專利名稱：含α的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含α1受體阻斷劑作為活性成分的視神經(jīng)保護藥物。
背景技術(shù)：
人類的視神經(jīng)由大約1,000,000根視神經(jīng)纖維組成。現(xiàn)在認為當30％的纖維紊亂時，靜態(tài)視野計能夠檢測到異常；當50％的纖維紊亂時，會對視野造成影響并被動態(tài)視野計檢測到。視神經(jīng)纖維是由視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的軸突組成，延長至外側(cè)膝狀體核。解剖學和生理學上將視網(wǎng)膜神經(jīng)結(jié)細胞分成幾種類型。從這些種類的視網(wǎng)膜神經(jīng)結(jié)細胞延伸出來的軸突具有各自不同的形態(tài)和功能。視神經(jīng)紊亂的發(fā)生基本是因為軸突運輸?shù)奈蓙y。軸突運輸在篩板部分發(fā)生紊亂。軸突運輸?shù)奈蓙y意味著視神經(jīng)細胞的死亡。有人提出這種死亡涉及到調(diào)亡(Journal of the eye，16(6)833-841)。當視神經(jīng)細胞紊亂時，發(fā)生視野紊亂和各種視網(wǎng)膜紊亂，最后可能導致喪失視覺。因此需要開發(fā)用于保護視神經(jīng)細胞和預防該細胞死亡的視神經(jīng)保護藥物。
因為α1受體阻斷劑與腎上腺素α1受體結(jié)合抑制神經(jīng)傳遞，α1受體阻斷劑被用作抗高血壓藥物。布那唑嗪作為一種α1受體阻斷劑，可以作為抗高血壓藥物在市場上購得。日本專利2610619號公開了布那唑嗪具有降低眼內(nèi)壓的作用，用于治療高眼內(nèi)壓。此外，JP-B-7-23302公開了將布那唑嗪應用于滴眼劑中的制劑。此外，有報告特拉唑嗪(WO95/31200)、哌唑嗪(USP4197301號)和達哌唑(JP-A-54-157576)作為α1受體阻斷劑具有降低眼內(nèi)壓的作用。
通常認為青光眼是由于眼內(nèi)壓升高所引起的疾病，它在視神經(jīng)的視乳頭處引起視神經(jīng)纖維的機能性障礙，包括發(fā)生視乳頭倒位和視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維缺損，最終引起視野紊亂。在青光眼的研究工作領(lǐng)域中，主要研究通過抑制眼內(nèi)壓升高來間接防止視野紊亂的方法。
現(xiàn)在認為如果發(fā)現(xiàn)能夠有效保護視神經(jīng)細胞的藥物，就可以直接預防視野紊亂。
最近，一種不涉及眼內(nèi)壓升高但涉及視乳頭改變和視野改變的疾病引起人們的關(guān)注。該疾病被稱為正常眼壓青光眼。雖然眼內(nèi)壓持續(xù)位于正常范圍內(nèi)(小于或等于21mmHg)，但由于視神經(jīng)紊亂，正常眼壓青光眼是引起視野損傷的疾病。即使治療這種正常眼壓青光眼，也需要降低眼內(nèi)壓，使用降眼壓藥物。如果能夠發(fā)現(xiàn)可以保護視神經(jīng)的藥物，該藥物就可以直接用來治療或預防視野紊亂，因此可能是更有效的藥物。所以，需要開發(fā)具有這些效果的藥物。
另外，對于視網(wǎng)膜疾病，其中視網(wǎng)膜血液循環(huán)障礙占有特別重要的位置。視網(wǎng)膜血液循環(huán)障礙引起氧氣和營養(yǎng)供應不足，從而視網(wǎng)膜神經(jīng)結(jié)細胞死亡。視網(wǎng)膜血液循環(huán)障礙的典型癥狀包括例如視網(wǎng)膜血管閉塞伴視網(wǎng)膜靜脈或視網(wǎng)膜動脈堵塞或狹窄、作為視網(wǎng)膜剝離的一種病因的糖尿病性視網(wǎng)膜病和引起視覺功能障礙發(fā)生的缺血性視神經(jīng)病。有人提出視網(wǎng)膜神經(jīng)結(jié)細胞的死亡與黃斑變性、其它視網(wǎng)膜疾病如色素性視網(wǎng)膜炎和利伯氏病的發(fā)生或癥狀有密切關(guān)系。
如上所述，保護視神經(jīng)細胞使直接治療或預防視野紊亂成為可能。此外，這種保護是預防或治療多種視網(wǎng)膜疾病的有用措施。
