專利名稱：川芎醇酯類衍生物及其制備方法和含有川芎醇酯類衍生物的藥物組合物與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種衍生物及其制備方法和藥物應(yīng)用，具體涉及川芎醇酯類衍生物及其制備方法，并將該衍生物與輔劑組成藥物組合物，屬于衍生物類藥物技術(shù)領(lǐng)域。
川芎(Ligusticum Wallichii Franch)為傘形科植物川芎的干燥根莖，是祖國醫(yī)學(xué)實(shí)踐證明療效顯著的首位活血化淤傳統(tǒng)植物藥物，具有活血化淤、行氣定痛之功效，廣泛用于急慢性缺血性心、腦血管疾病的治療，其主要活性成分是川芎嗪等川芎生物堿。
川芎嗪(Ligustrazine)，異名川芎嗪I號堿，化學(xué)名2，3，5，6-四甲基吡嗪，簡稱四甲吡嗪(Tetramethylyrazine，TMP)，結(jié)構(gòu)見下圖。 藥理研究證明TMP有擴(kuò)張血管、抑制血管平滑肌收縮、增加冠脈血流及改善微循環(huán)作用；可降低血小板表面活性，降低血液粘度，對血小板聚集有抑制作用，并對已經(jīng)聚集的血小板有解聚作用，參見常立功，岳屹立等.中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，1992，9196；吳國新，呈錦昌等，中國藥理學(xué)報，1992，13330；此外，對缺血缺氧心肌其有保護(hù)作用，被認(rèn)為是一個新型“鈣離子拮抗劑”，參見徐汝明譯，國外醫(yī)學(xué)-植物藥分冊1997，12881。
川芎嗪在人體內(nèi)的藥代動力學(xué)參數(shù)表明，口服磷酸川芎嗪30分鐘左右達(dá)到最高血藥濃度3.114±0.902μg/ml，說明藥物在體內(nèi)吸收速度比較快；半衰期為0.486±0.188h，總表觀分布容積為66.77L，說明TMP在體內(nèi)分布較廣，同時藥物迅速代謝消除，消除半衰期為2.894±0.558h，給藥后3h，TMP血藥濃度降至0.5μg/ml，參見蔡偉，董善年等，藥學(xué)學(xué)報，1993，1579。由于TMP在體內(nèi)半衰期短、生物利用度較低，為保證療效需頻繁給藥，易產(chǎn)生毒性，結(jié)果尚不能令人滿意。因此，以川芎嗪為先導(dǎo)化合物，進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造和優(yōu)化，改善其藥代動力學(xué)參數(shù)，對研制和開發(fā)新型高效、低毒的川芎嗪類心腦血管疾病治療藥物具有重要的意義。
川芎嗪在體內(nèi)消除快、半衰期短的根本原因在于四甲基吡嗪分子中的甲基很容易被氧化，生成極性和水溶性較大的代謝產(chǎn)物2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(川芎醇)而迅速排出體外，參見陳欣，董善年.藥學(xué)學(xué)報，1996，31617；和江驥，姜國輝等，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報，1996，18228。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下1.川芎醇酯類衍生物根據(jù)生物活性協(xié)同原則，引入有效藥物基團(tuán)。即在川芎嗪代謝產(chǎn)物川芎醇-2位羥甲基上引入乙酰水楊酰基、煙?；?、對氯苯氧異丁?；?、阿魏酰基基團(tuán)。
引入芳香基團(tuán)可以增加藥物分子的脂溶性，使藥物易于透過細(xì)胞膜。即對芳香環(huán)進(jìn)行不同的取代如引入鹵原子、甲氧基以及在苯環(huán)和羰基之間插入飽和、不飽和碳鏈，取代基位置和數(shù)目對藥物活性會有一定的影響。
本發(fā)明的川芎醇酯類衍生物具有如下結(jié)構(gòu)通式 其中R為苯基、單取代苯基或多取代苯基；芐基、單取代或多取代芐基；苯乙基、單取代或多取代苯乙基；苯乙烯基、單取代或多取代苯乙烯基；取代苯氧乙基；五元雜環(huán)或取代五元雜環(huán)，六元雜環(huán)或取代六元雜環(huán)；氨基酸基。
