專利名稱：胰島素脂質(zhì)體凍干粉、口服胰島素復(fù)合制劑及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于治療II型糖尿病的胰島素脂質(zhì)體凍干粉、口服胰島素復(fù)合制劑及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
胰島素作為降血糖的生化藥用于治療糖尿病已有近百年歷史，迄今仍為I型糖尿病患者的首選藥，亦是越來越多的II型糖尿病患者的必不可少的藥物。目前臨床治療更傾向于對II型糖尿病患者盡早使用胰島素，這樣可使胰島素細(xì)胞得到修復(fù)，同時(shí)更好的減少糖尿病所引起的并發(fā)病。但由于胰島素是多肽類藥物，會被腸胃道的蛋白水解酶降解而不被吸收，所以口服途徑的治療幾乎是無效的，為此，臨床常用胰島素針劑治療。同時(shí)，為了避免外周給藥的不便與不良影響，以及單純用降糖藥帶來的并發(fā)病，國內(nèi)外各大機(jī)構(gòu)均設(shè)計(jì)了各種非注射的胰島素制劑，尤其以各種方式包埋的口服胰島素為主，但現(xiàn)有采用包埋方式生產(chǎn)的胰島素仍普遍存在包埋率低、穩(wěn)定性不好，難達(dá)成工業(yè)化生產(chǎn)等弱點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種包埋率高的胰島素脂質(zhì)體凍干粉和一種含有該胰島素脂質(zhì)體凍干粉的治療II型糖尿病的口服胰島素復(fù)合制劑，該口服胰島素復(fù)合制劑穩(wěn)定性好、便于工業(yè)化生產(chǎn)。一種胰島素脂質(zhì)體凍干粉，其按照以下步驟制備1)將胰島素加入到0. 01-0. 02M的HCl水溶液中充分溶解，使胰島素的濃度為 2. 6-3. 4g/l，再加入pH為6. 5-7. 5,0. 1-0. 2M的磷酸鹽緩沖液混合均勻，使胰島素的濃度達(dá)到0. 34-0. 45g/l，再加入濃度為0. 01-0. 02g/ml膽酸鈉溶液，使胰島素的濃度達(dá)到 0. 33-0. 43g/l，得到水相混合液；2)將質(zhì)量比為1 (1-3)的膽固醇和卵磷脂的混合物共溶于無水乙醇中，充分溶解混合均勻，使混合物的濃度為0. 018-0. 025g/ml,再加上濃度為0. 01-0. 02g/ml的甘露醇水溶液，使膽固醇和卵磷脂的混合物濃度達(dá)到0. 011-0. 013g/ml,再加入濃度為 0. 01-0. 02g/ml的膽酸鈉溶液，使膽固醇和卵磷脂的混合物濃度達(dá)到0. 011-0. 012g/ml，將所得液體放置于高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)10-30min，得到油相混合液；3)將體積比為(1. 3-2. 9) 1的水相混合液與油相混合液在容器中混合均勻并放置在2-6°C的水浴中2-4小時(shí)后，減壓蒸餾除去無水乙醇，得到濃縮液；4)將濃縮液冷凍干燥后得到胰島素脂質(zhì)體凍干粉。本發(fā)明胰島素脂質(zhì)體凍干粉，其按照以下步驟制備1)將胰島素加入到0. OlM的HCl水溶液中充分溶解，使胰島素的濃度為2. 9g/l， 再加入PH為7. 0,0. 2M的磷酸鹽緩沖液混合均勻，使胰島素的濃度達(dá)到0. 42g/l，再加入濃度為0. 01g/ml膽酸鈉溶液，使胰島素的濃度達(dá)到0. 40g/l，得到水相混合液；
