專利名稱：Ct造影功能的樹狀大分子/金-銀合金納米顆粒的制備的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬納米顆粒的制備領域，特別是涉及一種具有CT造影功能的樹狀大分子/ 金-銀合金納米顆粒的原位制備方法。
背景技術：
貴金屬納米顆粒以其獨特的光學、電學、催化及與量子尺寸相關的特性在許多 領域表現(xiàn)出其潛在的應用價值，引起了研究者們濃厚的研究興趣。其中，金納米顆粒 和銀納米顆粒因具有納米結構的顯著特性而倍受研究者的青睞。Shi X. Y.等[Shi， X. Y. ；Wang, S. H. ；Meshinchi, S. ；Van Antwerp, Μ. Ε. ；Bi, Χ. D. ；Lee, I. H. ；Baker, J. R. Dendrimer-Entrapped Gold Nanoparticles as a Platform for Cancer-Cell Targeting and Imaging [J]. Small 2007，3，1245.]用原位還原法制備 了平均尺寸為 3. 2nm的金納米顆粒。制備得到的金納米顆粒具有良好的生物相容性，可對癌癥細胞進行 有效地靶向和成像。Sutton, Α.等[Sutton，Α. ；Franc, G. ；Kakkar, A. J. Polym. Sci. Pol. Chem. 2009，47，(18)，4482-4493.]證明銀納米顆粒在對氯硝基苯的還原反應中具有很高的 催化活性。特別地，金-銀合金納米顆粒因具有獨特的光學，催化等特性而受到廣泛的關 注。Endo, T.等[Endo, T. ；Yoshimura, T. ；Esumi, K. Journal of Colloid and Interface Science 2005,286,602.]發(fā)現(xiàn)金-銀合金納米顆粒對p-硝基酚具有優(yōu)于單質金、銀的催化 活性。隨著研究的深入，金、銀納米顆粒及其合金納米顆粒已在化學催化、生物醫(yī)藥、疾 病診斷、光熱治療、藥物運輸及基因轉染等領域受到廣泛的應用。對這些應用而言，制備得 到具有可控光學特性，良好分散性，可控尺寸及尺寸分布等性質的金屬納米顆粒是研究的 熱點和難點。專利申請?zhí)枮镃N200710075684. 1的專利“納米微粒的制造方法”采用添加含 鈣、鎂、鑭、鋇、釔和/或鈰的可溶性鹽作為阻隔劑，乙二胺四乙酸、蘋果酸、葡萄糖和/或蔗 糖作為燃燒劑的方法，以燒結的手段制備納米微粒。專利“一種合成納米Ag-Ni合金的方 法”(專利申請?zhí)朇N200710011671.8)利用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)為分散劑，采用弱還原 劑胼對金屬離子進行還原獲得致密度超過99%的納米晶Ag-Ni合金。采用上述專利報道的制備方法可以得到具有一定性質的合金納米顆粒，然而合金 納米顆粒光學性質及尺寸不能被有效控制。在眾多基于聚合物的金、銀納米顆粒的制備方 法中，以樹狀大分子作為模板和穩(wěn)定劑因具有巨大的優(yōu)勢而受到廣大研究者的關注。樹狀 大分子是近二十幾年來發(fā)展起來的具有高度支化結構的大分子，它由3個結構部分組成 中心核、內層支化單元、端基支化單元。它擁有精準的分子結構、分子內層存在的空腔，及大 量的官能團。目前比較常見的樹狀大分子主要有聚酰胺-胺類樹狀大分子，聚丙烯亞胺類 樹狀大分子，聚酯類樹狀大分子和聚醚類樹狀大分子。 本專利中采用的是聚酰胺-胺(PAMAM)樹狀大分子，這是目前研究最廣泛、最深入 的樹狀大分子之一。自Tomalia于1985年首次用發(fā)散法成功合成以來，聚酰胺-胺樹狀大 分子已實現(xiàn)了商業(yè)化生產(chǎn)，并在多個領域獲得廣泛的研究和應用。它既具有樹狀大分子的共性，又具有自身的特點。