專利名稱：血清白蛋白結(jié)合分子的制作方法
血清白蛋白結(jié)合分子
相關(guān)申請
本申請主張2010年5月3日申請的美國臨時申請第61/330，672號的權(quán)益，該申請以全文引用的方式并入本文中?，F(xiàn)有技術(shù)
許多治療劑，尤其諸如肽、多肽及多核苷酸的生物制劑的效用因血清半衰期不足而受損。這導致需要以高頻率及/或較高劑量投與此類治療劑，或使用持續(xù)釋放制劑，以維持為治療效果所必需的血清水平。頻繁地全身投與藥物會引起相當大的消極副作用。舉例而言，頻繁地全身注射給受試者帶來相當大的不適，且造成投藥相關(guān)性感染的高風險，并可能需要住院治療或頻繁地到醫(yī)院就診，尤其當欲靜脈內(nèi)投與治療劑時。另外，在長期治療中，每天靜脈內(nèi)注射亦會導致相當大的如下副作用由反復穿刺血管引起的組織疤痕形成及血管病變。已知關(guān)于所有頻繁的全身性治療劑投與均存在類似問題，例如向糖尿病患者投與胰島素，或向罹患多發(fā)性硬化癥的患者投與干擾素藥物。所有此等因素均導致患者順應(yīng)性降低并增加衛(wèi)生系統(tǒng)的成本。
本申請?zhí)峁┛裳娱L各種治療劑的血清半衰期的化合物、具有延長的血清半衰期的化合物，及延長治療劑的血清半衰期的方法。用于延長治療劑的血清半衰期的此類化合物及方法可以成本有效的方式制造或?qū)嵤?，具有理想的生物物理學性質(zhì)(例如Tm、基本上為單體或良好折疊)，且尺寸足夠小而允許組織穿透。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及結(jié)合血清白蛋白的纖連蛋白III型第十C°Fn3)結(jié)構(gòu)域及其用途。本文還公開了包含血清白蛋白結(jié)合性kiFM的融合分子及其用途。
在一個方面，本發(fā)明提供一種包含纖連蛋白III型第十C°Fn3)結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域以I μ M或更 小的Kd結(jié)合人類血清白蛋白(HSA)的結(jié)構(gòu)域I或II，且其中在白蛋白存在下該多肽的血清半衰期為在血清白蛋白不存在下該多肽的血清半衰期的至少5倍。在一個實施方式中，相對于野生型wFM結(jié)構(gòu)域，該kiFM結(jié)構(gòu)域在BC、DE及FG環(huán)中的一或多者中包含經(jīng)修飾的氨基酸序列。
在某些實施方式中，該％113結(jié)構(gòu)域在5. 5至7. 4的pH值范圍內(nèi)結(jié)合HSA。在一個實施方式中，該kiFM結(jié)構(gòu)域在5. 5至7. 4的pH值范圍內(nèi)為以200nM或更小的Kd結(jié)合HSA。 在另一個實施方式中，該uiFr^結(jié)構(gòu)域在pH 5. 5以200nM或更小的Kd結(jié)合HSA。
在一些方面中，本文提供一種包含uiFr^結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合 HSA且包含與SEQ ID NO: 2至少70%同一的氨基酸序列。在一個實施方式中，該1QFn3結(jié)構(gòu)域包括下列中的一或多者包含SEQ ID N0:5所示的氨基酸序列的BC環(huán)、包含SEQ ID NO:6 所示的氨基酸序列的DE環(huán)、及包含SEQ ID NO: 7所示的氨基酸序列的FG環(huán)。
在任一上述方面及實施例中，該結(jié)構(gòu)域還結(jié)合稱猴(rhesus)血清白蛋白 (RhSA)、食蟹猴(cynomolgous monkey)血清白蛋白(CySA)或鼠血清白蛋白(MuSA)中的一或多者。在某些實施方式中，該kiFM結(jié)構(gòu)域不與RhSA、CySA或MuSA中的一或多者交叉反應(yīng)。
在任一上述方面及實施方式中，該uiFr^結(jié)構(gòu)域以I μ M或更小的Kd結(jié)合HSA。在一些實施方式中，該wFM結(jié)構(gòu)域以500ηΜ或更小的Kd結(jié)合HSA。在其它實施方式中，該wFM 結(jié)構(gòu)域以至少 200ηΜ、100ηΜ、50ηΜ、20ηΜ、10ηΜ 或 5ηΜ 的 Kd 結(jié)合 HSA。
在任一上述方面及實施方式中，該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合HSA的結(jié)構(gòu)域I或II。在一個實施方式中，該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合HSA的結(jié)構(gòu)域I與II。在一些實施方式中，該uiFr^結(jié)構(gòu)域在5. 5至7. 4的pH值范圍內(nèi)結(jié)合HSA。在其它實施方式中，該uiFr^結(jié)構(gòu)域在pH 5.5 以200nM或更小的Kd結(jié)合HSA。在另一個實施方式中，該kiFM結(jié)構(gòu)域在5. 5至7. 4的pH 值范圍內(nèi)以至少500nM、200nM、100nM、50nM、20nM、10nM或5nM的Kd結(jié)合HSA。在一個實施方式中，該 10Fn3 結(jié)構(gòu)域在 pH 5. 5 以至少 500nM、200nM、100nM、50nM、20nM、IOnM 或 5nM 的 Kd 結(jié)合HSA。
在任一上述方面及實施方式中，在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期為在血清白蛋白不存在下該多肽的血清半衰期的至少2倍。在某些實施方式中，在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期為在血清白蛋白不存在下該多肽的血清半衰期的至少5倍、7倍、 10倍、12倍、15倍、20倍、22倍、25倍、27倍或30倍。在一些實施方式中，所述血清白蛋白為 HSA、RhSA、CySA 或 MuSA 中的任一者。
在任一上述方面及實施方式中，在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期為至少 20小時。在某些實施方式中，在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期為至少2小時、2. 5 小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時、9小時、10小時、12小時、15小時、20小時、25小時、30小時、40小時、50小時、75小時、90小時、100小時、110小時、120小時、130 小時、150小時、170小時或200小時。在一些實施方式中，該多肽的半衰期是在靈長類(例如人或猴)或鼠類中觀察到的。
在一個方面，本發(fā)明提供一種包含uiFr^結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合 HSA，且包括包含SEQ ID NO: 5所示的氨基酸序列的BC環(huán)、包含SEQ ID N0:6所示的氨基酸序列的DE環(huán)、及包含SEQ ID N0:7所示的氨基酸序列的FG環(huán)。在另一方面中，該kiFM結(jié)構(gòu)域包括以下的一或多者包含SEQID NO: 5所示的氨基酸序列的BC環(huán)、包含SEQ ID NO: 6 所示的氨基酸序列的DE環(huán)、及包含SEQ ID NO: 7所示的氨基酸序列的FG環(huán)。
在一個方面，本發(fā)明提供一種包含uiFr^結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合 HSA，且包括包含SEQ ID NO: 9所示的氨基酸序列的BC環(huán)、包含SEQ ID N0:10所示的氨基酸序列的DE環(huán)、及包含SEQ ID NO: 11所示的氨基酸序列的FG環(huán)。在另一方面中，該1QFn3 結(jié)構(gòu)域包括以下一或多者包含SEQID NO:9所示的氨基酸序列的BC環(huán)、包含SEQ ID N0:10 所示的氨基酸序列的DE環(huán)、及包含SEQ ID NO: 11所示的氨基酸序列的FG環(huán)。
在一個方面，本發(fā)明提供一種包含uiFr^結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合 HSA，且包括包含SEQ ID NO: 13所示的氨基酸序列的BC環(huán)、包含SEQ ID NO: 14所示的氨基酸序列的DE環(huán)、及包含SEQ ID NO: 15所示的氨基酸序列的FG環(huán)。在另一方面中，該 10Fn3結(jié)構(gòu)域包括以下一或多者包含SEQ ID NO: 13所示的氨基酸序列的BC環(huán)、包含SEQ ID NO: 14所示的氨基酸序列的DE環(huán)及包含SEQ ID NO: 15所示的氨基酸序列的FG環(huán)。
在一個方面，本發(fā)明提供一種包含uiFr^結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合HSA且包括包含SEQ ID NO: 17所示的氨基酸序列的BC環(huán)、包含SEQ ID NO: 18所示的氨基酸序列的DE環(huán)及包含SEQ ID NO: 19所示的氨基酸序列的FG環(huán)。在另一方面中，該1QFn3結(jié)構(gòu)域包括包含SEQ ID NO: 17所示的氨基酸序列的BC環(huán)、包含SEQ ID NO: 18所示的氨基酸序列的DE環(huán)及包含SEQ ID NO: 19所示的氨基酸序列的FG環(huán)中的一或多者。在任一上述方面及實施方式中，該kiFM結(jié)構(gòu)域還結(jié)合獼猴血清白蛋白(RhSA)、食蟹猴血清白蛋白(CySA)或鼠類血清白蛋白(MuSA)中的一或多者。在一些實施方式中，該10Fn3結(jié)構(gòu)域不與RhSA、CySA或MuSA中的一或多者交叉反應(yīng)。在某些實施方式中，該1QFn3結(jié)構(gòu)域以ΙμΜ或更小的Kd結(jié)合HSA。在其它實施方式中，該kiFM結(jié)構(gòu)域以至少1.5μΜ、1. 2μΜ、1μΜ、700ηΜ、500ηΜ、300ηΜ、200ηΜ、100ηΜ、75ηΜ、50ηΜ、25ηΜ、10ηΜ 或 5ηΜ 的 Kd 結(jié)合HSA。在任一上述方面及實施方式中，該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合HSA的結(jié)構(gòu)域I或II。在某些實施方式中，該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合HSA的結(jié)構(gòu)域I與II。在某些實施方式中，該kiFM結(jié)構(gòu) 域在5. 5至7. 4的pH值范圍內(nèi)結(jié)合HSA。在一個實施方式中，該uiFr^結(jié)構(gòu)域在pH 5.5以200nM或更小的Kd結(jié)合HSA。在另一個實施方式中，該uiFr^結(jié)構(gòu)域在5. 5至7. 4的pH值范圍以至少 500nM、200nM、100nM、50nM、20nM、10nM*5nM 的 Kd 結(jié)合 HSA。在一個實施方式中，該 10Fn3 結(jié)構(gòu)域在 pH 5. 5 以至少 500nM、200nM、100nM、50nM、20nM、IOnM 或 5nM 的 Kd 結(jié)合 HSA。在任一上述方面及實施方式中，在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期為在血清白蛋白不存在下該多肽的血清半衰期的至少2倍。在某些實施方式中，在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期為在血清白蛋白不存在下該多肽的血清半衰期的至少5倍、7倍、10倍、12倍、15倍、20倍、22倍、25倍、27倍或30倍。在一些實施方式中，所述血清白蛋白為 HSA、RhSA, CySA 或 MuSA 中的任一者。在任一上述方面及實施方式中，在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期為至少20小時。在某些實施方式中，在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期為至少2小時、2. 5小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時、9小時、10小時、12小時、15小時、20小時、25小時、30小時、40小時、50小時、75小時、90小時、100小時、110小時、120小時、130小時、150小時、170小時或200小時。在一些實施方式中，該多肽的半衰期是在靈長類(例如人類或猴)或鼠類中觀察到的。在一個方面，本發(fā)明提供一種包含纖連蛋白III型第十C°Fn3)結(jié)構(gòu)域及異源蛋白質(zhì)的融合多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域以ΙμΜ或更小的Kd結(jié)合HSA。在某些實施方式中，該1QFn3結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID NO:4至少70%同一的氨基酸序列。在一個實施方式中，該1QFn3結(jié)構(gòu)域包含具有SEQ ID NO: 5所示的氨基酸序列的BC環(huán)、具有SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列的DE環(huán)及具有SEQ IDNO: 7所示的氨基酸序列的FG環(huán)。在另一個實施方式中，該1QFn3結(jié)構(gòu)域包含具有SEQ ID NO: 5所示的氨基酸序列的BC環(huán)、具有SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列的DE環(huán)及具有SEQ ID N0:7所示的氨基酸序列的FG環(huán)中的一或多者。在一個實施方式中，該異源蛋白質(zhì)選自成纖維細胞生長因子21 (FGF21)、胰島素、胰島素受體肽、GIP(葡萄糖依賴性促胰島素多肽)、骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(BMP-9)、胰淀素(amylin)、肽 YY(PYY3_36)、胰多肽(PP)、白介素 21 (IL-21)、胰高血糖素樣(glucagon-like)肽I (GLP-1)、菌絲霉素(Plectasin)、顆粒蛋白前體(Progranulin)、骨I丐蛋白(Osteocalcin, OCN)、Apelin或包含結(jié)構(gòu)域的多肽。在其它實施方式中，該異源蛋白質(zhì)選自GLP-1、Exendin 4、脂連蛋白蛋白(adiponectin)、IL-1RA(白介素I受體拮抗劑)、VIP(血管活性腸肽)、PACAP(垂體腺苷酸環(huán)化酶激活多肽)、瘦素、INGAP(胰島新生相關(guān)蛋白)、BMP(骨形態(tài)發(fā)生蛋白)及骨鈣蛋白(OCN)。在一個實施方式中，該異源蛋白質(zhì)包含SEQ ID NO: 118所示的序列。在某些實施方式中，該異源蛋白質(zhì)包含結(jié)合于除血清白蛋白外的靶蛋白質(zhì)的第二10Fn3結(jié)構(gòu)域。在其它實施方式中，該融合多肽進一步包含結(jié)合靶蛋白質(zhì)的第三kiFM結(jié)構(gòu)域。在一個實施方式中，該第三kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合與第二 kiFM結(jié)構(gòu)域相同的靶。在其它實施方式中，第三kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合與第二 kiFM結(jié)構(gòu)域不同的靶。在一個實施方式中，該融合多肽的1QFn3結(jié)構(gòu)域還結(jié)合獼猴血清白蛋白(RhSA)、食蟹猴血清白蛋白(CySA)或鼠類血清白蛋白(MuSA)中的一或多者。在其它實施方式中，該10Fn3結(jié)構(gòu)域不與RhSA、CySA或MuSA中的一或多者交叉反應(yīng)。
