專利名稱：用于治療脂肪肝的被子植物蜂花粉水提取物及其制備方法、用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及從植物，特別是從被子植物蜂花粉中提取有效物質(zhì)的工藝技術領域。
背景技術：
脂肪肝是指由于各種原因引起的肝細胞內(nèi)脂肪堆積過多的病變，脂肪性肝病正嚴 重威脅國人的健康，成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病，已被公認為隱蔽性肝硬化的常 見原因。脂肪肝是一種常見的臨床現(xiàn)象，而非一種獨立的疾病。其臨床表現(xiàn)輕者無癥狀，重 者病情兇猛。一般而言，脂肪肝屬可逆性疾病，早期診斷并及時治療?？苫謴驼！Ｖ靖?的形成，一般是由于肝臟內(nèi)脂肪的分解與合成代謝失去平衡，或運出發(fā)生障礙，脂肪就會在 肝細胞內(nèi)過量積聚，當脂肪含量增加至30%以上，則稱為脂肪肝。脂肪肝按自身體素質(zhì)不 同、飲食習慣不同等導致脂肪肝的發(fā)病原理不同，一般可分為肥胖、過食性脂肪肝，肝炎后 脂肪肝，酒精性脂肪肝，營養(yǎng)缺乏性脂肪肝，藥物性脂肪肝，糖尿病性脂肪肝，妊娠性脂肪肝 和不明原因的隱源性脂肪肝等。脂肪肝按輕重程度不同又分為輕度脂肪肝、中度脂肪肝和 重度脂肪肝。輕度脂肪肝，已成為現(xiàn)代人的普遍問題，輕度脂肪肝是治療脂肪肝的最佳時 期。在某些職業(yè)人群中(白領人士、出租車司機、職業(yè)經(jīng)理人、個體業(yè)主、政府官員、高級知 識分子等)脂肪肝的平均發(fā)病率為25%;肥胖人群與II型糖尿病患者中脂肪肝的發(fā)病率為 50% ;嗜酒和酗酒者脂肪肝的發(fā)病率為58%;在經(jīng)常失眠、疲勞、不思茶飯、胃腸功能失調(diào)的 亞健康人群中脂肪肝的發(fā)病率約為60%。近年來脂肪肝人群的年齡也不斷下降，年齡只有 40歲，30歲左右的病人也越來越多，45歲以下男性脂肪肝明顯多于女性。其中約25%的患 者發(fā)生肝纖維化，1. 5% 8. 0%的患者發(fā)展為肝硬化，經(jīng)濟發(fā)達地區(qū)發(fā)病率較高，并且發(fā)病 有小齡化的趨勢，已成為一個嚴重危害人類健康的常見隱患。因此，防治脂肪肝已引起醫(yī)學 界的高度重視。由于脂肪肝并非為獨立性病種，通過引發(fā)肝功能的損傷，引起血液生化指標 和酶值的變化。在反應肝細胞損傷的檢測項目中，以血清酶值最常見，如谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、 谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、γ —谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、乳酸脫氫酶(LDH)等。當 肝臟發(fā)生脂肪變時，由于肝細胞受到損害，細胞變性、壞死，細胞膜破碎或細胞膜的通透性 增加，肝細胞中所含的ALT和AST就會被釋放到血液中，使血中ALT、AST活性增加。由于 ALT、AST主要存在于肝細胞中，當其明顯升高時常提示有肝損傷。肝臟發(fā)生脂肪變時，常見 ALT、AST升高，但多以ALT升高為主。谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)是診斷肝細胞實質(zhì)損害的主要項 目，其高低往往與病情輕重相平行。