專利名稱：制備能護肝臟、抗腫瘤、降血脂、調節(jié)免疫力制劑的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種制備能護肝臟、抗腫瘤、降血脂、調節(jié)免疫力制劑的方法。
背景技術：
熊果酸是存在于天然植物中的一種三萜類化合物，可從山楂或女貞葉等天然植物中提取。眾研究表明，熊果酸具有鎮(zhèn)靜、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗?jié)?、降低血糖等多種生物學效應，被廣泛地用作醫(yī)藥和化妝品原料。通過試驗表明熊果酸對人肝癌細胞、人乳腺癌細胞、人淋巴瘤細胞、人成淋巴細胞白血病和人急性成淋巴細胞白血病、人急性早幼粒白血病及人慢性髓性白血病都有細胞毒效應?，F在用于護肝臟、抗腫瘤、降血脂、調節(jié)免疫力的制劑有很多，如有《一種抗衰老及免疫調節(jié)的中西合劑》(CN03116722. 5)，由含中藥女貞子、淫羊藿、山藥和含西藥谷維素、維生素B6和維生素BI組成?！兑环N降血脂的中藥組合物及其制備方法》(CN201110249810. 7)，由900 1100份香菇、600 900份山楂、350 400份苦丁茶、200 300份荷葉、100 150份三七為原料藥制得?！督堤墙抵祲骸⒏纳莆⒀h(huán)及免疫的藥劑及其制備方法》(CN200510085788. 1)，配方包括麥門冬、枸杞子、女貞子、葛根、決明子、黃精、丹參、白術等?！兑环N降血脂、提高人體免疫力的保健制劑》(CN200410035720)由以下重量配比的原料制成鮮銀杏葉8份，靈芝5份，枸杞5份，燕麥3份，蜂膠4份，三七總皂甙5份，人參皂甙5份，?；撬?份，茶多酚2份。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是針對上述現狀，旨在提供一種能有效保留藥物的有效成分，效率高、成本低的制備能護肝臟、抗腫瘤、降血脂、調節(jié)免疫力制劑的方法本發(fā)明目的的實施方式為，制備能護肝臟、抗腫瘤、降血脂、調節(jié)免疫力制劑的方法，具體步驟如下I)制備熊果酸浸膏粉A①取女貞葉220g 340g、山楂160g 240g烘干粉碎，過60目篩后，超聲波破碎，加入1800ml 2700ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時；②抽濾，去濾洛，濾液用旋轉蒸發(fā)器，在45°C，O. IMpa條件下減壓濃縮，直至呈浸膏狀；③浸膏加入其重量20倍的石油醚用真空泵抽濾，3次，每次24小時，棄去濾液除雜；·
④濾渣用無水乙醇溶解，向濾液中加入活性碳顆粒，于50°C恒溫搖床中，脫色I小時，用真空泵抽濾，回收活性碳，重復三次，直至濾液顏色基本不變；⑤用氫氧化鈉調節(jié)步驟④濾液的pH值至10-12，熊果酸鈉鹽析出，靜至I小時，溶液會分層，用漏斗過濾，去濾渣；⑥用稀鹽酸調節(jié)步驟⑤濾液液的pH值至2-4，熊果酸鈉鹽與鹽酸反應生成熊果酸溶液，向溶液中加入其體積3倍量的水，不溶于水的熊果酸沉淀析出，用離心機4000r/min離心IOmin,棄去離心液的上清液,合并沉淀；⑦用二氧化硅干燥器干燥步驟⑥的沉淀成粉末，即得熊果酸粗品；⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過80— 100目篩得熊果酸浸膏粉A。2)制備浸膏粉B①取荷葉160g 240g、決明子60g 100g、制首烏60g 100g、丹參15g 20g，洗凈后加其重量8倍的水浸泡24小時，加溫煎煮3小時后過濾，回收濾液一；②向步驟①濾渣中加其重量6倍的水，加溫煎煮3小時后過濾，回收濾液二 ；
③合并濾液一、二，濃縮至20 1的密度為I. 15 I. 25 ;④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于5 10°C下靜置24小時，吸取上清液；⑤向步驟④的沉淀物中加入其體積2倍，90%含量的乙醇，充分攪拌后靜置24小時沉淀，過濾，棄去沉淀物；⑥合并向步驟④的上清液和步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過80-100目篩，得浸膏粉B。3)向浸膏粉A和浸膏粉B混合物中加等重量的淀粉，用乙醇制成顆粒，過40目篩，加O. 4%的硬脂酸鎂混合，灌裝成膠囊。本發(fā)明制劑配方科學合理，由女貞葉、山楂為主要原料，再配以荷葉、決明子、制首烏、丹參等其它的幾味中藥提取物，能保護肝臟、抗腫瘤、降血脂、調節(jié)免疫力；使用超聲波萃取技術來提取熊果酸成份，萃取溫度低，不會破壞中藥材中某些具有熱不穩(wěn)定、易水解或氧化特性的有效成分；常壓萃取，安全性好，操作簡單易行，維護保養(yǎng)方便；萃取效率高、能耗低、生產成本低。