2)將質(zhì)量比為1 3的膽固醇和卵磷脂的混合物溶于無水乙醇中，充分溶解混合 均勻，使混合物的濃度為0. 020g/ml，再加上濃度為0. 02g/ml的甘露醇水溶液，使膽固醇和 卵磷脂的混合物濃度達(dá)到0. 0125g/ml，再加入濃度為0. 01g/ml的膽酸鈉溶液，使膽固醇和 卵磷脂的混合物濃度達(dá)到0. 011g/ml，將所得液體放置于高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)10-30min，得到 油相混合液；3)將體積比為2. 7 1的水相混合液與油相混合液在容器中混合均勻并放置在 2-6°C的水浴中2-4小時(shí)后，減壓蒸餾除去無水乙醇，得到濃縮液；4)將濃縮液冷凍干燥后得到胰島素脂質(zhì)體凍干粉。一種治療II型糖尿病的ロ服胰島素復(fù)合制劑，包括按重量份計(jì)的以下組分上述胰島素脂質(zhì)體凍干粉1份；葛根4-13 份；天花粉9- 份；地黃5-15 份；人參1-3 份；黃芪3-9 份；山藥3-10 份。本發(fā)明治療II型糖尿病的ロ服胰島素復(fù)合制劑，包括按重量份計(jì)的以下組分權(quán)利要求1或2所述的胰島素脂質(zhì)體凍干粉1份；葛根8份；天花粉16份；地黃10 份；人參2份；黃芪6份；山藥6份。一種治療II型糖尿病的ロ服胰島素復(fù)合制劑的制備方法，包括以下步驟按比例 稱取ロ服胰島素復(fù)合制劑中的各組分并混合均勻，粉碎過80目篩，濕法制粒，將濕顆粒于 60 70°C烘干，干顆粒用20目篩整粒，灌裝成膠囊。上述胰島素脂質(zhì)體凍干粉在制備治療II型糖尿病的藥物中的應(yīng)用。上述ロ服胰島素復(fù)合制劑在制備治療II型糖尿病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明添加葛根、天花粉、地黃、人參、黃芪、山藥中藥材作為輔料，其中葛根味甘、辛，涼；歸脾、胃經(jīng)。功能與主治解肌退熱，生律，透疹，升陽止瀉?！侗?草綱目》載葛根，性涼、氣平、味甘，具清熱、降火、排毒諸功效。天花粉生律，止渴，降火，潤燥，排膿，消腫。用于熱病煩渴，肺熱燥咳，內(nèi)熱消渴， 瘡瘍腫毒。《本草備要》降火潤燥，滑痰解渴，古方多用治消渴病(即糖尿病)。行水通經(jīng)， 胃熱疸黃，ロ燥唇干，腫毒發(fā)背，乳癰瘡痔。《醫(yī)林纂要》補(bǔ)肺，斂氣，降火，寧心，兼瀉肝郁， 緩肝急，清膀胱熱，止熱淋小便短數(shù)，除陽明濕熱。地黃滋陰，養(yǎng)血。治陰虛發(fā)熱，消渴，吐血，衄血，血崩，月經(jīng)不調(diào)，胎動不安，陰傷 便秘。①《本經(jīng)》主折跌絕筋，傷中，逐血痹，填骨髄，長肌肉，作湯除寒熱積聚，除痹。生者 尤良。②《別錄》主男子五勞七傷，女子傷中，胞漏下血，破惡血，溺血，利大小腸，去胃中宿食，補(bǔ)五臟，內(nèi)傷不足，通血脈，益氣力，利耳目。③《藥性論》補(bǔ)虛損，溫中下氣，通血脈，治產(chǎn)后腹痛，主吐血不止。④《日華子本草》治驚悸勞劣，心肺損，吐血，鼻衄，婦人崩中血暈， 助筋骨。⑤王好古主心病，掌中熱痛，痹氣痿蹙，嗜臥，足下熱而痛。⑥《本草從新》治血虛發(fā)熱，常覺饑餒，倦怠嗜臥。人參大補(bǔ)元?dú)?，固脫生津，安神?！夺t(yī)學(xué)啟源》記錄人參治脾胃陽氣不足及肺氣促，短氣、少氣，補(bǔ)中緩中，瀉肺脾胃中火邪?！吨髦蚊匾酚涗浫藚⒀a(bǔ)元?dú)?，止瀉，生津液。 《滇南本草》記錄人參治陰陽不足，肺氣虛弱。補(bǔ)氣固表，利尿托毒，排膿，斂瘡生肌。用于氣虛乏力，食少便溏，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，氣虛水腫黃芪癰疽難潰，久潰不斂，血虛痿黃，內(nèi)熱消渴；慢性腎炎蛋白尿，糖尿病。山藥補(bǔ)脾養(yǎng)胃，生津益肺，補(bǔ)腎澀精。