專(zhuān)利名稱(chēng)：一種蛋白藥物微囊及其吸入性氣霧劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含蛋白藥物的蛋白藥物微囊。
本發(fā)明還涉及一種蛋白藥物的新藥物劑型，具體地說(shuō)是含有蛋白藥物微囊的吸入性氣霧劑。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有蛋白藥物主要是通過(guò)注射途徑用藥，同時(shí)也有許多新的劑型，如滴眼劑、栓劑、軟膏劑、凝膠劑、片劑、膠囊、乳膏劑等正在開(kāi)發(fā)。
對(duì)于疾病的治療，可進(jìn)行吸入給藥。吸入給藥是指利用霧化裝置將藥物霧化成幾十微米至幾微米的顆粒，使藥物通過(guò)呼吸道到達(dá)肺部的給藥方式，這種給藥方式包括三種劑型，(1)噴霧劑，它是通過(guò)一小型機(jī)械裝置在外力作用下，將藥物溶液加壓后形成噴霧。(2)粉霧劑，藥物成粉末形態(tài)，通過(guò)患者的大力吸氣將粉末吸入。(3)氣霧劑，它的特點(diǎn)是在裝有藥物的容器中加入一類(lèi)稱(chēng)為拋射劑的物質(zhì)，拋射劑在容器中被壓縮成液態(tài)，但通過(guò)閥門(mén)釋出時(shí)立即膨脹成氣態(tài)，并將一同帶出的藥物分散成細(xì)小的微粒。它包括溶液型和混懸型氣霧劑。
氣霧劑分為吸入性氣霧劑和非吸入性氣霧劑。毫無(wú)疑問(wèn)，吸入性氣霧是以吸入的方式給藥的。通過(guò)氣霧劑的吸入給藥，可使藥物迅速達(dá)到肺泡部位，并且由于肺泡乃是單層上皮細(xì)胞組成，藥物在此部位能被較好地吸收進(jìn)入血液，從而達(dá)到治療全身性疾病的目的。為了使藥物能有效到達(dá)肺泡而不至于沉積在氣管、支氣管等呼吸道腔的表面，有必要將霧化產(chǎn)生的顆?？刂圃?0微米以下，大部分控制在5微米以下。
氣霧劑中使用的拋射劑包括氟氯烷烴類(lèi)物質(zhì)，俗稱(chēng)氟里昂、氫氟鏈烷烴類(lèi)物質(zhì)、以及烷烴類(lèi)物質(zhì)。氟氯烷烴類(lèi)物質(zhì)被認(rèn)為對(duì)大氣臭氧層具有破壞作用而逐漸被禁用(至2010年將完全禁用)，最有希望取代它們的新拋射劑是氫氟鏈烷烴類(lèi)，例如1.1.1.2-四氟乙烷(HFC134a)，1.1.1.2.3.3.3.-七氟丙烷(HFA227ea)、1.1-二氟乙烷(HFA152a)、異丁烷。它們不但在環(huán)境問(wèn)題上能被接受，而且由于它們的低毒性和適應(yīng)于氣霧劑的氣壓，從而使它們成為一種理想的藥物拋射劑。由于在氟氯烷烴氣霧劑中使用的表面活性劑及潛溶劑等輔料并不能適應(yīng)于新一代的拋射劑中，因而必須研究新的藥物配方才能適應(yīng)氫氟烷烴拋射劑。
美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,284,656公開(kāi)了一種粒性白細(xì)胞集落刺激因子制劑，它包括懸浮在拋射劑中含粒性白細(xì)胞集落刺激因子的精細(xì)粉碎的粉末，并有表面活性劑如脫水山梨醇三油酸酯，大豆卵磷脂或油酸等作為輔料，美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,364,838公開(kāi)了一種胰島素制劑，其中胰島素干粉懸浮在含賦形劑油酸的低沸點(diǎn)拋射劑中。
