專利名稱：藿香油在制備抗病毒藥物中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藿香油的新用途，特別涉及藿香油在制備抗病毒藥物中的用途。
背景技術(shù)：
由病毒引起的感染性疾病，一直嚴(yán)重威脅著人類的生命與健康。據(jù)統(tǒng)計(jì)，80%以上的傳染病是由病毒引起。病毒性疾病已涉及到臨床醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域，目前病毒及其造成的疾病成為許多學(xué)科關(guān)注的熱點(diǎn)，病毒感染疾病中最常見的就是由呼吸道病毒和腸道病毒造成的感染疾病。呼吸道病毒是一大類能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病變，或僅以呼吸道為侵入門戶引起呼吸道組織器官病變的病毒，是引起急性呼吸道傳染的主要病原體。目前，已知能引起急性呼吸道感染的病毒有10多種，包括流感病毒、副流感病毒、腺病毒、單純皰疹病毒、呼吸道合胞病毒等。據(jù)統(tǒng)計(jì)，90%以上急性呼吸道感染由病毒引起，尤以上呼吸道感染為臨床上的常見病和多發(fā)病，感染者中嚴(yán)重者呈細(xì)支氣管炎和肺炎，可引起急性呼吸窘迫和心衰，甚至導(dǎo)致死亡。呼吸道病毒易發(fā)生變異，從而增加其致病性，或引發(fā)一些新的疾病。其中流感病毒(influenza)是引起急性呼吸道感染性疾病流感的主要致病病毒，流感具有傳染性強(qiáng)、傳播快、人群反復(fù)易感等特點(diǎn)。據(jù)世界衛(wèi)生組織發(fā)布最新疫情通報(bào)，僅今年至今甲型HINI流感己在全球造成超過I萬人死亡，其在中亞、南亞地區(qū)的活動(dòng)更是持續(xù)加強(qiáng)。我國是流感的多發(fā)區(qū)，流感的流行或局部暴發(fā)基本上每年都會(huì)發(fā)生，使I億多人遭受流感的困擾，因流感到醫(yī)院就醫(yī)者超過50萬人，造成的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)難以統(tǒng)計(jì)。腺病毒的危害也不容忽視，腺病毒AdV (Adneovirus)是兒童呼吸道感染的常見病毒，最常引起的疾病是咽扁桃體炎，其次為肺炎、胃腸炎、支氣管炎及中耳炎，也可引起咽-結(jié)膜炎、腦炎、角膜炎、腸炎等，病死率甚高?？滤_奇病毒(Coxsaekieviurs)屬小核糖核酸病毒科(Picomaviridea),腸道病毒屬(Enterroviurs),根據(jù)其對(duì)乳鼠致病能力的不同可分為A組和B組?？滤_奇病毒B(Coxsackievirusgroup B, CVB)可引起流行性胸痛、無菌性腦炎、腦膜腦炎和心包炎,尤其CVB3是病毒性心肌炎的主要病原體，能引起心肌組織發(fā)生灶性壞死，并伴有炎性細(xì)胞浸潤，心肌細(xì)胞裂解等病理改變，病毒持續(xù)感染可導(dǎo)致擴(kuò)張性心肌病，給人類帶來了極大的威脅。20世紀(jì)90年代以來，研究人員發(fā)現(xiàn)不少新的抗病毒藥物，目前在臨床上應(yīng)用的抗病毒藥物已超過20余種，但其確切療效仍有很大爭議，并且抗病毒化學(xué)合成類藥物長期應(yīng)用后，病毒易對(duì)其產(chǎn)生耐藥性，現(xiàn)已成為臨床上治療病毒性疾病的棘手問題。現(xiàn)在常規(guī)用于防治病毒感染的藥物病毒唑(ribavirin)，通過抑制磷酸次嘌核脫氫酶，從而抑制病毒復(fù)制，早期用藥有效。但病毒唑靜脈給予時(shí)存在骨髓細(xì)胞毒性，因此最好只通過少量的氣霧劑經(jīng)呼吸道給予，但臨床應(yīng)用中常出現(xiàn)白細(xì)胞減少，劑量過大時(shí)可致頭痛、不可逆貧血、血清膽紅素升高等副作用，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)有致畸的報(bào)道。因此，抗病毒藥物的研究具有重要的實(shí)際意義，尋找一種高效、安全、副作用少的抗病毒藥物的研究勢在必行。我國的中藥資源極為豐富，應(yīng)用歷史悠久，在長期的實(shí)踐中積累了很多資料和經(jīng)驗(yàn)。中藥療效肯定，毒副作用小，藥源豐富且價(jià)格低廉。中醫(yī)理論中提出具有清熱，解毒作用的，如金銀花、大青葉、蒼術(shù)、黃芪等單味藥物，及板蘭根沖劑等復(fù)方藥物可在抗病毒方面發(fā)揮優(yōu)勢。體外實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)踐證明，多數(shù)病毒對(duì)中草藥敏感，如呼吸道病毒(流感病毒、麻疹病毒、流行性腮腺炎病毒)、腸道病毒(脊灰炎病毒、輪狀病毒、柯薩奇病毒)、煤病毒(流行性乙腦病毒、腦炎病毒)等使用中藥治療可獲得較好療效。