專利名稱：防治肉雞腎型傳染性支氣管炎的中藥制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及防治肉雞腎型傳染性支氣管炎的藥物。
背景技術(shù)：
畜禽病毒性疾病是嚴(yán)重危害畜牧生產(chǎn)的一類傳染病，它不僅可以造成畜禽大批死亡，畜禽生產(chǎn)性能降低，畜產(chǎn)品質(zhì)量下降而直接影響人民的經(jīng)濟(jì)收入和對(duì)外貿(mào)易，而且某些人畜共患病還威脅著人類健康。我國獸醫(yī)中藥具有悠久的歷史，隨著人們對(duì)綠色畜產(chǎn)品的需求越來越大，具有來源廣泛、療效顯著、無殘留、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)的中藥作為化學(xué)藥物的替代品用于防治畜禽病毒性疾病越來越受到人們的重視。中獸醫(yī)在禽病的診斷及防治中的應(yīng)用，近百年來有了長(zhǎng)足的發(fā)展，而且人們?cè)陂L(zhǎng)期防病治病過程中創(chuàng)造和積累了很多寶貴經(jīng)驗(yàn)，形成了我國獨(dú)特的中藥學(xué)理論，隨著現(xiàn)代科技的不斷發(fā)展，中藥研究將不斷的深入，中藥在防治畜禽病毒性疾病中必將發(fā)揮更大的作用。雞傳染性支氣管炎(Infectious bronchitis, IB)是由傳染性支氣管炎病毒(IBvirus, IBV )引起的嚴(yán)重危害世界養(yǎng)雞業(yè)的一種急性高度接觸性傳染病。呼吸道上皮細(xì)胞為IBV原發(fā)的和主要的增殖部位，但部分毒株也可以在感染雞的腎臟、輸卵管和腸道等組織器官的上皮細(xì)胞中復(fù)制和增殖，造成感染雞發(fā)生腎炎或產(chǎn)蛋母雞的產(chǎn)蛋量下降以及蛋品質(zhì)的下降，給養(yǎng)禽業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。由于IB具有高度的遺傳變異和廣泛的組織嗜性，給防治帶來很大麻煩。藥物是防治禽呼吸道疾病綜合征的主要手段，為了有效的預(yù)防和控制該病的發(fā)生，目前對(duì)肉雞腎型傳染性支氣管炎的治療主要是進(jìn)行免疫預(yù)防、西藥治療等手段。由于病毒血清型較多，交叉保護(hù)率低，一種疫苗不可能在所有的養(yǎng)雞地區(qū)均收到良好的免疫效果。西藥主要是針對(duì)細(xì)菌性因素和病毒感染后控制細(xì)菌的感染，多為抗生素類和抗病毒類藥物，容易產(chǎn)生耐藥菌和產(chǎn)生抗生素的藥殘，使其使用受到很大的限制。
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我國的傳統(tǒng)中獸醫(yī)學(xué)博大精深，治療疾病講究整體且標(biāo)本兼治。中藥由于其高效、低藥物殘留越來越多的應(yīng)用到動(dòng)物疫病的防治中來，大量研究表明，用中藥治療病毒性疾病有其獨(dú)特的療效，因此研究利用中藥來防治病毒性疾病成為當(dāng)今中獸醫(yī)學(xué)界的熱點(diǎn)。雖然中藥用于IB的防治已有了大量的研究工作，但已經(jīng)報(bào)道的方劑中多以散劑為主，投藥不方便，且影響療效，對(duì)禽呼吸系統(tǒng)疾病防治有一定的困難，因此，研制出集對(duì)癥治療、抗毒、抑菌、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、高效、無毒、便于生產(chǎn)于一體的新型防治藥物具有十分重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種防治肉雞腎型傳染性支氣管炎的中藥制劑，能有效防治肉雞腎型傳染性支氣管炎，標(biāo)本兼治、治愈率高，且投藥方便，不產(chǎn)生抗藥性，無藥物殘留；能提高肉雞抗氧化能力、腎功能及免疫能力，降低死亡率，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益，有利于推動(dòng)肉雞產(chǎn)業(yè)向安全、衛(wèi)生、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保型發(fā)展的進(jìn)程。
