專(zhuān)利名稱(chēng)：雷公藤甲素的抗骨質(zhì)疏松新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗骨質(zhì)疏松相關(guān)的藥物領(lǐng)域，尤其涉及雷公藤甲素用于防治骨質(zhì)疏松的新用途。
背景技術(shù)：
骨質(zhì)疏松是一種全身性的、代謝性的骨疾病，其特征是骨量減少、骨組織細(xì)微結(jié)構(gòu)破壞，從而導(dǎo)致骨脆性和骨折危險(xiǎn)性增加。隨著人口的老齡化，骨質(zhì)疏松的發(fā)病率也迅速增力口，已經(jīng)成為危害人類(lèi)健康的重要疾病，給全球帶來(lái)了巨大的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。盡管?chē)?guó)內(nèi)外相關(guān)專(zhuān)家學(xué)者對(duì)此病的防治十分重視，但該病尚缺乏有效的治療藥物。根據(jù)作用機(jī)制可將骨質(zhì)疏松癥治療藥物主要分為抑制骨吸收藥物和促進(jìn)骨形成藥物。前者包括雙膦酸鹽類(lèi)，選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑，激素替代藥物，降鈣素，維生素D 等；后者包括甲狀旁腺素，人重組甲狀旁腺激素(特立帕肽)，他汀類(lèi)藥物等。雙磷酸鹽類(lèi)藥物雖然效果不錯(cuò)，但可導(dǎo)致頜骨壞死、嚴(yán)重肌肉骨骼痛、食管癌和腎功能衰竭等嚴(yán)重不良反應(yīng)；激素替代療法雖然是防治絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的首選療法，但長(zhǎng)期使用有導(dǎo)致乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌的潛在危險(xiǎn)；使用選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑可以使血栓性事件明顯增加。其他藥物如降鈣素等，或價(jià)格昂貴，或遠(yuǎn)期療效不確切，均不夠理想。由于骨質(zhì)疏松是一種慢性病，需要長(zhǎng)期服藥，因此價(jià)格合理，毒副作用小的中草藥用來(lái)治療骨質(zhì)疏松已成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)之一。雷公藤甲素是一個(gè)具有多種生物活性的二萜內(nèi)酯，來(lái)源于中藥雷公藤的根。現(xiàn)代研究表明它具有抗炎、免疫抑制、抗腫瘤等多種藥理作用，并未發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素有抗骨質(zhì)疏松用途。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種價(jià)格合理，毒副作用小的中草藥-雷公藤甲素的抗骨質(zhì)疏松新用途。本發(fā)明通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素在制備抗骨質(zhì)疏松藥物中的應(yīng)用。進(jìn)一步，所述的骨質(zhì)疏松是由于雌激素缺乏導(dǎo)致。本發(fā)明通過(guò)體內(nèi)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素有顯著的預(yù)防骨質(zhì)疏松的作用。其骨藥理學(xué)機(jī)制是抑制骨轉(zhuǎn)化率，減少骨量丟失，增加骨密度，升高血清鈣和磷的濃度，有利于骨的沉積，并且無(wú)雌激素樣副作用，是一種具有預(yù)防絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松作用的理想藥物。
具體實(shí)施例方式 I材料與方法
1.1動(dòng)物及模型
十周齡健康SD雌鼠(24只，江蘇省動(dòng)物中心)隨機(jī)分成4組，每組6只假手術(shù)組(Sham)、去卵巢模型組(0VX)、雷公藤甲素低劑量組(0VX+13. 40ug/kg/d)、雷公藤甲素高劑量組(0VX+17.86ug/kg/d)。飼養(yǎng)條件溫度為(23 ±2) °C，光照黑暗為12 12，任意進(jìn)食大鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料和去離子水。讓各組大鼠適應(yīng)環(huán)境2周后開(kāi)始骨質(zhì)疏松造模手術(shù)各組大鼠均經(jīng)腹腔注射20%烏拉坦麻醉^ml/ kg體重)，無(wú)菌條件下操作，Sham組開(kāi)腹后關(guān)腹，其余各組行雙側(cè)卵巢切除術(shù)。給藥處理
