專(zhuān)利名稱(chēng)：一種納米斑蝥素鈉注射制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥制藥領(lǐng)域，具體涉及一種納米斑蝥素鈉注射制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
納米中藥主要是指運(yùn)用納米技術(shù)制造的，徑粒小于100納米的中藥有效成分、有效部位、原藥及復(fù)方制劑。生物機(jī)體對(duì)藥物的吸收、代謝是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，中藥制劑產(chǎn)生的藥理效應(yīng)不能僅僅歸之于藥物特有的化學(xué)組成還與該制劑的物理狀態(tài)密切相關(guān)。因此，改變藥物制劑的物理狀態(tài)是新藥研制的一種有效方法。在改變物理狀態(tài)方面，改變藥物的單元尺寸是十分有效的。當(dāng)顆粒尺寸進(jìn)入納米量級(jí)時(shí)由于量子尺寸效應(yīng)和表面效應(yīng)，納米粒子呈現(xiàn)出新奇的物理化學(xué)和生物學(xué)特性。這就是應(yīng)用納米技術(shù)于中藥研究可能使藥物活性和生物利用度提高乃至產(chǎn)生新的特性依據(jù)所在。
納米中藥的制備是研究納米中藥最基礎(chǔ)的，也是最重要的問(wèn)題。將納米技術(shù)引入中藥的研究時(shí)，必須考慮中藥組方的多樣性、中藥成分的復(fù)雜性，例如中藥單昧藥可分為礦物藥、植物藥、動(dòng)物藥和菌物藥等，中藥的有效部位和有效成分又包括無(wú)機(jī)化合物和有機(jī)化合物、水溶性成分和脂溶性成分等。因此，針對(duì)不同的藥物，在進(jìn)行納米化時(shí)必須采用不同的技術(shù)路線(xiàn)。納米中藥與中藥新制劑關(guān)系十分密切，如何在中藥理論的指導(dǎo)下進(jìn)行納米中藥新制劑的研究，將中藥制成高效、速效、長(zhǎng)效、計(jì)量小、低毒、服用方便的現(xiàn)代制劑，也是進(jìn)行中藥納米化時(shí)必須考慮的問(wèn)題。
目前，納米技術(shù)在中藥研究中存在的問(wèn)題也不能忽視的。一.納米中藥的制備困難我國(guó)雖已制備一些納米級(jí)的中藥，可是由于中藥品種繁多，成分復(fù)雜，不同的成分由于其作用部位、作用機(jī)制及作用緩急的不同而要求其粒徑大小、載體成分及給藥劑量均有可能不同。同時(shí)納米中藥應(yīng)該有它自己的一套質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，使其生產(chǎn)規(guī)范化；二.納米中藥的毒副作用藥物制成納米微粒，其物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)均發(fā)生了顯著的變化，這些變化對(duì)人體是否有毒副反應(yīng)均未有有關(guān)的研究報(bào)道。但由于納米材料的特殊性，除了可穿透皮膚，還會(huì)進(jìn)入細(xì)胞器內(nèi)，是否會(huì)直接參與或作為催化劑擾亂機(jī)體正常的化學(xué)反應(yīng)，均未見(jiàn)有關(guān)報(bào)道。此外，納米中藥還可以通過(guò)機(jī)體的屏障系統(tǒng)，那它是否會(huì)影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)，精子的生成及其活力、胎兒的發(fā)育等，這些問(wèn)題均無(wú)法回避；三.中藥在納米級(jí)粉碎后，納米微粒表面積變大，由于納米微粒表面的活性使他們很容易團(tuán)聚在一起，這給納米微粒的收集及其藥效的穩(wěn)定性帶來(lái)很大的困難。
現(xiàn)代中藥的研究就是要在繼承中藥傳統(tǒng)的基礎(chǔ)上，充分利用現(xiàn)代科技手段，使中藥具有先進(jìn)的生產(chǎn)工藝和現(xiàn)代劑型，做到“有效、安全、可控”，將納米技術(shù)應(yīng)用于中藥領(lǐng)域是現(xiàn)代中藥發(fā)展的重要方向之一。納米中藥一般不是簡(jiǎn)單地將中藥材進(jìn)行粉碎至納米量級(jí)，而是針對(duì)組成中藥方劑的某味藥的有效部位甚至是有效成分進(jìn)行納米技術(shù)加工處理，賦予傳統(tǒng)中藥以新的功能，如提高生物利用度，增強(qiáng)靶向性；降低毒副作用；呈現(xiàn)新的藥效，拓寬原藥的適應(yīng)證；豐富中藥的劑型選擇；減少用藥量，節(jié)省中藥資源等。
同傳統(tǒng)中藥相比，納米中藥具有以下特點(diǎn)①提高了藥物的利用度，減少用藥量。②增強(qiáng)藥物的靶向性。③具有緩釋功能，將中藥納米粒進(jìn)行一定的表面修飾后，可能使中藥具有緩釋作用。④呈現(xiàn)新的藥效，拓寬原藥適應(yīng)癥，中藥加工至納米尺寸時(shí)，由于其量子尺寸等效應(yīng)導(dǎo)致其物理、化學(xué)特性的改變，從而可使中藥呈現(xiàn)出新功能。⑤豐富中藥的劑型選擇，提升傳統(tǒng)給藥途徑。
徐輝碧等檢索了1998年～2000年美國(guó)專(zhuān)利中涉及納米科技的專(zhuān)利，發(fā)現(xiàn)該類(lèi)專(zhuān)利與生物醫(yī)學(xué)相關(guān)的專(zhuān)利占總數(shù)的80％以上，楊孟君在2001年一年內(nèi)申請(qǐng)了940多件納米中藥的專(zhuān)利，但其申請(qǐng)的大部分都是中藥原料藥進(jìn)行納米粉碎，其專(zhuān)利實(shí)用性不強(qiáng)。