其分子中有大量含N的官能團，這些官能團以規(guī)則的一層接一層 支化的方式存在，并且其數(shù)量隨分子代數(shù)的增加以幾何級數(shù)的形式增加，高代數(shù)分子呈球 狀、分子本身具有納米級尺寸。相對于線型的聚合物，其結構固定規(guī)整，由中心向外對稱發(fā) 散并高度分支，有著極好的幾何對稱性。聚酰胺_胺樹狀大分子大量的表面基團具有可控 性，可通過修飾功能基團形成具有生物功能的多功能大分子通過修飾葉酸分子得到具有 靶向癌細胞的功能，修飾熒光素分子得到可以具有熒光成像功能的分子，修飾盤尼西林形 成高效抗菌產(chǎn)物。貴金屬納米顆粒的一個重要潛在應用就是作為CT成像造影劑。聚酰胺_胺樹狀 大分子的內部空腔可對貴金屬納米顆粒進行包裹，以獲得穩(wěn)定的具有CT成像功能的復合 材料。近來的許多研究都表明金納米顆粒具有很高的X-射線衰減強度，表現(xiàn)出優(yōu)于臨床上 基于碘的造影劑(碘海醇)的CT成像功能。在近期發(fā)表的專利“負載納米金顆粒的樹狀大 分子CT靶向造影劑及其制備方法”(專利申請?zhí)朇N200910198801. 2)中，一種新型的基于 樹狀大分子的金納米顆粒造影劑被制備，金納米顆粒尺寸為1 20nm。該造影劑具有生物 相容性好，體內循環(huán)時間長，穩(wěn)定性好等優(yōu)點。同時，專利“一種CT成像造影劑及其制備方 法”(專利申請?zhí)朇N200910113084.9)也制備了一種含金的CT造影劑。它是由金納米顆 粒和碘海醇組成，其結構為金納米顆粒為核心，外圍包裹碘海醇；其中金納米顆粒的粒徑可 控，粒徑大小為10 500nm。另外，在本課題組近期的研究中證明樹狀大分子穩(wěn)定的銀納 米顆粒(dendrimer-stabilized silver nanoparticles, Ag DSNPs)具有相近于碘海醇的 X-射線衰減特性，但具有明顯優(yōu)于碘海醇的體內成像時間。這也為新型CT造影劑的開發(fā)提 供了良好的實驗基礎。大量的研究表明，降低氨基末端的樹狀大分子的表面電荷可以有效地減小其細胞 毒性。這對樹狀大分子在生物醫(yī)學領域的應用十分重要。檢索國內外有關金-銀合金納米顆粒方面的文獻和專利結果表明在本發(fā)明完成 之前，還沒有發(fā)現(xiàn)基于樹狀大分子的金-銀合金納米顆粒在CT造影應用方面的報道。

發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種具有CT造影功能的樹狀大分子/金-銀 合金納米顆粒的 原位制備方法，該方法制備的樹狀大分子/金_銀復合納米顆粒，尺寸分布 較窄，具有良好的分散性，沒有發(fā)生團聚現(xiàn)象。X-射線衰減強度測試結果表明，合金納米顆 粒的X-射線衰減強度呈增長趨勢，逐漸表現(xiàn)出優(yōu)于傳統(tǒng)造影劑碘海醇的CT成像性能。本發(fā)明的一種具有CT造影功能的樹狀大分子/金-銀合金納米顆粒的原位制備 方法，包括(1)稱取末端為胺基的第五代聚酰胺-胺樹狀大分子，配制濃度為9. 7 14. 9mg/ mL的溶液；(2)在上述溶液中加入硝酸銀溶液，再加入氯金酸溶液，攪拌之后再加入硼氫化 鈉溶液，再繼續(xù)攪拌反應2-3h ；將反應后的溶液進行透析，冷凍干燥處理，得到乙?；爱a(chǎn) 品；其中金銀樹狀大分子摩爾比分別為20-50 20-50 1 ；硼氫化鈉摩爾數(shù)為金屬原 子總摩爾數(shù)的3-5倍。所述步驟(2)采用了具有均一結構和大量內部空腔的第五代聚酰胺-胺樹狀大分子為模板與穩(wěn)定劑，很好地防止了金屬納米顆粒的聚集。所述步驟(2)中，銀鹽，金鹽幾乎同時加入溶液中，提供了一種簡便的金-銀合金 納米顆粒的制備方法。所述步驟(2)中的硝酸銀溶液的濃度為70-89mmol/L，氯金酸溶液的濃度為 10-15mg/mL,硼氫化鈉溶液的濃度為700-730mmol/L。所述步驟(2)調控金銀樹狀大分子的投料比為20 50 1,35 35 1， 50 20 1。所述步驟(2)中的透析采用PBS緩沖液，蒸餾水。