專利名稱：抑制軟骨退化的藥用組合物的制作方法
軟骨是在哺乳動(dòng)物的關(guān)節(jié)中所發(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)性質(zhì)的物質(zhì)，它是一種覆蓋著滑液腔中的骨關(guān)節(jié)表面的彈性的海綿狀物質(zhì)。軟骨的存在及其壓縮彈性和變形性的特殊性質(zhì)使得關(guān)節(jié)能夠?qū)崿F(xiàn)其兩種主要的功能，即承受重量和便于運(yùn)動(dòng)的功能。
關(guān)節(jié)的退化出現(xiàn)在多種疾病情況下，所述疾病包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)病、增殖性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎。此外，關(guān)節(jié)急性炎癥可能伴隨有軟骨的破壞。涉及急性關(guān)節(jié)炎癥的疾病的例子有耶爾森氏菌性關(guān)節(jié)炎(yersiniaarthritis)、焦磷酸鹽性關(guān)節(jié)炎(pyrophosphatearthritis)、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎和膿毒性關(guān)節(jié)炎。此外，可能導(dǎo)致軟骨破壞或退化的另一個(gè)因素是用可的松治療。
本發(fā)明提供抑制人或其它哺乳動(dòng)物軟骨退化的方法，它包括給需要治療的人或其它哺乳動(dòng)物使用有效量的式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。式(Ⅰ)化合物如下
式中R1和R3獨(dú)立地為氫、-CH3、 式中的Ar是可任選地被取代的苯基;
R2選自吡咯烷子基(pyrrolidino)和哌啶子基。
本發(fā)明涉及這樣一個(gè)發(fā)現(xiàn)，即選擇的一組2-苯基-3-芳?；讲⑧绶?苯并噻吩類)，這些式(Ⅰ)化合物可用于抑制軟骨退化。本發(fā)明所提供的治療方法通過(guò)給需要抑制軟骨退化的人使用抑制軟骨退化有效量的式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物來(lái)實(shí)施。術(shù)語(yǔ)抑制被定義為包括其一般可接受的意義，這包括預(yù)防性治療易患軟骨退化的人以及控制和/或治療現(xiàn)存的軟骨退化。因此，本發(fā)明方法包括醫(yī)療性和/或預(yù)防性治療。
一般來(lái)講，所述化合物用普通的賦形劑、稀釋劑或載體來(lái)配制并壓制成片劑或者配制成酏劑或溶液劑用于常規(guī)口服，或者經(jīng)肌肉內(nèi)或靜脈內(nèi)途徑使用。所述化合物可以經(jīng)皮膚途徑來(lái)使用，而且可以被配制成緩釋劑型等。
用于本發(fā)明方法中的化合物可以按照已建立的方法來(lái)制備，例如在美國(guó)專利第4133814、4418068和4380635中所述的方法，所有這些文獻(xiàn)引入本文作參考。一般來(lái)講，所述方法用具有6-羥基和2-(4-羥苯基)基團(tuán)的苯并[b]噻吩開(kāi)始。將所述起始化合物保護(hù)、?；⑷ケＷo(hù)，制得式(Ⅰ)化合物。制備這樣的化合物的例子見(jiàn)上述的美國(guó)專利。取代的苯基包括用C1-C6烷基、C1-C4烷氧基、羥基、硝基、氯、氟或三(氯或氟)甲基取代一次或兩次的苯基。
