專利名稱：一種預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，具體地說是淫羊藿和續(xù)斷提取物組成的藥物組合物。
背景技術(shù)：
骨科疾病是一個(gè)世界范圍的、越來越引起人們重視的健康問題。例如，目前全世界約2億人患有骨質(zhì)疏松，其發(fā)病率已躍居常見病、多發(fā)病的第七位。最新研究表明，在我國一直被認(rèn)為是老年人特有疾病的骨質(zhì)疏松癥，實(shí)際上在兒童時(shí)期就已存在。隨著人口老齡化日趨明顯，作為中老年多發(fā)的退行性疾病--骨質(zhì)疏松癥及其并發(fā)癥，已成為一個(gè)社會(huì)性的健康問題而備受老年病學(xué)者的關(guān)注，并引起了社會(huì)的高度重視。目前醫(yī)學(xué)上還未有安全而有效的根治方法，幫助已疏松的骨骼恢復(fù)原狀。骨科方面還有關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)增生等疾病的發(fā)病率也越來越高，嚴(yán)重影響了人們的生活質(zhì)量的提高。因此，開發(fā)一種能有效預(yù)防和治療骨科疾病的藥物有重要的醫(yī)學(xué)和社會(huì)意義。
淫羊藿為小檗科淫羊藿屬植物淫羊藿的葉?！侗静菥V目》記載其具有“益精氣，堅(jiān)筋骨，補(bǔ)腰膝，強(qiáng)心力”等功效；淫羊藿的作用廣泛，如對心血管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、抗炎、抗骨質(zhì)疏松、抗衰老、抗腫瘤等均用作用。淫羊藿是傳統(tǒng)的補(bǔ)腎壯陽中藥，傳統(tǒng)中藥中許多治療骨質(zhì)疏松癥的方劑中均含有淫羊藿?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證明淫羊藿的主要化學(xué)成分為黃酮與多糖，大量的研究表面淫羊藿治療骨質(zhì)疏松癥的有效部位為黃酮(中國天然藥物，2004，7，2(4)，235-239)，它能促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖和(或)增強(qiáng)其礦化能力，有效的防治骨質(zhì)疏松癥。
續(xù)斷始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品。此后歷代本草多有記載，但品種不一，先后涉及多個(gè)科的十?dāng)?shù)種植物。其中主要有川續(xù)斷科的川續(xù)斷、唇形科的糙蘇，菊科的薊等，但自明代開始，川續(xù)斷科的川續(xù)斷便成為藥用續(xù)斷的主流，到了清代，川續(xù)斷便成為續(xù)斷的唯一正品來源并延續(xù)至今。現(xiàn)代化學(xué)研究結(jié)果表明續(xù)斷含有甙類、氨基酸、酚類、皂甙、生物堿等。藥理學(xué)研究表明，續(xù)斷能顯著增加大鼠血清鈣、磷、25-羥基VD的含量，并改善X-光骨質(zhì)像的密度。續(xù)斷乙醇提取物對大鼠試驗(yàn)性骨傷愈合有促進(jìn)作用，且存在量效關(guān)系。
三七為五加科人參屬多年生草本植物，《本草綱目》記載“味微甘而苦，頗似人參之味?！薄胺舱葥鋫麚p，瘀血淋漓者，隨即嚼爛罨之即止，青腫者即消散。若受杖時(shí)，先服一、二錢，則血不沖心，杖后尤宜服之，產(chǎn)后服亦良。大抵此藥氣溫，味甘微苦，及陽明、厥陰血分之藥，故能治一切血病”。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表面三七在治療心血管疾病，調(diào)節(jié)新成代謝方面有比較明顯的藥理作用，三七的主要有效成分為三七皂甙，藥理實(shí)驗(yàn)表面其有顯著的鎮(zhèn)靜和增強(qiáng)體力的作用。
紅花為血中氣藥。中醫(yī)理論認(rèn)為胸痹心痛證多屬本虛標(biāo)實(shí)證，胸痹心痛證疼痛期的治療多以止痛活血、祛淤理氣藥治標(biāo)為主；疼痛緩解后則以調(diào)整陰陽臟腑氣血為主。所以，紅花可用于本虛證者，又能活血、散淤而止痛、用治標(biāo)實(shí)證者。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中治療骨科疾病的藥物通常是含雌激素的化學(xué)藥物，臨床使用時(shí)藥物副作用大，中藥因其療效獨(dú)特和副作用小而深得醫(yī)生和患者的青睞。檢索以前的傳統(tǒng)中藥方劑發(fā)現(xiàn)淫羊藿和續(xù)斷在治療骨科疾病的方劑中廣泛使用。經(jīng)過我們研究證明，盡管淫羊藿提取物和續(xù)斷提取物本身單獨(dú)使用就有預(yù)防和治療骨科疾病的作用，但藥理和臨床試驗(yàn)表明淫羊藿提取物和續(xù)斷提取物的組合物比它們單獨(dú)使用時(shí)有更強(qiáng)的預(yù)防和治療骨科疾病的作用，它們的之間的協(xié)同作用有效的提高了藥效，藥理表現(xiàn)更為明顯。在這種藥物組合的基礎(chǔ)上加入三七提取物或者紅花提取物后藥理作用相當(dāng)。為了現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)的需要，我們研究將這種藥物組合物制成現(xiàn)代化的膠囊劑、注射劑型和凍干粉針注射劑型，藥效確切，起效快，臨床使用方便，為臨床預(yù)防與治療骨科疾病提供了一種新的有效的藥物組合。