用于脾虛食少，久瀉不止，肺虛喘咳，腎虛遺精，帶下，尿頻，虛熱消渴。本發(fā)明提供的胰島素脂質(zhì)體凍干粉的包埋率高，胰島素的包埋率均在90%以上； 含有該胰島素脂質(zhì)體凍干粉的口服胰島素復(fù)合制劑穩(wěn)定性好，保存對個(gè)月后，口服胰島素復(fù)合制劑中的胰島素含量仍保持了 99%以上，而胰島素脂質(zhì)體的包埋率與0個(gè)月時(shí)相比， 僅降低了 2%左右，說明包埋在脂質(zhì)體中的胰島素泄露的情況不顯著；由于包埋率高、穩(wěn)定性好使得該口服胰島素復(fù)合制劑便于工業(yè)化生產(chǎn)。胰島素脂質(zhì)體包埋過程在做包膜的過程中選用無水乙醇作為溶劑較用乙醚、氯仿作為溶劑毒副作用小，且形成包膜與胰島素溶液結(jié)合力強(qiáng)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1胰島素脂質(zhì)體凍干粉的制備1)將IOOmg胰島素加入30ml 0. OlM的HCl水溶液中充分溶解，再加入200ml的 pH6. 5,0. IM的磷酸鹽緩沖液混合均勻，再加入IOml濃度為0. 01g/ml膽酸鈉溶液混合均勻， 得到水相混合液；2)將膽固醇0. 5g、卵磷脂0. 5g共溶于40ml無水乙醇中，充分溶解混合均勻，再加上40ml濃度為0. 01g/ml的甘露醇溶液和IOml濃度為0. 01g/ml的膽酸鈉溶液，將所得液體放置于高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)lOmin，得到油相混合液；3)將上述水相混合物和油相混合物倒入容器中混合均勻并放在2V的水浴中2小時(shí)后，減壓蒸去無水乙醇，得到濃縮液；4)將濃縮液冷凍干燥后得到胰島素脂質(zhì)體凍干粉。實(shí)施例2 口服胰島素復(fù)合制劑的制備按重量份計(jì)，將實(shí)施例1所得胰島素脂質(zhì)體凍干粉作為1份，再加入4份葛根、9份天花粉、5份地黃、1份人參、3份黃芪、3份山藥混合均勻，粉碎過80目篩，濕法制粒，將濕顆粒于60°C烘干，干顆粒用20目篩整粒，灌裝成膠囊。實(shí)施例3胰島素脂質(zhì)體凍干粉的制備1)將400mg胰島素加入150ml 0. 02M的HCl水溶液中充分溶解，再加入1000ml、 pH7. 5的0. 2M磷酸鹽緩沖液混合均勻，再加入60ml濃度為0. 02g/ml膽酸鈉溶液混合均勻， 得到水相混合液；2)將膽固醇2. 5g、卵磷脂7. 5g共溶于450ml無水乙醇中，充分溶解混合均勻，再加上400ml濃度為0. 02g/ml的甘露醇溶液和40ml濃度為0. 02g/ml的膽酸鈉溶液，將所得液體放置于高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)30min，得到油相混合液；3)將上述所得水相混合液和油相混合液倒入容器中混合均勻并放置在6°C的水浴中4小時(shí)后，減壓蒸去無水乙醇，得到濃縮液；4)將濃縮液冷凍干燥后得到胰島素脂質(zhì)體凍干粉。實(shí)施例4 口服胰島素復(fù)合制劑的制備按重量份計(jì)，將實(shí)施例3所得胰島素脂質(zhì)體凍干粉作為1份，再加入13份葛根、29 份天花粉、15份地黃、3份人參、9份黃芪、10份山藥混合均勻，粉碎過80目篩，濕法制粒，將濕顆粒于70°C烘干，干顆粒用20目篩整粒，灌裝成膠囊。實(shí)施例5胰島素脂質(zhì)體凍干粉的制備1)將200mg胰島素加入70ml 0. OlM的HCl水溶液中充分溶解，再加入400ml、 pH7. 0的0. 2M磷酸鹽緩沖液混合均勻，再加入20ml濃度為0. 