專利名稱：一種魚腥草注射液的制備方法及質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種注射液的制備方法及質(zhì)量控制方法，特別是涉及一種含β-環(huán)糊精衍生物的魚腥草注射液的制備方法及質(zhì)量控制方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，本申請(qǐng)是第 200410037630. 2號(hào)專利的分案申請(qǐng)。
背景技術(shù)：
魚腥草注射液現(xiàn)行工藝制法是取鮮魚腥草全草進(jìn)行水蒸汽蒸餾，收集初蒸餾液， 再進(jìn)行重蒸餾，收集重蒸餾液，加入氯化鈉及吐溫-80，混勻，加注射用水至配制量，濾過(guò)，灌封，滅菌而得。它具有抗菌、抗病毒、抗炎等功效，能提高機(jī)體免疫功能，屬國(guó)家醫(yī)保甲類藥品。魚腥草注射液中含有魚腥草揮發(fā)油，揮發(fā)油在水中溶解度極小，必須加助溶劑或增溶劑才能制成澄明溶液?，F(xiàn)行工藝是在重蒸餾液中加入表面活性劑吐溫-80增溶，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定加吐溫-80的用量為0. 5%。而吐溫-80是非離子型表面活性劑，有溶血作用， 且有一定毒性，若一次輸入魚腥草注射液100ml，則輸入的吐溫-80量為0. 5g，對(duì)人體不夠安全，尤其是輸注速度較快時(shí)，對(duì)人體的不良反應(yīng)更大。且魚腥草中揮發(fā)油含量隨種質(zhì)，產(chǎn)地，生長(zhǎng)期，采收季節(jié)等因素變化，差異很大。通常全草中含揮發(fā)油0. 0049%左右，有的全草中含0. 025%。有人對(duì)不同居群，不同時(shí)期采收的魚腥草全草中有效成份甲基正壬酮含量測(cè)定，最高達(dá)153. 4 μ g/g，最低為7. 68 μ g/g，相差近20倍[英衛(wèi)，中國(guó)中藥雜志200328 (87 718)]?，F(xiàn)行工藝中加吐溫-80制備魚腥草注射液，魚腥草原料中揮發(fā)油含量高時(shí)，重蒸餾液中揮發(fā)油也多，而吐溫-80的增溶作用有限，因此難以配制成澄明藥液，不得不加入活性炭或滑石粉，濾除部分揮發(fā)油，使之澄明，這樣有效成份不能得到充分利用，浪費(fèi)了魚腥草資源，同時(shí)也配制不成含高揮發(fā)油含量的魚腥草注射液。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種魚腥草注射液的制備方法；本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種含環(huán)糊精衍生物的，無(wú)吐溫-80，無(wú)溶血作用，穩(wěn)定性好的魚腥草注射液的制備方法；本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種魚腥草注射液的質(zhì)量控制方法；本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種有效成分含量確切的魚腥草注射液的質(zhì)量控制方法。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的將新鮮魚腥草全草凈選，洗凈，投入蒸餾鍋中，水蒸汽蒸餾，收集初蒸餾液至大部分有效成份蒸出，初蒸餾液重蒸餾，收集至重蒸餾液中有效成份含量在規(guī)定范圍內(nèi)；取重蒸餾液加β-環(huán)糊精衍生物0.5% 10% (w/v)，加滲透壓調(diào)節(jié)劑氯化鈉或葡萄糖成等滲，調(diào) PH值至4. 0 6. 0，濾過(guò)，灌封，滅菌即得。魚腥草注射液中含β-環(huán)糊精衍生物的用量為0.5% 10% W/V。β-環(huán)糊精衍生物是指各種取代的β -環(huán)糊精，包括羥甲基-β -環(huán)糊精，羥乙基-β -環(huán)糊精，羥丙基-β -環(huán)糊精。魚腥草注射液主要有效成份為甲基正壬酮和癸酰乙醛，每毫升重蒸餾液中含甲基正壬酮的含量為1 μ g 20 μ g。