目前納米中藥的研究主要集中于利用納米技術(shù)對(duì)少數(shù)成分比較明確的單體有效成分進(jìn)行納米處理制成納米制劑，或?qū)⒃纤幹苯臃鬯槌杉{米級(jí)，對(duì)大部分中藥的納米制劑研究還很少，主要是因?yàn)橹兴幱行С煞趾陀行Р课惶貏e是中藥復(fù)方中有效部位本身就是一個(gè)“黑匣子”，中藥中真正起藥理作用的有效成分或有效部位研究本身就是一個(gè)難題，而且由于中藥成分比較復(fù)雜，所以將其制備成納米制劑需要克服的困難較多，因此，中藥納米制劑及技術(shù)是醫(yī)藥科研工作者的重要研究課題。
斑蝥素鈉注射液由斑蝥素鈉制備而成，斑蝥素溶解性差，體內(nèi)吸收較難達(dá)到有效的血藥濃度，且有較大的副作用，可引起刺激性炎癥、血栓性靜脈炎、局部組織壞死、泌尿道和消化道刺激癥狀，因此將斑蝥素進(jìn)行合成反應(yīng)，成為斑蝥素鈉，以降低其不良反應(yīng)，雖然其溶解性增加，但斑蝥素鈉不能在癌細(xì)胞聚集，不能達(dá)到很好的治療作用，因此斑蝥素鈉注射液需要進(jìn)一步進(jìn)行改進(jìn)以增強(qiáng)其治療作用。
查閱文獻(xiàn)和專(zhuān)利，未檢索到納米斑蝥素鈉注射制劑的資料。

發(fā)明內(nèi)容
基于上述原因，為了提高斑蝥素鈉在癌細(xì)胞中的濃度，增強(qiáng)其臨床作用，我們經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn)研究，將斑蝥素鈉與藥用載體組合，制備成納米斑蝥素鈉注射制劑，使斑蝥素鈉經(jīng)包封成納米物質(zhì)后，增加了對(duì)癌細(xì)胞的通進(jìn)性，提高它在生物膜上的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)，并以胞飲作用的方式為細(xì)胞所吞噬。由于癌細(xì)胞較正常細(xì)胞更旺盛活躍，斑蝥素鈉納米藥物極易融合進(jìn)癌細(xì)胞內(nèi)，且因癌細(xì)胞中含有較正常細(xì)胞更多的磷脂酶與酞胺酶，通過(guò)酶解作用又能把大量藥物釋放出來(lái)，并在癌組織中滯留，增強(qiáng)殺傷腫瘤細(xì)胞的作用，所以納米斑蝥素鈉注射制劑不但有效地提高抗癌活性，而且能有效的減輕其毒性，應(yīng)用十分安全，是一種抗癌新制劑，有很高的研究和推廣價(jià)值，與現(xiàn)有技術(shù)比較，本專(zhuān)利將斑蝥素鈉進(jìn)行納米制備后，具有更好的腫瘤細(xì)胞的靶向性。
本發(fā)明在于提供一種安全、靶向作用的納米斑蝥素鈉的注射制劑；本發(fā)明還在于提供一種納米斑蝥素鈉注射制劑的制備方法；本發(fā)明還在于提供納米斑蝥素鈉注射制劑的應(yīng)用；本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
一.工藝制法斑蝥素鈉注射制劑納米技術(shù)處方斑蝥素鈉8-12重量份，藥用載體26-60重量份方法一取斑蝥素鈉、乳化劑和脂質(zhì)，在通氮?dú)鈼l件下加熱至80±5℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮?dú)鈼l件下用高壓乳勻機(jī)載41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮?dú)夥盅b后，迅速冷卻形成主藥混懸液。
方法二取斑蝥素鈉、卵磷脂、泊絡(luò)沙姆F-68、土溫80，在高速攪拌條件加入70±5℃的蒸餾水中，待完全熔融作為水相，再稱(chēng)取單硬脂酸甘油酯加熱熔融作為油相，將油相緩慢加入水相中，持續(xù)攪拌1h后超聲分散室溫，頻率45-50Hz，超聲時(shí)間5-8分鐘，即得澄明的混懸液。
方法三取斑蝥素鈉，脂質(zhì)和丙酮加入容器中，超聲使充分溶解，加入乳化劑，微熱使溶成有機(jī)相，另取助乳化劑泊絡(luò)沙姆F-68溶于水中，構(gòu)成水相，將有機(jī)相在(1000r/min)攪拌下注入75±2℃水相中，繼續(xù)加熱攪拌4h，使有機(jī)融媒完全蒸發(fā)并使體系濃縮，將所得的半透明體系攪拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相，繼續(xù)攪拌2h，即得混懸液。
方法四取斑蝥素鈉，溶于30％-70％乙醇中；將脂質(zhì)中一種或多種溶于烷烴，混合攪拌均勻；將乙醇溶解物和烷烴溶解物混合，放入旋轉(zhuǎn)刮膜蒸發(fā)儀，控制壓力0.1-0.2個(gè)大氣壓，去除有機(jī)溶劑至盡，將蒸餾物放入密閉容器中進(jìn)行超聲處理，得到混懸液。
本發(fā)明所用的脂質(zhì)如脂肪酸甘油酯類(lèi)(包括三硬脂酸甘油酯、三棕櫚酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三窬酸甘油酯、Witepsol W35、WitepsolH35、Witepsol H42、單硬脂酸甘油酯)及脂肪酸類(lèi)(如硬脂酸、棕櫚酸)等；本發(fā)明所用的乳化劑如磷脂(包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂及磷脂酰膽堿等)、泊洛沙姆、聚山梨醇、膽酸鹽、四丁酚醛等；方法五油相將斑蝥素鈉油溶液(聚氰基丙烯酸烷酯、聚乳酸、聚丙交酯-乙交酯、殼聚糖、明膠中的一種或幾種)，同無(wú)水乙醇混合，搖勻，得透明溶液；水相為0.5％非離子型表面活性劑Pluronic F68的水溶液(pH值約6)，兩相均為20℃，將油相通過(guò)硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)過(guò)濾，即得混懸液。
制劑制備水針劑制備取上述混懸液，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到水針劑；輸液劑制備取上述混懸液加入藥用輔料，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到輸液劑；粉針劑制備取上述混懸液加入藥用輔料，加注射用水溶解完全，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，冷凍干燥，得到粉針劑；