01g/ml膽酸鈉溶液混合均勻， 得到水相混合液；2)將膽固醇0. 5g、卵磷脂1. 5g共溶于IOOml無水乙醇中，充分溶解混合均勻，再加上60ml濃度為0. 02g/ml的甘露醇溶液和20ml濃度為0. 01g/ml的膽酸鈉溶液，將所得液體放置于高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)20min，得到油相混合液；3)將上述所得水相混合液和油相混合液倒入容器中混合均勻并放置在6°C的水浴中3小時(shí)后，減壓蒸去無水乙醇，得到濃縮液；4)將濃縮液冷凍干燥后得到胰島素脂質(zhì)體凍干粉。實(shí)施例6 口服胰島素復(fù)合制劑的制備按重量份計(jì)，將實(shí)施例5所得胰島素脂質(zhì)體凍干粉作為1份，再加入8份葛根、16 份天花粉、10份地黃、2份人參、6份黃芪、6份山藥混合均勻，粉碎過80目篩，濕法制粒，將濕顆粒于65°C烘干，干顆粒用20目篩整粒，灌裝成膠囊。實(shí)施例7胰島素脂質(zhì)體凍干粉的制備1)將270mg胰島素加入IOOml 0. OlM的HCl水溶液中充分溶解，再加入500ml、 pH7. O的0. IM磷酸鹽緩沖液混合均勻，再加入30ml濃度為0. 01g/ml膽酸鈉溶液混合均勻， 得到水相混合液；2)將膽固醇1. 5g、卵磷脂1. 5g共溶于160ml無水乙醇中，充分溶解混合均勻，再加上80ml濃度為0. 01g/ml的甘露醇溶液和30ml濃度為0. 01g/ml的膽酸鈉溶液，將所得液體放置于高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)20min，得到油相混合液；3)將上述所得水相混合液和油相混合液倒入容器中混合均勻并放置在6°C的水浴中3小時(shí)后，減壓蒸去無水乙醇，得到濃縮液；4)將濃縮液冷凍干燥后得到胰島素脂質(zhì)體凍干粉。實(shí)施例8 口服胰島素復(fù)合制劑的制備按重量份計(jì)，將實(shí)施例7所得胰島素脂質(zhì)體凍干粉作為1份，再加入8份葛根、16 份天花粉、10份地黃、2份人參、6份黃芪、6份山藥混合均勻，粉碎過80目篩，濕法制粒，將濕顆粒于65°C烘干，干顆粒用20目篩整粒，灌裝成膠囊。實(shí)施例9胰島素脂質(zhì)體凍干粉的胰島素包埋率檢測精確稱取實(shí)施例2、4、6和8中所得膠囊的內(nèi)容物各2. 5g，分別加入三蒸水IOml使內(nèi)容物均勻分散且使凍干粉溶解，在低溫離心機(jī)中4°C、12000rpm分別離心IOmin去除中藥粉末，取上清液，分別用截留分子量為12000的濾膜進(jìn)行超濾，游離胰島素溶液可通過濾膜，分別測量各游離胰島素溶液體積，依中華人民共和國藥典2010年版二部胰島素檢驗(yàn)方法采用HPLC法測定游離胰島素濃度，色譜條件如下。包埋率=(1-游離胰島素濃度X游離胰島素溶液體積/總胰島素質(zhì)量)X 100%，其中總胰島素質(zhì)量是指在實(shí)施例1、3、5、7中進(jìn)行包埋時(shí)，投入包埋體系中總的胰島素質(zhì)量。包埋率檢測結(jié)果見表1。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0. 2mo 1/L硫酸鹽緩沖液(取無水硫酸鈉28. 4g，加水溶解后，加磷酸2. 7ml、水800ml，用乙醇胺調(diào)節(jié)pH值至2. 3，加水至 IOOOml)-乙腈(體積比74 26))為流動相，流速為1. Oml/min ；柱溫為40°C ；檢測波長 214nm。表1胰島素脂質(zhì)體凍干粉包埋率檢測結(jié)果
