專(zhuān)利名稱(chēng)：一種以20(S)－人參皂甙Rh的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于增強(qiáng)抗癌藥物療效，降低抗癌藥物毒性、預(yù)防和治療放化療引起的白細(xì)胞降低及增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的抗癌輔助藥物，屬于癌癥治療的醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
癌癥是危害人類(lèi)健康的三大疾病之一，其發(fā)病率及死亡率在某些國(guó)家已上升到第1位。因此研制開(kāi)發(fā)抗癌藥物是廣大醫(yī)藥工作者面臨床的重大課題之一。至今開(kāi)發(fā)成功的很多抗癌藥物，雖然治療效果越來(lái)越好，但是因?yàn)樗幬锉旧淼亩靖弊饔锰珡?qiáng)，導(dǎo)致臨床應(yīng)用受到限制。因此，目前抗癌藥物研究，一方面繼續(xù)開(kāi)發(fā)殺死癌細(xì)胞的治療藥物外，開(kāi)發(fā)以增強(qiáng)抗癌藥物的療效，降低其毒副作用為主要功效的抗癌輔助藥物也越來(lái)越受到重視。
我國(guó)是中藥大國(guó)，中醫(yī)中藥理論源遠(yuǎn)流長(zhǎng)，在利用中醫(yī)中藥治療癌癥，尤其是中西藥結(jié)合治療癌癥方面具有豐富的經(jīng)驗(yàn)。在中西藥結(jié)合治療癌癥的過(guò)程中，中藥所起的作用主要是增加抗癌藥物的療效，降低其毒性，增強(qiáng)患者的機(jī)體免疫功能，能使患者繼續(xù)接受放化療，幫助患者戰(zhàn)勝癌癥。
人參是一種名貴的滋補(bǔ)藥物，具有大補(bǔ)元?dú)?，?fù)脈固脫，補(bǔ)脾益肺，生津、安神功能。在臨床上用于提高癌癥患者的機(jī)體免疫功能，預(yù)防和治療因放化療引起的白細(xì)胞降低等方面。
人們對(duì)人參的化學(xué)成分及生理活性的研究始于20世紀(jì)60年代，主要集中在日本、韓國(guó)及中國(guó)，從那時(shí)起人們相繼從人參中分離出了20余種四環(huán)三萜皂甙類(lèi)成分，其中包括含量較高的人參皂甙Ra1、Ra2、Ra3、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rc、Rg1、Rg2和含量非常低的Rg3、Rh2、Rh1等。另外還包括人參皂甙的酸水解、堿水解、酶水解及生物代謝產(chǎn)物，如人參皂甙Rck、人參皂甙Y、原人參二醇、原人參三醇、人參二醇、人參三醇等。
與此同時(shí)，人們對(duì)人參及其主要化學(xué)成分-人參皂甙的生理活性進(jìn)行了很多的研究，證明了人參的有效成分是人參皂甙，并發(fā)表了大量的關(guān)于人參皂甙的單體或它們的混合物的生理活性研究報(bào)告。
人參皂甙Rh2，最早由日本學(xué)者北川勛從紅參中分得，其含量只有十萬(wàn)分之幾，而人參皂甙Rh2又分為20(S)-人參皂甙Rh2和20(S)-人參皂甙Rh2兩個(gè)對(duì)映異構(gòu)體。 20(S)-人參皂甙Rh220(R)-人參皂甙Rh2本發(fā)明涉及的是20(S)-人參皂甙Rh2。
關(guān)于人參皂甙Rh2的活性方面的研究相對(duì)較少，而且主要集中在抗癌活性方面。日本專(zhuān)利昭58-57399公開(kāi)了以20(S)-人參皂甙Rh2為有效成分的抗癌藥物專(zhuān)利，認(rèn)為20(S)-人參皂甙Rh2具有較強(qiáng)抑制腫瘤生長(zhǎng)活性。太田等人[Journal of PharmaceuticalScience 80(12)1141_1143，1991]發(fā)表了人參皂甙Rh2抑制黑色素瘤的活性研究報(bào)告，中國(guó)專(zhuān)利CN1225366A公開(kāi)了20(S)-人參皂甙Rh2的制備方法及做為抗癌藥物的應(yīng)用。
由于20(S)-人參皂甙Rh2在人參或人參屬其它植物中的含量非常低，所以只能靠其它人參皂甙的水解或合成的方式獲得20(S)-人參皂甙Rh2。
20(S)-人參皂甙Rh2的制備方法，陳英杰等人[沈陽(yáng)藥學(xué)院學(xué)報(bào)，5(2)149，1988]報(bào)道了從人參中分離純化人參皂甙Rh2的方法，宋長(zhǎng)春等人[中國(guó)藥學(xué)雜志，27(1)6，1992]報(bào)道了利用西洋參莖葉總皂甙通過(guò)堿水解制備Rh2的方法。另外韓國(guó)專(zhuān)利91-16456公開(kāi)了20(R)-人參皂甙Rh2的制備方法及化合物專(zhuān)利。
我們認(rèn)為人參及人參皂甙具有一定的抗癌活性，但其殺傷癌細(xì)胞的作用比不上化學(xué)合成藥，比如環(huán)磷酰胺、5-氟氣尿嘧定、順鉑等，但是它對(duì)抗癌藥物的增效減毒作用、提高癌癥患者的機(jī)體免疫力等方面具有明確的顯著效果。因此，我們根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，有選擇地進(jìn)行了人參皂甙的抑瘤活性尤其是抗癌增效減毒方面的研究工作。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)，20(S)-人參皂甙Rh2具有一定的抑制惡性腫瘤活性，但其活性確實(shí)不如化學(xué)合成藥，而20(S)-人參皂甙Rh2在抗癌藥物的增效減毒、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能等方面確實(shí)具有非常明顯的效果。經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的實(shí)驗(yàn)研究，終于完成了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
首先，我們研究成功了利用高沸點(diǎn)有機(jī)溶劑作反應(yīng)介質(zhì)，在常壓下經(jīng)過(guò)高溫堿水解，從人參二醇組皂甙(人參皂甙Rb1、Rb2、Rc、Rd等)制備20(S)-人參皂甙Rh2的方法，并申請(qǐng)了中國(guó)專(zhuān)利(CN1293198A)。此方法可利用人參、西洋參、三七等人參屬植物中大量存在的人參皂甙Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd等制備20(S)-人參皂甙Rh2，此方法產(chǎn)量大、產(chǎn)率高、操作簡(jiǎn)便、適于工業(yè)化生產(chǎn)。
