專利名稱：一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是有關(guān)一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，特別是指一種由龍眼花萃取物、綠蜂膠及國蘭多酚所組成的復(fù)方組成物。
背景技術(shù)：
根據(jù)世界衛(wèi)生組織的流行病學(xué)調(diào)查指出，憂郁癥、癌癥以及艾滋病為21世紀(jì)的三大疾病；甚至預(yù)測公元2020年時，精神疾病將成為殘疾的第二大原因⑴。神經(jīng)退化性疾病為老年人常見的疾病，如失智癥，其導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶能力減退、認(rèn)知功能下降，亦為憂郁情境產(chǎn)生的主要原因，因此失智癥與憂郁癥經(jīng)常兩者同時發(fā)生?；加猩窠?jīng)退化性疾病，如失智癥中的阿茲海默癥(Alzheimer’ s disease)，的患者會出現(xiàn)漸進(jìn)式的記憶損害與其它如語言障礙、執(zhí)行日常生活作息功能降低等癥狀，進(jìn)而影響到工作表現(xiàn)、人際關(guān)系與社會功能。在疾病過程中甚至?xí)a(chǎn)生妄想、幻覺，其可對患者本身或他人產(chǎn)生危險，且隨著疾病的進(jìn)展對他人的依賴程度大幅增加，對患者本身及其家屬的生活亦有極大的影響⑵。神經(jīng)退化性疾病的致病原因為腦部產(chǎn)生發(fā)炎反應(yīng)、神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)減少、神經(jīng)細(xì)胞死亡等神經(jīng)老化現(xiàn)象。習(xí)知，脂肪酸、腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子及單胺氧化酶與腦部發(fā)炎、神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)及神經(jīng)細(xì)胞的修復(fù)有密切的關(guān)聯(lián)。研究指出罹患阿茲海默癥的患者腦部有明確地發(fā)炎反應(yīng)現(xiàn)象，且發(fā)作早期腦部神經(jīng)膠細(xì)胞有活化的現(xiàn)象，其代表患者腦部有異常發(fā)炎的反應(yīng)，以致于病癥晚期時會有腦部萎縮情形發(fā)生(S。脂肪酸如n-3不飽和脂肪酸可以代謝抗發(fā)炎物質(zhì)前列腺素3 (prostaglandin 3)的前驅(qū)物，而n_6不飽和脂肪酸則為促發(fā)炎物質(zhì)前列腺素 2 (prostaglandin幻及白三烯B4 (leukotrieneB4)的前驅(qū)物。因此，若提升n_3不飽和脂肪酸及降低n-6不飽和脂肪酸，則能改善腦部發(fā)炎的現(xiàn)象。亦有研究指出憂郁情境與發(fā)炎也具有一定相關(guān)性(19)，故，藉由改善發(fā)炎現(xiàn)象亦能改善其相關(guān)的憂郁情境。另，阿茲海默癥患者腦部神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)，如乙酰膽堿(acetylcholine)，會明顯減少，使記憶力及注意力降低。腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子(Brain Derived Neurotrophic Factor ； BDNF)主要是存在海馬回中的神經(jīng)生長蛋白，其掌管細(xì)胞修復(fù)或?qū)W習(xí)記憶，并同時會帶動幾種荷爾蒙的分泌，如第一類型胰島素生長因子(IGF-I)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和纖維母細(xì)胞生長因子(FGF2)，啟動學(xué)習(xí)的機(jī)制并使干細(xì)胞分裂@)。腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子可幫助大腦增加IGF-I，并啟動神經(jīng)元制造與記憶相關(guān)的血清素和絲胺酸，這兩種神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)會刺激更多的腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子受體產(chǎn)生，增加神經(jīng)元之間的連接(27)。