在某些實施方式中，該融合多肽的uiFr^結(jié)構(gòu)域以I μ M或更小的Kd結(jié)合HSA。在一些實施方式中，該wFM結(jié)構(gòu)域以500ηΜ或更小的Kd結(jié)合HSA。在其它實施方式中，該wFM結(jié)構(gòu)域以至少 200ηΜ、100ηΜ、50ηΜ、20ηΜ、10ηΜ 或 5ηΜ 的 Kd 結(jié)合 HSA。在其它實施方式中，該融合多肽的kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合HSA的結(jié)構(gòu)域I或II。在一個實施方式中，該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合HSA的結(jié)構(gòu)域I與II。在一些實施方式中，該uiFr^結(jié)構(gòu)域在5. 5至7. 4的pH值范圍內(nèi)結(jié)合HSA。在其它實施方式中，該uiFr^結(jié)構(gòu)域在pH 5.5以200nM或更小的Kd結(jié)合HSA。在另一個實施方式中，該1QFn3結(jié)構(gòu)域在5. 5至7. 4的pH值范圍內(nèi)以至少500nM、200nM、100nM、50nM、20nM、10nM或5nM的Kd結(jié)合HSA。在一個實施方式中，該 1QFn3 結(jié)構(gòu)域在 pH 5. 5 下以至少 500nM、200nM、100nM、50nM、20nM、IOnM 或 5nM 的Kd結(jié)合HSA。在一些實施方式中，在血清白蛋白存在下該融合多肽的血清半衰期為在血清白蛋白不存在下該多肽的血清半衰期的至少5倍。在某些實施方式中，在血清白蛋白存在下該融合多肽的血清半衰期為在血清白蛋白不存在下該多肽的血清半衰期的至少2倍、5倍、7倍、10倍、12倍、15倍、20倍、22倍、25倍、27倍或30倍。在一些實施方式中，血清白蛋白為HSA、RhSA, CySA 或 MuSA 中的任一者。在某些實施方式中，在血清白蛋白存在下該融合多肽的血清半衰期為至少20小時。在某些實施方式中，在血清白蛋白存在下該融合多肽的血清半衰期為至少2小時、2. 5小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時、9小時、10小時、12小時、15小時、20小時、25小時、30小時、40小時、50小時、75小時、90小時、100小時、110小時、120小時、130小時、150小時、170小時或200小時。在一些實施方式中，該融合多肽的半衰期是在靈長類(例如人類或猴)或鼠類中觀察到的。在任一上述方面及實施方式中，該1QFn3結(jié)構(gòu)域包含選自SEQ ID NO:8、12、16、20及24-44的序列。在一個方面，本發(fā)明提供一種包含纖連蛋白III型第十C°Fn3)結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該1QFn3結(jié)構(gòu)域(i)相對于野生型1QFn3結(jié)構(gòu)域，在AB、BC、⑶、DE、EF及FG環(huán)中的一或多者中包含經(jīng)修飾的氨基酸序列；(ii)結(jié)合野生型kiFM結(jié)構(gòu)域不結(jié)合的靶分子；且(iii)包含具有序列(ED)n的C端尾部，其中η為3至7的整數(shù)。在某些實施方式中，該kiFM結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID NO:1的殘基9-94所示的氨基酸序列具有至少60%同一性的氨基酸序列。在一個實施方式中，該C端尾部進一步在N端包含E、I或EI。在一些實施方式中，C端尾部提高該多肽的溶解度及/或減少其聚集。在某些實施方式中，相對于野生型wFM結(jié)構(gòu)域，該kiFM結(jié)構(gòu)域在BC、DE及FG環(huán)的每一者中包含經(jīng)修飾的氨基酸序列。在某些實施方式中，該多肽以I μ M或更小的Kd結(jié)合靶。在一些方面中，本發(fā)明提供一種包含任一上述方面及實施方式的多肽的藥物組合物。在某些實施方式中，該醫(yī)藥組合物包含琥珀酸、甘氨酸及山梨糖醇。在例示性實施方式中，該組合物包含5ηΜ至30mM琥珀酸、5%至15%山梨糖醇及2. 5%至10%甘氨酸(pH 6. O)。在某些實施方式中，該組合物包含IOmM琥珀酸、8%山梨糖醇及5%甘氨酸(pH 6.0)。在其
它實施方式中，該藥物組合物進一步包含生理學上可接受的擔載體。附圖簡述

圖1. HAS在小鼠中的體內(nèi)半衰期。將20mg/kg(圖1A)或50mg/kg(圖1B)的HSA注入小鼠中。圖2. SABA1-4在小鼠中的半衰期測定結(jié)果。圖2A =SABAl.1 ;圖2B SABA2.1 ;圖2C SABA3.1 ;及圖 2D SABA4.1。圖3.展示當與HSA共注射時SABA1-4在小鼠中的半衰期延長的概要的圖。圖4. SABA1.1 (圖4A)及SABA5.1 (圖4B)在食蟹猴中的半衰期測定結(jié)果。圖5.藉由直接結(jié)合ELISA測定法測得的SABA1. 2與來自人類、小鼠及大鼠的白蛋白的結(jié)合。圖6. SABA1.1及HSA化學計量的測定結(jié)果。SABA1.1與HSA以1:1的化學計量結(jié)
口 ο圖7. SABA1. 2與HSA的重組結(jié)構(gòu)域片段的結(jié)合的Biacore分析。圖8. SABA1. 2在猴中在投與Impk及IOmpk下的藥物動力學概況。圖9. SABA1. 2在猴中在靜脈內(nèi)或皮下投予Impk下的藥物動力學概況。圖10.用于生產(chǎn)性表達FGF21及SABA融合物的pET29b載體的質(zhì)粒圖。圖11.在37°C下在PBS緩沖液中SABA_FGF21vl與HSA的融合物的代表性等溫滴定熱量測定結(jié)果。在此測定法中測得的值N=0. 87 ;Kd=3. 8X 10_9Μ ；ΔΗ=-15360卡/摩爾。圖 12.在 37°C下 SABA1-FGF21vl 與 HSA (A)、CySA(B)及 MuSA (C)或 SABAl_FGF21v3與HSAOO、CySA(E)及MuSA(F)的結(jié)合的SPR傳感圖數(shù)據(jù)。圖13.帶His標簽的FGF21相對于SABAl_FGF21vl在人類血清白蛋白存在下刺激HEK β-Klotho細胞中的pERK 1/2水平的活性的比較。圖14.在HEK親本細胞中相對于在HEK β -Klotho細胞中，F(xiàn)GF1、帶標簽His6的FGF21及SABAl-FGF21vl刺激pERK 1/2水平的活性的比較。HEK親本細胞(圖14A)及HEKβ-Klotho表達細胞(圖14Β)中的pERK 1/2水平的劑量反應(yīng)刺激的代表圖。所繪圖中的數(shù)據(jù)為三份樣品的平均值土sem。圖15A及15B. SABA 1-FGF2Ivl在糖尿病ob/ob小鼠中的體內(nèi)功效的檢查結(jié)果。餐后血漿葡萄糖水平。圖16.在猴中與帶His標簽的FGF21相比SABA及FGF21融合物使t1/2增加約27倍。圖17A及17B展示HuSA/SABA1.2復合物的兩個視圖，其中第二個視圖(圖17B)繞第一個視圖(圖17A)垂直軸旋轉(zhuǎn)了 70°。HuSA以曲面表現(xiàn)的方式展示，而SABA1. 2以示意圖(cartoon)展示，即其中β鏈呈現(xiàn)為箭頭而環(huán)呈現(xiàn)為帶子。SABA1. 2上的多樣化環(huán)以黑色展示，而HuSA上的接觸殘基以較淺的灰色展示。標出了 HuSA的三個結(jié)構(gòu)域(即1、II 及 III)。圖18.劑量遞增及處理群組的示意圖(參見實施例Α9)。研究周數(shù)指示研究的整個持續(xù)時間。各群組內(nèi)的周數(shù)(Wk)指示自該群組處理開始起的持續(xù)時間。(a)給定群組的處理直至前一群組中的最后一個受試者完成第29天就診后約4周時才開始，以允許進行PK分析。(b)各群組中的第1、2或3列指示以錯開I周的時間間隔(第I群組中的第I與2亞組之間的時間間隔為15天)開始的多個亞組。第I組將包含I個SABA1. 2處理的受試者及I個安慰劑受試者;第2組將包含4個SABA1. 2處理的受試者及I個安慰劑受試者；第3組將包含5個(對于第I群組)或4個(對于第2及3群組)SABA1. 2處理的受試者及1個(對于所有群組)安慰劑受試者。箭頭(丨)指示處理(各組的第I及15天)；實線(_)指示主動觀察期；點線(——)指示安全性追蹤。圖19.在ob/ob小鼠中用SABAl_FGF21vl處理14天后的HbAlc水平。圖20.在猴中SABAl_FGF21vl的平均血漿濃度相對于時間的概況(平均值土SD)。圖21.用于固相肽合成的正交保護的氨基酸的實例(上圖)。還展示了適用于固相合成的其它構(gòu)建嵌段(下圖)。發(fā)明詳述定義如本文中所使用的，以下術(shù)語及短語應(yīng)具有下文所述的含義。除非另有定義，否則本文中所使用的所有技術(shù)及科學術(shù)語均具有與本領(lǐng)域技術(shù)人員通常所了解相同的含義。除非本文另外明確指示，否則單數(shù)形式“一”(個/種)及“該”包括復數(shù)個指示物。術(shù)語“包含”以包涵性開放意義使用，此意謂可包括其它要素。 術(shù)語“包括”用于意謂“包括但不限于”?！鞍ā奔啊鞍ǖ幌抻凇笨苫Q使用。術(shù)語“抗體樣蛋白質(zhì)”指具有“免疫球蛋白樣折疊”的非免疫球蛋白蛋白質(zhì)，即包含結(jié)構(gòu)上組織成一組β或β樣鏈，從而形成β片的約80-150個氨基酸殘基，其中此類β或β樣鏈藉由插入環(huán)部分而連接。這些β片形成抗體樣蛋白質(zhì)的穩(wěn)定核心，同時產(chǎn)生兩個由連接所述β或β樣鏈的環(huán)構(gòu)成的“面”。如本文所述，這些環(huán)可經(jīng)改變而產(chǎn)生定制的配體結(jié)合位點，且可在不破壞蛋白質(zhì)的總體穩(wěn)定性的情況下產(chǎn)生此類變化。此類抗體樣蛋白質(zhì)的一個實例為“基于纖連蛋白的支架蛋白質(zhì)”，其意指基于纖連蛋白III型結(jié)構(gòu)域(Fn3)的多肽。在一個方面，抗體樣蛋白質(zhì)基于纖連蛋白III型第十結(jié)構(gòu)域C°Fn3)?！岸嚯摹币庵^具有兩個或兩個以上氨基酸的任何序列，而與長度、翻譯后修飾或功能無關(guān)?！岸嚯摹?、“肽”及“蛋白質(zhì)”在本文中可互換使用?！鞍被嵝蛄型恍园俜直?%) ”在本文中定義為在比對序列及必要時引入間隙，以達成最大序列同一性百分比，且不將任何保守性取代視為序列同一性的一部分后，第一序列中與第二序列中的氨基酸殘基同一的氨基酸殘基的百分比。為測定氨基酸序列同一性百分比的目的，比對可以通過屬于本領(lǐng)域技術(shù)的范圍內(nèi)的多種方式來實現(xiàn)，例如使用公開可得到的計算機軟件，諸如 BLAST、BLAST-2、ALIGN、ALIGN-2 或 Megalign (DNASTAR)軟件。本領(lǐng)域技術(shù)人員可確定適用于測量比對的參數(shù)，包括在所比較的序列全長上達成最大比對所需的任何算法。然而，出于本文的目的，氨基酸序列同一性％值如下文所述藉由使用序列比較計算機程序ALIGN-2來獲得。ALIGN-2序列比較計算機程序由Genentech, Inc.創(chuàng)作,其已在美國版權(quán)局(U. S. CopyrightOffice) (Washington D. C. , 20559)與用戶文件一起備案，在美國版權(quán)局其以美國版權(quán)登記號TXU510087登記，且可公開經(jīng)由Genentech, Inc. (SouthSanFrancisco, Calif)得到。ALIGN-2程序應(yīng)經(jīng)編譯以于UNIX操作系統(tǒng)、優(yōu)選為數(shù)字UNIXV4. OD上使用。所有序列比較參數(shù)均由ALIGN-2程序設(shè)定且并不變化。為本文的目的，如下計算特定氨基酸序列A與特定氨基酸序列B的氨基酸序列同一性％ (其或者可表述為特定氨基酸序列A與特定氨基酸序列B具有或包含某一氨基酸序列同一性％) 100 X (X/Y)，其中X為在A與B的序列比對程序ALIGN-2比對中由該程序評定為同一匹配的氨基酸殘基的數(shù)目，且其中Y為B的氨基酸殘基的總數(shù)。應(yīng)了解，若氨基酸 序列A的長度不等于氨基酸序列B的長度，則A與B的氨基酸序列同一性％不會等于B與A的氨基酸序列同一性％。術(shù)語“治療有效量”指可有效治療哺乳動物的疾病或病癥及/或在一定程度上緩解與該病癥相關(guān)的一種或多種癥狀的藥物的量。術(shù)語“SABA” 指血清白蛋白結(jié)合 AdnectinsTM(gerum AlbuminMnding^dnectins )。Adnectins (Adnexus,—家屬于 Bristol-Myers Squibb 的研發(fā)公司)為基于第十纖連蛋白III型結(jié)構(gòu)域，即Fn3的第十模塊C°Fn3)的配體結(jié)合性支架蛋白質(zhì)。氨基酸序列或化合物的半衰期(t1/2)通常可定義為在體內(nèi)多肽的血清濃度降低50% (例如由于天然機制對該序列或化合物的降解及/或該序列或化合物的清除或螯合)所用的時間。半衰期可以現(xiàn)有技術(shù)中已知的任何方式來測定，諸如利用藥物動力學分析。參見例如 M Gibaldi 及 D Perron “Pharmacokinetics”，由 Marcel Dekker 出版,第 2 修訂版(1982)。半衰期可使用諸如t1/2_a、 1/2-β及曲線下面積(AUC)等參數(shù)來表示。“半衰期增加”指這些參數(shù)中的任一者、這些參數(shù)中的任兩者或這些參數(shù)的所有三個增加。在某些實施方式中，半衰期增加指 1/2_β增加,而t1/2_a或AUC或兩者有增加或無增加。術(shù)語“PK”為“藥物動力學”的縮寫，涵蓋化合物的性質(zhì)，包括例如受試者對其的吸收、分布、代謝及消除?！癙K調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)”或“PK部分”指當與生物活性分子融合或與其一起投與時影響生物活性分子的藥物動力學性質(zhì)的任何蛋白質(zhì)、肽或部分。綜述Fn3指纖連蛋白的III型結(jié)構(gòu)域。Fn3結(jié)構(gòu)域為小的、單體的、可溶且穩(wěn)定。其缺乏二硫鍵，因此在還原條件下是穩(wěn)定的。Fn3的總體結(jié)構(gòu)類似于免疫球蛋白折疊。依自N端至C端的次序，F(xiàn)n3結(jié)構(gòu)域包含β或β樣鏈A ;環(huán)AB ; β或β樣鏈B ;環(huán)BC ; β或β樣鏈C ;環(huán)CD ; β或β樣鏈D ;環(huán)DE ; β或β樣鏈E ;環(huán)EF ; β或β樣鏈F ;環(huán)FG ;及β或β樣鏈G。七個反平行β鏈排列成兩個β片，它們形成穩(wěn)定的核心，同時產(chǎn)生兩個由連接β或β樣鏈的環(huán)構(gòu)成的“面”。環(huán)ΑΒ、⑶及EF位于一個面上且環(huán)BC、DE及FG位于相對的面上。任何或所有環(huán)AB、BC、⑶、DE、EF及FG均可參與配體結(jié)合。Fn3存在至少15種不同模塊，且雖然此類模塊之間的序列同源性較低，但其三級結(jié)構(gòu)均共有高度相似性。
Adnectins (Adnexus, 一家Bristol-Myers Squibb 的研發(fā)公司)為基于第十纖連蛋白III型結(jié)構(gòu)域，即Fn3的第十模塊C°Fn3)的配體結(jié)合骨架蛋白質(zhì)。天然存在的人類10Fn3的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示
VSDVPRDLEVVA ATPTSLLISffDAPAVTVRYYRITYGETGGNSPVQEFTVPGSKSTATISGLKPGVDYTITVYAVTGRGDSPASSKPISINYRT (SEQID NO:1)(對 AB、CD 及 EF 環(huán)加有下劃線，且對 BC、FG及DE環(huán)以粗體突出)。在SEQ ID NO:1中，AB環(huán)對應(yīng)于殘基15-16，BC環(huán)對應(yīng)于殘基21-30，CD環(huán)對應(yīng)于殘基39-45，DE環(huán)對應(yīng)于殘基51-56，EF環(huán)對應(yīng)于殘基60-66，且FG環(huán)對應(yīng)于殘基76-87。(Xu 等人，Chemistry&Biology 20029:933-942)。BC、DE 及 FG 環(huán)沿該分子的一個面排列且AB、⑶及EF環(huán)沿該分子的相對面排列。在SEQ ID NO:1中，β鏈A對應(yīng)于殘基9_14，β鏈B對應(yīng)于殘基17-20，β鏈C對應(yīng)于殘基31-38，β鏈D對應(yīng)于殘基46-50，β鏈E對應(yīng)于殘基57-59，β鏈F對應(yīng)于殘基67-75，且β鏈G對應(yīng)于殘基88-94。這些鏈經(jīng)由相應(yīng)環(huán)彼此連接，例如鏈A與B經(jīng)由環(huán)AB以鏈Α、環(huán)ΑΒ、鏈B的構(gòu)造連接。SEQ ID NO:1的開頭8個氨基酸(上文中的斜體)可以加以缺失而仍保留分子的結(jié)合活性。形成疏水性核心(“核心氨基酸殘基”)所涉及的殘基包括對應(yīng)于SEQ ID NO:1的以下氨基酸的氨基酸L8、V10、A13、L18、I20、W22、Y32、134、Y36、F48、V50、A57、I59、L62、Y68、I70、V72、A74、188、190 及Y92，其中核心氨基酸殘基以單字母氨基酸符號后隨其在SEQ ID N0:1中的位置來表示。參見例如 Dickinson 等人，J. Mol. Biol. 236:1079-1092 (1994)。10Fn3在結(jié)構(gòu)及功能上類似于抗體，尤其是抗體的可變區(qū)。雖然uiFr^結(jié)構(gòu)域可描述為“抗體模擬物”或“抗體樣蛋白質(zhì)”，但其提供許多優(yōu)于常規(guī)抗體的優(yōu)點。具體而言，與抗體相比，其展現(xiàn)更好的折疊及熱穩(wěn)定性性質(zhì)，且其缺乏已知在某些條件下妨礙或阻礙適當折疊的二硫鍵。例示性的基于血清白蛋白uiFr^的結(jié)合物主要為Tm平均為約65°C的單體。kiFM的BC、DE及FG環(huán)類似于來自免疫球蛋白的互補決定區(qū)(CDR)。在這些環(huán)區(qū)中氨基酸序列的變化可改變kiFM的結(jié)合特異性。亦可制備在AB、CD及EF環(huán)中具有修飾的kiFM結(jié)構(gòu)域以產(chǎn)生結(jié)合所需靶的分子。環(huán)外的蛋白質(zhì)序列類似于來自免疫球蛋白的框架區(qū)且在kiFM的結(jié)構(gòu)構(gòu)象中起作用。