專利名稱：一種抗腫瘤藥物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑及其制備方法和應(yīng)用，具體地說是一種抗腫瘤藥物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
近年來，抗腫瘤新藥的研究與應(yīng)用突破了多年徘徊發(fā)展的局面，出現(xiàn)了快速發(fā)展的強(qiáng)勁勢頭，主要表現(xiàn)在1)抗腫瘤化療新藥的研制與應(yīng)用步驟明顯加快化療新藥紫杉醇、多烯紫杉醇、草酸鉬、樂鉬、健擇、異長春花堿、開普拓、希羅達(dá)、阿里米塔等藥物的上市， 顯著提高了多種腫瘤治療的效果；幻人源化抗體研究快速升溫自從美國FDA批準(zhǔn)人源化單克隆抗體Here印tin治療Her-2表達(dá)陽性的乳腺癌以來，針對⑶20、表皮生長因子受體、 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子等單克隆抗體作為抗腫瘤新藥陸續(xù)獲得美國FDA批準(zhǔn)用于臨床，提高了部分腫瘤的治療效果；幻分子靶向藥物研制的成功隨著對腫瘤生物學(xué)行為認(rèn)識的不斷深入，人們可以有針對性地設(shè)計(jì)與腫瘤密切相關(guān)的分子靶點(diǎn)阻斷劑，以特異性地抑制腫瘤細(xì)胞的生長，如C225、Avastin、STI571、Iressa等；4)靶向載體的迅速發(fā)展將化療藥物或毒素采用長循環(huán)脂質(zhì)體微球、熱敏脂質(zhì)體微球、多聚物載藥納米粒等載體包裹，形成智能藥物，提高腫瘤治療的靶向性，減少毒性反應(yīng)。以上四大領(lǐng)域均有大批在研項(xiàng)目，其中有些已經(jīng)成為發(fā)達(dá)國家腫瘤一線、二線治療新的標(biāo)準(zhǔn)藥物。我國臨床腫瘤學(xué)起步雖然較晚，但由于與美歐發(fā)達(dá)國家頻繁的學(xué)術(shù)交流，所以在發(fā)達(dá)地區(qū)的大型醫(yī)院臨床腫瘤治療水平與發(fā)達(dá)國家是接軌的。這就造成了以下局面中國人一旦不幸得了腫瘤以后，病人自己或社會必須耗去大筆藥費(fèi)從國外制藥企業(yè)進(jìn)口極其昂貴的抗腫瘤新藥用于治療。病人不堪經(jīng)濟(jì)重負(fù)、社會不堪經(jīng)濟(jì)重負(fù)。即使在美國本土，昂貴的抗腫瘤新藥也使美國的社會保險(xiǎn)業(yè)不堪重負(fù)，更何況我國！我國民族制藥業(yè)目前大多只能仿制國際上部分超過專利保護(hù)期的藥物，比較而言，滯后、被動(dòng)。努力開發(fā)具有我國獨(dú)立自主知識產(chǎn)權(quán)的抗腫瘤新藥一直是我國醫(yī)藥學(xué)者們孜孜不倦努力研究的重要方向?？鼓[瘤化療藥物大多來源于天然藥物，然后才經(jīng)過修飾、人工合成等加工過程。中藥是源于我國的獨(dú)特的天然藥物寶庫。在我國，中藥制劑治療惡性腫瘤十分普遍，但是被現(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實(shí)具有肯定抗癌作用的藥物不多，其抗癌作用能夠與化療藥物相媲美的更少。如果在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，通過大樣本的臨床驗(yàn)證和基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中藥復(fù)方制劑抗腫瘤作用的研究，無疑是我國抗腫瘤新藥研究的優(yōu)勢所在。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明目的本發(fā)明的第一目的在于提供一種抗腫瘤藥物，該中藥對于消化道腫瘤有明顯的抑制生長的作用。本發(fā)明的第二目的是為了提供上述抗腫瘤藥物的制備方法。本發(fā)明的第三目的在于提供上述抗腫瘤藥物在制備抗腫瘤中藥復(fù)方制劑中的應(yīng)用。