具體實施例方式本發(fā)明配方科學合理，由女貞葉、山楂為主要原料，再配以荷葉、決明子、制首烏、丹參等其它的幾味中藥提取物。從山楂或女貞葉天然植物中提取的熊果酸抗腫瘤及免疫調節(jié)作用。山楂中的山楂葉總黃酮(HF)具有抑制U937細胞增殖的作用，能提高免疫力。荷葉能降脂護肝。決明子有降低血壓、膽固醇作用，對多種細菌有抑制作用，有免疫功能。荷葉有清暑利濕、升發(fā)清陽、降血脂的作用。制首烏能補肝腎，益精血，兼能收斂。丹參一般用于擴充血管，也有對腫瘤細胞的抑制作用，調節(jié)免疫功能的作用。本發(fā)明是先將女貞葉、山楂烘干超聲波破碎，加乙醇熱回流提取，抽濾，濾液減壓濃縮呈浸膏狀，加石油醚用真空泵抽濾，用氫氧化鈉調濾液PH，濾渣用乙醇溶解，加活性碳去色，用稀鹽酸調pH，加水離心分離，沉淀低壓干燥粉碎過篩，得熊果酸浸膏粉A。荷葉、決明子、制首烏、丹參加水浸泡、煎煮過濾，濾渣加水，煎煮，合并濾液濃縮，加乙醇靜置過濾，沉淀加乙醇靜置過濾，合并濾液低壓干燥粉碎過篩，得浸膏粉B。浸膏粉A、B合并加淀粉等制粒，灌裝膠囊，膠囊裝量300mg/粒。下面用具體實施例詳述本發(fā)明。例I、I)制備熊果酸浸膏粉A
①取女貞葉220g、山楂160g烘干粉碎，過60目篩后，超聲波破碎，加入1800ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時；②抽濾，去濾渣，濾液用旋轉蒸發(fā)器，在45°C，O. IMpa條件下減壓濃縮，直至呈浸膏狀；③浸膏加入其重量20倍的石油醚用真空泵抽濾，3次，每次24小時，棄去濾液除雜；④濾渣用無水乙醇溶解，向濾液中加入活性碳顆粒，于50°C恒溫搖床中，脫色I小時，用真空泵抽濾，回收活性碳，重復三次，直至濾液顏色基本不變； ⑤用氫氧化鈉調節(jié)步驟④濾液的pH值至10-12，熊果酸鈉鹽析出，靜至I小時，溶液會分層，用漏斗過濾，去濾渣；⑥用稀鹽酸調節(jié)步驟⑤濾液液的pH值至2-4，熊果酸鈉鹽與鹽酸反應生成熊果酸溶液，向溶液中加入其體積3倍量的水，不溶于水的熊果酸沉淀析出，用離心機4000r/min離心IOmin,棄去離心液的上清液,合并沉淀；⑦用二氧化硅干燥器干燥步驟⑥的沉淀成粉末，即得熊果酸粗品；⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過80目篩得熊果酸浸膏粉A。2)制備浸膏粉B①取荷葉160g、決明子60g、制首烏60g、丹參15g，洗凈后加其重量8倍的水浸泡24小時，加溫煎煮3小時后過濾，回收濾液一；②向步驟①濾渣中加其重量6倍的水，加溫煎煮3小時后過濾，回收濾液二，③合并濾液一、二，濃縮至20 1的密度為I. 15 I. 25 ;④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于5°C下靜置24小時，吸取上清液；⑤向步驟④的沉淀物中加入其體積2倍，90%含量的乙醇，充分攪拌后靜置24小時沉淀，過濾，棄去沉淀物；⑥合并步驟④的上清液和步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過80目篩，得浸膏粉B。3)向浸膏粉A和浸膏粉B混合物中加等重量的淀粉，用乙醇制成顆粒，過40目篩，加O. 4%的硬脂酸鎂混合，灌裝成膠囊，膠囊裝量300mg/粒。例2、同例1，不同的是，I)制備熊果酸浸膏粉A①取女貞葉240g、山楂180g烘干粉碎；過60目篩后，超聲波破碎，加入2000ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時；⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過100目篩得熊果酸浸膏粉A。2)制備浸膏粉B①取荷葉180g、決明子75g、制首烏60g、丹參15g ；④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于6°C下靜置24小時，吸取上清液；⑥合并向例2中2)步驟④的上清液和同例I中2)步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過90目篩，得浸膏粉B。