本發(fā)明輸液劑所用的藥用輔料為氯化鈉或葡萄糖；本發(fā)明粉針劑所用的輔料為蔗糖、乳糖或甘露醇本發(fā)明納米水針劑、納米輸液劑加入少量PVP(聚乙烯吡咯烷酮)，可以提高制劑的穩(wěn)定性。
本發(fā)明所用的以上載體制備工藝是我們經(jīng)大量實(shí)驗(yàn)研究和優(yōu)選的結(jié)果，在研究過(guò)程中我們采用了很多納米技術(shù)工藝并進(jìn)行了比較，有的工藝難以制備成納米藥物，而有的工藝即便制備成納米藥物，也達(dá)不到本發(fā)明制劑的靶向效果。
本發(fā)明納米斑蝥素鈉注射制劑在制備治療原發(fā)性肝癌、白細(xì)胞低下、肝炎、肝硬化、乙型肝炎病癥的應(yīng)用。
二.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)依據(jù)根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》(2005年版，二部附錄XIX E微囊、微球與脂質(zhì)體制劑指導(dǎo)原則)進(jìn)行的納米質(zhì)量檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)儀器H-7000型透射電鏡儀(日本Hitachi公司)；Zetamaster光子相關(guān)光譜儀(英國(guó)Malvern公司)；LC-10A高效液相色譜儀(日本島津)；TGL-18G型臺(tái)式高速離心機(jī)。
1.形態(tài)觀(guān)察及粒徑將本專(zhuān)利斑蝥素鈉納米藥物在透射電鏡下進(jìn)行形態(tài)觀(guān)察，可見(jiàn)呈圓球體，大小較均勻，表面光滑，無(wú)粘連。根據(jù)納米藥物的光學(xué)顯微照片測(cè)定了1000個(gè)，平均粒徑為40±5nm，最大粒徑為60nm，最小粒徑為10nm，且粒徑分布符合正態(tài)分布規(guī)律。
2.包封率和載藥量測(cè)定以斑蝥素鈉進(jìn)行含量測(cè)定，并用下述公式計(jì)算包封率和載藥量包封率(％)＝(投藥量-游離藥物量)/投藥量×100％；
載藥量(％)＝(投藥量－游離藥物量)/納米藥物的重量×100％。結(jié)果包封率為90.3％，載藥量為20％-30％。
3.穩(wěn)定性考察將納米藥物分別置于小瓶?jī)?nèi)，密封。于冰箱(3-5℃)、室溫(20-25℃)和37℃(RH75％)的環(huán)境中放置，于0、1、2和3月觀(guān)測(cè)納米藥物的外觀(guān)、大小、再分散性等。結(jié)果均未見(jiàn)明顯變化，3種條件下的納米藥物再分散性保持良好，無(wú)聚合現(xiàn)象的發(fā)生。結(jié)果見(jiàn)表1。
表1穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

結(jié)論通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)表明，本專(zhuān)利納米藥物具有很好的穩(wěn)定性，充分說(shuō)明本發(fā)明工藝具有實(shí)際意義。
三.檢測(cè)分析實(shí)驗(yàn)斑蝥素鈉注射制劑有效成分的檢測(cè)分析根據(jù)WS-10001-(HD-0044)-2002標(biāo)準(zhǔn)中斑蝥素鈉注射液的含量測(cè)定的方法測(cè)定納米斑蝥素鈉注射制劑和市售斑蝥素鈉注射液中人參皂苷和斑蝥素的含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2表2斑蝥素鈉注射制劑含量比較


結(jié)論通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)表明，本專(zhuān)利工藝具有實(shí)際意義。
四.安全性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1刺激性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明各組納米斑蝥素鈉制劑(廣東天之驕藥物開(kāi)發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康大耳家兔，雌雄兼用。
實(shí)驗(yàn)方法取健康大耳家兔3只，將動(dòng)物固定于兔箱內(nèi)，用酒精將皮膚消毒后，于右側(cè)耳緣靜脈處注射本專(zhuān)利納米斑蝥素鈉注射制劑，于另一側(cè)對(duì)應(yīng)部位注射同一體積的等滲葡萄糖水作為對(duì)照。每日注射1次，連續(xù)3次，觀(guān)察兔耳緣靜脈反應(yīng)。于末次給藥24h后將兔放血處死，取下兩耳，用10％甲醛溶液浸泡，距注射部位1-4cm處，解剖取出靜脈，做組織切片檢查，觀(guān)察注射部位的反應(yīng)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)過(guò)程中，肉眼觀(guān)察兩耳靜脈注射部位處，未見(jiàn)紅腫、熱等刺激表現(xiàn)。表明給藥組切片部位組織形態(tài)無(wú)明顯差異，未見(jiàn)本品毒性所致的病理形態(tài)學(xué)改變(血管結(jié)構(gòu)正常，無(wú)內(nèi)皮細(xì)胞損傷，無(wú)血栓形成及其他病理性變化)。
實(shí)驗(yàn)2溶血毒性考察實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明各組納米斑蝥素鈉注射制劑(廣東天之驕藥物開(kāi)發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供)實(shí)驗(yàn)方法2％紅細(xì)胞混懸液的制備取兔耳緣靜脈取血10-20ml，放入盛有玻璃珠的錐形瓶中，振搖10分鐘，除去纖維蛋白原，使成脫纖血。加10倍量的生理鹽水溶液，搖勻，離心，除去上清液，沉淀的紅細(xì)胞再用生理鹽水溶液洗滌2-3次，至上清液不呈紅色時(shí)為止。將所得的紅細(xì)胞用用生理鹽水配成濃度為2％的混懸液，即得。