中國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)1171046A(WO 96/19197)公開(kāi)了肽和蛋白藥物與具有促進(jìn)吸收作用的表面活性劑混合，干燥制后加工制得細(xì)顆粒，這些顆粒懸浮于拋射劑HFC134a中。PCT/JP91/00486(WO 91/16038)公開(kāi)了蛋白藥物與糖類(lèi)一起冷凍干燥后研磨成細(xì)粉，再與表面活性劑一起加入到拋射劑中制備氣霧劑。
WO 01/60420(PCT/US01/00117)公開(kāi)的是大分子藥物顆粒的氣霧劑，它不使用潛溶劑、表面活性劑，它使用的是具有保護(hù)作用的膠體穩(wěn)定劑。美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,230,884公開(kāi)了以表面活性劑形成反相膠束包圍蛋白或多肽藥物的水溶液，避免這些生物活性分子與拋射劑的直接接觸，從而保護(hù)它們生物活性的方法。
由于氣霧劑中使用的HFA具有有機(jī)溶劑的特性，蛋白藥物與之直接接觸會(huì)引起變性而喪失活性，必須采用與現(xiàn)有技術(shù)中不同的保護(hù)方法才能得到理想的氣霧劑。因而設(shè)計(jì)一種能在HFA中保護(hù)干擾素等蛋白藥物活性的結(jié)構(gòu)是有重要意義的。這種結(jié)構(gòu)的目的在于防止HFA與蛋白分子之間的直接接觸。
微囊是利用天然或合成高分子材料作為囊膜壁殼，通過(guò)某些工藝步驟，將藥物分子包裹制成藥庫(kù)型微型膠囊，即微囊。微囊能使囊內(nèi)藥物分子與外部液體分子有效隔離，維護(hù)藥物分子尤其是蛋白分子的穩(wěn)定性，并具有緩釋控釋等特點(diǎn)。目前，制備的微囊常用方法包括單凝聚法、復(fù)凝聚法、薄膜超聲乳化法、乳化溶劑蒸發(fā)法、高壓乳勻法、微乳冷卻法、噴霧干燥法，二次乳化法等。
張利軍等(廣東藥學(xué)，2001年第11卷第5期，11-19)報(bào)道的凝血酶氣霧劑的研制是采用海藻酸鈣將酶制成微囊結(jié)構(gòu)，再將這種微囊混懸于拋射劑中而成，該凝血酶氣霧劑是為藥物的外用設(shè)計(jì)的，屬于非吸入性氣霧劑，它不以藥物的吸入給藥為目的。并且海藻酸鈣是難以生物降解的高分子材料，其沉降于呼吸道粘膜會(huì)長(zhǎng)期存在，從而造成對(duì)呼吸系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的損害，因此該微囊結(jié)構(gòu)也不適于體內(nèi)給藥。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種適于制備氣霧劑的蛋白藥物微囊，其以微囊包裹蛋白藥物，并且大部分微囊的粒徑在10微米以下，具有緩釋控釋作用并能維持蛋白藥物的生物活性。
本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種組合物，其含有本發(fā)明的蛋白藥物微囊和藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明的再一個(gè)目的在于提供一種蛋白藥物的吸入性氣霧劑，其含有本發(fā)明的蛋白藥物微囊以及拋射劑，制備成可吸入給藥的氣霧劑劑型?？赏ㄟ^(guò)吸入方式給藥，將蛋白藥物輸送至呼吸系統(tǒng)，達(dá)到治療的目的。
根據(jù)本發(fā)明的一方面，蛋白藥物微囊是將各種蛋白藥物及賦形劑與具有生物降解性的微囊材料混合，制備得到本發(fā)明的蛋白藥物微囊。
