專(zhuān)利名稱(chēng)：含吡唑啉酮衍生物的穩(wěn)定的高濃度注射劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種注射劑，主要含有高濃度的具有式(I)結(jié)構(gòu)的吡唑啉酮衍生物、或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物 其中R1為氫原子、芳基、含1至5個(gè)碳原子的烷基或總共含3至6個(gè)碳原子的烷氧基羰基烷基；R2為氫原子、芳氧基、芳基巰基、含1至5個(gè)碳原子的烷基或含1至3個(gè)碳原子的羥基烷基，或者，R1和R2一起形成含3至5個(gè)碳原子的亞烷基；R3為氫原子、含1至5個(gè)碳原子的烷基、含5至7個(gè)碳原子的環(huán)烷基、含1至3個(gè)碳原子的羥基烷基、芐基、萘基或苯基，或被1至3個(gè)取代基取代的苯基，該取代基可相同或不同，選自下列基團(tuán)含1至5個(gè)碳原子的烷氧基、含1至3個(gè)碳原子的羥基烷基、總共含2至5個(gè)碳原子的烷氧基羰基、含1至3個(gè)碳原子的烷基巰基、含1至4個(gè)碳原子的烷基氨基、總共含2至8個(gè)碳原子的二烷基氨基、鹵原子、三氟甲基、羧基、氰基、羥基、硝基、氨基和乙酰氨基。更具體地，本發(fā)明涉及一種長(zhǎng)期穩(wěn)定的高濃度注射劑，含有上述吡唑啉酮衍生物或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物作為有效成分。
背景技術(shù)：
3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮(非專(zhuān)利名“Edaravone”，商品名“Radicut”；由Mitsubishi Pharma Corporation生產(chǎn)銷(xiāo)售。下文中稱(chēng)為Edaravone)是上述吡唑啉酮衍生物的其中一種，也被稱(chēng)為3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮。該化合物有效用于各種腦血管疾病的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)，并且極具潛力能在臨床上用于治療腦血管疾病，如腦中風(fēng)、腦瘤、頭部外傷急性期常見(jiàn)的腦缺血、腦水腫等，這些疾病目前還沒(méi)有有效藥物能治療(brain function normalizing effect(JP特公平5-31523)，lipid peroxidation inhibiting effect(JP特公平5-35128)。含Edaravone作為有效成分的注射劑已經(jīng)被開(kāi)發(fā)出來(lái)。其中一個(gè)例子為Edaravone水溶液的注射液，含有至少一種選自亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽和焦亞硫酸鹽的化合物，以及半胱氨酸，其pH值為2.5～6.0(JP特公平7-121861)。
如今，Edaravone在臨床上用作腦保護(hù)劑(輸液)，每天需給藥2安瓿。如果將來(lái)Edaravone用于治療其他疾病，可能需要施用更多安瓿。因此，按照現(xiàn)行的處方，每天需要準(zhǔn)備至少2安瓿或小瓶。但是，在醫(yī)療現(xiàn)場(chǎng)不能出現(xiàn)任何意外，必須盡可能減少藥品的配制步驟，提高制劑的實(shí)用性。而且，使用多個(gè)安瓿或小瓶的藥品需要更大的空間來(lái)存放。這種狀況無(wú)論對(duì)藥品生產(chǎn)者還是實(shí)施治療的醫(yī)護(hù)人員來(lái)說(shuō)都是不利的。
因此需要研制一種含有高濃度Edaravone的小容量制劑，即，高濃度小容量的注射劑。但是，Edaravone難溶于水(在25℃為2mg/mL)，其化學(xué)穩(wěn)定性隨在水溶液中的濃度升高而降低，并且，相對(duì)于粉末形式，其在水溶液中更易于被氧化而分解。由于上述特性，很難將Edaravone作為一種藥品長(zhǎng)期穩(wěn)定保存，并且，制備一種含Edaravone的濃度超過(guò)其在水中的飽和濃度的注射劑是很難的，事實(shí)上，在此之前，從未得到這樣的劑型。
