專利名稱：減少藥物副作用的方法
本申請(qǐng)是1989年3月13日申請(qǐng)的編號(hào)為07/322，209的申請(qǐng)的部分繼續(xù)申請(qǐng);同樣，07/322，209申請(qǐng)是1986年1月27申請(qǐng)的編號(hào)為07/007，763的申請(qǐng)的部分繼續(xù)申請(qǐng)，而07/007，763申請(qǐng)又是1984年7月17日申請(qǐng)的編號(hào)為06/631，806的申請(qǐng)的部分繼續(xù)申請(qǐng)。上面提及的申請(qǐng)(即07/322，209，07/007，763，06/631，806)現(xiàn)已經(jīng)被放棄。
本發(fā)明涉及化學(xué)療法領(lǐng)域，更具體地說，它涉及減少化學(xué)治療劑副作用的方法。
假如副作用并不妨礙藥物的較大劑量的使用，那么藥物將變得更有效。副作用的產(chǎn)生是因?yàn)樗幬餂]有完全集中作用于需作治療的生物體細(xì)胞或微生物而引起的。當(dāng)藥物誤作用于某些生物體細(xì)胞而該細(xì)胞并不是該藥物的靶細(xì)胞時(shí)，其副作用尤為明顯。
舉例來說，例如用于其他靶目標(biāo)的藥物對(duì)胃腸細(xì)胞同樣有毒性，那么就會(huì)產(chǎn)生惡心、嘔吐和腹瀉，以及胃腸出血。假如藥物對(duì)造血細(xì)胞有毒性，則會(huì)產(chǎn)生貧血癥、易患感染(由于白細(xì)胞數(shù)不足)和出血。假如藥物對(duì)皮膚細(xì)胞有毒性，則會(huì)產(chǎn)生脫發(fā)和皮疹。
癌難以從人體根除掉的原因是因?yàn)槟切绨┘?xì)胞的藥劑(下文稱為溶癌劑或抗癌劑)，在殺滅癌細(xì)胞的同時(shí)也殺滅了那些正常分裂細(xì)胞，如腸、造血骨髓和皮膚的正常分裂細(xì)胞。假如正常細(xì)胞能免受抗癌劑的細(xì)胞毒素的作用，那么就能安全地使用較高劑量的抗癌劑。因?yàn)楦邉┝磕軞绺甙俜直鹊陌┘?xì)胞，這樣才有可能殺滅因目前使用劑量低而能存活的那些少量的癌細(xì)胞。
病毒難于從人體根除的原因是由于那些殺滅病毒的藥劑，在殺滅病毒的同時(shí)也殺滅了正常的分裂細(xì)胞。假如正常細(xì)胞能免受抗病毒劑的細(xì)胞毒素的作用，那么人們就能使用充足劑量的這種藥劑來根除威脅生命的病毒。舉例來說，疊氮胸苷已被發(fā)現(xiàn)在治療后天獲得性免疫缺陷綜合癥，即愛滋病(AIDS)中能延長(zhǎng)病人的生命。根據(jù)“技術(shù)背景”(Backgrounder)(癌癥交流通訊處，國(guó)家癌癥研究院出版)1986年9月19日記載，“AZT為胸苷的衍生物，胸苷為DNA(基因)正常組分之一，也是宿主細(xì)胞和病毒復(fù)制所必需的化學(xué)成分。當(dāng)AZT進(jìn)入被HTLV-Ⅲ(引起愛滋病的病毒)感染的細(xì)胞時(shí)，該藥物使細(xì)胞浸沒在錯(cuò)誤的DNA構(gòu)建單元中，所以病毒不能自身復(fù)制(注，指用AZT代替胸苷)。一旦這種情況發(fā)生，病毒感染和復(fù)制就被止住，從而保護(hù)了靶細(xì)胞”。遺憾的是，注射入血流內(nèi)的疊氮基胸苷同樣也可以到達(dá)骨髓的造血細(xì)胞。在那里，疊氮基胸苷妨礙了再生血細(xì)胞的復(fù)制，其結(jié)果是造成貧血癥和白血細(xì)胞數(shù)目的減少。NCI Backgrounder(剛才引用的出版物)中敘述說“在大劑量情況下，藥物對(duì)骨髓的抑制作用可能成為藥物使用受限制的因素”。假如我們保護(hù)這些骨髓細(xì)胞使其不受AZT的損害，我們就能夠使用大劑量的AZT，從而達(dá)到更好的治療效果。盡管現(xiàn)在存在著實(shí)質(zhì)性問題的爭(zhēng)論，即與AIDS有關(guān)的病毒是否是AIDS的病因，但是本發(fā)明所描述的內(nèi)容，對(duì)于治療那些由病毒性疾病的通常仍然是有效的，因?yàn)楸Ｗo(hù)正常分化細(xì)胞使人們有可能使用更高劑量和更有效劑量的抗病毒劑。
其他抗微生物的藥物具有劇烈的副作用以致限制了它們的應(yīng)用。慶大霉素和有關(guān)藥物如托普霉素和氨基羥丁基卡那霉素A，是僅次于青霉素，在對(duì)虛弱病人(如外科手術(shù)后的、老年的、免疫損傷的)的膿毒癥的治療方面是最主要的抗生素。然而，這些藥物也會(huì)損害腎臟細(xì)胞以及前庭的和聽覺的感覺細(xì)胞，并且經(jīng)常不能用足夠的劑量或足夠的的時(shí)間。如果能夠保護(hù)好腎臟、前庭和聽覺的感覺細(xì)胞，使之不受這些抗生素的傷害，便能延長(zhǎng)這些藥物的使用，從而拯救更多的生命。
本發(fā)明人已發(fā)明了一種新穎的方法，能集中藥物效應(yīng)，并減少藥物的副作用，它是通過使那些不需受到藥物作用的生物體細(xì)胞免受所述藥物的有害效應(yīng)而實(shí)現(xiàn)。更具體地說，本發(fā)明人的方法是當(dāng)使用某藥物時(shí)，給需要保護(hù)的生物體細(xì)胞優(yōu)先地輸入該藥物的解毒劑。在一個(gè)實(shí)施例中，所述優(yōu)先輸入是這樣完成的將與所述的生物體細(xì)胞有親合性的抗體或者抗體類似物(antibody-comparable)(1)直接與所述的解毒劑結(jié)合，或者(2)與攜帶所述的解毒劑分子的載體，例如蛋白質(zhì)和其他聚合物結(jié)合，或者(3)與帶有解毒劑的微體載體結(jié)合，例如脂質(zhì)體，細(xì)紅胞的血影，膠體載體，三維樹狀物(dendrimer)，類蛋白(質(zhì))微球(protenoid microsphere)。這種輸入完成后，可以使所述的解毒劑對(duì)抗藥物對(duì)需要保護(hù)的生物體細(xì)胞的毒害作用，而且相對(duì)于藥物作用的靶細(xì)胞而言，這種對(duì)抗優(yōu)先發(fā)生在需要保護(hù)的細(xì)胞。