Y-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶是酒精性肝損傷的重要指標，而且非 常敏感。當今脂肪肝的治療仍以去除病因，積極治療原發(fā)病和堅持合理飲食制度為主，藥 物僅起輔助治療作用。所以，對該病的研究已成為國內(nèi)外研究的共同熱點和難點。到目前 為止，西藥尚無防治脂肪肝的有效藥物，以中藥長期調(diào)理性為好，其中何首烏和山楂最好， 能降低血脂，防止膽固醇在肝內(nèi)沉積。西藥常選用保護肝細胞、去脂藥物及抗氧化劑等，如 維生素B、C、E、卵磷脂、肌苷、輔酶A、還原型谷胱甘肽、?；撬?、肉毒堿乳清酸鹽、肝泰樂，以及某些降脂藥物(例如肝旨清)等等。上述藥物雖然很多，但大多仍需要進一步驗證其療 效以及安全性，因此，應在醫(yī)生指導下正確選用，切不可濫用。有人把脂肪肝和冠心病比喻成高脂血癥一根繩上的兩個螞蚱，因為肥胖、高脂血 癥、糖尿病和酗酒是脂肪肝的常見病因，而這些因素也同樣與動脈粥樣硬化和冠心病關系 密切。有明顯心肌損傷和血流動力學紊亂，T細胞免疫功能下降，肝活檢研究顯示，這些病例 中91. 4%有肝細胞脂肪變性。一般而言，酒精脂肪肝屬可逆性疾病，早期診斷并及時治療常 可恢復正常。西方發(fā)達國家推測，兒童非酒精性脂肪肝的患病率至少為1%至洲，肥胖兒童 患病率更高，達22. 5%至52. 8%發(fā)病率。肝臟是身體內(nèi)以物質(zhì)代謝功能為主的一個器官， 并在身體里面扮演著解毒、代謝、去氧化，儲存肝糖，分泌性蛋白質(zhì)的合成等等功能。隨著生 活水平提高，許多人每天都攝入大量的酒精和高脂類食物，不知不覺中形成脂肪肝?，F(xiàn)代生 活節(jié)奏快，大家忙于自己的工作，社會普遍認為脂肪肝不是病而忽視治療。然而脂肪肝可以 引發(fā)很多疾病，特別是通過引起多項血液生化指標的改變，影響機體代謝。長期食用高脂食 物或大量飲酒，酒精會直接毒害肝細胞，影響其結構及功能；許多人就是因為飲酒過度才患 上酒精性肝炎、脂肪肝致使肝臟受損。而肝損傷可導致甘油三酯(TG)下降，甘油三酯是長 鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子。是人體內(nèi)含量最多的脂類，大部分組織均可以利用甘油 三酯分解產(chǎn)物供給能量，是體內(nèi)能量的主要來源。脂肪肝會導致食入的大量脂肪吸收減少， 膽汁分泌不足，不能分解吃進去的脂肪，脂肪在肝臟形成脂肪滴從而加重病情。被子植物蜂花粉是植物的雄性生殖細胞，擔負著植物繁衍的重任，包含著孕育新 生命所必需的全部營養(yǎng)物質(zhì)，其營養(yǎng)豐富、均衡、搭配合理，是純天然的營養(yǎng)寶庫。蜂花粉是 中國醫(yī)學寶庫中的藥食兼用花粉品種，作為中國傳統(tǒng)藥材，其藥食兼用的歷史已逾數(shù)千年， 從MOO年前的《神農(nóng)本草經(jīng)》到今天的《中華人民共和國藥典》等歷代醫(yī)藥典籍中都有記 載。蜜蜂采集的蜂花粉具有品質(zhì)純凈、無污染、無異體花粉或有毒花粉摻雜、無動物激素的 特點，是純天然的綠色食品。蜂花粉中含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、不飽和脂肪酸、多糖、維 生素、膳食纖維、酶類、黃酮、核酸、天然激素等多種營養(yǎng)成分和生物活性物質(zhì)，眾多研究表 明其具有調(diào)節(jié)內(nèi)分泌，改善生殖機能、促進新陳代謝，提高機體免疫力等功效，是大自然賜 予人類的天然營養(yǎng)庫。茶花粉是由蜜蜂從茶花植物花蕊中采集的花粉?；煲曰鄱傻姆?