術(shù)后第4周起,Sham組和OVX組每天給大鼠按照5ml/kg去離子水灌胃,低劑量組和高劑量組分別用13. 40ug/kg和17. 86ug/kg雷公藤甲素灌胃給藥,每天I次,連續(xù)給藥3個(gè)月，每周稱(chēng)一次體重。取材
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用乙醚和烏拉坦麻醉，摘取眼球采血，2000r/min離心，吸取上清(即血清)。摘除大鼠子宮，迅速稱(chēng)重。取出大鼠雙側(cè)股骨和雙側(cè)脛骨，剔除軟組織。骨組織和血清學(xué)指標(biāo)的測(cè)定
I.左股骨用骨密度儀(江蘇省人民醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科提供)測(cè)量骨密度。2.血清生化指標(biāo)測(cè)定取血清O. 5 ml，用全自動(dòng)生化分析儀(南京軍區(qū)南京總醫(yī)院普外科提供)檢測(cè)血清堿性磷酸酶、鈣和磷。3.將去除軟組織的雙側(cè)脛骨置于經(jīng)800°C高溫爐(由南京大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院提供)中灰化8h,冷卻后稱(chēng)灰重。用研缽碾碎成灰狀,取O. Ig骨灰溶于I ml, 6 mol/1鹽酸中,測(cè)骨鈣和骨磷時(shí)取O. 2 ml用超純水稀釋至1ml，用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)骨鈣和骨磷含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用x±S表示。結(jié)果
1)雷公藤甲素對(duì)雙側(cè)卵巢切除大鼠體重及子宮系數(shù)的的影響
實(shí)驗(yàn)組別I體重(g)
345. 7±54. 4
假手術(shù)組(Sham)
模型組(OVX)345·0±41·9
雷公藤甲素(0VX+13. 40ug/kg/d) ~322. 9±34· 5 雷公藤甲素(0VX+17. 86ug/kg/d)丨303· 5±46· 7
IWi且別I子宮系數(shù)Qn^TiT
I.894±0. 095
假手術(shù)組(Sham)
模型組(OVX)O. 141 ±0. 059
雷公藤甲素(0VX+13. 40ug/kg/d) ~0. 157±0· 028 雷公藤甲素(0VX+17. 86ug/kg/d)|θ. 206±0. 065
結(jié)果顯示各組大鼠體重?zé)o明顯差別，與假手術(shù)組相比，去卵巢模型組大鼠的子宮明顯
萎縮，給予雷公藤甲素3個(gè)月后，并未引起子宮重量的明顯增加，說(shuō)明雷公藤甲素對(duì)子宮生
長(zhǎng)無(wú)刺激作用。
2)雷公藤甲素對(duì)雙側(cè)卵巢切除大鼠血清學(xué)的影響
實(shí)驗(yàn)組別I血清堿性磷酸酶(U/L)
假手術(shù)組(Sham)_29. 00±8· 49_
雇型組(OVX)丨221· 00±19· 80
權(quán)利要求
1.雷公藤甲素在制備抗骨質(zhì)疏松藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的應(yīng)用，其特征在于所述的骨質(zhì)疏松是由于雌激素缺乏導(dǎo)致。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了雷公藤甲素用于防治骨質(zhì)疏松的新用途。隨著人口的老齡化，骨質(zhì)疏松的發(fā)病率也迅速增加，已經(jīng)成為危害人類(lèi)健康的重要疾病，給全球帶來(lái)了巨大的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。盡管?chē)?guó)內(nèi)外相關(guān)專(zhuān)家學(xué)者對(duì)此病的防治十分重視，但該病尚缺乏有效的治療藥物。本發(fā)明通過(guò)體內(nèi)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素有顯著的預(yù)防骨質(zhì)疏松的作用。其骨藥理學(xué)機(jī)制是抑制骨轉(zhuǎn)化率，減少骨量丟失，增加骨密度，是一種具有預(yù)防骨質(zhì)疏松的作用的理想藥物。
文檔編號(hào)A61K31/585GK102772421SQ20111029220
公開(kāi)日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2011年10月2日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月2日
發(fā)明者丁希偉, 吳俊華, 宗峰陽(yáng), 王婷, 王玉蓉, 祝根飛, 鄭陽(yáng) 申請(qǐng)人:南京大學(xué)