一般藥理作用原理是通過抑制病毒復(fù)制，阻止病毒致細(xì)胞的病變，調(diào)節(jié)免疫作用，改善肺循環(huán)，減少和消除致病部位炎性滲出物等綜合作用，使病毒感染性疾病癥狀減輕或痊愈，因此中藥抗病毒有著潛在優(yōu)勢和廣闊的前景。廣藿香為唇形科(Labiatae)多年生刺蕊草本植物廣藿香(Pogostemoncablin (Blanco) Benth.),又名枝香,原產(chǎn)菲律賓等熱帶亞洲，現(xiàn)廣泛分布在中國、印度、日本、印度尼西亞、馬來西亞、馬達(dá)加斯加、巴西、巴拉圭和俄羅斯等。目前廣蕾香在廣東的廣州、肇慶、湛江以及海南、廣西、四川等省(區(qū))均有栽培，是“十大南藥”之一，其藥材商品按產(chǎn)地不同分為牌香(廣州產(chǎn))、枝香(肇慶產(chǎn))、湛香(湛江產(chǎn))和南香(海南產(chǎn))4種。其味辛，性微溫，歸脾、胃、肺經(jīng)，以全草入藥，具有芳香化濁、開胃止嘔、發(fā)表解暑之功效。常用于濕濁中阻、脘痞嘔吐，暑濕倦怠、胸悶不舒、寒濕閉暑、腹痛吐瀉、鼻淵頭痛、外感風(fēng)寒。廣藿香的揮發(fā)油具有抗炎、鎮(zhèn)痛和抗菌活性。藿香為唇形科植物藿香Agastache rugosa (Fisch.Et Mey.) 0.Ktze.的干燥地上部分，含有揮發(fā)油，功效同廣藿香?，F(xiàn)代藥理表明，廣藿香具有抗病原微生物、抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛等作用，是藿香正氣水、抗病毒口服液等治療流感、感冒常用中成藥的主要成分，但其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚不明確且未見有其體內(nèi)抗流感病毒作用·報(bào)道。藿香的揮發(fā)油具有抗菌作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供藿香油的新用途，以及以藿香油為活性成分的藥物組合物。本發(fā)明藿香油新用途是在制備抗病毒藥物中的用途。所述抗病毒藥物是抗流感病毒、CVB-3和/或腺病毒的藥物。所述抗病毒藥物是治療呼吸道感染性疾病、肺炎、中耳炎、病毒性心肌炎、結(jié)膜炎、腦炎、角膜炎、肝炎或/和腸炎的藥物。其中，所述的治療呼吸道感染性疾病的藥物是治療鼻炎、咽炎、扁桃體炎、喉炎、氣管炎或/和支氣管炎的藥物。其中，所述的藿香油來源于廣藿香Pogostemon cablin (Blanco)Benth.或藿香Agastache rugosa (Fisch.Et Mey.) 0.Ktze.提取的揮發(fā)油。其中，所述源于廣藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.的藿香油，百秋李醇含量不低于40% (w/w)，廣藿香酮含量不低于20% (w/w)0所述的藿香油是由以下方法制備得到的:取廣藿香Pogostemon cablin(Blanco)Benth.或藿香 Agastache rugosa (Fisch.Et Mey.) 0.Ktze.的全草，粉碎成粗粉，加水，浸泡，采用水蒸氣蒸餾法提取，即得藿香油。本發(fā)明抗病毒的藥物組合物，是以藿香油為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的藥劑。所述的藥劑是外用制劑、口服制劑或注射制劑。
所述外用制劑為洗劑、栓劑、涂膜劑或搽劑。所述制劑中藿香油的含量為0.1% 100% (w/w)。本發(fā)明藿香油具有抗病毒的作用，尤其是對(duì)流感病毒、CVB-3和/或腺病毒的抑制作用顯著，對(duì)病毒引起的急性呼吸道感染以及其他炎癥有治療作用，其中，對(duì)病毒性心肌炎、肺炎的療效確切，具有良好的臨床應(yīng)用前景。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明 的范圍。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本發(fā)明藿香油的制備取廣藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.全草，粉碎過 20-40 目篩，加入10-14倍重量的蒸餾水，浸泡1-5小時(shí)后，采用水蒸氣蒸餾法提取2-6小時(shí)，即得本發(fā)明藿香油，又稱廣藿香油，其中，含百秋李醇(C15H26O)不得低于40% w/w，廣藿香酮不得低于20%w/w ο實(shí)施例2本發(fā)明藿香油的制備取藿香Agastache rugosa (Fisch.Et Mey.) 0.Ktze.全草，粉碎過 20-40 目篩，力口入10-14倍重量的蒸餾水，浸泡1-5小時(shí)后，采用水蒸氣蒸餾法提取2-6小時(shí)，即得本發(fā)明
