專利名稱：酪磷肽鈣營養(yǎng)液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明公開了一種促鈣吸收的營養(yǎng)液，尤其是一種酪磷肽鈣的營養(yǎng)液，其屬于含肽類的食品技術(shù)領(lǐng)域。
目前市場上銷售的大量補(bǔ)鈣營養(yǎng)品或藥品，大多是以鈣素加V-D的制劑，其療效有限，而且長期使用V-D，在臨床上發(fā)現(xiàn)V-D中毒病例已不在少數(shù)。V-D介導(dǎo)鈣吸收是舉世公認(rèn)的促鈣吸收利用的因子，從V-D藥理學(xué)看V-D的效應(yīng)主要集中在體內(nèi)十二指腸及小腸上部腸道內(nèi)主動(dòng)吸收鈣離子，而在小腸下部PH值7.8弱堿性條件下，V-D促鈣吸收作用無或不明顯。然而小腸下部較長的腸道內(nèi)又是鈣吸收的主要場所，其占體內(nèi)鈣吸收閾值的70～80％，其鈣吸收機(jī)理是依賴腸道內(nèi)鈣離子濃度梯度差來完成的。在該部位腸道區(qū)內(nèi)呈弱堿性，很容易形成不溶性鈣鹽，這樣就限制了鈣的吸收。有資料證明，人體從飲食中攝取的鈣，其吸收率僅在21-26％。要提高鈣的吸收率，必須阻斷腸道內(nèi)鈣與磷酸結(jié)合形成的不溶性磷酸鈣。然而目前市場上銷售的各種補(bǔ)鈣制品幾乎忽視了體內(nèi)小腸下部腸道內(nèi)鈣吸收的主要區(qū)域。在該區(qū)域V-D不起作用，因此目前的補(bǔ)鈣制品，其補(bǔ)鈣量是盲目的。
本發(fā)明的目的是要解決上述補(bǔ)鈣制品的弊端，提供一種不必使用V-D，而既有補(bǔ)鈣功能，又有促鈣吸收功能的雙功能的營養(yǎng)液食品，該食品的營養(yǎng)液能在體內(nèi)小腸下部腸道區(qū)內(nèi)阻礙不溶性磷酸鈣形成，保持增加腸道內(nèi)可溶性鈣離子濃度梯度差，以促進(jìn)鈣的吸收，其促鈣吸收能力要達(dá)到40％以上。提供的酪磷肽鈣(以下簡稱CPP-Ca)營養(yǎng)液及其制法要安全，無毒付作用，其中CPP-Ca的制備工藝要有較高的提取收率。
本發(fā)明的任務(wù)是有以下技術(shù)方案完成的，研制了一種酪磷肽鈣營養(yǎng)液，該營養(yǎng)液是由以下組合混配而成的組合物，組分 重量比(份)去離子水 100可溶性鈣鹽(以鈣元素計(jì))0.005～0.5CPP-Ca0.005～0.025甜味劑 0.5～15酸味劑 0.1～0.15
穩(wěn)定劑 0.01～0.2V-C0.1～0.5防腐劑 適量香味劑 適量以上組分中肽(CPP)∶鈣＝1∶(1～20)，經(jīng)分批混合溶解，過濾，紫外線滅菌，高壓均質(zhì)，稀釋定容，灌裝，制成瓶裝產(chǎn)品，該產(chǎn)品呈透明的乳白色膠體溶液。
本酪磷肽鈣營養(yǎng)液，所述的可溶性鈣鹽，其可以是乳酸鈣，葡萄糖酸鈣，泛酸鈣，醋酸鈣，氯化鈣，其中的一種或幾種。
本酪磷肽鈣營養(yǎng)液，所述的CPP-Ca其是由25個(gè)氨基酸組成的肽鏈，其分子量4400，其氨基酸序列結(jié)構(gòu)為Arg-Glu-Leu-Glu-Glu-Leu-Asn-Val-Pro-Gly-Glu-Ile-Val-Glu-Serp-Leu-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu-Ser-Ile-THr-Arg，該肽鏈內(nèi)含四個(gè)Serp(磷酸絲氨酸)，該Serp上含有四個(gè)磷酸殘基，其具有生物活性，該殘基可與鈣絡(luò)合形成絡(luò)合鈣鹽-CPP-Ca，該CPP-Ca產(chǎn)品外觀呈乳白色粉末。