在本發(fā)明中，術(shù)語(yǔ)“蛋白藥物”或“蛋白”或“蛋白質(zhì)”是指包括天然存在或重組技術(shù)制備的、其分子結(jié)構(gòu)是由多種氨基酸通過(guò)肽鍵連接而成的分子量在1000道爾頓以上的物質(zhì)，包括人們常稱(chēng)的“蛋白質(zhì)”和“多肽”。包括但不限于干擾素、白介素、神經(jīng)生長(zhǎng)因子、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子、粒細(xì)胞集落刺激因子、促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素、促血小板生長(zhǎng)素、酶、多肽疫苗、胰島素、胰高血糖素、胰島素的C肽、血管加壓素、去氨加壓素、促腎上腺皮質(zhì)激素、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素、促性腺釋放激素、促性腺釋放激素激動(dòng)劑和拮抗劑、促性腺素黃體生成素、降鈣素、甲狀旁腺素、甲狀腺素、生長(zhǎng)激素、生長(zhǎng)激素釋放激素、生長(zhǎng)激素釋放抑制素、催產(chǎn)素、心鈉素、催乳素、促濾泡素、內(nèi)啡肽、糖蛋白、脂蛋白。
術(shù)語(yǔ)“蛋白藥物微囊”是指利用天然或合成高分子材料作為囊膜壁殼，通過(guò)某些工藝步驟，將蛋白藥物分子包裹制成藥庫(kù)型微型膠囊，即微囊。它能維護(hù)蛋白藥物分子的穩(wěn)定性，并具有緩釋控釋等特點(diǎn)。制備可吸入給藥的微囊材料應(yīng)具有可生物降解性，適宜的材料包括但不限于明膠、阿拉伯膠、西黃蓍膠、白蛋白、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-乙醇酸(PLGA)、聚乙二醇。
包裹于微囊中的蛋白藥物的有效量，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)具體使用的蛋白藥物的治療有效量和生理有效量方便地確定，在這里術(shù)語(yǔ)“治療有效量”是指存在于組合物中的、病人用后能出現(xiàn)生理反應(yīng)所需的蛋白藥物的量。每種蛋白藥物的用量根據(jù)具體情況而定，它取決于每種蛋白藥物的生物活性。術(shù)語(yǔ)“生理有效劑量”是指給病人服用的、能產(chǎn)生預(yù)期的緩解作用或療效的量，該量對(duì)每種蛋白藥物都是特定的。
在本發(fā)明的蛋白藥物微囊中，還可在蛋白藥物中進(jìn)一步添加藥學(xué)上可接受的賦形劑以維持蛋白藥物的穩(wěn)定性，優(yōu)選的賦形劑為白蛋白和/或例如甘露醇的碳水化合物。
制備蛋白藥物微囊的方法可以采用例如，超聲-低溫萃取法，該方法是在低溫條件下通過(guò)分散——超聲霧化——萃取——分離等幾個(gè)步驟將蛋白藥物加工制成微囊。在該制備微囊的方法中，蛋白藥物先制成粉末形式。可通過(guò)將蛋白藥物與賦形劑制成混合溶液，賦形劑為白蛋白，或碳水化合物，或它們二者任意比例的組合，混合液通過(guò)冷凍干燥后在噴射粉碎機(jī)中粉碎，即可制得粉末。也可將這種混合溶液通過(guò)噴霧干燥制得粉末。這里的賦形劑是為了維護(hù)蛋白藥物的穩(wěn)定性，它們?cè)诨旌衔镏兴贾亓堪俜直葹?0％～99％，即賦形劑與蛋白藥物的重量比為50∶50～99∶1。蛋白藥物和賦形劑的混合物與微囊材料之間的重量比為1∶0.1～1∶100，優(yōu)選1∶1～1∶10。將上述含蛋白藥物的粉末加至微囊材料，例如PLGA-二氯甲烷溶液中，超聲分散后，經(jīng)超聲霧化噴至氮?dú)獗Ｗo(hù)下冷至-40℃～-80℃的乙醇中，蛋白藥物在超冷的環(huán)境中十分穩(wěn)定，微乳中的二氯甲烷很快為乙醇所萃取，蛋白藥物微囊析出，經(jīng)真空干燥，即得成品微囊。美國(guó)Sono-Tek公司生產(chǎn)的Cryogenic-process裝置可用于生產(chǎn)這種微囊。微囊的粒徑65％以上在10微米以下，50％以上在5微米以下。
