專利名稱：一種防治禽流感的藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種防治高致病性禽流感的藥物及其制備方法，尤其涉及一種從植物材料的提取物中制備得到的用于防治禽流感的藥物及其制備方法，屬于生命科學(xué)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
高致病性禽流感(Highly Pathogenic Avian Influenza，簡(jiǎn)稱HPAI)，也稱為雞瘟。它是由高致病性流感病毒H5N1(或H7N1)經(jīng)呼吸道、消化道或氣源性媒介傳播的一種烈性傳染病。2002-2004年度相繼在東南亞國(guó)家越南、泰國(guó)、馬來(lái)西亞、印度尼西亞、韓國(guó)、日本等和中國(guó)中南部各省、香港和臺(tái)灣發(fā)生的禽流感，不僅大批雞、鴨、鵝和火雞被感染致死或被撲殺，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，而且發(fā)生了禽-人之間的傳播，引起人類感染并有死亡。例如，香港、越南和泰國(guó)均有報(bào)告因禽流感病毒H5N1感染的病人致死病例總計(jì)達(dá)到幾十例、泰國(guó)50只老虎也因禽流感致死。因此，禽流感的暴發(fā)曾引起人們的極大恐慌。這種病毒的肆虐，不但給養(yǎng)禽業(yè)遭受嚴(yán)重打擊，同時(shí)向人類的健康發(fā)出了新的挑戰(zhàn)，開(kāi)展對(duì)禽流感病毒的研究關(guān)系到公共健康、國(guó)計(jì)民生和社會(huì)發(fā)展。
目前，國(guó)際上仍無(wú)防治高致病H5N1禽流感的特效藥物。撲滅禽流感主要是采用隔離、封鎖、樸殺焚燒或深埋、緊急免疫接種、消毒等綜合手段。其中，后者使用的消毒劑有石灰、漂泊粉、氫氧化鈉稀溶液。這些無(wú)機(jī)制劑最大的不足是造成環(huán)境污染，也不能用于高危人群和污染織物的消毒。因此，從藥用植物中尋找純天然、高效低毒，對(duì)人禽安全使用，同時(shí)不污染環(huán)境的新型消毒劑，對(duì)禽流感的防治具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種新的能夠有效防治流感的藥物。
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是通過(guò)以下技術(shù)途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明的防治禽流感的藥物組合物，主要由以下步驟制備而成將香薷、薄荷、連翹、金蕎麥、茶葉、貫眾、淫羊藿分別提取其活性成分，將純化后的提取物經(jīng)組方配制而得。
詳細(xì)的制備方法如下將香薷、連翹粉碎，以稀乙醇或水淹過(guò)藥面，加熱蒸餾得到揮發(fā)油，經(jīng)油水分離、干燥得提取物；將薄荷、金蕎麥、茶葉、貫眾、淫羊藿粉碎后加熱回流提取3～4次，每次1～2小時(shí)，過(guò)濾除去藥渣，合并濾液，減壓濃縮得到的浸膏，加入適量水轉(zhuǎn)溶，澄清的水溶液經(jīng)過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(或聚酰胺)柱，去除無(wú)機(jī)鹽、氨基酸、糖類等雜質(zhì)，被吸附物以乙醇解吸，在減壓下濃縮解吸液至干，得到提取物。最后將所得的提取物根據(jù)消毒劑要求和不同用途進(jìn)行組方配制而得。
香薷為唇形科植物，拉丁文名稱為Elsholtzia splendens Nakai或E.ciliata。
薄荷為唇形科植物，拉丁文名稱為Mentha hyplocalyx Briq(M.aroensisL.var.hyplocalyx Briq)或M.hyplocalyx Briq var.piperascens.
連翹為木犀科植物，拉丁文名稱為Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl L.
金蕎麥為蓼科植物，拉丁文名稱為Fagopyrum cymosun(F.dibotrys)茶為茶科植物，拉丁文名稱為Camellia sinensis Kuntnze或C.japonica L.
貫眾為鱗毛蕨科植物，拉丁文名稱為Dryopteris crassirhizoma Nakai；Cyrtomium fortunei；Osmunda japonica；Blechnum orientale.
淫羊藿為小檗科植物，拉丁文名稱為Epimedium koreanum Nakai；E.Sagitatum；E.Breivicornum；E.Macroamthum；E.Wanshanense.