本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是:
一種防治肉雞腎型傳染性支氣管炎的中藥制劑，其由下述重量份的中藥原料制成:麻黃90-110份、板藍(lán)根55-70份、大青葉50-65份、貫眾50-65份、獨(dú)活20-35份、柴胡25-40份、前胡20-40份、桔梗40-60份、川芎20-40份、蟾酥1-4份、甘草15-25份。優(yōu)選的，其由下述重量份的中藥原料制成:麻黃95-102份、板藍(lán)根60-65份、大青葉55-60份、貫眾55-60份、獨(dú)活25-30份、柴胡30-40份、前胡25-35份、桔梗45-55份、川芎25-30份、蟾酥2-3份、甘草20-25份。更優(yōu)選的，其由下述重量份的中藥原料制成:麻黃100份、板藍(lán)根60份、大青葉60份、貫眾60份、獨(dú)活30份、柴胡30份、前胡30份、桔梗50份、川彎30份、蟾酥2份、甘草20份。本發(fā)明還提供 了上述中藥制劑的制備方法，包括下述步驟:按重量配比稱取中藥原料，加入中藥原料10-20倍重量的水浸泡20-40min，煎煮20_40min，倒出藥液；加入中藥原料10-15倍重量的水再煎煮20-40min，兩次藥液合并，濃縮、離心后定容至生藥濃度為lg/mL。預(yù)防用法用量:將中藥制劑用水稀釋至質(zhì)量濃度為0.2%-0.3%，按照雞的正常飲水量一日兩次飲用，連用12天。治療用法用量:將中藥制劑用水稀釋至質(zhì)量濃度為0.4%-0.6%，按照雞的正常飲水量一日兩次飲用，連用6天。此組方中，麻黃:歸肺、膀胱經(jīng)，發(fā)汗散寒，宣肺平喘，利水消腫；板藍(lán)根:歸胃、肝經(jīng)，清熱解毒，涼血利咽；大青葉:入肝、脾二經(jīng)，清熱，解毒，主治流行性感冒，急性傳染性肝炎，急性胃腸炎，急性肺炎；貫眾:《中華本草》中記載，入肝、腎二經(jīng)，有清熱、解毒，主風(fēng)熱感冒之功效；獨(dú)活:入腎、膀胱經(jīng)，祛風(fēng)，勝濕，散寒，止痛。治風(fēng)寒濕痹，腰膝酸痛，手腳攣痛，慢性氣管炎，頭痛，齒痛；柴胡:歸肝、膽經(jīng)，和解表里，疏肝，升陽；前胡:歸肺經(jīng)，散風(fēng)清熱，降氣化痰；桔梗:歸肺經(jīng)，宣肺，利咽，祛痰，排膿；川芎:歸肝經(jīng)、膽經(jīng)，活血行氣，祛風(fēng)止痛；蟾酥:歸心經(jīng)，解毒，止痛，開竅醒神；甘草:歸心、肺、脾、胃經(jīng)，補(bǔ)脾益氣，清熱解毒，祛痰止咳，緩急止痛，調(diào)和諸藥。本發(fā)明根據(jù)中獸醫(yī)整體觀念和辨證論治理論擬定中藥組方，然后用飼養(yǎng)試驗(yàn)研究中藥組方對(duì)人工感染的肉雞腎型傳染性支氣管炎病進(jìn)行治療和預(yù)防保護(hù)性試驗(yàn)，觀察防治效果，研究中藥組方對(duì)肉雞腎功能的影響，并通過檢測(cè)機(jī)體的免疫機(jī)能、抗氧化機(jī)能揭示其機(jī)理，旨在為臨床防治肉雞腎型傳染性支氣管炎病提供新的思路和科學(xué)依據(jù)。臨床劑量和防治機(jī)理實(shí)驗(yàn)如下:
1、劑量的篩選
為了進(jìn)一步明確中藥組方臨床療效的穩(wěn)定性和臨床劑量，進(jìn)行臨床劑量的篩選試驗(yàn)。將240只I日齡健康肉仔雞隨機(jī)分成8組，正常對(duì)照組、感染對(duì)照組、低劑量預(yù)防組、中劑量預(yù)防組、高劑量預(yù)防組、低劑量治療組、中劑量治療組、高劑量治療組，每組30只。本實(shí)驗(yàn)中，中藥制劑按照下述組方制備:麻黃100g、板藍(lán)根60g、大青葉60g、貫眾60g、獨(dú)活30g、柴胡30g、前胡30g、桔梗50g、川芎30g、蟾酥2g、甘草20g，加入中藥原料10倍重量的水浸泡20min，煎煮20min，倒出藥液；加入中藥原料10倍重量的水再煎煮20min，兩次藥液合并，濃縮、離心后定容至生藥濃度為lg/mL。預(yù)防組I日齡雛雞常規(guī)飼養(yǎng)預(yù)飼3d后(第4d)，中藥預(yù)防組將中藥制劑按給藥濃度
