專利名稱：載有藥物納米纖維醫(yī)用敷料制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制備載有藥物的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料的方法。
背景技術(shù)：
靜電紡絲是一種使帶電荷的聚合物溶液或熔體在靜電場(chǎng)中射流制備聚合物超細(xì)纖維的加工方法，在外加電場(chǎng)達(dá)到一定臨界值時(shí)，纖維就會(huì)從噴絲口噴射而出，同時(shí)溶劑逐漸揮發(fā)離開帶電纖維，干燥的纖維落在收集板上，形成超細(xì)的納米纖維無紡布。制備的納米纖維無紡布具有比表面積大、孔隙率高、纖維的精細(xì)程度與均一性高、長(zhǎng)徑比大等優(yōu)點(diǎn)。通常運(yùn)載藥物的材料體系越小，藥物越容易被人體吸收。因此，納米纖維在藥物緩釋方面具備了極大的應(yīng)用可能性。殼聚糖(Chitosan、CS)是一種天然的聚陽(yáng)離子堿性多糖，安全無毒，有一定的抑菌活性。在體內(nèi)可生物降解成水和二氧化碳；與人體有很好的生物相容性，對(duì)皮膚和粘膜無刺激，而且有黏膜黏附性，可促進(jìn)傷口愈合和組織修復(fù)再生，在醫(yī)用敷料方面有廣闊的應(yīng)用前景。殼聚糖本身帶正電荷，是天然的陽(yáng)離子型黏膜藥物運(yùn)釋載體。近幾年緩釋性能優(yōu)良的殼聚糖衍生物層出不窮，在微球、微囊、納米球、漂浮片等緩釋劑型中廣泛應(yīng)用。透明質(zhì)酸(Hyaluronic acid、HA)是存在于生物組織中細(xì)胞外基質(zhì)中的一種聚陰離子酸性粘多糖，在空間上呈剛性的螺旋柱狀結(jié)構(gòu)，柱的內(nèi)側(cè)由于存在大量的羥基而產(chǎn)生強(qiáng)親水性，而且透明質(zhì)酸分子將其結(jié)合的水分子鎖定在其雙螺旋柱狀結(jié)構(gòu)中，使水分不易流失，因此具有特殊的保水作用。透明質(zhì)酸以其獨(dú)特的分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)在機(jī)體內(nèi)顯示出多種重要的生理功能，如潤(rùn)滑關(guān)節(jié)，調(diào)節(jié)血管壁的通透性，調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)，水電解質(zhì)擴(kuò)散及運(yùn)轉(zhuǎn)，促進(jìn)創(chuàng)傷愈合等。同時(shí)，由于透明質(zhì)酸對(duì)人體皮膚刺激性小，安全無毒，使得它在很多領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用在食品方面，透明質(zhì)酸可以為人體補(bǔ)充透明質(zhì)酸，改善肌膚水分和關(guān)節(jié)功能；在醫(yī)藥方面，透明質(zhì)酸常作為藥物載體，不但能增強(qiáng)藥物的生物利用度而且能減少全身的毒副作用；在日化方面，透明質(zhì)酸?？勺鳛閮?yōu)異的保濕劑和成膜劑。我們已經(jīng)在常溫下成功制備出 HA 的納米纖維(Liu Y.，Ma G.，F(xiàn)ang D.，Xu J.，Zhang H.，Nie J. · Effects of solution properties and electric field on the electrospinning of hyaluronic acid. Carbohydrate Polymers, Article in press)，基于此，我們將進(jìn)一步拓寬 HA 納米纖維膜的應(yīng)用范圍、增強(qiáng)其生物醫(yī)用功能。目前醫(yī)用敷料在使用上有諸多不便之處，有的敷料使用不可降解的聚丙烯腈材料作為支架材料，造成醫(yī)源性污染；同時(shí)，敷料吸收創(chuàng)面滲出夜同時(shí)和創(chuàng)面發(fā)生粘連，造成揭除時(shí)損傷新生組織，給患者帶來了極大的痛苦。而納米纖維膜制成的醫(yī)用敷料有利于傷口滲出液的蒸發(fā)，有利于氧氣透過，也有利于創(chuàng)面組織的生長(zhǎng)和再生，從而可加速傷口的愈合 (Chong E. J.，Phan Τ. T.，Lim I. J.，Zhang Y. Z.，Bay B. H.，S. Ramakrishnaa, Lim C. T.. Evaluation of electrospun PCL/gelatin nanofibrous scaffold for wound healing and layered dermal reconstitution. Acta Biomaterial，2007，3 :321-330)。近年來石if究表明，將藥物包封在微球、納米粒、納米纖維等中，具有良好的緩、控釋作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一提供了一種可生物降解及吸收的納米纖維膜材料作為醫(yī)用敷料的應(yīng)用本發(fā)明的目的之二提供了一種具有良好力學(xué)性能的多孔透明質(zhì)酸納米纖維的制備方法。本發(fā)明的目的之三載有治療性藥物的聚合物納米纖維膜材料的制備方法。