上述方法制備的20(S)-人參皂甙Rh2，經(jīng)藥效學(xué)、毒理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，具有非常顯著的增強(qiáng)抗癌藥物療效，降低抗癌藥物毒性、預(yù)防和治療抗癌藥物引起的白細(xì)胞降低、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的作用，而且毒副作用小，是一個(gè)非常理想的抗癌輔助藥物。
20(S)-人參皂甙Rh2藥效學(xué)研究結(jié)果如下20(S)-人參皂甙Rh2與功能主治有關(guān)的主要藥效學(xué)試驗(yàn)摘要 通過(guò)小鼠體內(nèi)移植性腫瘤模型，對(duì)20(S)-人參皂甙Rh2抗腫瘤作用，對(duì)化療藥物環(huán)磷酰胺(CTX)的增效、減毒作用進(jìn)行研究。結(jié)果表明，20(S)-人參皂甙Rh2具有良好的抗癌活性，50、100、200mg/kg劑量組對(duì)肝癌H22的平均抑瘤率分別為27.63％、37.16％、47.23％；對(duì)Lewis肺癌的平均抑瘤率分別為25.0％、42.4％、49.9％；對(duì)黑色素瘤B16的平均抑瘤率分別為28.6％、37.1％、46.8％。而且20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)CTX具有較明顯的增效、減毒作用。通過(guò)對(duì)NK、SI、IL-2等免疫學(xué)指標(biāo)的測(cè)定，表明20(S)-人參皂甙Rh2可能通過(guò)增強(qiáng)免疫功能達(dá)到抗腫瘤功效的。
試驗(yàn)?zāi)康? 觀察荷瘤動(dòng)物應(yīng)用20(S)-人參皂甙Rh2后腫瘤生長(zhǎng)情況，對(duì)該藥進(jìn)行抗腫瘤藥效學(xué)、增效、減毒及增強(qiáng)免疫作用研究。
試驗(yàn)材料1.藥物20(S)-人參皂甙Rh2原料粉 海南亞洲制藥有限公司提供，批號(hào)000816；羧甲基纖維素鈉上海化學(xué)試劑公司提供，批號(hào)990606；環(huán)磷酰胺上海華聯(lián)制藥有限公司提供，批號(hào)000205。
2.動(dòng)物 昆明種小鼠，5～8周齡，體重18～22g，雌雄兼用，每批實(shí)驗(yàn)采用同一性別。實(shí)驗(yàn)前在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)飼養(yǎng)三天，由長(zhǎng)春高新醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)中心提供。合格證號(hào)10-5113；C57BL/6純系小鼠，5～8周齡，體重18～22g，雌雄兼用，每批實(shí)驗(yàn)采用同一性別。實(shí)驗(yàn)前在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)飼養(yǎng)一周，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育場(chǎng)提供，合格證號(hào)SCXK11-00-0006。
3.細(xì)胞株 小鼠肝癌H22、小鼠黑色素瘤B16、小鼠Lewis肺癌，由吉林省腫瘤研究所提供，經(jīng)本實(shí)驗(yàn)室傳代保存。
試驗(yàn)方法1.藥物配制 將20(S)-人參皂甙Rh2原料粉在研缽內(nèi)以1％羧甲基纖維素鈉配成不同濃度的混懸液。環(huán)磷酰胺以無(wú)菌生理鹽水稀釋?zhuān)涑?.1％溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。
2.動(dòng)物分組及給藥方案 將小鼠按體重隨機(jī)分為下列各組(1)抑瘤試驗(yàn)溶劑對(duì)照組 給予1％羧甲基纖維素鈉陽(yáng)性藥對(duì)照組給予環(huán)磷酰胺20mg/kg藥物小劑量組給予20(S)-人參皂甙Rh2 50mg/kg藥物中劑量組給予20(S)-人參皂甙Rh2 100mg/kg藥物大劑量組給予20(S)-人參皂甙Rh2 200mg/kg(2)增效試驗(yàn)溶劑對(duì)照組 給1％羧甲基纖維素鈉陽(yáng)性藥小劑量對(duì)照組 給環(huán)磷酰胺5mg/kg陽(yáng)性藥小+藥物小劑量組 給環(huán)磷酰胺5mg/kg+20(S)-人參皂甙Rh250mg/kg陽(yáng)性藥小+藥物大劑量組 給環(huán)磷酰胺5mg/kg+20(S)-人參皂甙Rh2200mg/kg陽(yáng)性藥大劑量對(duì)照組 給環(huán)磷酰胺10mg/kg陽(yáng)性藥大+藥物小劑量組 給環(huán)磷酰胺10+20(S)-人參皂甙Rh2 50mg/kg陽(yáng)性藥大+藥物大劑量組 給環(huán)磷酰胺10+20(S)-人參皂甙Rh2 200mg/kg(3)減毒試驗(yàn)溶劑對(duì)照組 給1％羧甲基纖維素鈉陽(yáng)性藥小劑量對(duì)照組 給環(huán)磷酰胺10mg/kg陽(yáng)性藥小+藥物小劑量組 給環(huán)磷酰胺10+20(S)-人參皂甙Rh2 50mg/kg陽(yáng)性藥小+藥物大劑量組 給環(huán)磷酰胺10+20(S)-人參皂甙Rh2 200mg/kg陽(yáng)性藥大劑量對(duì)照組 給環(huán)磷酰胺20 mg/kg陽(yáng)性藥大+藥物小劑量組 給環(huán)磷酰胺20+20(S)-人參皂甙Rh2 50mg/kg陽(yáng)性藥大+藥物大劑量組 給環(huán)磷酰胺20+20(S)-人參皂甙Rh2 200mg/kg各組藥物均灌胃(i.g)給藥，容量為0.2ml/10g，連續(xù)給藥10天。
3. 20(S)-人參皂甙Rh2的體內(nèi)抑瘤試驗(yàn)按抗腫瘤藥物實(shí)驗(yàn)方法學(xué)方法接種腫瘤，取腹腔內(nèi)傳代7天的肝癌H22小鼠，在無(wú)菌條件下抽取瘤細(xì)胞，并以生理鹽水洗滌3次，調(diào)整瘤細(xì)胞濃度為1×107/ml，接種于昆明種小鼠左腹股溝皮下，每只小鼠接種0.2ml。取傳代Lewis肺癌和黑色素瘤B16腫瘤生長(zhǎng)良好的小鼠，在無(wú)菌條件下剝離瘤組織塊，在玻璃研磨器內(nèi)研磨成腫瘤勻漿，按瘤重(g)∶生理鹽水(ml)＝1∶2的比例制備瘤液，接種于C57BL/6小鼠左腹股溝皮下，每只小鼠接種0.2ml。接種次日起給藥，連續(xù)給藥10天，于停藥后24小時(shí)頸椎脫臼處死荷瘤小鼠，剝離腫瘤組織，稱(chēng)重。結(jié)果以腫瘤生長(zhǎng)抑瘤率表示抑瘤率＝(1-實(shí)驗(yàn)組平均瘤重/對(duì)照平均瘤組)×100％取符合實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)要求(對(duì)照組平均瘤重＞1g，且瘤重＜400mg的動(dòng)物數(shù)不超過(guò)總數(shù)的20％)的三批試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