上述的雜環(huán)是指脂肪或芳香雜環(huán)。2.川芎醇酯類衍生物的合成路線如下 3.川芎醇酯類衍生物的2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(IV)中間體及制備川芎醇酯類衍生物的中間體是具有上述IV結(jié)構(gòu)的2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪。制備方法如下(1)將川芎嗪三水合物、冰醋酸和30％過氧化氫按重量比3∶4∶1.5混合，于70～80℃加熱反應(yīng)4～5小時，加入等量的30％過氧化氫，繼續(xù)反應(yīng)4～5小時，薄層層析(TLC)監(jiān)測至反應(yīng)完全，冷卻至室溫；(2)以45％～60％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH＝10，三氯甲烷提取，無水Na2SO4干燥，過濾，蒸去三氯甲烷，得到川芎嗪單氮氧化合物粗品；(3)然后加入醋酐，加熱回流2～3小時，TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全后，減壓蒸除過量的醋酐，得到黑色漿狀川芎嗪乙?；?；(4)冷卻后加入20％～30％氫氧化鈉溶液，放置10～20小時，乙酸乙酯提取，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓蒸除溶劑，得到2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(IV)中間體。
(5)以石油醚(30-60℃)重結(jié)晶，得黃色針狀結(jié)晶。4.川芎醇酯類衍生物的制備方法川芎醇酯類衍生物的制備方法，包括用上述的中間體2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(IV)與有機(jī)羧酸在N，N-二甲胺基吡啶(DMAP)催化下的二環(huán)己基亞酰脲(DCC)脫水合成法或通過將有機(jī)羧酸與氯化亞砜制成酰氯后在吡啶堿性下的?；铣煞ǎ缓蠼?jīng)分離、純化獲得。(1)合成，按下列方法之一①二環(huán)己基亞酰脲(DCC)脫水法合成將上述2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪中間體、有機(jī)羧酸和N，N-二甲胺基吡啶(DMAP)按毫摩爾(mmol)比1～2∶2～4∶0.1～0.2混合，加入10～15ml吡啶，溶解，加入二環(huán)己基亞酰脲(DCC)與有機(jī)羧酸相等毫摩爾量(mmol)，出現(xiàn)白色沉淀二環(huán)己基脲(DCU)，室溫攪拌20～30小時。TLC監(jiān)測反應(yīng)達(dá)平衡后，停止反應(yīng)，過濾去除白色DCU沉淀，濾液加入2～3g硅膠減壓蒸干?；旌衔锎蛛x純化。②酰氯法合成有機(jī)羧酸8～9mmol冰浴條件下滴加氯化亞砜0.8～0.9ml和吡啶0.25ml，撤去冰浴，緩慢升溫至沸，回流反應(yīng)2～3小時。TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全后，冷卻，減壓蒸除過量的氯化亞砜，殘渣加入12～16ml四氫呋喃充分?jǐn)嚢?，得到有機(jī)羧酸酰氯的四氫呋喃溶液。在冰浴條件下，將上述有機(jī)羧酸酰氯溶液加入到含有2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪和吡啶的四氫呋喃溶液中，撤去冰浴，加熱回流反應(yīng)3～4小時。TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全后，冷卻，過濾除去吡啶鹽，濾液減壓蒸除四氫呋喃?；旌衔锎蛛x純化。(2)分離純化①快速柱層析分離，洗脫溶劑系統(tǒng)為環(huán)己烷/乙酸乙酯。得川芎醇酯類衍生物。②也可直接用有機(jī)溶劑重結(jié)晶法得川芎醇酯類衍生物2-取代酰氧甲基-3，5，6-三甲基吡嗪結(jié)晶。
上述的有機(jī)羧酸是苯甲酸，單取代或多取代苯甲酸；苯乙酸、單取代或多取代苯乙酸；苯丙酸、單取代或多取代苯并酸；肉桂酸或各種取代肉桂酸；苯氧異丁酸或各種取代苯氧異丁酸；各種氨基酸；各種脂雜環(huán)或芳雜環(huán)羧酸以及各種取代脂雜環(huán)或芳雜環(huán)羧酸。
上述的有機(jī)溶劑是四氯化碳、正己烷、乙酸己酯、環(huán)己烷/乙酸己酯任意比例的混合溶劑。表1部分合成化合物的結(jié)構(gòu) No.RNo.R 5.川芎醇酯類衍生物藥物組合物本發(fā)明的川芎醇酯類衍生物藥物組合物，含有上述的川芎醇酯類衍生物，川芎醇酯類衍生物與輔料按常規(guī)比例混合，按常規(guī)方法制成不同劑型的藥物。6.芎醇酯類衍生物藥物組合物的應(yīng)用川芎醇酯類衍生物藥物組合物用于血管內(nèi)皮細(xì)胞(VECs)的修復(fù)與保護(hù)藥物，以及內(nèi)皮素受體拮抗劑。(1)川芎醇酯類衍生物對正常人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)增殖的影響。