隨著年紀(jì)的增長， 腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子會自然下降，因此，藉由提升腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子能改善神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)減少的現(xiàn)象、促神經(jīng)細(xì)胞生長，進(jìn)而改善神經(jīng)退化性疾病。神經(jīng)細(xì)胞亦會隨著老化而死亡，氧化壓力亦會導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞的受損及促進(jìn)細(xì)胞死亡。單胺氧化酶(Monoamine Oxidase)分別有兩種單胺氧化酶A(MAO-A)及單胺氧化酶B(MAO-B)。單胺氧化酶A的活性在患有神經(jīng)退化性疾癥而引起的憂郁癥的患者中較高，通?；颊邥褂脝伟费趸窤抑制劑(MAOIs)以降低單胺氧化酶A的活性，其可使神經(jīng)系統(tǒng)突觸間的單胺，如正腎上腺素(nor印in印hrine)、血清素(serotonin)及多巴胺 (dopamine)的代謝率降低，進(jìn)而增強(qiáng)單胺的作用，達(dá)到減低憂郁癥患者的憂郁情境β1)，而單胺氧化酶B的活性則會隨著年齡而增加，當(dāng)活性過高時會促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞及腎臟細(xì)胞的凋亡(22)。因此，藉由降低單胺氧化酶A及單胺氧化酶B的活性能改善因神經(jīng)退化性疾病所產(chǎn)生的憂郁情境及神經(jīng)細(xì)胞死亡的現(xiàn)象，進(jìn)而改善神經(jīng)退化性疾病。神經(jīng)退化性疾病最有希望的治療方法的一為神經(jīng)干細(xì)胞的移植，以補(bǔ)救受損的神經(jīng)細(xì)胞，惟，干細(xì)胞數(shù)量稀少，其來源及臨床的應(yīng)用備受爭議，且侵入性的治療風(fēng)險較高，因此，一一種低風(fēng)險且非侵入性的治療方法是有迫切的需要。目前，市面上治療神經(jīng)退化性疾病的藥物大多為化學(xué)合成物，與天然植物中所萃取出的天然化合物相比，副作用較多，天然萃取物所組成的復(fù)方，因成分天然，副作用少，故較能被患者接受。惟，迄今未見使用天然萃取物組成復(fù)方，并用于改善神經(jīng)退化性疾病，因此若能將天然萃取物制成一復(fù)方組合物，不僅對改善神經(jīng)退化性疾病有很大的幫助，亦能讓患者在治療過程中有多一種選擇。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的主要目的，旨在提供一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，尤指一種能改善腦部發(fā)炎反應(yīng)、神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)減少及神經(jīng)細(xì)胞死亡的現(xiàn)象，進(jìn)而改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物。本發(fā)明的另一目的為改善腦部發(fā)炎反應(yīng)、神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)減少及神經(jīng)細(xì)胞死亡現(xiàn)象。本發(fā)明的另一目的為提供一種用以改善神經(jīng)退化性疾病以及改善憂郁癥的復(fù)方組成物。為達(dá)上述目的，本發(fā)明揭露一種復(fù)方組成物，其是由下列成分所組成80%重量百分比的龍眼花萃取物；10%重量百分比的綠蜂膠；以及10%重量百分比的國蘭多酚。本發(fā)明復(fù)方組成物具有提升腦中η-3不飽和脂肪酸濃度，降低腦中η-6不飽和脂肪酸濃度，腦中腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子濃度，降低細(xì)胞中單胺氧化酶活性，提升細(xì)胞腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子濃度的功效，進(jìn)而改善腦部發(fā)炎反應(yīng)、神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)減少及神經(jīng)細(xì)胞死亡的現(xiàn)象。因此，本發(fā)明的復(fù)方組成物可作為改善神經(jīng)退化性疾病，如失智癥的阿茲海默癥或帕金森氏癥，及伴隨神經(jīng)退化性疾病的憂郁癥的用途。