4. 20(S)-人參皂甙Rh2的增效試驗(yàn) 用小鼠肝癌H22及Lewis肺癌建立小鼠體內(nèi)移植性腫瘤模型，方法及給藥同前。末次給藥后24小時(shí)頸椎脫臼處死荷瘤小鼠，取瘤并稱(chēng)重，比較單純應(yīng)用環(huán)磷酰胺5mg及10mg治療同與20(S)-人參皂甙Rh2 50mg及200mg分別合用治療各組之間抑瘤率差異，觀察20(S)-人參皂甙Rh2增效作用。
5. 20(S)-人參皂甙Rh2的減毒試驗(yàn) 用小鼠肝癌H22及Lewis肺癌建立小鼠體內(nèi)移植性腫瘤模型，方法及給藥同前。比較單純應(yīng)用環(huán)磷酰胺10mg及20mg治療同與20(S)-人參皂甙Rh2 50mg及200mg分別合用治療各組之間各組動(dòng)物體重差異，計(jì)算臟器指數(shù)，按常規(guī)方法計(jì)數(shù)外周血白細(xì)胞數(shù)，觀察20(S)-人參皂甙Rh2的減毒作用。
6. 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)荷瘤小鼠免疫功能的影響6.1藥物對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能的影響第三批肝癌H22抑瘤試驗(yàn)中，末次給藥后24小時(shí)在觀察抑瘤率同時(shí)，無(wú)菌條件下取出荷瘤小鼠脾臟，分組研磨，用IMDM培養(yǎng)液調(diào)脾細(xì)胞濃度到1×107個(gè)/ml。取96孔平底培養(yǎng)板，每只鼠設(shè)(1)對(duì)照孔，3復(fù)孔，每孔加100μl IMDM培養(yǎng)液(2)ConA刺激孔，3復(fù)孔，每孔加100μl ConA(10μg/ml)然后每孔加100μl脾細(xì)胞懸液。在37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72小時(shí)，終止培養(yǎng)前4小時(shí)加入MTT溶液(5mg/ml)10μl/孔。終止培養(yǎng)后，小心吸棄孔內(nèi)上清液，每孔加入100μl DMSO，振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。用酶標(biāo)儀在570nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度(OD值)，計(jì)算刺激指數(shù)。
刺激指數(shù)＝ConA刺激孔OD值/對(duì)照孔OD值6.2藥物對(duì)荷瘤小鼠NK細(xì)胞毒百分率影響的測(cè)定取上述脾細(xì)胞懸液，制備常規(guī)培養(yǎng)YAC-1細(xì)胞懸液，調(diào)濃度至1×106個(gè)/ml。取96孔圓底培養(yǎng)板，每只鼠設(shè)(1)效應(yīng)細(xì)胞∶靶細(xì)胞(10∶1)孔，加50μl脾細(xì)胞懸液，100μl YAC-1細(xì)胞懸液，50μl IMDM培養(yǎng)液；效應(yīng)細(xì)胞對(duì)照孔，加50μl脾細(xì)胞懸液，150μl IMDM培養(yǎng)液。
(2)效應(yīng)細(xì)胞∶靶細(xì)胞(20∶1)孔，加100μl脾細(xì)胞懸液，100μl YAC-1細(xì)胞懸液；效應(yīng)細(xì)胞對(duì)照孔，加入100μl脾細(xì)胞懸液，100μl IMDM培養(yǎng)液。
(3)靶細(xì)胞對(duì)照孔，加入100μl YAC-1細(xì)胞懸液，100μl IMDM培養(yǎng)液。
上述各組均設(shè)三復(fù)孔，將培養(yǎng)板于37℃、5％CO2及100％濕度的培養(yǎng)箱中孵育24小時(shí)后，各孔加入MTT溶液(5mg/ml)10μl，同樣條件下繼續(xù)孵育4小時(shí)終止培養(yǎng)。然后小心吸棄孔內(nèi)上清液，每孔加入100μl DMSO，振蕩10min。用酶標(biāo)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定OD值，計(jì)算NK細(xì)胞毒百分率。 6.3藥物對(duì)荷瘤小鼠IL-2活性的影響采用依賴細(xì)胞株法檢測(cè)Ppd對(duì)荷瘤小鼠IL-2活性的影響。
(1)小鼠脾細(xì)胞IL-2誘生 制備脾細(xì)胞懸液，方法同上，沖洗一次后調(diào)細(xì)胞濃度為0.5×107/ml。加入終濃度為5～10μg/ml的ConA，3000rpm離心10min收獲細(xì)胞培養(yǎng)上清(其中含IL-2)。
(2)IL-2活性測(cè)定 將IL-2標(biāo)準(zhǔn)品用培養(yǎng)液倍比稀釋?zhuān)?復(fù)孔加入96孔板，每孔100μl。將待測(cè)樣品1∶2稀釋?zhuān)喟?復(fù)孔加入到96孔板內(nèi)。將生長(zhǎng)狀態(tài)良好的CTL2細(xì)胞離心洗滌兩遍，用含10％小牛血清的IMDM培養(yǎng)液配成5×105/ml濃度的細(xì)胞懸液。向每孔中加入100μl細(xì)胞懸液，置5％CO237℃培養(yǎng)箱中孵育22小時(shí)后，各孔加入MTT溶液(5mg/ml)10μl，同樣條件下繼續(xù)孵育4小時(shí)終止培養(yǎng)，小心吸棄孔內(nèi)上清液，每孔加入100μl DMSO，振蕩10min。用酶標(biāo)儀在570nm波長(zhǎng)處測(cè)定OD值。用log2稀釋度(X)和各稀釋度對(duì)應(yīng)的OD值(Y)作直線回歸，分析計(jì)算待測(cè)樣品的IL-2濃度。
統(tǒng)計(jì)方法 所有結(jié)果均采用Excel進(jìn)行T檢驗(yàn)顯著性差異檢測(cè)，結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。
試驗(yàn)結(jié)果1 20(S)-人參皂甙Rh2的抑瘤作用1.1 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)小鼠肝癌H22的生長(zhǎng)抑制作用結(jié)果表明，20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)肝癌H22具有明顯的生長(zhǎng)抑制作用，且存在劑量效應(yīng)關(guān)系，實(shí)驗(yàn)組三個(gè)劑量的平均抑瘤率分別為27.63％、37.16％、47.23％，見(jiàn)表1。
