專利名稱：α－1抗胰蛋白酶在制備用于治療纖維肌痛的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及α-1抗胰蛋白酶(AAT)在制備可以有效治療纖維肌痛(FM)的藥物中的應(yīng)用。
纖維肌痛是特征在于非關(guān)節(jié)來(lái)源的慢性全身性肌肉骨骼痛的臨床現(xiàn)象。根據(jù)American College of Rheumatology(ACR)的分類標(biāo)準(zhǔn)(Wolfe F等Arthritis Rheum 1990；33160-248)，診斷纖維肌痛的兩個(gè)基本特征為存在持續(xù)3個(gè)月以上的全身疼痛和對(duì)指壓迫異常敏感，其中使用約4kg的力，在18個(gè)特定點(diǎn)中至少11個(gè)稱作″壓痛點(diǎn)″。除疼痛外，患者通常存在其它非特異性的癥狀，包括因勞累而加重的疲勞、晨僵、腫脹感覺(jué)和手部晨僵、難以睡眠和/或不能恢復(fù)精力的睡眠、無(wú)法解釋的頭痛、對(duì)溫度改變敏感、焦慮、結(jié)腸過(guò)敏等。這些癥狀有助于診斷，但不包括在診斷標(biāo)準(zhǔn)中。此外，按照ACR，存在第二種病癥不除外FM診斷。常用的實(shí)驗(yàn)室研究和影像研究就FM而言一般是陰性的非特異性的。
在對(duì)這些患者進(jìn)行的研究中出現(xiàn)的社會(huì)人口統(tǒng)計(jì)和臨床分布表明她們通常為女性(在80-90％的病例中)，平均年齡在35-60歲，患有疼痛情況的平均時(shí)間為6-12年，且經(jīng)過(guò)使其癥狀得到緩解的治療失敗的病史。
盡管這種綜合征的發(fā)病率(歐洲和北美人口的1.5-3％)和心理和社會(huì)花費(fèi)(都很高)，但是尚無(wú)清楚的有關(guān)其病因?qū)W或其藥理學(xué)療法的結(jié)論。
基于上述現(xiàn)有技術(shù)的狀態(tài)，很顯然存在對(duì)發(fā)現(xiàn)有效治療纖維肌痛的藥物的需求。
為了達(dá)到該目的，本發(fā)明者進(jìn)行了廣泛而深入的研究和試驗(yàn)，從而產(chǎn)生了基于α-1抗胰蛋白酶(AAT)在制備可有效治療纖維肌痛(FM)的藥物中的應(yīng)用的本發(fā)明。
α-1抗胰蛋白酶(AAT)是肝細(xì)胞中分泌的糖蛋白且一般以高濃度存在于血清和大部分組織中，其中它起絲氨酸蛋白酶抑制劑的作用。除作為抗蛋白酶活性外，AAT可以具有重要的抗炎生物功能，這是因?yàn)樗鼘?duì)許多炎性介質(zhì)和氧化劑基團(tuán)具有顯著的抑制能力(Brantly M.Am J Respir Cell Mol.Biol.，2002；27652-654)。
AAT缺乏是一種遺傳性疾病，它在30-40歲的成年人生命早期階段導(dǎo)致慢性阻塞性肺病(COPD)，主要是肺氣腫。更為常見(jiàn)的第二種表現(xiàn)為可以影響、新生兒、兒童和成年人的肝病。較不常見(jiàn)的是稱作壞死性脂膜炎的皮膚炎性疾病。
目前市場(chǎng)上存在治療性AAT制劑，它們一般從人血漿中得到，已經(jīng)證實(shí)了它們?cè)谥委熯@種蛋白質(zhì)缺乏的患者中具有治療有效性。
在本發(fā)明人進(jìn)行的研究和試驗(yàn)過(guò)程中，令人意外地發(fā)現(xiàn)α-1抗胰蛋白酶可以用于制備有效治療纖維肌痛的藥物，從而使得在定期輸注含有α-1抗胰蛋白酶(AAT)的藥物時(shí)，因該病產(chǎn)生的癥狀完全消失。
這一獲得的發(fā)現(xiàn)更加令人意外，即含有α-1抗胰蛋白酶的藥物的新治療應(yīng)用在任何方面均不與嚴(yán)格基于對(duì)表現(xiàn)為慢性阻塞性肺病(COPD)形式和脂膜炎形式的皮膚炎性疾病的其自身天然缺乏進(jìn)行補(bǔ)償?shù)囊阎狝AT應(yīng)用相關(guān)。
本發(fā)明人不希望受限于任何有關(guān)含有AAT的新藥物表現(xiàn)出它們用于治療纖維肌痛的方式的假設(shè)。在一種非限定方式的假設(shè)中，發(fā)明人認(rèn)為AAT在控制導(dǎo)致誘發(fā)疼痛的骨骼部分的結(jié)締組織中的炎性成分和纖維肌痛導(dǎo)致的生理限制中起重要作用。