以結(jié)構(gòu)構(gòu)象不改變到破壞配體結(jié)合的程度為限，10Fn3的框架樣區(qū)中的變化是可允許的。產(chǎn)生kiFM配體特異性結(jié)合物的方法已描述于以下文獻中PCT公開第WO 00/034787號、第WO 01/64942號及第WO 02/032925號，其披露高親和力TNFa結(jié)合物；PCT公開第WO 2008/097497號，其披露高親和力VEGFR2結(jié)合物；及PCT公開第WO 2008/066752號，其披露高親和力IGFIR結(jié)合物。討論wFM結(jié)合物及選擇結(jié)合物的方法的其它參考文獻包括PCT公開第W098/056915號、第WO 02/081497號及第WO2008/031098號及美國公開第2003186385號。如上文所述，對應(yīng)于SEQ ID NO:1的殘基21_30、51_56及76_87的氨基酸殘基分別定義BC、DE及FG環(huán)。然而應(yīng)了解，并非環(huán)區(qū)中的每一殘基均需要修飾以產(chǎn)生對所需靶(諸如人類血清白蛋白)具有強親和力的kiFM結(jié)合物。舉例而言，在本文所述的許多實例中，僅有對應(yīng)于BC環(huán)的氨基酸23-30及DE環(huán)的52-55的殘基被修飾而產(chǎn)生高親和力wFM結(jié)合物。相應(yīng)地，在某些實施方式中，BC環(huán)可由對應(yīng)于SEQ ID NO:1的殘基23-30的氨基酸定義，且DE環(huán)可由對應(yīng)于SEQ ID NO:1的殘基52-55的氨基酸定義。另外，亦可制造環(huán)區(qū)中的插入及缺失，而仍產(chǎn)生高親和力的uiFr^結(jié)合物。舉例而言，SEQ ID N0:4(SABA I)為HSA結(jié)合物的一個實例，其中FG環(huán)含有四個氨基酸缺失，即對應(yīng)于SEQ ID NO:1的21-29的11個殘基被替換為7個氨基酸。SEQ ID NO: 113為HSA結(jié)合物的一個實例，其中FG環(huán)含有氨基酸插入，即對應(yīng)于SEQ IDNO:1的氨基酸21-29的11個殘基被替換為12個氨基酸。因此，在一些實施方式中，相對于野生型人類kiFM中的相應(yīng)環(huán)，選自BC、DE及FG的一或多個環(huán)的長度可延伸或縮短。在一些實施方式中，環(huán)的長度可延伸2-25個氨基酸。在一些實施方式中，環(huán)的長度可減少1-11個氨基酸。具體地，uiFr^的FG環(huán)的長度為12個殘基，而抗體重鏈中的相應(yīng)環(huán)在4-28個殘基范圍內(nèi)。因此，為最優(yōu)化抗原結(jié)合，uiFr^的FG環(huán)的長度及序列均可加以改變以涵蓋4-28個殘基的CDR3范圍以便獲得最大可能的抗原結(jié)合柔性及親和力。在一些實施方式中，整聯(lián)蛋白結(jié) 合基序“精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸” (RGD)可替換為極性氨基酸-中性氨基酸-酸性氨基酸序列(沿N端至C端方向)。1QFn3通常以對應(yīng)于SEQ ID NO:1的編號I的氨基酸殘基開始。然而，具有氨基酸缺失的結(jié)構(gòu)域亦涵蓋于本發(fā)明中。在一些實施方式中，對應(yīng)于SEQID N0:1的開頭8個氨基酸的氨基酸殘基缺失。亦可添加額外序列至N或C端。舉例而言，可將額外的MG序列置于kiFM的N端。M通常會被切去，在N端留下G。在一些實施方式中，延伸序列可位于uiFr^域的 C 端，例如 EIDKPSQ(SEQ ID NO: 54)、EIEKPSQ(SEQ ID NO:60)或 EIDKPSQLE (SEQ IDN0:61)。此類C端序列在本文中稱為“尾部”或“延伸”，且在本文中有進一步描述。在一些實施方式中，可將His6標簽直于N端或C端。10Fn3的非配體結(jié)合序列，即“^^113支架”可被改變，條件是kiFM保留配體結(jié)合功能及/或結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。在一些實施方式中，Asp 7、Glu 9及Asp 23中的一或多者被替換為另一氨基酸，例如非帶負電的氨基酸殘基(例如AsruLys等)。已報導這些突變具有在中性PH值下與野生型形式相比促進突變kiFM的穩(wěn)定性提高的作用(參見PCT公開第TO 02/04523號)。已公開了有益或中性的1QFn3支架中的各種其它的有益或中性的變化。參見例如 Batori 等人,ProteinEng. 200215 (12) : 1015-20 ；Koide 等人,Biochemistry200140(34):10326-33。10Fn3支架可藉由一或多個保守性取代來修飾。10Fn3支架中的多達5%、10%、20%或甚至30%或更多氨基酸可藉由保守性取代來改變而不實質(zhì)上改變kiFM對配體的親和力。舉例而言，支架修飾優(yōu)選使kiFM結(jié)合物對配體的結(jié)合親和力降低至小于1/100、1/50、1/25、1/10,1/5或1/2。此類變化可能會改變kiFM的體內(nèi)免疫原性，而在免疫原性降低的情況下，這樣的變化是理想的。如本文中所使用的，“保守性取代”為在物理或功能上類似于相應(yīng)的參考殘基的殘基。亦即，保守性取代及其參考殘基具有類似的尺寸、形狀、電荷、化學性質(zhì)(包括形成共價鍵或氫鍵的能力)或其類似性質(zhì)。優(yōu)選的保守性取代為滿足Dayhoff等人，Atlas of Protein Sequence and Structure 5:345-352 (1978 及增刊)中對可接受的點突變所定義的標準的那些保守性取代。保守性取代的實例為以下各組中的取代(a)纈氨酸、甘氨酸；(b)甘氨酸、丙氨酸；(c)纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸；(d)天冬氨酸、谷氨酸；(e)天冬酰胺、谷氨酰胺；(f)絲氨酸、蘇氨酸；(g)賴氨酸、精氨酸、甲硫氨酸 '及(h)苯丙氨酸、酪氨酸。在某些實施方式中，基于kiFM支架的抗體樣蛋白質(zhì)可由以下序列一般性地定義EVVAAT (X) .SLLI (X) ..YYRITYGE (X) .QEFTV (X) yATI (X) .DYTITVYAV (X) JSINYRT (SEQID NO:2)。在SEQ ID NO:2中，AB環(huán)由Xa表示，CD環(huán)由Xb表示，EF環(huán)由X。表示，BC環(huán)由Xx表示，DE環(huán)由Xy表示，且FG環(huán)由Xz表示。X表示任何氨基酸，且X后的下標表示氨基酸數(shù)目的整數(shù)。具體的，a 可為 1-15、2-15、1-10、2-10、1-8、2-8、1-5、2-5、1-4、2-4、1-3、2-3 或
1-2個氨基酸中的任一者；且13、(33、7及z可各獨立地為2-20、2-15、2-10、2-8、5-20、5-15、5-10、5-8、6-20、6-15、6-10、6-8、2-7、5-7或6-7個氨基酸中的任一者。在優(yōu)選的實施方式中，a為2個氨基酸，b為7個氨基酸，c為7個氨基酸，X為9個氨基酸，y為6個氨基酸，且z為12個氨基酸。相對于SEQ ID NO:1所示的相應(yīng)氨基酸，β鏈的序列可在所有7個支架區(qū)中具有O至10、0至8、0至6、0至5、0至4、0至3、0至2或O至I個取代、缺失或添加中的任一者。在一個例示性實施方式中，相對于SEQ ID NO:1所示的相應(yīng)氨基酸，β鏈的序列可在所有7個支架區(qū)中具有O至10、0至8、0至6、0 至5、0至4、0至3、0至2或O至I個保守性取代中的任一者。在某些實施方式中，核心氨基酸殘基為固定的，且任何取代、保守性取代、缺失或添加存在于除核心氨基酸殘基外的殘基處。在例示性實施方式中，由(X)x、(X)y及(X)z表示的BC、DE及FG環(huán)分別被替換為包含來自下表2中所示的任意HSA結(jié)合物(亦即表2中的SEQ ID Ν0:4、8、12、16、20及24-44)的BC、DE及FG環(huán)序列的多肽。在某些實施方式中，基于kiFM支架的抗體樣蛋白質(zhì)可由以下序列一般性定義EVVAATPTSLLI (X) ..YYRITYGETGGNSPVQEFTV (X) .,ATISGLKPGVDYTITVYAV (X) JSINYRT(SEQ ID NO:3)ο在SEQ ID NO:3中，BC環(huán)由Xx表示，DE環(huán)由Xy表示，且FG環(huán)由Xz表示。X表示任何氨基酸，且X后的下標表示氨基酸數(shù)目的整數(shù)。具體的，X、y及z可各獨立地為2-20、
2-15、2-10、2-8、5-20、5-15、5-10、5-8、6-20、6-15、6-10、6-8、2-7、5-7或 6-7 個氨基酸中的任一者。在優(yōu)選的實施方式中，X為9個氨基酸，y為6個氨基酸，且z為12個氨基酸。相對于SEQ ID NO:1所示的相應(yīng)氨基酸，β鏈的序列可在所有7個支架區(qū)中具有O至10、0至8、0至6、0至5、0至4、0至3、0至2或O至I個取代、缺失或添加中的任一者。在一個例示性的實施方式中，相對于SEQ ID NO:1所示的相應(yīng)氨基酸，β鏈的序列可在所有7個支架區(qū)中具有O至10、0至8、0至6、0至5、0至4、0至3、0至2或O至I個保守性取代中的任一者。在某些實施方式中，核心氨基酸殘基是固定的，且任何取代、保守性取代、缺失或添加存在于除核心氨基酸殘基外的殘基處。在例示性實施方式中，分別由(X)x、(X)y& (X)z表示的BC、DE及FG環(huán)被替換為包含來自下表2中所示的任意HSA結(jié)合物(亦即表2中的SEQ ID N0:4、8、12、16、20 及 24-44)的 BC、DE 及 FG 環(huán)序列的多肽。具有ED尾部的1QFn3結(jié)構(gòu)域在一個方面，本發(fā)明提供一種包含纖連蛋白III型第十C°Fn3)結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該1QFn3結(jié)構(gòu)域(i)相對于野生型1QFn3結(jié)構(gòu)域，在AB、BC、⑶、DE、EF及FG環(huán)中的一或多者中包含經(jīng)修飾的氨基酸序列；(ii)結(jié)合野生型kiFM結(jié)構(gòu)域不結(jié)合的靶分子；且(iii)包含具有序列(ED)n的C端尾部，其中η為2-10、2-8、2-5、3-10、3-8、3-7、3-5或4_7的整數(shù)，或其中 η 為 2、3、4、5、6、7、8、9 或 10。在某些實施方式中，uiFr^結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID NO:1的殘基9_94所示的氨基酸序列具有至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的氨基酸序列。在某些實施方式中，kiFM結(jié)構(gòu)域包含SEQID N0:l、2或3。在某些實施方式中，kiFM結(jié)構(gòu)域包含SEQ ID NO:1的氨基酸9-94。 在某些實施方式中，具有ED尾部的wFM結(jié)構(gòu)域在C端緊鄰著ED重復序列之前包含E、I或EI。在一些實施方式中，ED重復序列提高kiFM結(jié)構(gòu)域的溶解度及/或減少其聚集。在某些實施方式中，相對于野生型1QFn3域，具有ED尾部的1QFn3域在BC、DE及FG環(huán)的每一者中包含經(jīng)修飾的氨基酸序列。在其它實施方式中，具有ED尾部的kiFM結(jié)構(gòu)域以I μ M或更小的Kd結(jié)合所需的靶。血清白蛋白結(jié)合物10Fn3結(jié)構(gòu)域由于其約IOkDa的小尺寸而通過腎過濾及降解自循環(huán)快速清除(t1/2= 在小鼠體內(nèi)15-45分鐘；在猴體內(nèi)3小時)。在某些方面中，本申請?zhí)峁┨禺愋越Y(jié)合血清白蛋白(例如人類血清白蛋白(HSA))以延長kiFM結(jié)構(gòu)域的t1/2的kiFM結(jié)構(gòu)域。HSA的血清濃度為600 μ M且在人體內(nèi)t1/2為19天。HSA的t1/2的延伸已部分被歸因于其經(jīng)由新生Fe受體(FcRn)的再循環(huán)。在經(jīng)由內(nèi)體攝取至內(nèi)皮細胞中后，HSA以pH值依賴性方式結(jié)合FcRn ;此相互作用使HSA再循環(huán)回到血流中，從而使其避免溶酶體降解。FcRn被廣泛地表達，且其再循環(huán)路徑被認為是組成性的。在大多數(shù)細胞類型中，大部分FcRn存在于細胞內(nèi)分選內(nèi)體中。HSA容易藉由流體相胞飲作用的非特異性機制內(nèi)在化，且被FcRn自溶酶體降解中救出。在內(nèi)體中所見的酸性pH值下，HSA對FcRn的親和力增加(在pH 6.0下為5μΜ)。一旦結(jié)合于FcRn,則HSA避開溶酶體降解路徑,胞轉(zhuǎn)(transcytosed)至細胞表面并在細胞表面釋放。在一個方面，本發(fā)明提供包含血清白蛋白結(jié)合性kiFM結(jié)構(gòu)域的抗體樣蛋白質(zhì)。在例示性實施方式中,本文所述的血清白蛋白結(jié)合性uiFr^蛋白質(zhì)以小于3 μ M、2. 5 μ M、2 μ M、L 5 μ Μ、I μ Μ、500ηΜ、100ηΜ、50ηΜ、IOnM、1ηΜ、500ρΜ、100ρΜ、50ρΜ 或 IOpM 的 Kd 結(jié)合 HSA。在某些實施方式中，本文所述的血清白蛋白結(jié)合性kiFM蛋白質(zhì)在25°C或37°C下在5. 5至
7.4 的 pH 值范圍內(nèi)以小于 3 μ Μ、2· 5 μ Μ、2 μ M、1. 5 μ M、I μ Μ、500ηΜ、100ηΜ、50ηΜ、IOnM, ΙηΜ、500ρΜ、100ρΜ、50ρΜ或IOpM的Kd結(jié)合HSA。在一些實施方式中，與在1. 4或更大的pH值下對HSA的結(jié)合親和力相比，本文所述的血清白蛋白結(jié)合性kiFM蛋白質(zhì)在小于7. 4的pH值下較緊密地結(jié)合于HSA。在某些實施方式中，本文所述的HSA結(jié)合性kiFM蛋白質(zhì)亦可結(jié)合來自猴、大鼠或小鼠中的一或多者的血清白蛋白。在某些實施方式中，本文所述的血清白蛋白結(jié)合性wFM蛋白質(zhì)以小于 3μΜ、2· 5μΜ、2μΜ、1· 5μΜ、1 μΜ、500ηΜ、100ηΜ、50ηΜ、10ηΜ、1ηΜ、500ρΜ 或IOOpM的Kd結(jié)合獼猴血清白蛋白(RhSA)或食蟹猴血清白蛋白(CySA)。在某些實施方式中，本文所述的血清白蛋白結(jié)合性wFnS蛋白質(zhì)結(jié)合HSA的結(jié)構(gòu)域I及/或結(jié)構(gòu)域II。在一個實施方式中，本文所述的血清白蛋白結(jié)合性uiFr^蛋白質(zhì)不結(jié)合HSA的結(jié)構(gòu)域III。在某些實施方式中，血清白蛋白結(jié)合性uiFr^(SABA)包含與野生型uiFr^結(jié)構(gòu)域(SEQ ID NO:1)具有至少40%、50%、60%、70%、75%、80%或85%同一性的序列。在一個實施方式中，相對于野生型kiFM結(jié)構(gòu)域，BC、DE或FG環(huán)中的至少一者是經(jīng)修飾的。在另一個實施方式中，相對于野生型kiFM結(jié)構(gòu)域，BC、DE或FG環(huán)中的至少兩者是經(jīng)修飾的。在另一個實施方式中，相對于野生型kiFM結(jié)構(gòu)域，BC、DE及FG環(huán)中的所有三者均是經(jīng)修飾的。在其它實施方式中，SABA包含與表2中所示的26個核心SABA序列(即SEQ IDNO: 4、8、12、16、20及24-44)中的任一者或表2中所示的延伸SABA序列(亦即SEQ ID N0:89_116，減去6XHIS標簽)中的任一者具有至少40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%或95%同一性。在某些實施方式中，如本文所述的SABA可包含如SEQ ID NO: 2或3所示的序列，其中分別由(X) x、⑴y及(X) z表示的BC、DE及FG環(huán)被替換為來自26個核心SABA序列(亦即表2中的SEQ ID N0:4、8、12、16、20及24-44)中的任一者或與26個核心SABA序列的BC、DE及FG環(huán)序列至少75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一的序列的各別的一組指定的BC、DE及FG環(huán)。在例示性實施方式中，如本文所述的SABA由SEQ ID NO: 3定義且具有來自26個核心SABA序列(亦即表2中的SEQ ID NO:4、8、12、16、20及24-44)中的任一者的一組BC、DE及FG環(huán)序列。相對于SEQ ID NO:1的支架氨基酸殘基，此類SABA的支架區(qū)可具有O至20、0至15、0至10、0至8、0至6、0至5、0至4、0至3、0至2或O至I個取代、保守性取代、缺失或添加中的任一者。舉例而言，SABAl具有SEQ ID N0:4所示的核心序列且包含如SEQ ID NO: 5-7分別所示的BC、DE及FG環(huán)。因此，基于SABAl核心的SABA可包含 SEQ IDN0:2 或 3，其中(X)x 包含 SEQ ID NO: 5，(X)y 包含 SEQ ID NO: 6，且(X)z 包含 SEQ ID NO: 7。預期使用來自其它SABA核心序列的該組BC、DE及FG環(huán)的類似構(gòu)建體。相對于SEQ ID N0:1的支架氨基酸殘基，此類SABA的支架區(qū)可包含O至20、0至15、0至10、0至