也可以將蛋白藥物與賦形劑制備成溶液形式，然后將該溶液加入到油性介質(zhì)，例如花生油中，研磨后得到水/油乳液，再將該乳液在微囊材料溶液中研磨得到水/油/水的復(fù)乳液，沉淀析出制得含蛋白藥物的微囊。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，含蛋白藥物微囊的組合物可以包括本發(fā)明的蛋白藥物微囊和藥學(xué)上可接受的載體，將蛋白藥物微囊和載體充分混合制成混合物，微囊在混合物中的比例應(yīng)根據(jù)不同藥物確定，一般來(lái)說(shuō)載體在混合物中所占重量百分比為30％～90％，優(yōu)選比例為40％～85％，更優(yōu)選的比例為50％～80％，即蛋白藥物微囊與載體的重量比為70∶30～10∶90，優(yōu)選為60∶40～15∶85，更優(yōu)選為50∶50～20∶80。
術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的載體”是指能被用于肺部并無(wú)嚴(yán)重不良毒性作用的載體?？山邮艿妮d體的量是為了維持氣霧劑的穩(wěn)定并確保在病人的肺部均勻的給藥。用作載體的類(lèi)型包括穩(wěn)定劑，pH調(diào)節(jié)劑或緩沖劑，鹽，抗氧劑，表面活性劑，潤(rùn)滑劑。
穩(wěn)定劑的適宜例子有人血白蛋白(HSA)，也可選用碳水化合物、氨基酸、多肽等，如乳糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、海藻糖、蔗糖、麥芽糖、棉子糖、松三糖、蘇糖醇、乳糖醇、山梨醇、環(huán)糊精、甘露糖醇(或甘露醇)、木糖醇、丙氨酸、甘氨酸、甜菜堿。優(yōu)選的是海藻糖。
PH調(diào)節(jié)劑或緩沖劑如酸式磷酸鹽，堿式磷酸鹽，枸櫞酸鈉、抗壞血酸鈉等。優(yōu)選的是枸櫞酸鈉。
鹽的適宜的例子有氯化鈉、海藻酸鈉等。
抗氧劑的適宜例子有維生素C、維生素E等。
表面活性劑在組合物中可起促進(jìn)吸收和潤(rùn)滑的作用，也可在微囊制備過(guò)程中起乳化劑的作用，適宜例子有脂肪酸及其鹽，優(yōu)選C8～C20的脂肪酸及其鹽，如油酸、辛酸鈉、月桂酸鈉，適宜例子還有膽汁酸及其鹽，如膽酸、鵝脫氧膽酸、甘氨膽酸、牛黃膽酸、甘氨鵝脫氧膽酸、牛黃鵝脫氧膽酸、脫氧膽酸、甘氨脫氧膽酸、牛黃脫氧膽酸，及其鹽。適宜的表面活性劑例子還有磷脂類(lèi)，如卵磷脂、心磷脂、腦磷脂，適宜的表面活性劑還包括吐溫類(lèi)，如吐溫80，吐溫85，司盤(pán)類(lèi)，如司盤(pán)80，如司盤(pán)85，以及聚乙二醇等。
根據(jù)本發(fā)明的再一方面，蛋白藥物吸入性氣霧劑包括本發(fā)明的蛋白藥物微囊和拋射劑，也可以包括本發(fā)明的含蛋白藥物微囊的組合物和拋射劑。拋射劑可以選自1，1，1，2-四氟乙烷(HFC134a)，1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷(HFA227ea)1，1-二氟乙烷(HFA152a)、氟里昂F11、氟里昂F12、氟里昂F22和異丁烷的一種或幾種，更優(yōu)選的可以是選自1，1，1，2-四氟乙烷(HFC134a)，1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷(HFA227ea)、1，1-二氟乙烷(HFA152a)和異丁烷的一種或幾種。蛋白藥物微囊或含有其的組合物與拋射劑的重量比可在1∶99～30∶70之間。
