專利名稱：香鱗毛蕨中綿馬素bb在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及香鱗毛蕨中綿馬素BB在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
癌癥是死亡率極高的人類健康第二號(hào)“殺手”，開發(fā)和研制高效低毒的天然抗癌藥物是目前乃至未來人類所需著重解決的重大科技任務(wù)之一。近年來隨著分子腫瘤學(xué)、分子藥理學(xué)的不斷發(fā)展以及對(duì)腫瘤本質(zhì)的逐漸闡明，藥物、基因工程、組合化學(xué)、大規(guī)?？焖俸Y選等先進(jìn)技術(shù)的廣泛應(yīng)用，加速了新型抗腫瘤藥物的開發(fā)。目前主要的抗腫瘤藥物有:烷化齊[J，抗代謝藥物，抗腫瘤抗生素，鉬類抗腫瘤藥物，激素類，抗腫瘤植物藥，用于微管和微管蛋白的紫杉醇，用于拓?fù)洚悩?gòu)酶的喜樹堿，以及用于抑制腫瘤細(xì)胞DNA合成的三尖杉酯堿。然而普通的化學(xué)抗腫瘤藥物存在著毒副作用較大的缺點(diǎn)，限制了臨床應(yīng)用，因此開發(fā)低毒的天然抗腫瘤藥物已顯現(xiàn)了巨大的潛力，并已日益成為國內(nèi)外學(xué)者研究的焦點(diǎn)和熱點(diǎn)，孕育著重大的科學(xué)發(fā)現(xiàn)。鱗毛蕨屬中主要的藥用植物為傳統(tǒng)驅(qū)蟲藥，應(yīng)用歷史悠久，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。除了傳統(tǒng)的藥理功效外，還具有良好的抗病毒、抗腫瘤、抗菌、消炎、止血及子宮收縮等活性?；瘜W(xué)研究表明該屬植物的有效成分為其特征性成分——間苯三酚類化合物(左麗,2004)。香鱗毛蕨D ryopteris frag rans L.為鱗毛蕨科鱗毛蕨屬植物,生長(zhǎng)于海拔100021700m的山坡或巖石縫中，分布于東北、華北各省。從該植物中分離鑒定出的間苯三酚類化合物有80多種。民間廣泛用其治療多種皮膚病(沈志濱，2006)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供了香鱗毛蕨中綿馬素BB在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明以人乳腺癌細(xì)胞、人肺癌細(xì)胞、人胃癌細(xì)胞、人前列腺癌細(xì)胞、人結(jié)腸癌細(xì)胞、人白血病細(xì)胞、人卵巢癌細(xì)胞、人宮頸癌細(xì)胞、人肝癌細(xì)胞、人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞為研究對(duì)象，使用MTT法檢測(cè)香鱗毛蕨中綿馬素BB對(duì)腫瘤細(xì)胞的體外抑制作用，結(jié)果證明，綿馬素BB對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用較明顯。本發(fā)明通過裸鼠體內(nèi)實(shí)體瘤抑瘤實(shí)驗(yàn)證明香鱗毛蕨中綿馬素BB具有體內(nèi)抗腫瘤活性?；谏鲜鲅芯拷Y(jié)果，本發(fā)明證實(shí)了香鱗毛蕨中綿馬素BB具有治療乳腺癌、前列腺癌、肝癌等癌癥的潛在價(jià)值，可用于制備抗腫瘤的藥物。本發(fā)明可以純化的形式與藥學(xué)上適當(dāng)?shù)妮d體一起被使用?？芍瞥傻乃幬飫┬桶ㄆ瑒?、丸劑、膠囊劑、顆 粒劑、混懸劑、滴丸、口服液或粉針劑，還可以采用現(xiàn)代制藥界所公認(rèn)的控釋或緩釋劑型。根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物的給藥途徑可以是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員普遍知道的任何一種?？梢酝ㄟ^任何適當(dāng)?shù)姆绞浇o藥，包括非腸道、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹腔內(nèi)給藥，或者也可以通過用導(dǎo)管直接灌注給藥。給藥的劑量和頻率依據(jù)年齡、性別、病人狀態(tài)，同時(shí)服用其它藥物、不良反應(yīng)和臨床醫(yī)師考慮到的其它因素而定。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn):1.本發(fā)明以新鮮或者干燥香鱗毛蕨為原料，在不破壞植物生態(tài)平衡、不影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的基礎(chǔ)上，對(duì)植物資源進(jìn)行高效合理的利用。2.本發(fā)明中的香鱗毛蕨中綿馬素BB具有低毒不易產(chǎn)生耐藥性的特點(diǎn)，對(duì)腫瘤細(xì)胞的IC50值可達(dá)到10 μ Μ-20 μ Mo
