專利名稱：一種調(diào)節(jié)女性陰道微生態(tài)的提取液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種婦科病用藥，具體為一種調(diào)節(jié)女性陰道微生態(tài)的提取液。
背景技術(shù)：
眾所周知，女性下生殖道為開(kāi)放性腔道，是人體內(nèi)重要的微生態(tài)區(qū)，正常情況下是以優(yōu)勢(shì)菌為主組成的微生態(tài)系統(tǒng)。而女性陰道微生態(tài)失衡是引起婦科外陰及陰道炎癥反復(fù)發(fā)作的主要原因。在維持陰道微生態(tài)平衡的因素中，雌激素、乳酸桿菌及陰道酸堿度(PH) 起著至關(guān)重要的作用。在正常的生理情況下，雌激素使陰道上皮增生變厚并富含糖原，增加對(duì)病原體的抵抗力；糖原在陰道乳酸桿菌作用下分解為乳酸，維持陰道正常的酸性環(huán)境 (pH彡4. 5，多在3. 8 4. 4)，抑制其他寄生菌及其病原體的生長(zhǎng)，這是陰道的自凈作用。陰道內(nèi)正常菌群是陰道微生態(tài)研究的核心內(nèi)容，早在1892年，Dederlein首次發(fā)表了關(guān)于人類陰道微生態(tài)菌群的研究。后來(lái)人們發(fā)現(xiàn)健康女性的陰道菌群由多種厭氧菌和需氧菌構(gòu)成。目前，陰道分泌物中已分離到四種之多的微生物，其中最重要的是乳酸桿菌，它在健康女性的陰道排出物標(biāo)本中分離率高達(dá)50% 80%。它能產(chǎn)生一些抗微生物的物質(zhì)，包括乳酸、細(xì)菌素、乳酸素B和過(guò)氧化氫。產(chǎn)過(guò)氧化氫的乳酸桿菌在控制陰道微生態(tài)環(huán)境中起重要作用，并通過(guò)與其他過(guò)氧化物的聯(lián)合作用抑制其他病原體過(guò)度生長(zhǎng)。另一方面，乳酸桿菌造成的酸性環(huán)境又有利于減少細(xì)胞表面負(fù)電荷和去除覆蓋于受體表面的糖基，暴露受體而有助于細(xì)菌黏附。因此乳酸桿菌是通過(guò)正反兩方面調(diào)節(jié)正常陰道的菌群。陰道微生態(tài)平衡一旦被打破或外源病原體侵入，即可導(dǎo)致炎癥發(fā)生，如雌激素水平改變或陰道PH升高；濫用或使用抗生素會(huì)使病菌產(chǎn)生耐藥性，并殺死大量有益菌，破壞陰道菌群的平衡，從而導(dǎo)致真菌生長(zhǎng)旺盛，婦科疾病頑固難纏，難以徹底根治。綜上所述，改善陰道微環(huán)境，修復(fù)陰道微損傷，維持陰道微生態(tài)平衡、改善陰道清潔度、提高陰道粘膜免疫力，對(duì)于治療女性陰道常見(jiàn)疾病具有重要意義，同時(shí)要考慮避免使用抗生素所引發(fā)的耐藥性、二重感染、過(guò)敏反應(yīng)以及對(duì)機(jī)體的毒副作用等弊端。目前市場(chǎng)上出現(xiàn)的婦科凝膠多為中藥成分，且主要是通過(guò)抑制有害病菌來(lái)達(dá)到治療婦科病的目的，在殺滅致病菌的同時(shí)也殺滅了很多益生菌，導(dǎo)致陰道內(nèi)菌群失調(diào)、陰道免疫力低下，從而致使陰道炎反復(fù)發(fā)作，無(wú)法根治。由于臨床上抗菌和抗感染類藥物的廣泛使用甚至濫用，引發(fā)了當(dāng)前各種嚴(yán)重問(wèn)題細(xì)菌耐藥性逐年增加，某些抗感染藥物療效降低乃至失效，甚至若干已控制的傳染病又有再度流行的趨勢(shì)。故開(kāi)發(fā)新的抗感染類藥物刻不容緩。盡管到目前為止，任何抗感染類中藥的作用都不能與西藥相提并論，但抗感染類中藥以其副作用小、耐藥性低等西藥無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì)，越來(lái)越受到人們的青睞，由此開(kāi)發(fā)抗感染類中藥就顯得更加重要。同時(shí)，由于婦科疾病為成年女性的常見(jiàn)病，具有反復(fù)發(fā)作、病因復(fù)雜且常伴有多種嚴(yán)重并發(fā)癥的特點(diǎn)， 患者常需要長(zhǎng)期用藥，加之我國(guó)女性長(zhǎng)久以來(lái)形成的用藥習(xí)慣等因素，且中成藥在常見(jiàn)婦科感染疾病的治療方面具有獨(dú)特的功效，故開(kāi)發(fā)具有抗菌功效的中藥婦科洗液迫在眉睫。