血管內(nèi)皮細(xì)胞(VECs)損傷不僅是動脈粥樣硬化的始動因素，而且對冠心病、高血壓等疾病的發(fā)展起著重要的作用。因此，研究川芎醇酯類衍生物對VECs的增殖，即修復(fù)與保護(hù)，是防治這類疾病的新途徑。
方法通過噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測細(xì)胞活性，觀察川芎嗪及其醇酯類衍生物對實(shí)驗(yàn)所用人胎兒臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)的作用。在含5％小牛血清的DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)24h后，加入不同濃度藥物溶液，繼續(xù)培養(yǎng)24h，然后每孔加入20μl MTT溶液(5mg/ml)，37℃培養(yǎng)4h，傾去上清夜，每孔加入二甲基亞砜100μl，振蕩數(shù)分鐘，30min內(nèi)在全自動酶標(biāo)儀上于570nm處測定吸光度值(A570nm)，按下式計算細(xì)胞增殖率P(％)。
P(％)＝A-A0/A0×100(A—實(shí)驗(yàn)組吸光度，A0—對照組吸光度)化合物的最大增殖率及作用濃度見表2。 表2川芎嗪及其醇酯類衍生物的最大增殖率Pmax(％)及作用濃度C(mmol.L-1)No.Pmax(％) C(mmol.L-1) No.Pmax(％) C(mmol.L-1)Va 88.57 0.1Vk 71.95 0.1Vb 70.88 0.1Vl 66.04 0.1Vc 83.87 0.1Vm 52.95 0.1Vd 87.85 0.1Vn 45.80 0.1Ve 37.00 0.6Vo 32.10 0.6Vf 76.11 0.1Vp 59.33 0.1Vg 80.54 0.1Vq 82.55 0.1Vh 77.32 0.6Vu 69.39 0.6Vi 75.40 0.1TMP20.66 0.6Vj 70.16 0.1HOTP 28.03 0.6TMP-川芎嗪；HOTP-2-羥基川芎嗪由表2可以看出，陽性對照藥物川芎嗪在0.6mmol.L-1時作用最強(qiáng)，增殖率為20.66％。2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪在0.6mmol.L-1時作用最強(qiáng)，增殖率為28.03％。大多數(shù)目標(biāo)化合物能促進(jìn)正常HUVECs的增殖。
引入有效藥物基團(tuán)的四個化合物Va～Vd的最大增殖率分別為88.57％、70.88％、83.87％、87.85％均大于川芎嗪和2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪，且達(dá)到最佳作用所需濃度為0.1mmol.L-1，說明這四個化合物的活性大于川芎嗪和2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪。
其中，Va、Vc在0.1～1.5mmol.L-1范圍內(nèi)均能增加正常HUVECs的A570nm值，增殖率呈濃度依賴性遞減。Vb在0.l～0.6mmol.L-1能顯著增加HUVECs的A570nm值。(2)川芎醇酯類衍生物對損傷的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用。
資料表明，動脈粥樣硬化患者存在血管內(nèi)皮細(xì)胞(VECs)的損傷，突出表現(xiàn)為循環(huán)血液中脫落的內(nèi)皮細(xì)胞的增加，參見林蓉，劉君田等，中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2000，14425。川芎醇酯類衍生物對H2O2損傷的HUVECs的保護(hù)作用，對VECs的損傷時的修復(fù)，保持血管壁的平滑、完整、預(yù)防血栓的形成具有重要的意義。