發(fā)明內(nèi)容
經(jīng)過我們大量的科學(xué)研究和臨床試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)了淫羊藿和續(xù)斷提取物的藥物組合有很強(qiáng)的預(yù)防和治療骨科疾病的作用，并對此發(fā)明做了進(jìn)一步的完善，將這種組合物制成便于臨床實(shí)施應(yīng)用的藥物制劑。
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種能有效預(yù)防和治療骨科疾病的淫羊藿和續(xù)斷提取物的藥物組合物，經(jīng)藥理和臨床試驗(yàn)證明其作用比單獨(dú)使用以上各組分更為有效。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，這種藥物組合物中加入三七提取物或者紅花提取物后藥理試驗(yàn)結(jié)果相當(dāng)。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種制備以上組合物的生產(chǎn)工藝。
稱取淫羊藿5kg，加10倍量的70％乙醇提取3次，每次1.5小時(shí)，回收乙醇，水浴濃縮，蒸干得淫羊藿提取物。
稱取續(xù)斷5kg，加10倍量的70％乙醇提取3次，每次1.5小時(shí)，回收乙醇，水浴濃縮，溶液上大孔吸附樹脂D-101柱，用3BV(Bed Volume，柱床體積)量的水洗滌柱床，再用2BV量的70％乙醇洗脫，合并濾液和洗滌液，濾液回收乙醇，80℃減壓干燥8小時(shí)，研磨成粉，得續(xù)斷提取物。
取三七藥材，60℃干燥8小時(shí)，粉碎成粗粉(24目)，稱取粗粉1公斤，浸漬過夜，用10倍75％乙醇以1-3ml/min.kg的流速滲漉，滲漉液回收乙醇，減壓干燥，得粗品。粗品加15倍水溶解，溶液上大孔吸附樹脂D-101柱，用3BV(Bed Volume，柱床體積)量的水洗滌柱床，再用2BV量的70％乙醇洗脫，洗脫液加中性氧化鋁1公斤，加熱回流15分鐘，濾過，濾渣用適量70％乙醇洗滌2次，合并濾液和洗滌液，再加活性碳20g，回流30分鐘，濾過，濾渣用適量70％乙醇洗滌2次，合并濾液和洗滌液，濾液回收乙醇，80℃減壓干燥8小時(shí)，研磨成粉，得三七提取物。
本發(fā)明的藥物組合物的配方如下淫羊藿提取物1-99重量比續(xù)斷提取物1-99重量比采用現(xiàn)有的醫(yī)藥工業(yè)領(lǐng)域的制劑技術(shù)，可以將上述配方的藥物組合物制成各種適合臨床使用的藥物劑型。
以下內(nèi)容為驗(yàn)證本發(fā)明藥物組合物的藥理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果(1)本品對實(shí)驗(yàn)性骨質(zhì)疏松癥的影響試驗(yàn)動(dòng)物Wistar大鼠60只，雌性，16周齡，體重220~240g。
實(shí)驗(yàn)儀器雙能X線骨密度檢測量儀美國Nodand公司生產(chǎn)，儀器型號XR226.
實(shí)驗(yàn)方法大鼠實(shí)驗(yàn)性骨質(zhì)疏松癥實(shí)驗(yàn)各組大鼠分籠飼養(yǎng)于不銹鋼金屬籠內(nèi)，每籠5只，室溫調(diào)節(jié)在22-26℃，濕度控制在50％~70％，自由飲食和攝水。動(dòng)物稱重，采用分層隨機(jī)法將大鼠60只分為6組，即空白對照組0.9％氯化鈉注射液(10ml/kg)；模型對照組0.9％氯化鈉注射液(10ml/kg)；本品大劑量組(800mg/Kg)；本品中劑量組(400mg/Kg)；本品小劑量組(200mg/Kg)；治療骨質(zhì)疏松藥物對照組骨松寶顆粒劑(2.7g/Kg)。
實(shí)驗(yàn)過程中每組稱重一次，根據(jù)大鼠體重調(diào)節(jié)給藥量。空白組在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中只給等量生理鹽水，模型組、骨松寶顆粒劑組、本品膠囊各劑量組于實(shí)驗(yàn)第1~15天均給予維甲酸(70mg·g-1Dd-1)灌胃，同時(shí)骨松寶顆粒組加服骨松寶顆粒，本品組加服本品各相應(yīng)的劑量，14d后各組停用維甲酸，空白組、模型組給于等量生理鹽水，給藥組繼續(xù)給予所試藥物，劑量不變，第29天，麻醉動(dòng)物并腹主動(dòng)脈取血，分離血清用全自動(dòng)生化儀測定血鈣、血磷，處死動(dòng)物，分離了兩側(cè)完整的股骨、第2~4腰椎進(jìn)行骨密度的檢測。
試驗(yàn)結(jié)果表1本品膠囊對大鼠骨密度變化的影響(x±s，n＝10)