8、0至6、0至5、0至4、0至3、0至2或O至I個取代、保守性取代、缺失或添加中的任一者?？蛇M行此類支架修飾，只要SABA能夠以所需Kd結(jié)合血清白蛋白(例如HSA)即可。在某些實施方式中，SABA (例如SABA核心序列或如上文所述的基于SABA核心序列的序列)可經(jīng)修飾以包含N端延伸序列及/或C端延伸序列。例示性延伸序列展示于表2中。舉例而言，稱為SABA1.1的SEQ ID NO:89包含具有N端序列MGVSDVPRDLE(SEQ IDNO: 45，稱為 AdNTl)及 C 端序列 EIDKPSQ (SEQ ID NO: 54，稱為 AdCTl)的核心 SABA I 序列(SEQ ID NO:4) ο然而，SABA1.1進一步在C端包含His6標簽，應(yīng)了解His6標簽完全是任選的,且可位于N或C端延伸序列中的任何地方。此外，表2中所提供的任一例示性N或C端延伸序列(SEQ ID N0:45-64及215)及其任何變體可用于修飾表2中所提供的任何特定SABA核心序列。在某些實施方式中，表2中所提供的接頭序列(SEQ ID NO:65-88,216-221及397)可單獨或與SEQ ID NO: 54-64或215中的一者組合用作C端尾部序列。在某些實施方式中，C端延伸序列(亦稱為“尾部”)包含E及D殘基，且長度可為8至50、10至30、10至20、5至10及2至4個氨基酸。在一些實施方式中，尾部序列包括基于ED的接頭，其中序列包含ED的串聯(lián)重復序列。在例示性實施方式中，尾部序列包含
2-10、2-7、2-5、3-10、3-7、3-5、3、4或5個ED重復序列。在某些實施方式中，基于ED的尾部序列亦可包括其它氨基酸殘基，例如E1、EID、ES、EC、EGS&EGC。此類序列部分地基于已知AdnectinTM尾部序列，諸如EIDKPSQ(SEQ ID NO: 54)，其中殘基D及K已被移除。在例示性實施方式中，基于ED的尾部在ED重復序列之前包含E、I或EI殘基。在其它實施方式中，當設(shè)計SABA融合分子，例如SEQ ID NO: 147 (SABAl-FGF21vl6)(其中EIEDEDEDEDED與GSGSGSGS連接)時，尾部序列可視需要與其它已知接頭序列(例如表 2 中的 SEQ ID NO:65-88、216-221 及 397)組合。血清白蛋白結(jié)合Adnectin (SABA)的融合物本發(fā)明的一個方面提供包含血清白蛋白結(jié)合性1QFn3(SABA)及至少一個其它部分的綴合物。該其它部分可適用于任何診斷性、成像或治療性目的。在某些實施方式中，相對于不與SABA綴合的部分的血清半衰期，與SABA融合的部分的血清半衰期得到增加。在某些實施方式中，SABA融合物的血清半衰期為該部分不與 SABA 融合時的血清半衰期的至少 20、40、60、80、100、120、150、180、200、400、600、800、1000、1200、1500、1800、1900、2000、2500或3000%。在其它實施方式中，SABA融合物的血清半衰期為該部分不與SABA融合時的血清半衰期的至少1. 5倍、2倍、2. 5倍、3倍、3. 5倍、4倍、4. 5倍、5倍、6倍、7倍、8倍、10倍、12倍、13倍、15倍、17倍、20倍、22倍、25倍、27倍、30倍、35倍、40倍或50倍。在一些實施方式中，SABA融合物的血清半衰期為至少2小時、2. 5小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時、9小時、10小時、15小時、20小時、25小時、30小時、35小時、40小時、50小時、60小時、70小時、80小時、90小時、100小時、110小時、120小時、130小時、135小時、140小時、150小時、160小時或200小時。
在某些實施方式中，SABA融合蛋白結(jié)合HSA的Kd為小于3 μ M、2. 5 μ Μ、2 μ M、L 5 μ Μ、I μ Μ、500ηΜ、100ηΜ、50ηΜ、IOnM, 1ηΜ、500ρΜ、100ρΜ、50ρΜ 或 IOpM0 在某些實施方式中，SABA融合蛋白在25°C或37°C下在5. 5至7. 4的pH值范圍內(nèi)以小于3 μ M、2. 5 μ Μ、2 μ M、L 5 μ Μ、I μ Μ、500ηΜ、100ηΜ、50ηΜ、IOnM、1ηΜ、500ρΜ、100ρΜ、50ρΜ 或 IOpM 的 Kd 結(jié)合 HSA。在一些實施方式中，與在pH 7. 4下結(jié)合相比，SABA融合蛋白在小于7. 4的pH值下更緊密地結(jié)合HSA。因此，本文所述的SABA融合分子適用于藉由形成治療性部分與SABA之間的融合物來增加治療性部分(例如FGF21)的半衰期。此類融合分子可用于治療對融合物中所含的治療性部分的生物活性有反應(yīng)的病癥。本發(fā)明涵蓋SABA融合分子在由任一以下蛋白質(zhì)或分子降解所引起的疾病中的用途。異源部分在一些實施方式中，SABA與第二部分融合，該第二部分為小有機分子、核酸或蛋白質(zhì)。在一些實施方式中，SABA與治療性部分融合，該治療性部分靶向受體、受體配體、病毒外殼蛋白、免疫系統(tǒng)蛋白質(zhì)、激素、酶、抗原或細胞信號傳導蛋白質(zhì)。該融合物可藉由將第二部分連接于SABA分子的任意末端(亦SABA-治療性分子排列或治療性分子-SABA排列)來形成。在例示性實施方式中，該治療性部分為VEGF、VEGF-Rl、VEGF-R2、VEGF-R3、Her-1、Her-2、Her_3、EGF-1, EGF-2、EGF-3、a 3、cMet、I COS, CD40L、LFA-1, c_Met、I COS, LFA-1,IL-6、B7.1、ffl. 2、0X40、IL_Ib、TAC1、IgE、BAFF 或 BLys, TPO-R、CD19、CD20、CD22、CD33、CD28、IL-1-Rl、TNF-a、TRAIL-R1、補體受體1、FGFa、骨橋蛋白(Osteopontin)、玻璃連結(jié)蛋白(Vitronectin)、埃弗林(Ephrin)A1-A5、埃弗林 B1-B3、α-2-巨球蛋白、CCL1、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL6、CCL7、CXCL8、CXCL9、CXCL10、CXCLI1、CXCLl2, CCLl3, CCL14、CCL15、CXCLl6, CCL16、CCL17、CCL18、CCL19、CCL20、CCL21、CCL22、PDGF、TGFb, GMCSF、SCF、p40 (IL12/IL23)、ILIb, ILIa, ILlra, IL2、IL3、IL4、IL5、IL6、IL8、IL10、IL12、IL15、IL23、Fas、FasL、Flt3 配體、41BB、ACE、ACE-2, KGF、FGF-7、SCF、網(wǎng)蛋白(Netrin)1、網(wǎng)蛋白2、IFNa、IFNb、IFNg、胱天蛋白酶(Caspase) 2、胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶7、胱天蛋白酶8、胱天蛋白酶 10、ADAMS1、ADAM S5、ADAM 8、ADAM 9、ADAM 15、ADAM TSU ADAM TS5 ;脂連蛋白(Adiponectin)、ALCAM> ALK-1> APRIL、憐脂結(jié)合蛋白(Annexin)V、血管生成素、雙調(diào)蛋白(Amphiregulin)、血管位蛋白(Angiopoietin)1、血管位蛋白2、血管位蛋白4、B7-1/CD80、B7-2/CD86、B7-Hl、B7-H2、B7-H3、Bcl-2、BACE-1、BAK、BCAM、BDNF、bNGF、bECGF、BMP2、BMP3、BMP4、BMP5、BMP6、BMP7、BMP8 ;CRP、鈣黏素6、鈣黏素8、鈣黏素11 ;組織蛋白酶A、組織蛋白酶B、組織蛋白酶C、組織蛋白酶D、組織蛋白酶E、組織蛋白酶L、組織蛋白酶S、組織蛋白酶 V、組織蛋白酶 X ;CDlla/LFA-l、LFA-3、GP2b3a、GH 受體、RSV F 蛋白、IL_23(p40、pl9)、IL-12、CD80、CD86、CD28、CTLA-4、α 4_β1、α 4_β 7、TNF/ 淋巴毒素、IgE、CD3、CD20、IL-6、IL-6R、BLYS/BAFF、IL-2R、HER2、EGFR、CD33、CD52、地高辛(Digoxin)、Rho (D)、水痘(Varicella)、肝炎、CM V、破傷風、牛痘、抗蛇毒(Antivenom)、肉毒梭菌、Trail-Rl、Trai 1-R2、cMet、TNF-R 家族(諸如 LA NGF-R)、CD27、CD30、CD40、CD95、淋巴毒素 a/b 受體、Ws1-1、TL1A/TNFSF15、BAFF, BAFF-R/TNFRSF13C、TRAIL R2/TNFRSF10B、TRAIL R2/TNFRSF 10B、Fas/TNFRSF6CD27/TNFRSF7、DR3/TNFRSF25、HVEM/TNFRSF 14、TROY/TNFRSF19、CD40 配體 /TNFSF5、BCMA/TNFRSF17、CD30/TNFRSF8、LIGHT/TNFSF14、4_1BB/TNFRSF9、CD40/TNFRSF5、GITR/[ y]NFRSF 18、骨保護蛋白(Osteoprotegerin)/TNFRSF I IB、RANK/TNFRSF IIA,TRAIL R3/TNFRSF 10C、TRAIL/TNF SFIO、TRANCE/RANK L/TNFSF11、4_1BB 配體/TNFSF9、TWEAK/TNFSF12、CD40 配體 /TNFSFS、Fas 配體 /TNFSF6、RELT/TNFRSF19L、APRIL/TNFSFl3, DcR3/TNFRSF6B、TNF RI/TNFRSFIA、TRAIL Rl/TNFRSFIOA、TRAILR4/TNFRSF10D、CD30 配體 /TNFSF8、GITR 配體 /TNFSF18、TNFSF18、TACI/TNFRSF13B、NGF R/TNFRSF16、0X40 配體 /TNFSF4、TRAILR2/TNFRSF10B、TRAIL R3/TNFRSF10C、TWEAK R/TNFRSF12、BAFF/BLyS/TNF SF13、DR6/TNFRSF21、TNF-a/TNF SF 1A、Pro-TNF-a/TNFSF1A、淋巴毒素 β R/TNFRSF3、淋巴毒素 β R (LTbR)/Fe 嵌合體、TNF RI/TNFRSFIA、TNF-β/TNFSF 1B、PGRP_S、TNFRI/TNFRSFIA、TNF RII/TNFRSFIB、EDA_A2、TNF-a /TNFSFIA、EDAR、XEDAR、TNFRI/TNFRSFIA。備受關(guān)注的是以純化形式市售的人類靶蛋白質(zhì)以及結(jié)合于這些靶蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)。實例為4EBP1、14-3-3 ζ、53BP1、2B4/SLAMF4、CCL21/6Ckine、4_lBB/TNFRSF9、8D6A、4-1BB 配體 /TNFSF9、8-氧代-dG、4_ 氨基-1，8-萘二甲酰亞胺、A2B5、氨肽酶 LRAP/ERAP2、A33、氨肽酶 N/ANPEP、Aag、氨肽酶 P2/XPNPEP2、ABCG2、氨肽酶 P1/XPNPEP1、ACE、氨肽酶PILS/ARTSl、ACE-2、無羊膜(Amnionless)、肌動蛋白、雙調(diào)蛋白、β -肌動蛋白、AMPK α 1/2、活化素(Actin)Α、ΑΜΡΚ α1、活化素 ΑΒ、ΑΜΡΚ α 2、活化素 Β、ΑΜΡΚβ1、活化素 C、AMPK β 2、活化素RIA/ALK-2、雄激素R/NR3C4、活化素RIB/ALK-4、血管生成素、活化素RIIA、血管位蛋白-1、活化素RIIB、血管位蛋白-2、ADAM8、血管位蛋白-3、ADAM9、血管位蛋白-4、ADAM10、血管位蛋白樣UADAM12、血管位蛋白樣2、ADAM15、血管位蛋白樣3、TACE/ADAM17、血管位蛋白樣4、ADAM19、血管位蛋白樣7/CDT6、ADAM33、血管抑制素、ADAMTS4、磷脂結(jié)合蛋白Al/磷脂結(jié)合蛋白1、ADAMTS5、磷脂結(jié)合蛋白A7、ADAMTS1、磷脂結(jié)合蛋白A10、ADAMTSL-1/普克汀(Punctin)、磷脂結(jié)合蛋白V、脂連蛋白/Acrp30、ANP、AEBSF、AP位點、聚蛋白聚糖(Aggrecan)、APAF-1、聚集蛋白(Agrin)、APC、AgRP、APE、AGTR-2、APJ、AIF、APLP-1, Akt、APLP-2、Aktl、載脂蛋白(Apolipoprotein)Al、Akt2、載脂蛋白 B、Akt3、APP、血清白蛋白、APRIL/TNFSF13、ALCAM、ARC、ALK-1、阿特明(Artemin)、ALK-7、芳基硫酸酯酶 AJARSA、堿性磷酸酶、ASAH2/N-?；窠?jīng)鞘胺醇酰胺水解酶-2、ci2U-球蛋白、ASC、α_1_酸醣蛋白、ASGRl、α -胎蛋白、ASKl、ALS、ATM、釉母細胞(Ameloblastic) ATRIP、AMICA/JAML、奧羅拉(Aurora)A、AMIGO、奧羅拉 B、AMIG02、阿星(Axin)-1、AMIG03、Axl、氨基?；?ACY1、天青殺素(Azurocidin)/CAP37/HBP、氨肽酶 A/ENPEP、B4GALT1、B頂、B7_1/CD80、6-生物素-17-NAD、B7-2/CD86、BLAME/SLAMF8、B7-H1/PD-L1、CXCL13/BLC/BCA-1、B7-H2、BLIMPl,B7-H3、BIk、B7-H4、BM1-1、BACE-1、BMP-1/PCP、BACE-2、BMP-2、Bad、BMP-3、BAFF/TNFSF 13B、BMP-3b/⑶F-10、BAFF R/TNFRSF 13C、BMP-4、Bag-1、BMP-5、BAK、BMP-6、BAMBI/NMA、BMP-7、BARD1、BMP-8、Bax、BMP-9、BCAM、BMP-10、Bcl-10、BMP-15/⑶F-9B、Bcl_2、BMPR-1A/ALK-3、Bcl-2 相關(guān)蛋白 Al、BMPR-1B/ALK-6、Bcl_w、BMPR-1I, Bcl_x、BNIP3L、Bcl-xL、BOC, BCMA/TNFRSF17、B0K、BDNF、BPDE、苯甲酰胺、短尾基因(Brachyury)、普通 β 鏈、Β-Raf、β IG-H3、CXCL14/BRAK、β 細胞調(diào)節(jié)素、BRCAl、β -防御素(Defensin) 2、BRCA2、BID、BTLA、雙聚糖(Biglycan)、Bub-1> Bik 樣殺手蛋白(killer protein)、c-jun、CD90/Thyl> c_Rel、CD94、CCL6/C10、CD97、CIq R1/CD93、CD151、CIqTNFl、CD160、ClqTNF4、CD163、ClqTNF5、CD164、補體組分CIr、CD200、補體組分CIs、CD200R1、補體組分C2、CD229/SLAMF3、補體組分C3a、CD23/Fc ε RH、補體組分 C3d、CD2F-10/SLAMF9、補體組分 C5a、CD5L、鈣黏素-4/R-鈣黏素、CD69、鈣黏素-6、CDC2、鈣黏素-8、CDC25A、鈣黏素-11、CDC25B、鈣黏素-12、CDCP1、鈣黏素-13、CD0、鈣黏素-17、CDX4、E-鈣黏素、CEACAM_l/CD66a、N-鈣黏素、CEACAM-6、P-鈣黏素、親環(huán)蛋白(Cerberus) UVE-1丐黏素、CFTR、f丐結(jié)合蛋白(Calbindin)D、cGMP、f丐神經(jīng)蛋白 A、Chem R23、f丐神經(jīng)蛋白B、凱莫瑞(Chemerin)、I丐網(wǎng)織蛋白(Calreticulin)-2、趨化因子樣品包、CaM激酶I1、殼聚糖酶(Chitinase) 3樣l、cAMP、殼三糖苷酶(Chitotriosidase)/CHIT1、類大麻酚 Rl、Chkl、類大麻酚 R2/CB2/CNR2、Chk2、CAR/NR1I3、CHL-1/L1CAM-2、碳酸酐酶1、膽堿乙酰基轉(zhuǎn)移酶/CbAT、碳酸酐酶I1、軟骨凝集蛋白(Chondrolectin)、碳酸酐酶II1、脊索發(fā)生素(Chordin)、碳酸酐酶IV、脊索發(fā)生素樣1、碳酸酐酶VA、脊索發(fā)生素(Chordin-1ike)樣 2、碳酸酐酶 VB、CINC_1、碳酸酐酶 V1、CINC_2、碳酸酐酶 VI1、CINC_3、碳酸酐酶VII1、卡拉斯賓(Claspin)、碳酸酐酶IX、緊密連接蛋白(Claudin)-6、碳酸酐酶X、CLC、碳酸酐酶 XI1、CLEC-1、碳酸酐酶 XII1、CLEC-2、碳酸酐酶 XIV、CLECSF13/CLEC4F、羧甲基賴氨酸、CLECSF8、羧肽酶A1/CPA1、CLF-1、羧肽酶A2、CL-P1/C0LEC12、羧肽酶A4、簇蛋白(Clusterin)、羧肽酶B1、簇蛋白樣1、羧肽酶E/CPE、CMG-2、羧肽酶X1、CMV UL146、心肌營養(yǎng)蛋白(Cardiotrophin)-l、CMV UL147、肌肽二肽酶1、CNP、卡隆特(Caronte)、CNTF, CART、CNTF R α、胱天蛋白酶、凝血因子11/凝血酶、胱天蛋白酶-1、凝血因子111/組織因子、胱天蛋白酶_2、凝血因子VI1、胱天蛋白酶-3、凝血因子X、胱天蛋白酶-4、凝血因子X1、胱天蛋白酶-6、凝血因子XIV/蛋白C、胱天蛋白酶-7、COCO、胱天蛋白酶_8、黏結(jié)蛋白(Cohesin)、胱天蛋白酶_9、膠原蛋白1、胱天蛋白酶_10、膠原蛋白I1、胱天蛋白酶_12、膠原蛋白IV、胱天蛋白酶-13、常見Y鏈/IL-2R