試驗(yàn)方法取試管6支，按表3中的配比量依次加入2％紅細(xì)胞混懸液和生理鹽水溶液，混勻，于37℃恒溫箱中放置30分鐘，分別加入不同量的本發(fā)明納米斑蝥素鈉注射制劑(以第6管為空白對(duì)照)，搖勻后，置37℃恒溫箱中，開(kāi)始每隔15分鐘觀(guān)察1次，1小時(shí)后，每隔1小時(shí)觀(guān)察1次，共觀(guān)察2小時(shí)。
表3各組別配比量

實(shí)驗(yàn)結(jié)果以第3試管為準(zhǔn)，各管均未染有紅色，顯微鏡下觀(guān)察未見(jiàn)有紅細(xì)胞破裂，說(shuō)明本專(zhuān)利納米斑蝥素鈉注射制劑不溶血，安全性好。
實(shí)驗(yàn)3急性毒性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明各組納米斑蝥素鈉注射制劑(廣東天之驕藥物開(kāi)發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供)；斑蝥素鈉注射液(貴州益佰制藥股份有限公司)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康小鼠18-22g，，雌雄各半。
實(shí)驗(yàn)方法取小鼠，分為市售斑蝥素鈉注射液組、本專(zhuān)利納米斑蝥素鈉水針劑組、輸液劑組、粉針劑組，腹腔給藥，按照體表面積換算成小鼠給藥劑量，每天給藥3次，連續(xù)7天，觀(guān)察小鼠死亡情況，記錄數(shù)據(jù)，按改良寇氏法計(jì)算斑蝥素鈉注射制劑的LD50值實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4表4小鼠用藥LD50值比較

結(jié)論通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)表明，本專(zhuān)利納米斑蝥素鈉注射制劑與市售斑蝥素鈉注射液具有相同的安全性六.藥理實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1靶向組織中藥物含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明各組納米斑蝥素鈉注射制劑(廣東天之驕藥物開(kāi)發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供)；斑蝥素鈉注射液(貴州神奇制藥有限公司)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大鼠，體重約180-220g，雌雄不限。
實(shí)驗(yàn)方法取大鼠，分為市售斑蝥素鈉注射液組、本專(zhuān)利納米斑蝥素鈉水針劑組、輸液劑組、粉針劑組，大鼠腹腔給藥，給藥量為1ml/kg(輸液制劑與粉針劑處理成與水針劑相同密度的溶液)，30min后立即斷頭處死，取血漿和肝、肺、淋巴組織，取血漿離心10min(2000rpm)，取血清分析測(cè)定含量。取出的大鼠組織用生理鹽水輕輕沖洗，用濾紙吸干，組織膜血管剝離干凈后取組織，稱(chēng)重。然后按組織∶生理鹽水＝1∶1.5(W/V)的比例勻漿，離心10min(2000rpm)，取上清液分析測(cè)定含量(測(cè)定斑蝥素鈉含量)，見(jiàn)表5表5同組織藥物濃度含量測(cè)定


結(jié)論通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明納米斑蝥素鈉注射制劑具有很好的組織器官靶向性。
實(shí)驗(yàn)2對(duì)大鼠肝腫瘤抑制的比較實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大鼠，150g-180g，雌雄不分。
實(shí)驗(yàn)藥物生理鹽水；本發(fā)明各組納米斑蝥素鈉注射制劑(廣東天之驕藥物開(kāi)發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供)；斑蝥素鈉注射液(貴州神奇制藥有限公司)實(shí)驗(yàn)方法取大鼠分為生理鹽水組、市售斑蝥素鈉注射液組、本專(zhuān)利納米斑蝥素鈉水針劑組、輸液劑組、粉針劑組，作W256的肝內(nèi)接種，接種7天后，用戊巴比妥鈉按35mg/kg的劑量腹腔注射麻醉，固定，剖腹暴露肝，測(cè)量肝上腫瘤表面最大徑(a)和最小徑(b)，按(a*b2)/2＝V(腫瘤體積)。分離胃、十二指腸動(dòng)脈、肝總動(dòng)脈和肝固有動(dòng)脈，結(jié)扎胃、十二指腸動(dòng)脈遠(yuǎn)端，以銀夾阻斷肝總動(dòng)脈，于手術(shù)放大鏡下在胃十二指腸動(dòng)脈上切口并插入外徑0.3mm導(dǎo)管后再送入肝固有動(dòng)脈，然后按實(shí)驗(yàn)分組分別注入受試藥物，術(shù)后拔管結(jié)扎胃十二指腸動(dòng)脈，放開(kāi)肝總動(dòng)脈銀夾，再縫合切口，將大鼠置于動(dòng)物室待蘇醒，繼續(xù)飼養(yǎng)觀(guān)察，手術(shù)后8天，按上法檢測(cè)腫瘤體積，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6表6各組制劑對(duì)腫瘤的抑制比較


注與生理鹽水組比較**P＜0.01；與陽(yáng)性對(duì)照組比較*P＜0.05實(shí)驗(yàn)3對(duì)CCl4急性肝損傷的保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)藥物生理鹽水；本發(fā)明各組納米斑蝥素鈉注射制劑(廣東天之驕藥物開(kāi)發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供)；斑蝥素鈉注射液(貴州神奇制藥有限公司)實(shí)驗(yàn)儀器日立7170型自動(dòng)生化分析儀(試劑由日立公司提供)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Balb/C小鼠，體重20-22g，雌雄兼用。