1.2 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)小鼠Lewis肺癌的生長(zhǎng)抑制作用結(jié)果表明，20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)Lewis肺癌具有明顯的生長(zhǎng)抑制作用，且存在劑量效應(yīng)關(guān)系，實(shí)驗(yàn)組三個(gè)劑量的平均抑瘤率分別為25.0％、42.4％、49.9％，見(jiàn)表2。
1.3 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)小鼠黑色素瘤B16的生長(zhǎng)抑制作用結(jié)果表明，20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)黑色素瘤B16具有明顯的生長(zhǎng)抑制作用，且存在劑量效應(yīng)關(guān)系，實(shí)驗(yàn)組三個(gè)劑量的平均抑瘤率分別為28.6％、37.1％、46.8％，見(jiàn)表3。
表1 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)小鼠肝癌H22的生長(zhǎng)抑制作用(n＝10 x±s)組別劑量 瘤重(g) 抑瘤率％P值溶劑對(duì)照20ml/kg1.64±0.36-環(huán)磷酰胺20mg/kg0.48±0.2871.0＜0.001小劑量組50mg/kg1.27±0.3522.6＜0.05中劑量組100mg/kg 1.08±0.4134.1＜0.01大劑量組200mg/kg 0.92±0.2843.9＜0.001溶劑對(duì)照20ml/kg1.37±0.46-環(huán)磷酰胺20mg/kg0.47±0.1165.3＜0.001小劑量組50mg/kg0.86±0.3137.2＜0.01中劑量組100mg/kg 0.78±0.2143.1＜0.001大劑量組200mg/kg 0.67±0.1851.1＜0.001溶劑對(duì)照20ml/kg1.69±0.57-環(huán)磷酰胺20mg/kg0.27±0.1084.1＜0.001小劑量組50mg/kg1.30±0.2223.1＜0.05中劑量組100mg/kg 1.11±0.2934.3＜0.01大劑量組200mg/kg 0.90±0.1946.7＜0.001表2 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)小鼠Lewis肺癌的生長(zhǎng)抑制作用(n＝10 x±s)組別 劑量 瘤重(g) 抑瘤率％ P值溶劑對(duì)照 20ml/kg 1.62±0.45-環(huán)磷酰胺 20mg/kg 0.47±0.2871.0 ＜0.001小劑量組 50mg/kg 1.17±0.3527.8 ＜0.05中劑量組 100mg/kg 0.84±0.2548.1 ＜0.01大劑量組 200mg/kg 0.79±0.4351.2 ＜0.01溶劑對(duì)照 20ml/kg 1.06±0.24-環(huán)磷酰胺 20mg/kg 0.27±0.0674.3 ＜0.001小劑量組 50mg/kg 0.81±0.2223.6 ＜0.05中劑量組 100mg/kg 0.61±0.1842.5 ＜0.01大劑量組 200mg/kg 0.50±0.1452.8 ＜0.001溶劑對(duì)照 20ml/kg 1.53±0.29-環(huán)磷酰胺 20mg/kg 0.37±0.2075.7 ＜0.001小劑量組 50mg/kg 1.17±0.4123.5 ＜0.05中劑量組 100mg/kg 0.97±0.6336.6 ＜0.05大劑量組 200mg/kg 0.83±0.4145.8 ＜0.001表3 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)小鼠黑色素瘤B16的生長(zhǎng)抑制作用(n＝10 x±s)組別 劑量 瘤重(g) 抑瘤率％ P值溶劑對(duì)照 20ml/kg 1.56±0.53-環(huán)磷酰胺 20mg/kg 0.24±0.0984.9 ＜0.001小劑量組 50mg/kg 1.03±0.4134.0 ＜0.05中劑量組 100mg/kg 0.98±0.3437.2 ＜0.01大劑量組 200mg/kg 0.80±0.2848.7 ＜0.01溶劑對(duì)照 20ml/kg 1.60±0.49-環(huán)磷酰胺 20mg/kg 0.23±0.1085.5 ＜0.001小劑量組 50mg/kg 1.13±0.3629.4 ＜0.05中劑量組 100mg/kg 0.94±0.3141.3 ＜0.01大劑量組 200mg/kg 0.81±0.3749.4 ＜0.01溶劑對(duì)照 20ml/kg 1.25±0.22-環(huán)磷酰胺 20mg/kg 0.26±0.0579.5 ＜0.001小劑量組 50mg/kg 0.97±0.2622.4 ＜0.05中劑量組 100mg/kg 0.84±0.3432.8 ＜0.01大劑量組 200mg/kg 0.72±0.1942.4 ＜0.0012 20(S)-人參皂甙Rh2的增效作用
2.1 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)環(huán)磷酰胺治療小鼠肝癌H22的增效作用結(jié)果表明，環(huán)磷酰胺5mg/kg劑量組平均抑瘤率為20.19％，而加用20(S)-人參皂甙Rh2 50mg/kg及200mg/kg實(shí)驗(yàn)組平均抑瘤率分別為26.69％及48.42％，提高抑瘤率6.50～28.23％。環(huán)磷酰胺10mg/kg劑量組平均抑瘤率為32.45％，而加用20(S)-人參皂甙Rh250mg/kg及200mg/kg實(shí)驗(yàn)組平均抑瘤率分別為46.38％及65.02％，提高抑瘤率13.93～32.57％，結(jié)果見(jiàn)表4。
2.2 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)環(huán)磷酰胺治療小鼠Lewis肺癌的增效作用結(jié)果表明，環(huán)磷酰胺5mg/kg劑量組平均抑瘤率為19.40％，而加用20(S)-人參皂甙Rh2 50mg/kg及200mg/kg組平均抑瘤率分別為24.90％及46.21％，提高抑瘤率5.50～26.81％。環(huán)磷酰胺10mg/kg劑量組平均抑瘤率為37.25％，而加用20(S)-人參皂甙Rh2 50mg/kg及200mg/kg組平均抑瘤率分別為53.13％及59.98％，提高抑瘤率15.88～22.73％，結(jié)果見(jiàn)表5。