注與模型對照組比較，*P＜0.05；**P＜0.01本品對大鼠骨密度的影響本品高、中、低劑量組對實(shí)驗(yàn)性大鼠骨質(zhì)疏松癥導(dǎo)致的骨密度降低有明顯抑制作用，可升高大鼠股骨和腰椎骨密度的作用(P＜0.05~0.001)，骨松寶也有升高大鼠股骨和腰椎骨密度的作用(P＜0.05)。
表2 本品膠囊對大鼠血鈣、血磷的影響(x±s，n＝10)


本品對大鼠血鈣、血磷的影響本品三個(gè)劑量組對維甲酸性導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥大鼠的血鈣水平有顯著的升高作用，和模型組比較有顯著差異(P＜0.05)，骨松寶也有升高大鼠血鈣、血磷的作用(P＜0.05)。本品對大鼠血磷無明顯作用。
(2)鎮(zhèn)痛作用2.1小鼠化學(xué)刺激法引起擬痛反應(yīng)(扭體法)實(shí)驗(yàn)一級ICR小鼠60只，體重18～22g，隨機(jī)分為5組，每組12只，雌雄各半，分組及給藥情況見表3。
表3 對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響試驗(yàn)給藥及分組情況

各組動(dòng)物按上表給藥，除陽性組于注射醋酸前15min一次性腹腔注射給藥，其它各組每天給藥1次，連續(xù)7天，于末次給藥后45min，各鼠腹腔注射0.6％醋酸0.2ml/只，觀察15min內(nèi)各動(dòng)物扭體反應(yīng)次數(shù)。計(jì)算藥物鎮(zhèn)痛百分率。
結(jié)果見表4表4 對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響


注與空白對照組比較，***p＜0.001；**p＜0.01。
表4結(jié)果表明，本專業(yè)品對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)具有明顯抑制作用，與空白對照組比較，高劑量組p＜0.001，中劑量組p＜0.01，提示本品對醋酸致痛具有明顯止痛作用。
2.2熱傳導(dǎo)引起小鼠擬痛反應(yīng)(熱板法)實(shí)驗(yàn)一級ICR小鼠，體重18～22g，雌性；RB-200智能熱板儀，程控溫度55±0.5℃，以小鼠舔后足為致痛指標(biāo)，出現(xiàn)舔后足時(shí)所用的時(shí)間即為其痛閾值，測量各鼠正常痛閾值，選澤正常痛閾值在5～30s之間的小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，分組及給藥情況見表5。
表5 對小鼠熱板致痛的影響試驗(yàn)給藥及分組情況

測定正常痛閾值后，各組動(dòng)物按上表給藥，給藥后30、60、90min(度冷丁組為15、60、90min)分別測定各鼠給藥后痛閾值，計(jì)算痛閾提高百分率。
統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS10.0軟件單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，數(shù)據(jù)結(jié)果用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。
結(jié)果見表6。
表6 對小鼠熱板致痛的影響