本發(fā)明也可另外添加本領(lǐng)域中具有通常知識者所熟知的添加劑，如一或多種以上藥理學(xué)上可接受的佐劑或賦型劑等，作為具有改善神經(jīng)退化性疾病作用的保健食品。本發(fā)明的優(yōu)點在于提供一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，尤指一種能改善腦部發(fā)炎反應(yīng)、神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)減少及神經(jīng)細(xì)胞死亡的現(xiàn)象，進(jìn)而改善神經(jīng)退化性疾病以及改善憂郁癥的復(fù)方組成物的復(fù)方組成物。


圖1是本發(fā)明復(fù)方組合物對于腦前額葉中腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子(Brain Derived Neurotrophic Factor)濃度的影響的結(jié)果分析圖；(所有數(shù)值為平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差；具有“*”的數(shù)值，為經(jīng)鄧肯多重差距檢定
4(Duncan，s multiple range test)后，與其它數(shù)值有明顯差異的數(shù)值，ρ < 0. 05)圖2是本發(fā)明復(fù)方組合物對于細(xì)胞生長情形影響的照相圖；圖3是本發(fā)明復(fù)方組合物對于細(xì)胞單胺氧化酶A活性影響的結(jié)果分析圖；(所有數(shù)值為平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差；“#”代表明顯低于控制組，P< 0. 05 ；“*”代表明顯高于控制組，ρ < 0. 05)圖4是本發(fā)明復(fù)方組合物對于細(xì)胞單胺氧化酶B活性影響的結(jié)果分析圖；以及(所有數(shù)值為平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差；“#”代表明顯低于控制組，P< 0. 05 ；“*”代表明顯高于控制組，ρ < 0. 05)圖5是本發(fā)明復(fù)方組合物對于細(xì)胞腦神經(jīng)滋養(yǎng)因子影響的結(jié)果分析圖。(所有數(shù)值為平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差；“*”代表明顯高于控制組，ρ< 0. 05)
具體實施例方式為便于更進(jìn)一步對本發(fā)明的構(gòu)造、使用及其特征有更深一層明確、詳實的認(rèn)識與了解，爰舉出較佳實施例，配合圖式詳細(xì)說明如下本發(fā)明為一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，特別是以龍眼花萃取物、 綠蜂膠及國蘭多酚共同組成的復(fù)方組合物，其中，上述龍眼花萃取物的重量百分比占復(fù)方組合物總重量的80%，上述綠蜂膠的重量百分比占復(fù)方組合物總重量的10% ；而上述國蘭多酚的重量百分比占復(fù)方組合物總重量的10%。如此即可形成一改善神經(jīng)退化性疾病及伴隨神經(jīng)退化性疾病的憂郁癥的復(fù)方組合物。此外，本發(fā)明復(fù)方組合物可進(jìn)一步加入一種以上藥理學(xué)上可接受的添加劑，讓復(fù)方組合物形成一作為具有改善神經(jīng)退化性疾病作用的保健食品。動物實驗本發(fā)明實驗動物是由靜宜大學(xué)王銘富教授實驗室所提供的senescence accelerated-prone 8 (SAMP8)老化促進(jìn)小鼠，經(jīng)近親繁殖后選擇年齡及體重相仿的5月齡雄性小鼠共計42只，實驗期間每3只小鼠飼養(yǎng)于同一個飼養(yǎng)籠內(nèi)，所飼養(yǎng)的環(huán)境為溫度 22士2°C、相對濕度65士5%，并給予12小時光暗循環(huán)的動物房。經(jīng)適應(yīng)期一周后開始進(jìn)行飲食介入(每只小鼠每日分別給予自由飲食及飲水)， 并以隨機(jī)的方式分為7組，每組各6只，且小鼠的月齡及平均體重相似；分別為基礎(chǔ)組 [Base](飲食中油脂為大豆油)、控制組[C](飲食中油脂為大豆油)、正控制組[IM](于進(jìn)行強(qiáng)迫游水試驗前給予伊米胺(imipramine))、n-3多元不飽和脂肪酸EPA組[EPA](飲食中油脂含EPA >60% )、！1-3多元不飽和脂肪酸DHA組[DHA](飲食中油脂含DHA > 60% )、 復(fù)方組合物組[L](飲食中含龍眼花萃取物、綠蜂膠、國蘭多酚)、磷脂質(zhì)絲胺酸組[PS](飲食中含磷脂質(zhì)絲胺酸)。