發(fā)明詳述本發(fā)明人致力研究一種高濃度小容量的注射劑，含有吡唑啉酮衍生物或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物作為有效成分。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在各種用于注射劑的可藥用添加劑中，乙醇具有優(yōu)良的助溶效果，大幅提高吡唑啉酮衍生物或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物在水中的溶解度。還發(fā)現(xiàn)乙醇是一種優(yōu)良的助溶劑，其作為注射劑的添加劑具有很高的安全性，并且很難與吡唑啉酮衍生物或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物發(fā)生反應(yīng)(試驗(yàn)例1)。在研究吡唑啉酮衍生物或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物的高濃度溶液的化學(xué)穩(wěn)定性時(shí)，卻發(fā)現(xiàn)溶液出現(xiàn)變色，表明溶液中發(fā)生了某些反應(yīng)。本發(fā)明人繼續(xù)進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過(guò)加入穩(wěn)定劑，吡唑啉酮衍生物或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物的穩(wěn)定性顯著提高(試驗(yàn)例2)，從而完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的要點(diǎn)如下1、一種注射劑，其相對(duì)于注射劑總量含有3～60mg/mL的式(I)吡唑啉酮衍生物、或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物， 其中R1為氫原子、芳基、含1至5個(gè)碳原子的烷基或總共含3至6個(gè)碳原子的烷氧基羰基烷基；R2為氫原子、芳氧基、芳基巰基、含1至5個(gè)碳原子的烷基或含1至3個(gè)碳原子的羥基烷基，或者，R1和R2一起形成含3至5個(gè)碳原子的亞烷基；R3為氫原子、含1至5個(gè)碳原子的烷基、含5至7個(gè)碳原子的環(huán)烷基、含1至3個(gè)碳原子的羥基烷基、芐基、萘基或苯基，或被1至3個(gè)取代基取代的苯基，該取代基可相同或不同，選自下列基團(tuán)含1至5個(gè)碳原子的烷氧基、含1至3個(gè)碳原子的羥基烷基、總共含2至5個(gè)碳原子的烷氧基羰基、含1至3個(gè)碳原子的烷基巰基、含1至4個(gè)碳原子的烷基氨基、總共含2至8個(gè)碳原子的二烷基氨基、鹵原子、三氟甲基、羧基、氰基、羥基、硝基、氨基和乙酰氨基。
2、所述注射劑，其中吡唑啉酮衍生物為3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮。
3、所述注射劑，其還含有乙醇。
4、所述注射劑，含有基于所述注射劑總量的10～70v/v％的乙醇。
5、所述注射劑，其pH為2.0～6.5。
6、所述注射劑，其pH為3.0～4.5。
7、所述注射劑，其還含有可藥用穩(wěn)定劑。
8、所述注射劑，其中可藥用穩(wěn)定劑相對(duì)于注射劑總量的含量為0.01～1mg/mL。
9、所述注射劑，其中可藥用穩(wěn)定劑為螯合劑。
10、所述注射劑，其中螯合劑為選自乙二胺、乙二胺四乙酸鈣二鈉和乙二胺四乙酸二鈉中的至少一種。
以下詳述制備上述注射劑的過(guò)程。首先，將吡唑啉酮衍生物或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物溶解于乙醇。另外，將穩(wěn)定劑加入到pH為2.0～6.5的緩沖液中使其溶解，制備成另一種溶液。將兩種溶液攪拌混勻。如果pH值在攪拌后發(fā)生很大變化，用適合的酸或堿將其調(diào)回到2.0～6.5。然后將溶液滅菌，裝入合適的容器(安瓿、小瓶等)密封，從而得到本發(fā)明的注射劑。