樣品包埋率實(shí)施例291. 7%實(shí)施例491. 2%實(shí)施例692. 0%實(shí)施例891. 5%結(jié)果表明胰島素脂質(zhì)體凍干粉中能夠包埋90%以上的胰島素，包埋率高。實(shí)施例10 口服胰島素復(fù)合制劑中胰島素穩(wěn)定性的檢測將實(shí)施例2、4、6和8中所得口服胰島素復(fù)合制劑置于溫度25士2°C、濕度60% 士 10%的條件下保存，于0、3、6、9、12、18、對個(gè)月分別取樣。精確稱取實(shí)施例2、4、6和8中所得膠囊的內(nèi)容物各2. 5g，加入IOml的0. lmol/L鹽酸水溶液使內(nèi)容物均勻分散且使凍干粉溶解，將其靜置過夜使脂質(zhì)體破裂，在低溫離心機(jī)中4°C、12000rpm分別離心IOmin去除中藥粉末，取上清液，分別測量各上清液體積，依中華人民共和國藥典2010年版二部胰島素檢驗(yàn)方法采用HPLC法測定上清液中胰島素濃度。保留的胰島素含量百分比=上清液中胰島素濃度X上清液體積/總胰島素質(zhì)量X100%，其中總胰島素質(zhì)量是指在實(shí)施例1、3、 5、7中進(jìn)行包埋時(shí)，投入包埋體系中總的胰島素質(zhì)量。具體檢驗(yàn)結(jié)果見表2。表2 口服胰島素復(fù)合制劑中胰島素穩(wěn)定性檢測結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種胰島素脂質(zhì)體凍干粉，其特征在于按照以下步驟制備1)將胰島素加入到0.01-0. 02M的HCl水溶液中充分溶解，使胰島素的濃度為 2. 6-3. 4g/l，再加入pH為6. 5-7. 5,0. 1-0. 2M的磷酸鹽緩沖液混合均勻，使胰島素的濃度達(dá)到0. 34-0. 45g/l，再加入濃度為0. 01-0. 02g/ml膽酸鈉溶液，使胰島素的濃度達(dá)到 0. 33-0. 43g/l，得到水相混合液；2)將質(zhì)量比為1 (1- 的膽固醇和卵磷脂的混合物共溶于無水乙醇中，充分溶解混合均勻，使混合物的濃度為0. 018-0. 025g/ml，再加上濃度為0. 01-0. 02g/ml的甘露醇水溶液，使膽固醇和卵磷脂的混合物濃度達(dá)到0. 011-0. 013g/ml，再加入濃度為0. 01-0. 02g/ml 的膽酸鈉溶液，使膽固醇和卵磷脂的混合物濃度達(dá)到0. 011-0. 012g/ml，將所得液體放置于高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)10-30min，得到油相混合液；3)將體積比為(1.3-2.9) 1的水相混合液與油相混合液在容器中混合均勻并放置在 2-6°C的水浴中2-4小時(shí)后，減壓蒸餾除去無水乙醇，得到濃縮液；4)將濃縮液冷凍干燥后得到胰島素脂質(zhì)體凍干粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰島素脂質(zhì)體凍干粉，其特征在于按照以下步驟制備1)將胰島素加入到0.OlM的HCl水溶液中充分溶解，使胰島素的濃度為2. 9g/l，再加入pH為7. 0,0. 2M的磷酸鹽緩沖液混合均勻，使胰島素的濃度達(dá)到0. 42g/l，再加入濃度為 0. 01g/ml膽酸鈉溶液，使胰島素的濃度達(dá)到0. 40g/l，得到水相混合液；2)將質(zhì)量比為1 3的膽固醇和卵磷脂的混合物溶于無水乙醇中，充分溶解混合均勻， 使混合物的濃度為0. 020g/ml，再加上濃度為0. 02g/ml的甘露醇水溶液，使膽固醇和卵磷脂的混合物濃度達(dá)到0. 0125g/ml，再加入濃度為0. 01g/ml的膽酸鈉溶液，使膽固醇和卵磷脂的混合物濃度達(dá)到0. 011g/ml，將所得液體放置于高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)10-30min，得到油相混合液；3)將體積比為2.7 1的水相混合液與油相混合液在容器中混合均勻并放置在2-6°C 的水浴中2-4小時(shí)后，減壓蒸餾除去無水乙醇，得到濃縮液；4)將濃縮液冷凍干燥后得到胰島素脂質(zhì)體凍干粉。