本發(fā)明的目的之四提供了具有良好細(xì)胞粘附性能的CS/HA核殼結(jié)構(gòu)復(fù)合納米纖維膜材料的制備方法。本發(fā)明的目的之五提供了一種利用聚陰陽(yáng)離子結(jié)合封裝治療性藥物作為載藥醫(yī)用敷料的應(yīng)用。本發(fā)明的目的之六提供了一種對(duì)藥物可控制釋放的聚合物納米纖維膜材料。本發(fā)明所提供的一種制備載有藥物的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料方法，包括以下步驟步驟一a.制備殼聚糖多孔納米纖維(1)殼聚糖靜電紡絲溶液的配制將殼聚糖粉末和制孔劑的混合物溶于10 95wt%的乙酸溶液中，配成重量百分比為3 12wt%的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢?，以致完全溶解，將溶液靜置超聲波1 2個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的殼聚糖電紡絲溶液。 所述的制孔劑為聚氧乙烷(PEO)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇(PVA)、 聚丙交酯(PLLA)或聚己內(nèi)酯(PCL)；其中殼聚糖與制孔劑的重量比為3 9 7 1。(2)靜電紡絲制備殼聚糖納米纖維將步驟(1)中配制的殼聚糖靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為15 30kV噴絲頭到收集板的距離為8 20cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為0. 5 2. OmL/h。啟動(dòng)裝置進(jìn)行靜電紡絲，在收集板上得到了殼聚糖納米纖維。(3)制備殼聚糖多孔納米纖維將步驟O)中得到的殼聚糖納米纖維用交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的殼聚糖納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在25 40°C下真空干燥1 12h，得到殼聚糖多孔納米纖維。b.制備透明質(zhì)酸多孔納米纖維(1)透明質(zhì)酸靜電紡絲溶液的配制將透明質(zhì)酸粉末和制孔劑溶于去離子水 (Dff)、甲酸(FA)和N，N- 二甲基甲酰胺(DMF)組成的混合溶劑中，配成重量百分比為0. 5 5wt%的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢?，以致完全溶解，將溶液靜置超聲波1 2個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的透明質(zhì)酸溶液。所述的制孔劑為聚氧乙烷(PEO)、聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇(PVA)、聚丙交酯(PLLA)或聚己內(nèi)酯(PCL)；其中透明質(zhì)酸與制孔劑的重量比為3 9 7 1 ；透明質(zhì)酸重均分子量為400，000 2，000, 000。(2)靜電紡絲制備透明質(zhì)酸納米纖維將步驟(1)中配制的透明質(zhì)酸靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為15 30kV ；噴絲頭到收集板的距離為8 20cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為0. 5 2. OmL/h ；紡絲環(huán)境溫度為10 40°C。啟動(dòng)裝置進(jìn)行透明質(zhì)酸的靜電紡絲，在收集板上得到了透明質(zhì)酸納米纖維。
(3)制備透明質(zhì)酸多孔納米纖維將步驟(2)中得到的透明質(zhì)酸納米纖維用交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的透明質(zhì)酸納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在25 40°C下真空干燥1 12h，得到透明質(zhì)酸多孔納米纖維。所述的交聯(lián)劑為戊二醛、乙二醛、甲醛、雙醛淀粉、京尼平、二乙烯基砜、碳化二亞胺、環(huán)氧氯丙烷、環(huán)硫氯丙烷、三聚磷酸鈉、氯醇、乙二醇二環(huán)氧甘油醚、1，4_ 丁二醇二環(huán)氧甘油醚或磷酰氯中的一種或幾種。步驟二(4)在納米纖維中封裝藥物將步驟一(3)中制備的聚合物多孔納米纖維無紡布浸泡在治療性藥物的溶液中2小時(shí)，使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在25 40°C下真空干燥，得到載有藥物的聚合物納米纖維無紡布。利用殼聚糖 (透明質(zhì)酸)的聚陽(yáng)(陰)離子特性，將得到的載有藥物的納米纖維膜浸泡在聚陰(陽(yáng))離子透明質(zhì)酸(殼聚糖)溶液中，使透明質(zhì)酸(殼聚糖)吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了載有藥物的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。所述的治療性藥物消炎類藥物，止痛類藥物，麻醉類藥物，抗凝血類藥物、抗病毒類藥物、抗生素或皮膚生長(zhǎng)因子。本發(fā)明得到的載有藥物的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料能夠很好的吸收滲透液、保持創(chuàng)傷周圍的濕潤(rùn)，可長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)釋放治療性藥物，具有生物可降解、抗菌、止血，有利于創(chuàng)面組織的生長(zhǎng)和再生，可加速傷口的愈合等功能。