如上所述，已知α1受體阻斷劑具有降低眼內(nèi)壓的作用。但是，沒有任何有關(guān)α1受體阻斷劑在視神經(jīng)保護方面效果的報告。此外，也沒有關(guān)于α1受體阻斷劑對主要包括例如正常眼壓青光眼、視網(wǎng)膜血管閉塞、糖尿病性視網(wǎng)膜病、缺血性視神經(jīng)病、黃斑變性、色素性視網(wǎng)膜炎和利伯氏病的視網(wǎng)膜疾病有何種影響的報告。
如上所述，α1受體阻斷劑對視神經(jīng)的保護作用還不為人們所知。因此，關(guān)于α1受體阻斷劑對神經(jīng)保護作用的研究是很有意義的課題。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明人進行了關(guān)于α1受體阻斷劑和視神經(jīng)保護作用之間關(guān)系的研究。隨后，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)α1受體阻斷劑具有保護視神經(jīng)細胞的顯著作用。
本發(fā)明涉及一種含α1受體阻斷劑作為有效成分的視神經(jīng)保護藥物。
此外，本發(fā)明涉及治療或預防由于視神經(jīng)細胞紊亂引起的疾病的方法，包括給予所需患者有效量的α1受體阻斷劑，以及α1受體阻斷劑在制備用于治療或預防視神經(jīng)細胞紊亂所引起疾病的藥物中的應用。
在本發(fā)明中，具有阻斷α1受體作用的化合物包括例如布那唑嗪、哌唑嗪、特拉唑嗪、萘哌地爾、多沙唑嗪、曲馬唑嗪、達哌唑、阿夫唑嗪、坦洛新和KRG-3332。
在這些α1受體阻斷劑中，優(yōu)選化學結(jié)構(gòu)中具有堿性雜環(huán)的α1受體阻斷劑。堿性雜環(huán)指環(huán)上至少具有一個氮原子并且是堿性的雜環(huán)。在這種堿性雜環(huán)中，更優(yōu)選具有兩個氮原子的飽和雜環(huán)。具體地講，飽和雜環(huán)包括例如咪唑烷、哌嗪和高哌嗪?；瘜W結(jié)構(gòu)具有堿性雜環(huán)的α1受體阻斷劑包括布那唑嗪、哌唑嗪、特拉唑嗪、萘哌地爾、多沙唑嗪、曲馬唑嗪和達哌唑。
這些藥物可以是與無機酸和有機酸形成的鹽的形式。這些鹽的實例包括例如鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽和草酸鹽。
在開發(fā)和研究α1受體阻斷劑作為青光眼治療藥物的過程中，本發(fā)明人意外發(fā)現(xiàn)α1受體阻斷劑具有保護視神經(jīng)細胞的作用。因此獲得了本發(fā)明。根據(jù)Kashii等的方法(IOVS.1994，vol.35，no.2 685-695)，本發(fā)明人研究了它們對加入谷氨酸引起培養(yǎng)的大鼠胚胎視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞死亡的作用，以及它們對去除血清引起培養(yǎng)的大鼠胚胎視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞死亡的作用。(詳細資料在下面藥理實驗中描述)。本發(fā)明人隨后發(fā)現(xiàn)α1受體阻斷劑可以有效抑制這些神經(jīng)細胞的死亡，可能是潛在的保護視神經(jīng)的重要藥物。
根據(jù)本發(fā)明，α1受體阻斷劑可以口服或腸胃外給藥。其劑型包括例如片劑、膠囊劑、顆粒劑、粉劑、滴眼劑和注射劑。特別優(yōu)選滴眼劑和注射劑。它們可以利用常規(guī)技術(shù)配制。
具體的講，可以使用例如JP-B-7-23302和WO95/31200中描述的配方和可商業(yè)獲得的配方。
以滴眼劑為例詳細描述配制方法。根據(jù)需要使用等滲制劑例如氯化鈉和濃甘油，緩沖劑例如硼酸、硼砂、磷酸鈉和乙酸鈉，表面活性劑例如聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯、硬脂酸-40-聚烴氧基酯、和聚氧乙烯硬化蓖麻油，穩(wěn)定劑例如檸檬酸鈉和乙二胺四乙酸鈉，防腐劑例如苯扎氯銨和對羥基苯甲酸酯，來制備這種滴眼劑。pH值在眼用制劑可接受的范圍內(nèi)。優(yōu)選pH值在4到8范圍內(nèi)。使用常用基質(zhì)如白凡士林和液體石蠟可以制備眼膏。