技術(shù)方案為了解決上述第一目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為一種抗腫瘤藥物，它包括由如下原料藥制成烏梅、五味子按生藥重量比為4 1 1 4。為了解決上述第二目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案有三個(gè)，他們分別是一是超微粉碎的方法首先按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈，干燥；然后將洗干凈的烏梅、五味子放入超微粉碎機(jī)中粉碎20分鐘，得到500目的超粉，即得到所述藥物。二是復(fù)方水提液的制備方法首先按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈；然后將沖洗干凈的烏梅、五味子用蒸餾水熱回流提取1. 5 2. 5小時(shí)，濾去藥渣，將濾液濃縮成干浸膏，-20°C保存，即得到所述藥物；其中所述蒸餾水的重量是原料藥總重量的6 30倍。三是復(fù)方醇提液的制備方法首先按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈；然后將沖洗干凈的烏梅、五味子用體積濃度為70%的乙醇熱回流提取1. 5 2. 5小時(shí)，濾去藥渣，將濾液濃縮成干浸膏，-20°C保存，即得到所述藥物； 其中所述乙醇的重量是原料藥總重量的6 30倍。上述抗腫瘤藥物在制備抗腫瘤中藥復(fù)方制劑中的應(yīng)用。有益效果與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是五味子性能收斂固澀、益氣生津、 補(bǔ)腎寧心，能增強(qiáng)機(jī)體免疫力，促進(jìn)機(jī)體的抗癌機(jī)能，能抑制腫瘤細(xì)胞生長，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。烏梅與五味子配伍，共收扶正抗癌之效，且能明顯延長荷瘤鼠的生存時(shí)間；價(jià)格低廉， 制備、服用方便，適于推廣使用。
具體實(shí)施例方式以下通過烏梅五味子復(fù)方對吐2荷瘤小鼠的抑瘤作用和生存期影響的實(shí)驗(yàn)來進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述中藥的有益效果。本實(shí)驗(yàn)將研究不同方法提取的烏梅五味子復(fù)方對小鼠移植性肝癌H22實(shí)體瘤的抑制作用，并觀察烏梅五味子超微粉碎復(fù)方對荷瘤小鼠生存期的影響。一.實(shí)驗(yàn)材料1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腹水型H22肝癌小鼠，南京中醫(yī)藥大學(xué)提供。實(shí)驗(yàn)小鼠，普通級ICR小鼠80只，雌雄各半，體重18-22g，由揚(yáng)州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號SCXK(蘇)，2007-0001。2.實(shí)驗(yàn)藥物烏梅五味子復(fù)方水提液組(烏梅與五味子的生藥重量比為1 1)由江蘇省中醫(yī)院制劑部提供，批號101010，制備方法是首先按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈；然后將沖洗干凈的烏梅、五味子用蒸餾水熱回流提取 1. 5 2. 5小時(shí)，濾去藥渣，將濾液濃縮成干浸膏，-20°c保存，即得到所述藥物；其中所述蒸餾水的重量是原料藥總重量的10倍。烏梅五味子復(fù)方醇提液組(烏梅與五味子的生藥重量比為1 1)由江蘇省中醫(yī)院制劑部提供，批號101011，制備方法首先按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈；然后將沖洗干凈的烏梅、五味子用體積濃度為70%的乙醇熱回流提取1. 5 2. 5小時(shí)，濾去藥渣，將濾液濃縮成干浸膏，-20°C保存，即得到所述藥物；其中所述乙醇的重量是原料藥總重量的10倍。烏梅五味子復(fù)方超微粉碎組(烏梅與五味子的具體配比是1 1):由江蘇省中醫(yī)院制劑部提供，批號101012制備方法是按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈，干燥；然后將洗干凈的烏梅、五味子放入超微粉碎機(jī)中粉碎 20分鐘，得到500目的超粉，即得到所述藥物。5-FU(5-氟尿嘧啶)由天津金耀氨基酸有限公司提供，批號0904152。三.實(shí)驗(yàn)方法1.接種小鼠常規(guī)飼養(yǎng)，另取傳代保種10d，生長旺盛的吐2荷瘤小鼠，處死后，在超凈工作臺中從腹腔抽出瘤液，用生理鹽水按1 3比例制成腫瘤細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)并調(diào)節(jié)細(xì)胞數(shù)為 ΙΧΙΟ11/!