0.1%、0.2%和0.3%投放到各對(duì)應(yīng)組飲水中，分上、下午2次給藥，連續(xù)飲用12d。復(fù)方中藥組用藥第7d和感染對(duì)照組同時(shí)每只雞鼻腔接種(滴鼻)IBV毒株0.3ml攻毒，正常對(duì)照組不攻毒，不喂藥，滴鼻0.3ml生理鹽水，觀察10d，統(tǒng)計(jì)發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)和存活數(shù)。治療組常規(guī)飼養(yǎng)至IOd的雛雞每只雞鼻腔接種(滴鼻)IBV毒株0.3ml攻毒，攻毒后48 h，分別在飲水中投放0.2%、0.4%和0.6%的藥物，每天上、下午各I次，連用6d ;觀察IOd,統(tǒng)計(jì)發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)和存活數(shù)。將攻毒雞只隔離在密閉健康環(huán)境中飼養(yǎng)。飼養(yǎng)環(huán)境中人工調(diào)節(jié)室溫，每日均給予保持低溫環(huán)境10-15°C 2-4h，其他時(shí)間保持房間的室溫18-20°C左右，并利用頻繁室內(nèi)灑水使室內(nèi)濕度保持在70%以上。結(jié)果表明:感染對(duì)照組死亡率為66.7%，低劑量預(yù)防組、中劑量預(yù)防組、高劑量預(yù)防組感染IBV后存活率分別為83.33%,93.33%,93.33%，明顯高于感染對(duì)照組的30.00%，差異顯著(P〈0.05)。這充分說明試驗(yàn)中所用中藥制劑對(duì)IBV病有明顯的預(yù)防效果。中劑量組與高劑量組攻毒后的發(fā)病率、死亡率及存活率相同，上述結(jié)果表明中劑量組為預(yù)防肉雞腎型傳染性支氣管炎的最佳劑量。使用給藥濃度為0.3%、0.2%、0.1%和0.6%、0.4%和0.2%的中藥制劑防治人工感染
肉雞腎型傳染性支氣管炎病，均·可降低雞的發(fā)病率和死亡率，通過防治效果比較，對(duì)肉雞傳染性支氣管炎的預(yù)防最低有效劑量為0.2%，而治療最低有效劑量為0.4%。本發(fā)明的中藥制劑考慮到中藥制劑組方的調(diào)整對(duì)治療效果的影響，將預(yù)防添加劑量確定為0.2%-0.3%，治療添加劑量確定為0.4%-0.6%。中藥制劑預(yù)防效果對(duì)雞的保護(hù)率比對(duì)照組高2.8倍，達(dá)到了明顯的預(yù)防效果。治療效果對(duì)雞的保護(hù)率比感染對(duì)照組提高2.7倍，達(dá)到了良好的治療效果。2、中藥制劑防治肉雞腎型傳染性支氣管炎的機(jī)理
將90只I日齡健康肉仔雞隨機(jī)分成3組，正常對(duì)照組、感染對(duì)照組、中藥制劑治療組，每組30只。中藥制劑治療組常規(guī)飼養(yǎng)至IOd的雛雞和感染對(duì)照組同時(shí)每只雞鼻腔接種(滴鼻)IBV毒株0.3ml攻毒，中藥制劑治療組于攻毒后48 h,在飲水中投放0.4%的中藥制劑，2次/日，每天上、下午各I次，連續(xù)用藥6d。將攻毒雞只隔離在密閉健康環(huán)境中飼養(yǎng)。飼養(yǎng)環(huán)境中人工調(diào)節(jié)室溫，每日均給予保持低溫環(huán)境10_15°C 2-4h，其他時(shí)間保持房間的室溫18-20°C左右，并頻繁室內(nèi)灑水使室內(nèi)濕度保持在70%以上。正常對(duì)照組不攻毒，不喂藥，滴鼻0.3ml生理鹽水。攻毒后，感染對(duì)照組于24h后出現(xiàn)輕微的呼吸道癥狀，病雞表現(xiàn)精神沉郁，張口呼吸，甩頭，食欲減退或廢絕，排白色稀糞，48h后開始出現(xiàn)雞只倒地死亡，到96h后雞不死亡。而中藥制劑治療組，36h后出現(xiàn)臨床癥狀，但其癥狀較攻毒組輕。中藥對(duì)IBV有較好的治療效果，存活率為93.33%，明顯高于感染對(duì)照組的33.33%。差異顯著(P〈0.05)。中藥制劑對(duì)肉雞血清中IBV抗體(IBV-Ab)具有一定的影響，在攻毒后0_14天與感染對(duì)照組、正常對(duì)照組相比沒有明顯差異，而到21d以后，中藥制劑治療組與感染對(duì)照組抗體水平差異顯著(P〈0.05)，中藥制劑治療組抗體水平為2.48ng/ml，而感染對(duì)照組僅為0.95ng/ml。IBV感染肉雞可使血清中肌酐(CR)水平升高，在攻毒前其含量為192.45，而攻毒后第7d其含量升高到260.65 umol/ml。而中藥制劑對(duì)肉雞血清中肌酐具有一定的影響，治療組第七天肌酐含量明顯下降，與感染對(duì)照組相比差異顯著(P〈0.05)，并且中藥制劑治療組在停藥后肌酐水平也處于較低水平。