在加入不同濃度藥物培養(yǎng)24h后，加入終濃度為75μmol.L-1H2O2溶液損傷細(xì)胞。試驗(yàn)方法同上。川芎嗪及其醇酯類衍生物對損傷HUVECs保護(hù)作用(增殖率)見表3。表3 川芎嗪及其醇酯類衍生物對損傷的HUVECs保護(hù)作用No. 化合物的濃度(mmol.L-1)0 0.10.30.61.21.5Va-49.8 -46.7 -36.4 -13.9 -12.0 3.79Vb-45.0 -34.2 -46.4 -53.8 -63.4 -Vc-49.8 -43.2 -76.7 -79.7 -60.6 -15.6Vd-49.8 -51.2 -40.4 -72.3 -83.4 -69.0Vf-45.0 -29.1 -24.4 -12.2 6.01 4.43Vg-45.0 -29.7 -23.5 -11.5 5.62 5.70Vi-45.0 -37.6 -33.3 -21.2 -25.1 -28.5Vq-45.0 -40.5 -28.6 -28.3 -2.46 -1.20TMP -49.8 -48.7 -47.5 -41.0 -44.2 -HOTP -49.8 -43.6 -40.5 -38.2 -36.4 -35.8TMP-川芎嗪；HOTP-2-羥基川芎嗪由表3結(jié)果可以看出，75μmol.L-1H2O2明顯抑制HUVECs增殖，而川芎嗪及其衍生物(Va、Vb、Vc、Vd、Vf、Vg、Vi、Vq)可以減輕引起的增殖抑制，細(xì)胞量多于只加H2O2的對照組，說明它們對損傷的HUVECs具有保護(hù)作用。其中Va、Vf、Vg、Vi、Vq隨濃度的增加對損傷細(xì)胞的保護(hù)作用增強(qiáng)有濃度依賴性，Va、Vf、Vg在濃度達(dá)到1.2mmol.L-1時增殖率接近正常對照組。(3)內(nèi)皮素受體競爭結(jié)合實(shí)驗(yàn)內(nèi)皮素在體外對各種離體血管具有強(qiáng)而持久的血管收縮作用。受體拮抗劑在臨床上對心腦血管疾病具有積極的治療作用。
實(shí)驗(yàn)方法以內(nèi)皮素受體拮抗劑Bosentan為陽性對照，125I內(nèi)皮素-1為受體競爭結(jié)合劑，用大鼠心室肌細(xì)胞膜細(xì)胞培養(yǎng)，測定川芎醇酯類衍生物競爭結(jié)合抑制率。
結(jié)果川芎醇酯類衍生物Vb、Vg、Vk呈現(xiàn)一定程度的內(nèi)皮素受體拮抗劑的作用，結(jié)合抑制率分別為38.35％，34.64％和16.9％。
活性研究表明，川芎醇具有川芎嗪相似的活性，因此根據(jù)前藥原理，以川芎嗪代謝產(chǎn)物2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪為先導(dǎo)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾與改造，是新藥發(fā)現(xiàn)的一種有效途徑。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1. 2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪中間體的制備將川芎嗪三水合物(30.4g，160mmol)、冰醋酸(40ml)和30％過氧化氫(18ml，220mmol)的混合物，于70～80℃加熱反應(yīng)4小時，補(bǔ)充加入30％過氧化氫40ml，繼續(xù)反應(yīng)4小時，至反應(yīng)完全；冷至室溫后，以50％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH＝10，氯仿提取，無水Na2SO4干燥，過濾，蒸去溶劑，得到川芎嗪單氮氧化合物粗品；然后加入醋酐54ml，加熱回流2.5小時，TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全后，減壓蒸除過量的醋酐，得到黑色漿狀川芎嗪乙?；铮焕鋮s后，加入100ml，20％氫氧化鈉溶液，放置過夜，乙酸乙酯提取(30ml×5)，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓蒸除溶劑，以石油醚(30-60℃)重結(jié)晶，得到2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪中間體的黃色針狀結(jié)晶，15.5g，產(chǎn)率為64％，mp88～89℃。實(shí)施例2. 