在另外一個(gè)實(shí)施例中，采用這樣的方法當(dāng)使用某藥物時(shí)，給需要保護(hù)的生物體細(xì)胞優(yōu)先地輸入該藥物的解毒劑。即在此實(shí)施例中，將解毒劑安置在載體上，該載體與需要保護(hù)的細(xì)胞具有內(nèi)在的易被攝入的親和性。這種載體與所述的需要保護(hù)的細(xì)胞的這種攝入親和性大于它與藥物靶細(xì)胞之間的攝入親和性，因此，這種(選擇性)攝入使得解毒劑可以抵抗藥物對(duì)需要保護(hù)的細(xì)胞的毒害作用。
關(guān)于“藥物”(“drug”)這個(gè)術(shù)語，本人意指化學(xué)治療劑，如列于《治療學(xué)藥理基礎(chǔ)》的那些藥物(The Pharmacologic Basis of Therapeutics)(編著者A.G.Gilman，L.S.Goodman，A.Gilman;紐約MacMillan出版公司1980年出版及稍后的版本)。對(duì)本發(fā)明來說，術(shù)語“藥物”(“drug”)包括離子輻射，因?yàn)楫?dāng)輻射高能粒子用于治療疾病時(shí)，它起到藥物的作用。
對(duì)于術(shù)語“解毒劑”(“antidote”)，本人意指對(duì)具體特定藥物的細(xì)胞效應(yīng)起反作用(抵抗作用)的化學(xué)物質(zhì)。舉例來說，亞葉酸為抗癌藥物氨甲蝶呤的解毒劑，胸苷為抗癌藥物5-氟脫氧尿苷(FUdR)的解毒劑，羥基嘌呤醇是5-氟尿嘧啶(5-FU)的解毒劑，尿苷為阿扎利賓(azaribine)的解毒劑，含有巰基的化合物諸如硫脲，甲硫氨酸等是鉑和鉑衍生物的解毒劑(Burchenel，J.H.et al. Biochimie 60961-965.1978;DiRe，F(xiàn).et al.Cancer Chemother.Pharm.25355-360.1990)，以及脫氧胞苷為胞嘧啶阿糖甙的解毒劑。亞葉酸為長(zhǎng)春花堿和長(zhǎng)春新堿的弱解毒劑，但谷氨酸和天冬氨酸以及谷氨酸鈉和色氨酸為長(zhǎng)春花堿的解毒劑。
谷氨酸鈉和色氨酸關(guān)于確定何種化學(xué)藥品可用作任給定藥物的解毒劑，這里有些邏輯規(guī)定1)假如藥物是作為天然代謝物的非官能類似物起作用的(例如，在胸苷的產(chǎn)生過程中，二氫葉酸還原酶被氨甲蝶呤即亞葉酸的一種非官能類似所阻斷，那么，這種藥物的一種解毒劑就是天然(官能的)代謝物。對(duì)該代謝物來說，該藥物就是其類似物。(對(duì)于氨甲喋呤而言，亞葉酸就是解毒劑。亞葉酸能與氨甲喋呤競(jìng)爭(zhēng)酶的結(jié)合位點(diǎn)，從而防止氨甲喋呤結(jié)合和阻斷酶)。
2)假如藥物通過可逆地阻斷酶的作用，而此酶為制造特定代謝物所必需的(例如，該酶二氫葉酸還原酶在制造胸苷中受氨甲蝶呤的阻斷)，那么這種藥物的一種解毒劑就是特定的代謝物。它的制造受該藥物的阻斷。(例如，在氨甲蝶呤的例子中，胸苷就是一種解毒劑)。
3)假如發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞中對(duì)給定藥物的天然抗藥性增大，人們將能得知細(xì)胞是如何變得有抗藥性的，并且可以用同樣的方式找到一種使細(xì)胞產(chǎn)生抗性的化學(xué)藥品，這種化學(xué)藥品就可以是一種解毒劑。舉例來說，一旦藥物進(jìn)入細(xì)胞，細(xì)胞通過增加某種酶的合成，這種酶能幫助降解該藥物，這樣細(xì)胞就往往會(huì)變得對(duì)藥物更有抗藥性。所述的酶就是該藥物的解毒劑。作為此規(guī)則的推論，即在細(xì)胞內(nèi)環(huán)境中能降解藥物并且無其他損害作用的一種酶可以為一種解毒劑。有些細(xì)胞能抵抗博萊霉素的作用是由于細(xì)胞內(nèi)具有較高濃度的博萊霉素水解酶。對(duì)胞嘧啶阿糖甙的抗藥性也歸因于胞苷脫氨酶。對(duì)重要的氨基糖甙抗生素的抗藥性則歸因于乙?；D(zhuǎn)移酶和氨基糖甙失活酶。在肝中大量存在的黃嘌呤氧化酶能解毒6-巰基嘌呤和氮雜硫嘌呤。這些酶，當(dāng)送入到需要保護(hù)的細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中時(shí)，就成為它們所解毒的藥物的解毒劑。
4)將電離子輻射作為藥物的情況，人們能在化學(xué)藥品中找到解毒劑，這些化學(xué)藥品是熟知的輻射防護(hù)劑，如WR-2721和WR1065(Walter Reed Army Institute of Research，Washington，D.C.)。
5)本人仍在探索的新途徑是將外來的過量的藥物的靶結(jié)構(gòu)物送入到細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中。藥物與靶結(jié)構(gòu)物的關(guān)系有藥物與靶結(jié)構(gòu)物結(jié)合(將二氨二氯絡(luò)鉑與脫氧核糖核酸)，藥物插入靶結(jié)構(gòu)物(阿霉素、道諾霉素與脫氧核糖核酸)，藥物直接改變靶結(jié)構(gòu)物(烷化劑與DNA和鳥嘌呤組分)。在此例子中，DNA片段(如富含鳥嘌呤堿基的DNA片段，經(jīng)人工合成的)可作為解毒劑。一旦進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，充當(dāng)假目標(biāo)的DNA片段就能與進(jìn)入的有細(xì)胞毒性的藥物分子反應(yīng)，使它們對(duì)細(xì)胞的“真正”官能DNA無害。