用在本發(fā)明方法中的化合物與多種有機(jī)和無(wú)機(jī)酸和堿生成藥學(xué)上可接受的酸和堿加成鹽，包括在藥物化學(xué)中經(jīng)常使用的生理上可接受的鹽。這樣的鹽亦屬于本發(fā)明范圍。用來(lái)形成所述鹽的典型的無(wú)機(jī)酸，包括鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、硫酸、磷酸、連二磷酸等。衍生自有機(jī)酸的鹽也可以使用，所述有機(jī)酸包括例如脂族一和二羧酸、苯基取代的鏈烷酸、羥基鏈烷酸和羥基鏈烷二酸、芳香酸、脂族和芳族磺酸。因此，這樣的藥學(xué)上可接受的鹽包括乙酸鹽、苯基乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙烯酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、鄰乙酰氧基苯甲酸鹽、萘-2-苯甲酸鹽、溴化物、異丁酸鹽、苯基丁酸鹽、β-羥基丁酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、已炔-1，4-二酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、氯化物、肉桂酸鹽、檸檬酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、乙醇酸鹽、庚酸鹽、馬尿酸鹽、乳酸鹽、蘋(píng)果酸鹽、馬來(lái)酸鹽、羥基馬來(lái)酸鹽、丙二酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺?；?mesylate)、煙酸鹽、異煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、對(duì)苯二甲酸鹽、磷酸鹽、一氫磷酸鹽、二氫磷酸鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、丙炔酸鹽、丙酸鹽、苯基丙酸鹽、水楊酸鹽、癸二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、焦硫酸鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)溴苯磺酸鹽、氯苯磺酸鹽、乙磺酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、甲磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、酒石酸鹽等。優(yōu)選的鹽是鹽酸鹽。
所述藥學(xué)上可接受的酸加成鹽一般通過(guò)將式(Ⅰ)化合物與等摩爾或過(guò)量的酸反應(yīng)來(lái)制備。一般將反應(yīng)物在互溶劑如乙醚或苯中混合。鹽通常在約1小時(shí)至10天之內(nèi)從溶液中沉淀析出并可用過(guò)濾法來(lái)分離，或者可將溶劑用常規(guī)方法去除。
常用于成鹽的堿包括氫氧化銨和堿金屬的和堿土金屬的氫氧化物、碳酸鹽和碳酸氫鹽，以及脂肪族和芳香族胺、脂族二胺和羥基烷基胺。尤其可用于制備加成鹽的堿包括氫氧化銨、碳酸鉀、碳酸氫鈉、氫氧化鈣、甲胺、二乙胺、乙二胺、環(huán)已胺和乙醇胺。
所述藥學(xué)上可接受的鹽通常比衍生出該鹽的化合物溶解度增大，因此常常更適于配制成液體或乳劑。
藥物制劑可以用本領(lǐng)域已知的方法來(lái)制備。例如，可將該化合物與常規(guī)賦形劑、稀釋劑或載體一起配制，并制成片劑、膠囊劑、懸浮劑、粉劑等。適合于所述制劑的賦形劑、稀釋劑和載體的例子包括填充劑和增量劑，例如淀粉，糖，甘露醇和硅酸衍生物;粘合劑，例如羧甲基纖維素和其它纖維素衍生物，藻酸鹽，明膠和聚乙烯吡咯烷酮;潤(rùn)濕劑，例如甘油;崩解劑，例如瓊脂，碳酸鈣和碳酸氫鈉;阻溶劑，例如石蠟;吸收促進(jìn)劑，例如季銨化合物;表面活性劑，例如十六烷醇，甘油一硬脂酸酯;吸附載體，例如高嶺土和膨潤(rùn)土;以及潤(rùn)滑劑，例如滑石粉，硬脂酸鈣和硬脂酸鎂，以及固體聚乙二醇類。