花粉團，富含蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪酸、核酸、維生素、活性酶等多種營養(yǎng)物質(zhì)和其它有效活 性成分。茶花粉具有清熱解毒、延緩衰老、調(diào)壓降脂、養(yǎng)顏健胃、淡斑等功效，氨基酸含量為 花粉之首，微量元素錳、鈷、鋅、及煙酸含量均比普通花粉高。目前我國脂肪肝的發(fā)病率很高，隨著現(xiàn)代生活水平提高，人們營養(yǎng)過剩、肥胖、過 量飲酒、高脂飲食、缺少運動，造成脂肪肝。在中國肥胖兒童中，脂肪肝的發(fā)病率高達八成左 右，脂肪肝已經(jīng)成為影響現(xiàn)代人生活質(zhì)量的重要問題。而脂肪肝治療期長，起效緩慢，患者 依從性差，往往治療易被人們忽視。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明第一目的在于發(fā)明一種能高效地從根本上治療脂肪肝的蜂花粉水溶性物 質(zhì)。本發(fā)明所述水溶性物質(zhì)為為從蜂花粉中提取的分子量小于^OOD的水溶性物質(zhì)。本發(fā)明的第二個目的在于發(fā)明上述被子植物蜂花粉水溶性物質(zhì)的制備方法。
包括以下步驟
1)將被子植物蜂花粉經(jīng)氣流粉碎破壁處理ι 2分鐘；
2)以常壓常溫水浸泡10 15分鐘后，再以超聲波處理10 20分鐘；
3)離心法除去固體雜質(zhì)，取上清液；
4)將所述上清液在-5 5°C的環(huán)境溫度下以2800D分子篩超濾分離，取得分子量為 2800D以下的蜂花粉水溶性物質(zhì)。經(jīng)試驗，利用蜂花粉治療脂肪肝效果顯著，且無副作用，而且費用低廉，簡單易行。 蜂花粉是被子植物雄蕊花藥和孢子植物小孢葉上的小孢子囊內(nèi)的小顆粒狀物，是植物的雄 性生殖細胞。蜂花粉內(nèi)含各種豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，具有多種的生物學活性。蜂花粉能夠在激 素的受體水平上發(fā)揮抗雌激素、抗雄激素的藥理作用，但對蜂花粉中是何物質(zhì)起作用目前 研究不多。本發(fā)明就是利用水提的方法從蜂花粉分離出對脂肪肝有治療效果的成份。本發(fā)明所述步驟1)的氣流粉碎破壁是一種低溫破壁工藝，經(jīng)1 2分鐘處理，目 的是破壞蜂花粉的細胞壁，便于蜂花粉中有效成份的提取和保持活性。本發(fā)明步驟2)中先浸泡時間為10 15分鐘，然后超聲波提取10 20分鐘，目 的是便于蜂花粉中有效成份充分溶解、分離。本發(fā)明步驟3)中所述離心法是在轉(zhuǎn)速為8000 10000轉(zhuǎn)的冷凍離心機中離心 8 12分鐘。目的是能有效去處蜂花粉中固體雜質(zhì)，使提取液澄清，透明，使提取液得到進
一步提純。本發(fā)明再一目的在于發(fā)明上述蜂花粉水提物的應用方法。一種應用方法是用于治療脂肪肝的被子植物蜂花粉水提取物用于制備治療脂肪 肝口服制劑。作為口服制劑的優(yōu)點是使用方便、吸收效果好、價格低廉，可作為兒童一般保健使 用，預防脂肪肝的發(fā)生。
第二種應用方法是用于治療脂肪肝的被子植物蜂花粉水提取物用于制備治療脂肪肝 的注射制劑。作為注射制劑的優(yōu)點是吸收迅速、治療針對性強。


圖1為自然健康組肝臟組織切片圖。圖2為灌胃豬油白酒模型對照組肝臟組織切片圖。圖3為注射茶花粉水提液組肝臟組織切片圖。