根據(jù)患者的癥狀、年齡等適當?shù)剡x擇劑量。對于口服給藥，可以每天一次或分多次服用0.1到100mg的劑量。每天0.0001到1w/v％、優(yōu)選0.001到0.1w/v％的滴眼劑，一次或分多次滴眼。
本發(fā)明的α1受體阻斷劑可以與其它降低眼內(nèi)壓的藥物聯(lián)合使用。
作為一個實例，下面顯示藥理實驗的結(jié)果。該實例是為了更好的理解本發(fā)明，而不是對本發(fā)明的限制。
本發(fā)明的最佳實施方式實施例[藥理實驗]為了研究α1受體阻斷劑保護視神經(jīng)細胞的作用，用下文中的方法研究以下作用(1)對加入谷氨酸引起的培養(yǎng)大鼠胚胎視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞死亡的作用，和(2)對去除血清引起的培養(yǎng)大鼠胚胎視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞死亡的作用。
(1)α1受體阻斷劑對加入谷氨酸引起的培養(yǎng)大鼠胚胎視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞死亡的作用從大鼠胚胎(大小為孕18天)中取出并分離視網(wǎng)膜細胞，然后在含10％胎牛血清的Eagle氏基本培養(yǎng)基中、在涂布聚乙烯亞胺的塑料蓋片上培養(yǎng)7天(37℃，5％CO2/95％空氣)。在第八天和以后，細胞在含10％馬血清的Eagle氏基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在培養(yǎng)的第六天，加入阿糖胞苷(10μM)抑制非神經(jīng)元細胞生長。在培養(yǎng)的第十一天，細胞在補充谷氨酸(1mM)和一種α1受體阻斷劑的無血清Eagle氏基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)10分鐘。然后，將細胞轉(zhuǎn)移到不含谷氨酸和α1受體阻斷劑的無血清Eagle氏基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)1小時。隨后，通過臺盼藍染色排除法測定毒性。具體地講，細胞用1.5％的臺盼藍溶液染色10分鐘，用10％中性福爾馬林溶液固定，用生理鹽水漂洗。然后用相差顯微鏡進行細胞計數(shù)。被臺盼藍染色的細胞定義為死亡細胞，而不被染色的細胞定義為活細胞?；诨罴毎麑偧毎?200或更多)的比例確定培養(yǎng)細胞的生存率。僅加入1mM谷氨酸的組和同時加入1mM谷氨酸與α1受體阻斷劑的組分別被定義為“僅加入1mM谷氨酸組”和“加入1mM谷氨酸+α1受體阻斷劑組”。將這些結(jié)果與由沒有處理的組“未處理組”計算所得相應比率進行比較。在這個實驗中，鹽酸布那唑嗪、鹽酸哌唑嗪、鹽酸特拉唑嗪和鹽酸萘哌地爾用作α1受體阻斷劑。實驗結(jié)果分別顯示在表1到4中。表中顯示了平均值。
表1鹽酸布那唑嗪的作用

()中的數(shù)字指每組的例數(shù)。
表2鹽酸哌唑嗪的作用

()中的數(shù)字指每組的例數(shù)。
表3鹽酸特拉唑嗪的作用

()中的數(shù)字指每組的例數(shù)。
表4鹽酸萘哌地爾的作用

()中的數(shù)字指每組的例數(shù)。
(2)α1受體阻斷劑對去除血清引起的培養(yǎng)大鼠胚胎視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞死亡的作用從大鼠胚胎(大小為孕18天)中取出并分離視網(wǎng)膜細胞，然后在含10％胎牛血清的Eagle氏基本培養(yǎng)基中、在涂布聚賴氨酸的玻璃蓋片上培養(yǎng)7天(37℃，5％CO2/95％空氣)。在第八天和以后，細胞在含10％馬血清的Eagle氏基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在培養(yǎng)的第六天，加入阿糖胞苷(10μM)抑制非神經(jīng)元細胞的生長。