以上結(jié)果提示，環(huán)磷酰胺5mg劑量組為治療肝癌H22及Lewis肺癌的無(wú)效劑量，環(huán)磷酰胺10mg劑量組為治療肝癌H22及Lewis肺癌的有效劑量，20(S)-人參皂甙Rh2分別與其聯(lián)合應(yīng)用可以提高抑瘤率，增強(qiáng)治療效果。而且20(S)-人參皂甙Rh2與環(huán)磷酰胺聯(lián)合用藥優(yōu)于環(huán)磷酰胺單純用藥，增效作用明顯(與相應(yīng)劑量的環(huán)磷酰胺組比較P＜0.05～P＜0.001)。表4 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)環(huán)磷酰胺抑制小鼠肝癌H22生長(zhǎng)的增效作用組別 劑量 瘤重(g) 抑瘤率％溶劑對(duì)照組20ml/kg1.99±0.55 -環(huán)磷酰胺 5mg/kg 1.53±0.47 23.31環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 5+50mg/kg 1.48±0.3925.63*環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 5+200mg/kg 0.93±0.2853.26** ##環(huán)磷酰胺 10mg/kg 1.14±0.3830.65*環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 10+50mg/kg 0.98±0.2950.75**環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 10+200mg/kg 0.67±0.2166.33*** ##溶劑對(duì)照組20ml/kg1.23±0.40 -環(huán)磷酰胺 5mg/kg 0.89±0.26 27.64環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 5+50mg/kg 0.79±0.2135.77*環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 5+200mg/kg 0.58±0.2552.85** #環(huán)磷酰胺 10mg/kg 0.78±0.2136.59*環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 10+50mg/kg 0.64±0.1347.97**環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 10+200mg/kg 0.41±0.1966.67*** ##溶劑對(duì)照組20ml/kg1.66±0.66 -環(huán)磷酰胺 5mg/kg 1.50±0.469.61環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 5+50mg/kg 1.35±0.4118.67環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 5+200mg/kg 1.01±0.3639.16* #環(huán)磷酰胺 10mg/kg 1.16±0.3730.10*環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 10+50mg/kg 0.99±0.2740.36**環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 10+200mg/kg 0.63±0.2062.05***###注與溶劑對(duì)照比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001與相應(yīng)劑量環(huán)磷酰胺比較#P＜0.05，##P＜0.01，###P＜0.001(下同)表5 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)環(huán)磷酰胺抑制小鼠Lewis肺癌生長(zhǎng)的增效作用組別 劑量 瘤重(g) 抑瘤率％溶劑對(duì)照組20ml/kg 1.10±0.37-環(huán)磷酰胺 5mg/kg 0.88±0.2920.00環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 5+50mg/kg 0.86±0.2421.82*環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 5+200mg/kg0.59±0.1246.36** #環(huán)磷酰胺 10mg/kg 0.69±0.2037.27*環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 10+50mg/kg0.61±0.2744.54**環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 10+200mg/kg 0.52±0.1452.72** #溶劑對(duì)照組20ml/kg 1.31±0.36-環(huán)磷酰胺 5mg/kg 1.04±0.2720.61環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 5+50mg/kg 0.98±0.2525.19環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 5+200mg/kg0.65±0.1150.38** ##環(huán)磷酰胺 10mg/kg 0.83±0.2736.64*環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 10+50mg/kg0.54±0.1958.78** #環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 10+200mg/kg 0.44±0.1466.42*** ##溶劑對(duì)照組20ml/kg 1.48±0.31-環(huán)磷酰胺 5mg/kg1.22±0.2417.58環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 5+50mg/kg 1.07±0.2227.70*環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 5+200mg/kg0.86±0.2841.89** #環(huán)磷酰胺 10mg/kg 0.92±0.1337.84*環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh2 10+50mg/kg0.65±0.1756.08** #環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+200mg/kg 0.58±0.1660.81** ##3 20(S)-人參皂甙Rh2的減毒作用在肝癌H22及Lewis肺癌腫瘤模型中，環(huán)磷酰胺10mg及20mg劑量組在抑瘤作用的同時(shí)可見(jiàn)體重、免疫器官及白細(xì)胞均明顯下降(P＜0.01或0.001)，有些小鼠在停藥前就已經(jīng)死亡。20(S)-人參皂甙Rh2與環(huán)磷酰胺合用可對(duì)此起保護(hù)作用，對(duì)抗環(huán)磷酰胺所致的體重、白細(xì)胞下降及免疫器官萎縮，提高小鼠胸腺及脾臟重量，降低荷瘤小鼠死亡率，減輕環(huán)磷酰胺的毒性，見(jiàn)表6-1、2、3及表7-1、2、3。
