專利名稱：一種治療顱外實體腫瘤的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
關(guān)于癌癥的研究雖已取得了較大進(jìn)展，但其死亡率仍居各種常見死因的前列。在我國每年約有160萬人患癌癥，近130萬人死于癌癥，占總死亡人數(shù)的五分之一。癌癥發(fā)病率逐年上升且呈年輕化趨勢，有資料顯示，在不到20年的時間里，我國癌癥發(fā)病率上升了69％，死亡率增長了29.4％。據(jù)世界衛(wèi)生組織最新統(tǒng)計，到2020年全球癌癥發(fā)病率將增加百分之五十，發(fā)病人數(shù)增到一千五百萬。因此，探討一種有效的治療癌癥的方法或藥物已經(jīng)成為目前研究的熱點。
多年來，BCNU一直被作為治療腦腫瘤的首選藥物，而用BCNU局部緩釋治療腦腫瘤的經(jīng)驗更表明，局部藥物緩釋保證了局部用藥范圍內(nèi)持久而較穩(wěn)定的藥物濃度，降低了全身藥物濃度，減輕了毒副作用，給膠質(zhì)瘤化療帶來了希望。之所以用BCNU，特別是局部緩釋BCNU治療腦腫瘤，其理論根據(jù)在于(1)由于受血腦屏障的限制，許多化療藥物在常規(guī)靜脈化療時不能進(jìn)入腦內(nèi)或藥物濃度難以達(dá)到或保持長時間有效濃度，相比之下，BCNU受血腦屏障的限制較??；(2)90％的病人于手術(shù)后1年內(nèi)在局部(2cm內(nèi))復(fù)發(fā)；(3)BCNU作為最常用的治療腦腫瘤的藥物，對腦腫瘤具有相對高的選擇性。

發(fā)明內(nèi)容基于以上對現(xiàn)有技術(shù)的考查，本發(fā)明對腦腫瘤和某些顱外腫瘤進(jìn)行了比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)卡莫司汀對肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、膀胱癌、睪丸癌、結(jié)腸癌及直腸癌等顱外實體腫瘤具有較為明顯的作用效果。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)BCNU局部緩釋對甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌及前列腺癌等其它顱外實體腫瘤也具有很好的治療作用。局部藥物緩釋在保證了局部用藥范圍內(nèi)持久而較穩(wěn)定的藥物濃度的同時，明顯降低了全身藥物濃度，減輕了毒副作用。
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種治療顱外實體腫瘤的藥物組合物。
本發(fā)明治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，包括抗癌有效成分和藥用輔料，其中抗癌有效成分為卡莫司汀，又稱卡氮芥、BCNU或carmustine。
藥用輔料包括下列之一或其組合(1)生物相容性多聚物，包括生物可降解的或生物不可降解的多聚物及其混合物或共聚物，(2)水溶性低分子化合物，或/和(3)用于實現(xiàn)針劑和緩釋劑等藥物劑型的合適的添加劑及賦型劑。
上述生物可降解的多聚物包括天然的和/或合成的多聚物。合成的多聚物如，但不限于，聚酐類、聚羥基酸、聚酯(polyesters)、聚酰胺(polyamides)、聚原酸酯(polyorthoesters)、聚磷腈(polyphosphazenes)、對羧苯基丙烷(p-CPP)、葵二酸(sebacic acid)、聚苯丙生(對羧苯基丙烷與葵二酸的共聚物)等；天然的多聚物如，但不限于，蛋白質(zhì)及多糖，包括透明質(zhì)酸、膠原蛋白、軟骨素、明膠、白蛋白等。
上述聚酐類可選用，但不限于，芳香聚酐、脂肪族聚酐；其中芳香聚酐將解較慢，熔點高，有機(jī)溶劑中溶解度低，然而，芳香聚酐與脂肪族聚酐的共聚物卻較為理想(美國專利4757128)。其中的代表物是聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸(SA)的共聚物)，而對羧苯基丙烷為芳香聚酐，葵二酸則是一個芳香二酸與一個脂肪二酸的共聚物。可選用的其它芳香或脂肪族聚酐的共聚物在其它美國專利中已有詳細(xì)描述(US 4857311；4888176；4789724)。
上述聚羥基酸可選用，但不限于，聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚乳酸(PLA)與聚乙醇酸的混合物、乙醇酸和羥基羧酸的共聚物(PLGA)；當(dāng)PLA和PLGA混合時，其含量重量百分比分別為0.1-99.9％和99.9-0.1％。聚乳酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以10,000-50000為優(yōu)選，以10,000-20000為最優(yōu)選；聚乙醇酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以10,000-50000為優(yōu)選，以10,000-20000為最優(yōu)選；以上聚羥基酸可單選或多選。當(dāng)單選時，以聚乳酸(PLA)或羥基羧酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)為優(yōu)選，共聚物的分子量可為，但不限于，1000-100,000，但以10,000-50000為優(yōu)選；以10,000-20000為最優(yōu)選；當(dāng)多選時，以高分子多聚物或不同高分子多聚物組成的復(fù)合多聚物或共聚物為優(yōu)選，以含不同分子量聚乳酸或葵二酸的復(fù)合多聚物或共聚物為最優(yōu)選，如，但不限于，分子量為5000到10000的聚乳酸與分子量為20000到50000的聚乳酸混合、分子量為10000到20000的聚乳酸與分子量為30000到80000的PLGA混合、分子量為5000到10000的聚乳酸與葵二酸混合、分子量為30000到80000的PLGA與葵二酸混合。