本發(fā)明注射液的質(zhì)量控制方法如下鑒別(1)取本發(fā)明注射液5ml，置分液漏斗中，加稀鹽酸lml，用氯仿振搖提取 2 3次，每次5ml，分取氯仿液，揮干，殘?jiān)託溲趸c試液3ml使溶解，加二硝基苯胼試液 lml，振搖，即生成橙紅色沉淀；(2)取本發(fā)明注射液anl，加品紅亞硫酸試液3 5滴，放置片刻，即顯粉紅色或紅紫色；含量測(cè)定照氣相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VID)測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)0V-17毛細(xì)管柱，柱溫120°C ；理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計(jì)算應(yīng)不低于8000 ；校正因子測(cè)定取正十五烷適量，精密稱定，加無(wú)水乙醇制成每Iml含0. 3mg的溶液；作為內(nèi)標(biāo)溶液，另取甲基正壬酮對(duì)照品5mg，精密稱定，置IOOml量瓶中，加無(wú)水乙醇溶液并稀釋至刻度；精密量取1ml，置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液50ul，搖勻，吸取 2ul，注入氣相色譜儀，計(jì)算校正因子；供試品溶液的制備與測(cè)定精密量取本發(fā)明注射液25ml，通過(guò)C8小柱 (IOOmg lml)ft，用醋酸乙酯-乙醇(70 30)混合液洗脫；收集洗脫液約Iml置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液50ul，搖勻，作為供試品溶液，吸取2ul，注入氣相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明注射液每Iml含甲基正壬酮(C11H22O)不得少于1. Ougo本發(fā)明中，初蒸餾液的收集量依據(jù)初蒸餾液中有效成分含量而定，至基本上無(wú)有效成分蒸出為止，而不是現(xiàn)有技術(shù)的收集初蒸餾液至1 1[鮮魚腥草(g)初蒸餾液 (ml)]，使魚腥草中的揮發(fā)油能充分利用。本發(fā)明中重蒸餾液的收集量依據(jù)重蒸餾液中有效成分含量而定，可規(guī)定范圍。目前認(rèn)為魚腥草中主要的有效成分是甲基正壬酮和癸酰乙醛，都可用化學(xué)方法測(cè)定含量?，F(xiàn)行魚腥草注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定每毫升含甲基正壬酮 (C11H22O)不得少于1. Oug，未規(guī)定上限。本發(fā)明的魚腥草注射液有效成分甲基正壬酮含量為 1 20ug/ml，實(shí)際生產(chǎn)中根據(jù)臨床需要及給藥途徑，確定含量范圍。本發(fā)明的制備方法中采用羥丙基環(huán)糊精做魚腥草注射液增溶劑，它極易溶于水，且無(wú)毒，無(wú)溶血和無(wú)刺激性。有人給病人靜脈注射羥丙基環(huán)糊精1.5g/Kg無(wú)影響，另一試驗(yàn)中注射羥丙基- β -環(huán)糊精的劑量為一日470mg/Kg，濃度5 %，4天總劑量達(dá)到 30g，也無(wú)不良影響(謝伯泰，國(guó)外醫(yī)學(xué)合成藥制劑分冊(cè)2002 23(5) :302)。羥丙基-β-環(huán)糊精的增溶機(jī)理是利用它的中空筒狀結(jié)構(gòu)，中心有一空腔，藥物分子可以進(jìn)入空腔，形成包合物，而達(dá)到增溶目的。魚腥草蒸餾液中加入羥丙基-β -環(huán)糊精，魚腥草中揮發(fā)油可以進(jìn)入羥丙基-β-環(huán)糊精的空腔生成包合物分散在藥液中而制得澄明液體。因此本發(fā)明能充分利用不同產(chǎn)地，不同季節(jié)，不同種質(zhì)魚腥草中的揮發(fā)油，制成高含量有效成份的魚腥草注射液，大幅度降低生產(chǎn)成本。且首次實(shí)現(xiàn)制備無(wú)吐溫-80的魚腥草注射液，所制得的注射液無(wú)溶血，無(wú)毒性，解決了現(xiàn)有技術(shù)中魚腥草注射液因加入表面活性劑如吐溫-80而產(chǎn)生的溶血作用和不能制成含高濃度揮發(fā)油注射液以及不能充分利用魚腥草中揮發(fā)油等問(wèn)題，質(zhì)量穩(wěn)定，澄明度好，配制簡(jiǎn)便；提高了藥物療效，降低了不良反應(yīng)；可以肌注或加入葡萄糖或氯化鈉注射液中靜滴，也可直接靜滴；注射劑劑量更準(zhǔn)確，使用更安全、更方便，更穩(wěn)定，