表6-120(S)-人參皂甙Rh2對(duì)環(huán)磷酰胺抑制小鼠肝癌H22生長(zhǎng)的減毒作用組別 體重(g) 胸腺指數(shù)脾指數(shù)WBC(×10 9/L)溶劑對(duì)照組20ml/kg 22.05±1.64 0.152±0.0430.705±0.156 8.26±2.86環(huán)磷酰胺10mg/kg 19.84±1.57***0.086±0.021*** 0.478±0.094**4.76±2.47***環(huán)磷酰胺20mg/kg 18.70±1.63***0.048±0.042*** 0.410±0.120**4.24±2.89***環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+50mg/kg21.90±1.43## 0.127±0.057## 0.631±0.124# 7.53±2.76##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+200mg/kg 21.68±1.12## 0.151±0.036### 0.729±0.140##7.36±3.16##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh220±50mm/kg 21.43±1.37### 0.1118±0.051## 0.621±0.065##7.55±3.47##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh220+200mg/kg 21.14±1.67## 0.133±0.064### 0.692±0.179##7.78±3.52##表6-2 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)環(huán)磷酰胺抑制小鼠肝癌H22生長(zhǎng)的減毒作用組別 體重(g) 胸腺指數(shù) 脾指數(shù) WBC(×10 9/L)溶劑對(duì)照組20ml/kg 25.43±2.31 0.283±0.052 0.849±0.138 10.67±2.55環(huán)磷酰胺10mg/kg 23.39±1.88* 0.132±0.024*** 0.443±0.112*** 6.76±1.01***環(huán)磷酰胺20mg/kg 20.76±1.92*** 0.096±0.029*** 0.389±0.087*** 5.28±2.37***環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+50mg/kg 24.73±1.56 0.232±0.035##0.746±0.185## 11.56±2.46##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+200mg/kg 25.5±2.23# 0.178±0.038# 0.718±0.147### 10.35±2.78##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh220+50mg/kg 24.57±2.76##0.221±0.042##0.733±0.145### 9.57±1.43##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh220+200mg/kg 25.68±3.16### 0.285±0.433### 0.768±0.164### 11.07±3.65##表6-3 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)環(huán)磷酰胺抑制小鼠肝癌H22生長(zhǎng)的減毒作用組別 體重(g) 胸腺指數(shù) 脾指數(shù) WBC(×10 9/L)溶劑對(duì)照組20ml/kg 24.08±2.05 0.188±0.035 0.718±0.137 10.26±2.34環(huán)磷酰胺10mg/kg 21.83±1.76* 0.091±0.022***0.426±0.058*** 5.81±2.51***環(huán)磷酰胺20mg/kg 19.97±2.64***0.045±0.014***0.401±0.125*** 4.21±1.80***環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+50mg/kg 23.12±2.87 0.162±0.083## 0.723±0.164## 9.39±1.43##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+200mg/kg 23.70±2.54# 0.174±0.024###0.649±0.186## 9.60±2.45##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh220+50mg/kg 24.16±3.01###0.167±0.059## 0.612±0.185## 9.78±2.02##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh220+200mg/kg 24.04±2.68###0.182±0.025###0.610±0.147### 10.12±2.89##表7-120(S)-人參皂甙Rh2對(duì)環(huán)磷酰胺抑制小鼠Lewis肺癌生長(zhǎng)的減毒作用組別 體重(g) 胸腺指數(shù) 脾指數(shù) WBC(×10 9/L)溶劑對(duì)照組20ml/kg 26.75±1.64 0.173±0.046 0.552±0.168 8.68±2.11環(huán)磷酰胺10mg/kg 23.83±1.57***0.089±0.020***0.371±0.120*4.52±1.44***環(huán)磷酰胺20mg/kg 