專利名稱：前列地爾脂質(zhì)體組合藥物及工業(yè)制備和質(zhì)量控制和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種前列地爾脂質(zhì)體組合藥物及工業(yè)制備和質(zhì)量控制和用途。
背景技術(shù)：
前列地爾，曾用名前列腺素E1，簡(jiǎn)稱PGE115屬內(nèi)源性藥物，生理活性廣且高效。用于治療和預(yù)防冠心病和心肌梗塞、腦梗塞、高血壓、高血脂、動(dòng)脈硬化癥、脈管炎、腫瘤；還可治療肝炎、糖尿病血管病變及腎功能不全；對(duì)難治愈的支氣管哮喘、胰腺炎、胃潰瘍、椎底供血不足有奇效。具有用藥量小、是廣譜藥物且療效確切、半衰期短、體內(nèi)不積聚、無(wú)損害性的毒副作用的特點(diǎn)，將是百年不倒良藥。但由于其化學(xué)性質(zhì)活潑，制劑質(zhì)量穩(wěn)定性差，含量遞降影響療效和產(chǎn)生副作用，因此含量遞降和注射疼痛、冰箱儲(chǔ)運(yùn)是前列地爾制劑的三大國(guó)際難題?，F(xiàn)有技術(shù)為了克服注射疼痛，制成劑量極小乳劑，10 μ g/支，甚至5 μ g/支的靶向制劑。其實(shí)上述疾病，大多是屬于全身血液質(zhì)量病變和血管病變、內(nèi)臟病變?cè)谏眢w局部的反映，靶向制劑治療意義不大，更需大劑量前列地爾制劑對(duì)全身血液、血管、內(nèi)臟全面治療。而且我國(guó)已進(jìn)入老年人社會(huì)，患上述疾病的人口數(shù)量大，因此，制造出含量穩(wěn)定、注射不疼痛、 不需冰箱儲(chǔ)運(yùn)大劑量前列地爾制劑，對(duì)提高我國(guó)人民身體健康水平和生活質(zhì)量，更具有顯著的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益，以造福于人民。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)制備的前列地爾制劑劑量太小、注射疼痛、含量遞降、冰箱儲(chǔ)運(yùn)的四大缺陷。本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)發(fā)明目的本發(fā)明一種前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的各組份原料的重量比如下(1)高純度前列地爾O· 10 — 0.27
(2)賴氨匹林水楊酸鈉重量比為85— 95 5 —15混合物 280—350
(3)亞硫酸氫鈉和二巰丁二鈉混合物
(4)甘露醇與低分子右旋糖酐-40 重量比1: 1.2-1. 5混合物
(5)0. 015M磷酸鹽緩沖液pH值4.0—6.5
(6)蛋黃卵磷脂或大豆卵磷脂
2. 0 一4. 0
1400-1600 14000 — 15000 20—40
(7)膽固醇4-10
(8)依地酸二鈉鹽8-10本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物，是高純度前列地爾的脂質(zhì)體和賴氨匹林水楊酸鈉重量比為85-95 5-15的混合物為主要成分的組合藥物；本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物配方優(yōu)勢(shì)有高純度前列地爾為主要活性成分，純度為99. 5%以上，本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，除了現(xiàn)有本發(fā)明人的在先發(fā)明專利(專利號(hào)200810127055. 的專利技術(shù)規(guī)定其不含雜質(zhì)氫醌和鐵離子等高價(jià)金屬離子外，更重要的是不能含有前列腺A1和前列腺素B1雜質(zhì)，這是利用本發(fā)明人的在先發(fā)明專利(專利號(hào)00109233. 的專利技術(shù)精制前列地爾原料藥所得。現(xiàn)行藥典規(guī)定的前列腺素~%<3%，而前列腺素B1^沒(méi)有規(guī)定(前列地爾原料藥有規(guī)定而制劑沒(méi)規(guī)定)，本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，限定雜質(zhì)含量前列腺素A1 % < 0. 1 %，前列腺素B1 < 0. 1 %， 只有這樣才可消除前列地爾含量遞降，因?yàn)楸景l(fā)明研究發(fā)現(xiàn)前列腺素A1可蛻變?yōu)榍傲邢偎?B1,而前列腺素B1由于分子結(jié)構(gòu)內(nèi)存在ρ- π - π共軛結(jié)構(gòu)，即其五元環(huán)及環(huán)外有O = C-C =C-C = C共軛體系，在光和空氣作用下其五元環(huán)易氧化開(kāi)環(huán)，雙鍵斷裂形成酮或羧酸，這些酮和羧酸不僅可輕易地氧化前列地爾，而且羧酸可周期性地催化前列地爾蛻變?yōu)榍傲邢偎貇和前列腺素B1,所以前列地爾含量遞降，本研究發(fā)現(xiàn)高純度前列地爾在沒(méi)有雜質(zhì)干擾下，室溫下是穩(wěn)定的，本研究還發(fā)現(xiàn)純前列地爾擴(kuò)張血管僅是膨脹感，可忍受，而前列地爾雜質(zhì)，尤其是前列腺A1和酮類、羧酸類雜質(zhì)對(duì)血管刺激則是疼痛難忍。賴氨匹林和水楊酸鈉混合物為剛性賦形劑，又是前列地爾的助溶劑和保護(hù)劑，本研究發(fā)現(xiàn)尤其是水楊酸鈉和賴氨匹林組合的保護(hù)作用使前列地爾穩(wěn)定，可能是兩者分子協(xié)調(diào)地對(duì)前列地爾兩個(gè)羥基的氫鍵作用，使前列地爾羥基不易脫水，從而不易蛻變?yōu)榍傲邢偎谹1和前列腺素B1,從而阻斷了前列地爾的周期性的含量遞變，使前列地爾制劑進(jìn)入質(zhì)量穩(wěn)定，注射不疼痛，可室溫下儲(chǔ)存良性循環(huán)。這里的賴氨匹林或用阿司匹林精氨酸鹽，其在組合藥物中重量比和賴氨匹林同。二巰丁二鈉為優(yōu)良的前列地爾的抗氧劑，用量小，抗氧劑或是亞硫酸氫鈉，或兩者混和物，亞硫酸氫鈉毒性比二巰丁二鈉大，用量要小些，即在前列地爾脂質(zhì)體組合藥物中重量比在0. 7-1. 6有抗氧效果，兩者的混合物在前列地爾脂質(zhì)體組合藥物中重量比為2-4. 0。