取所述步驟(2)透析前的溶液加入三乙胺，攪拌之后加入乙酸酐，繼續(xù)攪拌反應 20-48h ；得到乙酰化后產(chǎn)品；其中乙酸酐的摩爾數(shù)為樹狀大分子表面胺基總摩爾數(shù)的5倍 過量；三乙胺的摩爾數(shù)為乙酸酐摩爾數(shù)的120%過量。本方法中采用簡便的乙酰化的方法來中和樹狀大分子的表面電荷，以提高其生物 相容性。該方法中，通過調整金銀樹狀大分子的摩爾投料比，可以有效地在一定波長 范圍內連續(xù)調控合金納米顆粒的吸收峰波長。同時，納米顆粒的尺寸也可以得到調控。配制活性元素(金/銀、碘)摩爾濃度為0. 05mol/L的樣品，以碘海醇作為對照， 進行X-射線衰減強度測試。使用NMR (核磁共振)、UV-Vis (紫外可見光譜)、TEM (透射電子顯微鏡)、CT機表 征本發(fā)明獲得的具有CT造影功能的樹狀大分子/金-銀合金納米顆粒的結果分別如下(I)NMR測試結果NMR圖譜表明樹狀大分子表面基團的類型以及數(shù)量。以金銀樹狀大分子摩爾 比為50 20 1為例，參照說明書附圖1。附圖1中出現(xiàn)在1.87ppm處的化學位移峰為乙 酰基中甲基的特征峰。由此可證明樹狀大分子表面的氨基已通過乙?；饔帽晦D化為了乙?；?。(2) UV-Vis 測試結果UV-Vis測試結果表明本發(fā)明中制備得到的 金屬納米顆粒的表面等離子體共振 (SPR)峰均位于400nm和540nm之間。而400nm和540nm分別是純銀和純金納米顆粒的SPR 峰位置。參見說明書附圖2。這表明本發(fā)明中制備得到的為合金納米顆粒。其sra峰的位 置隨著合金納米顆粒中金比例的升高而出現(xiàn)相應程度的紅移。所得合金納米顆粒在不同溫 度(4-50°C )和pH(5-8)條件下具有良好的穩(wěn)定性。(3) TEM測試結果TEM測試結果顯示了金-銀合金納米顆粒的尺寸及尺寸分布。乙酰化前的金-銀合 金納米顆粒尺寸分為在3. 0-11. Onm之間；乙酰化后合金納米顆粒尺寸分布在4. 7-17. Onm 之間。隨著合金納米顆粒中金含量的提高，其尺寸會發(fā)生一定的程度的減小。同時，在相同 金銀樹狀大分子摩爾比條件下，經(jīng)過乙?；幚砗蠛辖鸺{米顆粒的尺寸出現(xiàn)一定程度 的增大。(4) CT機測試結果CT機測試結果表明隨著合金納米顆粒中金含量的提高，合金納米顆粒的X-射線 衰減強度呈上升趨勢，逐漸表現(xiàn)出優(yōu)于碘海醇的X-射線衰減特性。在相同金銀樹狀大分子摩爾比條件下，乙?；蠛辖鸺{米顆粒具有較大的CT衰減值。參見說明書附圖4。以內部具有大量空腔和結構精確可控的聚酰胺_胺樹狀大分子為模板和穩(wěn)定劑， 原位還原法制備具有CT造影功能的樹狀大分子/金-銀合金納米顆粒，本發(fā)明涉及了三個 基本原理(1)充分利用聚酰胺-胺樹狀大分子的內部空腔。主要體現(xiàn)在在還原前，其內部 空腔可以對Ag+^11(14_進行絡合，防止AgCl沉淀的產(chǎn)生；還原后，可以起到防止合金納米顆 粒團聚的作用。(2)采用強還原劑NaBHji金屬離子進行快速還原，在樹狀大分子內部空腔的約束 下，產(chǎn)生穩(wěn)定的具有一定尺寸的金-銀合金納米顆粒。(3)貴金屬納米顆粒(金，銀)對X-射線有良好的衰減能力。X-射線衰減強度測試結果表明，隨著合金納米顆粒中金含量的提高，合金納米顆 粒的X-射線衰減強度呈增長趨勢，逐漸表現(xiàn)出優(yōu)于傳統(tǒng)造影劑碘海醇的CT成像性能。有益效果(1)本發(fā)明的制備過程簡單，實驗條件為常溫常壓，易于操作，所采用的制備程序 可用于制備其他單金屬、雙金屬，甚至三金屬納米顆粒，具有很好的使用價值；(2)本發(fā)明方法制備的金_銀合金納米顆粒，尺寸分布較窄，沒有發(fā)生團聚現(xiàn)象， 且具有良好的溶解性，樹狀大分子能有效地穩(wěn)定金_銀合金納米顆粒，不會產(chǎn)生團聚和沉 淀；(3)制備得到的合金納米顆粒具有優(yōu)于傳統(tǒng)造影劑碘海醇的CT成像效果，為新型 造影劑的開發(fā)打下了良好的實驗基礎。