飲食介入后紀(jì)錄各組每日飲食攝取狀況，并于每周記錄小鼠的體重變化以了解其生長狀況。飲食介入六周后，除基礎(chǔ)組外，每組犧牲前先進(jìn)行動物行為分析(強(qiáng)迫游水試驗； Force Swim Test)，進(jìn)行強(qiáng)迫游水試驗后的行為模式分析后，將小鼠進(jìn)行犧牲，犧牲時經(jīng)由心臟灌流固定液進(jìn)行固定，從小鼠的心臟采取血液樣本，并以含有抗凝血劑EDTA(ethylene diamine tetraacetic acid)的紫頭采血管收集血液。將收集到的血液以離心機(jī)進(jìn)行離心 (離心機(jī)轉(zhuǎn)速設(shè)定為3，OOOrpm，溫度4°C，時間為10分鐘)，將以離心好的血液分為血漿及紅血球，分別以微量離心管收集后儲存于-80°C冰箱中。采集完血液后，利用磷酸緩沖液(PBS)由心臟灌流(transcardiac perfusion)以清除小鼠臟器內(nèi)的血液及其它干擾物質(zhì)，將所有臟器固定后，取下腦部、心臟、肝臟及腎臟， 臟器以鋁箔紙將其稍作包裹后，隨即放入-80°C冰箱中以待之后實驗分析。統(tǒng)計分析數(shù)值以平均值及標(biāo)準(zhǔn)偏差(Mean 士 SD或SEM)來表示，使用SAS 9. 1版統(tǒng)計軟件來做數(shù)據(jù)分析，利用One-way ANOVA進(jìn)行比較，利用鄧肯多重差距檢定(Duncan’ s multiple range test)來進(jìn)行事后檢定，當(dāng)ρ < 0. 05時具有統(tǒng)計上差異。由ICN所訂定ΑΙΝ-93Μ飲食及復(fù)方組成物飲食的組成
成分AIN-93M 飲食EPA飲食DHA飲食復(fù)方組成物飲食磷脂質(zhì)絲胺酸飲食數(shù)量(％)數(shù)量(％)數(shù)量(％)數(shù)量(％)數(shù)量(％)干酪素14.0014.0014.0014.0014.00糊精化玉米淀粉15.5015.5015.5015.5015.50蔗糖10.0010.0010.0010.0010.00玉米淀粉46.5746.5746.5746.5746.57α,非營養(yǎng)性主體 (a, Non-Nutritive Bulk)5.005.005.005.005.00大豆油4.00--4.004.00富含EPA的魚油-4.00---富含DIlA的魚油--4.00--AIN-93M礦物質(zhì)混合物3.503.503.503.503.50L·胱氨酸0.180.180.180.180.18AIN-93-VX維他命混合物1.001.001.001.001.00膽堿0.250.250.250.250.25第二丁基氫醌0.00140.00140.00140.00140.0014復(fù)方組成物---0.5-磷脂質(zhì)絲胺酸---0.5實施例一復(fù)方組合物對于小鼠行為模式的影響對小鼠進(jìn)行強(qiáng)迫游水試驗，全程以攝影機(jī)記錄，試驗后利用軟件(Clever Sys, Inc. ForcedswimScan 2. 0)分析，而實驗動物的行為將分為a.劇烈游水(escape)四肢不斷拍打水面的動作，且有強(qiáng)烈想逃脫的動作。b.攀爬(climb)前肢不斷攀爬容器邊緣的動作。c.潛水(dive)全身(包含尾巴)都潛入水面以下的動作。d.靜止期(immobility)漂浮在水面上，沒有任何其它的動作。e.小動作劃水期(swim)緩慢且小動作劃水以維持身體平衡及頭部保持在水面上的動作。f.焦慮情境于行為模式分析后，計算水中糞便數(shù)。表一、強(qiáng)迫游水試驗行為議少) 控制組正控制組 EPA組 DHA組復(fù)方組合物組磷脂質(zhì)絲胺酸組
劇烈游水13.21±13.68a51.84±25.31a92.53土 70.81b42.12±34.51a37.55；±5.5a51.85±26.95a攀爬26.08±18.80a69.13±34.52b66.72±32.68b52.91±37.34"''71.83±31.81"78.73±21.53b潛水1.82±1.74a1.19+ 1.5010.00+ 0.0034.50±8.56a3.94±5.68a3.57±3.04a靜止期226.2±45.2a127.1±60.5b41.7±44.5°158.1±58.5b112.3±29.4b119.2 ±42.2b小動作劃水期32.30±27.12a50.78±18.16ab99.00±46. 38。