本酪磷肽鈣營養(yǎng)液，所述的CPP-Ca的制備工藝過程是(a)、將酪蛋白按5～30％投料量溶于50～85℃蒸餾水中，在調(diào)PH值7～9，均質(zhì)工作壓力8～15MPa高壓均質(zhì)成糊狀基料；(b)、按加酶量0.01～0.5％投入胰蛋白酶，調(diào)PH值3～6，在25～65℃溫浴下1～6小時(shí)，水解酪蛋白；(c)、酶解后，迅速加溫90℃保溫5分鐘，滅活胰酶；(d)、分離酶解液在6000～10000p.r.m下，離心5～20分鐘，得取上清液；(e)、上清液過液在-4～4℃下，靜置12～14小時(shí)，除去未水解大分子；(f)、按上清液體積量投入CaCL2，按CaCL2料量20～40％(W/V)，充分?jǐn)嚢璺磻?yīng)2～5小時(shí)；(g)、按反應(yīng)液體積∶乙醇＝1∶(0.3～2.3)加入無水乙醇，凝聚生成乳白色絮狀物沉淀-CPP-Ca，回收乙醇；(h)、分離CPP-Ca，高速離心在6000～10000p.r.m10～30分鐘；(1)、真空干燥，在60℃以下真空干燥獲得純品CPP-Ca，粉碎包裝備用。
本酪磷肽鈣營養(yǎng)液，所述的甜味劑，其可以是蔗糖，乳糖，木糖醇，果糖漿，甜菊甙，其中的一種或幾種。
本酪磷肽鈣營養(yǎng)液，所述的酸味劑，其可以是檸檬酸，酒石酸，蘋果酸，其中的一種或幾種。
本酪磷肽鈣營養(yǎng)液，所述的穩(wěn)定劑，其可以是黃原膠，瓜爾豆膠，阿拉伯膠，西黃耆膠，其中的一種或幾種。
本酪磷肽鈣營養(yǎng)液，所述的防腐劑，其可以是山梨酸，蘋果酸鈉。
本酪磷肽鈣營養(yǎng)液，所述的香精，其可以是草莓香精，桔子香精，菠蘿香精，水蜜桃香精。
本酪磷肽鈣營養(yǎng)液的制造方法如下該營養(yǎng)液的組分按下列步驟配制(一)、先將按配方稱量的穩(wěn)定劑加1/5配方量的甜味劑，干粉混合攪拌均勻，再投入化膠罐加去離子水，在50～60℃溫度下充分溶解；(二)、將按配方稱量的可溶性鈣鹽投入調(diào)配罐中，加去離子水，加溫50～60℃，充分溶解；(三)、將按配方稱量的CPP-Ca，酸味劑，防腐劑，依次投入另一調(diào)配罐中，加去離子水，在50～60℃溫度下充分溶解；(四)、將余下4/5配方量的甜味劑投入化糖罐中，加去離子水在50～60℃溫度下，攪拌充分溶解，再經(jīng)過濾器投入中配罐中；(五)、將上述(一)-(三)罐中溶解液，經(jīng)管道紫外線滅菌后泵入中配罐中，再加入適量香味劑，攪拌混合均勻制成濃配液；(六)、將濃配液泵入高壓均質(zhì)機(jī)，在8-25MPa下均質(zhì)物料；(七)、將均質(zhì)的濃配液泵入稀配罐，用2/5配方用水量充分沖洗上述各罐和均質(zhì)機(jī)，洗水江入稀配罐，加去離子水定容，待裝瓶備用；
(八)、稀釋定容的營養(yǎng)液，再經(jīng)管道紫外線滅菌后，灌裝入瓶，再經(jīng)巴氏滅菌，檢驗(yàn)合格后制成瓶裝CPP-Ca營養(yǎng)液。
本發(fā)明的營養(yǎng)液，其優(yōu)點(diǎn)在于成功地開發(fā)了CPP-Ca鹽作為食品添加劑制成口服營養(yǎng)液，能順利地維持體內(nèi)的可溶性鈣量的吸收，經(jīng)實(shí)驗(yàn)測定正常人體表現(xiàn)消化鈣吸收率達(dá)46％，達(dá)到促進(jìn)鈣吸收的效果。該營養(yǎng)液經(jīng)急性毒理實(shí)驗(yàn)，微核實(shí)驗(yàn)，Ames試驗(yàn)，精子畸形實(shí)驗(yàn)，細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群實(shí)驗(yàn)，這五項(xiàng)實(shí)驗(yàn)證明無任何毒付作用，食用安全可靠。