所述化合物也可以被配制為常規(guī)口服用酏劑或溶液劑，或者被配制成適于腸道外注射例如肌肉內(nèi)、皮下或靜脈注射用溶液劑。另外，該化合物非常適于配制成緩釋劑型等。可將所述制劑配制成可能在一段時(shí)間內(nèi)僅僅或最好在腸道的特定部位釋放活性成分的制劑。包衣、膜和保護(hù)基質(zhì)可以例如用聚合物或蠟類來(lái)制備。
按照本發(fā)明，抑制軟骨退化所需的式(Ⅰ)化合物的特定劑量將取決于病情的嚴(yán)重程度、給藥途徑和將由執(zhí)疹醫(yī)生決定的相關(guān)因素。一般來(lái)講，可接受且有效的日劑量應(yīng)為約0.1-1000mg/天，更典型地為約50-200mg/天。應(yīng)將所述的劑量給需要治療的病人每天服用一至約三次，或者更常見(jiàn)的是根據(jù)有效地抑制軟骨退化的需要來(lái)服用。
通常優(yōu)選使用以酸加成鹽形式存在的式(Ⅰ)化合物，因?yàn)檫@在使用帶有堿性基團(tuán)例如哌啶子基環(huán)的藥品上是通行的。給正步入老年的人(例如絕經(jīng)后的婦女)口服這樣的化合物也是有利的。為此，下列口服劑型是合用的。
在下列制劑中，“活性成分”指式(Ⅰ)化合物。
制劑Ⅰ明膠膠囊用下列成分制備硬膠囊成分?jǐn)?shù)量(mg/膠囊)活性成分0.1-1000淀粉，NF0-650可流動(dòng)的淀粉粉末0-650硅氧烷液350厘沲0-15將上述成分混合，過(guò)第45號(hào)篩目美國(guó)篩，然后將其裝入硬膠囊中。
已經(jīng)制得的式中R2是哌啶子基的式(Ⅰ)化合物[拉洛西芬(ra-loxifene)]的特定膠囊制劑的例子包括以下所示制劑制劑2拉洛西芬膠囊成分?jǐn)?shù)量(mg/膠囊)拉洛西芬1淀粉，NF112可流動(dòng)的淀粉粉末225.3硅氧烷液350厘沲1.7制劑3拉洛西芬膠囊成分?jǐn)?shù)量(mg/膠囊)拉洛西芬5淀粉，NF108可流動(dòng)的淀粉粉末225.3
硅氧烷液350厘沲1.7制劑4拉洛西芬膠囊成分?jǐn)?shù)量(mg/膠囊)拉洛西芬10淀粉，NF103可流動(dòng)的淀粉粉末225.3硅氧烷液350厘沲1.7制劑5拉洛西芬膠囊成分?jǐn)?shù)量(mg/膠囊)拉洛西芬50淀粉，NF150可流動(dòng)的淀粉粉末397硅氧烷液350厘沲3.0以上特定制劑可以按照所提供的相當(dāng)?shù)淖償?shù)來(lái)變動(dòng)。
用以下成分來(lái)制備片劑制劑6片劑成分?jǐn)?shù)量(mg/片)活性成分0.1-1000微晶纖維素0-650煅制二氧化硅0-650硬脂酸0-15將這些成分混合并壓制成片劑。
或者，按下述制備各含0.1-1000mg活性成分的片劑制劑7片劑成分?jǐn)?shù)量(mg/片)活性成分0.1-1000淀粉45微晶纖維素35聚乙烯吡咯烷酮4(為10%水溶液)羧甲基纖維素鈉4.5硬脂酸鎂0.5滑石粉1將活性成分、淀粉和纖維素過(guò)第45號(hào)目篩美國(guó)篩并充分混合。將聚乙烯吡咯烷酮溶液與得到的粉末混合。然后過(guò)第14號(hào)篩目美國(guó)篩。將如此制得的顆粒于50-60℃干燥并過(guò)第18號(hào)篩目美國(guó)篩，然后將預(yù)先通過(guò)美國(guó)第60號(hào)篩的羧甲基纖維素鈉、硬脂酸鎂和滑石粉加至所述顆粒中，混合后，在壓片機(jī)上壓制成片劑。
每5ml劑量含0.1-1000mg藥物的懸浮劑制備如下制劑8懸浮劑成分?jǐn)?shù)量(mg/5ml)活性成分0.1-1000mg羧甲基纖維素鈉50mg糖漿1.25mg苯甲酸溶液0.10ml芳香劑適量著色劑適量?jī)艋又?ml將所述藥物通過(guò)第45號(hào)篩目美國(guó)篩并與羧甲基纖維素鈉和糖漿混合形成均勻的糊狀物。將苯甲酸溶液、芳香劑和著色劑用一些水稀釋，攪拌下將其加至所述糊狀物中。然后將足夠的水加至其中以達(dá)到需要的體積。