6)有些藥物通過在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生游離基而起作用(例如阿霉素)。在這種情況下，游離基清除劑如α-生育酚(維生素E)、輔酶Q和N-?；摎浔彼峥捎米鹘舛緞?Solaini，G.Biochem.Biophys.Res.Comm，147(2)572-80.1987 & its references;Pascoe，G.A.Archives Bioch. Biophys.256(1)159-166.1987).阿霉素的使用由于它對(duì)心臟有毒性而受到限制，對(duì)心臟的毒性似乎主要是由于產(chǎn)生游離基而引起的。前面所述的清除劑能用作心肌及其他細(xì)胞的解毒劑。金屬硫因(metallothionein)(Webb，M.InThe chemistry，biochemistryand biology of cadmium.Webb，M.，ed.Elsevier/North Holland，Amsterdam，P.195.1979)是一種低分子量的蛋白質(zhì)，它對(duì)于重金屬毒性，例如含鉑藥物的毒性，具有保護(hù)細(xì)胞的作用。它還表現(xiàn)出抗產(chǎn)生自由基藥物(例如，阿霉素，博萊霉素，匹來霉素和輻射)的保護(hù)細(xì)胞的作用。有報(bào)道說，金屬硫因在抗某些烷基化藥物方面也有保護(hù)性。人們可以將金屬硫因作為解毒劑直接使用，也可以使用某些化學(xué)藥品(如次硝酸鉍)在細(xì)胞內(nèi)預(yù)先誘導(dǎo)金屬硫因的合成。(Satoh，M，et al.Cancer Chemother.Pharmacol.21176-178.1988).當(dāng)然，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域技術(shù)熟練的人來說，有一點(diǎn)是很自然的也是很明顯的，就是如果某人要使用預(yù)誘導(dǎo)劑的話，在使用抗癌藥之前先輸入預(yù)誘導(dǎo)劑，從而在細(xì)胞暴露于抗癌藥之前使金屬硫因有時(shí)間在被保護(hù)的細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生，他就可以使保護(hù)效果更好。但是，因?yàn)椴∪朔锌拱┧幊３Ｊ窃跀?shù)周內(nèi)反復(fù)服用，因此，人們可以與抗癌藥幾乎同時(shí)開始預(yù)誘導(dǎo)物治療。一開始，需保護(hù)的細(xì)胞并不能得到最佳的保護(hù)，但是數(shù)天之內(nèi)，便能得到所期望的保護(hù)。
尋找解毒劑時(shí)，可使用已知的經(jīng)驗(yàn)證據(jù)或者進(jìn)行體內(nèi)或體外的試驗(yàn)。舉例來說，人們能確定一種物質(zhì)是否能符合本發(fā)明目的的“解毒劑”的要求，其方法如下將試驗(yàn)的“解毒劑”加入到需保護(hù)的生物體細(xì)胞的組織培養(yǎng)液中，然后將作為試驗(yàn)解毒劑的藥物加入至組織培養(yǎng)液中。人們可評(píng)價(jià)該試驗(yàn)“解毒劑”在組織培養(yǎng)細(xì)胞上對(duì)藥物作用所具有的效果，以便確定該試驗(yàn)“解毒劑”可否被接受。對(duì)某些解毒劑來說，如蛋白質(zhì)和酶，人們需提供將試驗(yàn)解毒劑引入培養(yǎng)的Cancer 31661-670，1983)的實(shí)例，他采用白蛋白作為載體。Reisfeld和他的小組近來又采用一種新的結(jié)合技術(shù)，該技術(shù)使用一種酸敏感的銜接物，即順式鳥頭酸酐(Proc.Nat.Acad.Sci.851189-1193，1988)。另一個(gè)很有趣的但是效果稍差的技術(shù)是利用多聚谷氨酸作為中間載體，如由G.F.Rowland(Nature 255487-，1975)所描述的那樣。
在較理想的實(shí)施例中，特別使用酶為解毒劑時(shí)，可先將該解毒劑安置在微體載體內(nèi)。這種微體載體有酯質(zhì)體、紅細(xì)胞血影，膠體載體和類蛋白微球等等，它們能在其結(jié)構(gòu)內(nèi)部容納許多解毒劑分子。
在脂質(zhì)體的例子中，脂質(zhì)體是一些小球體，它們是磷脂在含水區(qū)域溶脹時(shí)形成的。在脂質(zhì)或脂質(zhì)體的含水相內(nèi)，脂質(zhì)或水溶性的物質(zhì)，可分別被捕集。脂質(zhì)體的一些物理性質(zhì)可隨意變更大小(半徑)能被調(diào)節(jié)，從單片脂質(zhì)體的約12毫微米到多片型式的幾個(gè)微米，并且通過加入帶電荷的酚衍生物，使脂質(zhì)體帶有正的或負(fù)的表面電荷(Gregoriadis，G.，Methods in Enzymology 44698-，1976)。對(duì)被捕集的物質(zhì)的滲透性的控制和穩(wěn)定性的控制，可以通過將甾醇或其他脂類加入到脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)中的方法而達(dá)到(Gregoriadis，G.，剛才引用的參考資料)。
