專利名稱：銀杏內(nèi)酯注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥制藥領(lǐng)域，特別是涉及一種銀杏內(nèi)酯提取工藝和銀杏內(nèi)酯注射液及其制備方法。
背景技術(shù)：
尋找強(qiáng)效PAF(血小板活化因子)拮抗劑是上世紀(jì)80年代以來新藥研究的重大方向之一。PAF在體內(nèi)參與許多病理生理過程，作用面廣，活性很大，已發(fā)現(xiàn)PAF在血栓形成、哮喘、器官移植排斥、急性炎癥、心臟過敏、內(nèi)毒素導(dǎo)致的休克等病理過程中起著重要作用。在PAF拮抗劑的研究中，從天然產(chǎn)物中篩選的銀杏內(nèi)酯類化合物是活性最強(qiáng)，評(píng)價(jià)最多的天然產(chǎn)物，藥理和臨床研究也表明，銀杏內(nèi)酯類化合物是最先進(jìn)的PAF拮抗劑，其中銀杏內(nèi)酯B拮抗PAF受體的選擇性和活性最強(qiáng)。銀杏內(nèi)酯作為高度專一性的PAF受體阻斷劑，其活性強(qiáng)弱IC50分別為銀杏內(nèi)酯B 0.25Mm＞銀杏內(nèi)酯A 0.74Mm＞銀杏內(nèi)酯C 7.1Mm。銀杏內(nèi)酯對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用主要表現(xiàn)為能阻止腦缺血后引起的損傷，能明顯改善腦缺血狀態(tài)，對(duì)缺血引起的腦水腫、電解質(zhì)紊亂、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)具有顯著抑制作用。銀杏內(nèi)酯可以抑制血小板聚集，降低血液粘度，改善缺血病人的微循環(huán)，減少血栓形成；銀杏內(nèi)酯穩(wěn)定細(xì)胞膜，減少血管緊張素的滲透作用；具有抗過敏、抗炎、抗休克作用，對(duì)缺血損傷及器官移植的排斥反應(yīng)亦有保護(hù)作用。另外，銀杏內(nèi)酯還可以提高SOD活性，消除自由基、延緩衰老。但是目前的銀杏內(nèi)酯提取工藝成本高、得率低、有效物質(zhì)含量少，而且由于銀杏內(nèi)酯在水中溶解度低，不易制成高濃度的注射液，限制了它的有效應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種成本低、得率高的銀杏內(nèi)酯的提取工藝。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種濃度高、熱穩(wěn)定性好的銀杏內(nèi)酯注射液。
本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供上述銀杏內(nèi)酯注射液的制備方法。
本發(fā)明所述的銀杏內(nèi)酯提取工藝中所用的提取溶劑為稀丙酮液、乙酸乙酯，工藝中用石油醚及醋酸鈉溶液除雜；用乙醇重結(jié)晶。本工藝采用溶劑法。
本發(fā)明選用了羥丙基-β-環(huán)糊精作為銀杏內(nèi)酯的增溶劑，能夠大大提高銀杏內(nèi)酯在水中的溶解度，可以制成輸液使用，解決了銀杏內(nèi)酯大劑量使用問題，同時(shí)也使銀杏內(nèi)酯在水中的熱穩(wěn)定性得到了較大提高。在輸液中加入適量的等滲調(diào)節(jié)劑使與血液等滲。為提高輸液長(zhǎng)期放置的穩(wěn)定性，還可以加入適量螯合劑。