20.71±1.68***0.075±0.042***0.286±0.116**4.01±0.85***環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+50mg/kg25.62±2.17# 0.187±0.074## 0.594±0.065# 7.52±2.65##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+200mg/kg 26.23±2.32## 0.202±0.072###0.525±0.168# 8.67±2.54##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh220+50mg/kg25.36±2.36## 0.166±0.032###0.528±0.143##7.85±1.12##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh220+200mg/kg 26.01±2.87###0.176±0.045###0.549±0.187##8.76±2.39##表7-220(S)-人參皂甙Rh2對(duì)環(huán)磷酰胺抑制小鼠Lewis肺癌生長(zhǎng)的減毒作用組別 體重(g) 胸腺指數(shù) 脾指數(shù)WBC(×10 9/L)溶劑對(duì)照組20ml/kg 24.47±2.38 0.223±0.052 0.481±0.138 9.65±2.57環(huán)磷酰胺10mg/kg 21.30±1.69** 0.118±0.021***0.285±0.087*** 4.76±1.04***環(huán)磷酰胺20mg/kg 19.77±2.96***0.097±0.015***0.246±0.112*** 4.23±1.18***環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+50mg/kg24.35±1.76## 0.214±0.073## 0.431±0.130##8.51±1.43##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+200mg/kg 24.38±2.21## 0.219±0.060## 0.405±0.152##9.12±1.45##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh220+50mg/kg24.42±2.32###0.208±0.038## 0.432±0.056###8.65±1.21##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh220+200mg/kg 24.61±3.23###0.221±0.058###0.423±0.074###9.73±2.71###表7-320(S)-人參皂甙Rh2對(duì)環(huán)磷酰胺抑制小鼠Lewis肺癌生長(zhǎng)的減毒作用組別體重(g) 胸腺指數(shù) 脾指數(shù) WBC(×10 9/L)溶劑對(duì)照組20ml/kg 23.38±2.11 0.290±0.057 0.495±0.132 10.26±2.34環(huán)磷酰胺10mg/kg 20.52±1.83** 0.091±0.015***0.322±0.114***5.81±2.51***環(huán)磷酰胺20mg/kg 18.17±1.60***0.045±0.011***0.250±0.129***4.21±1.80***環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+50mg/kg 22.63±2.20# 0.213±0.065## 0.410±0.161## 9.23±1.67##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh210+200mg/kg 23.31±2.25## 0.236±0.087## 0.414±0.165## 9.56±2.18##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh220+50mg/kg 22.56±2.14## 0.201±0.045## 0.429±0.187## 9.80±2.54##環(huán)磷酰胺+20(S)-人參皂甙Rh220+200mg/kg 23.13±2.02###0.275±0.056###0.415±0.178###984±2.86##4 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)小鼠免疫功能的影響4.1 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能的影響20(S)-人參皂甙Rh2中劑量及大劑量灌胃給藥10天后，ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)明顯增高(P＜0.05及0.01)，且存在量效關(guān)系。見(jiàn)表8。
4.2 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)NK細(xì)胞活性的影響20(S)-人參皂甙Rh2中劑量及大劑量灌胃給藥10天后，可明顯提高小鼠NK細(xì)胞活性(P＜0.05及0.01)，且存在量效關(guān)系。見(jiàn)表8。
4.3 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)荷瘤小鼠IL-2活性的影響20(S)-人參皂甙Rh2中劑量及大劑量灌胃給藥10天后，CTLL2誘導(dǎo)荷瘤小鼠產(chǎn)生的IL-2的量明顯增加(P＜0.05及0.01)，且存在量效關(guān)系，見(jiàn)表8。
表8 20(S)-人參皂甙Rh2對(duì)肝癌H22荷瘤小鼠免疫功能的影響組別 劑量 SI NK(％) IL-2溶劑對(duì)照 20ml/kg1.022±0.25319.23±2.102.169±0.360環(huán)磷酰胺 20mg/kg1.198±0.33117.45±3.142.474±0.441小劑量組 50mg/kg1.082±0.10620.43±2.552.152±0.232中劑量組 100mg/kg 1.287±0.146* 21.58±2.24* 3.126±0.854*大劑量組 200mg/kg 1.302±0.187* 23.35±3.25** 4.987±1.569**注與溶劑對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01本發(fā)明的藥物組合物，其有效成分是20(S)-人參皂甙Rh2，可以口服給藥，也可以注射給藥，還可以采用其它給途徑，可制成各種相應(yīng)的口服制劑、注射制劑或其它制劑。例如，利用20(S)-人參皂甙Rh2和各種藥用輔料，可以制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液等，也可以用注射用溶媒和(或)助溶劑制成注射液或注射用粉針劑。