為了驗(yàn)證通過(guò)實(shí)驗(yàn)方式確立的新藥物的這種作用，本發(fā)明人對(duì)人體進(jìn)行試驗(yàn)，將其具體內(nèi)容列在下面的實(shí)施例中。
實(shí)施例實(shí)施例1女性患者(患者1)被診斷為患有FM她存在18/18壓痛點(diǎn)且滿足該疾病的條件，且排除可能存在的與纖維肌痛相似的癥狀的其它病理情況。該患者開(kāi)始使用靜脈內(nèi)輸注AAT(60mg/kg/周)療法且在2-3次輸注AAT后，令人意外地發(fā)現(xiàn)經(jīng)歷了因FM產(chǎn)生的癥狀受到了逐步控制。而且這種效果在用AAT進(jìn)行交替(alternative)治療時(shí)也得到了維持。隨后她接受僅用于特定時(shí)間期限的交替療法，在那些特定期限之間停止該療法。在她不接受使用AAT的療法的過(guò)程中，發(fā)生與FM相關(guān)的癥狀逐步復(fù)發(fā)且在中斷治療后3-4周結(jié)束時(shí)又恢復(fù)到基礎(chǔ)狀態(tài)。當(dāng)再開(kāi)始使用AAT治療時(shí)，在2-3次輸注AAT后，幾次出現(xiàn)疼痛、疲勞和壓痛點(diǎn)消失。
表1表示患者血清中的AAT水平(mg/dl)，分別是基礎(chǔ)水平，輸注AAT后，和下一次輸注前。
實(shí)施例2女性患者(患者2)被診斷為患有FM她存在13/18壓痛點(diǎn)且滿足疾病的條件，且排除可能存在的與纖維肌痛相似的癥狀的其它病理情況。該患者開(kāi)始使用靜脈內(nèi)輸注AAT療法且如上述病例(實(shí)施例1)中所述在2-3次輸注AAT后，令人意外地發(fā)現(xiàn)因FM產(chǎn)生的癥狀受到了逐步控制。而且在用AAT進(jìn)行交替治療時(shí)，這種效果也得到了維持。隨后她接受了僅間斷地在特定時(shí)間期限進(jìn)行治療的的交替療法，即在那些特定期限之間停止該療法。在該患者不接受使用AAT的療法的過(guò)程中，同樣是與FM相關(guān)的癥狀逐步復(fù)發(fā)。當(dāng)再開(kāi)始使用該療法時(shí)，在2-3次輸注AAT后，有幾次都證實(shí)了疼痛、疲勞和壓痛點(diǎn)消失。
表1表示患者血清中的AAT水平(mg/dl)，分別是基礎(chǔ)水平，輸注AAT后，和下一次輸注前。
實(shí)施例3女性患者3，自35歲(1984)以來(lái)就患有極為嚴(yán)重的FM且她還患有輕度支氣管哮喘，但肺功能正常。在詳盡研究后，提出了她應(yīng)接受使用商購(gòu)AAT和安慰劑的酌情治療(8劑量產(chǎn)品AAT；和相同數(shù)量的安慰劑含有維生素B的生理血清)以便測(cè)試該治療對(duì)其FM的作用。在簽署試服志愿書(shū)后，開(kāi)始每周使用輸注AAT治療(60mg/kg/周，連續(xù)8周)。患者開(kāi)始在18處均存在壓痛點(diǎn)。從治療開(kāi)始后，觀察到慢性疼痛和疲勞逐步改善且從第4次劑量開(kāi)始，觀察到18個(gè)壓痛點(diǎn)消失且臨床癥狀顯著改善。該患者在開(kāi)始時(shí)不能進(jìn)行日常生活的基本活動(dòng)，諸如自己梳洗或穿衣且需要借助于第三者的幫助才能行走等。在第4次輸注后，她重新恢復(fù)了失去的功能且在給她輸入所述產(chǎn)品(2個(gè)月)的同時(shí)有利的情況得以維持。在第8次劑量后，轉(zhuǎn)而輸注安慰劑且在10-12天后，患者全身疼痛重新出現(xiàn)且觀察到18/18個(gè)壓痛點(diǎn)重新出現(xiàn)。用于評(píng)價(jià)該過(guò)程對(duì)患者影響的問(wèn)卷如下健康評(píng)價(jià)問(wèn)卷西班牙語(yǔ)版(Esteve-Vives JI Battle-Gualda E，Reig A健康評(píng)價(jià)調(diào)查表西班牙語(yǔ)版可靠、有效和跨越文化等效性。J Rheumato 1993；202115-2122)；FIQ(涉及纖維肌痛對(duì)生活質(zhì)量的影響)；漢密爾頓憂郁量表(有17項(xiàng))和SCL-90(Derogatis LR，Rickels K，Rock.The SCL-90和MMPIa step inthe validation of a new self-report scale.Br J Psychiatry 1976；128280-289)。