在制備氣霧劑中，將本發(fā)明的蛋白藥物微囊或含有其的組合物計(jì)量加入耐壓容器中，裝上適用于氣霧劑的計(jì)量閥，加入拋射劑，即可制成氣霧劑。也可在低溫下將該組合物加入耐壓容器中，再灌入拋射劑，然后裝上適用于氣霧劑的計(jì)量閥，即可制成氣霧劑。當(dāng)使用按鈕擠壓計(jì)量閥時(shí)，由于罐內(nèi)的壓力大于一個(gè)大氣壓以上，壓力將拋射劑和藥物微囊從容器口釋出一定量的體積，拋射劑在容器外迅速氣化膨脹，形成氣霧，而將帶出的藥物微囊分散送到病人肺泡。
本發(fā)明還可以進(jìn)一步包括蛋白藥物微囊吸入給藥的藥盒，該藥盒包括一個(gè)含有本發(fā)明蛋白藥物微囊或含有其的組合物的單位容器，該容器每次能定量地給出一預(yù)定的劑量。將本發(fā)明的蛋白藥物微囊或含有其的組合物以及拋射劑裝入這種容器中，該劑量能為病人單位劑量的治療提供足夠的蛋白藥物?？刹捎冒ü摅w、計(jì)量閥、按鈕三部分構(gòu)成的容器。例如，其中罐體可采用英國(guó)Presspart公司生產(chǎn)的C128P型罐，計(jì)量閥可采用法國(guó)Valois公司生產(chǎn)的型號(hào)為DF10或DF30計(jì)量閥，按鈕可采用法國(guó)Valois公司生產(chǎn)的型號(hào)為KN1/IN3的Inhale actuator。
本發(fā)明的蛋白藥物微囊，直徑大部分在10μm以下，適于制備吸入性氣霧劑。本發(fā)明的氣霧劑中，微囊結(jié)構(gòu)對(duì)蛋白藥物起到了很好的保護(hù)作用，使蛋白藥物的穩(wěn)定性大大提高。較小的微囊粒徑和氣霧劑中拋射劑的配合，可將蛋白藥物輸送至肺泡等部位，使藥物能得到較好的吸收，并具有緩釋控釋藥物的功能，是蛋白藥物的一種理想的新劑型。
下面，通過(guò)對(duì)本發(fā)明較佳實(shí)施方式的描述，詳細(xì)說(shuō)明但不限制本發(fā)明。
發(fā)明的
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1干擾素微囊及其氣霧劑的制備材料來(lái)源重組人干擾素α2b溶液，按照《中國(guó)生物制品規(guī)程》(2000版)之“重組人干擾素α2b制造檢定規(guī)程”，制備，即得。
其他各種試劑均為市售產(chǎn)品。
重組人干擾素α2b溶液500ml(蛋白濃度為0.2mg/ml)，加入白蛋白1g，甘露醇8.9g，噴霧干燥，得到干擾素粉末。Buchi Laboratory噴霧干燥器可用于生產(chǎn)這種粉末。
將上述粉末5g加至含10％(w/v)PLGA的二氯甲烷溶液50ml中，超聲分散后，經(jīng)超聲霧化噴至氮?dú)獗Ｗo(hù)下冷至-40℃～-80℃的乙醇中，形成微乳。0.5～5小時(shí)后，干擾素微囊析出，經(jīng)真空干燥，即得成品干擾素微囊。美國(guó)Sono-Tek公司生產(chǎn)的Cryogenic-process裝置可用于生產(chǎn)這種微囊，它是包含分散、霧化、萃取、干燥各步驟的連貫裝置。
取干擾素微囊70份(重量份，下同)，磷脂10份，油酸5份，海藻糖10份，司盤(pán)80為5份，混合，得干擾素微囊組合物。
將干擾素微囊組合物1份(重量份，下同)加入到容器中，裝上計(jì)量閥，計(jì)量閥可采用上海華勝氣霧機(jī)械有限公司生產(chǎn)的WQH型封口機(jī)裝上。常溫下灌入99份拋射劑HFC134a，可用上海華勝氣霧機(jī)械有限公司生產(chǎn)的WQG型灌氣機(jī)將拋射劑壓入容器中。