中藥制劑可顯著降低感染IBV肉雞血清中尿素氮(BUN)含量，中藥治療組感染第7d后其血清BUN含量為2.15mmol/ml，而同期感染對(duì)照組BUN含量為3.89 mmol/ml，其差異顯著(P〈0.05)。肉雞感染IBV后血清中超氧化物歧化酶(SOD )活性降低，而中藥制劑治療組SOD活性增加，中藥治療組感染第7d后，SOD活性為110.67 U/ml，而攻毒組SOD活性僅為63.27U/ml,差異顯著(P〈0.05)。肉雞感染IBV后血清中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性降低，而中藥制劑治療組GSH-PX活性增加，治療組感染第7d后，GSH-PX活性為368.67酶活力單位，而攻毒感染組GSH-PX活性僅為298.45酶活力單位，差異顯著(P〈0.05)。肉雞感染IBV后血清中丙二醛(MDA)含量升高，而中藥制劑治療組MDA含量降低，中藥制劑治療組感染第7d后，MDA含量為3.76 nmol/ml，而感染對(duì)照組MDA含量4.35 nmol/ml,差異顯著(P〈0.05)。結(jié)果表明:肉雞感染腎型傳染性支氣管炎后機(jī)體死亡率較高，超氧化物歧化酶(S0D)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性降低，而丙二醛(MDA)、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)含量升高，表明其腎臟損傷與氧自由基含量增多有關(guān)。本發(fā)明的中藥制劑可顯著降低病雞死亡率，顯著降低MDA、CR、BUN含量，與感染對(duì)照組比較差異顯著(P〈0.05);而且顯著提高SOD、GSH-PX的活性，與感染對(duì)照組比較差異顯著(P〈0.05);降低氧自由基的對(duì)腎臟等組織器官的損傷，同時(shí)還可提 高肉雞IBV抗體水平(P〈0.05)，從而對(duì)肉雞腎型傳染性支氣管炎具有較高的防治功效。采用上述技術(shù)方案所產(chǎn)生的有益效果在于:
1.本發(fā)明的中藥制劑能有效防治肉雞腎型傳染性支氣管炎，標(biāo)本兼治、治愈率高，且投藥方便，不產(chǎn)生抗藥性，無藥物殘留。2.本發(fā)明的中藥制劑能提高肉雞抗氧化能力、腎功能及免疫能力，降低死亡率，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益，有利于推動(dòng)肉雞產(chǎn)業(yè)向安全、衛(wèi)生、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保型發(fā)展的進(jìn)程。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
稱取下述重量份的中藥原料:麻黃100g、板藍(lán)根60g、大青葉60g、貫眾60g、獨(dú)活30g、柴胡30g、前胡30g、桔梗50g、川芎30g、蟾酥2g、甘草20g，加入中藥原料10倍重量的水浸泡20min,煎煮20min，倒出藥液；加入中藥原料10倍重量的水再煎煮20min，兩次藥液合并，濃縮、離心后定容至生藥濃度為lg/mL。實(shí)施例2
稱取下述重量份的中藥原料:麻黃90 g、板藍(lán)根63 g、大青葉50 g、貫眾58 g、獨(dú)活20g、柴胡28 g、前胡20 g、桔梗52 g、川芎30 g、蟾酥3 g、甘草15 g，加入中藥原料17倍重量的水浸泡20min，煎煮40min，倒出藥液；加入中藥原料15倍重量的水再煎煮40min，兩次藥液合并，濃縮、離心后定容至生藥濃度為lg/mL。實(shí)施例3
稱取下述重量份的中藥原料:麻黃102g、板藍(lán)根70 g、大青葉65 g、貫眾60 g、獨(dú)活25g、柴胡33 g、前胡40 g、桔梗60 g、川芎20 g、蟾酥4 g、甘草20 g，加入中藥原料13倍重量的水浸泡25min，煎煮35min，倒出藥液；加入中藥原料13倍重量的水再煎煮35min，兩次藥液合并，濃縮、離心后定容至生藥濃度為lg/mL。實(shí)施例4