，每只小鼠接種0. 2mL·以上操作須在無菌條件下盡快完成。2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組(1)烏梅五味子復(fù)方對H22實(shí)體瘤小鼠的腫瘤抑制作用將50只大鼠隨機(jī)分為陰性對照組(NS組)、陽性對照組(5-FU組)、烏梅五味子復(fù)方水提液組、烏梅五味子復(fù)方醇提液組、烏梅五味子復(fù)方超微粉碎組，每組10只。(2)烏梅五味子復(fù)方對H22實(shí)體瘤小鼠的生存期的影響將30只大鼠隨機(jī)分為陰性對照組(NS組)、陽性對照組(5-FU組)、烏梅五味子復(fù)方超微粉碎組，每組10只。3.造模及實(shí)驗(yàn)方法(1)烏梅五味子復(fù)方對H22實(shí)體瘤小鼠的腫瘤抑制作用小鼠接種后，隨機(jī)分為陰性對照組(NS組)、陽性對照組(5-FU組)、烏梅五味子復(fù)方水提液組、烏梅五味子復(fù)方醇提液組、烏梅五味子復(fù)方超微粉碎組，每組10只。接種后次日給藥，中藥各組每日灌服給藥O.anl/lOg，每日1次，連續(xù)10d。5-FU組隔日灌胃給藥 0. lml/10g體重，連續(xù)10d。陰性對照組每日灌服生理鹽水O.anl/lOg。末次給藥后次日稱體重、脫頸椎處死動(dòng)物、剖瘤稱重。按下列公式計(jì)算腫瘤抑制率。腫瘤抑制率=(對照組平均瘤重-藥物組平均瘤重)/對照組平均瘤重X 100 %判斷標(biāo)準(zhǔn)腫瘤抑制率> 30%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有明顯差異者為有抗腫瘤作用。(2)烏梅五味子復(fù)方對H22實(shí)體瘤小鼠的生存期的影響造模第2天開始用藥，直至對照組出現(xiàn)第一只動(dòng)物死亡為止。中藥組每日灌服給藥O.anl/lOg體重，每日1次，5-FU組隔日灌胃給藥0. lml/10g體重。記錄小鼠存活時(shí)間， 計(jì)算各組平均生存時(shí)間，按下列公式計(jì)算生命延長率生命延長率=(藥物組平均生存時(shí)間-對照組平均生存時(shí)間)/對照組平均生存時(shí)間X 100%4.藥效評價(jià)按照國家衛(wèi)生部藥政管理局制定的治療惡性腫瘤的中藥藥效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(1)對照組小鼠腫瘤均值不得低于腫瘤抑制率在30%以上，與對照組比較有顯著性差異； (3)給藥組動(dòng)物平均體重下降(與自身對照)不得超過15%;(4)動(dòng)物死亡數(shù)不超過20%。5.統(tǒng)計(jì)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以“ s表示，采用SPSS13. 0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，方差齊性檢驗(yàn)后，組間比較用t檢驗(yàn)。三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.烏梅五味子復(fù)方對H22實(shí)體瘤小鼠的腫瘤抑制作用陽性對照組(5-FU組)、烏梅五味子復(fù)方水提液組、烏梅五味子復(fù)方醇提液組、烏梅五味子復(fù)方超微粉碎組腫瘤抑制率分別為27.08% (P < 0. 05),33. 05% (P < 0. 05)、 34. 44% (P <0.05)。復(fù)方醇提液組、復(fù)方超微粉碎組有明顯抗腫瘤作用(見表1)。表1烏梅五味子復(fù)方對H22小鼠腫瘤瘤重的影響
組別劑量體·￡ (g)-瘤重(g)抑瘤率(g/kg)給藥前給藥后(%)陰性對照組19.51±0.830.05±0.941.84±0.695-Fu 組0.02519.12±0.8726.27±1.350.44±0.26*76.05烏梅五味子復(fù)1019.39±1.1526.14±1.371.34±0.63*27.08方水提液組烏梅五味子復(fù)1019.12±0.8727.67±1.451.23±0.46*33.05方醇提液組烏梅五味子復(fù)619.03±0.5429.08±0.791.21±0.46*34.44方超微粉碎組* 與陰性對照組比，(P < 0. 05)；2.烏梅五味子復(fù)方對H22實(shí)體瘤小鼠生存時(shí)間的影響5-Fu組、烏梅五味子復(fù)方超微粉碎組的生命延長率分別為_15.05、27.6% (P < 0. 05)，表示烏梅五味子復(fù)方可延長小鼠的生存時(shí)間(見表2)。表2烏梅五味子復(fù)方對H22小鼠生命延長率的影響