依地酸二鈉是絡(luò)合輔料和水中金屬離子，避免前列地爾被氧化。磷酸鹽緩沖液的使用是為了使前列地爾溶解，為磷酸二氫鉀鹽或鈉鹽的緩沖液， 或用注射用水代替磷酸鹽緩沖液，在配方中注射用水重量比和磷酸鹽緩沖液等同。本發(fā)明還提供所述前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的制備方法操作過(guò)程及工藝條件(1)西林瓶理瓶、清洗、滅菌將5ml西林瓶由傳遞柜經(jīng)紫外燈滅菌后運(yùn)入理瓶室，在理瓶室進(jìn)行理瓶，把理好的西林瓶放到洗瓶室的固定位置；把GMSU-400W隧道式滅菌烘箱后面出現(xiàn)的排風(fēng)口擋板開(kāi)至一半，啟動(dòng)電加熱按鈕，預(yù)熱區(qū)、高溫區(qū)、冷卻區(qū)溫度開(kāi)始逐漸上升；當(dāng)烘箱內(nèi)預(yù)熱區(qū)溫度達(dá)到250°C、高溫區(qū)溫度達(dá)到預(yù)置溫度350°C、冷卻區(qū)溫度達(dá)到220°C，洗瓶機(jī)即可投入生產(chǎn)。PCX-IV型洗瓶機(jī)用熱純化水，XCQ-VI型洗瓶機(jī)用注射用水，啟動(dòng)PLC程控器，完成粗洗、精洗的全部過(guò)程，取精洗后的西林瓶，檢測(cè)西林瓶是否洗凈、有無(wú)可見(jiàn)異物；烘箱在運(yùn)行過(guò)程中，溫度保持在350士5°C ；西林瓶洗凈后至滅菌放置時(shí)間不超過(guò)4小時(shí)，西林瓶滅菌后至使用放置時(shí)間不超過(guò)16小時(shí)；(2)膠塞清洗、滅菌將裝5ml膠塞小盒打開(kāi)，將盒內(nèi)的合格證取出，并剔除不合格膠塞之后，將膠塞裝入料桶中；純化水、注射用水壓力0. 1-0. 2MPa，真空壓力-0. 06MPa以下，壓縮空氣 0. 4-0. 6MPa，純蒸汽0. 2MPa以上。真空進(jìn)料，待所有膠塞被吸入后，蓋上“加料、取樣口蓋”; 純化水噴淋粗洗10分鐘，超聲波漂洗15分鐘，注射用水精洗25分鐘，取樣進(jìn)行可見(jiàn)異物檢測(cè)，如檢測(cè)不合格，則點(diǎn)動(dòng)“重新精洗”按鈕，繼續(xù)自動(dòng)精洗全過(guò)程；加入二甲硅油，二甲硅油加入量為10ml，溫度上升至加熱溫度85°C后，硅化10分鐘，沖洗時(shí)間5分鐘；當(dāng)滅菌溫度逐漸上升到設(shè)置的123°C后，滅菌開(kāi)始計(jì)時(shí)，滅菌時(shí)間30分鐘；真空干燥8分鐘，當(dāng)烘干溫度逐漸上升至105°C后，熱風(fēng)干燥10分鐘，再真空干燥5分鐘，當(dāng)逐步降溫冷卻至60°C后，出料；膠塞滅菌后至使用放置時(shí)間不超過(guò)16小時(shí)；(3)鋁塑蓋清洗、軋蓋將5ml鋁塑蓋拿到鋁蓋清洗間，先剔除不合格的鋁蓋，將合格鋁塑蓋放入清洗槽中，用熱純化水進(jìn)行清洗；將已清洗的鋁塑蓋平鋪于盤中放入JRSH型凈化熱風(fēng)循環(huán)烘箱， 于110°C，干燥滅菌3小時(shí)后放置備用，其滅菌后至使用放置時(shí)間不超過(guò)16小時(shí)；(4)配液活性炭和右旋糖酐40與甘露醇混合物的處理將針劑用活性炭放入IOOOml燒杯中，在烘箱中于180°C溫度下保溫2. 5小時(shí)除菌、
除熱原、除水，降溫至室溫并密封備用；按配方量稱取右旋糖酐40與甘露醇混合物重量，加入磷酸鹽緩沖液，攪拌溶解，按右旋糖酐40重量加入10% (w% w)活性炭，加入賴氨匹林和水楊酸鈉，不需攪拌， 于121°C滅菌15分鐘，下步配料用需用的磷酸鹽緩沖液或注射用水也一同滅菌；冷卻至 60士5°C，趁熱用0.22 μ m濾膜的濾芯過(guò)濾，濾器、濾筒、管件、濾芯應(yīng)在濾前放在注射用水中滅菌后才可使用；過(guò)濾后，濾液密封，冷卻20°C 士2°C，制得輔料液；(5)將滅菌和濾過(guò)后的20°C 士2°C輔料液放入316L不銹鋼料桶中，加入滅菌磷酸鹽緩沖液，調(diào)至輔料液重量等于配方中磷酸鹽緩沖液、右旋糖酐40與甘露醇混合物、賴氨匹林和水楊酸鈉混合物三者重量之和(調(diào)藥液體積受溫度波動(dòng)誤差較大，調(diào)藥液重量只要車間在地球上地址不變，溫度不同重量不變，批與批間含量均勻度好)，攪拌均勻，先用8 % 的氫氧化鈉溶液調(diào)溶液PH值至6. 5-7. 0，用0. 22 μ m膜濾芯過(guò)濾，除去輔料、活性炭帶入輔料液中的金屬離子沉淀物、不溶性粒子，尤其是三價(jià)鐵離子沉淀物；濾過(guò)后的輔料液再用 8%鹽酸溶液調(diào)pH值4. 5-5. 