專利名稱：一種干預(yù)氧化應(yīng)激的香椿子超臨界總多酚萃取物的制法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種天然中藥香椿子的萃取工藝，具體的說是一種香椿子中宗多酚的超臨界CO2萃取方法，是指采用超臨界(X)2萃取香椿子中抗氧化應(yīng)激作用的總多酚，屬于中藥有效部位提取技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
香椿子為楝科植物香椿的果實(shí)。《四川中藥志》記載香椿子，性溫，味辛苦，無毒， 入肝、肺經(jīng)，具祛風(fēng)、散寒、止痛功效，主治風(fēng)寒外感、心胃氣痛、風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛、疝氣等。香椿在我國分布于華北、東北、西北、西南、華東等地，尤以山東、河北兩省為多。香椿以栽植最多， 加上廣泛分布的野生香椿，整體資源非常豐富。鑒于多酚化合物具有較強(qiáng)的清除自由基、抗氧化、抗腫瘤、抗輻射、保護(hù)心血管系統(tǒng)等功能，與心血管疾病、腫瘤、衰老、糖尿病并發(fā)癥等疾病的防治相關(guān)，所以開發(fā)綠色安全的天然抗氧化劑成為目前研究的熱點(diǎn)之一。目前香椿子化學(xué)成分研究尚不系統(tǒng)，以多酚、揮發(fā)油等有效部位為主。研究證實(shí)香椿子總多酚具有抗氧化、降血糖、保護(hù)心肌缺血再灌注損傷、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、保護(hù)活化和損傷的內(nèi)皮細(xì)胞等作用。目前自香椿子中提取總多酚的方法為先用70 %乙醇提取，再用AB-8大孔樹脂純化，后用減壓法制備總多酚提取物(邢莎莎，陳超.香椿子中多酚類成分體外抗氧化作用研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38 (14) :7285-7觀7.)。上述制備方法中，涉及到提取、回收、 樹脂預(yù)處理、吸附解吸、樹脂再生以及減壓干燥等步驟，有機(jī)溶劑消耗量大，提取時間長，伴有加熱過程，容易造成多酚類成分氧化變質(zhì)，最終所得到的總多酚提取物，得率相對較低， 生產(chǎn)效率偏低，樹脂中殘留的合成原料或有機(jī)溶劑，易流入藥液造成二次污染。張京芳等運(yùn)用超臨界(X)2萃取技術(shù)，在物料粒度60目，靜態(tài)萃取20 min, CO2流量 30 mL，萃取溫度50 °C，萃取壓力5000 psi工藝條件下，得到了具有營養(yǎng)保健作用的香椿籽油(張京芳，王冬梅，張強(qiáng)，等.香椿籽油的超臨界(X)2流體萃取工藝研究及品質(zhì)分析[J]. 中國糧油學(xué)報，2007，22 (5) :93-96.)。香椿子經(jīng)上法萃取處理后，雖去掉了其中大部分香椿子油，但有一定極性的總多酚化合物尚存在于藥渣中。在此基礎(chǔ)上，對藥渣進(jìn)行第二次超臨界(X)2萃取，在夾帶劑協(xié)助下，針對性萃取藥渣中的香椿子總多酚，不僅綜合利用了提油后的藥渣，而且大為提高了總多酚的純度與質(zhì)量穩(wěn)定性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是提供一種香椿子中總多酚的超臨界CO2萃取方法，是一種提取效率高、操作簡單、質(zhì)量可控、產(chǎn)品穩(wěn)定、溶劑殘留低，具有綠色環(huán)保節(jié)能的有效部位萃取方法。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明通過下列措施實(shí)現(xiàn)
⑴采用液氮低溫粉碎機(jī)將香椿子粉碎成60目粗粉，香椿子粗粉置于超臨界萃取儀的萃取釜中，運(yùn)用張京芳等研究的香椿籽油超臨界(X)2流體萃取工藝先行提油，減壓分離獲得香椿籽油。
(2)提油后的藥渣，按照粗粉質(zhì)量(g)與夾帶劑體積(ml) 1 2的配比，加入20 ml 的40%乙醇協(xié)助提取。⑶調(diào)節(jié)萃取釜，控制萃取溫度在45 °C、萃取壓力在25 MPa, CO2流量在25 ml / min，萃取時間為1. 5 h。⑷調(diào)節(jié)分離釜，控制解析溫度在50 °C、解析壓力在7 MPa條件下解析分離，所得香椿子總多酚純度為61. 04 %。香椿子經(jīng)低溫粉碎處理后置于萃取釜中，采用超臨界CO2萃取香椿子中總多酚?；谙愦蛔又锌偠喾泳哂幸欢O性，先采用超臨界(X)2進(jìn)行前處理，萃取香椿籽油；加入適宜的夾帶劑，選擇合理工藝參數(shù)，對香椿子中總多酚進(jìn)行提取，觀察所得萃取物對體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。本發(fā)明方法提取率高、質(zhì)量可控、溶劑殘留低，最大限度地提高了總多酚的數(shù)量與質(zhì)量，符合當(dāng)前綜合利用、綠色環(huán)保、可持續(xù)發(fā)展及循環(huán)經(jīng)濟(jì)模式。下面結(jié)合具體實(shí)施方式