表1表示患者血清中的AAT水平(mg/dl)，分別是基礎(chǔ)水平，輸注AAT后和下一次輸注前。
表1
患者1、2和3中的每一個(gè)均對(duì)AAT治療有反應(yīng)且纖維肌痛癥狀例如全身疼痛、疲勞和壓痛點(diǎn)緩解或消除。該表中的數(shù)據(jù)表明給藥后24小時(shí)時(shí)血清AAT水平至少比基礎(chǔ)水平增加約8倍；而患者3出現(xiàn)比基礎(chǔ)水平增加約5倍。所有3位患者在給藥后7天時(shí)均表現(xiàn)出血清AAT水平比基礎(chǔ)水平增加約100％。
由此證實(shí)通過(guò)本發(fā)明發(fā)現(xiàn)可以使用基于AAT制備的藥物有效治療患有FM的患者。這些患者可能受到軟組織慢性炎癥過(guò)程的侵害。這種炎癥過(guò)程可能是生物促炎癥反應(yīng)產(chǎn)物(細(xì)胞因子、蛋白酶和炎性介質(zhì))與抗炎產(chǎn)物(尤其是AAT)之間異常失衡的結(jié)果。對(duì)可以引起炎癥的起始因素或病原體尚不了解，但可能是I感染物(例如HCV、HBV、腸病毒、布氏疏螺旋體、枝原體等)或自身免疫過(guò)程(例如紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等)。它們可以導(dǎo)致炎性細(xì)胞因子異常表達(dá)。迄今為止尚不了解的遺傳、環(huán)境和可能的激素因素可能涉及FM的臨床表現(xiàn)。在皮下結(jié)締組織處釋放的細(xì)胞因子可以吸引循環(huán)的白細(xì)胞到達(dá)炎性病灶且可以活化組織巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞?；罨募?xì)胞可以釋放其它通常受到天然抗炎劑(尤其是AAT)控制的細(xì)胞因子、蛋白酶和炎性介質(zhì)。然而，如果炎性介質(zhì)負(fù)荷抗炎的防御作用(通過(guò)過(guò)度產(chǎn)生)，那么就可能產(chǎn)生可以促進(jìn)炎癥發(fā)展的失衡。這種炎癥過(guò)程可以刺激將刺激傳送至大腦的皮膚傷害感受器且受到刺激的皮質(zhì)可以產(chǎn)生全身疼痛的感覺(jué)。另一方面，通過(guò)傳出反射途經(jīng)，神經(jīng)發(fā)放可以使骨骼肌泛發(fā)性痙攣和可以在肌肉疲勞和痛覺(jué)過(guò)敏中表現(xiàn)的血管痙攣。FM的其余癥狀可能因這些主要情況所致。
可以使用純化自人血漿或通過(guò)重組或轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的AAT治療濃縮物對(duì)FM進(jìn)行治療。同樣，能夠使用含有足量AAT以獲得最小劑量的血漿或其它治療產(chǎn)品治療。
正如其它蛋白質(zhì)一樣，為了獲得預(yù)期的效果，并不必需存在完整的α-1抗胰蛋白酶分子。因此，為了治療FM，它們可以為帶有來(lái)源于α-1抗胰蛋白酶分子相應(yīng)序列的部分氨基酸序列的有用分子。可以通過(guò)合成方法或通過(guò)轉(zhuǎn)基因或重組技術(shù)獲得這些分子。