上述生物不可降解的多聚物包括，但不限于有機(jī)硅聚合物、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(Ethelene-vinyl acetate copolymer，EVAc)、聚丙烯腈(polyacrylonitriles)，聚氨基甲酸酯(polyurethanes)及聚磷腈(polyphosphazenes)等。組合物可通過直接擴(kuò)散的方式將有效成分釋放出來。
為調(diào)節(jié)藥物釋放速度或改變本發(fā)明抗癌藥物組合物的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調(diào)節(jié)藥用輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各種糖和鹽等。其中糖可為，但不限于，木糖醇、低聚糖及甲殼素等，其中鹽可為但不限于，鉀鹽和鈉鹽等。
本發(fā)明藥物組合物所用的藥用輔料可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質(zhì)，但以水溶性高分子聚合物為主選，在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLGA、乙醇酸和羥基羧酸的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羥基羧酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和羥基羧酸共聚時的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是對羧苯基丙烷(p-CPP)，對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸共聚時的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
藥用輔料在《藥用輔料大全》(第123頁，四川科學(xué)技術(shù)出版社1993年出版，羅明生和高天惠主編)中已有詳細(xì)描述。另外，中國專利(申請?zhí)?6115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美國發(fā)明專利(專利號5,651,986)也列舉了某些藥用輔料。包括充填劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻止劑。以上藥用輔料有的具有多重作用，因此有的同種物質(zhì)被列為不同的類別。本發(fā)明抗實體腫瘤組合物可選用的支持物可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質(zhì)，并不完全根據(jù)其分類或定義來限制組合物的技術(shù)特征。
因此，本發(fā)明的藥用輔料主要選自聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)、聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)葵二酸(SA)共聚物)、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)、木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠及白蛋白中的一種或其組合。其中聚乳酸(PLA)的分子量峰值為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000；聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)的分子量峰值為5000-15000、15000-35000、35000-45000或45000-80000；聚乙醇酸與羥基乙酸的重量比為10∶90，20∶80，30∶70，40∶60，50∶50或60∶40；聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)葵二酸(SA)共聚物)中對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸(SA)的重量比為10∶90，20∶80，30∶70，40∶60，50∶50或60∶40。
本發(fā)明的特點在于所用的藥用輔料除高分子聚合物外，還含有上述任意一種或多種其它藥用輔料。添加的藥用輔料統(tǒng)稱為添加劑。添加劑可根據(jù)其功能分為充填劑、致孔劑、賦型劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻止劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑等。
藥用輔料還可為流質(zhì)，如，但不限于芝麻油、混懸液、蒸餾水、生理沖液、以及半固態(tài)物質(zhì)，如(但不限于)果凍、糊劑、軟膏等，上述藥用輔料適用于含或不含添加劑的組合物。
為調(diào)節(jié)藥物釋放速度或改變本發(fā)明抗癌體內(nèi)植入劑的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調(diào)節(jié)藥用輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各種糖和鹽等。其中糖可為但不限于，木糖醇、低聚糖及甲殼素等，其中鹽可為但不限于，鉀鹽和鈉鹽等。
藥物組合物的用量取決于很多因素，如，但不限于，腫瘤體積、病人體重、給藥方式、病情進(jìn)展情況及治療反應(yīng)。但其原則是在能夠降低腫瘤細(xì)胞的修復(fù)能力，增加化療作用效果的同時并不明顯增加藥物的毒性反應(yīng)。有效劑量為0.01-100毫克/患者，以1-30毫克/患者為理想，以2-20毫克/患者為最理想。