2-煙酰氧甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(Va)的制備將實(shí)施例1制備的2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪中間體3mmol、煙酸6mmol和N，N-二甲胺基吡啶(DMAP)0.6mmol混合，置于50ml圓底燒瓶中，加入10ml吡啶，待混合物溶解后，加入DCC6mmol，出現(xiàn)白色沉淀DCU，室溫攪拌24小時。TLC監(jiān)測反應(yīng)達(dá)平衡后，停止反應(yīng)，過濾去除白色DCU沉淀，濾液加入2.5g硅膠減壓蒸干，快速柱層析分離，洗脫劑為環(huán)己烷∶乙酸乙酯＝1∶5重量比，正己烷重晶體得2-煙酰氧甲基-3，5，6-三甲基吡嗪結(jié)晶0.51g。產(chǎn)率67.0％。mp68～70℃。
光譜分析數(shù)據(jù)1HNMR(CDCl3)δ(ppm)9.223～7.359(m，4H，Ar-H)，5.451(s，2H，CH2)，2.583(s，3H，6-CH3)，2.525(s，3H，5-CH3)，2.471(s，3H，3-CH3).IR(cm-1，KBr壓片)3085，3068，3044(vCH，吡啶環(huán))，2983，2949，2854(vCH)，1706(vC＝O)，1587，1416(vC＝C，芳環(huán)骨架振動)，1276，1144(vC-O-C)，745(γAr-H)；MS(m/z)M+1258。實(shí)施例3. 2-乙酰阿魏酰氧甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(Vc)的制備如實(shí)施例2所述的方法，所不同的是2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪中間體4mmol、乙酰阿魏酸7mmol和N，N-二甲胺基吡啶(DMAP)0.8mmol混合，洗脫劑為環(huán)己烷∶乙酸乙酯＝1∶2重量比，四氯化碳重結(jié)晶，得到淡黃色固體0.48g，產(chǎn)率43.6％，mp82～85℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(cm-1，KBr壓片)3326(vNH)，2923，2850(vCH)，1762，1700(vC＝O)，1629，1509，1423(vC＝C)，1274，1218(vC-O-C，CH2OCO)，1235，1155(vC-O-C，Ar-O-CH3)，978(γ＝CH)，854，838(γΦH)；MS(m/z)M+1371實(shí)施例4. 2-乙酰水楊酰氧甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(Vb)的制備實(shí)施例1制備的中間體，按方法②酰氯法合成酯乙酰水楊酸8mmol于100ml三頸燒瓶中，冰浴條件下滴加氯化亞砜0.8ml和吡啶1滴，加畢，撤去冰浴，緩慢升溫，回流反應(yīng)2.5小時。TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全后，冷卻，減壓蒸除過量的氯化亞砜，殘渣加入15ml四氫呋喃充分?jǐn)嚢瑁玫揭阴Ｋ畻钏狨Ｂ鹊乃臍溥秽芤?。在冰浴條件下，將上述有機(jī)羧酸酰氯溶液逐滴加入到含有2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪和吡啶的四氫呋喃溶液中，撤去冰浴，加熱回流反應(yīng)3h。TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全后，冷卻，過濾除去吡啶鹽，濾液減壓蒸除四氫呋喃，得深棕色油狀物，快速柱層析分離，洗脫劑為環(huán)己烷∶乙酸乙酯＝1∶1，得油狀產(chǎn)物0.6g。環(huán)己烷/乙酸乙酯(3∶1)重結(jié)晶，得白色固體2-乙酰水楊酰氧甲基-3，5，6-三甲基吡嗪，產(chǎn)率45.7％。
光譜分析數(shù)據(jù)1HNMR(CDCl3)δ(ppm)7.583～6.939(m，4H，Ar-H)，5.379(s，2H，CH2)，2.561(s，3H，6-CH3)，2.524(s，3H，5-CH3)，2.507(s，3H，CH3COO-Ar)，2.309(s，3H，3-CH3).IR(cm-1，涂層法)2991，2952，2923(vCH)，1753(vC＝O)，1615，1469(vC＝C，ΦH)，1308，1253(vC-O-C)，762(γΦH).實(shí)施例5.2-肉桂酰氧甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(Vh)的制備如實(shí)施例4所述的制備方法，肉桂酸8mmol，得到淡黃色油狀產(chǎn)物1.07g，產(chǎn)率63％。