劇烈晃動(dòng)30秒，在超聲浴器中處理5～20分鐘，可制得干擾素微囊氣霧劑。
實(shí)施例2白細(xì)胞介素-2微囊氣霧劑的制備材料來(lái)源白介素按照《中國(guó)生物制品規(guī)程》(2000版)之“重組人干擾素白介素-2制造檢定規(guī)程”，制備，即得。
其它各種試劑均為市售產(chǎn)品。
白介素溶液250ml(蛋白濃度為4mg/ml)，加入甘露醇30g，噴霧干燥，得到白介素粉末。美國(guó)產(chǎn)Buchi Laboratory噴霧干燥器可用于生產(chǎn)這種粉末。
將上述粉末1g加至含10％(w/v)聚乙二醇的二氯甲烷溶液1000ml中，超聲分散后，經(jīng)超聲霧化噴至氮?dú)獗Ｗo(hù)下冷至-40℃～-80℃的乙醇中，形成微乳。0.5～5小時(shí)后，白介素微囊析出，經(jīng)真空干燥，即得成品白介素微囊。
取白介素-2微囊10份(重量份，下同)，磷脂40份，油酸10份，海藻糖30份，司盤(pán)80為10份，混合，得白介素微囊組合物。
將干擾素微囊組合物30份(重量份，下同)加入到容器中，裝上計(jì)量閥，常溫下灌入70份拋射劑氟里昂F12于容器中。
實(shí)施例3低溫法制備干擾素微囊氣霧劑在實(shí)施例1中，將制得的干擾素微囊組合物在低溫-30℃～-50℃條件下加入到容器中，在該低溫條件下加入拋射劑HFA152a，裝上計(jì)量閥，振搖10秒鐘，得到干擾素微囊氣霧劑。
實(shí)施例4冷凍干燥法制備干擾素微囊重組人干擾素α2b溶液1000ml(1mg/ml)，加入白蛋白40g，冷凍干燥，再?lài)娚浞鬯椤?br> 按實(shí)施例1所述制備干擾素微囊及干擾素微囊組合物，再制成氣霧劑。
實(shí)施例5W/O/W型干擾素微囊的制備干擾素α2b溶液10ml(1mg/ml)，加入白蛋白0.2g。將此溶液加入到30ml花生油中，研磨0.5～3小時(shí)，得到W/O的乳液。將該乳液加入到3％(w/v)明膠溶液100ml的中，充分研磨，得到W/O/W的復(fù)乳溶液。在40℃～60℃的條件下加入飽和硫酸銨溶液，微囊沉淀析出，以稀硫酸銨溶液洗滌微囊，在2℃～10℃條件下加入10％～30％甲醛溶液，固化微囊，以蒸餾水或生理鹽水洗滌微囊，冷凍干燥，得成品干擾素微囊。
將上述粉末1g加至含10％(w/v)PLGA的二氯甲烷溶液100ml中，超聲分散后，經(jīng)超聲霧化噴至氮?dú)獗Ｗo(hù)下冷至-40℃～-80℃的乙醇中，形成微乳。0.5～5小時(shí)后，干擾素微囊析出，經(jīng)真空干燥，即得成品干擾素微囊。
取干擾素微囊40份(重量份，下同)，磷脂20份，油酸5份，海藻糖30份，司盤(pán)80為5份，混合，得干擾素微囊組合物。
將干擾素微囊組合物15份(重量份，下同)加入到容器中，裝上計(jì)量閥，常溫下灌入85份拋射劑異丁烷。
劇烈晃動(dòng)30秒，在超聲浴器中處理5～20分鐘，可制得干擾素微囊氣霧劑。
實(shí)施例6胰島素微囊氣霧劑的制備材料來(lái)源胰島素，市售，徐州生化制藥廠產(chǎn)，配制成10mg/ml。
胰島素溶液1000ml(10mg/ml)，加甘露醇10g溶解，制成混合溶液，另配2％(w/v)明膠溶液100ml作為微囊材料。使用丹麥生產(chǎn)的nitro-atomizerospray drying雙噴嘴噴霧干燥器，其中一個(gè)噴嘴噴出的胰島素混合溶液在干燥器中迅速干燥后，另一個(gè)噴嘴噴出明膠溶液覆蓋在胰島素顆粒外表面，并被迅速干燥，即得胰島素微囊。