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明一種能夠殺滅女性陰道內(nèi)致病菌中藥制劑，調(diào)節(jié)女性陰道微生態(tài)的提取液。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案本發(fā)明一方面涉及一種調(diào)節(jié)女性陰道微生態(tài)的中藥組合物，其特征在于以重量份數(shù)中藥制成甘草1-2份、丁香1-2份、蛇床子1-2份、石榴皮1-2份、五倍子1-2份、虎杖1-2 份、五味子1-2份、白頭翁1-2份、黃連1-2份、黃柏1-2份、木香1-2份和生百部1_2份。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，其特征在于該組合物是水提醇沉的提取液。本發(fā)明還涉及上述中藥組合物的提取物的制備方法，其特征在于包括如下步驟 將藥材粉碎，加入水，加熱煮沸，然后煎煮，趁熱抽濾，將藥渣加水繼續(xù)煎煮，重復(fù)2-3次，最后將藥液合并在一起，將合并的藥液用30-50%濃度的乙醇進(jìn)行醇沉提取，靜置后取上清液，回收乙醇并濃縮得藥液。本發(fā)明還涉及一種藥物制劑，其特征在于上述中藥組合物以及藥物上可接受的輔料制成藥學(xué)上可接受的劑型。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，其特征在于所述的藥物上可接受的劑型是洗液、凝膠劑或栓劑。本發(fā)明還涉及一種凝膠劑，其特征在于由上述中藥組合物以及藥學(xué)上可接受的輔料制成，其中所述的藥學(xué)上可接受的輔料包括脂肪重聚氧乙烯醚硫酸鹽，蒸餾水，十二烷基苯磺酸鈉，甘油，乙醇，檸檬酸，薄荷腦，NaCl以及防腐劑中的一種或2種或3種或全部。本發(fā)明還涉及上述中藥組合物在制備調(diào)節(jié)女性陰道微生態(tài)的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及上述中藥組合物在體外抗菌或在制備抗菌藥物中的應(yīng)用。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，其中所述的抗菌是指抗金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、糞鏈球菌、大腸桿菌、變形桿菌、白色念珠菌、熱帶念珠菌、克柔念珠菌和/或其他念珠菌。本發(fā)明得到的中藥組合物可直接用于女性陰道，有效去除陰道內(nèi)的致病菌，能同時(shí)抗金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、糞鏈球菌、大腸桿菌、變形桿菌、白色念珠菌、熱帶念珠菌、克柔念珠菌和其他念珠菌。
具體實(shí)施例方式中藥配方甘草、丁香、石榴皮、五倍子、五味子、虎杖、黃柏、黃連、白頭翁、木香、蛇床子、生百部。以上藥品均購(gòu)于銀川市興慶區(qū)古方大藥房凝膠處方脂肪重聚氧乙烯醚硫酸鹽(AES 98% ) :14.細(xì)1，蒸餾水57. 6ml，十二烷基苯磺酸鈉0. 192g，甘油:7ml，乙醇(95% ) :6ml，復(fù)方甘草提取液8ml，檸檬酸0. 096g，薄荷腦 1. 0g, NaCl :4g，防腐劑0. 5g共制100ml制作工藝(一 )復(fù)方甘草藥液的提取取甘草、丁香、蛇床子、石榴皮、五倍子、虎杖、五味子、白頭翁、黃連、黃柏、木香和生百部，將其粉碎，然后各稱取約10g，放入IOOOml的平底燒瓶中，用量筒量取880ml的水， 攪拌加入，然后置入電熱套中加熱，先調(diào)至100°C沸騰之后再調(diào)到50°C進(jìn)行煎煮，煎煮1小時(shí)，1小時(shí)后放置一會(huì)趁熱抽濾，給藥渣中再加入880ml的水繼續(xù)煎煮，重復(fù)三次，最后將三次藥液合并在一起，將合并的藥液用40%的乙醇進(jìn)行醇沉提取，靜置M小時(shí)后取上清液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收乙醇，最后將回收過(guò)乙醇的藥液濃縮至Iml藥液相當(dāng)于2. 