與空白對照組比較，***p＜0.001；**p＜0.01；*p＜0.05。
表6結(jié)果表明，本品能明顯提高熱板致痛小鼠的痛閾值，與空白對照組比較，60min時(shí)高中低劑量組p＜0.01，90min時(shí)高、中劑量組p＜0.05。提示本品對熱板致痛小鼠有明顯的止痛作用。
(3)本品膠囊抗炎癥實(shí)驗(yàn)研究3.1對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響雄性ICR小鼠60只，按體重隨機(jī)分為模型對照組、陽性對照組，本品膠囊高、中、低劑量組，共5組，每組12只。高中低劑量組大鼠分別灌胃給予本品800、400、200mg/kg，陽性對照組灌胃給予醋酸地塞米松片1.0mg/kg，模型組給予等體積生理鹽水，每天1次，連續(xù)7天，末次給藥后1小時(shí)，將50μl二甲苯涂于每只小鼠右耳前后兩面。4小時(shí)后脫頸處死，剪下雙耳，用直徑為8mm不銹鋼沖子沖下左右耳片，稱重，以兩耳片重量之差作為衡量腫脹程度的指標(biāo)，抗炎作用強(qiáng)度以抑制率(％)表示，用SPSS11.5軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果見表7。
表7 對小鼠耳腫脹的影響(x±s)

與模型對照組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本品膠囊對二甲苯致小鼠耳廓腫脹有明顯抑制作用，其高劑量組與模型組比較有極顯著差異。
3.2對小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性升高的抑制作用雄性ICR小鼠60只，按體重隨機(jī)分為模型對照組、陽性對照組，本品膠囊高、中、低劑量組，共5組，每組12只。高中低劑量組大鼠分別灌胃給予本品800、400、200mg/kg，陽性對照組灌胃給予醋酸地塞米松片1.0mg/kg，模型組給予等體積生理鹽水，每天1次，連續(xù)7天，于末次給藥后30min，尾靜脈注射0.5％伊文思藍(lán)溶液0.1ml/10g體重，立即腹腔注射0.6％冰醋酸溶液0.2ml/只。20min后，剪開腹腔皮膚，用5ml生理鹽水沖洗腹腔，吸出全部腹腔洗液，于751型分光光度計(jì)上測量其吸光值。以O(shè)D值反映其腹腔毛細(xì)血管通透性情況。結(jié)果見表8。
表8 對小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加的影響(x±s)

