專利名稱：一種甾醇類衍生物的抗癌用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥化工領域，涉及一種留醇類衍生物的抗癌用途。
背景技術：
紅曲(Monascus-fermented rice)是以大米為原料，經(jīng)紅曲霉(Monascus)發(fā)酵制成的一種紫紅色米曲。紅曲古代稱丹曲，是將紅曲霉為主的曲母或酒曲接種于米飯上發(fā)酵而成，其色赤紅，故又名赤曲、紅米、紅大米、紅糟，又因主產(chǎn)于福建等地.故又名福曲、福米
坐寸ο我國利用紅曲菌的歷史悠久，從漢代起就用它制曲。紅曲是一味食療兼?zhèn)涞膫鹘y(tǒng)中藥。早在古代它已被廣泛應用于食品著色、釀酒、發(fā)酵、中醫(yī)中藥方面。《飲膳正要》有紅曲“味甘、平、無毒”、“健脾、益氣、溫中”；《本草綱目》有“甘、溫、無毒”、“治女人血痛及產(chǎn)后惡血不凈，擂酒飲之良”;《本草衍義補遺》有“活血、消食、健脾暖胃、治赤白下痢、跌打損傷”等記載。上世紀70年代，日本Endo教授首次從紅色紅曲霉(Monascus ruber)中分離出生理活性物質(zhì)莫納克林KOnonacolin K)以來，眾多國內(nèi)外學者在紅曲霉代謝產(chǎn)物中不斷發(fā)現(xiàn)生理活性物質(zhì)，包括monacolin類化合物、紅曲色素、降壓成分GABA及抗氧化成分dimerumic acid及最近分離的一些職類化合物等等。隨著現(xiàn)代生物化學與藥理學的發(fā)展，紅曲的降血脂、降壓、降糖、抗肥胖、抗癌、防治老年癡呆及骨質(zhì)疏松等功效不斷被挖掘。從而為傳統(tǒng)的紅曲增添了新的內(nèi)涵。血脂康膠囊是北京北大維信生`物科技有限公司自主研究的特制紅曲霉發(fā)酵制成的高效、安全的國產(chǎn)現(xiàn)代調(diào)脂中藥。血脂康的主要有效成分為洛伐他汀，而且洛伐他汀是實驗室常用的抗癌陽性對照品。但是，除了洛伐他汀，血脂康中還可能存在一些未知的抗癌成分。故尚需要發(fā)現(xiàn)新的具有抗癌作用的化合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人經(jīng)過深入的研究和創(chuàng)造性的勞動，得到了一種留醇類衍生物，并且本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物能夠有效地抑制癌細胞(腫瘤細胞)的增殖，從而具有作為預防和/或治療和/或輔助治療癌癥的藥物的潛力。由此提供了下述發(fā)明:本發(fā)明的一個方面涉及式I所示的化合物，或其藥學上可接受的鹽，
權利要求
1.如下的(1)-(4)中的任一項在制備預防和/或治療和/或輔助治療癌癥的藥物中的用途；具體地，所述癌癥為結腸癌、肝癌、淋巴癌、或黑色素瘤， (1)式I所示的化合物或其藥學上可接受的鹽，式I
2.權利要求1中所述的(1)-(4)中的任一項在制備在體內(nèi)或體外抑制腫瘤細胞的藥物或者試劑中的用途；具體地，所述腫瘤細胞為結腸癌細胞、肝癌細胞、淋巴癌細胞或黑色素瘤細胞。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的用途，其中，所述第(3)項中的提取物為紅曲提取物和/或紅曲醇提物(例如血脂康膠囊內(nèi)容物)的提取物。
4.根據(jù)權利要求3所述的用途，其中，所述第(3)項中的提取物，其為如下的步驟I)至2)中制得的石油醚-乙酸乙酯為50: 50-25: 75的洗脫部分；或如下的步驟I)至3)中制得的甲醇-水為50: 50-75: 25的洗脫部分；或如下的步驟I)至4)中制得的9.2min的色譜峰部分: 1)取紅曲和/或紅曲的醇提物(例如血脂康膠囊內(nèi)容物干粉)，用2-6倍體積的選自二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇中的一種或多種有機溶劑作為溶劑超聲提取一次或多次，每次20-40分鐘，合并提取液，除去溶劑，得到精提物； 2)將步驟I)得到的精提物進行硅膠柱色譜分離，用石油醚和乙酸乙酯進行梯度洗脫；石油醚-乙酸乙酯的體積比依次為75: 25,50: 50-25: 75,0: 100 ；3)取步驟2)中的石油醚-乙酸乙酯為50: 50-25: 75的洗脫部分，經(jīng)C18反相柱色譜進行分離，用甲醇-水進行梯度洗脫，甲醇-水的體積比依次為10: 90,50: 50-75: 25、100: O ;和 4)取步驟3)中的甲醇-水為50: 50-75: 25的洗脫部分用半制備高效液相色譜純化，以乙腈-0.2%乙酸水溶液(45: 55)為流動相，C18半制備柱為固定相，收集9.2min的色譜峰部分。