本發(fā)明可制成各種形狀，其中有效成份的含量因不同需要而定?？芍瞥筛鞣N劑型，如，但不限于，針劑、渾懸液、軟膏、膠囊、植入劑、緩釋劑及植入緩釋劑等，其中植入劑主要為緩釋植入劑、控釋植入劑或遲釋植入劑；呈各種形狀，如，但不限于，顆粒狀、片狀、球形、塊狀、針狀、棒狀及膜狀；可經(jīng)各種途徑給藥，如動脈、皮下、肌肉、皮內(nèi)、腔內(nèi)、瘤內(nèi)、瘤周等。給藥途徑取決于多種因素，如腫瘤所在部位、是否手術(shù)或轉(zhuǎn)移、腫瘤體積大小、腫瘤類別、病人年齡、身體狀況、生育狀況及要求等。為于腫瘤所在部位獲得有效藥物濃度，可選擇性地動脈灌注，腔內(nèi)灌注(intracavitary)，腹腔(intraperitoneal)或胸腔(intrapleural)及椎管內(nèi)(intraspinal)給藥，也可臟器內(nèi)放置，如腸腔內(nèi)、膀胱內(nèi)、宮腔內(nèi)、陰道內(nèi)、胃內(nèi)及食道內(nèi)等。在各種途徑中，以局部給藥，如以選擇性動脈、瘤內(nèi)、瘤周注射為主，以瘤內(nèi)、瘤周或瘤腔放置緩慢釋放的形式為優(yōu)選，如可選用可種緩釋泵、緩釋膠囊、緩釋劑、植入劑及緩釋植入劑。
可用任意的方法制備。其主要成份的包裝方法和步驟在美國專利US5651986中已有詳細(xì)描述，包括若干種制備緩釋制劑的方法如，但不限于，(i)把載體支持物粉末與藥物混合然后壓制成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然后固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解于溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸發(fā)溶劑，乾燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧干燥法；及(v)冷凍干燥法等。其中溶解法可用以微球的制造，其方法是任意的，抗癌藥物組合物也可包裝脂質(zhì)體中。組合物的有效成分可均勻地包裝于整個藥用輔料中，也可包裝于載體支持物中心或其表面；可通過直接擴(kuò)散或經(jīng)多聚物降解的方式或如此兩種方式將有效成分釋放。
本發(fā)明治療顱外實體腫瘤的藥物組合物優(yōu)選下列之一，均為重量百分比(A)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(B)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(C)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乳酸；(D)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乳酸；(E)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚苯丙生；(F)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚苯丙生；(G)5-35％的卡莫司汀和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和1-95％的聚苯丙生；(H)5-35％的卡莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚苯丙生；(I)5-35％的卡莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(J)5-35％的卡莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和1-95％的聚苯丙生。
本發(fā)明藥物組合物用于治療顱外實體腫瘤，包括肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、直腸癌、睪丸癌、皮膚癌、頭頸部腫瘤和源于膽囊、口腔、外周神經(jīng)系統(tǒng)、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、眼睛、的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤。因此，本發(fā)明的應(yīng)用是用于制造治療上述腫瘤的上述各種藥物制劑，其中以針劑、渾懸液、軟膏、膠囊、植入劑、緩釋劑及緩釋植入劑為優(yōu)選，以緩釋植入劑、控釋植入劑或遲釋植入劑為最優(yōu)選。
本發(fā)明治療顱外實體腫瘤的藥物組合物中還可加入其它藥用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。由于本發(fā)明抗癌藥物組合物可使常規(guī)化療、免疫治療、高熱治療、光化學(xué)治療、電療、生物治療、激素治療、磁療、超聲治療、放療及基因治療等方法的作用效果加強(qiáng)。因此在局部緩慢釋放的同時可與上述非手術(shù)療法合用，從而使其抗癌效果進(jìn)一步加強(qiáng)。當(dāng)與上述非手術(shù)療法合用時，本發(fā)明抗癌藥物組合物可與非手術(shù)療法同時應(yīng)用，也可在非手術(shù)療法實施前幾天內(nèi)應(yīng)用，其目的在于盡可能增強(qiáng)腫瘤的敏感性，從而為根治各種人體及動物原發(fā)和轉(zhuǎn)移實體腫瘤提供一種更有效的新的方法，具有非常高的臨床應(yīng)用價值及顯著的經(jīng)濟(jì)和社會效益。
當(dāng)局部應(yīng)用時，該組合物可直接置于原發(fā)或轉(zhuǎn)移的實體腫瘤周圍或瘤體內(nèi)，也可直接置于原發(fā)或轉(zhuǎn)移的實體腫瘤全部或部分切除后所形成的腔內(nèi)。
本發(fā)明治療顱外實體腫瘤的藥物組合物中主要成份以生物可容性物質(zhì)為支持物，故不引起異物反應(yīng)。支持物體內(nèi)放置后可降解吸收，故不再手術(shù)取出。因在腫瘤局部釋放所含藥物，從而選擇性地提高并延長局部藥物濃度，同時可降低由常規(guī)途徑給藥所造成的全身毒性反應(yīng)。對顱外實體腫瘤具有明顯的治療作用。