通過(guò)調(diào)節(jié)作為助溶劑加入的乙醇的量，本發(fā)明的吡唑啉酮衍生物或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物可以調(diào)制到3mg～60mg/mL的濃度范圍。因此，作為助溶劑加入的乙醇的濃度可以根據(jù)需要溶解的吡唑啉酮衍生物或生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物的濃度進(jìn)行調(diào)節(jié)。但如果乙醇濃度過(guò)低，其對(duì)于吡唑啉酮衍生物或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物的助溶效果下降。相反，過(guò)高的濃度給注射液的制備帶來(lái)困難，例如，液體的量很難調(diào)整，因?yàn)閾]發(fā)度增大。因此，乙醇的濃度為注射劑總量的10～70v/v％，優(yōu)選為15～55v/v％，更優(yōu)選為20～40v/v％?？梢约尤肴魏慰伤幱梅€(wěn)定劑，但優(yōu)選使用螯合劑。任何可藥用螯合劑可都以用作本發(fā)明的螯合劑，但優(yōu)選乙二胺、乙二胺四乙酸鈣二鈉或乙二胺四乙酸二鈉，更優(yōu)選乙二胺四乙酸二鈉。穩(wěn)定劑的濃度優(yōu)選為0.01～1mg/mL，特別優(yōu)選為0.05～0.5mg/mL。如果穩(wěn)定劑的量低于上述范圍，對(duì)吡唑啉酮衍生物或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物不能產(chǎn)生足夠的穩(wěn)定效果。如果穩(wěn)定劑的量超過(guò)上述范圍，其穩(wěn)定效果已經(jīng)到極限，并且從安全性方面考慮是不可取的。本發(fā)明注射劑的pH值通過(guò)用于注射劑的可藥用緩沖劑如檸檬酸或其鹽、磷酸或其鹽、醋酸或其鹽等調(diào)節(jié)，考慮到吡唑啉酮衍生物或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物的穩(wěn)定性，pH值優(yōu)選調(diào)至2.0～6.5，特別優(yōu)選3.0～4.5。制備本發(fā)明注射劑時(shí)還可根據(jù)需要加入可藥用等滲劑、防腐劑等。
最佳實(shí)施方式以下將進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。需要注意的是，只要不偏離本發(fā)明主旨，本發(fā)明不限于下列實(shí)施方式。
<實(shí)施例1>
將Edaravone(1g)溶于60mL乙醇。另外，分別將20mg乙二胺四乙酸二鈉，420mg檸檬酸一水合物和294mg檸檬酸三鈉溶于140mL注射用水中。將兩種溶液攪拌混勻，用1mol/L的鹽酸將混合溶液的pH調(diào)至3.6。然后加入注射用水至總體積為200mL，通過(guò)膜過(guò)濾器進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾。將所得溶液裝入10mL的小瓶中。用氮?dú)鈱⑿∑績(jī)?nèi)頂部空間的空氣吹出后，用橡皮塞和鋁帽將小瓶密封，得到一種注射劑(Edaravone的濃度5mg/mL)。
<實(shí)施例2>
除了用196mg磷酸代替檸檬酸一水合物和檸檬酸三鈉，其它與實(shí)施例1的方法相同，得到一種注射劑。
<對(duì)比實(shí)施例1>
將Edaravone(1g)溶于100mL乙醇，然后加入注射用水至總體積為200mL，然后通過(guò)膜過(guò)濾器進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾。將所得溶液裝入10mL的小瓶中。用氮?dú)鈱⑿∑績(jī)?nèi)頂部空間的空氣吹出后，用橡皮塞和鋁帽將小瓶密封，得到一種注射劑。
<對(duì)比實(shí)施例2>
將Edaravone(1g)溶于200mL乙醇，將得到的溶液通過(guò)膜過(guò)濾器進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾。將所得溶液裝入10mL的小瓶中。用氮?dú)鈱⑿∑績(jī)?nèi)頂部空間的空氣吹出后，用橡皮塞和鋁帽將小瓶密封，得到一種注射劑。
<對(duì)比實(shí)施例3>
除了用丙二醇代替乙醇，其它與實(shí)施例1的方法相同，得到一種注射劑，。
<對(duì)比實(shí)施例4>