最好，該脂質(zhì)體為單片的，直徑約為350-600埃，并且可為中性或帶正電荷。許多制造合適的脂質(zhì)體的方法是眾所周知的(Ju-liano，R.L.，Stamp，D.，Biochem.Biophys，Res.Comm.63(3)651-658，1975;Ann，New York Acad，Sci.308411-432，1978，Canad.J.Ppysio.Pharmacy 57(5)535-539，1979，和Biochem.Pharmacol.2721-27，1978;Kimelberg，H.K.，Cancer Res.362949-2957，1976;Barbet，J.，Machy，P.，& L.Leserman的著作;J.Supramolecular Structure and Cellular Biochemistry 16243-258.1981;Gregoriadis，G.Nature 265407-生物體細(xì)胞內(nèi)的方法。例如，將酶放入脂質(zhì)體內(nèi)(下面將作討論)當(dāng)脂質(zhì)體膜和細(xì)胞融合時(shí)，使酶進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中。
有多種方法，人們可“優(yōu)先地將解毒劑輸送入需保護(hù)的生物體細(xì)胞中”。人們可將解毒劑與對(duì)需保護(hù)的生物體細(xì)胞具有親和性的抗體共價(jià)結(jié)合。現(xiàn)有技術(shù)在方法學(xué)上不斷發(fā)展，但是本人參考Hurwitz E.，(Cancer Res.35;1175-，1975)的文獻(xiàn)資料，描述了一種成功的鍵合方法通過將待結(jié)合的藥物用高碘酸鹽氧化，并將經(jīng)氧化的藥物與抗體發(fā)生反應(yīng)，接著通過氫硼化物還原試劑。特別有用的技術(shù)是由細(xì)胞基因公司(Cytogen Corporation)所開發(fā)的，(Princeton，New Jersey，USA-Rodwell，J.D，et al.Proc.Nat.Acad.Sci.83;2632-2636，1986)，它利用在抗體重鏈的一定部位發(fā)現(xiàn)的低聚糖。將低聚糖用化學(xué)方法或酶法氧化為醛類，該醛類能與含有下列官能基團(tuán)的化合物反應(yīng)如胺類、肼類、酰肼類和氨基硫脲類。此種特定部位的改變能產(chǎn)生比較均一的抗體結(jié)合，它具有未受損害的抗原結(jié)合的特點(diǎn)。這些“銜接物”結(jié)合也是“有條件地穩(wěn)定的”，即該銜接物對(duì)應(yīng)于所謂的“第二信號(hào)”釋放藥物。與抗體連接的藥物附著于靶細(xì)胞而第二信號(hào)，如蛋白水解酶，破壞該結(jié)合，結(jié)果釋放出藥物進(jìn)入靶細(xì)胞周圍的外環(huán)境。除酶之外(如補(bǔ)體、血纖維蛋白溶酶和彈性蛋白酶)，銜接物也能制成對(duì)其他因素敏感，例如對(duì)pH變化或放射性同位素敏感。使用“第二信號(hào)”并不總是必需的，因?yàn)榧?xì)胞將會(huì)攝取附著于其外膜的內(nèi)部藥物。
在細(xì)胞基因公司(Cytogen Corporation)工作之前，一般地說，將藥物直接結(jié)合在抗體上而不引起藥物或抗體的官能損失，是有些困難的。因此，許多人發(fā)現(xiàn)較好的情況是，首先將藥物與一載體結(jié)合，接著該載體再與抗體相結(jié)合。在此法中，有可能將更多藥物分子與抗體結(jié)合而不引起抗體官能的損失。一個(gè)成功的例子是M.Garnett，M.J.Embleton，E.Jacobs和R.W.Baldwin(Int.J.of411，1977;Gregoriadis，G.，New England J.Med.295(3)704-710，1976和295(14)765-770，1976)。大量的信息可在研究文獻(xiàn)中得到，它們描述了如何變更脂質(zhì)體的大小、電荷和容量(Gregoriadis，G.，Leathwood，P.D.，&Ryman，B.E.，F(xiàn)ed.Europ.Biochem.Soc.Letters 1495-99，1971;Gregoriadis，G.，F(xiàn)ed.Europ.Biochem.Soc.Trans.2117-119，1974;Gregoriadis，G.&Ryman，B.E.，Europ.J.Biochem.24485-491，1972;Magee，E.E.，Miller，O.V.，Nature 235339-340，1972;Kobayashi，T.，Gann 66719-720，1975;Gregoriadis，G.Biochem.Soc.Trans.2117，1974;GregoriadisG.Fed.Europ Bioch.Soc.Letters 36(3)292-1973;Gregoriadis，G.&E.D.Neerunjun Biochem Biophys，Res，Comm.65537-544，1975)。
另一種微體載體，紅細(xì)胞血影是由紅細(xì)胞或類似的材料形成的載體囊泡。(Ropars，C.，et al.，eds.Proc.of 2nd International Meeting on Red Blood Cells as Carriers for DrugsPotential Therapeutic Applications in Advances in Biosciences.Vol.671-260.Pergamon Press，NY.1987Kruse，C.A.，et al.Biotech.and Applied Biochem.11571-580.1989;Brearley，C.A.，et al.J.Pharm.Pharmacol.42297-301.1990).