本發(fā)明是由下列方案實(shí)現(xiàn)的一種銀杏內(nèi)酯的提取工藝，其特征在于包含下列步驟稱取一定量銀杏葉，粉碎，加數(shù)倍量的稀丙酮液溫浸提取，回收丙酮后用除雜溶劑除雜，醋酸乙酯萃取純化，醋酸鈉再除雜，回收醋酸乙酯，乙醇或甲醇中重結(jié)晶，過濾，低溫干燥。
所述的提取工藝，其中銀杏葉用稀丙酮提取，其濃度為20％～70％，溫浸溫度為30～55℃，丙酮用量為原藥材的2～10倍。
所述的提取工藝，其提取工藝中除雜溶劑可以是正己烷、環(huán)己烷、氯仿、石油醚(30～120℃)。
所述的提取工藝，其提取工藝中萃取純化溶劑為乙酸乙酯、2-15％醋酸鈉溶液或碳酸氫鈉溶液。
所述的提取工藝，其提取工藝中銀杏內(nèi)酯重結(jié)晶溶劑為40～95％乙醇或甲醇，40-80℃溫度下干燥。
一種銀杏內(nèi)酯注射液，它是對(duì)銀杏內(nèi)酯采用羥丙基-β-環(huán)糊精增溶制得的水溶液。
所述的銀杏內(nèi)酯注射液，它還含有螯合劑。
所述的銀杏內(nèi)酯注射液，其中螯合劑可以是乙二胺四乙酸二鈉或乙二胺四乙酸二鈉鈣。
所述的的銀杏內(nèi)酯注射液，它還含有等滲調(diào)節(jié)劑。
所述的銀杏內(nèi)酯注射液，其中等滲調(diào)節(jié)劑可以是氯化鈉或葡萄糖。
上述任一銀杏內(nèi)酯注射液，在每100ml制劑中含銀杏內(nèi)酯 0.001-0.1g 羥丙基-β-環(huán)糊精 0.01-10g 等滲調(diào)節(jié)劑 0.5-5g螯合劑 0.01-0.05g。
所述銀杏內(nèi)酯注射液的制備方法，包括溶解、活性炭處理、粗濾、定容、精濾、分裝、滅菌過程，其特征在于將羥丙基-β-環(huán)糊精加入注射用水中，攪拌溶解后，再加入銀杏內(nèi)酯，攪拌并加熱至溶解，然后加入等滲調(diào)節(jié)劑和螯合劑攪拌溶解，加入活性炭處理后粗濾，加注射用水定容后精濾，分裝，熱壓滅菌。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)采用本法生產(chǎn)銀杏內(nèi)酯優(yōu)點(diǎn)如下1、本法采用溶劑法提取銀杏內(nèi)酯，割除國(guó)內(nèi)目前常用的樹脂柱和其他吸附劑生產(chǎn)銀杏內(nèi)酯。本法操作簡(jiǎn)單、污染少、成本低。
2、本法提取銀杏內(nèi)酯得率高達(dá)0.1％以上，而用其他提取方法銀杏內(nèi)酯得率僅為0.07％左右。
3、本法提取銀杏內(nèi)酯含量達(dá)90％以上，其中銀杏內(nèi)酯B含量達(dá)50％，同類產(chǎn)品中銀杏內(nèi)酯B含量只能達(dá)30％左右。
4、本法提取銀杏內(nèi)酯中主要雜質(zhì)銀杏酚酸類含量小于5ppm，其他方法生產(chǎn)的銀杏內(nèi)酯中酚酸類含量高于100ppm。
5、羥丙基-β-環(huán)糊精是β-環(huán)糊精衍生物，水溶性好，無毒無刺激，可以作為靜脈注射用輔料，對(duì)多種藥物具有增溶和包合作用。本發(fā)明利用羥丙基-β-環(huán)糊精對(duì)銀杏內(nèi)酯增溶，不僅解決了銀杏內(nèi)酯在非堿性條件下的水溶性問題，使銀杏內(nèi)酯在非堿性條件下溶解度最大可達(dá)1mg/ml，而且可以提高銀杏內(nèi)酯水溶液的熱穩(wěn)定性，使注射液熱壓滅菌成為可能，制備的注射液更安全、更穩(wěn)定，有利于臨床用藥。