另外，本發(fā)明的藥物組合物，還可以制成以20(S)-人參皂甙Rh2為主要有效成分，同時(shí)含有其它一種或多種天然的或合成的抗癌藥物組成的復(fù)方制劑供臨床應(yīng)用。例如，可以用20(S)-人參皂甙Rh2和環(huán)磷酰胺、5-氟尿嘧啶，阿霉素、順鉑等組成復(fù)方制劑，制成療效增強(qiáng)、毒性降低的藥物組合物。
本發(fā)明的藥物組合物，其臨床用量以20(S)-人參皂甙Rh2計(jì)可以是20-1500mg，最好是100-200mg，每日分兩次服用。
實(shí)施例2將6g固體氫氧化鈉溶于50ml，丙三醇中，再加入5g二醇組人參皂甙干粉，攪拌下加熱至220℃進(jìn)行水解反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)完成后趁熱傾入150ml 25℃的水中稀釋、混勻，加入乙酸乙酯萃取3次，每次使用乙酸乙酯70ml，回收乙酸乙酯后于105℃干燥得水解總產(chǎn)物2.3g。以硅膠柱層析(洗脫液氯仿∶甲醇∶乙酸乙酯∶水＝2∶2∶7∶1)分得20-(S)人參皂甙Rh2粗品432mg，再將此粗品以甲醇-水重結(jié)晶得白色晶體368mg，收率7.36％，其純度經(jīng)HPLC法測(cè)定92.3％。此白色晶體經(jīng)TLC、MS、13C-NMR、1H-NMR、13C-1HCOSY、1H-1H COSY、比旋光度及熔點(diǎn)測(cè)定，并與20-(S)人參皂甙Rh2的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)核實(shí)，確認(rèn)此白色晶體為20-(S)人參皂甙Rh2。
實(shí)施例3將6g固體氫氧化鈉溶于50ml丙三醇中，再加入5g二醇組人參皂甙干粉，攪拌下加熱至210℃進(jìn)行水解反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)完成后趁熱傾入150ml 25℃的水中稀釋、混勻，加入乙酸乙酯萃取3次，每次使用乙酸乙酯70ml，回收乙酸乙酯后于105℃干燥得水解總產(chǎn)物2.4g。以硅膠柱層析(洗脫液氯仿∶甲醇∶乙酸乙酯∶水＝2∶2∶7∶1)分得20-(S)人參皂甙Rh2粗品430mg，ODS柱層析(洗脫液甲醇∶水＝20∶1)后再以甲醇-水重結(jié)晶得白色晶體302mg，收率6.04％，其純度經(jīng)HPLC法測(cè)定98.5％。此白色晶體經(jīng)TLC、MS、13C-NMR、1H-NMR、13C-1H COSY、1H-1H COSY、比旋光度及熔點(diǎn)測(cè)定，并與20-(S)人參皂甙Rh2的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)核實(shí)，確認(rèn)此白色晶體為20-(S)人參皂甙Rh2。
實(shí)施例4將1.2Kg固體氫氧化鈉溶于20L丙三醇中，再加入1Kg二醇組人參皂甙干粉，攪拌下加熱至220℃進(jìn)行水解反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)完成后趁熱傾入60L 25℃的水中稀釋、混勻，加入乙酸乙酯萃取3次，每次使用乙酸乙酯21L，回收乙酸乙酯后于105℃干燥得水解總產(chǎn)物450g。以硅膠柱層析(洗脫液氯仿∶甲醇∶乙酸乙酯∶水＝2∶2∶7∶1)分得20-(S)人參皂甙Rh2粗品84g，再將此粗品以甲醇-水重結(jié)晶得白色晶體71.2g，收率7.12％，其純度經(jīng)HPLC法測(cè)定92.4％。此白色晶體經(jīng)TLC、MS、13C-NMR、1H-NMR、13C-1HCOSY、1H-1H COSY、比旋光度及熔點(diǎn)測(cè)定，并與20-(S)人參皂甙Rh2的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)核實(shí)，確認(rèn)此白色晶體為20-(S)人參皂甙Rh2。20-(S)人參皂甙Rh2制劑的實(shí)施例制劑的實(shí)施例1取10g 20(S)-人參皂甙Rh2加可溶性淀粉適量，混勻，制粒，裝入膠囊，制成每粒含20(S)-人參皂甙Rh250mg的膠囊200粒。制劑的實(shí)施例220ml溶射用蒸餾水，加入吐溫-80適量，再加入20mg 20(S)-人參皂甙Rh2，加熱溶解，過(guò)濾、分裝、滅菌，制成每ml含1mg20(S)-人參皂甙Rh2的注射液5支。制劑的實(shí)施例3250ml注射用蒸餾水，加入適量吐溫-80，再加入100mg 20(S)-人參皂甙Rh2，加熱溶解、過(guò)濾、滅菌，制成靜脈點(diǎn)滴用20(S)-人參皂甙Rh2注射液。制劑的實(shí)施例4取10g 20(S)-人參皂甙Rh2、加環(huán)磷酰胺400mg及可溶性淀粉適量，混勻，制粒，裝入膠囊，制成每粒含20(S)-人參皂甙Rh250mg、環(huán)磷酰胺2mg的膠囊200粒。
權(quán)利要求
1.一種以20(S)-人參皂甙Rh2為有效成分，用于增強(qiáng)抗癌藥物療效，降低抗癌藥物毒性、預(yù)防和治療放化療引起的白細(xì)胞降低及增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物是20(S)-人參皂甙Rh2和藥學(xué)上可接受的載體或輔料組成的藥物組合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物，是由20(S)-人參皂甙Rh2和其它抗癌藥物以及藥學(xué)上可接受的載體或輔料組成的藥物組合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其中抗癌藥物選自環(huán)磷酰胺、5-氟尿嘧啶、阿霉素、紫杉醇及順鉑中的一種或多種。
5. 20(S)-人參皂甙Rh2在制備具有增強(qiáng)抗癌藥物療效，降低抗癌藥物毒性、預(yù)防和治療放化療引起的白細(xì)胞降低及增強(qiáng)機(jī)體免疫功能作用的藥物組合物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種以20(S)－人參皂甙Rh
文檔編號(hào)A61K31/704GK1415304SQ0214655
公開(kāi)日2003年5月7日 申請(qǐng)日期2002年10月22日 優(yōu)先權(quán)日2002年10月22日
發(fā)明者金永日, 睢大員, 李緒文, 張龍清, 樓金 申請(qǐng)人:海南亞洲制藥有限公司