統(tǒng)計(jì)方法數(shù)據(jù)處理采用兩樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，并在Pems統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包下進(jìn)行計(jì)算。
實(shí)驗(yàn)方法將小鼠分為生理鹽水組、CCl4組、斑蝥素鈉注射液組、本發(fā)明納米斑蝥素鈉水針劑組、粉針劑組、輸液組，小鼠每天腹腔給藥1次，生理鹽水組、CCl4組給予生理鹽水，給藥組給藥量為1.5mg/kg，，連續(xù)給藥3天，于第三天除生理鹽水組外，每組均腹腔注射CCl4(20ul/kg)，16小時(shí)后血測(cè)定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)，并肝組織作常規(guī)組織病理學(xué)檢查，結(jié)果見(jiàn)表7表7不同制劑對(duì)CCl4肝損傷ALT和AST的影響


注與CCl4組比較，**p＜0.01與斑蝥素鈉注射液組比較#P＜0.05小結(jié)注射CCl416小時(shí)后，肝組織和肝功能明顯受損，血清ALT和AST顯著提高，數(shù)據(jù)顯示，本發(fā)明各組納米制劑均能較好的降低血清中的ALT和AST水平，減輕肝組織的變化和壞死。
實(shí)施例4對(duì)CCl4導(dǎo)致的肝纖維化的保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)藥物生理鹽水；本發(fā)明各組納米斑蝥素鈉注射制劑(廣東天之驕藥物開(kāi)發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供)；斑蝥素鈉注射液(貴州神奇制藥有限公司)實(shí)驗(yàn)儀器日立7170型自動(dòng)生化分析儀(試劑由日立公司提供)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wistar大鼠，體重200-240g，雌雄兼用。
實(shí)驗(yàn)方法取大鼠，分為生理鹽水組、CCl4組、斑蝥素鈉注射液組、本發(fā)明納米斑蝥素鈉水針劑組、粉針劑組、輸液組，大鼠每天腹腔給藥1次，生理鹽水組、CCl4組給予生理鹽水，給藥組給藥量為1.1mg/kg，給藥第一天起皮下注射CCl4，每周兩次，每次300ul/kg，生理鹽水組給予等容量的生理鹽水，連續(xù)給藥和CCl48周，末次注射CCl424小時(shí)后，取血測(cè)定ALT、AST、血清總蛋白、白蛋白、球蛋白含量，同時(shí)取肝組織作病理組織學(xué)檢查，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表8、表9表8不同制劑對(duì)大鼠肝纖維化ALT和AST的影響

注與CCl4組比較，**P＜0.01；與斑蝥素鈉注射液組比較#P＜0.05
表9不同制劑對(duì)大鼠肝纖維化血漿蛋白的影響

注與CCl4組比較，**P＜0.01與斑蝥素鈉注射液組比較#P＜0.05小結(jié)病理學(xué)檢查，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)大鼠有比較典型的肝纖維化，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，本發(fā)明納米注射制劑可以明顯提高肝纖維化大鼠血漿總蛋白和白蛋白含量，降低球蛋白含量，減輕了肝纖維化程度和肝纖維化發(fā)生率。
結(jié)論通過(guò)以上藥理實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的納米斑蝥素鈉注射制劑比市售斑蝥素鈉注射液的藥理作用更好。
七.制備實(shí)施例斑蝥素鈉納米技術(shù)處方斑蝥素鈉8克，藥用載體26克，脂質(zhì)10克，乳化劑16克；方法一取斑蝥素鈉8克、乳化劑大豆卵磷脂16克和脂質(zhì)三硬脂酸甘油酯10克，在通氮?dú)鈼l件下加熱至80±5℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮?dú)鈼l件下用高壓乳勻機(jī)載41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮?dú)夥盅b后，迅速冷卻形成主藥混懸液。
方法二取斑蝥素鈉8克、卵磷脂、泊絡(luò)沙姆F-68、土溫80共16克，在高速攪拌條件加入70±5℃的蒸餾水中，待完全熔融作為水相，再稱(chēng)取單硬脂酸甘油酯10克加熱熔融作為油相，將油相緩慢加入水相中，持續(xù)攪拌1h后超聲分散室溫，頻率45-50Hz，超聲時(shí)間5-8分鐘，即得澄明的混懸液。
方法三取斑蝥素鈉8克，脂質(zhì)三棕櫚酸甘油酯352克和丙酮10ml加入容器中，超聲使充分溶解，加入乳化劑蛋黃卵磷脂528克，微熱使溶成有機(jī)相，另取助乳化劑泊絡(luò)沙姆F-68溶于10ml水中，構(gòu)成水相，將有機(jī)相在(1000r/min)攪拌下注入75±2℃水相中，繼續(xù)加熱攪拌4h，使有機(jī)融媒完全蒸發(fā)并使體系濃縮，將所得的半透明體系攪拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相，繼續(xù)攪拌2h，即得混懸液。
方法四取斑蝥素鈉8克，溶于30％乙醇中；將脂質(zhì)中三月桂酸甘油酯10克溶于正己烷中，混合攪拌均勻；將乙醇溶解物和烷烴溶解物混合，放入旋轉(zhuǎn)刮膜蒸發(fā)儀，控制壓力0.1個(gè)大氣壓，去除有機(jī)溶劑至盡，將蒸餾物放入密閉容器中進(jìn)行超聲處理，得到混懸液。