本發(fā)明所述的銀杏內(nèi)酯注射液根據(jù)臨床需要，解決了銀杏內(nèi)酯大劑量使用的問題，簡(jiǎn)化了操作，使用方便，避免了由小封針抽取注入氯化鈉或葡萄糖輸液的中間環(huán)節(jié)，杜絕了用藥過程中的交叉污染，提高了用藥質(zhì)量，保障了用藥安全。本發(fā)明所述的銀杏內(nèi)酯輸液可以制成各種規(guī)格，供臨床醫(yī)生直接選用。
本輸液外觀無色澄明，各項(xiàng)指標(biāo)均符合《中國(guó)藥典2000年版(第二部)》附錄IB有關(guān)規(guī)定。
6、本發(fā)明的銀杏內(nèi)酯注射液的制備方法成本低、簡(jiǎn)單易行。
具體實(shí)施例方式
以下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的闡述。
實(shí)施例1銀杏內(nèi)酯的提取工藝稱取銀杏葉100g粉碎，加4倍量的70％丙酮液溫浸提取，溫度為30℃，浸提5小時(shí)，每隔10分鐘攪拌一次，過濾，得濾液I。藥渣繼續(xù)加入4倍量的70％丙酮液溫浸提取，溫度為30℃，浸提1小時(shí)，過濾，得濾液II。藥渣繼續(xù)加3倍量70％丙酮液溫浸提取，溫度為30℃，浸提1小時(shí)，過濾，得濾液III，藥渣棄去。合并三次提取液，回收丙酮至約總體積的1/4量，放置。過濾上述濃縮液并用石油醚(30℃，用量為2∶1)除雜4次，水相用醋酸乙酯(用量為2∶1)萃取3次；醋酸乙酯液用8％醋酸鈉溶液(用量為2∶1)洗滌，回收醋酸乙酯，殘?jiān)?0％乙醇溶解，放置析晶，過濾，70℃真空干燥(-0.07～0.08MPa)，即得。
實(shí)施例2銀杏內(nèi)酯的提取工藝稱取銀杏葉200g粉碎，加7倍量的50％丙酮液溫浸提取，溫度為40℃，浸提6小時(shí)，每隔10分鐘攪拌一次，過濾，得濾液I。藥渣繼續(xù)加入5倍量的50％丙酮液溫浸提取，溫度為40℃，浸提1小時(shí)，過濾，得濾液II。藥渣繼續(xù)加3倍量50％丙酮液溫浸提取，溫度為40℃，浸提1小時(shí)，過濾，得濾液III，藥渣棄去。合并三次提取液，回收丙酮至約總體積的1/4量，放置。過濾上述濃縮液并用石油醚(120℃，用量為3∶1)除雜5次，水相用醋酸乙酯(用量為3∶1)萃取4次；醋酸乙酯液用10％醋酸鈉溶液(用量為3∶1)洗滌，回收醋酸乙酯，殘?jiān)?0％乙醇溶解，放置析晶，過濾，40℃真空干燥(-0.07～0.08MPa)，即得。
實(shí)施例3銀杏內(nèi)酯的提取工藝稱取銀杏葉200g粉碎，加5倍量的60％丙酮液溫浸提取，溫度為50℃，浸提8小時(shí)，每隔10分鐘攪拌一次，過濾，得濾液I。藥渣繼續(xù)加入5倍量的60％丙酮液溫浸提取，溫度為50℃，浸提2小時(shí)，過濾，得濾液II。藥渣繼續(xù)加4倍量60％丙酮液溫浸提取，溫度為50℃，浸提2小時(shí)，過濾，得濾液III，藥渣棄去。合并三次提取液，回收丙酮至約總體積的1/4量，放置。過濾上述濃縮液并用環(huán)己烷(用量為3∶1)除雜3次，水相用醋酸乙酯(用量為3∶1)萃取2次；醋酸乙酯液用15％醋酸鈉溶液(用量為3∶1)洗滌，回收醋酸乙酯，殘?jiān)?5％乙醇溶解，放置析晶，過濾，50℃真空干燥(-0.07～0.08MPa)，即得。