5，分別在攪拌下加入依地酸二鈉鹽，加入配方量的二巰丁二鈉或亞硫酸氫鈉，分別攪拌溶解完全，待下步制備用；(6)將蛋黃卵磷脂溶解于無(wú)水乙醇中，蛋黃卵磷脂無(wú)水乙醇比為1 100(W/V)； 在700-1000轉(zhuǎn)/分?jǐn)嚢柁D(zhuǎn)速中，將蛋黃磷脂乙醇液在30分鐘內(nèi)滴加在( 步制得的輔料液中，用40Hz頻率(在常溫下)超聲波超聲至空白脂質(zhì)體粒子粒徑經(jīng)檢測(cè)無(wú)大于0.2微米空白脂質(zhì)體粒子止，制得空白脂質(zhì)體分散液；稱量配方用量前列地爾原料藥，用1 80(w/ ν)藥用注射劑級(jí)無(wú)水乙醇將其溶解后，30分鐘內(nèi)攪拌下滴加加入至上述空白脂質(zhì)體分散液中，攪拌均勻，溶解完全；將膽固醇溶于無(wú)水乙醇中，膽固醇重量無(wú)水乙醇體積為 1 80，將膽固醇乙醇溶液在700-1000轉(zhuǎn)/分?jǐn)嚢柁D(zhuǎn)速中，30分鐘內(nèi)滴加前列地爾脂質(zhì)體分散液中，滴加完后，再常溫?cái)嚢璺趸?0分鐘；到將C0MPACT-200型過(guò)濾器串連安裝好，用 0. 22 μ m濾芯進(jìn)行除菌過(guò)濾，濾過(guò)完畢，送樣檢測(cè)前列地爾中間產(chǎn)品含量，前列地爾加入無(wú)水乙醇后至檢測(cè)完畢的配液的時(shí)間不能超過(guò)2. 5小時(shí)；(7)灌裝、半加塞生產(chǎn)前將硅膠灌液管、灌液針用配制好的2% NaOH溶液浸泡30分鐘后用注射用水沖洗干凈，然后用滅菌袋包好，放入濕熱滅菌柜中于121°C滅菌30分鐘；按藥劑學(xué)允許的前列地爾劑量，確定灌裝量，正式灌裝前調(diào)好灌裝體積(稱重法)，灌裝過(guò)程中每10分鐘測(cè)定一次裝量差異；灌裝好藥液的西林瓶經(jīng)過(guò)機(jī)器自動(dòng)半加塞后進(jìn)入316L不銹鋼托盤內(nèi)；將 316L不銹鋼托盤沿百級(jí)通道送入凍干機(jī)組的凍干箱內(nèi)；整個(gè)灌裝時(shí)間不能超過(guò)4小時(shí)；(8)凍干灌裝好藥液的西林瓶都進(jìn)入凍干箱內(nèi)，開(kāi)冷凍干燥機(jī)冷凍，當(dāng)制品溫度達(dá)到預(yù)凍溫度_35°C以下，保溫時(shí)間達(dá)到2小時(shí)，對(duì)捕水器進(jìn)行預(yù)冷，待到“捕水器”溫度達(dá)到-50°C， 維持30分鐘。對(duì)系統(tǒng)抽真空，當(dāng)冷凍干燥箱內(nèi)真空度達(dá)到10 以下時(shí)，開(kāi)始加熱升華，升華過(guò)程中，每1小時(shí)隔板升溫2°C，升溫至36 °C，并保持系統(tǒng)真空度不高于20 ；當(dāng)制品溫度達(dá)到36°C且冷凍干燥箱內(nèi)達(dá)到極限真空(小于2. OPa) 6小時(shí)后，水分殘留小于1%，升華結(jié)束。真空下壓塞，使西林瓶?jī)?nèi)藥物及輔料在真空狀態(tài)下，不被氧氣，不被水分、細(xì)菌破壞， 凍干周期20-26小時(shí)；(9)軋蓋打開(kāi)冷凍干燥箱門(此時(shí)凍干箱內(nèi)壓與外壓一致)，從冷凍干燥箱中取出已壓塞的注射用前列地爾中間產(chǎn)品，放入傳遞柜中，關(guān)閉傳遞柜門，打開(kāi)軋蓋室內(nèi)的傳遞柜門，取出注射用前列地爾中間產(chǎn)品。把鋁塑蓋加入料斗里，將前列地爾凍干中間產(chǎn)品裝滿送瓶盤， 鋁塑蓋充滿軌道，開(kāi)始軋蓋；軋蓋過(guò)程中每5分鐘檢查一次軋蓋是否軋緊，制得前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的凍干針劑；(10)取(6)步制得的藥液分裝到316L不銹鋼托盤中，放入冷凍干燥箱中冷凍干燥，達(dá)水分殘留小于后出箱，將冷凍干燥固體無(wú)菌粉碎至60-80目，再按常法，配加其它輔料或溶液，按藥劑學(xué)允許的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的劑量，按常法操作可制成前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的口服制劑，或噴霧劑，或拴劑、或灌腸劑。本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物制備工藝的優(yōu)勢(shì)有高純度前列地爾原料藥不含前列腺素A1和前列腺素B1，還有不含氫醌和鐵離子；在制備過(guò)程中，除菌、除熱原、除金屬離子、除不溶性粒子徹底，活性炭用量是右旋糖酐40重量的10%以上，除盡右旋糖酐40中異性大分子物質(zhì)，以避免過(guò)敏，保證藥品質(zhì)量， 保證生產(chǎn)過(guò)程中不會(huì)使前列地爾變成前列腺素A1和前列腺素B1 ；藥品、輔料在真空、無(wú)水、無(wú)細(xì)菌西林瓶?jī)?nèi)保存；用重量法控制輔料液總重量和控制分裝量，可消除量體積法由于溫度波動(dòng)帶來(lái)的誤差。使制品含量均勻度好，劑量穩(wěn)定，帶來(lái)療效穩(wěn)定；綜上所述，本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物達(dá)到前列地爾高純度，達(dá)到無(wú)菌、無(wú)熱原、無(wú)不溶性粒子、無(wú)金屬離子、無(wú)氧氣、無(wú)水、無(wú)雜質(zhì)前列腺素A1和前列腺素B1破壞，不僅質(zhì)量上乘、療效穩(wěn)定，而且達(dá)到消除注射疼痛、含量遞降、冰箱儲(chǔ)運(yùn)三大國(guó)際難題。本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物質(zhì)量控制關(guān)鍵點(diǎn)，前列地爾、前列腺素A1和前列腺素B1含量測(cè)定及各自含量限度原料藥前列地爾99. 5%,由于檢驗(yàn)誤差，前列地爾含量可能低于此值，但應(yīng)在前列地爾含量測(cè)定的高效液相圖譜上前列腺素A1和前列腺素 B1峰積分得到的各自含量值要都< 0. 1%。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 本發(fā)明一種前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的各組份原料的重量比如下