方法五油相將斑蝥素鈉8克與聚氰基丙烯酸烷酯26克混合成油溶液，同無(wú)水乙醇混合，搖勻，得透明溶液；水相為0.5％非離子型表面活性劑Pluronie F68的水溶液(pH值約6)，兩相均為20℃，將油相通過(guò)硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)過(guò)濾，即得混懸液。
制劑制備水針劑制備取上述混懸液，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到水針劑1000瓶；輸液劑制備取上述混懸液加入藥用輔料氯化鈉，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到輸液劑1000瓶；粉針劑制備取上述混懸液加入藥用輔料蔗糖，加注射用水溶解完全，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，冷凍干燥，得到粉針劑1000瓶；將上述納米制劑進(jìn)行檢測(cè)，其納米粒徑為5-100納米

實(shí)施例2斑蝥素鈉納米技術(shù)處方為斑蝥素鈉12克，藥用載體60克，其中脂質(zhì)體制備中乳化劑為32克、脂質(zhì)28克，方法一取斑蝥素鈉12克、乳化劑蛋黃卵磷脂32克和脂質(zhì)三肉豆蔻酸甘油酯28克，在通氮?dú)鈼l件下加熱至80±5℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮?dú)鈼l件下用高壓乳勻機(jī)載41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮?dú)夥盅b后，迅速冷卻形成主藥混懸液。
方法二取斑蝥素鈉12克、卵磷脂、泊絡(luò)沙姆F-68、土溫80共32克，在高速攪拌條件加入70±5℃的蒸餾水中，待完全熔融作為水相，再稱(chēng)取單硬脂酸甘油酯28克加熱熔融作為油相，將油相緩慢加入水相中，持續(xù)攪拌1h后超聲分散室溫，頻率45-50Hz，超聲時(shí)間5-8分鐘，即得澄明的混懸液。
方法三取斑蝥素鈉12克，脂質(zhì)三月桂酸甘油酯28克和丙酮加入容器中，超聲使充分溶解，加入乳化劑磷脂酰膽堿32克，微熱使溶成有機(jī)相，另取助乳化劑泊絡(luò)沙姆F-68溶于水中，構(gòu)成水相，將有機(jī)相在(1000r/min)攪拌下注入75±2℃水相中，繼續(xù)加熱攪拌4h，使有機(jī)融媒完全蒸發(fā)并使體系濃縮，將所得的半透明體系攪拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相，繼續(xù)攪拌2h，即得混懸液。
方法四取斑蝥素鈉12克，溶于70％乙醇中；將脂質(zhì)Witepsol W3528克溶于丙烷中，混合攪拌均勻；將乙醇溶解物和烷烴溶解物混合，放入旋轉(zhuǎn)刮膜蒸發(fā)儀，控制壓力0.2個(gè)大氣壓，去除有機(jī)溶劑至盡，將蒸餾物放入密閉容器中進(jìn)行超聲處理，得到混懸液。
方法五油相將斑蝥素鈉12克和聚乳酸60克形成油溶液，同無(wú)水乙醇混合，搖勻，得透明溶液；水相為0.5％非離子型表面活性劑Pluronic F68的水溶液(pH值約6)，兩相均為20℃，將油相通過(guò)硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)過(guò)濾，即得混懸液。
制劑制備水針劑制備取上述混懸液，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到水針劑1000瓶；輸液劑制備取上述混懸液加入藥用輔料葡萄糖，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到輸液劑1000瓶粉針劑制備取上述混懸液加入藥用輔料乳糖，加注射用水溶解完全，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，冷凍干燥，得到粉針劑1000瓶；將上述納米制劑進(jìn)行檢測(cè)，其納米粒徑為5-100納米實(shí)施例3斑蝥素鈉納米技術(shù)處方為斑蝥素鈉9克，藥用載體36克，其中脂質(zhì)體制備中乳化劑為25克、脂質(zhì)11克，方法一取斑蝥素鈉9克、乳化劑泊洛沙姆25克和脂質(zhì)單硬脂酸甘油酯11克，在通氮?dú)鈼l件下加熱至80±5℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮?dú)鈼l件下用高壓乳勻機(jī)載41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮?dú)夥盅b后，迅速冷卻形成主藥混懸液。
方法二取斑蝥素鈉9克、卵磷脂、泊絡(luò)沙姆F-68、土溫80共25克，在高速攪拌條件加入70±5℃的蒸餾水中，待完全熔融作為水相，再稱(chēng)取單硬脂酸甘油酯11克加熱熔融作為油相，將油相緩慢加入水相中，持續(xù)攪拌1h后超聲分散室溫，頻率45-50Hz，超聲時(shí)間5-8分鐘，即得澄明的混懸液。
方法三取斑蝥素鈉9克，脂質(zhì)硬脂酸、棕櫚酸11克和丙酮加入容器中，超聲使充分溶解，加入乳化劑聚山梨醇25克，微熱使溶成有機(jī)相，另取助乳化劑泊絡(luò)沙姆F-68溶于水中，構(gòu)成水相，將有機(jī)相在(1000r/min)攪拌下注入75±2℃水相中，繼續(xù)加熱攪拌4h，使有機(jī)融媒完全蒸發(fā)并使體系濃縮，將所得的半透明體系攪拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相，繼續(xù)攪拌2h，即得混懸液。