5.根據(jù)權利要求4所述的用途，其特征在于(1)-(8)中的任一項或者多項: (1)步驟I)中，所述有機溶劑為二氯甲烷； (2)步驟I)中，所述超聲提取進行3次； (3)步驟I)中，通過減壓濃縮除去溶劑； (4)步驟2)中，石油醚-乙酸乙酯的體積比依次為75: 25,50: 50,25: 75,0: 100 ； (5)步驟3)中，取步驟2)中的石油醚 -乙酸乙酯為50: 50或25: 75的洗脫部分； (6)步驟3)中，甲醇-水的體積比依次為10: 90,50: 50,75: 25,100: O ； (7)步驟4)中，取步驟3)中的甲醇-水為50: 50或75: 25的洗脫部分；和 (8)步驟4)中，將收集的9.2min的色譜峰部分合并。
6.根據(jù)權利要求1或2所述的用途，其中，所述第(4)項中的組合物還包括藥學上可接受的載體或輔料。
7.一種在體內(nèi)或體外抑制腫瘤細胞的方法，包括使用有效量的權利要求1中所述的(1)-(4)中的任一項的步驟；具體地,所述腫瘤細胞為結腸癌細胞、肝癌細胞、淋巴癌細胞或黑色素瘤細胞。
8.根據(jù)權利要求7所述的方法，其中，所述第(3)項中的提取物為紅曲提取物和/或紅曲醇提物(例如血脂康膠囊內(nèi)容物)的提取物。
9.根據(jù)權利要求8所述的方法，其中，所述第(3)項中的提取物，其為如下的步驟I)至2)中制得的石油醚-乙酸乙酯為50: 50-25: 75的洗脫部分；或如下的步驟I)至3)中制得的甲醇-水為50: 50-75: 25的洗脫部分；或如下的步驟I)至4)中制得的9.2min的色譜峰部分: 1)取紅曲和/或紅曲的醇提物(例如血脂康膠囊內(nèi)容物干粉)，用2-6倍體積的選自二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇中的一種或多種有機溶劑作為溶劑超聲提取一次或多次，每次20-40分鐘，合并提取液，除去溶劑，得到精提物； 2)將步驟I)得到的精提物進行硅膠柱色譜分離，用石油醚和乙酸乙酯進行梯度洗脫；石油醚-乙酸乙酯的體積比依次為75: 25,50: 50-25: 75,0: 100 ； 3)取步驟2)中的石油醚-乙酸乙酯為50: 50-25: 75的洗脫部分，經(jīng)C18反相柱色譜進行分離，用甲醇-水進行梯度洗脫，甲醇-水的體積比依次為10: 90,50: 50-75: 25、100: O ;和 4)取步驟3)中的甲醇-水為50: 50-75: 25的洗脫部分用半制備高效液相色譜純化，以乙腈-0.2%乙酸水溶液(45: 55)為流動相，C18半制備柱為固定相，收集9.2min的色譜峰部分。
10.根據(jù)權利要求9所述的方法，其特征在于(1)-(8)中的任一項或者多項: (I)步驟I)中，所述有機溶劑為二氯甲烷；(2)步驟I)中，所述超聲提取進行3次； (3)步驟I)中，通過減壓濃縮除去溶劑；(4)步驟2)中，石油醚-乙酸乙酯的體積比依次為75: 25,50: 50,25: 75,0: 100 ；(5)步驟3)中，取步驟2)中的石油醚-乙酸乙酯為50: 50或25: 75的洗脫部分； (6)步驟3)中，甲醇-水的體積比依次為10: 90,50: 50,75: 25,100: O ； (7)步驟4)中，取步驟3)中的甲醇-水為50: 50或75: 25的洗脫部分；和 (8)步驟4)中，將收集的9.2min的色譜峰部分合并。
11.根據(jù)權利要求7所述的方法，其中，所述第(4)項中的組合物還包括藥學上可接受的載體或輔料 。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥化工領域，涉及一種甾醇類衍生物的抗癌用途。其中，所述甾醇類衍生物為式I所示的化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中，R1選自-OH、＝O、H、以及C1-C3烷基；R2選自-OH、H、以及C1-C3烷基；R3選自-OH、＝O、H、以及C1-C3烷基；R4選自-OH、H、以及C1-C3烷基；并且R1、R2、R3、和R4中任意2個、3個或4個同時為-OH。本發(fā)明的化合物能夠有效地抑制癌細胞(腫瘤細胞)的增殖，且抑制作用且呈濃度-效應關系；從而具有作為預防和/或治療和/或輔助治療癌癥的藥物的潛力。
文檔編號A61P35/00GK103169713SQ201110442009
公開日2013年6月26日 申請日期2011年12月26日 優(yōu)先權日2011年12月26日
發(fā)明者段震文, 郭樹仁, 李雪梅 申請人:北京北大維信生物科技有限公司