與模型對照組比較*p＜0.05，**p＜0.01。
注表中動(dòng)物數(shù)為注射成功、納入統(tǒng)計(jì)分析的小鼠數(shù)。
上表結(jié)果表明，本品膠囊對醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加具有明顯的抑制作用，高劑量組與模型對照組比較有顯著差異。
具體實(shí)施例以下為結(jié)合具體實(shí)施方式
對本發(fā)明所作的進(jìn)一步的詳細(xì)描述，并不對本發(fā)明作任何限制實(shí)施例1膠囊處方及工藝處方 (按1000粒計(jì))淫羊藿提取物 20g續(xù)斷提取物 20g淀粉 150ml微粉硅膠 10g制成 1000粒稱取淫羊藿5kg，加10倍量的70％乙醇提取3次，每次1.5小時(shí)，回收乙醇，水浴濃縮，蒸干得淫羊藿提取物。
稱取續(xù)斷5kg，加10倍量的70％乙醇提取3次，每次1.5小時(shí)，回收乙醇，水浴濃縮，溶液上大孔吸附樹脂D-101柱，用3BV(Bed Volume，柱床體積)量的水洗滌柱床，再用2BV量的70％乙醇洗脫，合并濾液和洗滌液，濾液回收乙醇，80℃減壓干燥8小時(shí)，研磨成粉，得續(xù)斷提取物。
實(shí)施例2粉針處方及工藝處方 (按1000瓶計(jì))淫羊藿提取物 100g續(xù)斷提取物100g甘露醇250ml注射用水 10g制成 1000瓶提取方法同上。成型工藝為取處方量淫羊藿提取物、續(xù)斷提取物、三七提取物、甘露醇、聚乙二醇400、80％處方量注射用水溶解；初濾后再用0.2um微孔濾膜精濾；補(bǔ)足注射用水至全量；分裝；凍干；包裝。
實(shí)例3注射液處方及工藝處方 (按1000瓶計(jì))淫羊藿提取物 100g續(xù)斷提取物100g注射用水 加至2000ml制成 1000瓶提取方法同上。成型工藝為取處方量淫羊藿提取物、續(xù)斷提取物、三七提取物、50％處方量注射用水溶解；活性炭初濾后再用0.2um微孔濾膜精濾；補(bǔ)足注射用水至全量；測定含量；分裝；滅菌；燈檢；包裝。
實(shí)例4片劑處方及工藝處方 (按1000片計(jì))淫羊藿提取物 20g續(xù)斷提取物20g淀粉 150g羥丙基纖維素 7g
羥甲基淀粉鈉7g微粉硅膠10g制成1000片提取方法同上。成型工藝為取處方量淫羊藿提取物、續(xù)斷提取物、三七提取物、淀粉，羧甲基淀粉鈉，用5％羥丙基纖維素作黏合劑，制軟材，20目篩制粒，60℃干燥，加入微粉硅膠整粒，壓片。
實(shí)例5滴丸處方及工藝處方(按1000粒計(jì))淫羊藿提取物20g續(xù)斷提取物 20g聚乙二醇6000200g制成1000粒提取方法同上。成型工藝為取聚乙二醇6000于油浴上加熱至90-100℃，待全部溶解后，加入淫羊藿提取物、續(xù)斷提取物、三七提取物、攪拌至溶解，轉(zhuǎn)移至貯液瓶中，密閉并保溫再80-90℃，調(diào)節(jié)滴液定量閥門，滴入10-15℃的液體石蠟中，將形成的滴丸瀝干并擦除液體石蠟，干燥。
權(quán)利要求
1.一種預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的配方為淫羊藿1-99重量比，續(xù)斷提取物1-99重量比。
2.一種預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的配方為淫羊藿35-60重量比，續(xù)斷提取物40-65重量比。
3.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于淫羊藿提取物可用淫羊藿原藥材代替，續(xù)斷提取物可用續(xù)斷原藥材代替。
4.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于這種藥物組合物還可以加入0-98重量比的三七提取物。
5.按照權(quán)利要求4所述的預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于三七提取物可用三七原藥材代替。
6.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于這種藥物組合物還可以加入0-98重量比的紅花提取物。
7.按照權(quán)利要求6所述的預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于紅花提取物可用紅花原藥材代替。
8.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于淫羊藿提取物中淫羊藿總黃酮重量比為10-100，續(xù)斷提取物中續(xù)斷皂甙重量比為10-100。
9.按照權(quán)利要求4所述的預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于三七提取物中三七皂甙重量比為10-100。
10.按照權(quán)利要求6所述的預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于紅花提取物中紅花總黃酮重量比為10-100。
11.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于其臨床上適用于治療骨質(zhì)疏松癥、關(guān)節(jié)疾病、骨質(zhì)增生，骨髓炎和筋骨傷痛等骨科疾病。
12.按照權(quán)利要求1所述預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥和抗炎的藥物組合物，其特征在于它的劑型是適合臨床應(yīng)用的注射液(包括輸液、凍干粉針)、丸劑、滴丸、片劑(包括分散片、口崩片等)、緩釋片、膠囊、軟膠囊、顆粒劑、散劑、錠劑、煎膏劑、口服液(合劑)、糖漿劑、軟膏劑、搽劑、涂膜劑等藥劑學(xué)上可以接受的劑型中的任何一種藥物劑型。
13.一種預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物的制備方法，其特征在于，它包括以下步驟(1)稱取淫羊藿5kg，加10倍量的70％乙醇提取3次，每次1.5小時(shí)，回收乙醇，水浴濃縮，蒸干得淫羊藿提取物；(2)稱取續(xù)斷5kg，加10倍量的70％乙醇提取3次，每次1.5小時(shí)，回收乙醇，水浴濃縮，溶液上大孔吸附樹脂D-101柱，用3BV(Bed Volume，柱床體積)量的水洗滌柱床，再用2BV量的70％乙醇洗脫，合并濾液和洗滌液，濾液回收乙醇，80℃減壓干燥8小時(shí)，研磨成粉，得續(xù)斷提取物；(3)取100g淫羊藿提取物、100g續(xù)斷提取物、50％處方量注射用水溶解；活性炭初濾后再用0.2um微孔濾膜精濾；補(bǔ)足注射用水至全量；測定含量；分裝；滅菌；燈檢；包裝制成本發(fā)明中藥注射劑1000瓶。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種能有效的預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，即淫羊藿提取物和續(xù)斷提取物組成的藥物組合物。它們的組合應(yīng)用在預(yù)防和治療治療骨科疾病方面有很好的協(xié)同作用，治療效果明顯，強(qiáng)于各組分單獨(dú)應(yīng)用。
文檔編號A61P19/08GK1907315SQ20051008879
公開日2007年2月7日 申請日期2005年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月2日
發(fā)明者孫毅 申請人:孫毅