圖1是按實(shí)施例1所提供的技術(shù)方案得到的CS/PE0納米纖維SEM形貌。圖2是按實(shí)施例1所提供的技術(shù)方案得到的CS多孔納米纖維SEM形貌圖3是按實(shí)施例1所提供的技術(shù)方案得到的用HA封裝的CS納米纖維SEM形貌。圖4是按實(shí)施例2所提供的技術(shù)方案得到的HA/PVP納米纖維SEM形貌。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 (1)將CS粉末和PEO (其重量比為CS/PE0 = 3/7)的混合物溶于95wt%的乙酸溶液中，配成重量百分比為3wt%的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢?，以致完全溶解，將溶液靜置超聲波1個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的CS電紡絲溶液。(2)將步驟(1)中配制的CS靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為20kV ；噴絲頭到收集板的距離為12cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為0. 5mL/h。啟動(dòng)裝置進(jìn)行靜電紡絲，在收集板上得到了 CS納米纖維(如圖1)。(3)將步驟O)中得到的CS納米纖維用戊二醛進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的殼聚糖納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在25°C下真空干燥lh，得到CS多孔納米纖維(如圖2)。(4)將步驟(3)中制備的CS多孔納米纖維無紡布浸泡在阿莫西林的溶液中2小時(shí)，使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在25°C下真空干燥，得到載有藥物的CS納米纖維無紡布。利用CS的聚陽(yáng)離子特性，將得到的載有藥物的CS納米纖維膜浸泡在HA溶液中，使HA吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中(如圖幻，得到了具有良好消炎作用的的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。使治愈時(shí)間由原來的10 14 天縮短到現(xiàn)在的2 5天。實(shí)施例2 (1)將Mw= 1,000,000的HA粉末和PVP (其重量比為HA/PVP = 5/5)溶于去離子水、甲酸和N，N-二甲基甲酰胺組成的混合溶劑中(去離子水/甲酸/N，N-二甲基甲酰胺 =25/50/25)，配成重量百分比為的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢瑁灾峦耆芙?，將溶液靜置超聲波2個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的HA溶液。(2)將步驟(1)中配制的HA靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為15kV ；噴絲頭到收集板的距離為15cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為0. 5mL/h ；紡絲環(huán)境溫度為18°C。啟動(dòng)裝置進(jìn)行透明質(zhì)酸的靜電紡絲，在收集板上得到了 HA納米纖維(如圖4)。(3)將步驟( 將步驟O)中得到的透明質(zhì)酸納米纖維用二乙烯基砜進(jìn)行交聯(lián)2 小時(shí)，將交聯(lián)后的透明質(zhì)酸納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在25°C下真空干燥12h，得到HA多孔納米纖維。(4)將步驟(3)中制備的HA多孔納米纖維無紡布浸泡在阿司匹林的溶液中2小時(shí)，使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在25°C下真空干燥， 得到載有藥物的HA納米纖維無紡布。利用HA的聚陰離子特性，將得到的載有藥物的HA納米纖維膜浸泡在CS溶液中，使CS吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了具有良好止痛作用的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。在4分鐘內(nèi)可以達(dá)到止痛的效果，并具有一定的持久性。