方法四取斑蝥素鈉9克，溶于35％乙醇中；將脂質(zhì)三硬脂酸甘油酯、三棕櫚酸甘油酯11克溶于正己烷中，混合攪拌均勻；將乙醇溶解物和烷烴溶解物混合，放入旋轉(zhuǎn)刮膜蒸發(fā)儀，控制壓力0.12個(gè)大氣壓，去除有機(jī)溶劑至盡，將蒸餾物放入密閉容器中進(jìn)行超聲處理，得到混懸液。
方法五油相將斑蝥素鈉9克和聚丙交酯-乙交酯、殼聚糖共36克形成油溶液，同無(wú)水乙醇混合，搖勻，得透明溶液；水相為0.5％非離子型表面活性劑Pluronic F68的水溶液(pH值約6)，兩相均為20℃，將油相通過(guò)硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)過(guò)濾，即得混懸液。
制劑制備水針劑制備取上述混懸液，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到水針劑1000瓶；輸液劑制備取上述混懸液加入藥用輔料葡萄糖，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到輸液劑1000瓶；粉針劑制備取上述混懸液加入藥用輔料蔗糖，加注射用水溶解完全，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，冷凍干燥，得到粉針劑；將上述納米制劑進(jìn)行檢測(cè)，其納米粒徑為40-120納米實(shí)施例4
斑蝥素鈉納米技術(shù)處方為斑蝥素鈉10克，藥用載體41克，其中脂質(zhì)體制備中乳化劑為29克、脂質(zhì)12克，方法一取斑蝥素鈉10克、乳化劑膽酸鹽、四丁酚醛29克和脂質(zhì)WitepsolH35、Witepsol H42、單硬脂酸甘油酯12克，在通氮?dú)鈼l件下加熱至80±5℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮?dú)鈼l件下用高壓乳勻機(jī)載41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮?dú)夥盅b后，迅速冷卻形成主藥混懸液。
方法二取斑蝥素鈉10克、卵磷脂、泊絡(luò)沙姆F-68、土溫80共29克，在高速攪拌條件加入70±5℃的蒸餾水中，待完全熔融作為水相，再稱(chēng)取單硬脂酸甘油酯12克加熱熔融作為油相，將油相緩慢加入水相中，持續(xù)攪拌1h后超聲分散室溫，頻率45-50Hz，超聲時(shí)間5-8分鐘，即得澄明的混懸液。
方法三取斑蝥素鈉10克，脂質(zhì)單硬脂酸甘油酯、棕櫚酸12克和丙酮加入容器中，超聲使充分溶解，加入乳化劑膽酸鹽29克，微熱使溶成有機(jī)相，另取助乳化劑泊絡(luò)沙姆F-68溶于水中，構(gòu)成水相，將有機(jī)相在(1000r/min)攪拌下注入75±2℃水相中，繼續(xù)加熱攪拌4h，使有機(jī)融媒完全蒸發(fā)并使體系濃縮，將所得的半透明體系攪拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相，繼續(xù)攪拌2h，即得混懸液。
方法四取斑蝥素鈉10克，溶于50％乙醇中；將脂質(zhì)三月桂酸甘油酯、三窬酸甘油酯、Witepsol W35共12克液體烷烴中，混合攪拌均勻；將乙醇溶解物和烷烴溶解物混合，放入旋轉(zhuǎn)刮膜蒸發(fā)儀，控制壓力0.16個(gè)大氣壓，去除有機(jī)溶劑至盡，將蒸餾物放入密閉容器中進(jìn)行超聲處理，得到混懸液。
方法五油相將斑蝥素鈉10克和聚丙交酯-乙交酯、殼聚糖、明膠油41克形成溶液，同無(wú)水乙醇混合，搖勻，得透明溶液；水相為0.5％非離子型表面活性劑Pluronic F68的水溶液(pH值約6)，兩相均為20℃，將油相通過(guò)硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)過(guò)濾，即得混懸液。
制劑制備水針劑制備取上述混懸液，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到水針劑1000瓶；輸液劑制備取上述混懸液加入藥用輔料葡萄糖，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到輸液劑1000瓶；粉針劑制備取上述混懸液加入藥用輔料蔗糖，加注射用水溶解完全，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，冷凍干燥，得到粉針劑1000瓶；將上述納米制劑進(jìn)行檢測(cè)，其納米粒徑為5-10納米實(shí)施例5斑蝥素鈉納米技術(shù)處方為斑蝥素鈉11克，藥用載體50克，其中脂質(zhì)體制備中乳化劑為34克、脂質(zhì)16克。
方法一取斑蝥素鈉11克、乳化劑山梨醇34克和脂質(zhì)硬脂酸、棕櫚酸16克，在通氮?dú)鈼l件下加熱至80±5℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮?dú)鈼l件下用高壓乳勻機(jī)載41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮?dú)夥盅b后，迅速冷卻形成主藥混懸液。
方法二取斑蝥素鈉11克、卵磷脂、泊絡(luò)沙姆F-68、土溫80共34克，在高速攪拌條件加入70±5℃的蒸餾水中，待完全熔融作為水相，再稱(chēng)取單硬脂酸甘油酯16克加熱熔融作為油相，將油相緩慢加入水相中，持續(xù)攪拌1h后超聲分散室溫，頻率45-50Hz，超聲時(shí)間5-8分鐘，即得澄明的混懸液。
方法三取斑蝥素鈉11克，脂質(zhì)Witepsol W35、Witepsol H35、三硬脂酸甘油酯共16克和丙酮加入容器中，超聲使充分溶解，加入乳化劑大豆卵磷脂34克，微熱使溶成有機(jī)相，另取助乳化劑泊絡(luò)沙姆F-68溶于水中，構(gòu)成水相，將有機(jī)相在(1000r/min)攪拌下注入75±2℃水相中，繼續(xù)加熱攪拌4h，使有機(jī)融媒完全蒸發(fā)并使體系濃縮，將所得的半透明體系攪拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相，繼續(xù)攪拌2h，即得混懸液。