本發(fā)明治療顱外實體腫瘤的藥物組合物中可通過許多方案予以實施，其目的只是為了進(jìn)一步說明，并非對本發(fā)明的實施加以任何限制。
試驗一、卡莫司汀對顱外腫瘤細(xì)胞生長的抑制作用。
為驗證卡莫司汀對顱外腫瘤細(xì)胞生長的抑制作用，本試驗將卡莫司汀(10ug/ml)加到體外培養(yǎng)24小時的各種顱外腫瘤細(xì)胞中(表1)，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后計數(shù)細(xì)胞總數(shù)并計算其對腫瘤細(xì)胞生長的抑制率(％)。
腫瘤細(xì)胞生長的抑制率(％)＝((對照組細(xì)胞數(shù)-試驗組細(xì)胞數(shù))/對照組細(xì)胞數(shù))×100％表1
試驗一的結(jié)果表明，與對照組相比，卡莫司汀對所試腫瘤的生長均有明顯抑制作用(P＜0.05)，其中對。這一意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的主要技術(shù)特征，為顱外實體腫瘤的治療提供了新的選擇。
本發(fā)明治療顱外實體腫瘤的藥物組合物可制成任意劑型或形狀，但以植入的緩慢釋放劑為優(yōu)選。
本發(fā)明治療顱外實體腫瘤的藥物組合物制備方法如下
(1)將稱重的藥用輔料放入容器中，加一定量的有機(jī)溶劑溶解均勻，有機(jī)溶劑的量不嚴(yán)格限定，以充分溶解為宜。
(2)加入稱重之抗癌有效成份重新?lián)u勻?？拱┯行С煞菖c藥用輔料的用量比例因具體要求而定。
(3)去除有機(jī)溶劑。真空干燥或低溫干燥法均可。
(4)將干燥后的固體組合物根據(jù)需要制成各種形狀。
(5)分裝后射線滅菌(射線劑量因體積而異)備用。也可用其它方法滅菌。
具體實施方式
實施例一將90mg的藥用輔料分子量為10000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加有機(jī)溶劑100毫升二氯甲烷溶解混勻，加入10mg卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比10％卡莫司汀的治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。
實施例二如實施例一所述，所不同的是組分為下列之一，均為重量百分比(A)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(B)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(C)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乳酸；(D)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乳酸；(E)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚苯丙生；(F)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚苯丙生。
實施例三將稱重85mg的藥用輔料分子量為15000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加有機(jī)溶劑100毫升二氯甲烷溶解混勻，加入15mg卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比15％卡莫司汀的治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。
實施例四如實施例三所述，所不同的是組分為下列之一，均為重量百分比(A)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(B)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(C)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乳酸；(D)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乳酸；(E)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚苯丙生；(F)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚苯丙生。
實施例五將稱重80mg的藥用輔料分子量為15000的乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)放入容器中，加有機(jī)溶劑100毫升二氯甲烷溶解混勻，加入20mg卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比20％卡莫司汀的治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。
實施例六如實施例五所述，所不同的是組分為下列之一，均為重量百分比
(A)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(B)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(C)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乳酸；(D)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乳酸；(E)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚苯丙生；(F)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚苯丙生。