實(shí)施例3:(1)將CS粉末和PEG (其重量比為CS/PEG = 9/1)的混合物溶于IOwt %的乙酸溶液中，配成重量百分比為8wt%的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢瑁灾峦耆芙?，將溶液靜置超聲波2個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的CS電紡絲溶液。(2)將步驟(1)中配制的CS靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為25kV ；噴絲頭到收集板的距離為20cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為lmL/h。啟動(dòng)裝置進(jìn)行靜電紡絲，在收集板上得到了 CS納米纖維。(3)將步驟O)中得到的CS納米纖維用京尼平進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的殼聚糖納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在40°C下真空干燥12h，得到CS多孔納米纖維。(4)將步驟(3)中制備的CS多孔納米纖維無紡布浸泡在肝素的溶液中2小時(shí)，使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在40°C下真空干燥，得到載有藥物的CS納米纖維無紡布。利用CS的聚陽(yáng)離子特性，將得到的載有藥物的CS納米纖維膜浸泡在HA溶液中，使HA吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了具有良好抗凝血作用的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。凝血時(shí)間在4分鐘以內(nèi)。實(shí)施例4 (1)將Mw = 2，000, 000的HA粉末和PCL (其重量比HA/PCL = 3/7)溶于去離子水、甲酸和N，N-二甲基甲酰胺組成的混合溶劑中(去離子水/甲酸/N，N-二甲基甲酰胺=25/50/25)，配成重量百分比為0. 5wt%的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢?，以致完全溶解，將溶液靜置超聲波1個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的HA溶液。(2)將步驟(1)中配制的HA靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為MkV噴絲頭到收集板的距離為20cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為1. 5mL/h ；紡絲環(huán)境溫度為25°C。啟動(dòng)裝置進(jìn)行透明質(zhì)酸的靜電紡絲，在收集板上得到了 HA納米纖維。(3)將步驟( 中得到的透明質(zhì)酸納米纖維用碳化二亞胺進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的透明質(zhì)酸納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在40°C下真空干燥lh，得到HA多孔納米纖維。(4)將步驟(3)中制備的HA多孔納米纖維無紡布浸泡在諾氟沙星的溶液中2小時(shí)，使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在40°C下真空干燥，得到載有藥物的HA納米纖維無紡布。利用HA的聚陰離子特性，將得到的載有藥物的HA納米纖維膜浸泡在CS溶液中，使CS吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了具有抗菌作用的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。通過MTT測(cè)試，其抗菌效果提高了 17%。實(shí)施例5:(1)將CS粉末和PVA (其重量比為CS/PVA = 4/6)的混合物溶于90襯％的乙酸溶液中，配成重量百分比為12wt%的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢?，以致完全溶解，將溶液靜置超聲波1. 5個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的殼聚糖電紡絲溶液。(2)將步驟(1)中配制的CS靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為30kV ；噴絲頭到收集板的距離為8cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為1. 2mL/h。啟動(dòng)裝置進(jìn)行靜電紡絲，在收集板上得到了 CS納米纖維。(3)將步驟⑵中得到的CS納米纖維用乙二醛進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的殼聚糖納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在30°C下真空干燥1 12h，得到CS多孔納米纖維。