例3、同例1，不同的是，I)制備熊果酸浸膏粉A①取女貞葉260g、山楂200g烘干粉碎；過60目篩后，超聲波破碎，加入2100ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時；⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過100目篩得熊果酸浸膏粉A。2)制備浸膏粉B①取荷葉180g、決明子80g、制首烏70g、丹參16g ；
④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于7°C下靜置24小時，吸取上清液；⑥合并向例3中2)步驟④的上清液和同例I中2)步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過90目篩，得浸膏粉B。例4、同例I，不同的是，I)制備熊果酸浸膏粉A①取女貞葉280g、山楂220g烘干粉碎；過60目篩后，超聲波破碎，加入2200ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時；⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過100目篩得熊果酸浸膏粉A。2)制備浸膏粉B①取荷葉200g、決明子80g、制首烏80g、丹參17g ；④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于8°C下靜置24小時，吸取上清液；⑥合并向例4中2)步驟④的上清液和同例I中2)步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過90目篩，得浸膏粉B。例5、同例1，不同的是，I)制備熊果酸浸膏粉A①取女貞葉300g、山楂200g烘干粉碎；過60目篩后，超聲波破碎，加入2300ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時；⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過100目篩得熊果酸浸膏粉A。2)制備浸膏粉B①取荷葉200g、決明子85g、制首烏85g、丹參18g ；④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于8°C下靜置24小時，吸取上清液；⑥合并向例5中2)步驟④的上清液和同例I中2)步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過90目篩，得浸膏粉B。例6、同例1，不同的是，I)制備熊果酸浸膏粉A①取女貞葉320g、山楂220g烘干粉碎；過60目篩后，超聲波破碎，加入2500ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時；⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過100目篩得熊果酸浸膏粉A。2)制備浸膏粉B
①取荷葉220g、決明子90g、制首烏90g、丹參18g ；④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于9°C下靜置24小時，吸取上清液；⑥合并向例6中2)步驟④的上清液和同例I中2)步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過90目篩，得浸膏粉B。例7、同例1，不同的是，I)制備熊果酸浸膏粉A①取女貞葉260g、山楂200g烘干粉碎；過60目篩后，超聲波破碎，加入2000ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時；
⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過100目篩得熊果酸浸膏粉A。例8、同例1，不同的是，I)制備熊果酸浸膏粉A①取女貞葉280g、山楂220g烘干粉碎；過60目篩后，超聲波破碎，加入2200ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時；⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過100目篩得熊果酸浸膏粉A。例9、同例1，不同的是，I)制備熊果酸浸膏粉A①取女貞葉300g、山楂220g烘干粉碎；過60目篩后，超聲波破碎，加入2400ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時；⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過100目篩得熊果酸浸膏粉A。例10、同例1，不同的是，2)制備浸膏粉B①取荷葉180g、決明子60g、制首烏60g、丹參15g ；④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于8°C下靜置24小時，吸取上清液；⑥合并向例10中2)步驟④的上清液和同例I中2)步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過90目篩，得浸膏粉B。例11、同例1，不同的是，2)制備浸膏粉B①取荷葉180g、決明子75g、制首烏75g、丹參17g ；④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于8°C下靜置24小時，吸取上清液；⑥合并向例11中2)步驟④的上清液和同例I中2)步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過90目篩，得浸膏粉B。例12、同例1，不同的是，2)制備浸膏粉B①取荷葉200g、決明子80g、制首烏80g、丹參18g ；④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于8°C下靜置24小時，吸取上清液；
⑥合并向例12中2)步驟④的上清液和同例I中2)步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過90目篩，得浸膏粉B。例13、同例1，不同的是，2)制備浸膏粉B①取荷葉220g、決明子90g、制首烏90g、丹參18g ；④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于8°C下靜置24小時，吸取上清液；⑥合并向例13中2)步驟④的上清液和同例I中2)步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過90目篩，得浸膏粉B。例14、同例I，不同的是， 2)制備浸膏粉B①取荷葉240g、決明子70g、制首烏70g、丹參15g ；④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于8°C下靜置24小時，吸取上清液；⑥合并向例14中2)步驟④的上清液和同例I中2)步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過90目篩，得浸膏粉B。例15、同例1，不同的是，2)制備浸膏粉B①取荷葉240g、決明子100g、制首烏100g、丹參20g ；④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于8°C下靜置24小時，吸取上清液；⑥合并向例2中2)步驟④的上清液和同例I中2)步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過90目篩，得浸膏粉B。例16、同例1，不同的是，I)制備熊果酸浸膏粉A①取女貞葉340g、山楂240g烘干粉碎；過60目篩后，超聲波破碎，加入2700ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時；⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過90目篩得熊果酸浸膏粉A。例17、同例1，不同的是，I)制備熊果酸浸膏粉A①取女貞葉340g、山楂240g烘干粉碎；過60目篩后，超聲波破碎，加入2700ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時；⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過100目篩得熊果酸浸膏粉A。2)制備浸膏粉B①取荷葉240g、決明子100g、制首烏100g、丹參20g ；④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于10°C下靜置24小時，吸取上清液；⑥合并向例4中2)步驟④的上清液和同例I中2)步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過90目篩，得浸膏粉B。