本發(fā)明藥物中含有木質(zhì)素類、兒茶素、黃烷醇衍生物、間苯三酚衍生物、黃酮類及揮發(fā)油、迷迭香酸、連翹酯苷、兒茶酚及其二聚或三聚體衍生物、貫眾素和淫羊藿苷等多種活性成分，這些活性成分混合在一起，各種藥效相互協(xié)調(diào)、配合能夠有效滅活禽流感病毒H5N1，也可滅活或抑制其他流感病毒，如甲型、乙型流感病毒等。此外，本發(fā)明藥物還有殺菌的功效，可有效殺滅金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、白色念珠菌、大腸桿菌等，可以進(jìn)一步加工制成適用于養(yǎng)雞場(chǎng)、養(yǎng)鴨場(chǎng)、公共場(chǎng)所等的空氣消毒劑及高危人群的洗手消毒用洗手液等。
具體實(shí)施例方式
以下通過(guò)實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步描述本發(fā)明，應(yīng)該理解的是，這些實(shí)施例儀用于例證的目的，決不限制本發(fā)明的范圍。
本發(fā)明藥物的制備取1kg粉碎的香薷，加水過(guò)面，加熱蒸餾，收集揮發(fā)油，經(jīng)油水分離、干燥得提取物(A)15g；取1kg粉碎的薄荷生藥干品，加水過(guò)面，回流提取3次，每次1小時(shí)，過(guò)濾，合并的濾液通過(guò)聚酰胺柱，以90％乙醇解吸附，乙醇溶液在減壓下濃縮至干，得提取物(B)62g；取連翹600g，加開(kāi)水3500ml，加熱蒸餾提取4次，每次2小時(shí)，并收集揮發(fā)油和水提取物。合并的油層經(jīng)脫水干燥得揮發(fā)油(C)20.8g，水提取物過(guò)濾，濾液經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂柱，以乙醇解吸，減壓下濃縮乙醇溶液至干得提取物(D)40.6g；茶葉1kg，加水過(guò)面，回流提取3次，每次1小時(shí)，過(guò)濾，合并的濾液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，以乙醇解吸，減壓下濃縮乙醇溶液至干得提取物(E)70g。
取貫眾1kg，加水過(guò)面，回流提取3次，每次1小時(shí)，過(guò)濾，合并的濾液通過(guò)聚酰胺柱，以90％乙醇解吸附，乙醇溶液在減壓下濃縮至干，得提取物(F)68g。
粉碎的淫羊藿1kg，加稀醇過(guò)面，回流提取3次，每次1小時(shí)，過(guò)濾，合并的濾液在減壓下濃縮至無(wú)醇味，加蒸餾水2000ml，過(guò)濾，濾液通過(guò)聚酰胺柱，以90％乙醇解吸附，乙醇溶液在減壓下濃縮至干，得提取物(G)78g。
取粉碎的金蕎麥1kg，加水過(guò)面，回流提取次4次，每次2小時(shí)，過(guò)濾，濾液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，乙醇解吸附。減壓下濃縮乙醇解吸液至干，得提取物(H)55g。
將以上所得到的A、B、C、D、E、F、G、H共八種提取物，根據(jù)消毒劑的要求和不同使用目的，進(jìn)行組方配制成空氣消毒劑或消毒洗手液。
本發(fā)明藥物的體外抗流感病毒的活性測(cè)定一、試驗(yàn)材料細(xì)胞狗腎細(xì)胞(MDCK)(來(lái)源于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物技術(shù)研究所)病毒流感甲型病毒(濟(jì)防190-15)；流感乙型(濟(jì)防197-13)在雞胚尿囊腔內(nèi)培養(yǎng)傳代。
受試樣品本發(fā)明實(shí)施例所制備的藥物。
陽(yáng)性對(duì)照藥病毒唑(RBV)(上海羅氏制藥有限公司)。
二、試驗(yàn)方法及結(jié)果試驗(yàn)方法以MTT法測(cè)定藥物對(duì)MDCK細(xì)胞半數(shù)毒性濃度(TC50)；以CPE法測(cè)定病毒對(duì)MDCK細(xì)胞半數(shù)感染濃度(TCID50)；以CPE法測(cè)定藥物抗病毒活性；試驗(yàn)重復(fù)兩次，取平均值。結(jié)果見(jiàn)表1表1本發(fā)明藥物體外抗流感病毒試驗(yàn)結(jié)果

SI＝TC50/IC50；表中TC50和IC50值(除RBV)為樣品母液的稀釋倍數(shù)；RBV、TC50及IC50單位為μg/ml[試驗(yàn)例2]本發(fā)明藥物的抗禽流感病毒活性檢測(cè)一、試驗(yàn)材料SPF種蛋；病毒AIV(H5N1)(來(lái)源于中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物所病毒室)。