就這種治療而言，預(yù)計(jì)在3-31天的期間內(nèi)輸注等于或大于6mgAAT/kg劑量是足夠的。AAT的優(yōu)選劑量為在3-31天的期間中輸注15-360mg/kg。更優(yōu)選的劑量為25-60mg/kg/周，或者是按照比例，根據(jù)預(yù)計(jì)到下一個(gè)劑量的時(shí)間間隔進(jìn)行調(diào)整，施用數(shù)倍于上述劑量的劑量。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了治療纖維肌痛的方法，包括對(duì)患有或有發(fā)生纖維肌痛危險(xiǎn)的患者給予治療有效量的AAT和一種或多種藥物惰性載體。其它實(shí)施方案包括給予至少約6mg/kg患者體重。根據(jù)各種因素的不同，包括癥狀的嚴(yán)重程度，可以給予約15-約360mg/kg劑量的AAT。在一個(gè)實(shí)施方案中，以25-60mg/kg/周施用AAT，或者按比例方式，根據(jù)預(yù)計(jì)到下一個(gè)劑量的時(shí)間間隔進(jìn)行調(diào)整，從而施用數(shù)倍上述劑量的AAT。
本發(fā)明的治療方案包括重復(fù)定期給予AAT以使纖維肌痛的癥狀緩解或消除。其它實(shí)施方案包括每3-31天給予一次AAT。另一個(gè)實(shí)施方案包括每7-21天重復(fù)給予AAT。
更具體的說(shuō)，本發(fā)明的治療方案包括給予約15-約360mg/kg患者體重的AAT并在約3-31天時(shí)重復(fù)給藥。另一個(gè)治療方案包括以25-60mg/kg/周給藥，或者按比例方式，根據(jù)預(yù)計(jì)到下一個(gè)劑量的時(shí)間間隔進(jìn)行調(diào)整，從而按上述劑量的數(shù)倍劑量給藥。
另一方面，可以構(gòu)建有效治療方案以獲得所需血清AAT水平(mg/dl)。例如，數(shù)據(jù)表明當(dāng)給藥足量AAT以便在給藥后7天時(shí)使血清AAT水平比基礎(chǔ)水平增加約100％時(shí)，觀察到了纖維肌痛癥狀得到改善。因此，另一個(gè)實(shí)施方案包括這類治療方案，包括對(duì)患有纖維肌痛的有癥狀患者給予足量的AAT，照此在給藥后約7天時(shí)患者AAT水平增加了約100％并在約3-約31天時(shí)至少重復(fù)給藥一次。另一個(gè)這類實(shí)施方案包括對(duì)患有纖維肌痛的有癥狀患者給予足量的AAT，照此在給藥后約7天時(shí)患者AAT水平增加了約100％并在約7-約21天時(shí)至少重復(fù)給藥一次。
類似的治療方案是有效的，其中給予AAT以便在給藥后24小時(shí)時(shí)使血清AAT水平比基礎(chǔ)水平增加約5倍。因此，本發(fā)明進(jìn)一步提供了治療方法，包括對(duì)患有纖維肌痛的患者給予一定量的AAT，照此使給藥后24小時(shí)時(shí)的血清AAT水平至少高于基礎(chǔ)水平約5倍。任選在約3-31天間隔時(shí)重復(fù)給藥一次或多次；且可以在約7-21天間隔時(shí)重復(fù)給藥。在另一個(gè)實(shí)施方案中，給予AAT以便在給藥后24小時(shí)時(shí)血清AAT水平比基礎(chǔ)水平增加至少約8倍。
在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)非腸道注射給予AAT。當(dāng)通過(guò)非腸道給藥時(shí)，將AAT在藥物上可接受的媒介物或載體中混合成溶液或混懸液。合適的媒介物的實(shí)例包括注射用水、無(wú)菌注射用水和其它含水媒介物(例如氯化鈉注射液。林格注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖和氯化鈉注射液和乳酸林格注射液)；水混溶性媒介物(例如乙醇、聚乙二醇、丙二醇)；和非水媒介物(例如玉米油、，棉子油、花生油和芝麻油)。對(duì)其它賦形劑、防腐劑、緩沖劑、殺生物劑等的需求和選擇屬于本領(lǐng)域技術(shù)人員的范圍且取決于各種因素，包括給藥途徑、所需貯存期限和儲(chǔ)存和航運(yùn)條件。
另外，可以使用防腐、保護(hù)或消毒抗胰蛋白酶制劑的其它加工步驟。例如，參見(jiàn)美國(guó)專利US 6,737,405(描述了例如可以進(jìn)行巴氏消毒而不會(huì)降低作用或變性的抗胰蛋白酶的穩(wěn)定制劑)；和美國(guó)專利US4,440,679(描述了蛋白質(zhì)巴氏消毒法)，將這兩篇文獻(xiàn)的內(nèi)容引入本文作為參考。
權(quán)利要求