該營養(yǎng)液所含的CPP-Ca是一種具有生物活性的物質(zhì)，其極易被腸道吸收，經(jīng)同位素示蹤證實(shí)CPP-Ca可被吸收入體內(nèi)并沉積于骨骼之中。由于CPP-Ca存在于小腸腸道下部，可以有效地阻止腸道內(nèi)不溶性鈣鹽的形成，這樣就增加了腸道內(nèi)鈣離子濃度，從而提高了鈣的擴(kuò)散吸收能力，而此時(shí)腸道內(nèi)并無V-D作用存在，達(dá)到了不使用V-D而補(bǔ)鈣的功能。
本發(fā)明所采取的CPP-Ca的提取制備方法，由于采用在弱堿性條件下PH7-9下均質(zhì)酪蛋白溶液，通過高壓短時(shí)間的充分均質(zhì)，使酪蛋白分子充分分散于溶液中，達(dá)到充分與胰蛋白酶接觸環(huán)境，從而使酶解反應(yīng)進(jìn)行得完全迅速，以提高CPP肽鏈切斷率。采用高速離心分離與低溫過濾靜置沉淀后的上清液加入氯化鈣，攪拌充分反應(yīng)，使Serp上的磷酸殘基絡(luò)合形成CPP-Ca鹽。該肽鏈上的鈣鹽具有生物活性。再經(jīng)無水乙醇以1∶(1-2.3)體積比，凝聚提取CPP-Ca，使提取收率接近了理論提取率15％，達(dá)到了14.5％的好收率。
本發(fā)明的實(shí)施例如下本發(fā)明的保護(hù)范圍不僅限于實(shí)施例中。
本發(fā)明的營養(yǎng)液，其中生物活性物質(zhì)CPP-Ca的制備，如表1所列數(shù)據(jù)
表1CPP-Ca的制備實(shí)例
本發(fā)明的營養(yǎng)液具體實(shí)施配方，如表2所列配方實(shí)例表2CPP-Ca營養(yǎng)液的配方實(shí)例(單位kg)
<p>本發(fā)明的CPP-Ca營養(yǎng)液實(shí)際生產(chǎn)過程是以每批次生產(chǎn)2500L營養(yǎng)液為例。
(一)、先取2.5kg黃原膠與25kg蔗糖，干粉混合均勻，投入化膠罐中，加去離子水200l，加熱50℃±5℃攪拌溶解至半透明狀膠體溶液備用；(二)、取38.75kg乳酸鈣投入調(diào)配罐，加去離子水150l，并加熱50℃±5℃充分溶解后備用；(三)、取CPP-Ca 0.25kg，檸檬酸3.75kg、V-C2.5kg，苯甲酸鈉1.25kg，山梨酸0.5kg，依次投入另一調(diào)配罐中，加去離水200l，在50℃±5℃溫度下攪拌充分溶解備用；(四)、將余下的100kg蔗糖投入化糖罐中，加去離子水100l，在50℃±5℃下攪拌充分溶解，再將該糖溶液泵入雙聯(lián)過濾器過濾后投入中配罐中；(五)、將上述(一)-(三)罐中溶液分別經(jīng)管道紫外線滅菌后，泵入中配罐中，再在該罐中加入1l草莓香精，攪拌混合均勻制成濃配液；(六)、將濃配液650l泵入高壓均質(zhì)機(jī)，在25MPa下，將濃配液均質(zhì)完全；(七)、用1000l去離子水充分沖洗上述各罐和均質(zhì)機(jī)，洗水匯入稀配罐，再加去離子水定容2500l，待裝瓶備用；(八)、將2500l稀釋的營養(yǎng)液，經(jīng)管道紫外線滅菌后，入灌裝機(jī)灌裝入瓶，再經(jīng)巴氏滅菌，檢驗(yàn)合格后制成瓶裝CPP-Ca營養(yǎng)液。