在培養(yǎng)的第十天，細胞在無血清Eagle氏基本培養(yǎng)基中或補充10μM鹽酸布那唑嗪的無血清Eagle基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時。隨后，通過臺盼藍染色排除法測定毒性。具體地講，細胞用1.5％的臺盼藍溶液染色10分鐘，用10％中性福爾馬林溶液固定，用生理鹽水漂洗。然后用相差顯微鏡進行細胞計數(shù)。被臺盼藍染色的細胞定義為死亡細胞，而不被染色的細胞定義為活細胞?；诨罴毎麑偧毎?200或更多)的比例，確定培養(yǎng)細胞的生存率。此外，使用TUNEL法，對由于去除血清而增加的TUNEL陽性細胞(調(diào)亡細胞)以及TUNEL陰性細胞(活細胞)計數(shù)，計算TUNEL陽性細胞對總細胞的比率。無血清Eagle氏基本培養(yǎng)基培養(yǎng)組和加入α1受體阻斷劑的無血清Eagle氏基本培養(yǎng)基培養(yǎng)組被分別定義為“去除血清組”和“去除血清+加入α1受體阻斷劑組”。將這些結(jié)果與由“未處理組”計算的相應比率進行比較。表5顯示了使用鹽酸布那唑嗪作為α1受體阻斷劑的實驗結(jié)果。表中的數(shù)字表示平均值。
表5

()中的數(shù)字指每組的例數(shù)。
如表1到5顯示的結(jié)果所示，α1受體阻斷劑具有明確地抑制培養(yǎng)視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞死亡(調(diào)亡)的作用。因此，作為保護視神經(jīng)細胞例如視網(wǎng)膜神經(jīng)結(jié)細胞藥物的α1受體阻斷劑，可以作為預防或治療主要包括例如正常眼壓青光眼、視網(wǎng)膜血管閉塞、糖尿病性視網(wǎng)膜病、缺血性視神經(jīng)病、黃斑變性、色素性視網(wǎng)膜炎和利伯氏病的視網(wǎng)膜疾病的藥物。
工業(yè)實用性藥理實驗結(jié)果顯示，α1受體阻斷劑例如布那唑嗪具有保護視神經(jīng)的作用，可以作為治療主要包括正常眼壓青光眼、視網(wǎng)膜血管閉塞、糖尿病性視網(wǎng)膜病、缺血性視神經(jīng)病、黃斑變性、色素性視網(wǎng)膜炎和利伯氏病的視網(wǎng)膜疾病的藥物。因此，本發(fā)明提供了一種含α1受體阻斷劑作為活性成分的視神經(jīng)保護藥物。
權(quán)利要求
1.一種含α1受體阻斷劑作為活性成分的視神經(jīng)細胞保護藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的視神經(jīng)細胞保護藥物，其中α1受體阻斷劑是化學結(jié)構(gòu)中具有堿性雜環(huán)的α1受體阻斷劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的視神經(jīng)細胞保護藥物，其中α1受體阻斷劑是布那唑嗪、哌唑嗪、特拉唑嗪、萘哌地爾、多沙唑嗪、曲馬唑嗪或達哌唑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的視神經(jīng)細胞保護藥物，其中視神經(jīng)細胞是視網(wǎng)膜神經(jīng)結(jié)細胞。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的視神經(jīng)細胞保護藥物，該視神經(jīng)細胞保護藥物用來預防或治療眼病。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的視神經(jīng)細胞保護藥物，其中眼病是正常眼壓青光眼。
7.根據(jù)權(quán)利要求5的視神經(jīng)細胞保護藥物，其中眼病是視網(wǎng)膜血管閉塞、糖尿病性視網(wǎng)膜病、缺血性視神經(jīng)病、黃斑變性、色素性視網(wǎng)膜炎或利伯氏病。