(1)高純度前列地爾0.10
(2)賴氨匹林水楊酸鈉重量比為85— 95 5-15混合物 280 (3 )亞硫酸氫鈉和二巰丁二鈉混合物2. O
(4 )甘露醇與低分子右旋糖酐-40
重量比1: 1.2-1. 5混合物1400
(5)0.015M 磷酸鹽緩沖液 pH 值 4. O—6. 514000
(6)蛋黃卵磷脂或大豆卵磷脂2O
(7)膽固醇4
(8)依地酸二鈉鹽8前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的制備步驟和方法同前所述。實(shí)施例2 本發(fā)明一種前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的各組份原料的重量比如下(1)高純度前列地爾0.27
(2)賴氨匹林水楊酸鈉重量比為85— 95 5-15混合物350 (3 )亞硫酸氫鈉和ニ巰丁ニ鈉混合物4. O (4 )甘露醇與低分子右旋糖酐-40
重量比1: 1. 2-1. 5混合物1600
(5)0. 015M 磷酸鹽緩沖液 pH 值 4.0—6. 515000
(6)蛋黃卵磷脂或大豆卵磷脂40
(7)膽固醇10
(8)依地酸ニ鈉鹽10前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的制備步驟和方法同前所述。實(shí)施例3:本發(fā)明ー種前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的各組份原料的重量比如下
(1)高純度前列地爾0.18
(2)賴氨匹林水楊酸鈉重量比為85— 95 5-15混合物 310 (3 )亞硫酸氫鈉和ニ巰丁ニ鈉混合物 2. 9 (4)甘露醇與低分子右旋糖酐-40
重量比1: 1.2-1. 5混合物1560
(5) 0. 015M 磷酸鹽緩沖液 pH 值 4. O—6. 514900
(6 )蛋黃卵磷脂或大豆卵磷脂36
(7)膽固醇6
(8)依地酸ニ鈉鹽9前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的制備步驟和方法同前所述實(shí)施例4 本發(fā)明ー種前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的各組份原料的重量比如下(1)高純度前列地爾
0. 10
(2)賴氨匹林水楊酸鈉重量比為85 — 95 5-15混合物350
(3 )亞硫酸氫鈉和二巰丁二鈉混合物2. 0
(4)甘露醇與低分子右旋糖酐-40
重量比1: 1.2-1.5混合物1600
(5)0. 015M 磷酸鹽緩沖液 piHi 4.0 — 6. 514000 (6 )蛋黃卵磷脂或大豆卵磷脂40
(7)膽固醇4
(8)依地酸二鈉鹽10前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的制備步驟和方法同前所述實(shí)施例5本發(fā)明一種前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的各組份原料的重量比如下
(1)高純度前列地爾0.27
(2)賴氨匹林水楊酸鈉重量比為85— 95 5-15混合物 280
(3 )亞硫酸氫鈉和二巰丁二鈉混合物4. O
(4)甘露醇與低分子右旋糖酐-40 重量比1: 1.2-1. 5混合物
(5)0.015M 磷酸鹽緩沖液 piHi 4.0—6.5
(6)蛋黃卵磷脂或大豆卵磷脂
(7)膽固醇
(8)依地酸二鈉鹽
O
O O
0000
4 5 2 1 8
11前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的制備步驟和方法同前所述質(zhì)量驗(yàn)證性試驗(yàn)(一 )本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物不含前列腺素A1和不含前列腺素B1的驗(yàn)證試驗(yàn)(按中國(guó)藥典2010版規(guī)定的前列地爾原料藥及制劑檢驗(yàn)規(guī)定)同時(shí)測(cè)定前列地爾、前列腺素A1和前列腺素B1三者含量的色譜條件色譜柱用十八烷基硅烷健合硅膠為填充劑0.6πιπιΧ25Οπιπι，5μπι)；乙腈_0. 02mol/L磷酸二氫鉀溶液(pH4. 9)體積比40 60混合液(混合后pH5. 1)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm ；柱溫30-35°C，流速為0. 