對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)一步的說明。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1香椿子(X)2超臨界總多酚萃取物的制備方法
采用i^olin-Ciocalteu比色法測定萃取物中總多酚含量，所用萃取設(shè)備為美國 SFT-100XW超臨界萃取系統(tǒng)，其實(shí)驗(yàn)步驟如下
實(shí)驗(yàn)1運(yùn)用超臨界CO2萃取技術(shù)萃取香椿子中香椿子油
稱取低溫粉碎的60目粗粉三份，每份10 g左右，在靜態(tài)萃取20min，CO2流量30 ml/ min，萃取溫度50 °C，萃取壓力5000 psi條件下萃取，減壓分離得香椿子油，其平均萃取率為 93. 2% (n=3)。實(shí)驗(yàn)2超臨界(X)2萃取香椿子總多酚工藝中夾帶劑濃度的考察
利用實(shí)驗(yàn)1中提油后的藥渣，分別加入不同濃度的夾帶劑20 ml，其它萃取條件實(shí)驗(yàn)1， 萃取1 h，收集并測定萃取物中總多酚含量，結(jié)果見表1。表1超臨界CO2萃取香椿子總多酚工藝中夾帶劑濃度的考察
'乙醇濃度(％) I總多酸(mg/g)I平均含量(mg/g) Irsd(%)
40_3. 64 3. 61 3. 72_^66_1. 56
553.60 3.62 3. 553.59TToQ~
703.56 3. 55 3.473.53Πο~
85丨3.48 3. 51 3.40丨3.46|l. 64
結(jié)果表明隨著乙醇濃度的增加，總多酚含量有逐漸降低的趨勢，故本試驗(yàn)選擇40%的
乙醇為萃取總多酚的夾帶劑。實(shí)驗(yàn)3超臨界(X)2萃取香椿子總多酚工藝中夾帶劑用量的考察
利用實(shí)驗(yàn)1中提油后的藥渣，選擇40%的乙醇為夾帶劑，分別加入不同體積的夾帶劑， 其它萃取條件實(shí)驗(yàn)2，收集并測定萃取物中總多酚含量，結(jié)果見表2。表2超臨界CO2萃￠(香椿子總多酚工藝中夾帶劑用量的考察
乙醇用量(ml) I總多酚(mg/g)I平均含量(mg/g) |RSD(%)
53.23 3. 19 3. 31“ 3.24T788~
10|3.45 3. 55 3.43丨3.48|l. 8權(quán)利要求
1.一種具有干預(yù)氧化應(yīng)激作用的香椿子(X)2超臨界總多酚萃取物的制備方法，其萃取方法的特征在于如下步驟⑴稱取低溫粉碎的香椿子粗粉，置于超臨界萃取儀的萃取釜中，控制超臨界CO2流體萃取條件，減壓分離獲得香椿子油；⑵提油后的藥渣，按照粗粉質(zhì)量(g)與夾帶劑體積(ml) 1:2的配比，加入20 ml的 40%乙醇協(xié)助提??；(3)調(diào)節(jié)萃取釜，控制萃取溫度在45 °C、萃取壓力在25 MPa，C02流量在25 ml / min, 萃取時間為1. 5 h ；⑷調(diào)節(jié)分離釜，控制解析溫度在50 °C、解析壓力在7 MI^a條件下解析分離，所得香椿子總多酚純度為61. 04%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的香椿子總多酚萃取物，通過使用H2A誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型，證明總多酚萃取物具有較好的干預(yù)氧化應(yīng)激作用。
全文摘要
本發(fā)明涉及香椿子的提取技術(shù)領(lǐng)域，是一種采用超臨界CO2萃取香椿子中總多酚的方法，可通過如下步驟完成香椿子液氮低溫粉碎成60目粗粉，控制超臨界CO2流體萃取條件，先行提取香椿子油；提油后的藥渣，加入40%乙醇為夾帶劑，設(shè)定合理的萃取與解析條件，萃取香椿子中總多酚。通過使用H2O2誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型，證實(shí)所得的總多酚萃取物具有較強(qiáng)的抗氧化能力和對內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用。本發(fā)明方法為一種提取率高、質(zhì)量可控、溶劑殘留低；對香椿子粗粉進(jìn)行兩次連續(xù)萃取，最大限度地提高了總多酚的數(shù)量與質(zhì)量，符合當(dāng)前綜合利用、綠色環(huán)保、可持續(xù)發(fā)展及循環(huán)經(jīng)濟(jì)模式。
文檔編號A61K36/58GK102526202SQ20121002421
公開日2012年7月4日 申請日期2012年2月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月5日
發(fā)明者李萬忠, 李愛峰, 李愛平, 陳為濤 申請人:李萬忠