5并使其大量用藥成為可能。下面實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例1 羥丙基環(huán)糊精用作魚腥草注射液增溶劑用量篩選及對(duì)澄明度影響工藝研究取鮮魚腥草全草，洗凈，置蒸餾鍋中，加適量水，進(jìn)行水蒸汽蒸餾，收集初蒸餾液至全草重量的1倍(g/ml)，再重蒸餾，收集重蒸餾液至全草重量的1/2，重蒸餾液中加0. 7 %的氯化鈉，攪拌溶解，加注射用水至配制量，備用。取上述魚腥草重蒸餾液各400ml，按下表加不同用量的羥丙基-β-環(huán)糊精和吐溫-80，混勻，置集熱式恒溫磁力攪拌器中，恒溫于70°C，攪拌1小時(shí)。冷卻至室溫，用 0. 65 μ m濾膜抽濾，取濾液按照《中國(guó)藥典》2000年版二部附錄IX B澄清度檢查法進(jìn)行澄清度檢查。結(jié)果見下表1和表2。表1兩種不同增溶劑增溶魚腥草注射液燈檢澄清度比較
權(quán)利要求
1.一種魚腥草注射液的制備方法，其特征在于該制備方法為將新鮮魚腥草全草投入蒸餾鍋中，加適量水，水蒸汽蒸餾，至蒸餾液取2ml加品紅亞硫酸試液3 5滴不顯紅色，收集初蒸餾液，將初蒸餾液重蒸餾，至收取的重蒸餾液中甲基正壬酮含量達(dá)1 20 μ g/ml，加入0. 5% 10% W/V的β -環(huán)糊精衍生物及滲透壓調(diào)節(jié)劑氯化鈉或葡萄糖至等滲，調(diào)PH值到4. 0 6. 0，濾過(guò)，灌封，滅菌而制成注射液。
2.如權(quán)利要求1所述的一種魚腥草注射液的制備方法，其特征在于該制備方法為 將新鮮魚腥草全草投入蒸餾鍋中，加適量水，水蒸汽蒸餾，至收取的蒸餾液2ml加品紅亞硫酸試液3 5滴不顯紅色，收集初蒸餾液，將初蒸餾液重蒸餾，至收取的重蒸餾液甲基正壬酮含量4 6ug/ml，加入0. 5% W/V的β -環(huán)糊精衍生物及滲透壓調(diào)節(jié)劑氯化鈉至等滲，調(diào)PH值至4. 5 5. 5，濾過(guò)，灌封，滅菌而制成注射液。
3.如權(quán)利要求1所述的一種魚腥草注射液的制備方法，其特征在于該制備方法為 將新鮮魚腥草全草投入蒸餾鍋中，加適量水，水蒸汽蒸餾，至收取的蒸餾液2ml加品紅亞硫酸試液3 5滴不顯紅色，收集初蒸餾液，將初蒸餾液重蒸餾，至收取的重蒸餾液甲基正壬酮含量4 6ug/ml，加入0. 75% W/V的β -環(huán)糊精衍生物及滲透壓調(diào)節(jié)劑氯化鈉至等滲，調(diào)PH值至5. 0 6. 0，濾過(guò)，灌封，滅菌而制成注射液。
4.如權(quán)利要求1所述的一種魚腥草注射液的制備方法，其特征在于該制備方法為 將新鮮魚腥草全草投入蒸餾鍋中，加適量水，水蒸汽蒸餾，至收取的蒸餾液2ml加品紅亞硫酸試液3 5滴不顯紅色，收集初蒸餾液，將初蒸餾液重蒸餾，至收取的重蒸餾液甲基正壬酮含量4 6ug/ml，加入1. 0% W/V的β -環(huán)糊精衍生物及滲透壓調(diào)節(jié)劑葡萄糖至等滲，調(diào)PH值至4. 0 5. 0，濾過(guò)，灌封，滅菌而制成注射液。
5.如權(quán)利要求1所述的一種魚腥草注射液的制備方法，其特征在于該制備方法為 將新鮮魚腥草全草投入蒸餾鍋中，加適量水，水蒸汽蒸餾，至收取的蒸餾液2ml加品紅亞硫酸試液3 5滴不顯紅色，收集初蒸餾液，將初蒸餾液重蒸餾，至收取的重蒸餾液甲基正壬酮含量4 6ug/ml，加入5% W/V的β -環(huán)糊精衍生物及滲透壓調(diào)節(jié)劑葡萄糖至等滲， 調(diào)PH值至4. 0 5. 5，濾過(guò)，灌封，滅菌而制成注射液。
6.如權(quán)利要求1、2、3、4、5所述的一種魚腥草注射液的制備方法，其特征在于β-環(huán)糊精衍生物包括羥甲基- β -環(huán)糊精、羥乙基- β -環(huán)糊精、羥丙基- β -環(huán)糊精。
7.—種魚腥草注射液的質(zhì)量控制方法，其特征在于該質(zhì)量控制方法中鑒別方法包括下列方法中的一種或兩種Α.取注射液5ml，置分液漏斗中，加稀鹽酸1ml，用氯仿振搖提取2 3次，每次5ml，分取氯仿液，揮干，殘?jiān)託溲趸c試液3ml使溶解，加二硝基苯胼試液1ml，振搖，即生成橙紅色沉淀；B.取注射液anl，加品紅亞硫酸試液3 5滴，放置片刻，即顯粉紅色或紅紫色。