5ml/min,或1. Oml/min,前列地爾脂質(zhì)體組合藥物供試品進(jìn)樣量為 40 μ 1，對(duì)照品進(jìn)樣量為20 μ 1，或10 μ 1，前列地爾峰與前列腺素A1峰的分離度大于4.0 ；取前列地爾對(duì)照品適量，精密稱定，用入25%乙醇水溶液溶解并稀釋制成每ml中含前列地爾100 μ g的溶液，作為前列地爾對(duì)照品溶液，備用；另取前列腺素A1雜質(zhì)對(duì)照品適量，精密稱定，用25%乙醇水溶液溶解并稀釋制成每ml中含前列腺素A1為15μ g的溶液作為雜質(zhì)的對(duì)照品溶液，備用；另取前列腺素B1雜質(zhì)對(duì)照品適量，精密稱定，用25%乙醇水溶液溶解并稀釋制成每ml中含前列腺素B1為5μ g的溶液作為雜質(zhì)的對(duì)照品溶液，備用；取本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物凍干針劑(10 μ g/支規(guī)格)10支，分別精密加入25%乙醇水溶液1. 00ml，振搖，使內(nèi)溶物溶解完全，作為供試品溶液備用；分別取前列地爾對(duì)照品溶液、前列腺素A1和前列腺素B1雜質(zhì)對(duì)照品溶液各適量， 按(1 1 1)比例混合，搖勻，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液，取20μ1注入液相色譜儀，調(diào)整色譜系統(tǒng)，使前列地爾峰的保留時(shí)間為11-13分鐘，前列腺素A1峰(按中國(guó)藥典2005版規(guī)定其峰保留時(shí)間為前列地爾峰保留時(shí)間的2. 2-2. 7倍)與前列腺素&峰(因?yàn)榍傲邢偎?B1比前列腺素A1多一個(gè)共軛雙鍵，所以其峰保留試間在前列腺素A1之后)的分離度應(yīng)大于 4.0 ；同時(shí)調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使前列腺素B1峰的高度藥為滿量程的10%。精密量取前列地爾脂質(zhì)體組合藥物供試品溶液40 μ 1、前列腺素A1、前列腺素B1雜質(zhì)對(duì)照品液與前列地爾對(duì)照品液各20 μ 1，分別注入液相色譜儀，記錄供試品溶液的色譜圖至前列地爾峰保留時(shí)間的4倍以上。按外標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算每瓶的含量及10瓶的平均含量，即得；按平均計(jì)算，含前列地爾應(yīng)為標(biāo)示量(IOyg/支)的90% -110.0% ；供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，前列腺素A1和前列腺素&均按外標(biāo)法計(jì)算，分別不得過(guò)1.0% 和0. 3% ；其他雜質(zhì)以前列地爾對(duì)照品溶液中的前列地爾峰面積計(jì)算，單個(gè)最大雜質(zhì)不得過(guò) 1.0% ；雜質(zhì)總量不得過(guò)2.0% (小于0. 的色譜峰不計(jì))。前列地爾脂質(zhì)體組合藥物供試品中，前列地爾峰保留時(shí)間為11. 220min，在圖譜上前列腺素A1和前列腺素B1含量在0. 01 %以下，因此在前列地爾保留峰后面無(wú)這兩個(gè)雜質(zhì)的保留峰出現(xiàn)，在前列地爾保留峰前面出現(xiàn)的三個(gè)保留峰和前列地爾后面出現(xiàn)又有的三個(gè)保留峰為本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物輔料的特征保留峰。在前列地爾前面出現(xiàn)的三個(gè)輔料的特征保留峰前面出現(xiàn)的保留峰為溶劑和輔料重疊峰。把流速改為1. Oml/min,前列地爾脂質(zhì)體組合藥物供試品進(jìn)樣量為40 μ 1，其他色譜條件及操作參數(shù)不變，則前列地爾峰的保留時(shí)間為5-6分鐘。前列地爾對(duì)照品 (220. 03984 μ g/ml濃度)前列地爾峰保留時(shí)間為5. 887min，在圖譜上前列腺素A1和前列腺素B1含量在0. 01%以下，因此在前列地爾保留峰后面無(wú)這兩個(gè)雜質(zhì)的保留峰出現(xiàn)，在前列地爾峰前面出現(xiàn)的三個(gè)保留峰和前列地爾后面出現(xiàn)又有的三個(gè)保留峰為本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物輔料的特征保留峰。在前列地爾前面出現(xiàn)三個(gè)輔料的特征保留峰之前面出現(xiàn)的峰為溶劑和輔料重疊保留峰。流速為0. 5ml/min時(shí)，前列地爾脂質(zhì)體組合藥物供試品中的前列地爾峰保留時(shí)間為11. 220min,前列腺素A1和前列腺素B1含量在0. 01 %以下，在前列地爾保留峰后面無(wú)這兩個(gè)雜質(zhì)的保留峰，在前列地爾保留峰峰前面出現(xiàn)的三個(gè)保留峰是本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物輔料的特征保留峰，這六個(gè)特征保留峰的保留時(shí)間分別為5. 396min, 7. 248min，8. 297min, 13. 698min, 15. 197min，22. 319min ；在前列地爾保留峰前面出現(xiàn)的三個(gè)輔料的特征保留峰之前面出現(xiàn)的保留峰為溶劑和輔料重疊峰；需要說(shuō)明的是，上述峰保留時(shí)間出現(xiàn)，由于種種原因，允許0. 5-1. Omin偏差。把流速改為1. Oml/min,前列地爾脂質(zhì)體組合藥物供試品進(jìn)樣量為40 μ 1，其他色譜條件及操作參數(shù)不變，前列地爾峰保留時(shí)間為5. 