制成的CPP-Ca營養(yǎng)液，經(jīng)人體消化吸收實(shí)驗(yàn)，其實(shí)驗(yàn)報(bào)告如下CPP-Ca人體消化吸收試驗(yàn)總結(jié)報(bào)告I一、實(shí)驗(yàn)對(duì)象先取學(xué)院在校學(xué)生，年齡18～22歲，健康狀態(tài)良好，30名作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，隨機(jī)分成二組，分別為實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組。
二、實(shí)驗(yàn)期限共分二期，食物適應(yīng)期二天，實(shí)驗(yàn)期二天，在實(shí)驗(yàn)期內(nèi)收集成食物、糞便，待檢測。
三、實(shí)驗(yàn)食物按全價(jià)食物制訂出整個(gè)實(shí)驗(yàn)期內(nèi)食譜，固定就餐內(nèi)容及量，實(shí)驗(yàn)對(duì)象將食物全部食盡。實(shí)驗(yàn)期內(nèi)，將每餐留出一分作分析檢測。其中，實(shí)驗(yàn)期中午飯、晚飯實(shí)驗(yàn)組服葡萄糖酸鈣400mg和表1實(shí)例2制備的CPP-Ca10mg，對(duì)照組服葡萄糖酸鈣400mg，不服CPP-Ca。
四、糞便采集以活性碳標(biāo)記物分別在收集糞便前及后內(nèi)服，收采實(shí)驗(yàn)期糞便，稱總重，拌勻，取出部分檢測，計(jì)算排出Ca總量。
五、檢測分析及數(shù)據(jù)處理檢測方法按高錳酸鉀滴定法檢測，檢測時(shí)用質(zhì)控樣品GBW-08551豬肝粉同時(shí)測定，測得數(shù)據(jù)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，算出人體Ca的表現(xiàn)消化吸收率。六.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
七、結(jié)論本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，實(shí)驗(yàn)組(服用10mgCPP-Ca組)Ca的消化吸收率為40.54±6.56％，對(duì)照組(未服CPP-Ca組)Ca的消化吸收率為29.13±12.75％。二組的表現(xiàn)消化吸收率差異有極顯著意義。
CPP-Ca消化吸收率試驗(yàn)報(bào)告II一、實(shí)驗(yàn)對(duì)象選取某學(xué)院在校學(xué)生，年齡22-24歲，健康男子12名為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，隨機(jī)分成二組，分別為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。
二、實(shí)驗(yàn)期限
共分二期，食物適應(yīng)期二天，實(shí)驗(yàn)期二天，在實(shí)驗(yàn)期內(nèi)收集好食物、糞便。
三、實(shí)驗(yàn)食物按全價(jià)食物制訂出整個(gè)實(shí)驗(yàn)期內(nèi)食譜，固定就餐內(nèi)容，實(shí)驗(yàn)對(duì)象將食物全部食盡。實(shí)驗(yàn)期內(nèi)，將每餐留出一分作分析檢測。每日早餐實(shí)驗(yàn)組服用表1實(shí)例5制備的CPP-Ca和含Ca飲料，對(duì)照組服含Ca飲料。
四、糞便采集以活性碳標(biāo)記物內(nèi)服，收集實(shí)驗(yàn)期糞便，稱總重，拌勻，取出部分檢測，計(jì)算排出Ca總量。