光譜分析數(shù)據(jù)1HNMR(CDCl3)δ(ppm)7.62(d，1H，J＝40Hz，Ar-CH＝)，7.44～7.20(m，5H，Ar-H)，6.38(d，1H，J＝40Hz，＝CH-CO)，5.22(s，2H，CH2)，2.48(s，3H，6-CH3)，2.40(s，6H，5，6-CH3).IR(KBr壓片，cm-1)3028，2990，2953，2923(vCH)，1713(vC＝O)，1637(vC＝C)，1497，1416(vC＝C，ΦH)，1163(vC-O-C)，987(γ＝CH)，768(γΦH).實(shí)施例6. 2-對氯苯氧異丁酰氧甲基-3，5，6，-三甲基吡嗪(Vd)如實(shí)施例4所述的制備方法，氯貝酸8mmol，洗脫劑環(huán)己烷∶乙酸乙酯＝4∶1，得到油狀產(chǎn)物0.67g，產(chǎn)率64.9％。
光譜分析數(shù)據(jù)1HNMR(CDCl3)δ(ppm)7.111(d，2H，J＝8.7Hz C2’-H，C6’-H，)，6.759(d，2H，J＝9.0Hz C3’-H，C5’-H)，5.257(s，2H，CH2)，2.491(s，3H，6-CH3)，2.452(s，3H，5-CH3)，2.408(s，3H，3-CH3)，1.603(s，6H，CH3-C-CH3)。IR(cm-1涂層法)2992，2939，2924，2857(vCH)，1739(vC＝O)，1594，1489(vC＝C，芳環(huán)骨架振動)，1282，1093(vC-O-C，CH2OCO)，1238，1139(vC-O-C，CO-Ar)，788(vC-Cl)實(shí)施例7. 2-(2，4-二甲氧基肉桂酰氧甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(Vj)如實(shí)施例4所述的制備方法，2，4-二甲氧基肉桂酸8mmol，洗脫劑環(huán)己烷∶乙酸乙酯＝1∶3，重結(jié)晶后得淡黃色固體0.59g，產(chǎn)率58.3％，mp83～85℃。
光譜分析數(shù)據(jù)1HNMR(CDCl3)δ(ppm)7.933(d，1H，Ar-CH＝，J＝15.9Hz)，7.427～6.427(m，3H，Ar-H)，6.488(d，1H，＝CH-CO，J＝13.2Hz)，5.305(s，2H，CH2)，3.835(s，6H，-OCH3)，2.574(s，3H，6-CH3)，2.515(s，6H，5，6-CH3)；IR(KBr，壓片cm-1)2989，2972，2942，2839(vCH)，1705(vC＝O)，1614(vC＝C)，1505，1411(vC＝C，ΦH)，1264，1180(vC-O-C，CH2OCO)，1248，1217，1161，1122，(vC-O-C，Ar-O-CH3)，1035(γ＝CH)，820(γΦH)；MS(m/z)M+1343。
權(quán)利要求
1.川芎醇酯類衍生物，其特征在于，具有如下結(jié)構(gòu)通式 其中R為苯基、單取代苯基或多取代苯基；芐基、單取代或多取代芐基；苯乙基、單取代或多取代苯乙基；苯乙烯基、單取代或多取代苯乙烯基；取代苯氧乙基；五元雜環(huán)或取代五元雜環(huán)，六元雜環(huán)或取代六元雜環(huán)；氨基酸基。
2.如權(quán)利要求1所述的上述的川芎醇酯類衍生物，其特征在于，所述的雜環(huán)是指脂肪或芳香雜環(huán)。
3.一種權(quán)利要求1所述的川芎醇酯類衍生物的制備方法，包括用中間體2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪與有機(jī)羧酸在N，N-二甲胺基吡啶催化下的二環(huán)己基亞酰脲脫水合成法或通過將有機(jī)羧酸與氯化亞砜制成酰氯后在吡啶堿性下的?；铣煞?，然后分離和/或重結(jié)晶純化獲得。
