專利名稱：作為止痛和抗炎劑的6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)止痛和抗炎劑的方法以及治療人類炎癥疾病而又不引起蛋白尿的方法。
Kadin在4，556，672號(hào)美國(guó)專利中描述了一些在3位上帶有?；〈?-羥吲哚-1-甲酰胺化合物，這些化合物是環(huán)氧化酶(CO)和脂氧化酶(LO)的抑制劑。這些化合物可用作哺乳動(dòng)物的止痛劑，并可用以改善或消除病人的疼痛狀況，例如外科病人或外傷病人。這些化合物也可用來對(duì)哺乳動(dòng)物慢性給藥以緩解諸如炎癥和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎這類慢性病的疼痛癥狀。Kadin在權(quán)利要求中特別提到一種產(chǎn)生止痛反應(yīng)的方法，以及治療哺乳動(dòng)物患者的炎癥疾病的方法，該治療方法包括用有效量的2-羥吲哚-1-甲酰胺類化合物來治療所說的哺乳動(dòng)物患者。這一化合物包括6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺。然而，對(duì)后面一種化合物的使用并不特別一致。
Kadin的2-羥吲哚-1-甲酰胺是高度有效的止痛劑和抗炎劑，但這組化合物中的5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺發(fā)現(xiàn)在一些患者中引起非進(jìn)行性的、可逆的蛋白尿。6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺并不引起蛋白尿。
本發(fā)明提供一種改進(jìn)的方法，該方法通過給患者施用對(duì)止痛或抗炎有效量的3-?；?2-羥吲哚-1-甲酰胺化合物，使該患者產(chǎn)生止痛或抗炎反應(yīng)；其中所說的改進(jìn)包括給所述患者施用一種止痛或抗炎而又不產(chǎn)生蛋白尿的一定劑量的6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺或其可藥用的堿式鹽，從而產(chǎn)生所述的止痛或抗炎反應(yīng)，同時(shí)又使該患者保持正常的尿蛋白/肌酸酐比率。
6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺(Ⅰ)是通過作為參考文獻(xiàn)并入本文的U.S.4,556,672所描述的下列反應(yīng)步驟和制備實(shí)例1-3的方法制備的。

6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺呈酸性，可形成堿式鹽。所有的堿式鹽均屬本發(fā)明的范圍之內(nèi)，它們可以通過常規(guī)的方法來制備。例如，在一種水的、非水的或部分為水的介質(zhì)中，通常以一種化學(xué)計(jì)量比簡(jiǎn)單地將上述的酸性化合物和堿結(jié)合起來，或者在適當(dāng)?shù)那闆r下將所述化合物的一種鹽轉(zhuǎn)變成另一種鹽，都可以制備這類堿式鹽。可以通過通濾、或通過用另一種溶劑使之沉淀后再過濾、或?qū)⑷軇┱舭l(fā)、或在水溶液的情況下必要時(shí)通過冷凍干燥等方法來回收這些堿式鹽。優(yōu)選的鹽是那些自然存在的氨基酸酯的鹽。
應(yīng)知道6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺大量地是以烯醇式存在，所有這些互變異構(gòu)體均包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
本文中所謂蛋白尿的“顯著增加或減少”是指經(jīng)過方差分析(ANOVA)表明的具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的增加或減少，首先根據(jù)患者在治療期間的蛋白/肌酸酐比值(PC)數(shù)據(jù)做回歸線，求出斜率。然后用ANOVA的方法分析此斜率，以確定對(duì)照組與處理組之間的愈后、病程和治療效果方面是否存在著差異。
6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺及其鹽具有止痛活性。這種活性可通過阻斷小鼠施用2-苯基-1，4-苯醌(PBQ)產(chǎn)生的腹部收縮來證實(shí)。該方法基于Siegmund等的方法(Proc.Soc.Exp.Biol.Med.,95,729-731(1957))，適合于高強(qiáng)收縮[進(jìn)一步參見Milne和Twomey，AgentsandActions，10，31-37，(1980)]。這些實(shí)驗(yàn)所用的小鼠為CF-1白化株的Carworth雄性鼠，體重18-20g。所有小鼠在服藥和試驗(yàn)之前禁食一夜。