膠體載體是能夠攜帶解毒劑分子的聚合物顆粒。(Koosha，F(xiàn).et al.Critical Revivws in Therapeutic Drug Carrier Systems 6(2)117-130，especially 123.1989;Muller，R.H.In Colloidal Carriers for Contrilled Drug Delivery;and Targeting.R.H.pp 277-335.Muller，ed.Wissenshaftliche Verlagsgesellschaft，Stuttgart&CRC Press，Boca Raton，F(xiàn)L.1991)。
類蛋白質(zhì)微球是合成蛋白質(zhì)構(gòu)成的中空微球，其大小與紅細(xì)胞相近或更小(Dr.Robert Rosen，Dalhousie University，Halifax，Nova Scotia;也是Clinical Technologies Associates，Inc.of Elmsford，NY的專利)。盡管目前這種微球的應(yīng)用主要是將藥物通過口服輸送到血液中，但這些載體也可以用來制成將解毒劑通過血流運(yùn)送到各種各樣的靶細(xì)胞。
鑒于微體載體的類型、化學(xué)和物理特性，將解毒劑放置在這樣的微體載體中是很有利的，因?yàn)槟承┪Ⅲw載體具有被某些生物體細(xì)胞攝取的內(nèi)在親合性，例如骨髓中的造血細(xì)胞。造成這種親合性的一個(gè)原因是某些血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞有吞噬顆粒物質(zhì)的天然傾向，而微體載體正好構(gòu)成了這樣的顆粒物質(zhì)。在這種情況下，人們只需設(shè)計(jì)，改進(jìn)或選擇有適當(dāng)親合性的微體載體，便能優(yōu)先將解毒劑輸送給需要保護(hù)的正常細(xì)胞，而不是藥物的靶細(xì)胞。
例如，通過改變脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)可以將脂質(zhì)體引向身體的不同細(xì)胞，例如骨髓細(xì)胞和腎細(xì)胞。因?yàn)樵S多藥物，尤其抗癌藥，危害骨髓細(xì)胞和腎細(xì)胞，所以人們可以利用本發(fā)明將解毒劑輸送給前面提及的正常細(xì)胞。
通過這些年的不斷實(shí)驗(yàn)，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)某些類型的脂質(zhì)體比另一些類型的脂質(zhì)體更有利于本發(fā)明的目的。脂質(zhì)體可以主要由脂類構(gòu)成，它在體溫下可以是流動(dòng)的(液晶態(tài))或者“固體態(tài)”。在下文中，流動(dòng)的脂質(zhì)體被稱為“軟殼的”而固體態(tài)的脂質(zhì)體被稱為“硬殼的”。其他類似的也同樣這樣稱呼。軟殼的脂質(zhì)體的例子是那些由卵磷脂(＜0)制成的和腦磷酯(13)制成的脂質(zhì)體。(在括號(hào)內(nèi)的數(shù)字是它們的固態(tài)向液晶態(tài)轉(zhuǎn)化的攝氏溫度)。硬殼的脂質(zhì)體的例子是那些由二硬脂酰磷酯甘油(53.7)和二硬脂酰磷酯膽堿(55.3)制成的脂質(zhì)體。(括號(hào)內(nèi)的數(shù)字同樣是它們的固態(tài)向液晶態(tài)轉(zhuǎn)變的攝氏溫度，所有轉(zhuǎn)變溫度都高于37-40℃的體溫。)也有一些脂類，它們的固態(tài)向液晶態(tài)轉(zhuǎn)變的溫度與體溫很相近。因而由此類脂類制得的脂質(zhì)體在某種程度上介于軟殼的和硬殼的脂質(zhì)體之間，所以可以稱之為“半硬殼的”。這些脂類是二棕櫚酰磷酯甘油(40.0)和二棕櫚酰磷酯膽堿(41.5)。最出乎意外的是，與硬殼的脂質(zhì)體相比，軟殼的脂質(zhì)體具有更強(qiáng)的將解毒劑輸送給骨髓細(xì)胞并抵抗藥物毒性的能力。半硬殼脂質(zhì)體的能力介于兩者之間。因此，在一個(gè)實(shí)施例中，為了保護(hù)骨髓細(xì)胞免受有毒的抗癌藥的毒害，解毒劑被安置在小的、軟殼的脂質(zhì)體中(直徑120-950埃，由卵磷脂和膽甾醇制成，兩者摩爾比為65∶35)。軟殼的脂質(zhì)體還具有更強(qiáng)的將解毒劑輸送給肝細(xì)胞的能力。
至于紅細(xì)胞血影，這類載體同樣具有被網(wǎng)狀內(nèi)皮組織細(xì)胞攝取的天然親和性，使之可用于將解毒劑輸送給這些細(xì)胞。(Deloach，J.R.Med.Res.Rev.6487-504.1986)。通過減小尺寸(例如不大于200nm)和改變表面特性，膠體載體能被變得具有將解毒劑輸送給骨髓細(xì)胞的能力(Illum，L.et al.Life Sc.40367-374.1987)。
顆粒載體，例如鐵蛋白同樣容易被特定的骨髓細(xì)胞所吞噬(包括巨噬細(xì)胞)。所以，如果希望將解毒劑優(yōu)先輸送給骨髓細(xì)胞的話，可以將解毒劑與這種載體結(jié)合。顆粒載體本身也可以與那些攜有解毒劑，以骨髓細(xì)胞為靶目標(biāo)的微體載體或其他載體結(jié)合。樹狀聚合物(dendritic dendrimer)(Joe Alper.Science 2511562-1564.1991.包括列出的參考文獻(xiàn))是高度分枝的聚合物，大約100埃，能夠攜帶數(shù)百個(gè)解毒劑分子。它們也能被骨髓細(xì)胞吞噬。