除了用N，N-二甲基乙酰胺代替乙醇，其它與實(shí)施例1的方法相同，得到一種注射劑，。
<對(duì)比實(shí)施例5>
除了不使用乙二胺四乙酸二鈉，其它與實(shí)施例1的方法相同，得到一種注射劑。
<對(duì)比實(shí)施例6>
除了用50mg硫甘油(thioglycerol)代替乙二胺四乙酸二鈉，其它與實(shí)施例1的方法相同，得到一種注射劑。
<對(duì)比實(shí)施例7>
除了用70mg的L-半胱氨酸鹽酸鹽一水合物和140mg的亞硫酸氫鈉代替乙二胺四乙酸二鈉，以及用196mg的磷酸代替檸檬酸一水合物和檸檬酸三鈉，其它與實(shí)施例1的方法相同，得到一種注射劑。
<試驗(yàn)例1>
“確定Edaravone在各種助溶劑中的溶解度和助溶劑與Edaravone反應(yīng)性”往通常用作靜脈注射劑助溶劑的乙醇、丙二醇、聚乙二醇400和N，N-二甲基乙酰胺各5mL中加入注射用水(5mL)，然后攪拌。向所得助溶劑水溶液中加入Edaravone，用攪拌器在4℃的恒溫槽中以恒定且不起泡的速度攪拌該混合物一天一夜。攪拌完畢后，目測(cè)觀察到有未溶解的Edaravone，從而確認(rèn)得到的每份溶液都是Edaravone飽和水溶液。然后，用在4℃下保存的膜過(guò)濾器(孔徑0.45μm)迅速將溶液過(guò)濾，用下文所述的HPLC法檢測(cè)濾液中的Edaravone含量。另外，還給出了用作靜脈給可藥用注射劑時(shí)，每種助溶劑每天的最大用量(Iyakuhin-tenkabutu-jiten 2000(Yakuji-nippou-sha出版)，第127頁(yè)、264頁(yè)和229～230頁(yè)。乙醇的最大用量是基于NIMOTOP IV(注冊(cè)商標(biāo)，Bayer Co.)中的用量進(jìn)行計(jì)算的)，其對(duì)Edaravone的助溶效果用數(shù)值來(lái)進(jìn)行計(jì)算。結(jié)果如表1所示。
HPLC檢測(cè)方法及條件通過(guò)用對(duì)氨基苯甲酸乙酯作為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的液相色譜(LC)檢測(cè)，得到Edaravone與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積比，根據(jù)該比值，確定了Edaravone的濃度。
檢測(cè)器紫外分光光度計(jì)(檢測(cè)波長(zhǎng)240nm)色譜柱不銹鋼管，內(nèi)徑約4mm，長(zhǎng)度約15cm，裝有5μm的十八烷基硅烷化硅膠，溫度為約50℃的固定溫度。
流動(dòng)相10mM醋酸水溶液和甲醇(3∶1)的混合溶液，用氨水調(diào)至pH＝5.5。
流速調(diào)節(jié)使Edaravone的保留時(shí)間為約8分鐘。
(表1)

另外，將通過(guò)對(duì)比實(shí)施例1～4得到的注射劑保存在60℃恒溫槽中，觀察溶液隨時(shí)間的變色程度(表2)。
(表2)

上述結(jié)果表明乙醇是一種優(yōu)良的助溶劑，同時(shí)還是一種極佳的添加劑，因?yàn)樗灰鹑芤鹤兩⑶译y與Edaravone發(fā)生反應(yīng)。
<試驗(yàn)例2>
“證實(shí)Edaravone穩(wěn)定劑的優(yōu)越性”從實(shí)施例1至2以及對(duì)比實(shí)施例5至7得到的注射劑保存在40℃或60℃的恒溫槽中，通過(guò)下文的HPLC方法檢測(cè)分解產(chǎn)物量的經(jīng)時(shí)變化。保存一段預(yù)定的時(shí)間后分解產(chǎn)物的總量如表3所示。
HPLC檢測(cè)方法及條件分解產(chǎn)物的總量用各類(lèi)似分解產(chǎn)物的總面積相對(duì)于Edaravone的峰面積(按照兩種條件測(cè)定)的百分比表示，各自都用液相色譜(LC)確定。
檢測(cè)器紫外分光光度計(jì)(檢測(cè)波長(zhǎng)240nm)色譜柱不銹鋼管，內(nèi)徑約4mm，長(zhǎng)度約15cm，裝有5μm的十八烷基硅烷化硅膠，溫度為約40℃的固定溫度。
流動(dòng)相(1)水、甲醇和冰醋酸(100∶100∶1)混合液(2)10mM醋酸水溶液和甲醇(3∶1)混合溶液，用氨水調(diào)至pH＝5.5。