(4)將步驟( 中制備的CS多孔納米纖維無紡布浸泡在皮膚生長(zhǎng)因子的溶液中2 小時(shí)，使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥， 得到載有藥物的CS納米纖維無紡布。利用CS的聚陽(yáng)離子特性，將得到的載有藥物的CS納米纖維膜浸泡在HA溶液中，使HA吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了具有良好修復(fù)皮膚功能的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。通過細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試，獲得的納米纖維敷料具有一定的皮膚修復(fù)功能。通過細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試，制備的納米敷料具有較好的皮膚修復(fù)功能。實(shí)施例6 (1)將Mw = 400, 000的HA粉末和PLLA (其重量比為HA/PLLA = 9/1)溶于去離子水、甲酸和N，N-二甲基甲酰胺組成的混合溶劑中(去離子水/甲酸/N，N-二甲基甲酰胺 =25/50/25)，配成重量百分比為5wt %的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢?，以致完全溶解，將溶液靜置超聲波1個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的HA溶液。(2)將步驟(1)中配制的HA靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為MkV;噴絲頭到收集板的距離為8cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為2mL/h ；紡絲環(huán)境溫度為40°C。啟動(dòng)裝置進(jìn)行透明質(zhì)酸的靜電紡絲，在收集板上得到了 HA納米纖維。(3)將步驟(2)中得到的透明質(zhì)酸納米纖維用乙二醇二環(huán)氧甘油醚進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的透明質(zhì)酸納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在30°C下真空干燥證，得到HA多孔納米纖維。(4)將步驟(3)中制備的HA多孔納米纖維無紡布浸泡在無環(huán)烏苷的溶液中2小時(shí)，使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在25°C下真空干燥，得到載有藥物的HA納米纖維無紡布。利用HA的聚陰離子特性，將得到的載有藥物的HA納米纖維膜浸泡在CS溶液中，使CS吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了具有良好抗病毒作用的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。通過MTT測(cè)試，其抗病毒效果提高了
22 % ο實(shí)施例7:(1)將CS粉末和PVP (其重量比為CS/PVP = 6/4)的混合物溶于30wt%的乙酸溶液中，配成重量百分比為IOwt %的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢?，以致完全溶解，將溶液靜置超聲波1個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的CS電紡絲溶液。(2)將步驟(1)中配制的CS靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為15kV ；噴絲頭到收集板的距離為8cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為0. 8mL/h。啟動(dòng)裝置進(jìn)行靜電紡絲，在收集板上得到了 CS納米纖維。(3)將步驟⑵中得到的CS納米纖維用環(huán)氧氯丙烷進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的殼聚糖納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥3h，得到CS多孔納米纖維。(4)將步驟(3)中制備的CS多孔納米纖維無紡布浸泡在曲馬多的溶液中2小時(shí)， 使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥，得到載有藥物的CS納米纖維無紡布。利用CS的聚陽(yáng)離子特性，將得到的載有藥物的CS納米纖維膜浸泡在HA溶液中，使HA吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了具有良好麻醉止痛作用的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。在2分鐘內(nèi)可以達(dá)到止痛的效果，并具有一定的持久性。