微體載體，如脂質(zhì)體，同樣可以附著于抗體類似物(包括抗體)而進(jìn)入靶細(xì)胞內(nèi)部。(Barbet，J.，Machy，P.，& L.Leserman，J.Supramolecular Structure and Cellular Biochemistry 16243-258，1981(cellular Recognition，p.237-252);Leserman，L.，Barbet，J.，& F.Kourlisky，Nature 288602-604.1980;Machy，P.，Pierres，M.，Barbet，J.，& L.Leserman.J.，Immunology 1292098-2102.1982;Machy，P.，& L.Leserman，EMBO J.3(9)1971-1977.1984;Konno H.et al.，Cancer Res.474471-4477.1987)或者通過附著于摸擬抗體(antibody mimetics)(Saragovi，H.U.，et al Science 253792-794.1991)，或者附著于模板介導(dǎo)合成的聚合物而進(jìn)入靶細(xì)胞。(Amato，I.Science 2531358.1991;Dhal，P.K.& Arnold，F(xiàn).H.，Journal of American Chemical Society，1991年9月11日。)摸擬抗體是以某種抗體結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)的一種化學(xué)藥品。模板介導(dǎo)合成的聚合物是一種將抗原作為模板，在抗原上加尾而得到的化學(xué)藥品。使用抗體和抗體類似物比其他靶定位方法更具優(yōu)越性，因?yàn)槭聦?shí)上任何一種細(xì)胞都是可以用抗體和抗體類似物靶定位的。
合適的將脂質(zhì)體送到靶細(xì)胞的抗體，可通過標(biāo)準(zhǔn)免疫的方法來制造，該方法包括由G.Gregoriadis(Biochem.Biophysic.Res.Comm.65537-544，1975)所描述的方法。然而，單克隆抗體的制造方法是最好的方法，它可提供大量的純化的抗體(Kohler，G.& C.Milstein，Nature 256495-497，1975;Barbet，J.，Machy，P.，& L.Leserman，上面所引用的)。最好，本發(fā)明所用的抗體應(yīng)為非補(bǔ)體結(jié)合的。現(xiàn)在有許多在商業(yè)上可得到的合適的抗體(例如，MRX OXI小鼠的抗鼠白細(xì)胞普通抗原;OKT-10小鼠抗人類骨髓細(xì)胞)。對(duì)骨髓莖的細(xì)胞及血微粒和血小板的前體細(xì)胞來說，人們可使用與對(duì)小鼠骨髓細(xì)胞的T200糖蛋白有活性的那些抗體相類似的抗體。對(duì)于胃腸細(xì)胞來說，較好的是使用對(duì)付結(jié)腸和小腸小囊和莖細(xì)胞的側(cè)基膜的IGG1單克隆抗體。其他需要保護(hù)的消化系統(tǒng)的的細(xì)胞包括有口咽、食管和胃的細(xì)胞。對(duì)皮膚細(xì)胞來說，最好是使用對(duì)付基礎(chǔ)角蛋白細(xì)胞(和頭發(fā)濾泡小囊角蛋白細(xì)胞)的單克隆IGG1(免疫球蛋白)抗體的。當(dāng)使用有細(xì)胞毒性的抗有絲分裂的藥物時(shí)，雖然有些正常的分裂細(xì)胞的分裂頻率降低并且可不必保護(hù)，但在一定用藥條件下這些細(xì)胞還是需要保護(hù)的，如長(zhǎng)時(shí)間用藥或超高劑量用藥的條件下。前句中所指的細(xì)胞包括呼吸上皮細(xì)胞、泌尿上皮細(xì)胞和肝細(xì)胞。有些藥對(duì)一些器官有特殊毒性(氨基羥丁基卡那霉素A抗生素對(duì)于腎細(xì)胞和耳細(xì)胞;阿霉素對(duì)于心肌細(xì)胞的毒性)，在此種情況下，可使用對(duì)受毒害器官具有親和性的抗體。
除了抗體和抗體類似物，人們還可以將載體與體液因子(humoral factor)相結(jié)合，該體液因子可以與某特定的靶細(xì)胞表面的受體相結(jié)合并刺激它自身進(jìn)入被結(jié)合的細(xì)胞內(nèi)部。如果，缺乏這種能力，人們就需要提供類似“第二信號(hào)”的東西(前面提及)，將解毒劑從載體和體液因子上釋放下來。采用這種方式，人們可以使用諸如鐵傳遞球蛋白(globulin transferrin)之類的物質(zhì)。鐵傳遞球蛋白可與紅細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞(erythrogenic cell)的某受體結(jié)合，從而刺激紅細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞將鐵傳遞球蛋白吞噬(或吞飲)進(jìn)細(xì)胞內(nèi)。當(dāng)然，體液因子本身也可以作為載體，但是使用其他載體將更有利，因?yàn)榭梢詫⒋罅康慕舛緞┓肿訑y帶進(jìn)細(xì)胞。
輸入需保護(hù)細(xì)胞的解毒劑的劑量必須適當(dāng)，以便提供所述的保護(hù)。舉例來說，在使用亞葉酸時(shí)，對(duì)每一摩爾進(jìn)入所述細(xì)胞中的氨甲蝶呤而言必須輸入至少為1摩爾的亞葉酸到被保護(hù)的細(xì)胞內(nèi)。將脂質(zhì)體直接注射到動(dòng)脈內(nèi)，輸液給需保護(hù)的細(xì)胞，是有好處的(例如，注入腹腔和上腸系膜動(dòng)脈，輸液給胃腸細(xì)胞)。
在有細(xì)胞毒性的藥物加入到同一介質(zhì)之前，應(yīng)將解毒劑加入到身體的活循環(huán)流體(血液)中，浸泡需保護(hù)的細(xì)胞，以便使解毒劑有時(shí)間到達(dá)其靶細(xì)胞。雖然某些解毒劑，如亞葉酸已被發(fā)現(xiàn)能減弱氨甲蝶呤的毒性效應(yīng)，甚至當(dāng)施用氨甲蝶呤以后3小時(shí)再施用亞葉膠，仍能減弱毒性效應(yīng)。當(dāng)然，越早施用亞葉酸，毒性效應(yīng)減弱得越多。在本發(fā)明的例子中，最好在施用有細(xì)胞毒性的藥物2-12小時(shí)之前，就施用解毒劑，因?yàn)榻舛緞┍凰椭列璞Ｗo(hù)的細(xì)胞中要化費(fèi)時(shí)間，也因?yàn)榭贵w或其他輸送方式都相對(duì)比較慢。當(dāng)然，人們可以通過增加與抗體或載體結(jié)合的解毒劑的藥量加速供藥，但是受到了經(jīng)濟(jì)因素限制。如果有毒的藥物是每天都施用的，那么很顯然，脂質(zhì)體也必須每天給藥，只要血流中殘留的藥物水平還有毒性。甚至當(dāng)有毒的藥物僅服用一次，如果劑量太高以致數(shù)天內(nèi)在血流中的殘留的藥物水平仍有毒，那么每天給藥將很有好處。
人們可以預(yù)先制備所需的解毒劑-載體-抗體復(fù)合物(包括在脂質(zhì)體之內(nèi)的與抗體結(jié)合的解毒劑)，例如，已被發(fā)現(xiàn)對(duì)另一種藥物來說為解毒劑的任何藥物，它能與骨髓莖細(xì)胞的抗體形成復(fù)合物，或者與結(jié)腸細(xì)胞的抗體形成復(fù)合物，或者與基礎(chǔ)角蛋白細(xì)胞的抗體形成復(fù)合物等等。各種類型的復(fù)合物可置于低溫貯存架上供以后之用。