4.如權(quán)利要求3所述川芎醇酯類衍生物的制備方法，其特征在于，中間體2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪的制備包括如下步驟(1)將川芎嗪三水合物、冰醋酸和30％過氧化氫按重量比3∶4∶1.5混合，于70～80℃加熱反應(yīng)4～5小時，加入等量的30％過氧化氫，繼續(xù)反應(yīng)4～5小時，薄層層析監(jiān)測至反應(yīng)完全，冷卻至室溫；(2)以45％～60％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH＝10，三氯甲烷提取，無水Na2SO4干燥，過濾，蒸去三氯甲烷，得到川芎嗪單氮氧化合物粗品；(3)然后加入醋酐，加熱回流2～3小時，TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全后，減壓蒸除過量的醋酐，得到黑色漿狀川芎嗪乙?；?；(4)冷卻后加入20％～30％氫氧化鈉溶液，放置10～20小時，乙酸乙酯提取，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓蒸除溶劑，得到2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(IV)中間體；(5)以石油醚30-60℃重結(jié)晶，得黃色針狀結(jié)晶。
5.如權(quán)利要求3所述的川芎醇酯類衍生物的制備方法，其特征在于，用二環(huán)己基亞酰脲脫水法進(jìn)行合成將上述2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪中間體、有機(jī)羧酸和N，N-二甲胺基吡啶按毫摩爾比1～2∶2～4∶0.1～0.2混合，加入10～15ml吡啶，溶解，加入二環(huán)己基亞酰脲與有機(jī)羧酸相等毫摩爾量，出現(xiàn)白色沉淀二環(huán)己基脲，室溫攪拌20～30小時，反應(yīng)達(dá)平衡后，停止反應(yīng)，過濾去除白色沉淀，濾液加入2～3g硅膠減壓蒸干。
6.如權(quán)利要求3所述的川芎醇酯類衍生物的制備方法，其特征在于，用酰氯法合成有機(jī)羧酸8～9mmol冰浴條件下滴加氯化亞砜0.8～0.9m1和吡啶0.25ml，撤去冰浴，升溫至沸，回流反應(yīng)2～3小時，反應(yīng)完全后，冷卻，減壓蒸除過量的氯化亞砜，殘渣加入12～16ml四氫呋喃充分?jǐn)嚢?，得到有機(jī)羧酸酰氯的四氫呋喃溶液，在冰浴條件下，將上述有機(jī)羧酸酰氯溶液加入到含有2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪和吡啶的四氫呋喃溶液中，撤去冰浴，加熱回流反應(yīng)3～4小時，反應(yīng)完全后，冷卻，過濾除去吡啶鹽，濾液減壓蒸除四氫呋喃。
7.如權(quán)利要求3所述的川芎醇酯類衍生物的制備方法，其特征在于，所述的有機(jī)羧酸是苯甲酸，單取代或多取代苯甲酸；苯乙酸、單取代或多取代苯乙酸；苯丙酸、單取代或多取代苯并酸；肉桂酸或各種取代肉桂酸；苯氧異丁酸或各種取代苯氧異丁酸；各種氨基酸；各種脂雜環(huán)或芳雜環(huán)羧酸以及各種取代脂雜環(huán)或芳雜環(huán)羧酸。
8.如權(quán)利要求3所述的川芎醇酯類衍生物的制備方法，其特征在于，所述的分離是快速柱層析分離，洗脫溶劑是環(huán)己烷/乙酸乙酯。
9.一種藥物組合物，含有權(quán)利要求1的川芎醇酯類衍生物，川芎醇酯類衍生物與輔料按常規(guī)比例混合，按常規(guī)方法制成不同劑型的藥物。
10.權(quán)利要求9所述芎醇酯類衍生物藥物組合物的應(yīng)用，用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的修復(fù)與保護(hù)藥物，或內(nèi)皮素受體拮抗劑。
全文摘要
川芎醇酯類衍生物及其制備方法和含有川芎醇酯類衍生物的藥物組合物與應(yīng)用，屬于衍生物類藥物技術(shù)領(lǐng)域。川芎醇酯類衍生物具有如下結(jié)構(gòu)通式該衍生物的制備方法，包括用中間體2－羥甲基－3，5，6－三甲基吡嗪與有機(jī)羧酸在N，N－二甲胺基吡啶催化下的二環(huán)己基亞酰脲脫水合成法或通過將有機(jī)羧酸與氯化亞砜制成酰氯后在吡啶堿性下的?；铣煞ǎ缓蠓蛛x純化獲得。其藥物組合物，用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的修復(fù)與保護(hù)藥物或內(nèi)皮素受體拮抗劑。
文檔編號A61P9/00GK1424313SQ02135989
公開日2003年6月18日 申請日期2002年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月20日
發(fā)明者劉新泳, 徐文方, 張蕊, 李朝武 申請人:山東大學(xué)