實(shí)施例8 (1)將Mw = 800, 000的HA粉末和PEG(其重量比為HA/PEG = 4/6)溶于去離子水、甲酸和N，N-二甲基甲酰胺組成的混合溶劑中(去離子水/甲酸/N，N-二甲基甲酰胺 =25/50/25)，配成重量百分比為3wt%的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢瑁灾峦耆芙?，將溶液靜置超聲波1個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的HA溶液。(2)將步驟(1)中配制的HA靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為30kV ；噴絲頭到收集板的距離為18cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為lmL/h ；紡絲環(huán)境溫度為20°C。啟動(dòng)裝置進(jìn)行透明質(zhì)酸的靜電紡絲，在收集板上得到了 HA納米纖維。(3)將步驟(2)中得到的透明質(zhì)酸納米纖維用氯醇進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的透明質(zhì)酸納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥4h，得到HA多孔納米纖維。(4)將步驟(3)中制備的HA多孔納米纖維無紡布浸泡在香豆素的溶液中2小時(shí)， 使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥，得到載有藥物的HA納米纖維無紡布。利用HA的聚陰離子特性，將得到的載有藥物的HA納米纖維膜浸泡在CS溶液中，使CS吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了具有良好抗凝血作用的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。凝血時(shí)間在4分鐘以內(nèi)。實(shí)施例9:(1)將CS粉末和PCL (其重量比為CS/PCL = 5/5)的混合物溶于60wt%的乙酸溶液中，配成重量百分比為7wt%的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢?，以致完全溶解，將溶液靜置超聲波2個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的CS電紡絲溶液。(2)將步驟(1)中配制的CS靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為MkV ；噴絲頭到收集板的距離為15cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為2mL/h。啟動(dòng)裝置進(jìn)行靜電紡絲，在收集板上得到了 CS納米纖維。(3)將步驟(2)中得到的CS納米纖維用雙醛淀粉進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的殼聚糖納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在40°C下真空干燥10h，得到CS多孔納米纖維。(4)將步驟(3)中制備的CS多孔納米纖維無紡布浸泡在頭孢霉素的溶液中2小時(shí)，使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥，得到載有藥物的CS納米纖維無紡布。利用CS的聚陽(yáng)離子特性，將得到的載有藥物的CS納米纖維膜浸泡在HA溶液中，使HA吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了具有消炎作用的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。使治愈時(shí)間由原來的10 14天縮短到現(xiàn)在的 2 5天。實(shí)施例10 (1)將Mw= 1,000,000的HA粉末和PEO (其重量比為ΗΑ/ΡΕ0 = 6/4)溶于去離子水、甲酸和N，N-二甲基甲酰胺組成的混合溶劑中(去離子水/甲酸/N，N-二甲基甲酰胺 =25/50/25)，配成重量百分比為5wt %的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢?，以致完全溶解，將溶液靜置超聲波1個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的HA溶液。(2)將步驟(1)中配制的HA靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為20kV ；噴絲頭到收集板的距離為15cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為0. 5mL/h ；紡絲環(huán)境溫度為30°C。啟動(dòng)裝置進(jìn)行透明質(zhì)酸的靜電紡絲，在收集板上得到了 HA納米纖維。(3)將步驟( 中得到的透明質(zhì)酸納米纖維用1，4_丁二醇二環(huán)氧甘油醚進(jìn)行交聯(lián) 2小時(shí)，將交聯(lián)后的透明質(zhì)酸納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥4h，得到HA多孔納米纖維。