以下是如何實(shí)施本發(fā)明的例子，提出這些例子僅是為了說明，不應(yīng)認(rèn)為本發(fā)明的范圍就限于這些例子，也不應(yīng)認(rèn)為這些實(shí)施例一定代表本發(fā)明的最佳操作模式。
實(shí)施例1含有亞葉酸(鈉鹽)的單片脂質(zhì)體，其制造方法如下用卵磷脂酰膽堿(卵磷脂)、膽甾醇和二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺3-(2-吡啶二硫)丙酸酯，其摩爾比為64∶35∶1。然后，將與白血細(xì)胞的骨髓前體具有親和性的抗體和此脂質(zhì)體相結(jié)合，結(jié)合方法采用選自Barbet的方法(J.Supramol，Structure & Cell Biochem.前面已引用過)。在施用治療癌癥的氨甲蝶呤之前數(shù)小時(shí)，可將這些脂質(zhì)體進(jìn)行靜脈注射。氨甲蝶呤對(duì)骨髓的毒性可大大降低。同時(shí)使用下列脂質(zhì)體將更有益1)與對(duì)胃腸、食管和口咽細(xì)胞具有親和性的抗體相結(jié)合的脂質(zhì)體，2)與對(duì)皮膚細(xì)胞具有親和性的抗體相結(jié)合的脂質(zhì)體，3)與對(duì)骨髓莖細(xì)胞具有親和性的抗體相結(jié)合的脂質(zhì)體，所有的脂質(zhì)體含有亞葉酸或胸苷。于是氨甲蝶呤就能方便地以通常能承受的劑量的2-3倍安全地施用。含有胸苷、5-FuDR和氨甲蝶呤的脂質(zhì)體也可使用。
實(shí)施例2制備含有2-脫氧鳥苷的單片脂質(zhì)體，然后將與骨髓細(xì)胞有親和性的抗體與該脂質(zhì)體相結(jié)合，方法可參照實(shí)施例1。在施用gancyclovir(用于治療AIDS病人的CMV視網(wǎng)膜炎的藥物)之前數(shù)小時(shí)用這些脂質(zhì)體進(jìn)行靜脈注射。只要注射gancyclovir(每天二次)，就每天一次繼續(xù)注射該脂質(zhì)體。gancyclovir對(duì)骨髓的毒性大為減弱。那些因?yàn)楣撬枋艿蕉竞Χ坏貌煌顺鰃ancyclovir治療的病人大為減少，而且某些病人可以耐受高于正常劑量25%的gancyclovir。
實(shí)施例3如實(shí)施例1，不同的是脂質(zhì)體中加入了胞苷脫氨酶而不是亞葉酸，并且藥物為胞嘧啶阿糖甙而不是氨甲蝶呤。
實(shí)施例4如實(shí)施例1，不同的是脂質(zhì)體中加入了博萊霉素水解酶而不是亞葉酸，藥物為博萊霉素而不是氨甲蝶呤。
實(shí)施例5如實(shí)施例1，不同的是脂質(zhì)體中加入了尿苷而不是亞葉酸，并且藥物為阿扎利賓(azaribine)而不是氨甲蝶呤。
實(shí)施例6如實(shí)施例1，不同的是脂質(zhì)體中加入了脫氧胞苷而不是亞葉酸，并且藥物為胞嘧啶阿糖甙而不是氨甲蝶呤。
實(shí)施例7不同于如上述例子中所用的脂質(zhì)體，解毒劑結(jié)合于抗體，抗體與解毒劑的接合使用酸敏感的銜接物，即順烏頭酸酐。其他方法如同實(shí)施例1、2、5和6。
關(guān)于通過特意為非抗體靶定位而構(gòu)建的脂質(zhì)體，輸送解毒劑的方法如下小的，單片的含有谷氨酸一鈉的脂質(zhì)體(直徑大小為120-950埃)是用卵膦酯和膽甾醇(兩者分別為14mg和3.87mg)制得的。具體制備方法是在250ml的圓底燒瓶的內(nèi)表面上蒸發(fā)溶于2ml氯仿的上述脂類，加入含32mg/ml谷氨酸鈉的水溶性L-緩沖溶液，旋渦震動(dòng)混合物直到脂類從燒瓶上脫落下來，然后在浴型(bath type)聲處理器上聲處理霧狀的混合物直至澄清，懸浮液通過0.22微米的微生物過濾器的過濾而消毒滅菌。在腹膜內(nèi)注射0.75mg/kg劑量的長(zhǎng)春花堿的之前24小時(shí)和前2小時(shí)，以及之后的24，48，72和96小時(shí)，將滅菌的體積為0.5ml的懸浮液(即1.25微摩爾脂類)靜脈注射入100克重的大鼠。只注射長(zhǎng)春花堿的大鼠體重下降(因?yàn)閷?duì)胃腸的毒性而造成食欲缺乏和腹瀉)而且骨髓有嚴(yán)重的損壞，但是注射上述脂質(zhì)體的大鼠的體重下降和骨髓受損的癥狀卻大為減輕。
其他實(shí)施例包括那些用在本說明書中提到的其他藥物-解毒劑對(duì)替換上述藥物和它們的解毒劑的實(shí)施例。
一個(gè)進(jìn)一步的例子是，本發(fā)明也能被用于在生物有機(jī)體中建立疾病模型。該模型建立是通過使用有細(xì)胞毒性的藥物殺滅某些生物體細(xì)胞，或使其病變，同時(shí)保護(hù)其他會(huì)受細(xì)胞毒性劑的影響的生物體細(xì)胞。舉例來說，人們可用FUd R來破壞結(jié)腸粘膜細(xì)胞來模擬結(jié)腸炎，同時(shí)使用已描述的方法將胸苷優(yōu)先輸送小腸、胃、食管、口咽、骨髓和基礎(chǔ)角蛋白細(xì)胞，使它們不受FUd R的細(xì)胞毒素的作用。
權(quán)利要求
1.一種減少藥物副作用的方法，該副作用是由于藥物對(duì)體細(xì)胞的(非該藥物的靶細(xì)胞)不良效應(yīng)造成的，其特征在于，所述的藥物有解毒劑，該解毒劑能對(duì)抗所述的藥物的細(xì)胞效應(yīng)，而且能夠附著于抗體類似物，該抗體類似物與所述的體細(xì)胞的親和性遠(yuǎn)大于與該藥物的靶細(xì)胞之間的親和性，該方法包括將所述的解毒劑附著于所述的抗體類似物；將附著于所述的抗體類似物上的解毒劑引入哺乳動(dòng)物的浸沒該體細(xì)胞的身體液體中，所述的解毒劑輸送給所述的體細(xì)胞，從而對(duì)所述的生物施用該藥物時(shí)，解毒劑能優(yōu)先對(duì)抗藥物對(duì)所述體細(xì)胞的效應(yīng)，而不是對(duì)抗藥物對(duì)靶細(xì)胞的效應(yīng)，從而確保解毒劑對(duì)抗藥物僅僅發(fā)生在所述的體細(xì)胞。