具體實施例方式一、制備蜂花粉治療脂肪肝水提物 1、在常溫下去除蜂花粉雜質(zhì)。2、將除雜的蜂花粉氣流粉碎破壁處理1 2分鐘。3、以常壓常溫水浸泡的蜂花粉10 15分鐘后，超聲波粉碎10 20分鐘。4、除去固體雜質(zhì)，取水溶液
在轉(zhuǎn)速為8000 10000轉(zhuǎn)的離心機中離心8 12分鐘，取上清。
5、將上清在-5 5°C的環(huán)境溫度下，以2800D分子篩超濾分離出分子量為2800D 以下的蜂花粉水提物，即為用于治療脂肪肝的蜂花粉水提物。二、制備口服制劑和注射制劑
1、制備口服制劑A:
將治療脂肪肝的被子植物蜂花粉水提物與蜂蜜或其他食品添加劑調(diào)勻，經(jīng)超濾和巴氏 消毒滅菌后，灌裝備用。
2、制備注射制劑B:
將治療脂肪肝的被子植物蜂花粉水提物巴氏消毒滅菌后與注射生理鹽水以11 2 的體積比混和，均勻溶解后抽真空密封，待用。三、應用
(一)試驗對象
大鼠(體重200 300克)
(二)使用劑量
1、口服制劑口服4-6毫升/天，連接服用20 30天。2、注射肌肉或腹腔注射2-4毫升/天連續(xù)20 30天
(三)對比結果
試驗組二月齡SD大鼠肝臟組織切片結果比較 1、將自然健康組肝臟組織切片，見圖1。從圖1可見雄性大白鼠肝臟肝細胞結構清晰，肝血竇明顯，肝索排列整齊。2、將灌胃豬油和白酒模型組肝臟組織切片，見圖2。從圖2可見肝細胞邊界不清，變圓內(nèi)有空泡，肝血竇受壓變窄，肝索排列紊亂。3、將注射茶花粉水提液組肝臟組織切片，見圖3。從圖3可見肝臟肝小葉結構清晰，肝血竇分布均勻，肝細胞呈多邊形，排列整齊。 蜂花粉水提液干預后對各試驗組大鼠血液酶值指標比較分析，如下表 蜂花粉水提液干預后對各試驗組大鼠血液酶值指標比較分析表(單位u/l)
權利要求
1.用于治療脂肪肝的蜂花粉水提取物，為從蜂花粉中提取的分子量小于^OOD的水溶 性物質(zhì)。
2.一種如權利要求1所述用于治療脂肪肝的蜂花粉水提取物的制備方法，其特征在于 包括以下步驟1)將被子植物蜂花粉經(jīng)氣流粉碎破壁處理1 2分鐘；2)以常壓常溫水浸泡10 15分鐘后，再以超聲波處理10 20分鐘；3)離心法除去固體雜質(zhì)，取上清液；4)將所述上清液在-5 5°C的環(huán)境溫度下以2800D分子篩超濾分離，取得分子量為 2800D以下的蜂花粉水溶性物質(zhì)。
3.根據(jù)權利要求2所述制備方法，其特征在于步驟3)中所述離心法是在轉(zhuǎn)速為 8000 10000轉(zhuǎn)的冷凍離心機中離心8 12分鐘。
4.如權利要求1所述用于治療脂肪肝的蜂花粉提取物用于制備治療脂肪肝的口服制劑。
5.如權利要求1所述用于治療脂肪肝的蜂花粉提取物用于制備治療脂肪肝的注射制劑。
全文摘要
用于治療脂肪肝的被子植物蜂花粉水提取物及其制備方法、用途，涉及從植物，特別是從蜂花粉中提取有效物質(zhì)的工藝技術領域。先將蜂花粉除雜、破壁，再以常壓常溫水浸泡后的超聲波提取，離心除去固體雜質(zhì)，取水溶液，最后，在-5～5℃的環(huán)境溫度下分離出分子量為2800D以下的被子植物蜂花粉水提取物，即為用于治療脂肪肝的被子植物蜂花粉水提取物。可將蜂花粉水提取物用于制備治療脂肪肝口服制劑，使用方便、吸收效果好、價格低廉，可作為兒童一般保健使用，預防脂肪肝的發(fā)生。還可將蜂花粉水提取物用于制備治療脂肪肝的注射制劑，吸收迅速、治療針對性強。
文檔編號A61K35/64GK102119939SQ201010607398
公開日2011年7月13日 申請日期2010年12月28日 優(yōu)先權日2010年12月28日
發(fā)明者葉滿紅, 周斌 申請人:葉滿紅, 周斌