Y、胱天蛋白酶肽抑制劑、COMP/凝血栓蛋白(Thrombospondin) -5、過氧化氫酶、補體組分CIrLP、β -連環(huán)蛋白(Catenin)、補體組分ClqA、組織蛋白酶1、補體組分ClqC、組織蛋白酶3、補體因子D、組織蛋白酶6、補體因子1、組織蛋白酶A、補體MASP3、組織蛋白酶B、連接蛋白(Connexin) 43、組織蛋白酶C/DPP1、接觸蛋白(Contactin)-1、組織蛋白酶D、接觸蛋白-2/TAG1、組織蛋白酶E、接觸蛋白-4、組織蛋白酶F、接觸蛋白-5、組織蛋白酶H、庫林(Corin)、組織蛋白酶L、庫努林(Cornulin)、組織蛋白酶O、C0RS26/ClqTNF，3、組織蛋白酶S、大鼠皮層干細胞、組織蛋白酶V、皮質(zhì)醇、組織蛋白酶 XITJ 、COUP-TF I/NR2F1、CBP、C0UP-TFII/NR2F2、CC1、COX-1、CCK-A R、COX-2、CCL28、CRACC/SLAMF7、CCRl、C-反應(yīng)性蛋白、CCR2、肌酸激酶、肌肉 /CKMM、CCR3、肌酸酐、CCR4、CREB, CCR5、CREG, CCR6、CRELD1、CCR7、CRELD2、CCR8、CRHBP, CCR9、CRHR-1、CCR10、CRIMl,CD155/PVR、克里普托(Cripto)、CD2、CRISP-2、CD3、CRISP-3、CD4、橫脈缺失(Crossveinless)-2、CD4+/45RA-、CRTAM、CD4+/45R0-、CRTH-2、CD4+/CD62L-/CD44、CRYl、CD4+/CD62L+/CD44、隱秘蛋白(Cryptic)、CD5、CSB/ERCC6、CD6、CCL27/CTACK、CD8、CTGF/CCN2、CD8+/45RA-、CTLA-4、CD8+/45R0-、庫比林(Cub i I in)、CD9、CX3CR1、CD 14、CXADR、CD27/TNFRSF7、CXCL16、CD27 配體 /TNFSF7、CXCR3、CD28、CXCR4、CD30/TNFRSF8、CXCR5、CD30 配體/TNFSF8、CXCR6、CD31/PECAM-1、親環(huán)素蛋白(Cyclophilin)A、CD34、Cyr61/CCNU CD36/SR-B3、胱抑素(Cystatin) A、CD38、胱抑素 B、CD40/TNFRSF5、胱抑素 C、CD40 配體 /TNFSF5、胱抑素D、CD43、胱抑素E/M、CD44、胱抑素F、CD45、胱抑素H、CD46、胱抑素H2、CD47、胱抑素S、CD48/SLAMF2、胱抑素 SA、CD55/DAF、胱抑素 SN、CD58/LFA-3、細胞色素 C、CD59、Apo 細胞色素c、CD68、Holo細胞色素c、CD72、細胞角蛋白(Cytokeratin)8、CD74、細胞角蛋白14、CD83、細胞角蛋白 19、CD84/SLAMF5、西托寧(Cytonin)、D6、DISPl、DAN、Dkk-1、DANCE、Dkk-2、DARPP-32、Dkk_3、DAX1/NR0B1、Dkk_4、DCC, DLEC, DCIR/CLEC4A、DLL1、DCAR、DLL4、DcR3/TNFRSF6B、d_ 熒光素、DC-SIGN、DNA 連接酶 IV、DC-SIGNR/CD299、DNA 聚合物 β、DcTRAIL R1/TNFRSF23、DNAM-1、DcTRAIL R2/TNFRSF22、DNA-PKcs,DDRl、DNER、DDR2、多巴脫羧酶 /DDC、DEC-205、DPCR-1、Decapentaplegic、DPP6、核心聚糖(Decorin)、DPP A4、戴克汀(Dectin)-1/CLEC7A、DPPA5/ESG1、Dectin_2/CLEC6A、DPPII/QPP/DPP7、DEP-1/CD 148、DPPIV/CD26、沙漠朿Ij 猬因子(Desert Hedgehog)、DR3/TNFRSF25、結(jié)蛋白(Desmin)、DR6/TNFRSF21、橋粒芯糖蛋白(Desmoglein)-1、DSCAM、橋粒芯糖蛋白-2、DSCAM-L1、橋粒芯糖蛋白-3、DSPG3、散亂蛋白(Dishevelled)-U Dtk、散亂蛋白 _3、發(fā)動蛋白(Dynamin)、EAR2/NR2F6、EphA5、ECE-1、EphA6、ECE-2、EphA7、ECF-L/CHI3L3、EphA8、ECM-1、EphBl、大腸桿菌抑制劑(Ecotin)、EphB2、EDA、EphB3、EDA-A2、EphB4、EDAR、EphB6、EDG-1、埃弗林、EDG-5、埃弗林-Al、EDG-8、埃弗林-A2、eEF_2、埃弗林-A3、EGF、埃弗林-A4、EGF R、埃弗林_A5、EGRl、埃弗林-B、EG-VEGF/PK1、埃弗林 _Bl、eIF2 α、埃弗林-B2、eIF4E、埃弗林-B3、EIk-1、埃匹根(Epigen)、EMAP-11、表皮形態(tài)發(fā)生素(Epimorphin)/突觸融合蛋白(Syntaxin)2、EMMPRIN/CD147、表皮調(diào)節(jié)素(Epiregulin)、CXCL5/ENA、EPR_1/Xa 受體、埃杜坎(Endocan)、ErbB2、埃杜格林(Endoglin)/CD 105、ErbB3、四聚糖(Endoglycan)、ErbB4、核酸內(nèi)切酶
II1、ERCCl、核酸內(nèi)切酶1丫31 03、核酸內(nèi)切酶￥3腿1/^腿2、核酸內(nèi)切酶￥1113腿1、埃杜里培林(Endorepellin)/基底膜蛋白聚糖(Perlecan)、ERK2、內(nèi)皮抑制素(Endostatin)、ERK3、內(nèi)皮素(Endothelin)-l、ERK5/BMK1、英格瑞里德(Engrailed)-2、ERR a/NR3Bl、EN-RAGE, ERR β /NR3B2、腸肽酶/腸激酶、ERR y /NR3B3、CCLl I/嗜酸粒細胞趨化蛋白(Eotaxin)、紅細胞生成素(Erythropoietin)、CCL24/嗜酸粒細胞趨化蛋白_2、紅細胞生成素 R、CCL26/ 嗜酸粒細胞趨化蛋白-3 (Eotaxin-3)、ESAM、EpCAM/TROP_l、ER a /NR3A1、EPCR、ER β/NR3A2、Eph、核酸外切酶 II1、EphAl、埃斯托新(Exostosin)樣 2/EXTL2、EphA2、埃斯托新樣 3/EXTL3、EphA3、FABP1、FGF-BP、FABP2、FGF Rl-4、FABP3、FGF R1、FABP4、FGF R2、FABP5、FGF R3、FABP7、FGF R4、FABP9、FGF R5、補體因子 B、Fgr、FADD、FHR5、FAM3A、纖連蛋白、FAM3B、纖維膠凝蛋白(Ficolin)-2、FAM3C、纖維膠凝蛋白-3、FAM3D、FITC、成纖維細胞活化蛋白 a /FAP、FKBP38、Fas/TNFRSF6、Flap、Fas 配體 /TNFSF6、FLIP、FATP1、FLRG、FATP4、FLRTl、FATP5、FLRT2、Fe yRI/CD64、FLRT3、Fc yRIIB/CD32b、Flt_3、Fc yRIIC/CD32c、Flt_3配體、Fe y RIIA/CD32a、卵泡抑素(Follistatin)、Fe y RII I/CD 16、卵泡抑素樣1、FcRHl/IRTA5、FosB/G0S3、FcRH2/IRTA4、FoxD3、FcRH4/IRTAl、FoxJl、FcRH5/IRTA2、FoxP3、Fe 受體樣 3/CD 16-2、Fpg、FEN-1、FPRl、胎球蛋白(Fetuin) A、FPRLl、胎球蛋白 B、FPRL2、酸性 FGF、CX3CL1/ 趨化因子(Fractalkine)、喊性 FGF、卷曲蛋白(Frizzled)-1、FGF_3、卷曲蛋白-2、FGF-4、卷曲蛋白-3、FGF-5、卷曲蛋白-4、FGF-6、卷曲蛋白-5、FGF-8、卷曲蛋白-6、FGF-9、卷曲蛋白-7、FGF-10、卷曲蛋白-8、FGF-11、卷曲蛋白-9、FGF-12, Frk, FGF-13, sFRP-1、FGF-16、sFRP-2、FGF-17、sFRP-3、FGF-19、sFRP-4、FGF-20、弗林蛋白(Fur in)、FGF-21、FXR/NRlH4、FGF-22、Fyn、FGF-23、G9a/EHMT2、GFR a-3/⑶NF R a -3, GABA-A-R a UGFRa -4/⑶NF R a -4、GABA-A-R a 2、GITR/TNFRSF 18、GABA-A-R a 4、GITR 配體 /TNFSF 18、GABA-A-R a 5、GL1-1、GABA-A-R a 6,GL1-2,GABA-A-Rβ UGLP/EHMTUGABA-A-R β 2,GLP-1R、GABA-A-R β 3、胰高血糖素、GABA-A-R y 2、葡糖胺(N-乙?；?_6_硫酸酯酶/GNS、GABA-B-R2、GIuRl、GAD 1/GAD67、G1uR2/3、GAD2/GAD65、G1uR2、GADD45a 、GluR3、GADD45β 、Glutl、GADD45 y、Glut2、半乳糖凝集素(Galectin)-1、Glut3、半乳糖凝集素-2、Glut4、半乳糖凝集素-3、Glut5、半乳糖凝集素-3BP、谷氧還蛋白(Glutaredoxin)1、半乳糖凝集素-4、甘氨酸R、半乳糖凝集素_7、血型糖蛋白(Glycophorin) A、半乳糖凝集素-8、糖苷蛋白 (Glypican) 2、半乳糖凝集素_9、糖苷蛋白3、GalNAc4S_6ST、糖苷蛋白5、GAP-43、糖苷蛋白6、GAPDH、GM-CSF, Gasl、GM-CSF R α、Gas6、GMF-β、GASP-1/WFIKKNRP、gpl30、GASP-2/WFIKKN、糖原磷酸化酶 BB/GPBB、GATA-1、GPR 15、GATA-2、GPR39、GATA-3、GPV1、GATA-4、GR/NR3C1、GATA-5、Gr_l/Ly-6G、GATA-6、粒溶蛋白(Granulysin)、GBL、顆粒酶(Granzyme)A、GCNF/NR6A 1、顆粒酶8、0乂(^6/60 -2、顆粒酶0、6-05 、顆粒酶6、6-05 R、顆粒酶H、⑶F-1、GRASP、⑶F-3GRB2、⑶F-5、骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白(Greml in)、⑶F-6、GRO、⑶F-7、CXCLI/GRO α、⑶F-8、CXCL2/GR0 β、⑶F-9、CXCL3/GR0 Y、⑶F-11、生長激素、⑶F-15、生長激素R、⑶NF、GRP75/HSPA9B、GFAP, GSK-3 α / β、GF1-1, GSK-3 α , GFR α -1/⑶NF R α -1、GSK-3 β ,GFR α -2/⑶NF R α -2、EZFIT、Η2ΑΧ、組氨酸、Η60、ΗΜ74Α、HA1-1、HMGA2、ΗΑΙ-2、HMGBl、ΗΑΙ-2Α、TCF-2/HNF-1 β、ΗΑΙ-2Β、HNF-3 β /FoxA2、HANDl、HNF-4 α /NR2A1、HAPLNl、HNF-4Y/NR2A2、氣道胰蛋白酶樣蛋白酶/HAT、H0-1/HM0X1/HSP32、HB-EGF, Η0-2/ΗΜ0Χ2、CCL14a/HCC-l、HPRG,CCL14b/HCC_3、Hrk、CCL16/HCC-4、HRP-1、a HCG,HS6ST2、Hck、HSD-1、HCR/CRAM-A/B、HSD-2、HDGF, HSP 10/EPF、血色素、HSP27、赫帕索辛 Ofepassocin)、HSP60、HES-U HSP70、HES-4、HSP90、HGF, HTRA/ 蛋白酶 Do、HGF 活化因子、HTRA1/PRSS11、HGF R、HTRA2/0m1、HIF-1 a、HVEM/TNFRSF14、HIF_2 a、透明質(zhì)酸蛋白(Hyaluronan) ,HIN-1/ 分泌球蛋白(Secretoglobulin) 3A1、4-羥基壬烯酸、Hip、CCL1/1-309/TCA-3、IL-1O、cIAP (廣譜)、IL-1O R α、cIAP-l/HIAP-2、IL-1O 、cIAP-2/HIAP-l、IL-1U IBSP/ 唾液酸蛋白(Sialoprotein)I1、 EL-1lR α 、 ICAM-1/CD54、 IL-12、 ICAM-2/CD102、 IL-12/IL_23p40、ICAM-3/CD50、IL-12RP 1、ICAM_5、IL_12R β 2、ICAT、IL-13、ICOS、IL-13R a1、艾杜糖2-硫酸酯酶/E0S、IL_13R a 2、EFN、IL-15、IFN-a、IL_15R a , IFN- a 1、IL_16、IFN_ a 2、IL_17、IFN-a 4b、IL-17R、IFN-a A、IL-17RC、IFN-a B2、IL-17RD、IFN-a C、IL-17B、IFN-a D、IL-17B R、IFN-a F、IL-17C、IFN-a G、IL-17D、IFN-a H2、IL-17E、IFN-a1、IL-17F、IFN-aJl、IL-18/IL-1F4、IFN-a K、IL_18BPa、IFN-a WA、IL_18BPc、IFN-a / β Rl、IL-18BPd、IFN- a / β R2、IL-18R a /IL-1R5、IFN- β、IL-18R β /IL-1R7、IFN- y、IL-19、IFN-yR1、IL-20、IFN-yR2、IL-20R a、IFN-ω、IL-20R β、IgE、IL-21、IGFBP-1、IL-21R、IGFBP-2、IL-22、IGFBP-3、IL-22R、IGFBP-4、IL-22BP、IGFBP-5、IL-23、IGFBP-6、IL-23R、IGFBP-Ll、IL-24、IGFBP_rpl/IGFBP_7、IL-26/AK155、IGFBP-rPIO、IL-27、IGF-1, EL-28A、IGF-1 R、IL-28B、IGF-1I, IL-29/EFN- λ1、IGF-1I R、IL-31、IgG、EL_31RA、IgM、IL-32 a、IGSF2、IL-33、IGSF4A/SynCAM、ILT2/CD85J、IGSF4B、ILT3/CD85k、IGSF8、ILT4/CD85d、IgY、ILT5/CD85a、IkB-β、ILT6/CD85e、IKK α、豪豬蛋白(Indian Hedgehog)、IKK ε、INSRR、EKK Y、胰島素、IL-1 a /IL-1F1、胰島素 R/CD220、IL-1 β /IL-1F2、胰島素原、IL-1ra/IL-1F3、胰島素降解酶(Insulysin)/EDE, IL-1F5/FIL1 δ、整聯(lián)蛋白 a 2/CD49b、IL-1F6/FILl ε、整聯(lián)蛋白 a 3/CD49c、IL-1F7/FIL1 ζ、整聯(lián)蛋白 α 3 β l/VLA-3、IL-1F8/FIL1 η、整聯(lián)蛋白 a4/CD49d、IL-1F9/IL-1H1、整聯(lián)蛋白 a 5/CD49e、IL-1F10/IL-1HY2、整聯(lián)蛋白α 5β UIL-1 R1、整聯(lián)蛋白 a 6/CD49f、IL-1 RH、整聯(lián)蛋白 a 7、IL-1 R3/IL-1R AcP、整聯(lián)蛋白 a 9、IL-1R4/ST2、整聯(lián)蛋白 a E/CD103、IL-1 R6/IL-1R rp2、整聯(lián)蛋白 a L/CDlIa、IL-1R8、整聯(lián)蛋白 a L β 2.1L-1 R9、整聯(lián)蛋白 a M/CD I Ib、IL_2、整聯(lián)蛋白 αΜ β 2.1L-2Rα、整聯(lián)蛋白α V/CD51、IL_2R0、整聯(lián)蛋白aV P5、IL_3、整聯(lián)蛋白a V β 3.1L-3R a、整 聯(lián)蛋白a V 0 6、IL_3R β、整聯(lián)蛋白a XJCDl Ic、IL_4、整聯(lián)蛋白β 1/CD29、IL_4R、整聯(lián)蛋白3 2/CD18、IL-5、整聯(lián)蛋白β 3/CD61、IL-5R α、整聯(lián)蛋白P5、IL_6、整聯(lián)蛋白β 6、IL-6R、整聯(lián)蛋白 β 7、IL-7、CXCL10/EP-10/CRG-2、IL-7Ra /CD127、IRAK1、CXCR1/IL-8RA、IRAK4、CXCR2/IL-8RB、ERS-1, CXCL8/IL-8、Islet-1, IL-9、CXCLl 1/1-TAC、IL-9R、杰格德(Jagged)1、JAM-4/IGSF5、杰格德 2、JNK, JAM-A, JNK1/JNK2、JAM-B/VE-JAM、JNKl、JAM-C,JNK2、激肽原(Kininogen)、激肽釋放酶(Kallikrein) 3/PSA、高分子激肽原(Kininostatin)、激肽釋放酶4、KER/CD158、激肽釋放酶5、KER2DL1、激肽釋放酶6/甘油磷酸鈣(Neurosin)、KIR2DL3、激肽釋放酶7、KIR2DL4/CD158d、激肽釋放酶8/紐羅普星(Neuropsin)、KIR2DS4、激肽釋放酶9、KIR3DL1、血漿激肽釋放酶/KLKBl、KER3DL2、激肽釋放酶10、Kirrel2、激肽釋放酶11、KLF4、激肽釋放酶12、KLF5、激肽釋放酶13、KLF6、激肽釋放酶 14、Klotho、激肽釋放酶 15、Klotho β、KC> KOR> Keapl、克里曼(Kremen)-1、Kell、克里曼-2、KGF/FGF-7、LAG-3、LINGO-2、LAIR1、脂質(zhì)(Lipin) 2、LAIR2、脂籠蛋白(Lipocalin)-l、層黏連蛋白(Laminin) α 4、脂籠蛋白-2/NGAL、層黏連蛋白γ1、5_脂肪加氧酶(Lipoxygenase)、層黏連蛋白1、LXR