測(cè)定1將兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。將各種濃度的本發(fā)明化合物(10-9M至10-5M)和35[硫]酸鈉同時(shí)加至在無(wú)血清的培養(yǎng)基中的培養(yǎng)物中。48小時(shí)后，測(cè)定結(jié)合入所述細(xì)胞和基質(zhì)(用4M氯化鈲萃取)中的放射性標(biāo)記的量并與對(duì)照細(xì)胞相比較，以測(cè)定化合物對(duì)蛋白多糖合成的影響。
測(cè)定2將兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞用各種濃度的本發(fā)明化合物(10-5M至10-9M)在有和沒(méi)有恒定濃度的雌激素(10-8M)存在下處理，并按上述評(píng)價(jià)蛋白多糖合成。
測(cè)定3按上述測(cè)定1分離和放射性標(biāo)記兔軟骨細(xì)胞。然后將所述細(xì)胞用interleukin-1β(10ng/ml)連同本發(fā)明化合物一起和無(wú)本發(fā)明化合物存在下進(jìn)行處理24-72小時(shí)。觀察各細(xì)胞培養(yǎng)物中蛋白多糖的減少?；钚曰衔飳⒆璧K蛋白多糖減少。
測(cè)定4將牛軟骨切成5×1mm薄片并用35[硫]酸鈉標(biāo)記48小時(shí)，然后按測(cè)定3處理。預(yù)計(jì)活性化合物會(huì)阻止軟骨的蛋白多糖減少。
測(cè)定5為評(píng)價(jià)本發(fā)明化合物是否誘導(dǎo)TGF-βs(1，2，3)，將兔軟骨細(xì)胞用各種濃度的本發(fā)明化合物處理24-72小時(shí)，測(cè)定該條件培養(yǎng)基中的惰性和活性TGF-βs。
測(cè)定6將兔軟骨細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基中在本發(fā)明化合物存在或不存在的情況下用interleukin-1β(10ng/ml)處理48小時(shí)。在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，取出培養(yǎng)基并用3[H]-酷蛋白作中性蛋白酶活性的底物測(cè)定該酶的活性?；钚曰衔镆种朴蒳nterleukin-1誘導(dǎo)的酶的生成和/或活性。
測(cè)定7給C57B1小鼠從1-6個(gè)月齡開(kāi)始間歇皮下注射本發(fā)明化合物。治療過(guò)程持續(xù)6-12個(gè)月。將所述動(dòng)物在18-20月齡時(shí)處死，并用它們的膝關(guān)節(jié)來(lái)評(píng)價(jià)骨關(guān)節(jié)炎的情況。骨關(guān)節(jié)炎損害的發(fā)生率降低或嚴(yán)重程度減輕表明治療有效。
在以上測(cè)定中的所有活性表明本發(fā)明化合物可用于抑制軟骨退化。
權(quán)利要求
1.適于抑制軟骨退化的藥用組合物，它包括作為活性成分的式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物 式中R1和R3獨(dú)立地為氫、-CH3、 式中的Ar是可任選地被取代的苯基；R2選自吡咯烷子基和哌啶子基。
2.權(quán)利要求1的藥用組合物，其中所述的化合物是其鹽酸鹽。
3.權(quán)利要求1的藥用組合物，其中所述的組合物適于預(yù)防性使用。
4.權(quán)利要求1的藥用組合物，其中所述化合物是下式化合物或其鹽酸鹽
全文摘要
抑制軟骨退化的藥用組合物，它包括作為活性成分的上式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑化物，式中R
文檔編號(hào)A61K31/38GK1106260SQ9411724
公開(kāi)日1995年8月9日 申請(qǐng)日期1994年10月13日 優(yōu)先權(quán)日1993年10月15日
發(fā)明者D·C·威廉斯 申請(qǐng)人:伊萊利利公司