn)行成本都比較高；本發(fā)明運(yùn)用化學(xué)方法常溫消毒，每噸培養(yǎng)劑只需少量消毒劑及能耗，整個(gè)消毒滅菌過程降低了建設(shè)運(yùn)行成本和相應(yīng)能耗，是一種低成本、高節(jié)能的消毒工藝。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有微藻異樣發(fā)酵培養(yǎng)液的消毒滅菌方法中存在的缺陷，尋求設(shè)計(jì)一種低成本、高節(jié)能的微藻異樣發(fā)酵培養(yǎng)液的消毒滅菌方法。為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明包括以下步驟(—)微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的制備將10-12千克氯化鈉、7-10千克硫酸鎂、3-4千克磷酸二氫鉀、2-3千克氯化鈣溶于I噸水中攪拌均勻，制成微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液；(二)微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌(I)在I噸微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中加入固體次氯酸鈉(NaC103)2_5克，充分溶解，攪拌均勻，靜置1-3小時(shí)，再次攪拌3-10分鐘，靜置12小時(shí)以上，使其充分發(fā)揮消毒滅菌的功效；(2)向微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中通入無菌空氣進(jìn)行曝氧驅(qū)氯20-40分鐘，使游離的氯通過曝氣揮發(fā)；(3)曝氧驅(qū)氯之后向微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中加入硫代硫酸鈉5-10克，充分溶解攪勻，以充分中和余氯，用余氯測(cè)試盒測(cè)試微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中的余氯，測(cè)試盒不顯色表示余氯全部被中和，通過甲基藍(lán)活體染色，用顯微鏡檢測(cè)有無活菌的存在；余氯中和完成且培養(yǎng)液中無活菌存在即可將消毒滅菌之后的微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液抽入微藻異樣發(fā)酵裝置；(4)在微藻異樣發(fā)酵裝置外部上位設(shè)置微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液消毒滅菌罐，其容積為微藻異樣發(fā)酵裝置的1/6-1/4 ；(5)在用次氯酸鈉給微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液消毒滅菌時(shí)，向微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液消毒滅菌罐中加入微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液和碳氮營養(yǎng)源，制成微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液，并在110-130°C O. 140-0. 165Mpa壓力條件下消毒滅菌；微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的質(zhì)量為碳氮營養(yǎng)源質(zhì)量的4-6倍,碳氮營養(yǎng)源是微藻異樣發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域公知的能夠用于微藻培養(yǎng)的碳氮營養(yǎng)源；(6)向微藻異樣發(fā)酵裝置抽入經(jīng)次氯酸鈉消毒滅菌后的微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液和經(jīng)110-130°C O. 140-0. 165Mpa壓力條件下消毒滅菌后的微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液，微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液的余熱提升微藻異樣發(fā)酵裝置中的溫度，完成微藻異樣 發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌及升溫過程，即可接種藻種。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用化學(xué)方法常溫消毒，不需專門的高溫以及冷卻設(shè)備，節(jié)約成本和能耗；利用微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液的余熱給微藻異樣發(fā)酵裝置加溫，節(jié)省專門加熱工序，整個(gè)消毒過程節(jié)能幅度大；微藻異樣發(fā)酵裝置不需制作壓力容器，節(jié)省制作成本；能夠用于裂壺藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌和小球藻、螺旋藻等微藻水池養(yǎng)殖無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌，對(duì)微藻培養(yǎng)無不良影響，滅菌后培養(yǎng)的藻液飼喂海產(chǎn)動(dòng)物幼苗，其發(fā)育、生長也無不良影響。
具體實(shí)施例方式下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。實(shí)施例I :本實(shí)施例包括以下步驟(—)微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的制備將11千克氯化鈉、8千克硫酸鎂、3千克磷酸二氫鉀、2千克氯化鈣溶于I噸水中攪拌均勻，制成微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液；(二)微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌(I)在I噸微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中加入固體次氯酸鈉(NaClO3) 3克，充分溶解，攪拌均勻，靜置2小時(shí)，再次攪拌10分鐘，靜置15小時(shí)，使其充分發(fā)揮消毒滅菌的功效；(2)向微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中通入無菌空氣進(jìn)行曝氧驅(qū)氯30分鐘，使游離的氯通過曝氣揮發(fā)；(3)曝氧驅(qū)氯之后向微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中加入硫代硫酸鈉8克，充分溶解攪勻，以充分中和余氯，用余氯測(cè)試盒測(cè)試微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中的余氯，測(cè)試盒不顯色表示余氯全部被中和，通過甲基藍(lán)活體染色，用顯微鏡檢測(cè)有無活菌的存在；余氯中和完成且培養(yǎng)液中無活菌存在即可將消毒滅菌之后的微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液抽入微藻異樣發(fā)酵裝置；(4)在微藻異樣發(fā)酵裝置外部上位設(shè)置微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液消毒滅菌罐，其容積為微藻異樣發(fā)酵裝置的1/5 ；(5)在用次氯酸鈉給微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液消毒滅菌時(shí)，向微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液消毒滅菌罐中加入微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液和碳氮營養(yǎng)源，制成微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液，并在120°C O. 150Mpa壓力條件下消毒滅菌；微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的質(zhì)量為碳氮營養(yǎng)源質(zhì)量的5倍，碳氮營養(yǎng)源是微藻異樣發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域公知的能夠用于微藻培養(yǎng)的碳氮營養(yǎng)源；(6)向微藻異樣發(fā)酵裝置抽入經(jīng)次氯酸鈉消毒滅菌后的微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液和經(jīng)120°C O. 150Mpa壓力條件下消毒滅菌后的微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液,微藻異樣 發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液的余熱提升微藻異樣發(fā)酵裝置中的溫度，完成微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌及升溫過程，即可接種藻種。
權(quán)利要求
1.一種微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌方法，其特征在于有如下步驟 (一)微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的制備 將10-12千克氯化鈉、7-10千克硫酸鎂、3-4千克磷酸ニ氫鉀、2-3千克氯化鈣溶于I噸水中攪拌均勻，制成微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液； (ニ)微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌 (1)在I噸微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中加入固體次氯酸鈉2-5克，充分溶解，攪拌均勻，靜置1-3小時(shí)，再次攪拌3-10分鐘，靜置12小時(shí)以上，使其充分發(fā)揮消毒滅菌的功效； (2)向微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中通入無菌空氣進(jìn)行曝氧驅(qū)氯20-40分鐘，使游離的氯通過曝氣揮發(fā)； (3)曝氧驅(qū)氯之后向微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中加入硫代硫酸鈉5-10克，充分溶解攪勻，以充分中和余氯，用余氯測(cè)試盒測(cè)試微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中的余氯，測(cè)試盒不顯色表示余氯全部被中和，通過甲基藍(lán)活體染色，用顯微鏡檢測(cè)有無活菌的存在；余氯中和完成且培養(yǎng)液中無活菌存在即可將消毒滅菌之后的微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液抽入微藻異樣發(fā)酵裝置； (4)在微藻異樣發(fā)酵裝置外部上位設(shè)置微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液消毒滅菌罐，其容積為微藻異樣發(fā)酵裝置的1/6-1/4 ； (5)在用次氯酸鈉給微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液消毒滅菌時(shí)，向微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液消毒滅菌罐中加入微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液和碳氮營養(yǎng)源，制成微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液，并在110-130°C 0. 140-0. 165Mpa壓カ條件下消毒滅菌；微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的質(zhì)量為碳氮營養(yǎng)源質(zhì)量的4-6倍，碳氮營養(yǎng)源是微藻異樣發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域公知的能夠用于微藻培養(yǎng)的碳氮營養(yǎng)源； (6)向微藻異樣發(fā)酵裝置抽入經(jīng)次氯酸鈉消毒滅菌后的微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液和經(jīng).110-130°C 0. 140-0. 165Mpa壓カ條件下消毒滅菌后的微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液,微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液的余熱提升微藻異樣發(fā)酵裝置中的溫度，完成微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌及升溫過程，即可接種藻種。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌方法，屬于消毒滅菌技術(shù)領(lǐng)域；向微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液中加入次氯酸鈉固體，攪拌均勻，靜置，然后通入無菌空氣進(jìn)行曝氧驅(qū)氯，加入硫代硫酸鈉中和余氯；在微藻異樣發(fā)酵裝置外部上位設(shè)置微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液母液消毒滅菌罐，并加入微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液和碳氮營養(yǎng)源形成母液然后進(jìn)行常規(guī)無菌消毒，向微藻異樣發(fā)酵裝置中抽入微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的同時(shí)加入上述母液，母液中的余熱提升主發(fā)酵罐中的溫度，完成微藻異樣發(fā)酵無機(jī)培養(yǎng)液的消毒滅菌以及升溫過程，即可接種藻種。
文檔編號(hào)A61L2/23GK102660462SQ201210139238
公開日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2012年5月8日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月8日
發(fā)明者夏偉, 張述智, 徐權(quán)漢, 朱紹輝, 王曉麗 申請(qǐng)人:青島中仁藥業(yè)有限公司