a /NR1H3、層黏連蛋白S、LXR β /NR1H2、層黏連蛋白-1、Livin、層黏連蛋白-5、LEX、LAMP、LMIR1/CD300A、蘭格林(Langerin)、LMIR2/CD300c、LAR、LMIR3/CD300LF、拉特星(Latexin)、LMIR5/CD300LB、排卵蛋白(Layilin)、LMIR6/CD300LE、LBP、LM02、LDLR、L0X-1/SR-E1、LECT2、LRH-1/NR5A2、LEDGF, LRIGl、萊夫替(Lefty)、LRIG3、萊夫替-1、LRP-1> 萊夫替-A、LRP-6、豆莢蛋白(Legumain)、LSECtin/CLEC4G、瘦素、光蛋白聚糖(Lumican)、瘦素 R、CXCL15/ 郎金(Lungkine)、白三烯 B4、XCLl/淋巴細胞趨化蛋白(Lymphotactin)、白三烯B4R1、淋巴毒素、LEF、淋巴毒素β/TNFSF3、LIFR α、淋巴毒素 β R/TNFRSF3、LIGHT/TNFSF14、Lyn、立米汀(Limitin)、Lyp、UMPII/SR-B2、賴氨酰基氧化酶同源物2、LIN-28、LYVE-1、LINGO-1、α 2-巨球蛋白、CXCL9/MIG、MAD2L1、骨引導因子(Mimecan)、MAdCAM-1、脊椎蛋白(Mindin)、MafB、鹽皮質(zhì)激素 R/NR3C2、MafF、CCL3L1/MIP-1 α 同功異型物 LD78 β、MafG、CCL3/MIP-1 a、MafK、CCL4L1/LAG_1、MAG/ 西格樂(Siglec)-4a、CCL4/MIP-1 β、MANF、CCL15/MEP-1 δ、ΜΑΡ2、CCL9/10/MIP-1 y、MAPK,MIP-2、馬拉普星(Marapsin)/盤克里星(Pancreasin)、CCL19/MIP-3 β、MARCKS, CCL20/ΜΙΡ-3 α、MARCO、MIP-1、Mashl、MIP-11、軟骨基質(zhì)蛋白(Matr i I in) -2、MIP-111、軟骨基質(zhì)蛋白-3、MIS/AMH、軟骨基質(zhì)蛋白-4、MIS RH、蛋白切割酶(Matriptase)/ST 14、MIXL1、MBL、MKK3/MKK6、MBL-2、MKK3、黑素皮質(zhì)素(Melanocortin) 3R/MC3R、MKK4、MCAM/CD 146、MKK6、MCK-2、MKK7、Mc1-1、MKP-3、MCP-6、MLH-1、CCL2/MCP-1、MLK4 α、MCP-11、MMP, CCL8/MCP-2、MMP-1、CCL7/MCP-3/MARC、ΜΜΡ-2、CCL13/MCP-4、ΜΜΡ-3、CCL12/MCP-5、ΜΜΡ-7、M-CSF、ΜΜΡ-8、M-CSF 1 、麗卩-9、11型]\ ^、麗？-10、]\ -1、麗？-1 1、MD-2、MMP-12、CCL22/MDC、MMP-13、MDL_1/CLEC5A、MMP-14、MDM2、MMP-15、MEA-1、MMP-16/ΜΤ3-ΜΜΡ、MEKI/ΜΕΚ2、ΜΜΡ-24/ΜΤ5-ΜΜΡ、MEKl、ΜΜΡ-25/ΜΤ6-ΜΜΡ、ΜΕΚ2、ΜΜΡ-26、整合蛋白 β I 結(jié)合蛋白(Melusin)、MMR、MEPE、MOG、安眠蛋白(Μ印rin) α、CCL23/MPIF-1、安眠蛋白 β、M-Ras/R-Ras3、Mer、Mrel1、間皮素(Mesothelin)、MRPl鎳紋蛋白(Meteorin)、MSK1/MSK2、甲硫胺酸胺肽酶1、MSK1、甲硫胺酸胺肽酶、MSK2、甲硫胺酸胺肽酶 2、MSP、MFG-E8、MSP R/Ron、MFRP, Mug、MgcRacGAP, MULT-1,MGL2、木薩施(Musashi)-1、MGMT、木薩施-2、MIA、MuSK, MICA、MutY DNA 糖基化酶、MICB,MyD88、MICL/CLEC12A、髓過氧物酶、β2微球蛋白、心肌蛋白(Myocardin)、中期腎蛋白(Midkine)、肌纖蛋白(Myocilin)、MIF、肌紅蛋白(Myoglobin)、NAIP NGF1-B y /NR4A3>Nanog、NgR2/NgRHl、CXCL7/NAP-2、NgR3/NgRH2、Nbsl,巢蛋白(Nidogen)-1/ 內(nèi)動蛋白 (Entactin)、NCAM-1/CD56、巢蛋白-2、NCAM-L1、一氧化氮、黏連蛋白(Nectin)-1、硝基酪氨酸、黏連蛋白-2/CD1 12、NKG2A、黏連蛋白-3、NKG2C、黏連蛋白-4、NKG2D、再生蛋白(Neogenin)、NKp30、腦啡肽酶(N^rilysin) /CDIO、NKp44、腦啡肽酶-2/MMEL1/MMEL2、NKp46/NCRl、巢蛋白(Nestin)、NKp80/KLRFl、NET02、NKX2. 5、網(wǎng)蛋白-1、NMDA R、NRl 亞單位、網(wǎng)蛋白-2、NMDA R、NR2A亞單位、網(wǎng)蛋白-4、NMDA R、NR2B亞單位、網(wǎng)蛋白_Gla、NMDA R、 NR2C 亞單位、網(wǎng)蛋白-G2a、N-Me-6, 7-diOH_TIQ、神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白(Neuregulin)-1/NRG1、諾德爾(Nodal)、神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白-3/NRG3、頭蛋白(Noggin)、紐立汀(Neuritin)、勿動蛋白(Nogo)受體、NeuroDl、勿動蛋白-A、神經(jīng)束蛋白(Neurofascin)、ΝΟΜΟ、神經(jīng)原質(zhì)蛋白(Neurogenin)-1、Nope、神經(jīng)原質(zhì)蛋白(Neurogenin)-2、諾里蛋白(Norrin)、神經(jīng)原質(zhì)蛋白-3、eNOS、溶神經(jīng)蛋白(Neurolysin)、iNOS、后葉激素運載蛋白(Neurophysin) I1、nNOS、神經(jīng)纖毛蛋白(Neuropilin)-1、諾池(Notch)-1、神經(jīng)纖毛蛋白-2、諾池-2、紐羅普汀(Neuropoietin)、諾池-3、紐羅曲明(Neurotrimin)、諾池-4、神經(jīng)秩蛋白(Neurturin)、N0V/CCN3、NFAMl、NRAGE、NF-H、NrCAM, NFkBl、NRL、NFkB2、NT-3, NF-L, NT-4, NF-M、NTB-A/SLAMF6、NG2/MCSP、NTHl、NGF R/TNFRSF16、核干細胞因子(Nucleostemin)、β _NGF、Nurr_l/NR4A2,NGF1-B a /NR4A1、0AS2、食欲蛋白(Orexin) B、OBCAM、OSCAR、0CAM、0SF_2/骨膜蛋白(Periostin)、0CIL/CLEC2d、制癌蛋白(Oncostatin)M/OSM、0CILRP2/CLEC21、OSM 、Oct-3/4、骨活素(Osteoactivin)/GPNMB、OGG1、骨黏附蛋白聚糖(Osteoadherin)、01igl>01ig2、01ig3、骨I丐蛋白、寡聚物1、成骨細胞分化素(Osteocrin)、01ig2、骨橋蛋白(Osteopontin)、01ig3、骨保護蛋白 /TNFRSF1IB、少突膠質(zhì)細胞(Oligodendrocyte)標記物
01、0tx2、少突膠質(zhì)細胞標記物04、OV-6、OMgp, 0X40/TNFRSF4、眼科新糖蛋白(Opticin)、0X40 配體 /TNFSF4、食欲蛋白 A、0AS2、食欲蛋白 B、OBCAM、OSCAR、OCAM、0SF-2/ 骨膜蛋白、0CIL/CLEC2d、制癌蛋白 M/0SM、0CILRP2/CLEC21、0SM R β、0ct_3/4、骨活素/GPNMB、OGG1、骨黏附蛋白聚糖(Osteoprotegerin)、01181、01182、01183、骨|丐蛋白、01181、成骨細胞分化素、01ig2、骨橋蛋白、01ig3、骨保護蛋白/TNFRSFl IB、少突膠質(zhì)細胞標記物01、Otx2、少突膠質(zhì)細胞標記物04、OV-6、OMgp、0X40/TNFRSF4、眼科新糖蛋白(Opticin)、0X40配體/TNFSF4、食欲蛋白 A、RACKl、Ret、Radl、REV-ERBa /NRlDl、Radl7、REV-ERB β /NRlD2、Rad51、Rex-1、Rae-1、RGM-A、Rae-1 α、RGM-B, Rae-1 β、RGM-C, Rae-1 δ、Rheb, Rae-1 ε、核糖體蛋白 S6、Rae-1 y、RIPl、Raf-1、ROBOl、RAGE、R0B02、RalA/RalB、R0B03、RalA、R0B04、RalB、R0R/NR1F1-3 (廣譜)、RANK/TNFRSF1 1A、ROR a /NR1F1、CCL5/RANTES、ROR y/NR1F3,Rap I A/B, RTK 樣孤兒受體 l/R0Rl、RARa /NR1B1、RTK 樣孤兒受體 2/R0R2、RAR β /NR1B2、RP105、RAR Y NR1B3、RP A2、Ras、RSK (廣譜)、RBP4、RSK1/RSK2、RECK、RSKl、Reg 2/PAP、RSK2、Reg1、RSK3、Reg I1、RSK4、Reg II1、R_ 脊椎蛋白(Spondin) l、RegIlia、R-脊椎蛋白 2、Reg
IV、R-脊椎蛋白 3、松弛素(Relaxin)-1、RUNX1/CBFA2、松弛素 _2、RUNX2/CBFA1、松弛素-3、RUNX3/CBFA3、RELM α , RXR a /NR2B1、RELM β , RXR β /NR2B2、RELT/TNFRSF 19L、RXR γ /NR2B3、抵抗素(Resistin)、S100A10、SLITRK5、S100A8、SLP1、S100A9、SMAC/Diablo、S100B、Smadl> S100P、Smad2、SALLl > Smad3、δ-肌聚糖蛋白(Sarcoglycan)、Smad4、Sca_l/Ly6、Smad5、SCD-1、Smad7、SCF、Smad8、SCF R/c_kit、SMCl、SCGF、a -平滑肌肌動蛋白、SCL/Tall、SMUG1、SCP3/SYCP3、蝸牛蛋白(Snail)、CXCL12/SDF-1、鈉鈣交換蛋白1、SDNSF/MCFD2、索吉(Soggy)-U α-分泌酶、音猬蛋白(Sonic Hedgehog)、Y -分泌酶、SorCSl、β -分泌酶、SorCS3、E-選擇素、選蛋白(Sortilin)、L-選擇素、SOST, P-選擇素、S0X1、臂板蛋白(Semaphorin) 3A、S0X2、臂板蛋白3C、S0X3、臂板蛋白3E、S0X7、臂板蛋白3F、S0X9、臂板蛋白6A、S0X10、臂板蛋白6B、S0X 17、臂板蛋白6C、S0X21臂板蛋白6D、SPARC、臂板蛋白7A、SPARC樣1、分離酶、SP-D、絲氨酸/蘇胺酸磷酸酶受質(zhì)1、脊骨蛋白(Spinesin)、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白(Serpin)Al、F-脊椎蛋白、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白A3、SR-AI/MSR、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白A4/激肽釋放酶結(jié)合蛋白(Kallistatin)、Src、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白A5/蛋白C抑制劑、SREC-1/SR-F1、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白A8/血管緊張素原、SREC-11、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白B5、SSEA-1、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白Cl/抗凝血酶-1I1、SSEA-3、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白Dl/肝素輔因子I1、SSEA-4、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白E1/PA1-1、ST7/LRP12、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白E2、斯塔比林(Stabilin)-1、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白F1、斯塔比林-2、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白F2、斯I丐素(Stanniocalcin)1、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白G1/C1抑制劑、斯鈣素2、絲氨酸蛋白酶抑制劑蛋白12、STAT1、血清淀粉樣蛋白Al、STAT2、SF-1/NR5A1、STAT3、SGK、STAT4、SHBG, STAT5a/b、SHIP、STAT5a、SHP/NR0B2、STAT5b、SHP-1、STAT6、SHP-2、VE-抑制素(Statin)、SIGIRR、斯蒂拉(Stella)/Dppa3、西格樂-2/CD22、STRO-1、西格樂-3/CD33、物質(zhì)P、西格樂_5、磺酰胺酶/SGSH、西格樂_6、硫酸酯酶調(diào)節(jié)因子1/SUMF1、西格樂-7、硫酸酯酶調(diào)節(jié)因子2/SUMF2、西格樂-9、SUM01、西格樂-10、SUM02/3/4、西格樂-11、SUM03、西格樂-F、過氧化物歧化酶、SIGNRl/⑶209、過氧化物歧化酶-1/Cu-Zn SOD、SIGNR4、過氧化物歧化酶-2/Mn_S0D、SIRP β1、過氧化物歧化酶-3/EC-SOD, SK1、凋亡抑制蛋白(Survivin)、SLAM/CD150、突觸素(Synapsin)1、睡美人轉(zhuǎn)座酶(Sleeping BeautyTransposase)、多配體蛋白聚糖(Syndecan)-1/CD 138、Slit3、多配體蛋白聚糖-2、SLITRK1、多配體蛋白聚糖-3、S LITRK2、多配體蛋白聚糖-4、SLITRK4、TACI/TNFRSF 13B、TMEFF I/ 血栓調(diào)節(jié)蛋白(Tomoregulin)-1、TA02、TMEFF2、TAPPl、TNF-a /TNFSF
IA、CCL17/TARC、TNF-β/TNFSF1B、τ , TNF RI/TNFRSFIA、TC21/R-Ras2、TNF RII/TNFRSFIB、TCAM-1、TOR、TCCR/WSX-1、TP-1、TC-PTP, TP63/TP73L、TDG, TR、CCL25/TECK、TR a /NRlAl、生腱蛋白(Tenascin) C、TRP 1/NR1A2、生腱蛋白 R、TR2/NR2C1、TER-119、TR4/NR2C2、TERT、TRA-1-85、睪丸蛋白聚糖(Testican) 1/SP0CK1、TRADD、睪丸蛋白聚糖 2/SP0CK2、TRAF-1、睪丸蛋白聚糖 3/SP0CK3、TRAF-2、TFP1、TRAF-3、TFP1-2、TRAF-4、TGF-a、TRAF-6、TGF-β、TRAIL/TNFSF 10、TGF-β1、TRAIL Rl/TNFRSFIOA、LAP(TGF-β I)、TRAILR2/TNFRSF10B、潛伏 TGF-β1、TRAIL R3/TNFRSF 10C、TGF-β1. 2、TRAILR4/TNFRSF 10D、TGF-β 2、TRANCE/TNFSF 11、TGF- β 3、Tf R (轉(zhuǎn)鐵蛋白 R)、TGF- β 5、Apo-轉(zhuǎn)鐵蛋白、潛伏 TGF- β bp1、Holo-轉(zhuǎn)鐵蛋白、潛伏 TGF-β bp2、Trappin-2/Elaf in、潛伏 TGF-β bp4、TREM-U TGF-β RI/ALK-5、TREM-2、TGF-β RH、TREM-3、TGF-β RIIb、TREML1/TLT-1、TGF-β RII1、TRF-1、嗜熱菌蛋白酶、TRF-2、硫氧還蛋白-1、TRH-降解胞外酶/TRHDE、硫氧還蛋白-2、TRM5、硫氧還蛋白-80、三肽基-肽酶1、硫氧還蛋白樣5/TRP14、TrkA, THOPl、TrkB,血栓調(diào)節(jié)素(Thrombomodulin)/CD141> TrkC、血小板生成素(Thrombopoietin)、TR0P-2、血小板生成素R、肌鈣蛋白(Troponin)I肽3、凝血栓蛋白-1、肌鈣蛋白T、凝血栓蛋白-2、TROY/TNFRSF19、凝血栓蛋白-4、胰蛋白酶1、胸腺生成素(Thymopoietin)、胰蛋白酶2/PRSS2、胸腺趨化激素-1、胰蛋白酶3/PRSS3、Tie-Ι、類胰蛋白酶-5/Prss32、Tie_2、類胰蛋白酶a /TPSl、 Μ-Ι/ αΜ-Ι/HAVCR、類胰蛋白酶 P-l/MCPT-7、 Μ-2、類胰蛋白酶 β-2/TPSB2、 Μ-3、類 胰蛋白酶ε /BSSP-4、HM-4、類胰蛋白酶Y-l/TPSGl、HM-5、色胺酸羥化酶、HM_6、TSC22、TIMP-1, TSG、TIMP-2, TSG-6、 ΜΡ-3、TSK、 ΜΡ-4、TSLP, TL1A/TNFSF15、TSLP R、TLRl、TSP50、TLR2、β -1II 微管蛋白、TLR3、TWEAK/TNFSF12、TLR4、TWEAKR/TNFRSF 12、TLR5、Tyk2、TLR6、磷酸化酪氨酸、TLR9、酪氨酸羥化酶、TLX/NR2E1、酪氨酸磷酸酶受質(zhì)1、遍在蛋白(Ubiquitin)、UNC5H3、Ug1、UNC5H4、UGRPl、UNG、ULBP-1、uPA、ULBP-2、uPAR、ULBP-3、URB,UNC5H1、UVDE、UNC5H2、辣椒素(VaniIloid) Rl、VEGF R、VASA、VEGFRl/Flt-1、血管抑制蛋白(Vasohibin)、VEGF R2/KDR/Flk_l、伐索林(Vasorin)、VEGF R3/FU-4、血管新生抑制素、多能素(Versican)、Vav-l、VG5Q、VCAM-1、VHR、VDR/NR1I1、波形蛋白(Vimentin)、VEGF、玻璃連結(jié)蛋白、VEGF-B, VLDLR、VEGF-C, vWF_A2、VEGF-D、突觸核蛋白(Synuclein) - α、Ku70、WASP、Wnt-7b、WIF-1、ffnt-8a WISP-1/CCN4、Wnt_8b、WNKl、Wnt_9a、Wnt-1、Wnt_9b、Wnt_3a、Wnt-10a、Wnt-4、Wnt-10b、Wnt-5a、Wnt-11、Wnt_5b、wnvNS3、Wnt7a、XCRl、XPE/DDB1、XEDAR、XPE/DDB2、Xg、XPF, XIAP, XPG, XPA, XPV, XPD, XRCCl、Yes、YY1、EphA4。