實(shí)施例4銀杏內(nèi)酯的提取工藝稱取銀杏葉200g粉碎，加10倍量的20％丙酮液溫浸提取，溫度為55℃，浸提6小時(shí)，每隔10分鐘攪拌一次，過濾，得濾液I。藥渣繼續(xù)加入8倍量的20％丙酮液溫浸提取，溫度為55℃，浸提1小時(shí)，過濾，得濾液II。藥渣繼續(xù)加6倍量20％丙酮液溫浸提取，溫度為55℃，浸提1小時(shí)，過濾，得濾液III，藥渣棄去。合并三次提取液，回收丙酮至約總體積的1/6量，放置。過濾上述濃縮液并用氯仿(用量為4∶1)除雜6次，水相用醋酸乙酯(用量為4∶1)萃取6次；醋酸乙酯液用2％醋酸鈉溶液(用量為4∶1)洗滌，回收醋酸乙酯，殘?jiān)?0％乙醇溶解，放置析晶，過濾，80℃真空干燥(-0.07～0.08MPa)，即得。
實(shí)施例5銀杏內(nèi)酯氯化鈉注射液及制備方法稱取羥丙基-β-環(huán)糊精50g加入5000ml注射用水中，攪拌溶解后，根據(jù)規(guī)格加入銀杏內(nèi)酯2.5g，攪拌并加熱至溶解，加入氯化鈉89g和乙二胺四乙酸二鈉鈣1g攪拌溶解，加入活性炭2.5g，80℃保溫并攪拌10分鐘，粗濾除炭，加注射用水至10000ml，混勻，用0.22μm微孔濾膜過濾，所得溶液分裝于100ml輸液瓶中，每瓶含有銀杏內(nèi)酯25mg，115℃滅菌30分鐘，即得銀杏內(nèi)酯輸液。
實(shí)施例6銀杏內(nèi)酯葡萄糖注射液及制備方法生產(chǎn)工藝同實(shí)施例5，將實(shí)施例5中氯化鈉89g改為葡萄糖494g。
實(shí)施例7銀杏內(nèi)酯氯化鈉注射液及制備方法稱取羥丙基-β-環(huán)糊精500g加入5000ml注射用水中，攪拌溶解后，根據(jù)規(guī)格加入銀杏內(nèi)酯5g，攪拌并加熱至溶解，加入氯化鈉89g和乙二胺四乙酸二鈉1g攪拌溶解，加入活性炭2.5g，80℃保溫并攪拌10分鐘，粗濾除炭，加注射用水至10000ml，混勻，用0.22μm微孔濾膜過濾，所得溶液分裝于100ml輸液瓶中，每瓶含有銀杏內(nèi)酯50mg，115℃滅菌30分鐘，即得銀杏內(nèi)酯輸液。
實(shí)施例8銀杏內(nèi)酯葡萄糖注射液及制備方法生產(chǎn)工藝同實(shí)施例7，將實(shí)施例7中氯化鈉89g改為葡萄糖494g。
實(shí)施例9銀杏內(nèi)酯氯化鈉注射液及制備方法稱取羥丙基-β-環(huán)糊精800g加入5000ml注射用水中，攪拌溶解后，根據(jù)規(guī)格加入銀杏內(nèi)酯8g，攪拌并加熱至溶解，加入氯化鈉89g和乙二胺四乙酸二鈉鈣1g攪拌溶解，加入活性炭2.5g，80℃保溫并攪拌10分鐘，粗濾除炭，加注射用水至10000ml，混勻，用0.22μm微孔濾膜過濾，所得溶液分裝于100ml輸液瓶中，每瓶含有銀杏內(nèi)酯80mg，115℃滅菌30分鐘，即得銀杏內(nèi)酯輸液。
實(shí)施例10銀杏內(nèi)酯葡萄糖注射液及制備方法生產(chǎn)工藝同實(shí)施例9，將實(shí)施例9中氯化鈉89g改為葡萄糖494g。
實(shí)施例11銀杏內(nèi)酯氯化鈉注射液及制備方法稱取羥丙基-β-環(huán)糊精1000g加入5000ml注射用水中，攪拌溶解后，根據(jù)規(guī)格加入銀杏內(nèi)酯10g，攪拌并加熱至溶解，加入氯化鈉89g和乙二胺四乙酸二鈉鈣1g攪拌溶解，加入活性炭2.5g，80℃保溫并攪拌10分鐘，粗濾除炭，加注射用水至10000ml，混勻，用0.22μm微孔濾膜過濾，所得溶液分裝于100ml輸液瓶中，每瓶含有銀杏內(nèi)酯100mg，115℃滅菌30分鐘，即得銀杏內(nèi)酯輸液。