陽(yáng)性血清AIV(H5N1)(來(lái)源于中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物所病毒室)。
受試樣品本發(fā)明實(shí)施例所制備的藥物。
二、試驗(yàn)方法及結(jié)果試驗(yàn)方法1.測(cè)定受試樣品對(duì)雞胚毒性，獲得各樣品的最大稀釋度；2.測(cè)定禽流感病毒EID503.受試樣品的抗病毒試驗(yàn)(雞胚法)4.測(cè)定半數(shù)抑制濃度(IC50)結(jié)果表明，受試樣品的最大稀釋度分別為1/200；1/100；1/200；1/100；1/100；1/40；1/200；1/300；1/40；1/100。受試樣品中除A，B，C，D外，其余樣品在這些濃度下對(duì)禽流感病毒H5N1的平均滅活率達(dá)100％(見(jiàn)表2)。
表2.受試樣品抗禽流感病毒(H5N1)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
本發(fā)明藥物用作禽流感消毒劑的制備(噴霧用)材料本發(fā)明實(shí)施例所得到的提取物A、B、E和F；95％乙醇；蒸餾水。
配方A 5g；B 10g；E 10g；F 25g；95％乙醇230ml；蒸餾水770ml。
配制方法將A用乙醇溶解，B，E和F各以50ml(蒸餾水)溶解后，合并各溶液，過(guò)濾，得到的濾液加水至1000ml即得噴霧用消毒劑。
本發(fā)明藥物用作禽流感消毒洗手液的制備材料本發(fā)明實(shí)施例所得到的提取物B、C、D、E、F、G和H；烷基苯磺酸鈉；Vc。
配方B 10g；C 5g；D 10g；E 10g；F 25g；G 25g；H 10g。
配制方法合并B、D、E、F、G、H和Vc(200mg)，加入120ml水，水浴加熱使溶解，C與880ml烷基苯磺酸鈉混合均勻后再與水溶液合并，即得洗手消毒液。
應(yīng)用例1所配制的空氣消毒劑和上述洗手消毒液，以試管稀釋法進(jìn)行抗菌實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表3。試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，本發(fā)明所配制的空氣消毒劑和洗手消毒液能夠有效殺滅各類細(xì)菌。
表3.空氣消毒劑和洗手液抑制結(jié)果(原液濃度為1)

權(quán)利要求
1.一種防治禽流感的藥物，主要由以下方法制備而成將香薷、薄荷、連翹、金蕎麥、茶葉、貫眾、淫羊藿分別提取其活性成分，將所得的提取物經(jīng)純化后組方配制而得。
2.按照權(quán)利要求1的藥物，其特征是由以下方法制備而成將香薷、連翹粉碎后分別加熱蒸餾提取揮發(fā)油，經(jīng)油水分離、干燥得提取物；金蕎麥、茶葉、貫眾、淫羊藿、薄荷粉碎后分別加熱回流，將提取液過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮得浸膏，將浸膏用水溶解，經(jīng)過(guò)大孔吸附樹(shù)脂或聚酰胺柱，去除雜質(zhì)，將被吸附物以乙醇解吸，在減壓下濃縮解吸液至干，得提取物；最后將上述所得的提取物根據(jù)消毒劑的要求進(jìn)行組方配制得到。
3.按照權(quán)利要求1或2的藥物，其特征是可按本領(lǐng)域常規(guī)制劑方法制備成任何一種適宜的臨床制劑。
4.權(quán)利要求1～3的任一藥物在制備防治流感病毒藥物中的用途。
5.按照權(quán)利要求4所述的用途，其特征是在制備防治禽流感病毒H5N1、甲型、乙型流感病毒藥物中的用途。
6.權(quán)利要求1～3的任一藥物在制備殺滅金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、白色念珠菌、大腸桿菌藥物中的用途。
7.權(quán)利要求1～3的任一藥物在制備消毒劑、消毒洗手液中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種新的防治高致病性禽流感的藥物。該藥物主要由下述方法制備而成將香薷、薄荷、連翹、金蕎麥、茶葉、貫眾、淫羊藿分別提取其活性成分，將所得的提取物經(jīng)純化后組方配制而得。試驗(yàn)證實(shí)，本發(fā)明藥物具有完全滅活禽流感病毒(H5N1)的作用。
文檔編號(hào)A61P1/16GK1799593SQ20041010398
公開(kāi)日2006年7月12日 申請(qǐng)日期2004年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月31日
發(fā)明者陳迪華, 高微微, 潘瑞樂(lè), 斯建勇 申請(qǐng)人:中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所