取胰島素微囊60份，辛酸鈉5份，油酸5份，海藻糖25份，司盤(pán)80為5份，混合，得胰島素微囊組合物。將組合物30份加入到容器中，裝上計(jì)量閥，常溫下灌入70份拋射劑HFA227ea，即得胰島素微囊氣霧劑。
實(shí)施例7干擾素微囊氣霧劑與干擾素直接制備的氣霧劑穩(wěn)定性比較重組人干擾素α2b溶液500ml(蛋白濃度為0.2mg/ml)，加入白蛋白1g，甘露醇8.9g，噴霧干燥，得到干擾素粉末。
取干擾素粉末70份(重量份，下同)，磷脂10份，油酸5份，海藻糖10份，司盤(pán)80為5份，混合。
將上述混合物1份(重量份，下同)加入到容器中，裝上計(jì)量閥，常溫下灌入99份拋射劑HFC134a。
取以上制備的氣霧劑與實(shí)施例1中的干擾素微囊氣霧劑，置室溫條件下，按照《中國(guó)生物制品規(guī)程》(2000版)之“重組人干擾素α2b制造檢定規(guī)程”分別測(cè)定1個(gè)月、6個(gè)月后干擾素活性保留的百分?jǐn)?shù)。結(jié)果如下

由以上結(jié)果可以看出，干擾素微囊氣霧劑穩(wěn)定性好，微囊結(jié)構(gòu)能有效保護(hù)蛋白分子的生物活性。
實(shí)施例8蛋白藥物微囊的粒徑測(cè)定取玻片，涂以液體石蠟和凡士林的混合物(2∶1)，加熱除去氣泡制成軟墊，取實(shí)施例1～實(shí)施例6(下表中編號(hào)為1～6)的蛋白質(zhì)微囊氣霧劑，將其噴嘴在距上述軟墊25～30cm處進(jìn)行噴霧，將軟墊置顯微鏡下觀察，測(cè)定收集顆粒的粒徑，計(jì)算10微米和5微米顆粒占全部顆粒的百分?jǐn)?shù)。

由以上結(jié)果可見(jiàn)，本發(fā)明制得的蛋白藥物微囊60％以上的顆粒粒徑為10μm以下，50％以上在5微米以下，非常適于制備氣霧劑，在體內(nèi)可有效地分散和吸收。
以上對(duì)本發(fā)明的詳細(xì)描述并不限制本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)本發(fā)明作出各種改變和變形，只要不脫離本發(fā)明的精神，均應(yīng)屬于本發(fā)明的權(quán)利要求所定義的范圍。
權(quán)利要求
1.一種蛋白藥物微囊，其特征在于它含有有效量的蛋白藥物；以及微囊材料，所述微囊材料選自明膠、阿拉伯膠、西黃蓍膠、白蛋白、聚乙二醇、聚乳酸和聚乳酸—乙醇酸的一種或幾種；其中所述蛋白藥物微囊至少60％的顆粒粒徑小于10微米，至少50％的顆粒粒徑小于5微米。
2.權(quán)利要求1所述的蛋白藥物微囊，其特征在于所述蛋白藥物為分子量1000道爾頓以上的多肽或蛋白質(zhì)，所述微囊材料選自明膠、白蛋白、聚乙二醇和聚乳酸—乙醇酸的～種或幾種。
3.權(quán)利要求2所述的蛋白藥物微囊，其特征在于所述蛋白藥物選自干擾素、白介素、神經(jīng)生長(zhǎng)因子、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子、粒細(xì)胞集落刺激因子、促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素、促血小板生長(zhǎng)素、酶、多肽疫苗、胰島素、胰高血糖素、胰島素的C肽、血管加壓素、去氨加壓素、促腎上腺皮質(zhì)激素、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素、促性腺釋放激素、促性腺釋放激素激動(dòng)劑和拮抗劑、促性腺素黃體生成素、降鈣素、甲狀旁腺素、甲狀腺素、生長(zhǎng)激素、生長(zhǎng)激素釋放激素、生長(zhǎng)激素釋放抑制素、催產(chǎn)素、心鈉素、催乳素、促濾泡素、內(nèi)啡肽、糖蛋白或脂蛋白。