實施例七將85mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷葵二酸重量比為20∶80)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入15mg卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比15％卡莫司汀的治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。該體內(nèi)植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為25-40天。
實施例八如實施例七所述，所不同的是組分為下列之一，均為重量百分比(A)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(B)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(C)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乳酸；(D)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乳酸；(E)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚苯丙生；(F)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚苯丙生。
實施例九將稱重80mg的藥用輔料分子量為10000的乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入20mg卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比20％卡莫司汀的治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。
實施例十將稱重的藥用輔料40mg分子量為20000的聚乳酸和40mg分子量為20000的聚苯丙生(對羧苯基丙烷∶葵二酸重量比為20∶80)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入20mg卡莫司汀，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機(jī)溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到含重量百分比20％卡莫司汀的治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，做為抗癌體內(nèi)植入劑。
實施例十一如實施例十所述，所不同的是組分為下列之一，均為重量百分比(A)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(B)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(C)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乳酸；(D)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乳酸；(E)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚苯丙生；(F)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚苯丙生；(G)5-35％的卡莫司汀和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和1-95％的聚苯丙生；
(H)5-35％的卡莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚苯丙生；(I)5-35％的卡莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(J)5-35％的卡莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和1-95％的聚苯丙生。
實施例十二如實施例一到實施例十一所述的治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，所不同的是所用藥用輔料選自下列之一或其組合a)分子量為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乳酸(PLA)；b)分子量為5000-15000、15000-35000、35000-45000或45000-80000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)；c)乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)；d)聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)共聚物)，對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸(SA)的重量百分比為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；e)木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠或白蛋白。
實施例十三不同實施例藥物體外釋放特性比較將實施例十一中的植入劑放在室溫生理鹽水中浸泡，測不同時間藥物(卡莫司汀)的釋放量，并計算累計釋放百分?jǐn)?shù)(％)。見表2所示。
表2
實施例十四不同實施例藥物體內(nèi)釋放特性比較將實施例十一中的抗癌體內(nèi)植入劑放于小白鼠皮下，定時取出測定藥物含量，根據(jù)剩余藥物量，并計算累計釋放百分?jǐn)?shù)(％)。見表3所示。