五、成分分析及數(shù)據(jù)處理每個(gè)樣品做2個(gè)平行樣，按高錳酸鉀滴定法檢測，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，算出Ca的表現(xiàn)消化吸收率。六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
七、結(jié)論由本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以說明，服用CPP-Ca組Ca的消化吸收率43.126±2.190高于不服CPP-Ca組25.372±11.933％，差異有顯著性。
權(quán)利要求
1.一種酪磷肽鈣營養(yǎng)液，其特征在于該營養(yǎng)液是由以下組分混配而成的組合物，組分重量比(份)去離子水100可溶性鈣鹽(以鈣元素計(jì)) 0.005～0.5CPP-Ca 0.005～0.025甜味劑 0.5～15酸味劑 0.1～0.15穩(wěn)定劑 0.01～0.2V-C 0.1～0.5防腐劑適量香味劑適量以上組分中肽(CPP)∶鈣＝1∶(1～20)，經(jīng)分批混合溶解，過濾，紫外線滅菌，高壓均質(zhì)，稀釋定容，灌裝，制成瓶裝產(chǎn)品，該產(chǎn)品呈透明的乳白色膠體溶液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述酪磷肽鈣營養(yǎng)液，其特征在于所述的可溶性鈣鹽，其可以是乳酸鈣，葡萄糖酸鈣，泛酸鈣，醋酸鈣，氯化鈣，其中的一種或幾種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述酪磷肽鈣營養(yǎng)液，其特征在于所述的CPP-Ca其是由25個(gè)氨基酸組成的肽鏈，其分子量4400，其氨基酸序列結(jié)構(gòu)為Arg-Glu-Leu-Glu-Glu-Leu-Asn-Val-Pro-Gly-Glu-Ile-Val-Glu-Serp-Leu-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu-Ser-Ile-THr-Arg，該肽鏈內(nèi)含四個(gè)Serp(磷酸絲氨酸)，該Serp上含有四個(gè)磷酸殘基，其具有生物活性，該殘基可與鈣絡(luò)合形成絡(luò)合鈣鹽-CPP-Ca，該CPP-Ca產(chǎn)品外觀呈乳白色粉末。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述酪磷肽鈣營養(yǎng)液，其特征在于所述的CPP-Ca的制備工藝過程是(a)、將酪蛋白按5～30％投料量溶于50～85℃蒸餾水中，在調(diào)PH值7～9，均質(zhì)工作壓力8～15MPa，條件高壓均質(zhì)成糊狀基料；(b)、按加酶量0.01～0.5％投入胰蛋白酶，調(diào)PH值3～6，在25～65℃溫浴下1～6小時(shí)，水解酪蛋白；(c)、酶解后，迅速加溫90℃保溫5分鐘，滅活胰酶；(d)、分離酶解液在6000～10000p.r.m下，離心5～20分鐘，得取上清液；(e)、上清液過夜在-4～4℃下，靜置12～14小時(shí)，除去未水解大分子；(f)、按上清液體積量投入CacL2，投CacL2料量20～40％(W/V)，充分?jǐn)嚢璺磻?yīng)2～5小時(shí)；(g)、按反應(yīng)液體積∶乙醇＝1∶(0.3～2.3)加入無水乙醇，凝聚生成乳白色絮狀物沉淀-CPP-Ca，回收乙醇；(h)、分離CPP-Ca，高速離心在6000～10000p.r.m10～30分鐘；(1)、真空干燥，在60℃以下真空干燥獲得純品CPP-Ca，粉碎包裝備用。