圖1為本發(fā)明制備的金銀樹狀大分子摩爾比為50 20 1的樹狀大分子/ 金_銀合金納米顆粒乙酰化后的NMR譜圖；圖2為本發(fā)明制備的樹狀大分子/金_銀合金納米顆粒乙?；暗腢V-Vis譜圖；圖3為本發(fā)明制備的金銀樹狀大分子摩爾比為35 35 1的樹狀大分子/ 金_銀合金納米顆粒乙酰化前(a)、后(b)的TEM圖片；圖4為本發(fā)明制備的樹狀大分子/金_銀合金納米顆粒乙酰化后的X-射線衰減強 度直方圖；1-5分別為金銀樹狀大分子摩爾比為0 70 1,20 50 1,35 35 1， 50 20 1,70 0 1的合金納米顆粒；6為碘海醇；[金-銀、碘]=0. 05mol/L ；
具體實施例方式下面結合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例 僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內容之后，本領域技術人 員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定 的范圍。實施例1取299. 52mgAgN03，溶于蒸餾水中，磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為 88. 16mmol/L的透明無色的Ag+鹽溶液20mL。取114. 68mg的NaBH4,溶于蒸餾水/甲醇(水甲醇=2 1，體積比)中，磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為721. 78mmol/ L的溶液4. 2mL。取第五代聚酰胺-胺樹狀大分子(G5. NH2) 48. 65mg,溶于5mL蒸餾水中，磁 力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為9. 73mg/mL的溶液。取AgNO3溶液1. 485mL,加入 到G5.NH2溶液中，攪拌0. 5h。之后，加入NaBH4溶液0. 544mL，攪拌反應2h。反應結束后， 取溶液的一半進行透析，PBS緩沖液(3次，4L/次)和蒸餾水(3次，4L/次)。然后進行冷 凍干燥處理，得到乙?；暗慕疸y樹狀大分子摩爾比為0 70 1的樹狀大分子/銀 納米顆粒復合材料，-20°C保存。對溶液的另一半進行乙酰化處理。加入三乙胺173. 6 μ L，攪拌0. 5h。之后，加入 乙酸酐98.2 μ L，攪拌反應24h。反應結束后，對溶液進行透析，PBS緩沖液(3次，4L/次) 和蒸餾水(3次，4L/次)。然后進行冷凍干燥處理，得到乙?；暗慕疸y樹狀大分子摩 爾比為0 70 1的樹狀大分子/銀納米顆粒復合材料，-20°C保存。配制活性元素(金/銀、碘)摩爾濃度為0. 05mol/L的樣品，以碘海醇作為對照， 進行X-射線衰減強度測試。UV-Vis測試結果表明譜圖中出現(xiàn)的415nm及400nm左右處的吸收峰為銀納米顆 粒的sra特征峰。這表明體系中成功制備了銀納米顆粒。TEM測試結果表明制備得到的 銀納米顆粒乙?；昂蟮某叽绶植挤謩e為11.0±3.5nm* 17.0±4.6nm。樹狀大分子/銀 納米顆粒具有良好的分散性，未出現(xiàn)團聚現(xiàn)象。X-射線衰減強度測試表明，制備得到的銀納 米顆粒乙?；昂蟮腃T值分別是130HU和123HU。實施例2取299. 52mgAgN03，溶于蒸餾水中，磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為 88. 16mmol/L的透明無色的Ag+鹽溶液20mL。取HAuCl450mg，溶于蒸餾水中，磁力震蕩使之 充分溶解均勻，配制成濃度為lOmg/mL的溶液。取114. 