將6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺溶解或懸浮在一種載體中，該載體由5%乙醇、5%emulphor620(一種聚氧乙烯脂肪酸酯的混合物)和90%鹽水構(gòu)成。這種載體還用作對(duì)照。劑量以鹽的重量計(jì)算，按對(duì)數(shù)級(jí)數(shù)增加(即...0.32,1.0,3.2,10。32...mg/kg)。給藥途徑為口服，濃度可變，以使小鼠服藥量為恒定劑量，即10ml/kg。用上述Milne和Towney的方法來測(cè)定藥效。給小鼠口服化合物，1小時(shí)后腹膜內(nèi)注入PBQ，劑量2mg/kg。立即將小鼠單個(gè)地放入一溫暖的有機(jī)玻璃小室內(nèi)，從注入PBQ后5分鐘開始，記錄5分鐘內(nèi)小鼠腹部收縮的次數(shù)。與同一天同時(shí)進(jìn)行的對(duì)照小鼠記錄到的腹部收縮次數(shù)比較，根據(jù)試驗(yàn)鼠收縮次數(shù)的減少來計(jì)算止痛保護(hù)的程度，即最大保護(hù)效果(%MPE)。至少做了四次測(cè)試，得到了計(jì)算的MPE50值(將腹部收縮減少到對(duì)照水平的50%的最佳劑量評(píng)估值)的劑量-反應(yīng)數(shù)據(jù)。
6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺還具有抗炎活性。這種活性可用大鼠通過基于標(biāo)準(zhǔn)的愛蘭苔膠誘導(dǎo)的鼠足水腫試驗(yàn)的方法來證明。[Winteretal,Proc.Soc.Exp.Biol.Med.111,544(1963)]。
將體重150g-190g的未麻醉的雄性成年大白鼠編號(hào)，稱重，在右外踝外用墨水標(biāo)記。將每只爪子都浸在水銀中，剛將浸到墨水標(biāo)記處。水銀盛在一個(gè)玻璃筒里，該簡(jiǎn)連接一個(gè)Statham壓力傳感器。該傳感器的輸出通過一個(gè)控制器被傳送給一個(gè)微電量計(jì)。讀出被浸入的爪子所代替的那部分水銀的體積。用管飼法給藥。給藥1小時(shí)后，在標(biāo)記的那只爪子的足跖組織中注射0.05ml%愛蘭苔膠溶液以產(chǎn)生水腫。注射完畢立即測(cè)量該足的體積。注射愛蘭苔膠后3小時(shí)足爪體積的增加即表示個(gè)體的炎癥反應(yīng)。
6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺及其鹽的止痛活性使得它們可用于對(duì)哺乳類動(dòng)物急性給藥以控制諸如術(shù)后和腫瘤引起的疼痛。此外，6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺還可用于對(duì)哺乳類動(dòng)物慢性給藥，以緩解諸如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎以及與骨關(guān)節(jié)有關(guān)的疼痛和其它肌肉骨骼的炎癥等慢性病的癥狀。
正常的人尿中通常會(huì)排出大量的肌酸酐，而蛋白的排出量則小得多，蛋白/肌酸酐比通常保持在大約0.05∶0.1。這里所說的尿中正常的蛋白/肌酸酐比是指這個(gè)人在服任何藥物之前，其尿中的蛋白/肌酸酐比。這里所說的“不引起蛋白尿的量”定義為一種止痛或抗炎化合物的劑量，與正常值相比，該劑量不會(huì)顯著的增加尿中蛋白/肌酸酐的比值。
已發(fā)現(xiàn)在10-15%的患者中，施用5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺(80mg/日)4周內(nèi)可引起蛋白尿。在不連續(xù)服藥的情況下這種蛋白尿是非進(jìn)行性的，而且是可逆的。以320mg/日的劑量服用本發(fā)明的化合物也不引起蛋白尿，見實(shí)施例1和2。
當(dāng)把6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺或其可藥用的鹽用作止痛劑或抗炎劑時(shí)，可單獨(dú)給患者施用，或者最好按照標(biāo)準(zhǔn)的藥學(xué)慣例與可藥用的載體或稀釋劑合起來以藥物組合物形式使用。該化合物可經(jīng)口服給藥，也可經(jīng)消化道外的途徑給藥。消化道外給藥包括靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)，腹膜內(nèi)，皮下和局部給藥。