流速(1)調(diào)節(jié)使Edaravone的保留時(shí)間為約4分鐘。
(2)調(diào)節(jié)使Edaravone的保留時(shí)間為約11分鐘。
(表3)

證實(shí)了可以通過(guò)加入穩(wěn)定劑制備可以長(zhǎng)期保持穩(wěn)定的注射劑。
工業(yè)實(shí)用性如上所述，本發(fā)明注射劑是一種高濃度小容量的溶液型注射劑，含有吡唑啉酮衍生物或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物作為有效成分。其具有長(zhǎng)期穩(wěn)定性，利于產(chǎn)品保存，并有良好的實(shí)用性。
本發(fā)明要求日本專(zhuān)利申請(qǐng)No.2001-141683為優(yōu)先權(quán)。
權(quán)利要求
1.一種注射劑，其相對(duì)于注射劑總量含有3～60mg/mL的式(I)吡唑啉酮衍生物、或其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物， 其中R1為氫原子、芳基、含1至5個(gè)碳原子的烷基或總共含3至6個(gè)碳原子的烷氧基羰基烷基；R2為氫原子、芳氧基、芳基巰基、含1至5個(gè)碳原子的烷基或含1至3個(gè)碳原子的羥基烷基，或者，R1和R2一起形成含3至5個(gè)碳原子的亞烷基；R3為氫原子、含1至5個(gè)碳原子的烷基、含5至7個(gè)碳原子的環(huán)烷基、含1至3個(gè)碳原子的羥基烷基、芐基、萘基或苯基，或被1至3個(gè)取代基取代的苯基，該取代基可相同或不同，選自下列基團(tuán)含1至5個(gè)碳原子的烷氧基、含1至3個(gè)碳原子的羥基烷基、總共含2至5個(gè)碳原子的烷氧基羰基、含1至3個(gè)碳原子的烷基巰基、含1至4個(gè)碳原子的烷基氨基、總共含2至8個(gè)碳原子的二烷基氨基、鹵原子、三氟甲基、羧基、氰基、羥基、硝基、氨基和乙酰氨基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的注射劑，其中吡唑啉酮衍生物為3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的注射劑，其還含有乙醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任意一項(xiàng)的注射劑，其中乙醇含量為注射劑總量的10～70％體積。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任意一項(xiàng)的注射劑，其pH為2.0～6.5。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5任意一項(xiàng)的注射劑，其pH為3.0～4.5。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6任意一項(xiàng)的注射劑，其還含有可藥用穩(wěn)定劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的注射劑，其中可藥用穩(wěn)定劑相對(duì)于注射劑總量的含量為0.01～1mg/mL。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8的注射劑，其中可藥用穩(wěn)定劑為螯合劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的注射劑，其中螯合劑為選自乙二胺、乙二胺四乙酸鈣二鈉和乙二胺四乙酸二鈉中的至少一種。
全文摘要
一種注射劑，含有3～60mg/mL的吡唑啉酮衍生物，典型為Edaravone、其生理可接受鹽、或這些物質(zhì)的水合物或溶劑化物作為有效成分。其具有長(zhǎng)期穩(wěn)定性，利于產(chǎn)品保存，并有很好的實(shí)用性。
文檔編號(hào)A61P9/10GK1525856SQ0280972
公開(kāi)日2004年9月1日 申請(qǐng)日期2002年5月9日 優(yōu)先權(quán)日2001年5月11日
發(fā)明者吉田博, 松尾直樹(shù), 千葉雅俊, 俊, 樹(shù) 申請(qǐng)人:三菱制藥株式會(huì)社