887min,前列腺素A1和前列腺素B1含量在0.01%以下，在前列地爾保留峰后面無(wú)這兩個(gè)雜質(zhì)的保留峰，在前列地爾保留峰前面出現(xiàn)的三個(gè)峰為本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物輔料的特征保留峰，這六個(gè)輔料的特征保留峰的保留時(shí)間分別為:2. 735min,3. 765min，4. 319min，6. 988min，7. 612min, 11. 158min 在前列地爾保留峰前面出現(xiàn)的三個(gè)輔料的特征保留峰之前面出現(xiàn)的峰為溶劑和輔料重疊保留峰；需要說(shuō)明的是，上述峰保留時(shí)間出現(xiàn)，由于種種原因，允許0. 5-1. Omin偏差。需要說(shuō)明的是，前面所述前列地爾脂質(zhì)體組合藥物輔料的特征保留峰是指本發(fā)明中配方中的混合輔料在經(jīng)過(guò)滅菌、磷脂包封、孵化、過(guò)濾、冷凍干燥等工藝后的混合輔料特征保留峰。需要說(shuō)明的是，由于當(dāng)時(shí)國(guó)內(nèi)買不到前列腺素A1和前列腺素B1的對(duì)照品，需高價(jià)進(jìn)口(3700元/mg)，所以中國(guó)藥典2005版規(guī)定用前列地爾溶液制備前列腺素A1方法，2005 半藥典及2010版藥典對(duì)前列地爾制劑中前列腺素B1的雜質(zhì)量沒(méi)有規(guī)定。( 二)藥效學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)1.治療腫瘤選擇小鼠肝癌、乳腺癌模型(選擇有資質(zhì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購(gòu)買或作試驗(yàn))，體重 19-20g,隨機(jī)分組，每組20只。治療組本發(fā)明藥物實(shí)施例1-5例依次分為第1-0組；第1-5組用前列地爾脂質(zhì)體組合藥物凍干針劑，每次劑量20 μ g/kg，腹腔注射，每天1次；第6-10組，每次用20 μ g/kg 劑量的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物腸溶膠囊口服，每天2次；對(duì)照組已知抗肝癌藥物鹽酸表柔比星陽(yáng)性對(duì)照組為第11組，每次劑量50mg/kg， 每天1次，腹腔注射；已知抗乳腺癌藥物環(huán)磷酰胺陽(yáng)性對(duì)照組為第12組，每次劑量50mg/ kg，每星期1次，腹腔注射；現(xiàn)有技術(shù)注射用前列地爾陽(yáng)性對(duì)照藥物為第13組，每次劑量 1000 μ g/kg,腹腔注射，每天1次；各組均給藥3星期，存活的小鼠停藥M小時(shí)后處死，稱量瘤重，計(jì)算平均值；并統(tǒng)計(jì)注射疼痛率，注射后小鼠有跳起、尖叫、翻滾、全身抖動(dòng)等現(xiàn)象之一者，均判為注射疼痛。試驗(yàn)結(jié)果如下表
權(quán)利要求
1.本發(fā)明一種前列地爾脂質(zhì)體組合藥物，其特征是，高純度前列地爾的脂質(zhì)體和賴氨匹林水楊酸鈉重量比為85-95 5-15的混合物為主要成分的組合藥物；所述前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的各組份原料的重量比如下(1 )高純度前列地爾0. 10—0. 27(2)賴氨匹林水楊酸鈉重量比為85—95 5-15混合物 280 — 350(3)亞硫酸氬鈉和二巰丁二鈉混合物2.0 — 4.0(4)甘露醇與低分子右旋糖酐-40重量比1: 1.2-1. 5混合物1400-1600(5)0.015M 磷酸鹽緩沖液 plHt 4. 0—6.514000—15000(6)蛋黃卵磷脂或大豆卵磷脂(7)膽固醇20—40 4-10 8-10(8)依地酸二鈉鹽賴氨匹林或用阿司匹林精氨酸鹽，其在組合藥物中重量比和賴氨匹林同；亞硫酸氫鈉在前列地爾脂質(zhì)體組合藥物中重量比在0. 7-1. 6 ；本發(fā)明還提供所述前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的制備方法操作過(guò)程及工藝條件(1)西林瓶理瓶、清洗、滅菌將5ml西林瓶由傳遞柜經(jīng)紫外燈滅菌后運(yùn)入理瓶室，在理瓶室進(jìn)行理瓶，把理好的西林瓶放到洗瓶室的固定位置；把GMSU-400W隧道式滅菌烘箱后面出現(xiàn)的排風(fēng)口擋板開(kāi)至一半，啟動(dòng)電加熱按鈕，預(yù)熱區(qū)、高溫區(qū)、冷卻區(qū)溫度開(kāi)始逐漸上升；當(dāng)烘箱內(nèi)預(yù)熱區(qū)溫度達(dá)到250°C、高溫區(qū)溫度達(dá)到預(yù)置溫度350°C、冷卻區(qū)溫度達(dá)到220°C，洗瓶機(jī)即可投入生產(chǎn)。 PCX-IV型洗瓶機(jī)用熱純化水，XCQ-VI型洗瓶機(jī)用注射用水，啟動(dòng)PLC程控器，完成粗洗、精洗的全部過(guò)程，取精洗后的西林瓶，檢測(cè)西林瓶是否洗凈、有無(wú)可見(jiàn)異物；烘箱在運(yùn)行過(guò)程中，溫度保持在350士5°C ；西林瓶洗凈后至滅菌放置時(shí)間不超過(guò)4小時(shí)，西林瓶滅菌后至使用放置時(shí)間不超過(guò)16小時(shí)；(2)膠塞清洗、滅菌將裝5ml膠塞小盒打開(kāi)，將盒內(nèi)的合格證取出，并剔除不合格膠塞之后，將膠塞裝入料桶中；純化水、注射用水壓力0. 1-0. 2MPa，真空壓力-0. 06MPa以下，壓縮空氣0. 4-0. 6MPa， 純蒸汽0.2MPa以上。