5g原藥材，放置(二)AES 的溶解量取MmlAES于燒杯(500ml)中，加水(AES 水=1 4)，用攪拌器攪拌(攪拌轉(zhuǎn)速適中，加熱溫度70到90攝氏度，時(shí)間1. 5小時(shí))，至充分溶解。(三)成品制備取AES溶解液72ml、十二烷基苯磺酸鈉0. 192g、甘油7ml、乙醇6ml、復(fù)方甘草提取液8ml、薄荷腦lg、NaCl (增稠劑)4g、檸檬酸(PH調(diào)節(jié)劑)0. 096g、以及雙乙酸鈉(防腐劑)0. 5g，于燒杯中，將燒杯放置于電熱套中加熱，加熱溫度控制在80到85攝氏度，同時(shí)用攪拌器攪拌(攪拌轉(zhuǎn)速適中，時(shí)間1. 5小時(shí)左右)，攪拌至完全混合呈澄清狀態(tài)即可。此時(shí) PH值達(dá)到6左右，每Iml凝膠含藥量為0. 2g。抑菌試驗(yàn)(一 )培養(yǎng)基的制備營(yíng)養(yǎng)瓊脂稱取瓊脂6.4g，加入200ml水，攪拌加熱煮沸，121°C高壓滅菌15min，分裝至直徑9厘米培養(yǎng)皿中，15-20ml/個(gè)，制成平板備用。MH肉湯(單料)稱取本品2. 7g，加入IOOml蒸餾水于錐形瓶Q50ml)中，攪拌煮沸溶解，121°C高壓滅菌15min備用。MH肉湯(雙料)稱取本品5. 4g，加入IOOml蒸餾水，攪拌加熱煮沸，121°C高壓滅菌15min備用。營(yíng)養(yǎng)肉湯(NB)稱取本品1. 8g，加入IOOml蒸餾水于錐形瓶Q50ml)中，攪拌煮沸溶解，121 °C高壓滅菌15min備用。生理鹽水稱取0. 9g加入IOOml蒸餾水?dāng)嚢柚蠓腥芙?，高壓滅菌? 二)菌液制備將接種于滅菌好的培養(yǎng)基中，37°C 18-24小時(shí)培養(yǎng)后，用無(wú)菌生理鹽水校正濃度至107-108CFU/ml (菌落形成單位)，即為供試菌的菌懸液。用接種環(huán)于培養(yǎng)好的各種受試菌株的培養(yǎng)基上劃取一個(gè)菌落分裝在3ml的MH肉湯(雙料)中，放置于搖床(37°C，50r) 中，培養(yǎng)6小時(shí)，即為供試菌的菌液。(三)菌液的稀釋將30ul各種受試菌株接種于30ml的營(yíng)養(yǎng)肉湯中，放置于搖床(37°C，50r)中，培養(yǎng)6小時(shí)。(四)抑菌試驗(yàn)將復(fù)方甘草原藥液1ml，MH單料Iml分別置于1_9號(hào)試管中，并依次加入IOOul大腸桿菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、白色念球菌、克柔念珠菌、糞鏈球菌、熱帶念珠菌、其他念珠菌，再將凝膠洗液lml，MH單料Iml分別置于10-18號(hào)試管中，并依次加入IOOul大腸桿菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、白色念球菌、克柔念珠菌、糞鏈球菌、熱帶念珠菌、其他念珠菌，然后將anlMH肉湯(單料)分別置于19-27號(hào)試管中， 并依次加入IOOul大腸桿菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、白色念球菌、克柔念珠菌、糞鏈球菌、熱帶念珠菌、其他念珠菌，最后于觀號(hào)試管中加入anlMH肉湯(單料)， 將1- 號(hào)試管均放置于搖床(37°C，50r)中，培養(yǎng)16-18小時(shí)。(因?yàn)橹兴幰罕旧淼臏啙岷腿藶橐曈X(jué)的差異，細(xì)菌生長(zhǎng)后，使得肉眼無(wú)法觀察，或觀察的實(shí)驗(yàn)結(jié)果易出現(xiàn)偏差。因此，需要將試管中的液體接種于固體培養(yǎng)皿中觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況。)轉(zhuǎn)種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基上，用接種環(huán)涂布，置37°C電熱恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)16 18小時(shí)，最后觀察菌落的生長(zhǎng)狀況。 平行做3次，以2次或3次相同結(jié)果為準(zhǔn)。(五)抑菌試驗(yàn)結(jié)果用復(fù)方甘草原藥液、凝膠洗液對(duì)金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、糞鏈球菌、大腸桿菌、變形桿菌、白色念珠菌、克柔念珠菌、熱帶念珠菌、其他念珠菌進(jìn)行體外抑菌實(shí)驗(yàn)，抑