劑量體重(g)生存時(shí)間生命延長
組別-
(g/kg) 給藥前給藥后(d) 率(％)
陰性對照組 21.08±1.26 33.16+6.0527.9士 6.24
5-Fu 組 0.025 20.96±2.19 27.51+523.7±3.71 -15.05
烏梅五味子復(fù) 6 21.39±1.19 25.31±4.8335.6±8.43 27.6
方超微粉碎組* 與陰性對照組比，(P < 0. 05)；結(jié)論現(xiàn)代研究表明，收澀藥味多酸澀，多含靴質(zhì)、有機(jī)酸及其它無機(jī)鹽，具有明顯的收斂作用，其廣泛的藥理作用也主要與這些具有收斂作用的成分有關(guān)。其收斂成分與粘膜、創(chuàng)面接觸后，能使表層蛋白質(zhì)沉淀和凝固，從而形成一種保護(hù)層，使對粘膜、創(chuàng)面的刺激減輕， 并能促進(jìn)瘡面愈合，因而具有止瀉、斂瘡作用據(jù)報(bào)道其中一些收澀藥具有抗腫瘤作用，如沈紅梅等經(jīng)過體外抗腫瘤及體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，烏梅具有抑制人原始巨核白血病細(xì)胞和人早幼粒白血病細(xì)胞生成的作用；烏梅《本經(jīng)》:“下氣，除熱煩滿，安心，止肢體痛，偏枯不仁，死肌，去青黑痣，蝕惡肉，”《本經(jīng)逢原》“烏梅酸收，益精開胃，能斂肺澀腸，止嘔斂
汗，定喘安蛔，......惡瘡裔肉，己燒灰研敷，惡簧自消，此即《本經(jīng)》去死肌惡肉之言?！蔽?br> 味子性能收斂固澀、益氣生津、補(bǔ)腎寧心，屬補(bǔ)益之品，能增強(qiáng)機(jī)體免疫力，促進(jìn)機(jī)體的抗癌機(jī)能，能抑制腫瘤細(xì)胞生長，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。兩藥配伍，共收扶正抗癌之效，且能明顯延長荷瘤鼠的生存時(shí)間。以下通過實(shí)施例來進(jìn)一步闡述本發(fā)明。實(shí)施例1 一種抗腫瘤藥物，它包括由如下原料藥制成烏梅、五味子按生藥重量比為1 1。它的制備方法為首先按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈，干燥；然后將洗干凈的烏梅、五味子放入超微粉碎機(jī)中粉碎20分鐘， 得到500目的超粉，即得到所述藥物。實(shí)施例2 與實(shí)施例1基本相同，所不同的是原料藥的重量比烏梅、五味子按生藥重量比為4 1。實(shí)施例3 —種抗腫瘤藥物，它包括由如下原料藥制成烏梅、五味子按生藥重量比為1 1。它的制備方法為首先按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈；然后將沖洗干凈的烏梅、五味子用蒸餾水熱回流提取2小時(shí)，濾去藥渣，將濾液濃縮成干浸膏，-20°C保存，即得到所述藥物；其中所述蒸餾水的重量是原料藥總重量的10倍。實(shí)施例4 一種抗腫瘤藥物，它包括由如下原料藥制成烏梅、五味子按生藥重量比為1 4。它的制備方法為首先按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈；然后將沖洗干凈的烏梅、五味子用蒸餾水熱回流提取1. 5小時(shí)，濾去藥渣，將濾液濃縮成干浸膏，-20°C保存，即得到所述藥物；其中所述蒸餾水的重量是原料藥總重量的8倍。實(shí)施例5 與實(shí)施例3基本相同，所不同的是原料藥的配比和制備該藥物時(shí)所用的蒸餾水量和提取時(shí)間，其中烏梅、五味子按生藥重量比為3 2，蒸餾水的重量是原料藥總重量的30倍，提取時(shí)間為2. 5小時(shí)。實(shí)施例6 與實(shí)施例4基本相同，所不同的是制備該藥物時(shí)所用的蒸餾水量，蒸餾水的重量是原料藥總重量的6倍。實(shí)施例7 —種抗腫瘤藥物，它包括由如下原料藥制成烏梅、五味子按生藥重量比為1 1。