8.如權(quán)利要求7所述的一種魚腥草注射液的質(zhì)量控制方法，其特征在于該質(zhì)量控制方法中含量測(cè)定方法為用照氣相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)0V-17毛細(xì)管柱，柱溫120°C ；理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計(jì)算應(yīng)不低于8000 ；校正因子測(cè)定取正十五烷適量，精密稱定，加無(wú)水乙醇制成每Iml含0. 3mg的溶液；作為內(nèi)標(biāo)溶液，另取甲基正壬酮對(duì)照品5mg，精密稱定，置IOOml量瓶中，加無(wú)水乙醇溶液并稀釋至刻度；精密量取Iml，置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液50ul，搖勻，吸取2ul，注入氣相色譜儀，計(jì)算校正因子；供試品溶液的制備與測(cè)定精密量取注射液25ml，通過(guò)(8小柱，用比例為70 30的醋酸乙酯-乙醇混合液洗脫；收集洗脫液約Iml置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液50ul，搖勻， 作為供試品溶液，吸取2ul，注入氣相色譜儀，測(cè)定，即得； 注射液每Iml含甲基正壬酮不得少于1. Ougo
9.如權(quán)利要求7所述的一種魚腥草注射液的質(zhì)量控制方法，其特征在于該質(zhì)量控制方法為鑒別A.取注射液5ml，置分液漏斗中，加稀鹽酸lml，用氯仿振搖提取2 3次，每次 5ml，分取氯仿液，揮干，殘?jiān)託溲趸c試液3ml使溶解，加二硝基苯胼試液1ml，振搖，即生成橙紅色沉淀；B.取注射液2ml，加品紅亞硫酸試液3 5滴，放置片刻，即顯粉紅色或紅紫色； 含量測(cè)定 照氣相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)0V-17毛細(xì)管柱，柱溫120°C ；理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計(jì)算應(yīng)不低于8000 ；校正因子測(cè)定取正十五烷適量，精密稱定，加無(wú)水乙醇制成每Iml含0. 3mg的溶液； 作為內(nèi)標(biāo)溶液，另取甲基正壬酮對(duì)照品5mg，精密稱定，置IOOml量瓶中，加無(wú)水乙醇溶液并稀釋至刻度；精密量取Iml，置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液50ul，搖勻，吸取2ul，注入氣相色譜儀，計(jì)算校正因子；供試品溶液的制備與測(cè)定精密量取注射液25ml，通過(guò)(8小柱，用比例為70 30的醋酸乙酯-乙醇混合液洗脫；收集洗脫液約Iml置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液50ul，搖勻， 作為供試品溶液，吸取2ul，注入氣相色譜儀，測(cè)定，即得； 注射液每Iml含甲基正壬酮不得少于1. Ougo
全文摘要
本發(fā)明公開了一種魚腥草注射液的制備方法及質(zhì)量控制方法。本發(fā)明注射液的制備方法為取鮮魚腥草全草進(jìn)行水蒸汽蒸餾，收集初蒸餾液，再進(jìn)行重蒸餾，收集重蒸餾液，加入滲透壓調(diào)節(jié)劑及β-環(huán)糊精衍生物，調(diào)PH值，濾過(guò)，灌封，滅菌制成注射液。本發(fā)明制備方法首次實(shí)現(xiàn)制備無(wú)吐溫-80的魚腥草注射液，所制成的魚腥草注射液無(wú)溶血作用，且含有效成份的濃度高，可以肌注也可靜滴，使用更安全，更穩(wěn)定。本發(fā)明質(zhì)量控制方法包括對(duì)甲基正壬酮和癸酰乙醛的鑒別方法和對(duì)甲基正壬酮的含量測(cè)定方法，能有效控制產(chǎn)品質(zhì)量。
文檔編號(hào)A61P37/04GK102335271SQ20111028129
公開日2012年2月1日 申請(qǐng)日期2004年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月28日
發(fā)明者何曉麗, 吳飛馳, 徐乃煥, 董紹象, 袁濤 申請(qǐng)人:湖南正清制藥集團(tuán)股份有限公司