菌結(jié)果表一表一復(fù)方甘草原藥液、凝膠洗液體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果(mg/ml)
權(quán)利要求
1.調(diào)節(jié)女性陰道微生態(tài)的中藥組合物，其特征在于以重量份數(shù)中藥制成甘草1-2份、 丁香1-2份、蛇床子1-2份、石榴皮1-2份、五倍子1-2份、虎杖1-2份、五味子1_2份、白頭翁1-2份、黃連1-2份、黃柏1-2份、木香1-2份和生百部1-2份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于該組合物是水提醇沉的提取液。
3.權(quán)利要求2所述的中藥組合物的提取物的制備方法，其特征在于包括如下步驟將藥材粉碎，加入水，加熱煮沸，然后煎煮，趁熱抽濾，將藥渣加水繼續(xù)煎煮，重復(fù)2-3次，最后將藥液合并在一起，將合并的藥液用30-50%濃度的乙醇進(jìn)行醇沉提取，靜置后取上清液， 回收乙醇并濃縮得藥液。
4.一種藥物制劑，其特征在于由權(quán)利要求1或2所述的中藥組合物以及藥物上可接受的輔料制成藥學(xué)上可接受的劑型。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物制劑，其特征在于所述的藥物上可接受的劑型是洗液、 凝膠劑或栓劑。
6.一種凝膠劑，其特征在于由權(quán)利要求1或2所述的中藥組合物以及藥學(xué)上可接受的輔料制成，其中所述的藥學(xué)上可接受的輔料包括脂肪重聚氧乙烯醚硫酸鹽，蒸餾水，十二烷基苯磺酸鈉，甘油，乙醇，檸檬酸，薄荷腦，NaCl以及防腐劑中的一種或2種或3種或全部。
7.權(quán)利要求1或2所述的中藥組合物在制備調(diào)節(jié)女性陰道微生態(tài)的藥物中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1或2所述的中藥組合物在體外抗菌或在制備抗菌藥物中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其中所述的抗菌是指抗金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、糞鏈球菌、大腸桿菌、變形桿菌、白色念珠菌、熱帶念珠菌、克柔念珠菌和/或其他念珠菌。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種調(diào)節(jié)女性陰道微生態(tài)的中藥組合物，其特征在于以重量份數(shù)中藥制成甘草1-2份、丁香1-2份、蛇床子1-2份、石榴皮1-2份、五倍子1-2份、虎杖1-2份、五味子1-2份、白頭翁1-2份、黃連1-2份、黃柏1-2份、木香1-2份和生百部1-2份。本發(fā)明得到的中藥組合物可直接用于女性陰道，有效去除陰道內(nèi)的致病菌，能同時(shí)抗金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、糞鏈球菌、大腸桿菌、變形桿菌、白色念珠菌、熱帶念珠菌、克柔念珠菌和其他念珠菌。
文檔編號(hào)A61P31/04GK102293972SQ20111024471
公開(kāi)日2011年12月28日 申請(qǐng)日期2011年8月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月25日
發(fā)明者付雪艷, 孫磊, 廉軍利, 張義偉, 張彩芳, 張新慧, 潘建榮, 白長(zhǎng)才, 葛青, 董林, 趙云生, 馬學(xué)琴 申請(qǐng)人:寧夏醫(yī)科大學(xué)