它的制備方法為首先按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈；然后將沖洗干凈的烏梅、五味子用體積濃度為70%的乙醇熱回流提取2小時(shí)，濾去藥渣，將濾液濃縮成干浸膏，-20°C保存，即得到所述藥物；其中所述乙醇的重量是原料藥總重量的10倍。實(shí)施例8 與實(shí)施例7基本相同，所不同的是原料藥的配比、制備該藥物時(shí)所用乙醇的用量和提取時(shí)間，其中烏梅、五味子按生藥重量比為2 3;乙醇的重量是原料藥總重量的8倍；提取時(shí)間為1.5小時(shí)。實(shí)施例9 與實(shí)施例7基本相同，所不同的是原料藥的配比、制備該藥物時(shí)所用乙醇的用量和提取時(shí)間，其中烏梅、五味子按生藥重量比為4 1 ；乙醇的重量是原料藥總重量的30倍；提取時(shí)間為2. 5小時(shí)。實(shí)施例10 與實(shí)施例7基本相同，所不同的是原料藥的配比、制備該藥物時(shí)所用乙醇的用量和提取時(shí)間，其中烏梅、五味子按生藥重量比為3 2;乙醇的重量是原料藥總重量的6倍；提取時(shí)間為1.5小時(shí)。
權(quán)利要求
1.一種抗腫瘤藥物，其特征在于，它包括由如下原料藥制成烏梅、五味子按生藥重量比為4 1 1 4。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤藥物的制備方法，其特征在于，首先按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈，干燥；然后將洗干凈的烏梅、 五味子放入超微粉碎機(jī)中粉碎20分鐘，得到500目的超粉，即得到所述藥物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤藥物的制備方法，其特征在于，首先按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈；然后將沖洗干凈的烏梅、五味子用蒸餾水熱回流提取1. 5 2. 5小時(shí)，濾去藥渣，將濾液濃縮成干浸膏，-20°C保存，即得到所述藥物；其中所述蒸餾水的重量是原料藥總重量的6 30倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的抗腫瘤藥物的制備方法，其特征在于，所述蒸餾水的重量是原料藥總重量的8 10倍。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗腫瘤藥物的制備方法，其特征在于，首先按生藥重量比稱取烏梅、五味子，然后用蒸餾水分別將烏梅、五味子沖洗干凈；然后將沖洗干凈的烏梅、五味子用體積濃度為70%的乙醇熱回流提取1. 5 2. 5小時(shí)，濾去藥渣，將濾液濃縮成干浸膏，-20°C保存，即得到所述藥物；其中所述乙醇的重量是原料藥總重量的6 30倍。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的抗腫瘤藥物的制備方法，其特征在于，所述乙醇的重量是原料藥總重量的8 10倍。
7.權(quán)利要求1所述的抗腫瘤藥物在制備抗腫瘤中藥復(fù)方制劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種抗腫瘤藥物及其制備方法和應(yīng)用，該藥物包括由如下原料藥制成烏梅、五味子按生藥重量比為4∶1～1∶4。它有三種制備方法，分別是超微粉碎的方法、復(fù)方水提液的制備方法和復(fù)方醇提液的制備方法。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是五味子性能收斂固澀、益氣生津、補(bǔ)腎寧心，能增強(qiáng)機(jī)體免疫力，促進(jìn)機(jī)體的抗癌機(jī)能，能抑制腫瘤細(xì)胞生長，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。烏梅與五味子配伍，共收扶正抗癌之效，且能明顯延長荷瘤鼠的生存時(shí)間；價(jià)格低廉，制備、服用方便，適于推廣使用。
文檔編號A61K36/736GK102335258SQ20111030230
公開日2012年2月1日 申請日期2011年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月30日
發(fā)明者劉沈林, 吳堅(jiān), 鄒璽 申請人:南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院