真空進(jìn)料，待所有膠塞被吸入后，蓋上“加料、取樣口蓋”；純化水噴淋粗洗10分鐘，超聲波漂洗15分鐘，注射用水精洗25分鐘，取樣進(jìn)行可見(jiàn)異物檢測(cè)，如檢測(cè)不合格，則點(diǎn)動(dòng)“重新精洗”按鈕，繼續(xù)自動(dòng)精洗全過(guò)程；加入二甲硅油，二甲硅油加入量為 10ml，溫度上升至加熱溫度85°C后，硅化10分鐘，沖洗時(shí)間5分鐘；當(dāng)滅菌溫度逐漸上升到設(shè)置的123°C后，滅菌開(kāi)始計(jì)時(shí)，滅菌時(shí)間30分鐘；真空干燥8分鐘，當(dāng)烘干溫度逐漸上升至105°C后，熱風(fēng)干燥10分鐘，再真空干燥5分鐘，當(dāng)逐步降溫冷卻至60°C后，出料；膠塞滅菌后至使用放置時(shí)間不超過(guò)16小時(shí)；(3)鋁塑蓋清洗、軋蓋將5ml鋁塑蓋拿到鋁蓋清洗間，先剔除不合格的鋁蓋，將合格鋁塑蓋放入清洗槽中， 用熱純化水進(jìn)行清洗；將已清洗的鋁塑蓋平鋪于盤中放入JRSH型凈化熱風(fēng)循環(huán)烘箱，于 110°C，干燥滅菌3小時(shí)后放置備用，其滅菌后至使用放置時(shí)間不超過(guò)16小時(shí)；(4)配液活性炭和右旋糖酐40與甘露醇混合物的處理將針劑用活性炭放入IOOOml燒杯中，在烘箱中于180°C溫度下保溫2. 5小時(shí)除菌、除熱原、除水，降溫至室溫并密封備用；按配方量稱取右旋糖酐40與甘露醇混合物重量，加入磷酸鹽緩沖液，攪拌溶解，按右旋糖酐40重量加入10% (w% w)活性炭，加入賴氨匹林和水楊酸鈉，不需攪拌，于121°C滅菌15分鐘，下步配料用需用的磷酸鹽緩沖液或注射用水也一同滅菌；冷卻至60士5°C，趁熱用0. 22 μ m濾膜的濾芯過(guò)濾，濾器、濾筒、管件、濾芯應(yīng)在濾前放在注射用水中滅菌后才可使用；過(guò)濾后，濾液密封，冷卻20°C 士2°C，制得輔料液；(5)將滅菌和濾過(guò)后的20°C士2°C輔料液放入316L不銹鋼料桶中，加入滅菌磷酸鹽緩沖液，調(diào)至輔料液重量等于配方中磷酸鹽緩沖液、右旋糖酐40與甘露醇混合物、賴氨匹林和水楊酸鈉混合物三者重量之和(調(diào)藥液體積受溫度波動(dòng)誤差較大，調(diào)藥液重量只要車間在地球上地址不變，溫度不同重量不變，批與批間含量均勻度好)，攪拌均勻，先用8 %的氫氧化鈉溶液調(diào)溶液PH值至6. 5-7. 0，用0. 22 μ m膜濾芯過(guò)濾，除去輔料、活性炭帶入輔料液中的金屬離子沉淀物、不溶性粒子，尤其是三價(jià)鐵離子沉淀物；濾過(guò)后的輔料液再用8%鹽酸溶液調(diào)PH值4. 5-5. 5，分別在攪拌下加入依地酸二鈉鹽，加入配方量的二巰丁二鈉或亞硫酸氫鈉，分別攪拌溶解完全，待下步制備用；(6)將蛋黃卵磷脂溶解于無(wú)水乙醇中，蛋黃卵磷脂無(wú)水乙醇比為1 100(W/V)；在 700-1000轉(zhuǎn)/分?jǐn)嚢柁D(zhuǎn)速中，將蛋黃磷脂乙醇液在30分鐘內(nèi)滴加在( 步制得的輔料液中，用40Hz頻率(在常溫下)超聲波超聲至空白脂質(zhì)體粒子粒徑經(jīng)檢測(cè)無(wú)大于0.2微米空白脂質(zhì)體粒子止，制得空白脂質(zhì)體分散液；稱量配方用量前列地爾原料藥，用1 80(w/ ν)藥用注射劑級(jí)無(wú)水乙醇將其溶解后，30分鐘內(nèi)攪拌下滴加加入至上述空白脂質(zhì)體分散液中，攪拌均勻，溶解完全；將膽固醇溶于無(wú)水乙醇中，膽固醇重量無(wú)水乙醇體積為 1 80，將膽固醇乙醇溶液在700-1000轉(zhuǎn)/分?jǐn)嚢柁D(zhuǎn)速中，30分鐘內(nèi)滴加前列地爾脂質(zhì)體分散液中，滴加完后，再常溫?cái)嚢璺趸?0分鐘；到將C0MPACT-200型過(guò)濾器串連安裝好，用 0. 22 μ m濾芯進(jìn)行除菌過(guò)濾，濾過(guò)完畢，送樣檢測(cè)前列地爾中間產(chǎn)品含量，前列地爾加入無(wú)水乙醇后至檢測(cè)完畢的配液的時(shí)間不能超過(guò)2. 5小時(shí)；(7)灌裝、半加塞生產(chǎn)前將硅膠灌液管、灌液針用配制好的2% NaOH溶液浸泡30分鐘后用注射用水沖洗干凈，然后用滅菌袋包好，放入濕熱滅菌柜中于121°C滅菌30分鐘；按藥劑學(xué)允許的前列地爾劑量，確定灌裝量，正式灌裝前調(diào)好灌裝體積(稱重法)，灌裝過(guò)程中每10分鐘測(cè)定一次裝量差異；灌裝好藥液的西林瓶經(jīng)過(guò)機(jī)器自動(dòng)半加塞后進(jìn)入316L不銹鋼托盤內(nèi)；將316L 不銹鋼托盤沿百級(jí)通道送入凍干機(jī)組的凍干箱內(nèi)；整個(gè)灌裝時(shí)間不能超過(guò)4小時(shí)；(8)凍干灌裝好藥液的西林瓶都進(jìn)入凍干箱內(nèi)，開(kāi)冷凍干燥機(jī)冷凍，當(dāng)制品溫度達(dá)到預(yù)凍溫度_35°C以下，保溫時(shí)間達(dá)到2小時(shí)，對(duì)捕水器進(jìn)行預(yù)冷，待到“捕水器”溫度達(dá)到-50°C，維持30分鐘，對(duì)系統(tǒng)抽真空，當(dāng)冷凍干燥箱內(nèi)真空度達(dá)到10 以下時(shí)，開(kāi)始加熱升華，升華過(guò)程中，每1小時(shí)隔板升溫2°C，升溫至36°C，并保持系統(tǒng)真空度不高于20 ；當(dāng)制品溫度達(dá)到36°C且冷凍干燥箱內(nèi)達(dá)到極限真空(小于2. OPa) 6小時(shí)后，水分殘留小于1%，升華結(jié)束；真空下壓塞，使西林瓶?jī)?nèi)藥物及輔料在真空狀態(tài)下，不被氧氣，不被水分、細(xì)菌破壞，凍干周期20-26小時(shí)；(9)軋蓋打開(kāi)冷凍干燥箱門(此時(shí)凍干箱內(nèi)壓與外壓一致)，從冷凍干燥箱中取出已壓塞的注射用前列地爾中間產(chǎn)品，放入傳遞柜中，關(guān)閉傳遞柜門，打開(kāi)軋蓋室內(nèi)的傳遞柜門，取出注射用前列地爾中間產(chǎn)品。