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述酪磷肽鈣營養(yǎng)液，其特征在于所述的甜味劑，其可以是蔗糖，乳糖，木糖醇，果糖漿，甜菊甙，其中的一種或幾種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述酪磷肽鈣營養(yǎng)液，其特征在于所述的酸味劑，其可以是檸檬酸，酒石酸，蘋果酸，其中的一種或幾種。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述酪磷肽鈣營養(yǎng)液，其特征在于所述的穩(wěn)定劑，其可以是黃原膠，瓜爾豆膠，阿拉伯膠，西黃耆膠，其中的一種或幾種。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述酪磷肽鈣營養(yǎng)液，其特征在于所述的防腐劑，其可以是山梨酸，蘋果酸鈉。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述酪磷肽鈣營養(yǎng)液，其特征在于所述的香精，其可以是草莓香精，桔子香精，菠蘿香精，水蜜桃香精。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酪磷肽鈣營養(yǎng)液的制造方法，其特征在于該營養(yǎng)液的組分按下列步驟配制(一)、先將按配方稱量的穩(wěn)定劑加1/5配方量的甜味劑，干粉混合攪拌均勻，再投入化膠罐加去離子水，在50～60℃溫度下充分溶解；(二)、將按配方稱量的可溶性鈣鹽投入調(diào)配罐中，加去離子水，加溫50～60℃，充分溶解；(三)、將按配方稱量的CPP-Ca，酸味劑，防腐劑，依次投入另一調(diào)配罐中，加去離子水，在50～60℃溫度下充分溶解；(四)、將余下4/5配方量的甜味劑投入化糖罐中，加去離子水在50～60℃溫度下，攪拌充分溶解，再經(jīng)過濾器投入中配罐中；(五)、將上述(一)-(三)罐中溶解液，經(jīng)管道紫外線滅菌后泵入中配罐中，再加入適量香味劑，攪拌混合均勻制成濃配液；(六)、將濃配液泵入高壓均質(zhì)機(jī)，在8-25MPa下均質(zhì)物料；(七)、將均質(zhì)的濃配液泵入稀配罐，用2/5配方用水量充分沖洗上述各罐和均質(zhì)機(jī)，洗水泵入稀配罐，加去離子水定容，待裝瓶備用；(八)、稀釋定容的營養(yǎng)液，再經(jīng)管道紫外線滅菌后，灌裝入瓶，再經(jīng)巴氏滅菌，檢驗(yàn)合格后制成瓶裝CPP-Ca營養(yǎng)液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種酪磷肽鈣營養(yǎng)液，該食品主要含有酪磷肽鈣，可溶性鈣鹽以及其它甜味劑，酸味劑，穩(wěn)定劑和抗氧化劑。其中肽∶鈣比為1∶(1～20)，采用高科技提取純化工藝，從酪蛋白中提取酪磷肽，再經(jīng)加鈣制取具有生物活性的酪磷肽鈣，以提高人體腸道區(qū)內(nèi)鈣離子擴(kuò)散吸收作用，達(dá)到鈣的表現(xiàn)消化吸收率46％以上。該營養(yǎng)液的保健功能是補(bǔ)充鈣元素，促進(jìn)鈣吸收，而不必使用V-D。
文檔編號(hào)A61K38/16GK1162489SQ9710269
公開日1997年10月22日 申請(qǐng)日期1997年2月25日 優(yōu)先權(quán)日1997年2月25日
發(fā)明者宋漢梁, 王仁元, 張恒生, 張心明, 丁玉芳, 牛立新 申請(qǐng)人:青島蓋寶特保健品有限公司