多種人類離子通道為備受關(guān)注的靶。非限制性實例包括5-羥色胺3受體亞單位、5_羥色胺3受體前體、5-羥色胺受體3亞單位C、AAD 14蛋白、乙酰膽堿受體蛋白、α亞單位前體、乙酰膽堿受體蛋白、β亞單位前體、乙酰膽堿受體蛋白、S亞單位前體、乙酰膽堿受體蛋白、ε亞單位前體、乙酰膽堿受體蛋白、Y亞單位前體、酸感應(yīng)離子通道3剪接變體b、酸感應(yīng)離子通道3剪接變體C、酸感應(yīng)離子通道4、ADP-核糖焦磷酸酶、線粒體前體、αΑ-電壓依賴性鈣通道、氨氯吡脒(Amiloride)敏感性陽離子通道1、神經(jīng)元氨氯吡脒敏感性陽離子通道2、神經(jīng)元氨氯吡脒敏感性陽離子通道4同功異型物2、氨氯吡脒敏感性鈉通道、氨氯吡脒敏感性鈉通道α-亞單位、氨氯吡脒敏感性鈉通道β-亞單位、氨氯吡脒敏感性鈉通道S-亞單位、氨氯吡脒敏感性鈉通道Y-亞單位、磷脂結(jié)合蛋白Α7、頂端樣蛋白(Apical-like protein)、ATP敏感性內(nèi)向性整流鉀通道1、ATP敏感性內(nèi)向性整流鉀通道10、ATP敏感性內(nèi)向性整流鉀通道11、ATP敏感性內(nèi)向性整流鉀通道14、ATP敏感性內(nèi)向性整流鉀通道15、ATP敏感性內(nèi)向性整流鉀通道8、鈣通道α 12. 2亞單位、鈣通道α 12. 2亞單位、韓通道a IE亞單位、δ 19 δ 40 δ 46剪接變體、韓活化鉀通道ct亞單位1、韓活化鉀通道β亞單位1、鈣活化鉀通道β亞單位2、鈣活化鉀通道β亞單位3、鈣依賴性氯通道-1、陽離子通道TRPM4B、CDNA FLJ90453fis、克隆NT2RP3001542 (高度類似于含鉀通道四聚化域6)、CDNA FLJ90663fis、克隆PLACE 1005031 (高度類似于氯化物細胞內(nèi)通道蛋白5)、CGMP門控陽離子通道β亞單位、氯通道蛋白、氯通道蛋白2、氯通道蛋白3、氯通道蛋白4、氯通道蛋白5、氯通道蛋白6、氯通道蛋白CIC-Ka、氯通道蛋白CIC-Kb、氯通道蛋白、骨骼肌、氯化物細胞內(nèi)通道6、氯化物細胞內(nèi)通道蛋白3、氯化物細胞內(nèi)通道蛋白4、氯化物細胞內(nèi)通道蛋白5、CHRNA3蛋白、Cl cn3e蛋白、CLCNKB蛋白、CNGA4蛋白、滯蛋白(Cul I in) -5、環(huán)狀GMP門控鉀通道、環(huán)狀核苷酸門控陽離子通道4、環(huán)狀核苷酸門控陽離子通道α 3、環(huán)狀核苷酸門控陽離子通道β 3、環(huán)狀核苷酸門控嗅覺通道、囊性纖維化跨膜傳導調(diào)節(jié)因子、細胞色素Β-245重鏈、敏感性L型二氫吡啶、鈣通道α-2/δ亞單位前體、含F(xiàn)XYD結(jié)構(gòu)域的離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子3前體、含F(xiàn)XYD結(jié)構(gòu)域的離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子5前體、含F(xiàn)XYD結(jié)構(gòu)域的離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子6前體、含F(xiàn)XYD結(jié)構(gòu)域的離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子7、含F(xiàn)XYD結(jié)構(gòu)域的離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子8前體、G蛋白活化內(nèi)向性整流鉀通道1、G蛋白活化內(nèi)向性整流鉀通道2、G蛋白活化內(nèi)向性整流鉀 通道3、G蛋白活化內(nèi)向性整流鉀通道4、Y-氨基丁酸受體α-l亞單位前體、Y-氨基丁酸受體α -2亞單位前體、Y -氨基丁酸受體α -3亞單位前體、Y -氨基丁酸受體α -4亞單位前體、Y-氨基丁酸受體α-5亞單位前體、Y-氨基丁酸受體α-6亞單位前體、γ-氨基丁酸受體β -1亞單位前體、Y -氨基丁酸受體β -2亞單位前體、Y -氨基丁酸受體β -3亞單位前體、Y-氨基丁酸受體S亞單位前體、Y-氨基丁酸受體ε亞單位前體、Y-氨基丁酸受體Y-1亞單位前體、Y-氨基丁酸受體Y _3亞單位前體、Y-氨基丁酸受體pi亞單位前體、Y -氨基丁酸受體P -1亞單位前體、Y -氨基丁酸受體P -2亞單位前體、Y -氨基丁酸受體Θ亞單位前體、GluR6紅藻氨酸受體、谷氨酸受體I前體、谷氨酸受體2前體、谷氨酸受體3前體、谷氨酸受體4前體、谷氨酸受體7、谷氨酸受體B、谷氨酸受體δ -1亞單位前體、谷氨酸受體、離子移變紅藻氨酸I前體、谷氨酸受體、離子移變紅藻氨酸2前體、谷氨酸受體、離子移變紅藻氨酸3前體、谷氨酸受體、離子移變紅藻氨酸4前體、谷氨酸受體、離子移變紅藻氨酸5前體、谷氨酸[NMDA]受體亞單位3Α前體、谷氨酸[NMDA]受體亞單位3Β前體、谷氨酸[NMDA]受體亞單位ε I前體、谷氨酸[NMDA]受體亞單位ε 2前體、谷氨酸[NMDA]受體亞單位ε 4前體、谷氨酸[NMDA]受體亞單位ζ I前體、甘氨酸受體α -1鏈前體、甘氨酸受體α-2鏈前體、甘氨酸受體α-3鏈前體、甘氨酸受體β鏈前體、H/ACA核糖核蛋白復合物亞單位1、高親和力免疫球蛋白ε受體β-亞單位、假想蛋白DKFZp31310334、假想蛋白DKFZp761M1724、假想蛋白FLJ12242、假想蛋白FLJ14389、假想蛋白FLJ14798、假想蛋白FLJ14995、假想蛋白FLJ16180、假想蛋白FLJ16802、假想蛋白FLJ32069、假想蛋白FLJ37401、假想蛋白FLJ38750、假想蛋白FLJ40162、假想蛋白FLJ41415、假想蛋白FLJ90576、假想蛋白FLJ90590、假想蛋白FLJ90622、假想蛋白KCTD15、假想蛋白MGC15619、I型肌醇1，4，5-三磷酸受體、2型肌醇1，4，5-三磷酸受體、3型肌醇1，4，5-三磷酸受體、中電導鈣活化鉀通道蛋白4、內(nèi)向性整流鉀通道13、內(nèi)向性整流鉀通道16、內(nèi)向性整流鉀通道4、內(nèi)向性整流K(+)通道陰性調(diào)節(jié)因子Kir2. 2v、紅藻氨酸受體亞單位KA2a、KCNH5蛋白、KCTD17蛋白、KCTD2蛋白、角蛋白形成細胞相關(guān)跨膜蛋白l、Kv通道相互作用蛋白4、梅拉斯達汀(Melastatin)1、膜蛋白 MLC1、MGC 15619 蛋白、黏脂蛋白(Mucolipin)-l、黏脂蛋白-2、黏脂蛋白-3、多重抗藥性相關(guān)蛋白4、N-甲基-D-天冬胺酸受體2C亞單位前體、NADPH氧化酶同源物l、Navl. 5、神經(jīng)元乙酰膽堿受體蛋白、α -10亞單位前體、神經(jīng)元乙酰膽堿受體蛋白、α-2亞單位前體、神經(jīng)元乙酰膽堿受體蛋白、α-3亞單位前體、神經(jīng)元乙酰膽堿受體蛋白、α-4亞單位前體、神經(jīng)元乙酰膽堿 受體蛋白、α-5亞單位前體、神經(jīng)元乙酰膽堿受體蛋白、α-6亞單位前體、神經(jīng)元乙酰膽堿受體蛋白、α-7亞單位前體、神經(jīng)元乙酰膽堿受體蛋白、α -9亞單位前體、神經(jīng)元乙酰膽堿受體蛋白、β -2亞單位前體、神經(jīng)元乙酰膽堿受體蛋白、β-3亞單位前體、神經(jīng)元乙酰膽堿受體蛋白、β_4亞單位前體、神經(jīng)元電壓依賴性鈣通道α 2D亞單位、Ρ2Χ嘌呤受體1、Ρ2Χ嘌呤受體2、Ρ2Χ嘌呤受體3、Ρ2Χ嘌呤受體4、Ρ2Χ嘌呤受體5、Ρ2Χ嘌呤受體6、Ρ2Χ嘌呤受體7、胰鉀通道TALK_Ib、胰鉀通道TALK_Ic、胰鉀通道TALK-1d、磷酸神經(jīng)膜前體、漿脂蛋白(Plasmolipin)、多囊性腎病2相關(guān)蛋白、多囊性腎病2樣I蛋白、多囊性腎病2樣2蛋白、多囊性腎病及卵膠相關(guān)蛋白前體的受體、多囊腎蛋白(Polycystin)-2、鉀通道調(diào)節(jié)因子、鉀通道亞家族K成員1、鉀通道亞家族K成員10、鉀通道亞家族K成員12、鉀通道亞家族K成員13、鉀通道亞家族K成員15、鉀通道亞家族K成員16、鉀通道亞家族K成員17、鉀通道亞家族K成員2、鉀通道亞家族K成員3、鉀通道亞家族K成員4、鉀通道亞家族K成員5、鉀通道亞家族K成員6、鉀通道亞家族K成員7、鉀通道亞家族K成員9、含鉀通道四聚化域3、含鉀通道四聚化域蛋白12、含鉀通道四聚化域蛋白14、含鉀通道四聚化域蛋白2、含鉀通道四聚化域蛋白4、含鉀通道四聚化域蛋白5、含鉀通道四聚化域10、含鉀通道四聚化域蛋白13、含鉀通道四聚化域1、鉀電壓門控通道亞家族A成員
1、鉀電壓門控通道亞家族A成員2、鉀電壓門控通道亞家族A成員4、鉀電壓門控通道亞家族A成員5、鉀電壓門控通道亞家族A成員6、鉀電壓門控通道亞家族B成員1、鉀電壓門控通道亞家族B成員2、鉀電壓門控通道亞家族C成員1、鉀電壓門控通道亞家族C成員3、鉀電壓門控通道亞家族C成員4、鉀電壓門控通道亞家族D成員1、鉀電壓門控通道亞家族D成員2、鉀電壓門控通道亞家族D成員3、鉀電壓門控通道亞家族E成員1、鉀電壓門控通道亞家族E成員2、鉀電壓門控通道亞家族E成員3、鉀電壓門控通道亞家族E成員4、鉀電壓門控通道亞家族F成員1、鉀電壓門控通道亞家族G成員1、鉀電壓門控通道亞家族G成員
2、鉀電壓門控通道亞家族G成員3、鉀電壓門控通道亞家族G成員4、鉀電壓門控通道亞家族H成員1、鉀電壓門控通道亞家族H成員2、鉀電壓門控通道亞家族H成員3、鉀電壓門控通道亞家族H成員4、鉀電壓門控通道亞家族H成員5、鉀電壓門控通道亞家族H成員6、鉀電壓門控通道亞家族H成員7、鉀電壓門控通道亞家族H成員8、鉀電壓門控通道亞家族KQT成員1、鉀電壓門控通道亞家族KQT成員2、鉀電壓門控通道亞家族KQT成員3、鉀電壓門控通道亞家族KQT成員4、鉀電壓門控通道亞家族KQT成員5、鉀電壓門控通道亞家族S成員1、鉀電壓門控通道亞家族S成員2、鉀電壓門控通道亞家族S成員3、鉀電壓門控通道亞家族V成員2、鉀電壓門控通道亞家族H成員7同功異型物2、鉀/鈉超極化活化環(huán)狀核苷酸門控通道1、鉀/鈉超極化活化環(huán)狀核苷酸門控通道2、鉀/鈉超極化活化環(huán)狀核苷酸門控通道3、鉀/鈉超極化活化環(huán)狀核苷酸門控通道4、可能的線粒體輸入受體亞單位T0M40同源物、嘌呤型受體P2X5同功異型物A、假定的4重復電壓門控離子通道、假定的氯通道蛋白7、假定的GluR6紅藻氨酸受體、假定的離子通道蛋白CATSPER2變體1、假定的離子通道蛋白CATSPER2變體2、假定的離子通道蛋白CATSPER2變體3、鉀通道蛋白變體I的假定調(diào)節(jié)因子、假定的酪氨酸-蛋白磷酸酶TPTE、雷諾定(Ryanodine)受體1、雷諾定受體2、雷諾定受體3、SH3KBP1結(jié)合蛋白1、短的暫時受體潛在通道1、短的暫時受體潛在通道4、短的暫時受體潛在通道5、短的暫時受體潛在通道6、短的暫時受體潛在通道7、小電導鈣活化鉀通道蛋白1、小電導鈣活化鉀通道蛋白2同功異型物b、小電導鈣活化鉀通道蛋白3同功異型物b、小電導鈣活化鉀通道SK2、小電導鈣活化鉀通道SK3、鈉通道、鈉通道β-1亞單位前體、II型鈉通道蛋白α亞單位、III型鈉通道蛋白α亞單位、IV型鈉通道蛋白α亞單位、IX型鈉通道蛋白α亞單位、V型鈉通道蛋白α亞單位、VII型鈉通道蛋白α亞單位、VIII型鈉通道蛋白α亞單位、X型鈉通道蛋白α亞單位、XI型鈉通道蛋白α亞單位、鈉及氯化物活化ATP敏感性鉀通道、轉(zhuǎn)運鈉/鉀的ATP酶Y鏈、精子相關(guān)陽離子通道1、精子相關(guān)陽離子通道2同功異型物4、突觸融合蛋白-1Β1、暫時受體潛在陽離子通道亞家族A成員1、暫時受體潛在陽離子通道亞家族M成員2、暫時受體潛在陽離子通道亞家族M成員3、暫時受體潛在陽離子通道亞家族M成員6、暫時受體潛在陽離子通道亞家族M成員7、暫時受體潛在陽離子通道亞家族V成員1、暫時受體潛在陽離子通道亞家族V成員2、暫時受體潛在陽離子通道亞家族V成員3、暫時受體潛在陽離子通道亞家族V成員4、暫時受體潛在陽離子 通道亞家族V成員5、暫時受體潛在陽離子通道亞家族V成員6、暫時受體潛在通道4 ε剪接變體、暫時受體潛在通道4 ζ剪接變體、暫時受體潛在通道7 Y剪接變體、腫瘤壞死因子、α誘導性蛋白1、內(nèi)皮細胞雙孔鈣通道蛋白2、VDAC4蛋白、鉀電壓門控通道Kv3. 2b、電壓門控鈉通道β IB亞單位、電壓依賴性陰離子通道、電壓依賴性陰離子通道2、電壓依賴性陰離子敏感性通道蛋白1、電壓依賴性陰離子敏感性通道蛋白2、電壓依賴性陰離子敏感性通道蛋白3、電壓依賴性鈣通道γ-l亞單位、電壓依賴性鈣通道Y _2亞單位、電壓依賴性鈣通道Y _3亞單位、電壓依賴性I丐通道Y-4亞單位、電壓依賴性I丐通道Y-5亞單位、電壓依賴性鈣通道Y _6亞單位、電壓依賴性鈣通道Y-7亞單位、電壓依賴性鈣通道Y-8亞單位、電壓依賴性L型鈣通道a -1C亞單位、電壓依賴性L型鈣通道a -1D亞單位、電壓依賴性L型鈣通道a -1S亞單位、電壓依賴性L型鈣通道β -1亞單位、電壓依賴性L型鈣通道β -2亞單位、電壓依賴性L型鈣通道β -3亞單位、電壓依賴性L型鈣通道β -4亞單位、電壓依賴性N型鈣通道a -1B亞單位、電壓依賴性P/Q型鈣通道a -1A亞單位、電壓依賴性R型鈣通道a -1E亞單位、電壓依賴性T型鈣通道a -1G亞單位、電壓依賴性T型鈣通道a -1H亞單位、電壓依賴性T型鈣通道α-1I亞單位、電壓門控L型鈣通道α-1亞單位、鉀電壓門控通道β-1亞單位、鉀電壓門控通道β _2亞單位、鉀電壓門控通道β-3亞單位、鉀電壓門控通道KCNA7。人電壓門控鈉通道的Navi, χ家族亦為特別有前途的靶。此家族包括例如通道Navl. 6 及 Navl. 8。在其它實施方式中，治療性蛋白質(zhì)可為G蛋白偶合受體(GPCR)。例示性GPCR包括但不限于A類視紫質(zhì)樣受體，諸如脊椎動物I型毒蕈堿乙酰膽堿、脊椎動物2型毒蕈堿乙酰膽堿、脊椎動物3型毒蕈堿乙酰膽堿、脊椎動物4型毒蕈堿乙酰膽堿；腎上腺素受體(I型α腎上腺素受體、2型α腎上腺素受體、I型β腎上腺素受體、2型β腎上腺素受體、3型β腎上腺素受體、脊椎動物I型多巴胺(Dopamine)、脊椎動物2型多巴胺、脊椎動物3型多巴胺、脊椎動物4型多巴胺、I型組胺、2型組胺、3型組胺、4型組胺、I型血清素、2型血清素、3型血清素、4型血清素、5型血清素、6型血清素、7型血清素、8型血清素、其它血清素類型、痕量胺、I型血管緊張素、2型血管緊張素、鈴蟾素(Bombesin)、緩激肽(Bradykinin)、C5a過敏毒素(anaphylatoxin)、Fmet-leu-phe、APJ樣、A型白介素_8、B型白介素_8、其它類型白介素-8、C-C趨化激素I型至I型I及其它類型、C-X-C趨化激素(2至6型及其它類型)、C-X3-C趨化激素、膽囊收縮素CCK、A型CCK、B型CCK、其它CCK、內(nèi)皮素、黑皮素(黑皮素細胞刺激激素、促腎上腺皮質(zhì)激素、黑皮素激素)、達菲抗原(Duffy antigen)、泌乳素釋放肽(GPRlO)、神經(jīng)肽Y (I至7型)、神經(jīng)肽Y、其它神經(jīng)肽Y、神經(jīng)調(diào)壓素(Neurotensin)、類鴉片(D、K、Μ、X型)、生長抑素(I至5型)、速激肽(受質(zhì)P(NKl)、受質(zhì)K(NK2)、神經(jīng)調(diào)節(jié)肽K(NK3)、速激肽樣1、速激肽樣2、血管加壓素/加壓催產(chǎn)素(I至2型)、加壓催產(chǎn)素、催產(chǎn)素/中催產(chǎn)素、海螺緊張素(Conopressin)、神經(jīng)節(jié)肽(Galanin)樣、蛋白酶活化樣、食欲蛋白(Orexin)及神經(jīng)肽FF. QRFP、趨化激素受體樣、神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U樣(神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U、PRXamide)、激素受體(卵泡刺激激素、促黃體激素_絨膜促性腺素激素、促甲狀腺素、I型促性腺激素、II型促性腺激素)、(視紫質(zhì))視蛋白、脊椎動物視紫質(zhì)(1-5型)、脊椎動物5型視紫質(zhì)、節(jié)肢動物視紫質(zhì)、節(jié)肢動物I型視紫質(zhì)、節(jié)肢動物2型視紫質(zhì)、節(jié)肢動物3型視紫質(zhì)、軟件動物視紫質(zhì)、視紫質(zhì)、嗅覺(嗅覺II家族I至13)、前列腺素(前列腺素E2亞型EP1、前列腺素E2/D2亞型EP2、前列腺素E2亞型EP3、前列腺素E2亞型EP4、前列腺素F2-α、前列環(huán)素)、血栓素、I至3型腺苷、嘌呤受體、嘌呤受體P2RY1-4，6，1 I GPR91、嘌呤受體 P2RY5, 8，9，10GPR35, 92，174、嘌呤受體 P2RY12-14GPR87 (UDP-葡萄糖)、類大麻酚、血小板活化因子、促性腺激素釋放激素、I型促性腺激素釋放激素、II型促性腺激素釋放激素、月旨動激素樣、庫拉左寧(Corazonin)、促甲狀腺素釋放激素及促泌素、促甲狀腺素釋放激素、生長激素促泌素、生長激素促泌素樣、蛻皮引發(fā)激素(ETHR)、褪黑素(Melatonin)、溶性鞘脂及LPA(EDG)、神經(jīng)鞘胺醇1-磷酸酯Edg-1、溶血磷脂酸Edg-2、神經(jīng)鞘胺醇1_磷酸酯Edg_3、溶血磷脂酸Edg-4、神經(jīng)鞘胺醇1-磷酸酯Edg-5、神經(jīng)鞘胺醇1-磷酸酯Edg-6、溶血磷脂酸Edg-7、神經(jīng)鞘胺醇1-磷酸酯Edg-8、其它Edg白三烯B4受體、白三烯B4受體BLTl、白三烯B4受體BLT2、A類孤兒/其它、假定的神經(jīng)傳遞素、SREB、Mas原癌基因及Mas相關(guān)(MRGs)、GPR45樣、半胱胺?