方法四取斑蝥素鈉11克，溶于65％乙醇中；將脂質(zhì)三月桂酸甘油酯、三窬酸甘油酯、Witepsol W35共16克溶于正丁烷，混合攪拌均勻；將乙醇溶解物和烷烴溶解物混合，放入旋轉(zhuǎn)刮膜蒸發(fā)儀，控制壓力0.18個(gè)大氣壓，去除有機(jī)溶劑至盡，將蒸餾物放入密閉容器中進(jìn)行超聲處理，得到混懸液。
方法五油相將斑蝥素鈉11克和聚丙交酯-乙交酯50克形成油溶液，同無(wú)水乙醇混合，搖勻，得透明溶液；水相為0.5％非離子型表面活性劑Pluronic F68的水溶液(pH值約6)，兩相均為20℃，將油相通過(guò)硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)過(guò)濾，即得混懸液。
制劑制備水針劑制備取上述混懸液，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到水針劑1000瓶；輸液劑制備取上述混懸液加入藥用輔料氯化鈉，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到輸液劑1000瓶；粉針劑制備取上述混懸液加入藥用輔料甘露醇，加注射用水溶解完全，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，冷凍干燥，得到粉針劑1000瓶。
將上述納米制劑進(jìn)行檢測(cè)，其納米粒徑為5-100納米
權(quán)利要求
1.一種納米斑蝥素鈉注射制劑，其特征在于其組成包括斑蝥素鈉8-12重量份，藥用載體26-60重量份；其特征還在于納米斑蝥素鈉注射制劑中納米粒徑為5-100納米。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種納米斑蝥素鈉注射制劑的制備方法，其特征包括以下步驟斑蝥素鈉注射制劑納米技術(shù)方法一取斑蝥素鈉、乳化劑和脂質(zhì)，在通氮?dú)鈼l件下加熱至80±5℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油和poloxamer188的水溶液，制成粗乳，在80±5℃通氮?dú)鈼l件下用高壓乳勻機(jī)載41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮?dú)夥盅b后，迅速冷卻形成主藥混懸液。方法二取斑蝥素鈉、卵磷脂、泊絡(luò)沙姆F-68、土溫80，在高速攪拌條件加入70±5℃的蒸餾水中，待完全熔融作為水相，再稱(chēng)取單硬脂酸甘油酯加熱熔融作為油相，將油相緩慢加入水相中，持續(xù)攪拌1h后超聲分散室溫，頻率45-50Hz，超聲時(shí)間5-8分鐘，即得澄明的混懸液。方法三取斑蝥素鈉，脂質(zhì)和丙酮加入容器中，超聲使充分溶解，加入乳化劑，微熱使溶成有機(jī)相，另取助乳化劑泊絡(luò)沙姆F-68溶于水中，構(gòu)成水相，將有機(jī)相在1000r/min攪拌下注入75±2℃水相中，繼續(xù)加熱攪拌4h，使有機(jī)融媒完全蒸發(fā)并使體系濃縮，將所得的半透明體系1000r/min攪拌下快速溶解于0-2℃的水相，繼續(xù)攪拌2h，即得混懸液。方法四取斑蝥素鈉，溶于30％-70％乙醇中；將脂質(zhì)中一種或多種溶于烷烴，混合攪拌均勻；將乙醇溶解物和烷烴溶解物混合，放入旋轉(zhuǎn)刮膜蒸發(fā)儀，控制壓力0.1-0.2個(gè)大氣壓，去除有機(jī)溶劑至盡，將蒸餾物放入密閉容器中進(jìn)行超聲處理，得到混懸液。方法五油相將斑蝥素鈉油溶液，同無(wú)水乙醇混合，搖勻，得透明溶液；水相為0.5％非離子型表面活性劑Pluronic F68的pH值約為6水溶液，兩相均為20℃，將油相通過(guò)硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用9-15μm玻砂漏斗過(guò)濾，即得混懸液。制劑制備水針劑制備取上述混懸液，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到水針劑；輸液劑制備取上述混懸液加入藥用輔料，加注射用水溶解完全，加入穩(wěn)定劑PVP，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，灌裝，得到輸液劑；粉針劑制備取上述混懸液加入藥用輔料，加注射用水溶解完全，調(diào)節(jié)PH值，過(guò)濾，滅菌，冷凍干燥，得到粉針劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的納米斑蝥素鈉注射制劑在制備治療原發(fā)性肝癌、白細(xì)胞低下、肝炎、肝硬化、乙型肝炎病癥藥物中的應(yīng)用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的納米斑蝥素鈉注射制劑在制備治療癌癥藥物中靶向作用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種納米斑蝥素鈉注射制劑及其制備方法，其特征在于將斑蝥素鈉與藥用載體組合，制備成納米水針劑、輸液劑、粉針劑；其特征還在于本發(fā)明注射制劑中斑蝥素鈉8－12重量份、藥用載體26－60重量份，其中納米粒徑為5－100納米；藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明納米注射制劑應(yīng)用安全，與市售斑蝥素鈉注射液比較具有更好的藥理作用。
文檔編號(hào)A61K9/10GK1883471SQ200510077498
公開(kāi)日2006年12月27日 申請(qǐng)日期2005年6月24日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月24日
發(fā)明者張晴龍 申請(qǐng)人:張晴龍