3.一種治療II型糖尿病的口服胰島素復(fù)合制劑，其特征在于包括按重量份計(jì)的以下組分權(quán)利要求1或2所述的胰島素脂質(zhì)體凍干粉1份； 葛根4-13份；天花粉9- 份；地黃5-15份；人參1-3份；黃芪3-9份；山藥3-10份。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述治療II型糖尿病的口服胰島素復(fù)合制劑，其特征在于包括按重量份計(jì)的以下組分權(quán)利要求1或2所述的胰島素脂質(zhì)體凍干粉1份； 葛根8份；天花粉16份；黃參芪藥地人黃山10份；2份； 6份； 6份。
5.一種如權(quán)利要求3所述的治療II型糖尿病的口服胰島素復(fù)合制劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟按比例稱取口服胰島素復(fù)合制劑中的各組分并混合均勻，粉碎過80 目篩，濕法制粒，將濕顆粒于60 70°C烘干，干顆粒用20目篩整粒，灌裝成膠囊。
6.一種如權(quán)利要求4所述的治療II型糖尿病的口服胰島素復(fù)合制劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟按比例稱取口服胰島素復(fù)合制劑中的各組分并混合均勻，粉碎過80 目篩，濕法制粒，將濕顆粒于60 70°C烘干，干顆粒用20目篩整粒，灌裝成膠囊。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的胰島素脂質(zhì)體凍干粉在制備治療II型糖尿病的藥物中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的口服胰島素復(fù)合制劑在制備治療II型糖尿病的藥物中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的口服胰島素復(fù)合制劑在制備治療II型糖尿病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于治療II型糖尿病的胰島素脂質(zhì)體凍干粉、口服胰島素復(fù)合制劑及其制備方法與應(yīng)用，胰島素脂質(zhì)體凍干粉包埋率高，口服胰島素復(fù)合制劑穩(wěn)定性好、便于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明胰島素脂質(zhì)體凍干粉按照以下步驟制備將胰島素加入到HCl水溶液中，再加入磷酸鹽緩沖液和膽酸鈉溶液，得到水相混合液；將膽固醇和卵磷脂共溶于無水乙醇中，再加上甘露醇水溶液和膽酸鈉溶液，均質(zhì)10-30min，得到油相混合液；將水相混合液與油相混合液混合均勻并放置在2-6℃的水浴中，減壓蒸餾，得到濃縮液；將濃縮液冷凍干燥。
文檔編號A61K36/8945GK102319216SQ20111028530
公開日2012年1月18日 申請日期2011年9月23日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月23日
發(fā)明者王志萍, 范圣剛 申請人:范圣剛