1.α-1抗胰蛋白酶在制備用于治療纖維肌痛的藥物中的應(yīng)用，其中所述藥物包含可以對(duì)人體給藥的治療形式的α-1抗胰蛋白酶或其衍生物。
2.權(quán)利要求1的應(yīng)用，包括以3-31天的周期使用含有足以獲得大于或等于6mgα-1抗胰蛋白酶/kg體重劑量的α-1抗胰蛋白酶的血漿或其它治療形式。
3.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中α-1抗胰蛋白酶是從人血漿中純化的。
4.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中通過(guò)合成、轉(zhuǎn)基因或重組技術(shù)生產(chǎn)α-1抗胰蛋白酶或含有其部分氨基酸序列的分子。
5.權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征在于以3-31天的周期使用等于或大于6mgα-1抗胰蛋白酶/kg體重的劑量。
6.治療方法，包括對(duì)患有纖維肌痛或有發(fā)生纖維肌痛危險(xiǎn)的患者以約15-約360mg AAT/kg患者體重給藥并在3-31天周期內(nèi)至少重復(fù)給藥一次。
7.權(quán)利要求6的方法，其中AAT的給藥劑量是25-60mg/kg/周，或者以按比例的方式，根據(jù)預(yù)計(jì)到下一個(gè)劑量的時(shí)間間隔進(jìn)行調(diào)整從而施用數(shù)倍上述劑量的AAT。
8.治療方法，包括對(duì)患有纖維肌痛或有發(fā)生纖維肌痛危險(xiǎn)的患者給予足量AAT，照此會(huì)使患者的AAT水平給藥后約7天時(shí)甚至比基礎(chǔ)水平增加100％；并在3-31天周期內(nèi)至少重復(fù)給藥一次。
9.權(quán)利要求8的方法，其中在約7-21天時(shí)將AAT給藥至少重復(fù)一次。
10.治療方法，包括對(duì)患有纖維肌痛或處于發(fā)生纖維肌痛危險(xiǎn)中的患者給予一定量的AAT，照此會(huì)使血清AAT水平給藥后約24小時(shí)時(shí)增加，甚至高于基礎(chǔ)水平5倍。
11.權(quán)利要求10的方法，其中在3-31天時(shí)重復(fù)給藥一次或多次。
12.權(quán)利要求10的方法，其中在7-21天時(shí)重復(fù)給藥一次或多次。
13.權(quán)利要求10的方法，其中給予一定量的AAT，照此會(huì)在給藥后24小時(shí)時(shí)使血清AAT水平增加，甚至超過(guò)基礎(chǔ)水平8倍；并在7-21天時(shí)重復(fù)給藥一次或多次。
14.治療患有纖維肌痛或有發(fā)生纖維肌痛危險(xiǎn)的患者的方法，包括對(duì)所述患者通過(guò)非腸道輸注約15-360mg AAT/kg患者體重給藥；并在3-31天時(shí)至少重復(fù)所述輸注一次以便使所述患者的纖維肌痛癥狀減輕。
15.權(quán)利要求14的方法，其中AAT的劑量為25-60mg AAT/kg體重且在約7-21天時(shí)重復(fù)輸注至少一次。
16.權(quán)利要求14或15的方法，其中通過(guò)靜脈內(nèi)輸注進(jìn)行給藥。
全文摘要
本發(fā)明基于α－1抗胰蛋白酶在制備用于治療纖維肌痛的藥物中的應(yīng)用，包括制備任意人體可耐受的給藥形式的α－1抗胰蛋白酶治療濃縮物，α－1抗胰蛋白酶通過(guò)純化人血漿得到或通過(guò)重組或轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生，劑量等于或大于6mgα－1抗胰蛋白酶/kg體重，持續(xù)不同時(shí)間期限。
文檔編號(hào)A61P29/00GK1751739SQ20051009374
公開(kāi)日2006年3月29日 申請(qǐng)日期2005年8月29日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月24日
發(fā)明者伊格內(nèi)喬·布蘭科·布蘭科 申請(qǐng)人:基立福有限公司