在含有6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺或其可藥用的鹽的藥物組合物中，載體與有效成分的重量比通常為1∶4到4∶1，優(yōu)選1∶2到2∶1。但在任何給定的情況下，所選擇的重量比將取決于這樣一些因素，如活性成分的溶解度、預(yù)定的劑量和給藥途徑。
6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺的口服劑型可以是，例如，片劑或膠囊，或做成一種水溶液或混懸液。做成口服的片劑時(shí)，通常所用的載體包括乳糖和玉米淀粉以及潤(rùn)滑劑，如硬酯酸鎂。對(duì)于口服的膠囊，乳糖和玉米干淀粉是可用的稀釋劑。需要用口服的水混懸液時(shí)，則將活性成分與乳化劑和懸浮劑結(jié)合。必要時(shí)，可以加一些甜味劑和/或芳香劑。用作肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下和靜脈內(nèi)給藥時(shí)，通常制成活性成分的滅菌溶液，并需適當(dāng)調(diào)節(jié)和緩沖溶液的PH值。對(duì)于靜脈內(nèi)給藥，需控制溶質(zhì)的總濃度以使制劑成等滲液。
當(dāng)將6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺或其鹽用于人類時(shí)，每日的劑量通常由處方醫(yī)生決定。而且，劑量也須根據(jù)患者的年齡、體重、個(gè)體反應(yīng)和癥狀的嚴(yán)重程度以及所用藥的具體制劑的效力而有所不同。然而，就緩解疼痛的急性給藥時(shí)，大多數(shù)情況下所需的有效劑量為0.01-0.5g(例如每4-6小時(shí))。就慢性給藥而言，大多數(shù)情況下有效劑量為0.01-1.0g/日，優(yōu)選劑量為1-320mg/日，最優(yōu)選的劑量為40-160mg/日，一次或分?jǐn)?shù)次給藥。另一方面，在某些情況下需用的劑量可能超出這些范圍。
給出下列實(shí)施例和制備例僅為進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實(shí)施例1使用雙盲安慰劑對(duì)照設(shè)計(jì)，給36名患者投以6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺，劑量為40，80，160和320mg，每日一次。第一天投藥一次，接下來的7天為清除期，然后再繼續(xù)投藥21天。每個(gè)劑量水平都是給9個(gè)人投以6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺，給3個(gè)人投以安慰劑，投給的安慰劑劑型與藥物的劑型一致。本項(xiàng)研究就組內(nèi)分配來說是雙盲的，而就組間分配來說是單盲的。用計(jì)算機(jī)做出的隨機(jī)表將受試者分配到各處理組去。每次給藥(藥物和安慰劑)都是在空腹禁食(只服240ml水)過夜后進(jìn)行。在給藥的第一天和最后一天，于給藥后第0小時(shí)(作為基線)和0.5，1，2，3，4，6，8，12，16，24，48，72，96，120，144，和168小時(shí)(最后一天還要在給藥后的192，216和240小時(shí))分別抽取足夠/ml血漿的血樣。在給藥的第一天和最后一天還要采集24步小時(shí)的尿樣以測(cè)定肌酸酐、尿酸、β2_微球蛋白、白蛋白和總蛋白。另外，在第2、第8和第22次給藥后及在最后一次給藥后240小時(shí)，從第一次展尿中(但須在服藥前)取20ml尿樣做蛋白和肌酸酐的定量測(cè)定。整個(gè)研究中藥物處理組與安慰劑處理對(duì)照組之間在蛋白/肌酸酐比值上沒有顯著性差異。
實(shí)施例2
用雙盲法安慰劑對(duì)照交叉設(shè)計(jì)，給25名患者投以6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺，劑量為80mg/日。患者隨機(jī)地給予6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺4周后再投以安慰劑4周，或者先投以安慰劑4周后再投以4周6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺。如果癥狀發(fā)展得難以忍受，患者也可以較早地轉(zhuǎn)入第二階段的投藥。開始處理前所有非類固醇類抗炎藥物均須停用，并給予1周的清除期。研究中在基線日及每周1次測(cè)定患者尿中的蛋白/肌酸酐比值。本申請(qǐng)書要求采集24小時(shí)的尿樣以便在以蛋白/肌酸酐比值為基準(zhǔn)估算24小時(shí)蛋白排出量時(shí)確定是否有任何增加。在用6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺治療時(shí)患者尿中的蛋白/肌酸酐比值未見有明顯變化，而且在用6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺治療與用安慰劑治療的患者間，其蛋白/肌酸酐比值也未見有顯著性差異。