68mg的NaBH4，溶于蒸餾水/甲醇 (水甲醇=2 1，體積比)中，磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為721. 78mmol/ L的溶液4. 2mL。取第五代聚酰胺-胺樹狀大分子(G5. NH2) 50. 35mg,溶于5mL蒸餾水中， 磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為10. 07mg/mL的溶液。取AgNO3溶液1. 098mL, 加入到G5. NH2溶液 中，緊接著加入HAuCl4溶液1. 595mL,攪拌0. 5h。之后，加入NaBH4溶液 0. 563mL，攪拌反應2h。反應結束后，取溶液的一半進行透析，PBS緩沖液(3次，4L/次)和 蒸餾水(3次，4L/次)。然后進行冷凍干燥處理，得到乙?；暗慕疸y樹狀大分子摩爾 比為20 50 1的樹狀大分子/金-銀合金納米顆粒，_20°C保存。對溶液的另一半進行乙?；幚?。加入三乙胺179. 7 μ L，攪拌0. 5h。之后，加入 乙酸酐101. 7 μ L，攪拌反應24h。反應結束后，對溶液進行透析，PBS緩沖液(3次，4L/次) 和蒸餾水(3次，4L/次)。然后進行冷凍干燥處理，得到乙?；蟮慕疸y樹狀大分子摩 爾比為20 50 1的樹狀大分子/金-銀合金納米顆粒，_20°C保存。配制活性元素(金/銀、碘)摩爾濃度為0. 05mol/L的樣品，以碘海醇作為對照， 進行X-射線衰減強度測試。UV-Vis測試結果表明譜圖中出現(xiàn)的吸收峰分別位于445nm和441nm。這表明體 系中成功制備了金-銀合金納米顆粒。TEM測試結果表明制備得到的金_銀合金納米顆 粒乙?；昂蟮某叽绶植挤謩e為5. O士 1. 4nm和5. 2士 1. Onm。樹狀大分子/金-銀合金納 米顆粒具有良好的分散性，未出現(xiàn)團聚現(xiàn)象。X-射線衰減強度測試表明，制備得到的金-銀合金納米顆粒乙?；昂蟮腃T值分別是168HU和184HU，乙?；蟮腃T值有一定的提高。 實施例3取240.70mg AgNO3,溶于蒸餾水中，磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為 70. 84mmol/L的透明無色的Ag+鹽溶液20mL。取HAuCl450mg，溶于蒸餾水中，磁力震蕩使 之充分溶解均勻，配制成濃度為lOmg/mL的溶液。取56. 26mg的NaBH4，溶于蒸餾水/甲醇 (水甲醇=2 1，體積比)中，磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為708. ISmmol/ L的溶液2.1mL。取第五代聚酰胺-胺樹狀大分子(G5.NH2)57. 13mg，溶于5mL蒸餾水中， 磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為11. 43mg/mL的溶液。取AgNO3溶液1. 090mL, 加入到G5. NH2溶液中，緊接著加入HAuCl4溶液3. 166mL,攪拌0. 5h。之后，加入NaBH4溶液 0. 660mL，攪拌反應2h。反應結束后，取溶液的一半進行透析，PBS緩沖液(3次，4L/次)和 蒸餾水(3次，4L/次)。然后進行冷凍干燥處理，得到乙?；暗慕疸y樹狀大分子摩爾 比為35 35 1的樹狀大分子/金-銀合金納米顆粒，_20°C保存。對溶液的另一半進行乙酰化處理。加入三乙胺101. 9 μ L，攪拌0. 5h。之后，加入 乙酸酐57.7 μ L，攪拌反應24h。反應結束后，對溶液進行透析，PBS緩沖液(3次，4L/次) 和蒸餾水(3次，4L/次)。然后進行冷凍干燥處理，得到乙?；蟮慕疸y樹狀大分子摩 爾比為35 35 1的樹狀大分子/金-銀合金納米顆粒，_20°C保存。配制活性元素(金/銀、碘)摩爾濃度為0. 05mol/L的樣品，以碘海醇作為對照， 進行X-射線衰減強度測試。UV-Vis測試結果表明譜圖中出現(xiàn)的吸收峰分別位于477nm和483nm。