藿香油。本發(fā)明藿香油也可按照藥典(2005年版)附錄XD揮發(fā)油測定法提取，還可采用有機(jī)溶劑提取、超臨界CO2萃取等現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行提取，或者通過購買市售產(chǎn)品獲得。以下通過藥效試驗(yàn)證明本發(fā)明的有益效果:實(shí)驗(yàn)例I本發(fā)明藿香油體外抗病毒實(shí)驗(yàn)1、材料及儀器1.1細(xì)胞株和病毒株1.1.1 細(xì)胞株:MDCK細(xì)胞(犬腎細(xì)胞)、Hep-2細(xì)胞(人喉癌上皮細(xì)胞)、HeLa細(xì)胞(宮頸癌細(xì)胞)，購自中國藥品與生物制品檢定所。1.1.2 病毒株:甲型流感病毒選用A/PR/8/34病毒株，血清型為HlNl (以下簡稱流感病毒)，源自國家流感中心；柯薩奇病毒選用B組3型(以下簡稱CVB-3)，源自四川省臨檢中心；腺病毒選用常見的3型(Ad-3)，由甘肅省疾控中心饋贈(zèng)。1.2藥物及對(duì)照藥物試驗(yàn)藥物:發(fā)明藥物:實(shí)施例1制備的廣藿香油。陽性藥物:利巴韋林注射液:規(guī)格為100mg/ml，天津藥業(yè)焦作有限公司生產(chǎn)。批準(zhǔn)文號(hào):國藥準(zhǔn)字H19992467，生產(chǎn)批號(hào):10110521 ;注射用阿昔洛韋:規(guī)格為0.25g/瓶，天津藥業(yè)焦作有限公司生產(chǎn)。批準(zhǔn)文號(hào):國藥準(zhǔn)字H20034034，生產(chǎn)批號(hào):10122403。
1.3培養(yǎng)基、試劑及耗材RPM1-1640 培養(yǎng)基(Gibco 公司，批號(hào) 1313945) ;DMEM 培養(yǎng)基(Gibco 公司，批號(hào)1345538);胎牛血清(HyClone生物化學(xué)制品(北京)有限公司，批號(hào)NVM0347);胰蛋白酶(Amresco公司)；青霉素G鈉、鏈霉素?zé)o菌細(xì)胞培養(yǎng)瓶和96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(美國Corning公司)。1、5、IOml —次性吸管，200 μ l、lml —次性槍頭(江蘇海門生物耗材公司)1.4主要儀器隔水式恒溫CO2培養(yǎng)箱(型號(hào)MC0-15AC,日本三洋公司)；OLYMPUS倒置顯微鏡(型號(hào)CKX41，日本奧林巴斯公司)；微量移液器(法國GILSON公司生產(chǎn))；隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱(型號(hào)GSV-DA-1，湖北省黃石市醫(yī)療器械廠)；水平離心機(jī)(型號(hào)LXJ-1I，上海醫(yī)用分析儀器廠)；電子天平(型號(hào)JA-2603，上海天平儀器廠)。2、試驗(yàn)方法2.1藥物及陽性對(duì)照的前處理將發(fā)明藥物廣藿香油先用0.5%吐溫-80助溶為白色液體制劑，其初始濃度為20%(廣藿香油密度是1.012g/ml，濃度202.4mg/ml)。使用前用0.5%吐溫-80將此白色液體做1/10稀釋，過濾除菌后備用。將用于流感病毒和柯薩奇病毒的陽性對(duì)照藥物利巴韋林注射液和用于腺病毒的陽性對(duì)照藥物注射用阿昔洛韋用無菌水做1/10稀釋(S卩10mg/ml)以備用。2.250%組織細(xì)胞感染劑量的測定流感病毒和腺病毒用3%胎牛血清DMEM，柯薩奇病毒B3用3%胎牛血清RPM1-1640稀釋成不同濃度的病毒液。流感病毒接種MDCK細(xì)胞，柯薩奇病毒B3株接種HeLa細(xì)胞，腺病毒接種Hep-2細(xì)胞，于37 °C，5%C02孵箱中培養(yǎng)7d后觀察感染細(xì)胞圓縮、脫落等細(xì)胞病變(cytopathiceffect, CPE)情況，以測定各病毒引起50%組織細(xì)胞病變的感染劑量(50%tissue culture infective dose, TCID50)。2.3抗病毒實(shí)驗(yàn)在96孔培養(yǎng)板的MDCK單層細(xì)胞中加入100 X TCID50流感病毒液0.1ml，在HeLa單層細(xì)胞中加入100XTCID50CVB-3病毒液0.1ml以及在!fep-2單層細(xì)胞中加入100XTCID50Ad-3病毒液0.1ml，于37°C、5%C02吸附2小時(shí)，吸棄病毒液，分別加入稀釋好