(4)將步驟(3)中制備的HA多孔納米纖維無紡布浸泡在阿莫西林的溶液中2小時(shí)，使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥，得到載有藥物的HA納米纖維無紡布。利用HA的聚陰離子特性，將得到的載有藥物的HA納米纖維膜浸泡在CS溶液中，使CS吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了具有良好消炎作用的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。使治愈時(shí)間由原來的10 14天縮短到現(xiàn)在的2 5天。實(shí)施例11 (1)將CS粉末和PLLA (其重量比為CS/PLLA = 8/2)的混合物溶于80wt%的乙酸溶液中，配成重量百分比為6wt%的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢瑁灾峦耆芙?，將溶液靜置超聲波1個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的CS電紡絲溶液。(2)將步驟(1)中配制的CS靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為15kV ；噴絲頭到收集板的距離為12cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為1. 5mL/h。啟動(dòng)裝置進(jìn)行靜電紡絲，在收集板上得到了 CS納米纖維。(3)將步驟(2)中得到的CS納米纖維用三聚磷酸鈉進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的殼聚糖納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥2h，得到CS多孔納米纖維。(4)將步驟(3)中制備的CS多孔納米纖維無紡布浸泡在諾氟沙星的溶液中2小時(shí)，使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥，得到載有藥物的CS納米纖維無紡布。利用CS的聚陽(yáng)離子特性，將得到的載有藥物的CS納米纖維膜浸泡在HA溶液中，使HA吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了具有良好抗菌作用的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。通過MTT測(cè)試，其抗菌效果提高了 15%。實(shí)施例12 (1)將Mw = 800, 000的HA粉末和VA(HA/PVA = 8/2)溶于去離子水、甲酸和N， N-二甲基甲酰胺組成的混合溶劑中(去離子水/甲酸/N，N-二甲基甲酰胺=25/50/25)， 配成重量百分比為Iwt %的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢瑁灾峦耆芙?，將溶液靜置超聲波 1個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的HA溶液。(2)將步驟(1)中配制的HA靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為20kV ；噴絲頭到收集板的距離為IOcm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為1. OmL/h ；紡絲環(huán)境溫度為20°C。啟動(dòng)裝置進(jìn)行透明質(zhì)酸的靜電紡絲，在收集板上得到了 HA納米纖維。(3)將步驟⑵中得到的納米纖維用磷酰氯交聯(lián)，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥他，得到HA多孔納米纖維。(4)將步驟(3)中制備的HA多孔納米纖維無紡布浸泡在皮膚生長(zhǎng)因子的溶液中2 小時(shí)，使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥， 得到載有藥物的HA納米纖維無紡布。利用HA的聚陰離子特性，將得到的載有藥物的HA納米纖維膜浸泡在CS溶液中，使CS吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了具有修復(fù)皮膚功能的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。通過細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試，制備的納米敷料具有較好的皮膚修復(fù)功能。
1權(quán)利要求