這表明體 系中成功制備了金-銀合金納米顆粒。TEM測試結果表明制備得到的金_銀合金納米顆 粒乙?；昂蟮某叽绶植挤謩e為3. 5 士0. 9nm和3. 9 士0. 9nm。樹狀大分子/金-銀合金納 米顆粒具有良好的分散性，未出現(xiàn)團聚現(xiàn)象。X-射線衰減強度測試表明，制備得到的金-銀 合金納米顆粒乙?；昂蟮腃T值分別是203HU和227HU，乙?；蟮腃T值有一定的提高。實施例4取299. 52mgAgN03，溶于蒸餾水中，磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為 88. 16mmol/L的透明無色的Ag+鹽溶液20mL。取HAuCl450mg，溶于蒸餾水中，磁力震蕩使之 充分溶解均勻，配制成濃度為lOmg/mL的溶液。取114. 68mg的NaBH4，溶于蒸餾水/甲醇 (水甲醇=2 1，體積比)中，磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為721. 78mmol/ L的溶液4. 2mL。取第五代聚酰胺-胺樹狀大分子(G5. NH2) 59. 52mg,溶于5mL蒸餾水中， 磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為11. 90mg/mL的溶液。取AgNO3溶液0. 519mL, 加入到G5. NH2溶液中，緊接著加入HAuCl4溶液4. 712mL,攪拌0. 5h。之后，加入NaBH4溶液 0. 666mL，攪拌反應2h。反應結束后，取溶液的一半進行透析，PBS緩沖液(3次，4L/次)和 蒸餾水(3次，4L/次)。然后進行冷凍干燥處理，得到乙?；暗慕疸y樹狀大分子摩爾 比為50 20 1的樹狀大分子/金-銀合金納米顆粒，_20°C保存。對溶液的另一半進行乙酰化處理。加入三乙胺212.4PL，攪拌0.5h。之后，加入 乙酸酐120. 2 μ L，攪拌反應24h。反應結束后，對溶液進行透析，PBS緩沖液(3次，4L/次) 和蒸餾水(3次，4L/次)。然后進行冷凍干燥處理，得到乙?；蟮慕疸y樹狀大分子摩 爾比為50 20 1的樹狀大分子/金-銀合金納米顆粒，_20°C保存。配制活性元素(金/銀、碘)摩爾濃度為0. 05mol/L的樣品，以碘海醇作為對照，進行X-射線衰減強度測試。UV-Vis測試結果表明譜圖中出現(xiàn)的吸收峰分別位于493nm和513歷。這表明體 系中成功制備了金-銀合金納米顆粒。TEM測試結果表明制備得到的金_銀合金納米顆 粒乙?；昂蟮某叽绶植挤謩e為3.6士0.9nm和6. 1 士 1.4nm。樹狀大分子/金-銀合金納 米顆粒具有良好的分散性，未出現(xiàn)團聚現(xiàn)象。X-射線衰減強度測試表明，制備得到的金-銀 合金納米顆粒乙?；昂蟮腃T值分別是251HU和278HU，乙?；蟮腃T值有一定的提高。實施例5取HAuCl450mg，溶于蒸餾水中，磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為IOmg/ mL的溶液。取114. 68mg的NaBH4,溶于蒸餾水/甲醇(水甲醇=2 1，體積比)中，磁力 震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度為721. 78mmol/L的溶液4. 2mL。取第五代聚酰胺-胺 樹狀大分子(G5. NH2) 74. 65mg，溶于5mL蒸餾水中，磁力震蕩使之充分溶解均勻，配制成濃度 為14. 93mg/mL的溶液。取HAuCl4溶液8. 274mL，加入到G5. NH2溶液中，攪拌0. 5h。之后， 加入NaBH4溶液0. 835mL，攪拌反應2h。反應結束后，取溶液的一半進行透析，PBS緩沖液(3 次，4L/次)和蒸餾水(3次，4L/次)。然后進行冷凍干燥處理，得到乙酰化前的金銀樹 狀大分子摩爾比為70 0 1的樹狀大分子/金納米顆粒復合材料，_20°C保存。