8.含α1受體阻斷劑、基于對視神經(jīng)細胞保護作用的治療或預防視野紊亂的藥物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的治療或預防視野紊亂的藥物，其中α1受體阻斷劑是化學結(jié)構(gòu)中具有堿性雜環(huán)的α1受體阻斷劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的治療或預防視野紊亂的藥物，其中α1受體阻斷劑是布那唑嗪、哌唑嗪、特拉唑嗪、萘哌地爾、多沙唑嗪、曲馬唑嗪或達哌唑。
11.治療或預防由于視神經(jīng)細胞紊亂引起的疾病的方法，包括給予所需患者有效量的α1受體阻斷劑。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的治療或預防方法，其中α1受體阻斷劑是化學結(jié)構(gòu)中具有堿性雜環(huán)的α1受體阻斷劑。
13.根據(jù)權(quán)利要求11的治療或預防方法，其中α1受體阻斷劑是布那唑嗪、哌唑嗪、特拉唑嗪、萘哌地爾、多沙唑嗪、曲馬唑嗪或達哌唑。
14.根據(jù)權(quán)利要求11的治療或預防方法，其中視神經(jīng)細胞是視網(wǎng)膜神經(jīng)結(jié)細胞。
15.根據(jù)權(quán)利要求11的治療或預防方法，其中的疾病是眼病。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的治療或預防方法，其中眼病是正常眼壓青光眼。
17.根據(jù)權(quán)利要求15的治療或預防方法，其中眼病是視網(wǎng)膜血管閉塞、糖尿病性視網(wǎng)膜病、缺血性視神經(jīng)病、黃斑變性、色素性視網(wǎng)膜炎或利伯氏病。
18.治療或預防視野紊亂的方法，包括給所需患者有效量的α1受體阻斷劑，該方法是基于對視神經(jīng)細胞的保護作用。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的治療或預防視野紊亂的方法，其中α1受體阻斷劑是化學結(jié)構(gòu)中具有堿性雜環(huán)的α1受體阻斷劑。
20.根據(jù)權(quán)利要求18的治療或預防視野紊亂的方法，其中α1受體阻斷劑是布那唑嗪、哌唑嗪、特拉唑嗪、萘哌地爾、多沙唑嗪、曲馬唑嗪或達哌唑。
21.α1受體阻斷劑在制備用于治療或預防由視神經(jīng)細胞保護紊亂引起的疾病的藥物中的應用。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的應用，其中α1受體阻斷劑是化學結(jié)構(gòu)中具有堿性雜環(huán)的α1受體阻斷劑。
23.根據(jù)權(quán)利要求21的應用，其中α1受體阻斷劑是布那唑嗪、哌唑嗪、特拉唑嗪、萘哌地爾、多沙唑嗪、曲馬唑嗪或達哌唑。
24.根據(jù)權(quán)利要求21的應用，其中視神經(jīng)細胞是視網(wǎng)膜神經(jīng)結(jié)細胞。
25.根據(jù)權(quán)利要求21的應用，其中所述疾病是眼病。
26.根據(jù)權(quán)利要求25的應用，其中眼病是正常眼壓青光眼。
27.根據(jù)權(quán)利要求25的應用，其中眼病是視網(wǎng)膜血管閉塞、糖尿病性視網(wǎng)膜病、缺血性視神經(jīng)病、黃斑變性、色素性視網(wǎng)膜炎或利伯氏病。
28.α1受體阻斷劑在制備用于治療或預防視野紊亂的藥物中的應用，該藥物是基于對視神經(jīng)細胞的保護作用。
29.根據(jù)權(quán)利要求28的應用，其中α1受體阻斷劑是化學結(jié)構(gòu)中具有堿性雜環(huán)的α1受體阻斷劑。
30.根據(jù)權(quán)利要求28的應用，其中α1受體阻斷劑是布那唑嗪、哌唑嗪、特拉唑嗪、萘哌地爾、多沙唑嗪、曲馬唑嗪或達哌唑。
全文摘要
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了α
文檔編號A61K31/551GK1522157SQ0281336
公開日2004年8月18日 申請日期2002年7月1日 優(yōu)先權(quán)日2001年7月2日
發(fā)明者宮肋宣明, 原英彰, 后藤若菜, 菜 申請人:參天制藥株式會社, 衛(wèi)材株式會社