表3
由表2和3可以看出，體內(nèi)外釋放卻有明顯差異，體外釋放較體內(nèi)釋放為快，體外釋放50％需5天時間，而體內(nèi)外釋放50％卻需10-14天時間。體外第一天釋放11-23％左右，第14天釋放78-92；體內(nèi)第一天釋放6-12％左右，第14天釋放56-73，第28天釋放82-96％。特別值得注意的是，當(dāng)聚苯丙生與PLGA或PLA合用時明顯延長了藥物的釋放時間，這一意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的又一主要技術(shù)特征，為更好控制藥物釋放時間提供了新的指導(dǎo)。
在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)體內(nèi)植入BCNU對肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、膀胱癌、睪丸癌、結(jié)腸癌、直腸癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌及前列腺癌等其它顱外實體腫瘤也具有很好的治療作用。局部藥物緩釋在保證了局部用藥范圍內(nèi)持久而較穩(wěn)定的藥物濃度的同時，明顯降低了全身藥物濃度，減輕了毒副作用。
腫瘤內(nèi)植入BCNU對顱外實體腫瘤的抑制作用實驗方法和步驟腫瘤細(xì)胞接種于小鼠的右側(cè)腋窩皮下，當(dāng)腫瘤直徑生長至0.8cm左右時(接種后第8天)，將動物隨機(jī)分為7組，每組10只。即生理鹽水組、卡莫司汀腹腔注射組(以下簡稱卡莫司汀腹腔組)、卡莫司汀局部注射組(簡稱卡莫司汀局部組)、高分子聚合物組(簡稱高聚組)、卡莫司汀緩釋植入劑7.5％組、卡莫司汀緩釋植入劑15％組，卡莫司汀緩釋植入劑30％組(簡稱植入劑7.5％、植入劑15％、植入劑30％)。用70％酒精消毒腫瘤表面皮膚，選擇距腫瘤下緣1cm處，剪開1mm長切口，用穿刺針將卡莫司汀植入劑植入腫瘤組織中，不含藥高分子聚合物、卡莫司汀植入劑7.5％、卡莫司汀植入劑15％、卡莫司汀植入劑30％。
縫合切口防止植入劑漏出。每3天用游標(biāo)卡尺測量腫瘤大小，植入劑包埋后15天處死動物，稱體重后完整剝離腫瘤并稱瘤重。計算腫瘤抑制率％，DAS.ver1.0藥理學(xué)軟件做統(tǒng)計學(xué)處理。
實施例十五腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用按照上述方法和步驟檢驗卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用。所用的輔料為PLGA(分子量為10000-15000，聚乙醇酸和羥基乙酸的共混比為50∶50)。實驗結(jié)果見表4表4、腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀植入劑小鼠肺癌(Lewis)的生長抑制作用組別劑量 動物數(shù)給藥途徑 體重(x±s，g) 瘤重 抑制率 p值(mg/kg) (只) 次數(shù) 前后(x±s.g) (％)生理鹽水組10ip×1 19.61±1.15 21.775±1.1 5.4089±0.921 -卡莫司汀腹腔組 21.76810ip×1 19.84±2.021.057±1.6 3.669±0.728 32.14 ＜0.001卡莫司汀局部組 21.76810ip×1019.64±1.822.387±2.1 4.309±0.549 20.47 ＝0.005
高聚組 0 10瘤內(nèi)植入 19.52±1.5 23.634±0.95 5.389±0.644 0.36 ＞0.1植入劑7.5％組117.1810瘤內(nèi)植入 19.42±1.2 22.089±1.5 4.738±0.834 12.37 ＞0.1植入劑15％組 234.3710瘤內(nèi)植入 19.89±1.1 19.043±1.7 1.353±0.764 74.9 ＜0.001植入劑30％組 468.7510瘤內(nèi)植入 19.11±1.7 16.803±170.458±0.266 91 5 ＜0.001本次實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑(117.18mg.Kg-1、234.37mg.Kg-1、468.75mg.Kg-1)植入小鼠模型乳腺癌實體腫瘤中，能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系，實驗結(jié)果卡莫司汀植入劑腫瘤抑制率分別為12.37％、74.9％、91.5％，與卡莫司汀局部注射組比較；P值均小于0.001。重復(fù)實驗?zāi)[瘤抑制率分別為10.46％、71.77％、90.73％，與卡莫司汀局部注射組比較；P值均小于0.001。差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義。卡莫司汀腹腔注射組和卡莫司汀局部注射組與生理鹽水組比較腫瘤抑制率為12.71％和5.085％，重復(fù)實驗?zāi)[瘤抑制率為11.11％和11.568％?？就≈踩雱┑囊至雎拭黠@超過卡莫司汀腹腔注射組和卡莫司汀局部注射組，兩次實驗結(jié)果重復(fù)性好。
實施例十六腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠乳腺癌的抑瘤作用按照實施例十五所述方法和步驟檢驗卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠乳腺癌的抑瘤作用，所用的植入劑輔料為聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸(SA)的重量百分比為50∶50)。實驗結(jié)果表明卡莫司汀植入劑腫瘤抑制率分別為12.37％、74.9％、91.5％，與卡莫司汀局部注射組比較；P值均小于0.001。用重復(fù)實驗?zāi)[瘤抑制率分別為10.46％、71.77％、90.73％，與卡莫司汀局部注射組比較；P值均小于0.001。差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義?？就「骨蛔⑸浣M和卡莫司汀局部注射組與生理鹽水組比較腫瘤抑制率為12.71％和5.085％，重復(fù)實驗?zāi)[瘤抑制率為11.11％和11.568％?？就≈踩雱┑囊至雎拭黠@超過卡莫司汀腹腔注射組和卡莫司汀局部注射組，兩次實驗結(jié)果重復(fù)性好。