具體實(shí)施方案實(shí)例一體外檢測(cè)抗腫瘤活性試驗(yàn)細(xì)胞:人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)、人肺癌細(xì)胞(Α549)、人胃癌細(xì)胞(SGC-7901)、人前列腺癌細(xì)胞(PC-3)、人結(jié)腸癌細(xì)胞(HCT-8)、人白血病細(xì)胞(CEM)、人卵巢癌細(xì)胞(Η0-8910)、人宮頸癌細(xì)胞(Hela)、人肝癌細(xì)胞0fepG2)、人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞(SHG-44)。均購自上海細(xì)胞庫。實(shí)驗(yàn)材料:香鱗毛蕨中綿馬素BB，本實(shí)驗(yàn)室制備；生理鹽水，哈爾濱三聯(lián)藥業(yè)；紫杉醇，上海昊化化工有限公司。方法:(1)分別取處于指數(shù)生長(zhǎng)期的腫瘤細(xì)胞，用含有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液稀釋成20000個(gè)細(xì)胞/mL。(2) 96孔板每孔中加入200 μ L細(xì)胞懸液，置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。(3)將木豆葉中木豆芪酸I用DMSO溶解，每孔中加入一定濃度的藥物，稀釋至需要的工作濃度。同時(shí)以紫杉醇為陽性對(duì)照。(4)置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)72h。(5)MTT用生理鹽水配成5mg/mL溶液，每孔中加入20yL，置于37°C、5% CO2孵箱中孵育4h。(6)吸出上清，加入100 μ LDMSO溶解沉淀物，用振蕩器搖勻IOmin測(cè)定0D570值。(7)按公式計(jì)算藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率:公式:腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率=(1-實(shí)驗(yàn)組OD/對(duì)照組0D) X 100%根據(jù)72h的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，由OD值計(jì)算生長(zhǎng)抑制率，將抑制率與藥物濃度做圖，得出劑量反應(yīng)曲線，計(jì)算出IC50l(半數(shù)抑制濃度)值。表I綿馬素BB對(duì)腫瘤細(xì)胞的體外半數(shù)抑制率
權(quán)利要求
1.本發(fā)明涉及一種香鱗毛蕨中綿馬素BB在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于香鱗毛蕨中綿馬素BB加入不同的賦形劑后可加工成任何一種藥劑學(xué)上所說的劑型。
2.權(quán)利要求1所述的一種香鱗毛蕨中綿馬素BB在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的腫瘤包括:人乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人卵巢癌H0-8910細(xì)胞、人前列腺癌PC-3細(xì)胞、人結(jié)腸癌HCT-8細(xì)胞、人肺癌A549細(xì)胞、人白血病CEM細(xì)胞、人宮頸癌Hela細(xì)胞、人肝癌H印G2細(xì)胞、人腦膠質(zhì)瘤SHG-44細(xì)胞、人胃腺癌SGC-7901細(xì)胞。
3.權(quán)利要求1所述的一 種香鱗毛蕨中綿馬素BB在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的劑型包括片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、口服液或粉針劑，以及用現(xiàn)代制藥界所公認(rèn)的控釋或緩釋劑型。
全文摘要
本發(fā)明涉及了香鱗毛蕨中綿馬素BB在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明利用體外MTT法、體內(nèi)裸鼠實(shí)驗(yàn)以及核磁共振檢測(cè)證明綿馬素BB對(duì)于多種腫瘤細(xì)胞均具有較好的活性，尤其是對(duì)MCF-7腫瘤細(xì)胞。并且綿馬素BB加入不同的賦形劑后可加工成任何一種藥劑學(xué)上所說的劑型。香鱗毛蕨中綿馬素BB具有毒副作用小，療效確切，安全可靠等特點(diǎn)。香鱗毛蕨資源豐富，采集方便，提取工藝簡(jiǎn)單，便于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K31/122GK103191086SQ20121000161
公開日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2012年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月5日
發(fā)明者付玉杰, 高暢, 孫瑤, 祖元?jiǎng)? 王薇, 姚麗萍 申請(qǐng)人:東北林業(yè)大學(xué), 付玉杰