42.42±27.21at'74.32±36.58be46.63±31.Mab1所有數(shù)值為平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差2同一欄內(nèi)，有同一字母的數(shù)值，為經(jīng)鄧肯多重差距檢定(Duncan’ s multiple range test)后與其它數(shù)值無明顯差異的數(shù)值，P < 0. 05實驗結(jié)果如表一所示，透過強(qiáng)迫游水試驗發(fā)現(xiàn)，給予復(fù)方組合物組與控制組比較， 可以增加小鼠在強(qiáng)迫游水試驗中的攀爬時間，同時也可以減少動物在水中靜止不動的時間。由此實驗可得知，復(fù)方組合物可改善小鼠因強(qiáng)大壓力所導(dǎo)致的憂郁情境。實施例二 復(fù)方組合物對于磷脂質(zhì)脂肪酸比例的影響將從血液離心后所取得的血漿、紅血球及小鼠腦前額葉，進(jìn)行以下粗脂肪酸萃取。a.紅血球利用親和層析管柱萃取脂肪酸后，再使用氣相層析儀(GC)分析。b.血漿經(jīng)萃取脂肪酸后，再使用氣相層析儀(GC)分析。c.腦組織將腦前額葉均質(zhì)并經(jīng)脂肪酸萃取后，使用氣相層析儀(GC)分析。最后皆利用分析軟件辨認(rèn)各種脂肪酸的含量并分析各脂肪酸所占的百分比。表二、紅血球脂肪酸的比例
基礎(chǔ)組控制組正控制組 EPA組 DHA組復(fù)方組合物組磷脂質(zhì)絲胺酸組 (%) 一
權(quán)利要求
1.一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，其特征在于復(fù)方組合物是由下列成分所組成80%重量百分比的龍眼花萃取物；10%重量百分比的綠蜂膠；以及10%重量百分比的國蘭多酚。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，其特征在于神經(jīng)退化性疾病的改善是指提升腦中n-3不飽和脂肪酸濃度。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，其特征在于神經(jīng)退化性疾病的改善是指降低腦中n-6不飽和脂肪酸濃度。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，其特征在于神經(jīng)退化性疾病的改善是指提升腦中腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子濃度。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，其特征在于神經(jīng)退化性疾病的改善是指降低細(xì)胞單胺氧化酶活性。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，其特征在于神經(jīng)退化性疾病的改善是指提升細(xì)胞腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子濃度。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，其特征在于神經(jīng)退化性疾病是指失智癥。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，其特征在于上述失智癥是指阿茲海默癥及/或帕金森氏癥。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，其包含作為保健食品用的添加劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，其特征在于上述添加劑，其為佐劑及/或賦型劑。
全文摘要
本發(fā)明是有關(guān)一種用以改善神經(jīng)退化性疾病的復(fù)方組成物，特別是為一種由龍眼花萃取物、綠蜂膠及國蘭多酚所組成的復(fù)方組成物，作為改善神經(jīng)退化性疾病的用途。該復(fù)方組成物可提升腦中n-3不飽和脂肪酸濃度、降低腦中n-6不飽和脂肪酸濃度、提升腦中腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子濃度、降低細(xì)胞中單胺氧化酶活性、提升細(xì)胞中腦源性神經(jīng)滋養(yǎng)因子濃度等功效，藉以延緩神經(jīng)細(xì)胞老化現(xiàn)象，進(jìn)而達(dá)到改善神經(jīng)退化性疾病的功效。
文檔編號A61K36/898GK102370885SQ20101025512
公開日2012年3月14日 申請日期2010年8月17日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月17日
發(fā)明者吳岱锜 申請人:康達(dá)生命科學(xué)有限公司