稱取下述重量份的中藥原料:麻黃110 g、板藍(lán)根55 g、大青葉55 g、貫眾55g、獨(dú)活35g、柴胡30 g、前胡30 g、桔梗40 g、川芎40 g、蟾酥3g、甘草25 g，加入中藥原料20倍重量的水浸泡30min，煎煮30min，倒出藥液；加入中藥原料12倍重量的水再煎煮25min，兩次藥液合并，濃縮、離心后定容至生藥濃度為lg/mL。實(shí)施例5
稱取下述重量份的中藥原料:麻黃95 g、板藍(lán)根65g、大青葉60 g、貫眾65 g、獨(dú)活30g、柴胡25 g、前胡25 g、桔梗55 g、川芎25 g、蟾酥2g、甘草17g，加入中藥原料15倍重量的水浸泡35min，煎煮25min，倒出藥液；加入中藥原料11倍重量的水再煎煮20min，兩次藥液合并，濃縮、離心后定容至生藥濃度為lg/mL。

實(shí)施例6
稱取下述重量份的中藥原料:麻黃97 g、板藍(lán)根60g、大青葉52 g、貫眾50 g、獨(dú)活31g、柴胡40g、前胡35 g、桔梗45 g、川芎34 g、蟾酥I g、甘草22 g，加入中藥原料10倍重量的水浸泡40min，煎煮20min，倒出藥液；加入中藥原料14倍重量的水再煎煮40min，兩次藥液合并，濃縮、離心后定容至生藥濃度為lg/mL。
權(quán)利要求
1.一種防治肉雞腎型傳染性支氣管炎的中藥制劑，其特征在于由下述重量份的中藥原料制成:麻黃90-110份、板藍(lán)根55-70份、大青葉50-65份、貫眾50-65份、獨(dú)活20-35份、柴胡25-40份、前胡20-40份、桔梗40-60份、川芎20-40份、蟾酥1-4份、甘草15-25份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防治肉雞腎型傳染性支氣管炎的中藥制劑，其特征在于其由下述重量份的中藥原料制成:麻黃95-102份、板藍(lán)根60-65份、大青葉55-60份、貫眾55-60份、獨(dú)活25-30份、柴胡30-40份、前胡25-35份、桔梗45-55份、川芎25-30份、蟾酥2_3份、甘草20-25份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的防治肉雞腎型傳染性支氣管炎的中藥制劑，其特征在于其由下述重量份的中藥原料制成:麻黃100份、板藍(lán)根60份、大青葉60份、貫眾60份、獨(dú)活30份、柴胡30份、前胡30份、桔梗50份、川芎30份、蟾酥2份、甘草20份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的中藥制劑的制備方法，其特征在于包括下述步驟:按重量配比稱取中藥原料，加入中藥原料10-20倍重量的水浸泡20-40min，煎煮20_40min，倒出藥液；加入中藥原料10-1 5倍重量的水再煎煮20-40min，兩次藥液合并，濃縮、離心后定容至生藥濃度為lg/mL。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種防治肉雞腎型傳染性支氣管炎的中藥制劑及其制備方法，其由下述重量份的中藥原料制成麻黃90-110份、板藍(lán)根55-70份、大青葉50-65份、貫眾50-65份、獨(dú)活20-35份、柴胡25-40份、前胡20-40份、桔梗40-60份、川芎20-40份、蟾酥1-4份、甘草15-25份。本發(fā)明的中藥制劑能有效防治肉雞腎型傳染性支氣管炎，標(biāo)本兼治、治愈率高，且投藥方便，不產(chǎn)生抗藥性，無藥物殘留；能提高肉雞抗氧化能力、腎功能及免疫能力，降低死亡率，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益，有利于推動(dòng)肉雞產(chǎn)業(yè)向安全、衛(wèi)生、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保型發(fā)展的進(jìn)程。
文檔編號(hào)A61P11/00GK103191263SQ20131011202
公開日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2013年4月2日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月2日
發(fā)明者魯改儒, 安勝英, 劉觀忠, 仝軍 申請(qǐng)人:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)