對溶液的另一半進行乙?；幚?。加入三乙胺266.4 4 1^，攪拌0.51!。之后，加入乙酸酐150. 7 μ L，攪拌反應24h。反應結束后，對溶液進行透析，PBS緩沖液(3次，4L/次) 和蒸餾水(3次，4L/次)。然后進行冷凍干燥處理，得到乙?；蟮慕疸y樹狀大分子摩 爾比為70 0 1的樹狀大分子/金納米顆粒復合材料，_20°C保存。配制活性元素(金/銀、碘)摩爾濃度為0. 05mol/L的樣品，以碘海醇作為對照，進行X-射線衰減強度測試。UV-Vis測試結果表明譜圖中出現(xiàn)的498nm及536nm左右處的吸收峰為金納米顆粒的sra特征峰。這表明體系中成功制備了銀納米顆粒。TEM測試結果表明制備得到的 銀納米顆粒乙?；昂蟮某叽绶植挤謩e為3. 0士0. 7nm和4. 7士 1. Onm。樹狀大分子/金納 米顆粒具有良好的分散性，未出現(xiàn)團聚現(xiàn)象。X-射線衰減強度測試表明，制備得到的金納米 顆粒乙酰化前后的CT值分別是254HU和32IHU。
權利要求
一種具有CT造影功能的樹狀大分子/金 銀合金納米顆粒的原位制備方法，包括(1)稱取末端為胺基的第五代聚酰胺 胺樹狀大分子，配制濃度為9.7～14.9mg/mL的溶液；(2)在上述溶液中加入硝酸銀溶液，再加入氯金酸溶液，攪拌之后再加入硼氫化鈉溶液，再繼續(xù)攪拌反應2 3h；將反應后的溶液進行透析，冷凍干燥處理，得到乙?；爱a(chǎn)品；其中金∶銀∶樹狀大分子摩爾比分別為20 50∶20 50∶1；硼氫化鈉摩爾數(shù)為金屬原子總摩爾數(shù)的3 5倍。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種具有CT造影功能的樹狀大分子/金_銀合金納米顆粒 的原位制備方法，其特征在于所述步驟(2)中的硝酸銀溶液的濃度為70-89mmol/L，氯金 酸溶液的濃度為10_15mg/mL，硼氫化鈉溶液的濃度為700-730mmol/L。
3.根據(jù)權利要求1所述的一種具有CT造影功能的樹狀大分子/金_銀合金納米 顆粒的原位制備方法，其特征在于所述步驟(2)調控金銀樹狀大分子的投料比為 20 50 1，35 35 1 或 50 20 1。
4.根據(jù)權利要求1所述的一種具有CT造影功能的樹狀大分子/金_銀合金納米顆粒 的原位制備方法，其特征在于所述步驟(2)中的透析采用PBS緩沖液，蒸餾水。
5.根據(jù)權利要求1所述的一種具有CT造影功能的樹狀大分子/金_銀合金納米顆粒 的原位制備方法，其特征在于取所述步驟(2)透析前的溶液加入三乙胺，攪拌之后加入乙 酸酐，繼續(xù)攪拌反應20-48h ；得到乙酰化后產(chǎn)品；其中乙酸酐的摩爾數(shù)為樹狀大分子表面 胺基總摩爾數(shù)的5倍過量；三乙胺的摩爾數(shù)為乙酸酐摩爾數(shù)的120%過量。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有CT造影功能的樹狀大分子/金-銀合金納米顆粒的原位制備方法，包括(1)稱取末端為胺基的第五代聚酰胺-胺樹狀大分子，配制濃度為9.7～14.9mg/mL的溶液；(2)在上述溶液中加入硝酸銀溶液，再加入氯金酸溶液，攪拌之后再加入硼氫化鈉溶液，再繼續(xù)攪拌反應2-3h；將反應后的溶液進行透析，冷凍干燥處理，得到乙?；爱a(chǎn)品。本發(fā)明方法制備的樹狀大分子/金-銀復合納米顆粒，尺寸分布較窄，具有良好的分散性，沒有發(fā)生團聚現(xiàn)象。X-射線衰減強度測試結果表明，合金納米顆粒的X-射線衰減強度呈增長趨勢，逐漸表現(xiàn)出優(yōu)于傳統(tǒng)造影劑碘海醇的CT成像性能。
文檔編號A61K49/12GK101987202SQ20101054383
公開日2011年3月23日 申請日期2010年11月15日 優(yōu)先權日2010年11月15日
發(fā)明者劉輝, 史向陽 申請人:東華大學