4.權(quán)利要求3所述的蛋白藥物微囊，其特征在于所述蛋白藥物為干擾素。
5.權(quán)利要求3所述的蛋白藥物微囊，其特征在于所述蛋白藥物為白介素。
6.權(quán)利要求3所述的蛋白藥物微囊，其特征在于所述蛋白藥物為胰島素。
7.權(quán)利要求1～6所述的蛋白藥物微囊，其特征在于其進(jìn)一步包含藥學(xué)上可接受的賦形劑，所述賦形劑與蛋白藥物重量比為50∶50～99∶1。
8.權(quán)利要求7所述的蛋白藥物微囊，其特征在于所述賦形劑為白蛋白和/或甘露醇。
9.權(quán)利要求7所述的蛋白藥物微囊，其特征在于蛋白藥物和賦形劑的混合物與微囊材料之間的重量比為1∶0.1～1∶100。
10.一種蛋白藥物吸入性氣霧劑，包括權(quán)利要求1所述的蛋白藥物微囊；以及拋射劑，所述蛋白藥物微囊與所述拋射劑的重量比為1∶99～30∶70。
11.權(quán)利要求10所述的蛋白藥物吸入性氣霧劑，其特征在于所述拋射劑選自1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷、1，1-二氟乙烷、異丁烷、氟里昂F11、氟里昂F12和氟里昂F22的一種或幾種。
12.權(quán)利要求1 1所述的蛋白藥物吸入性氣霧劑，其特征在于所述拋射劑選自1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷、1，1-二氟乙烷和異丁烷的一種或幾種。
13.權(quán)利要求10所述的蛋白藥物吸入性氣霧劑，其特征在于，其進(jìn)一步含有藥學(xué)上可接受的載體。
14.權(quán)利要求13所述的蛋白藥物吸入性氣霧劑，其特征在于所述蛋白藥物微囊與所述載體的重量比為70∶30～10∶90。
15.權(quán)利要求10所述的蛋白藥物吸入性氣霧劑，其特征在于所述蛋白藥物微囊為干擾素微囊。
16.權(quán)利要求10所述的蛋白藥物吸入性氣霧劑，其特征在于所述蛋白藥物微囊為白細(xì)胞介素微囊。
17.權(quán)利要求10所述的蛋白藥物吸入性氣霧劑，其特征在于所述蛋白藥物微囊為胰島素微囊。
18.一種蛋白藥物吸入給藥藥盒，包括權(quán)利要求10所述的蛋白藥物吸入性氣霧劑；以及一單位容器，用于收納所述蛋白藥物吸入性氣霧劑，所述容器經(jīng)按壓每次能定量地給出一預(yù)定劑量的蛋白藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種適于制備氣霧劑的蛋白藥物微囊，其以微囊包裹蛋白藥物，并且大部分微囊的粒徑在10微米以下，具有緩釋控釋作用并能維持蛋白藥物的生物活性。本發(fā)明還涉及一種組合物，其含有本發(fā)明的蛋白藥物微囊和藥學(xué)上可接受的載體。本發(fā)明還涉及一種蛋白藥物的吸入性氣霧劑，其含有本發(fā)明的蛋白藥物微囊以及拋射劑，制備成可吸入給藥的氣霧劑劑型?？赏ㄟ^(guò)吸入方式給藥，將蛋白藥物輸送至呼吸系統(tǒng)，達(dá)到治療的目的。本發(fā)明提供了一種用于輸送蛋白藥物的理想新劑型。
文檔編號(hào)A61K38/16GK1634565SQ20041009616
公開(kāi)日2005年7月6日 申請(qǐng)日期2004年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月30日
發(fā)明者柴向東, 王妍, 蔣為民, 張雪濤, 何凌冰 申請(qǐng)人:深圳市海王英特龍生物技術(shù)股份有限公司