制備例16-氯-5-氟-2-羥吲哚向130ml甲苯中攪拌下加入24.0g(0.165mol)3-氯-4-氟苯胺和13.5ml(0.166mol)吡啶。將生成的溶液冷卻到約0℃，加入13.2ml(0.166mol)2-氯乙酰氯。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，然后用100ml1N鹽酸再用100ml飽和氯化鈉溶液提取兩次。用硫酸鎂使得到的甲苯溶液干燥，真空濃縮，得32.6g(收率88%)N-(2-氯乙?；?-3-氯-4-氟苯胺。
將26.63gN-(2-氯乙?；?-3-氯-4-氟苯胺與64g無水三氯化鋁充分混合，將混合物在210°-230℃下加熱8.5小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物于攪拌下倒入水和1N鹽酸的混合物中，繼續(xù)攪拌30分鐘，過濾回收22.0g固體物。將比固體物質(zhì)以1∶1比例溶于乙酰乙酯/正己烷中，用800g硅膠進(jìn)行色譜分離。洗脫色譜柱，蒸發(fā)洗脫液，先得11.7gN-(2-氯乙?；?-3-氯-4-氟苯胺，然后得3.0g6-氯-5-氟-2-羥吲哚。將后面得到的這種化合物用甲苯重結(jié)晶，得1.70g(產(chǎn)率7%)6-氯-5-氟-2-羥吲哚，熔點(diǎn)196°-206℃。核磁共振譜分析表明產(chǎn)物中含有一些4-氯-5-氟-2-羥吲哚。
制備例26-氯-5-氟-2-羥吲哚-1-甲酰胺向6-氯-5-氟-2-羥吲哚(0.04mole)的乙腈(80ml)漿液中加入6.65g氯磺酰異氰酸酯(0.047mole)，將混合物攪拌45分鐘。然后加100ml水，將此水性混合物攪拌1小時(shí)。生成的沉淀經(jīng)過濾后用乙腈重結(jié)晶得0.92g標(biāo)題產(chǎn)物。用乙酸乙酯(300ml)提取濾液將提取液用MgSO4干燥，然后減壓蒸發(fā)，可得到額外的產(chǎn)物。用乙腈重結(jié)晶后得到另外的2.2g產(chǎn)物，熔點(diǎn)229°-231℃。
制備例36-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺將0.1mole6-氯-5-氟-2-羥吲哚-1-甲酰胺和26.9g(0.22mol)4-(N，N-二甲氨基)吡啶于200mlN，N-二甲基甲酰胺中的漿狀混合物于攪拌下冷卻到冰浴的溫度，然后將溶于50mlN，N-二甲基甲酰胺中的16.1g(0.11mole)2-噻吩甲酰氯溶液滴加進(jìn)去。繼續(xù)攪拌約30分鐘，然后將此反應(yīng)混合物倒入1升水和75ml3NHCL的混合物中。用冰浴冷卻生成的混合物，然后過濾收集濾渣。用水洗滌濾渣。再用1800ml乙酸使之重結(jié)晶，得26.6g疏松、黃色的標(biāo)的化合物結(jié)晶，熔點(diǎn)220-221℃。
權(quán)利要求
1.一種使患有疼痛或炎癥的病人產(chǎn)生止痛或抗炎癥反應(yīng)同時(shí)又使其尿中的蛋白/肌酸酐比值保持正常的藥物組合物，所述病人對(duì)由2-羥吲哚-1-甲酰胺類的止痛劑的抗炎劑引起的非進(jìn)行性的可逆的蛋白尿是敏感的；該組分含有對(duì)止痛或抗炎有效而不產(chǎn)生蛋白尿的一定量的6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺或其可藥用的堿式鹽，及可藥用的載體或烯釋劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種通過服用6-氯-5-氟-3-(2-噻吩甲酰)-2-羥吲哚-1-甲酰胺或其可藥用的堿式鹽產(chǎn)生止痛作用和治療炎癥疾病而又不使病人發(fā)生蛋白尿的方法。
文檔編號(hào)A61K31/4045GK1099614SQ9410105
公開日1995年3月8日 申請(qǐng)日期1994年1月21日 優(yōu)先權(quán)日1993年1月22日
發(fā)明者K·庫(kù)珀, B·H·李特曼, C·J·帕佐斯, K·D·韋爾納 申請(qǐng)人:美國(guó)輝瑞有限公司