實施例十七腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠肝癌的抑瘤作用按照實施例十五所述方法和步驟檢驗卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠肝癌的抑瘤作用，所用的植入劑輔料為聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸(SA)的重量百分比為50∶50)。實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑(117.18mg.Kg-1、234.37mg.Kg-1、468.75mg.Kg-1)植入小鼠肝癌(H22)實體腫瘤中，能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系，實驗結(jié)果卡莫司汀植入劑腫瘤抑制率分別為51.35％、69.93％、88.14％，與卡莫司汀局部注射組比較；低劑量組P值等于0.001，中、高劑量組P值均小于0.001。重復(fù)實驗?zāi)[瘤抑制率分別為35.297％、70.617％、85.93％，與卡莫司汀局部注射組比較；低劑量組P值小于0.05。中、高劑量組P值均小于0.001。差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義。卡莫司汀腹腔注射組和卡莫司汀局部注射組與生理鹽水組比較腫瘤抑制率為29.286％和24.564％，重復(fù)實驗?zāi)[瘤抑制率為26.36％和19.899％?？就≈踩雱┑囊至雎拭黠@超過卡莫司汀腹腔注射組和卡莫司汀局部注射組，兩次實驗結(jié)果重復(fù)性好。
實施例十八腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠食道癌的抑瘤作用按照實施例十五所述方法和步驟檢驗卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠食道癌的抑瘤作用，所用的植入劑輔料為PLGA(分子量為20000-35000，聚乙醇酸和羥基乙酸的共混比為50∶50)。實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑(117.18mg.Kg-1、234.37mg.Kg-1、468.75mg.Kg-1)植入裸鼠模型人食管癌(9706)實體腫瘤中，能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系，實驗結(jié)果卡莫司汀植入劑腫瘤抑制率分別為24.15％、63.08％、78.761％，與卡莫司汀局部注射組比較；P值均小于0.001。重復(fù)實驗?zāi)[瘤抑制率分別為59.767％、81.23％、83.815％，與卡莫司汀局部注射組比較；P值均小于0.001。差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義?？就「骨蛔⑸浣M和卡莫司汀局部注射組與生理鹽水組比較腫瘤抑制率為12.71％和5.085％，重復(fù)實驗?zāi)[瘤抑制率為11.11％和11.568％?？就≈踩雱┑囊至雎拭黠@超過卡莫司汀腹腔注射組和卡莫司汀局部注射組，兩次實驗結(jié)果重復(fù)性好。
實施例十九腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠胰腺癌的抑瘤作用按照實施例十五所述方法和步驟檢驗卡莫司汀緩釋植入劑對小鼠胰腺癌的抑瘤作用，所用的植入劑輔料為PLGA(分子量為20000-35000，聚乙醇酸和羥基乙酸的共混比為50∶50)。實驗結(jié)果證明不同劑量的卡莫司汀植入劑(117.18mg.Kg-1、234.37mg.Kg-1、468.75mg.Kg-1)植入裸鼠模型人胰腺癌(JF305)實體腫瘤中，能明顯抑制腫瘤生長，腫瘤抑制率與藥物劑量呈明顯量效關(guān)系，實驗結(jié)果卡莫司汀植入劑腫瘤抑制率分別為29.34％、56.71％、86.212％，與卡莫司汀局部注射組比較；P值均小于0.001。重復(fù)實驗?zāi)[瘤抑制率分別為57.845％、74.16％、81.9％，與卡莫司汀局部注射組比較；P值均小于0.001。差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義?？就「骨蛔⑸浣M和卡莫司汀局部注射組與生理鹽水組比較腫瘤抑制率為20.34％和6.71％。重復(fù)實驗?zāi)[瘤抑制率為11.51％和8.995％?？就≈踩雱┑囊至雎拭黠@超過卡莫司汀腹腔注射組和卡莫司汀局部注射組，兩次實驗結(jié)果重復(fù)性好。
另外，腫瘤內(nèi)植入卡莫司汀緩釋植入劑對胃癌、膀胱癌、睪丸癌、結(jié)腸癌、直腸癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌及前列腺癌等其它顱外實體腫瘤也具有很好的治療作用，其作用明顯超過卡莫司汀腹腔注射組和卡莫司汀局部注射組。這一意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的主要技術(shù)特征，為顱外實體腫瘤的治療藥物提供了又一新的選擇。
權(quán)利要求
1.一種治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物含抗癌有效量的卡莫司汀和藥用輔料。