把鋁塑蓋加入料斗里，將前列地爾凍干中間產(chǎn)品裝滿送瓶盤，鋁塑蓋充滿軌道，開(kāi)始軋蓋；軋蓋過(guò)程中每5分鐘檢查一次軋蓋是否軋緊，制得前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的凍干針劑；(10)取(6)步制得的藥液分裝到316L不銹鋼托盤中，放入冷凍干燥箱中冷凍干燥，達(dá)水分殘留小于后出箱，將冷凍干燥固體無(wú)菌粉碎至60-80目，再按常法，配加其它輔料或溶液，按藥劑學(xué)允許的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的劑量，按常法操作可制成前列地爾脂質(zhì)體組合藥物的口服制劑，或噴霧劑，或拴劑、或灌腸劑；
2.依權(quán)利要求1所述的前列地爾組合藥物，其特征是，同時(shí)測(cè)定前列地爾、前列腺素~和前列腺素B1三者含量的色譜條件色譜柱用十八烷基硅烷健合硅膠為填充劑 (4. 6mmX250mm,5ym)；乙腈 _0. 02mol/L 磷酸二氫鉀溶液(pH4. 9)體積比 40 60 混合液(混合后PH5. 1)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm ；柱溫30-35 °C，流速為0. 5ml/min,或I.Oml/min,前列地爾脂質(zhì)體藥物供試品進(jìn)樣量為40 μ 1，前列地爾峰與前列腺素A1峰的分離度大于4. 0，其特征是，流速為0. 5ml/min時(shí)，前列地爾峰保留時(shí)間為11. 220min，前列腺素A1和前列腺素B1含量在0. Ol %以下，在前列地爾保留峰后面無(wú)這兩個(gè)雜質(zhì)的保留峰； 在前列地爾保留峰前面出現(xiàn)的三個(gè)保留峰是本發(fā)明的前列地爾組合藥物輔料的特征保留峰，這三個(gè)特征峰的保留時(shí)間分別為5. 396min，7. 248min,8. ^7min，在前列地爾保留峰后面出現(xiàn)的三個(gè)保留峰也是前列地爾脂質(zhì)體組合藥物輔料的特征保留峰，保留時(shí)間分別為 13. 698min，15. 197min，22. 319min ；在前列地爾前面出現(xiàn)的三個(gè)輔料的特征保留峰之前面出現(xiàn)的保留峰為溶劑和輔料重疊峰；上述保留峰保留時(shí)間出現(xiàn)，允許0. 5-1. Omin偏差；把流速改為1. Oml/min，前列地爾脂質(zhì)體組合藥物樣品進(jìn)樣量為40 μ 1，其他色譜條件及操作參數(shù)不變，前列地爾峰保留時(shí)間為5. 887min,前列腺素A1和前列腺素B1含量在 0.01%以下，在前列地爾峰保留后面出現(xiàn)無(wú)這兩個(gè)雜質(zhì)的保留峰，在前列地爾保留峰前面出現(xiàn)的三個(gè)保留峰為本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物輔料的特征保留峰，這六個(gè)輔料的特征保留峰的保留時(shí)間分別為2. 735min,3. 765min，4. 319min，6. 988min，7. 612min,II.158min在前列地爾前面出現(xiàn)的三個(gè)輔料的特征保留峰之前面出現(xiàn)的保留峰為溶劑和輔料重疊的保留峰；上述保留峰保留時(shí)間出現(xiàn)，允許0. 5-1. Omin偏差；
3.依權(quán)利要求1所述的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物，其特征是，適用于治療和預(yù)防冠心病和心肌梗塞、腦梗塞、高血壓、高血脂、動(dòng)脈硬化癥、脈管炎、腫瘤、肝炎、糖尿病血管病變及腎功能不全、支氣管哮喘、胰腺炎、胃潰瘍、椎底供血不足等病的藥物。
全文摘要
本發(fā)明一種前列地爾脂質(zhì)體組合藥物，高純度前列地爾脂質(zhì)體和賴氨匹林∶水楊酸鈉重量比為85-95∶5-15混合物為主要成分的組合藥物，公開(kāi)了組合藥物的各組份原料的重量比；本發(fā)明還提供其制備方法及其質(zhì)量控制；制成其凍干針劑、或口服制劑，或噴霧劑，或拴劑、或灌腸劑；測(cè)定前列地爾、前列腺素A1和前列腺素B1三者含量的色譜條件，在前列地爾保留峰前、后面的各三個(gè)保留峰是本發(fā)明的前列地爾脂質(zhì)體組合藥物輔料的特征保留峰；前列地爾脂質(zhì)體組合藥物，用于治療和預(yù)防冠心病和心肌梗塞、腦梗塞、高血壓、高血脂、動(dòng)脈硬化癥、脈管炎、腫瘤、肝炎、糖尿病血管病變及腎功能不全、支氣管哮喘、胰腺炎、胃潰瘍、椎底供血不足等病。
文檔編號(hào)A61K9/127GK102274184SQ201110212140
公開(kāi)日2011年12月14日 申請(qǐng)日期2011年7月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月28日
發(fā)明者蔡海德 申請(qǐng)人:蔡海德