1.載有藥物納米纖維醫(yī)用敷料制備方法，其特征在于包括以下步驟步驟一a.制備殼聚糖多孔納米纖維(1)將殼聚糖粉末和制孔劑的混合物溶于10 95wt%的乙酸溶液中，配成重量百分比為3 12wt%的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢?，以致完全溶解，將溶液靜置超聲波1 2個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的殼聚糖電紡絲溶液。所述的制孔劑為聚氧乙烷、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚丙交酯或聚己內(nèi)酯；其中殼聚糖與制孔劑的重量比為3 9 7 1。(2)將步驟(1)中配制的殼聚糖靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為15 30kV；噴絲頭到收集板的距離為8 20cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為0. 5 2. OmL/h。啟動(dòng)裝置進(jìn)行靜電紡絲，在收集板上得到了殼聚糖納米纖維；(3)將步驟( 中得到的殼聚糖納米纖維用交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的殼聚糖納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維在25 40°C下真空干燥1 12h，得到殼聚糖多孔納米纖維。b.制備透明質(zhì)酸多孔納米纖維(1)將透明質(zhì)酸粉末和制孔劑溶于去離子水、甲酸和N，N-二甲基甲酰胺組成的混合溶劑中(去離子水/甲酸/N，N-二甲基甲酰胺=25/50/25)，配成重量百分比為0.5 5wt% 的溶液，然后將溶液充分?jǐn)嚢?，以致完全溶解，將溶液靜置超聲波1 2個(gè)小時(shí)使氣泡全部析出即得到透明的透明質(zhì)酸溶液。所述的制孔劑為聚氧乙烷、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、 聚乙烯醇、聚丙交酯或聚己內(nèi)酯；其中透明質(zhì)酸與制孔劑的重量比為3 9 7 1;透明質(zhì)酸重均分子量為400，000 2，000, 000。(2)將步驟(1)中配制的透明質(zhì)酸靜電紡絲溶液加入注射泵，調(diào)整電壓為15 30kV； 噴絲頭到收集板的距離為8 20cm ；噴絲頭紡絲溶液的流量為0. 5 2. OmL/h ；紡絲環(huán)境溫度為10 40°C。啟動(dòng)裝置進(jìn)行透明質(zhì)酸的靜電紡絲，在收集板上得到了透明質(zhì)酸納米纖維；(3)將步驟(2)中得到的透明質(zhì)酸納米纖維用交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián)2小時(shí)，將交聯(lián)后的透明質(zhì)酸納米纖維浸泡在制孔劑的溶劑中，選擇性的去除制孔劑和多余的交聯(lián)劑，將處理過的納米纖維在25 40°C下真空干燥1 12h，得到透明質(zhì)酸多孔納米纖維。所述的交聯(lián)劑為戊二醛、乙二醛、甲醛、雙醛淀粉、京尼平、二乙烯基砜、碳化二亞胺、環(huán)氧氯丙烷、環(huán)硫氯丙烷、三聚磷酸鈉、氯醇、乙二醇二環(huán)氧甘油醚、1，4_ 丁二醇二環(huán)氧甘油醚或磷酰氯中的一種或幾種。步驟二 (4)在納米纖維中封裝藥物將步驟一(3)中制備的聚合物多孔納米纖維浸泡在治療性藥物的溶液中2小時(shí)，使藥物在纖維內(nèi)部和表面均勻分布，將浸泡過的納米纖維無紡布在35°C下真空干燥，得到載有藥物的聚合物納米纖維無紡布。利用殼聚糖(透明質(zhì)酸)的聚陽(yáng)(陰)離子特性，將得到的載有藥物的納米纖維膜浸泡在聚陰(陽(yáng))離子透明質(zhì)酸(殼聚糖)溶液中，使透明質(zhì)酸(殼聚糖)吸附在納米纖維表面，將藥物包覆在纖維中，得到了具有藥效的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料。所述的治療性藥物消炎類藥物，止痛類藥物，麻醉類藥物，抗凝血類藥物、抗病毒類藥物、抗生素或皮膚生長(zhǎng)因子。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制備載有藥物的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料的方法。該敷料是一種納米纖維膜，主要將透明質(zhì)酸(殼聚糖)與制孔劑共紡，得到復(fù)合納米纖維，使用交聯(lián)劑將透明質(zhì)酸(殼聚糖)交聯(lián)，然后選擇性的去除制孔劑和交聯(lián)劑，得到透明質(zhì)酸(殼聚糖)多孔納米纖維，最后利用聚陽(yáng)陰離子自由結(jié)合的特性將治療性藥物封裝在透明質(zhì)酸(殼聚糖)納米纖維中。得到的載有藥物的可生物降解的納米纖維醫(yī)用敷料能夠很好的吸收滲透液、保持創(chuàng)傷周圍的濕潤(rùn)，可長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)釋放治療性藥物，具有生物可降解、抗菌、止血，有利于創(chuàng)面組織的生長(zhǎng)和再生，可加速傷口的愈合等功能。
文檔編號(hào)A61L15/28GK102266582SQ20111016881
公開日2011年12月7日 申請(qǐng)日期2011年6月17日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月17日
發(fā)明者孟準(zhǔn), 梁鵬總, 聶俊, 馬貴平 申請(qǐng)人:北京化工大學(xué)常州先進(jìn)材料研究院