實(shí)施例12銀杏內(nèi)酯葡萄糖注射液及制備方法生產(chǎn)工藝同實(shí)施例11，將實(shí)施例11中氯化鈉89g改為葡萄糖494g。
權(quán)利要求
1.一種銀杏內(nèi)酯注射液，其特征在于它是對(duì)銀杏內(nèi)酯采用羥丙基-β-環(huán)糊精增溶制得的水溶液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的銀杏內(nèi)酯注射液，其特征在于還含有螯合劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的銀杏內(nèi)酯注射液，其特征在于螯合劑可以是乙二胺四乙酸二鈉或乙二胺四乙酸二鈉鈣。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的銀杏內(nèi)酯注射液，其特征在于還含有等滲調(diào)節(jié)劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的銀杏內(nèi)酯注射液，其特征在于等滲調(diào)節(jié)劑可以是氯化鈉或葡萄糖。
6.根據(jù)權(quán)利要求1～5任一所述銀杏內(nèi)酯注射液，其特征在于每100ml制劑中含銀杏內(nèi)酯 0.001-0.1g 羥丙基-β-環(huán)糊精 0.01-10g 等滲調(diào)節(jié)劑 0.5-5g螯合劑 0.01-0.05g。
7.權(quán)利要求1～6任一所述銀杏內(nèi)酯注射液的制備方法，包括溶解、活性炭處理、粗濾、定容、精濾、分裝、滅菌過程，其特征在于將羥丙基-β-環(huán)糊精加入注射用水中，攪拌溶解后，再加入銀杏內(nèi)酯，攪拌并加熱至溶解，然后加入等滲調(diào)節(jié)劑和螯合劑攪拌溶解，加入活性炭處理后粗濾，加注射用水定容后精濾，分裝，熱壓滅菌。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種銀杏內(nèi)酯提取工藝和銀杏內(nèi)酯注射液及其制備方法。該提取工藝為稱取一定量銀杏葉粉碎，加數(shù)倍量的稀丙酮液溫浸提取，回收丙酮，除雜，醋酸乙酯萃取純化，醋酸鈉再除雜，回收醋酸乙酯，乙醇或甲醇中重結(jié)晶，過濾，低溫干燥。該銀杏內(nèi)酯注射液，是對(duì)銀杏內(nèi)酯采用羥丙基－β－環(huán)糊精增溶制得的水溶液。所述的注射液的制備方法，將羥丙基－β－環(huán)糊精加入注射用水中，攪拌溶解，加銀杏內(nèi)酯，攪拌并加熱溶解，再加等滲調(diào)節(jié)劑和螯合劑攪拌溶解，加活性炭處理后粗濾，加注射用水定容后精濾，分裝，熱壓滅菌。該提取工藝操作簡(jiǎn)單、污染少、成本低、提取效率高；所述的注射液銀杏內(nèi)酯含量高，穩(wěn)定性好，其制備方法簡(jiǎn)單易行。
文檔編號(hào)A61K31/365GK1698599SQ20051007246
公開日2005年11月23日 申請(qǐng)日期2004年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月30日
發(fā)明者曹慶先, 樓鳳昌, 丁峰, 周勤, 閻政, 馮志英 申請(qǐng)人:江蘇吳中蘇藥醫(yī)藥開發(fā)有限責(zé)任公司, 四川恩威中醫(yī)藥研究開發(fā)有限公司