的發(fā)明藥物和陽性對(duì)照藥，每個(gè)濃度做3復(fù)孔。實(shí)驗(yàn)同時(shí)設(shè)置感染等量病毒不給藥的感染對(duì)照和無病毒感染的正常細(xì)胞對(duì)照。各培養(yǎng)板于37°C、5%C02繼續(xù)培養(yǎng)5d，每天顯微鏡下觀察 CPE。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果及藥效學(xué)指標(biāo)計(jì)算3.1 各病毒的 TCID5tl 值流感病毒接種MDCK細(xì)胞后約3天出現(xiàn)CPE，柯薩奇病毒B3接種HeLa細(xì)胞和腺病毒Ad-3接種!fep-2 細(xì)胞后約5天出現(xiàn)CPE。流感病毒的TCID50效價(jià)為10_4，柯薩奇病毒Β3和腺病毒Ad-3的TCID50效價(jià)均為Kr12。3.3發(fā)明藥物抗病毒實(shí)驗(yàn)效果及藥效學(xué)指標(biāo)計(jì)算
3.3.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表I所示:表I發(fā)明藥物抗病毒實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=3)
權(quán)利要求
1.藿香油在制備抗病毒藥物中的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于:所述抗病毒藥物是抗流感病毒、CVB-3和/或腺病毒的藥物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于:所述抗病毒藥物是治療呼吸道感染性疾病、肺炎、中耳炎、病毒性心肌炎、結(jié)膜炎、腦炎、角膜炎、肝炎或/和腸炎的藥物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于，其特征在于:所述的治療呼吸道感染性疾病的藥物是治療鼻炎、咽炎、扁桃體炎、喉炎、氣管炎或/和支氣管炎的藥物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1 4任意一項(xiàng)所述的用途，其特征在于:所述的藿香油來源于廣藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.或藿香Agastache rugosa (Fisch.Et Mey.) 0.Ktze.提取的揮發(fā)油。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于:所述源于廣藿香Pogostemoncablin (Blanco)Benth.的藿香油，百秋李醇含量不低于40% (w/w),廣藿香酮含量不低于20% (w/w)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1 6任意一項(xiàng)所述的用途，其特征在于:所述的藿香油是按照如下方法制備:取廣藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.或藿香Agastacherugosa (Fisch.Et Mey.)0.Ktze.的全草,粉碎成粗粉,加水,浸泡,采用水蒸氣蒸懼法提取，即得。
8.一種抗病毒的藥物組合物，其特征在于:它是以藿香油為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的藥劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其特征在于:所述的藥劑是外用制劑、口服制劑或注射制劑。
10.根據(jù)權(quán)利要 求9所述的藥物組合物，其特征在于:所述口服制劑為片劑、膠囊劑、顆粒劑。
11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其特征在于:所述制劑中藿香油的含量為0.1^^100% (w/w)。
全文摘要
本發(fā)明公開了藿香油在制備抗病毒藥物中的用途。本發(fā)明還公開了一種抗病毒的藥物組合物，它是以藿香油為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的藥劑。本發(fā)明藿香油抗病毒的作用顯著，可以治療病毒引起的疾病，其中，對(duì)病毒性心肌炎、肺炎的療效確切，有較強(qiáng)的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
文檔編號(hào)A61K36/532GK103191183SQ20131014108
公開日2013年7月10日 申請日期2013年4月22日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月30日
發(fā)明者彭成, 魏曉露, 萬峰 申請人:成都中醫(yī)藥大學(xué), 成都華神集團(tuán)股份有限公司