用本發(fā)明制備的制劑經華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬梨園醫(yī)院臨床試驗統計分析，證實具有“保護肝臟、抗腫瘤、降血脂、調節(jié)免疫力”的功能。65 70歲以上老年人為試驗者，根據具體試驗要求篩選參選試驗者，共計試驗者221例。試驗者均口服本發(fā)明制備的膠囊，每日2次，每次2粒，一個月為一療程。一療程后測定試驗者各項指標，各項指標降至正常范圍內為顯效，明顯下降但在正常范圍之外為有效，指標下降不明顯為無效。實驗組療效結果如下表所示
權利要求
1.制備能護肝臟、抗腫瘤、降血脂、調節(jié)免疫力制劑的方法，具體步驟如下 1)制備熊果酸浸膏粉A ①取女貞葉220g 340g、山楂160g 240g烘干粉碎，過60目篩后，超聲波破碎，加入1800ml 2700ml濃度為90%的乙醇，在85°C時熱回流提取2小時； ②抽濾，去濾渣，濾液用旋轉蒸發(fā)器，在45°C，O.IMpa條件下減壓濃縮，直至呈浸膏狀； ③浸膏加入其重量20倍的石油醚用真空泵抽濾，3次，每次24小時，棄去濾液除雜； ④濾渣用無水乙醇溶解，向濾液中加入活性碳顆粒，于50°C恒溫搖床中，脫色I小時，用真空泵抽濾，回收活性碳，重復三次，直至濾液顏色基本不變； ⑤用氫氧化鈉調節(jié)步驟④濾液的PH值至10-12，熊果酸鈉鹽析出，靜至I小時，溶液會分層，用漏斗過濾，去濾渣； ⑥用稀鹽酸調節(jié)步驟⑤濾液液的pH值至2-4，熊果酸鈉鹽與鹽酸反應生成熊果酸溶液，向溶液中加入其體積3倍量的水，不溶于水的熊果酸沉淀析出，用離心機4000r/min離心IOmin,棄去離心液的上清液,合并沉淀； ⑦用二氧化硅干燥器干燥步驟⑥的沉淀成粉末，即得熊果酸粗品； ⑧低壓干燥粉碎熊果酸粗品，過80—100目篩得熊果酸浸膏粉A。
2)制備浸膏粉B ①取荷葉160g 240g、決明子60g 100g、制首烏60g 100g、丹參15g 20g，洗凈后加其重量8倍的水浸泡24小時，加溫煎煮3小時后過濾，回收濾液一； ②向步驟①濾渣中加其重量6倍的水，加溫煎煮3小時后過濾，回收濾液二； ③合并濾液一、二，濃縮至201的密度為I. 15 I. 25 ; ④向濃縮物中緩慢加入其體積2倍的，90%含量乙醇，攪拌后移至冷庫中，于5 10°C下靜置24小時，吸取上清液； ⑤向步驟④的沉淀物中加入其體積2倍，90%含量的乙醇，充分攪拌后靜置24小時沉淀，過濾，棄去沉淀物； ⑥合并向步驟④的上清液和步驟⑤的濾液，回收去除乙醇，低壓干燥粉碎后過80—100目篩，得浸膏粉B。
3)向浸膏粉A和浸膏粉B混合物中加等重量的淀粉，用乙醇制成顆粒，過40目篩，力口O.4%的硬脂酸鎂混合，灌裝成膠囊。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制備能護肝臟、抗腫瘤、降血脂、調節(jié)免疫力制劑的方法。先將女貞葉、山楂烘干超聲波破碎，加乙醇熱回流提取，抽濾，濾液減壓濃縮呈浸膏狀，加石油醚用真空泵抽濾，用氫氧化鈉調濾液pH，濾渣用乙醇溶解，加活性碳去色，用稀鹽酸調pH，加水離心分離，沉淀低壓干燥粉碎過篩，得熊果酸浸膏粉A。荷葉、決明子、制首烏、丹參加水浸泡、煎煮過濾，濾渣加水，煎煮，合并濾液濃縮，加乙醇靜置過濾，沉淀加乙醇靜置過濾，合并濾液低壓干燥粉碎過篩，得浸膏粉B。浸膏粉A、B合并加淀粉等制粒，灌裝膠囊。本發(fā)明制劑配方科學合理，制劑能保護肝臟、抗腫瘤、降血脂、調節(jié)免疫力。使用超聲波萃取等技術操作簡單易行，效率高、能耗低、成本低。
文檔編號A61P3/06GK102920786SQ20121046200
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月16日 優(yōu)先權日2012年11月16日
發(fā)明者李翔, 劉浩 申請人:武漢代代木生物科技有限公司