2.如權(quán)利要求1所述之治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物為針劑、混懸劑或植入劑。
3.如權(quán)利要求2所述之治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，其特征在于所述植入劑為緩釋植入劑、控釋植入劑或遲釋植入劑。
4.如權(quán)利要求1所述之治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，其特征在于藥用輔料選自高分子多聚物、高分子多聚物的混合物或共聚物、水溶性低分子化合物。
5.如權(quán)利要求1所述之治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，其特征在于所用藥用輔料選自聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、聚苯丙生、乙烯乙酸乙烯酯共聚物、木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、軟骨素、明膠及白蛋白中的一種或其組合。
6.如權(quán)利要求1所述之治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物組份為下列之一，重量百分比(A)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(B)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(C)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚乳酸；(D)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚乳酸；(E)5-15％的卡莫司汀和85-95％的聚苯丙生；(F)15-35％的卡莫司汀和65-85％的聚苯丙生；(G)5-35％的卡莫司汀和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和1-95％的聚苯丙生；(H)5-35％的卡莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚苯丙生；(I)5-35％的卡莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；(J)5-35％的卡莫司汀和1-95％的聚乳酸和1-95％的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物和1-95％的聚苯丙生。
7.如權(quán)利要求5或6所述之治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，其特征在于聚乳酸的分子量峰值為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000。
8.如權(quán)利要求5或6所述之治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，其特征在于聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物的分子量峰值為5000-15000、15000-35000、35000-45000或45000-80000；聚乙醇酸與羥基乙酸的重量比為10∶90，20∶80，30∶70，40∶60，50∶50或60∶40。
9.如權(quán)利要求5或6所述之治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，其特征在于聚苯丙生中對羧苯基丙烷與葵二酸的重量比為10∶90，20∶80，30∶70，40∶60，50∶50或60∶40。
10.權(quán)利要求1～9所述之任一種治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，用于制備治療顱外實體腫瘤的藥物，所述的顱外實體腫瘤包括肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、直腸癌、睪丸癌、皮膚癌、頭頸部腫瘤和源于膽囊、口腔、外周神經(jīng)系統(tǒng)、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結(jié)、眼睛的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤。
全文摘要
一種治療顱外實體腫瘤的藥物組合物，該藥物組合物含抗癌有效量的卡莫司汀和藥用輔料。藥用輔料主要為生物可容性可降解吸收的高分子多聚物，在其降解吸收的過程中能將卡莫司汀緩慢釋放于腫瘤局部，在明顯降低其全身毒性反應(yīng)的同時還可于腫瘤局部維持有效藥物濃度。腫瘤局部放置該抗藥物組合物不僅能夠降低卡莫司汀的全身毒性反應(yīng)，同時還能選擇性地提高腫瘤局部的藥物濃度，增強(qiáng)化療藥物及放射治療等非手術(shù)療法的治療效果。顱外實體腫瘤包括肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宮癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、直腸癌、皮膚癌、頭頸部腫瘤和源于外周神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)或繼發(fā)的癌。
文檔編號A61K31/17GK1698592SQ200510043480
公開日2005年11月23日 申請日期2005年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月13日
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