2.一種減少藥物副作用的方法，該副作用是由于藥物對(duì)體細(xì)胞(非該藥物的靶細(xì)胞)的不良效應(yīng)造成的，其特征在于，所述的藥物有解毒劑，該解毒劑能對(duì)抗此藥物的細(xì)胞效應(yīng)，而且能夠被載體攜帶，此載體能附著于所述的體細(xì)胞有親和力的抗體類似物上，該方法包括將解毒劑安置在抗體類似物附著的所述載體上;將抗體類似物附著的所述的載體所攜帶的解毒劑引入哺乳動(dòng)物的浸沒該體細(xì)胞的身體液體中，所述的解毒劑輸送給所述的體細(xì)胞，從而對(duì)所述的生物施用該藥物時(shí)，解毒劑能優(yōu)先對(duì)抗藥物對(duì)所述體細(xì)胞的效應(yīng)，而不是對(duì)抗藥物對(duì)靶細(xì)胞的效應(yīng)，從而確保解毒對(duì)抗藥物僅僅發(fā)生在所述的體細(xì)胞。
3.一種減少藥物副作用的方法，該副作用是由于藥物對(duì)體細(xì)(非該藥物的靶細(xì)胞)的不良效應(yīng)造成的，其特征在于，所述的藥物有解毒劑，該解毒劑能對(duì)抗此藥物的細(xì)胞效應(yīng)，而且能夠被某載體攜帶，該載體具有被所述的體細(xì)胞攝入的內(nèi)在親和性，從而使解毒劑能在體細(xì)胞處對(duì)抗所述藥物的效應(yīng)，該方法包括將所述的解毒劑安置在所述的載體上;將所述的載體攜帶的解毒劑引入哺乳動(dòng)物的浸沒該體細(xì)胞的身體液體中，將所述的解毒劑輸送給所述的體細(xì)胞，從而對(duì)所述的生物施用該藥物時(shí)，解毒劑能優(yōu)先對(duì)抗藥物對(duì)所述體細(xì)胞的效應(yīng)，而不是對(duì)抗藥物對(duì)靶細(xì)胞的效應(yīng)，同時(shí)確保解毒劑對(duì)抗藥物僅僅發(fā)生在所述的體細(xì)胞。
4.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的抗體類似物是抗體。
5.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的抗體類似物是模擬抗體。
6.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的抗體類似物是模板介導(dǎo)的聚合物。
7.如權(quán)利要求2，3，4，5或6所述的方法，其特征在于，所述的載體是脂質(zhì)體。
8.如權(quán)利要求2，3，4，5或6所述的方法，其特征在于，所述的載體是紅細(xì)胞血影。
9.如權(quán)利要求2，3，4，5或6所述的方法，其特征在于，所述的載體是類蛋白(質(zhì))微球。
10.如權(quán)利要求2，3，4，5或6所述的方法，其特征在于，所述的載體是微小的單片脂質(zhì)體。
11.如權(quán)利要求2，3，4，5或6所述的方法，其特征在于，所述的載體是微小的，單片脂質(zhì)體，該脂質(zhì)體主要由卵磷脂和膽甾醇(兩者摩爾比為65∶35)制成。
12.如權(quán)利要求2，3，4，5或6所述的方法，其特征在于，所述的載體是微小的，半硬殼單片脂質(zhì)體。
13.如權(quán)利要求2，3，4，5或6所述的方法，其特征在于，所述的載體是樹狀聚合物(dendritic dendrimer)。
14.如權(quán)利要求2，3，4或5所述的方法，其特征在于，所述的有害副效應(yīng)是粒細(xì)胞減少(癥)，而采用的載體是脂質(zhì)體。
15.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是谷氨酸(或其鹽)。
16.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是亞葉酸。
17.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是2-脫氧鳥苷。
18.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是胸苷。
19.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是脫氧胞(嘧啶核)苷。
20.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是羥基嘌呤醇(oxypurinol)。
21.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是是色氨酸。
22.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是尿(嘧啶核)苷。
23.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是是天冬氨酸。
24.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是博萊霉素水解酶。
25.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是黃嘌呤氧化酶。
26.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是自由基清除劑。
27.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的解毒劑是脫氧核糖核酸片段。
28.如權(quán)利要求1-13所述的方法，其特征在于，所述的載體是一種含硫基的能夠抵抗含鉑藥物的藥效應(yīng)的化學(xué)藥品。
29.一種脂質(zhì)體，其特征在于，是微小的，含有金屬硫因的脂質(zhì)體。
30.一種脂質(zhì)體，其特征在于，它含有某解毒劑的預(yù)誘導(dǎo)物。
31.如權(quán)利要求30所述的脂質(zhì)體，其特征在于，所述的解毒劑是金屬硫因。
全文摘要
一種減少藥物副作用的方法，該副作用是由于藥物對(duì)生物體細(xì)胞的有害效應(yīng)引起的，所述的生物體細(xì)胞，不是該藥物靶細(xì)胞。本方法包括在使用某藥物時(shí)，通過將該藥物的解毒劑結(jié)合于與所述的體細(xì)胞有親和性的抗體，從而將該藥物的解毒劑優(yōu)先輸送給所述的體細(xì)胞。
文檔編號(hào)A61K31/195GK1078400SQ9310331
公開日1993年11月17日 申請(qǐng)日期1993年3月23日 優(yōu)先權(quán)日1992年3月23日
發(fā)明者肯尼思·納于基·馬楚默拉 申請(qǐng)人:肯尼思·納于基·馬楚默拉