；兹?、G蛋白偶連膽汁酸受體、游離脂肪酸受體(GP40、GP41、GP43)、B類分泌素樣、降鈣素、促皮質(zhì)素釋放因子、胃抑制、胰高血糖素、生長激素釋放激素、甲狀旁腺激素、PACAP、分泌素、血管活性腸多肽、蜘蛛毒素親和蛋白(Latrophilin)U型蜘蛛毒素親和蛋白、2型蜘蛛毒素親和蛋白、3型蜘蛛毒素親和蛋白、ETL受體、腦特異性血管生成抑制劑(BAI)、瑪士撒拉樣蛋白(Methuselah-like protein, MTH)、鈣黏素 EGF LAG (CELSR)、極大G蛋白偶合受體、C類促代謝型谷氨酸/信息素、I至III組促代謝型谷氨酸、鈣感應(yīng)樣、細胞外鈣感應(yīng)、信息素、其它鈣感應(yīng)樣、假定的信息素受體、GABA-B、GABA-B亞型1、GABA-B 亞型 2、GABA-B 樣、孤兒 GPRC5、孤兒 GPCR6、無七的新娘蛋白(Bride of sevenlessprotein, BOSS)、味覺受體(TlR)、D類真菌信息素、真菌信息素A-因子樣(STE2. STE3)、真菌信息素B樣(BAR、BBR, RCB、PRA)、E類cAMP受體、眼白化病蛋白、卷曲蛋白/斯木森德(Smoothened)家族、A組卷曲蛋白(Fz I及2及4及5及7_9)、B組卷曲蛋白(Fz 3及6)、C組卷曲蛋白(其它)、犁鼻受體、線蟲化學受體、昆蟲氣味受體及Z類古菌/細菌/真菌視蛋白。在其它實施方式中，本文所述的SABA融合物可包含任一以下活性多肽Β0Τ0Χ、Myobloc、Neurobloc、Dysport (或其它血清型的肉毒桿菌神經(jīng)毒素)、阿葡糖苷酶α、達托霉素(daptomycin)、ΥΗ-16、絨膜促性腺激素α、非格司亭(filgrastim)、西曲瑞克(cetrorelix)、白介素-2、阿地白介素(aldesleukin)、替西白介素(teceleukin)、地尼白介素(denileukin diftitox)、干擾素α-n3 (注射劑)、干擾素a-nl、DL-8234、干擾素、桑托里(Suntory) ( Y-1a)、干擾素 Y、胸腺素 α1、他索納明(tasonermin)、DigiFab、ViperaTAb、EchiTAb、CroFab、奈西立妝(nesiritide)、阿巴西普(abatacept)、阿法賽特(alefacept)、利比(Rebif)、艾托特明 a (eptotermin alfa)、特立帕月太(teriparatide)(骨質(zhì)疏松癥)、可注射降鈣素(骨病)、降鈣素(鼻部、骨質(zhì)疏松癥)、依那西普(etanercept)、血色素格魯他姆(glutamer) 250 (牛)、德羅崔庫金(drotrecogin) α、膠原蛋白酶、卡培立肽(carperitide)、重組人類表皮生長因子(外用凝膠，傷口愈合)、DWP-401、達貝泊汀 a (darbepoetin alfa)、依泊汀 ω (epoetin omega)、依泊汀 β、依泊汀α、地西盧定(desirudin)、來匹盧定(Iepirudin)、比伐盧定(bivalirudin)、諾那凝血素 a (nonacog alpha)、凝血因子IX粉針劑(Mononine)、依他凝血素 a (eptacogalfa)(活化)、重組因子VIII+VWF、濃縮的重組抗血友病因子(Recombinate)、重組因子VII1、因子VIII (重組)、血源性凝血因子(Alphanate)、辛凝血素ct (octocog alfa)、因子VII1、帕里弗明(palifermin)、印地激酶(Indikinase)、替奈普酶(tenecteplase)、阿替普酶(alteplase)、帕米普酶(pamiteplase)、瑞替普酶瑞替普酶(reteplase)、那替 普酶(nateplase)、孟替普酶(monteplase)、促卵泡素 a (follitropin alfa)、rFSH、hpFSH、米卡芬凈(micafungin)、非格司亭(peglgrastim)、來諾拉提(Ienograstim)^P托司亭(nartograstim)、舍莫瑞林(sermorelin)、胰高血糖素、艾塞那肽(exenatide)、普蘭林肽(pramlintide)、伊米苷酶(imiglucerase)、加硫酶(galsulfase)、留可曲平(Leucotropin)、莫拉司亭(molgramostim)、乙酸曲普瑞林(triptorelin acetate)、組胺瑞林(histrelin)(皮下植入，Hydron)、地洛瑞林(deslorelin)、組胺瑞林、那法瑞林(nafarelin)、亮丙瑞林(Ieuprolide)持續(xù)釋放儲存物(ATRIGEL)、亮丙瑞林植入物(DUROS)、戈舍瑞林(goserelin)、索瑪曲平(somatropin)、優(yōu)曲平(Eutropin)、KP-102 程序、索瑪曲平、索瑪曲平、美卡舍明(mecasermin)(生長失敗)、恩夫韋地(enfuvirtide)、0rg-33408、精胰島素(insulin glargine)、賴谷胰島素(insulinglulisine)、胰島素(吸入型);賴脯胰島素(insulin lispro)、地特胰島素(insulindetemir)、胰島素(經(jīng)頰)、RapidMist)、美卡舍明林菲培(mecasermin rinfabate)、阿那白滯素(anakinra)、西莫白介素(celmoleukin)、99mTc_阿西肽(99mTc_apcitide)注射劑、麥羅匹德(myelopid)、貝特絲域(Betaseron)、乙酸格拉默(glatiramer acetate)、格旁(Gepon)、沙格司亭(sargramostim)、奧普瑞白介素(oprelvekin)、人類白細胞衍生α干擾素、Bilive、胰島素(重組)、重組人類胰島素、門冬胰島素(insulin aspart)、美卡舍明、羅擾素-A(Roferon-A)、干擾素-ct 2、阿爾法弗隆(Alfaferone)、干擾素alfacon-1、干擾素α、阿溫耐克斯(Avonex)重組人類促黃體生成激素、阿法錯道酶a (dornasealfa)、曲弗明(trafermin)、齊考諾肽(ziconotide)、他替瑞林(taltirelin)、地博特明 a (diboterminalfa)、阿托西班(atosiban)、貝卡普勒明(becaplermin)、依替巴肽(eptifibatide)、扎馬拉(Zemaira)、CTC-1lK 夏伐克(Shanvac)-B、HPV 疫苗(四價)、N0V-002、奧曲妝(octreotide)、蘭瑞妝(Ianreotide)、安瑟斯替(ancestim)、無半乳糖甘酶(agalsidase) β、無半乳糖甘酶α、艾杜糖醒酸水解酶(Iaronidase)、醋肽銅(prezatide copper acetate)(外用凝膠)、拉布立酶(rasburicase)、蘭尼單抗(ranibizumab)、阿克替姆(Actimmune)、佩樂能(PEG-1ntron)、曲可明(Tricomin)、重組馬塵螨過敏去敏注射劑、重組人類甲狀旁腺激素(PTH) 1-84 (sc，骨質(zhì)疏松癥)、依泊汀δ、轉(zhuǎn)基因基因抗凝血酶II1、格蘭蒂曲平(Granditropin)、透明質(zhì)酸酶(Vitrase)、重組胰島素、干擾素-α ( 口服口含錠)、GEM-2IS、伐普肽(vapreotide)、艾杜硫酶(idursulfase)、奧馬曲拉(omapatrilat)、重組血清白蛋白、賽妥珠單抗(certolizumab pegol)、谷卡匹酶(glucarpidase)、人類重組Cl酯酶抑制劑(血管性水腫)、拉諾替普酶(Ianoteplase)、重組人類生長激素、恩夫韋地(enfuvirtide)(無針注射，Biojector 2000) > VGV-1、干擾素(α)、蘆西納坦(Iucinactant)、阿肽地爾(aviptadil)(吸入型，肺病)、艾替班特(icatibant)、埃可蘭肽(ecallantide)、奧米加南(omiganan)、奧羅格雷(Aurograb)、乙酸培西加南(pexiganan acetate)、AD1-PEG-20、LD1-200、地加瑞克(degarelix)、貝辛白介素(cintredekin besudotox)、FavIcU MDX-1379、ISAtx-247、利拉魯月太(Iiraglutide)、特立帕肽(骨質(zhì)疏松癥)、替法可近(tifacogin)、AA-4500、T4N5脂質(zhì)體 洗液、卡托馬單抗(catumaxomab)、DWP-413、ART-123、克里薩林(Chrysalin)、去氨普酶(desmoteplase)、安地普酶(amediplase)、絨促卵泡素 a (corifollitropin alpha)、TH-9507、替度魯妝(teduglutide)、戴麥德(Diamyd)、(DWP-412)、生長激素(持續(xù)釋放注射)、重組G-CSF、胰島素(吸入型，AIR)、胰島素(吸入型，Technosphere)、胰島素(吸入型，AERx)、RGN-303、DiaP印277、干擾素P(C型肝炎病毒感染(HCV))、干擾素α -n3 ( 口服)、貝拉他西普(belatac印t)、經(jīng)皮胰島素貼片、AMG-531、MBP-8298、西雷西普(Xerecept),奧培巴坎(opebacan)、AIDSVAX、GV-100K LymphoScan、豹娃酶(ranpirnase)、利普散(Lipoxysan)、盧舒普肽(Iusupultide)、MP52 ( β -磷酸三韓載體，骨再生)、黑色素瘤疫苗、西普樂克(sipuleucel)-Τ、CTP-37、印瑟吉(Insegia)、維特斯朋(vitespen)、人類凝血酶(冷凍，手術(shù)抽血)、凝血酶、TransMID、蛇毒纖溶酶(alfimeprase)、聚乙二醇化重組豬尿酸酶(Puricase)、特利加壓素(terlipressin)(靜脈內(nèi)，肝腎綜合征)、EUR-1008M、重組 FGF-1 (可注射，血管疾病)、BDM-E、羅替格普肽(rotigaptide)、ETC-216、P-113、MB1-594AN、耐久霉素(duramycin)(吸入型，囊性纖維化)、SCV-07、0P1-45、內(nèi)皮抑制素、血管抑制素、ABT-510、保曼布克(Bowman Birk)抑制劑濃縮物、XMP-629、99mTc_Hynic-磷脂結(jié)合蛋白V、卡哈拉德(kahalalide)F、CTCE-9908、替維瑞克(teverelix)(延伸釋放)、奧扎里克(ozarelix)、羅米德普(romidepsin)、BAY-50-4798、白介素-4、PRX-321、佩斯坎(Pepscan)、埃布他德金(iboctadekin)、rh乳鐵傳遞蛋白(rh Iactoferrin)、TRU-015, IL-21、ATN-161、西侖吉肽(cilengitide)、阿爾布芬(Albuferon)、比費西克斯(Biphasix)、IRX-2、ω 干擾素、PCK_3145、CAP_232、帕斯雷肽(pasireotide)、huN901_DMl、卵巢癌免疫治療疫苗、SB-249553、0ncovax-CL、0ncoVax-P、BLP-25、CerVax-16、多表位肽黑色素瘤疫苗(MART-1, gplOO,酪氨酸酶)、奈米非肽(nemifitide)、rAAT(吸入型)、rAAT (皮膚病)、CGRP(吸入型，哮喘)、(pegsunercept)、胸腺素 β_4、普利德普(plitidepsin)、GTP-200、雷莫拉寧(ramoplanin)、GRASPA, OB1-1、AC-100、鮭魚降鈣素(口服，eligen)、降隹丐素(口服，骨質(zhì)疏松癥)、艾沙瑞林(examorelin)、卡普瑞林(capromorelin)、卡德法(Cardeva)、維拉弗明(velafermin)、1311-TM-601、KK-220、TP-10、烏拉立妝(ularitide)、地來司他(depelestat)、赫馬肽(hematide)、克里薩林(表面)、rNAPc2、重組因子VIII (聚乙二醇化脂質(zhì)體)、bFGF、聚乙二醇化重組葡激酶變體、V-10153、SonoLysis Prolyse、NeuroVax, CZEN-002、胰島細胞新生療法、rGLP-1、BIM-51077, LY-548806、?？怂闺?exenatide)(控制釋放，Medisorb)、AVE-OO10> GA-GCB、阿伏瑞林(avorelin)、A0D-9604、乙酸利那洛肽(linaclotide acetate)、CETi_1、赫莫斯盤(Hemospan)、VAL(可注射)、快速作用胰島素(可注射，Viadel)、鼻內(nèi)胰島素、胰島素(吸入型)、胰島素(口服，eligen)、重組甲硫胺?；祟愂菟?、皮崔金拉(pitrakinra)(皮下注射,eczema)、皮崔金拉(吸入型干粉，哮喘)、木替金(Multikine)、RG-1068、MM-093、NB1-6024、AT-001、PI_0824、0rg-39141、CpnlO (自體免疫疾病/炎癥) 、ta乳鐵傳遞蛋白(talactoferrin)(表面)、rEV-131 (眼用)、rEV-131 (呼吸道疾病)、口服重組人類胰島素(糖尿病)、RP1-78M、奧普瑞白介素(口服)、CYT-99007CTLA4-1g、DTY-OOU (valategrast)、干擾素 α -n3(表面)、IRX-3、RDP-58、濤弗隆(Tauferon)、膽汁鹽刺激性脂肪酶、梅里斯普酶(Merispase)、堿性磷酸酶、EP-2104R、美拉諾坦(Melanotan)-11、布雷默浪丹(bremelanotide)、ATL-104、重組人微纖維蛋白溶酶(recombinant human microplasmin)、AX-200、SEMAX> ACV-1> Xen-2174、CJC-1008、強啡肽(dynorphin)A、S1-6603, LAB GHRH、AER-002、BGC-728、瘧疾疫苗(病毒顆粒，PeviPR0)、ALTU-135、細小病毒B 19疫苗、流感疫苗(重組神經(jīng)胺糖酸苷酶)、瘧疾/HBV疫苗、炭疽病疫苗、Vacc-5q、Vacc_4x、HIV疫苗(口服)、HPV疫苗、Tat類毒素、YSPSL、CHS-13340、PTH (1-34)脂質(zhì)粒乳膏(Novasome)、奧斯布爾(Ostabolin)-C、PTH 類似物(表面，牛皮癬)、MBR1-93. 02、MTB72F 疫苗(肺結(jié)核)、MVA_Ag85A 疫苗(肺結(jié)核)、FAR-404、BA-210、重組噬菌體 FlV 疫苗、AG-702、OxSODrol, rBetVl、Der-pl/Der-p2/Der_p7 過敏靶向性疫苗(塵螨過敏)、PRl肽抗原(白血病)、突變ras疫苗、HPV-16E7脂肽疫苗、迷路疫苗(腺癌)、CML疫苗、WTl-肽疫苗(癌癥)、IDD-5、CDX-110、朋曲斯(Pentrys)、諾雷林(Norelin)、CytoFab> P-9808、VT-111、艾羅卡妝(icrocaptide)、替柏明(telbermin)(皮膚病，糖尿病足部潰瘍)、蘆平曲韋(rupintrivir)、雷替庫羅(reticulose)、rGRF、P1A、α -半乳糖苷酶 A、ACE-OlU ALTU-140, CGX-1160、血管緊張素治療疫苗、D-4F、ETC-642、APP-018、rhMBL、SCV-07( 口服，肺結(jié)核)、DRF_7295、ABT_828、ErbB2 特異性免疫毒素(抗癌劑)、DT388IL-3、TST-10088、PR0-1762、庫姆波托(Comboto χ)、縮膽囊肽-B/ 胃泌素-受體結(jié)合妝、I I lln-hEGF、ΑΕ-37、曲妥珠單抗(trastuzumab)-DMl、拮抗劑 G、IL_12(重組)、PM-02734、MP-321、rhIGF-BP3、BLX-883、CUV-1647(表面)、基于 L-19 的放射免疫治療劑(癌癥)、Re-188-P-2045、AMG-386、DC/I540/KLH 疫苗(癌癥)、VX-OOU AVE-9633、AC-9301、NY-ESO-1疫苗(肽)、NA17. A2肽、黑色素瘤疫苗(脈沖抗原治療劑)、前列腺癌疫苗、CBP-501、重組人類乳鐵傳遞蛋白(干眼病)、FX-06、AP-214、WAP-8294A2(可注射)、ACP-HIP, SUN-11031、肽 YY[3-36](肥胖，鼻內(nèi))、FGLL,阿塞西普(atacicept)、BR3_Fc、BN-003、BA-058、人類甲狀旁腺激素1-34(鼻內(nèi)，骨質(zhì)疏松癥)、F-18-CCR1、AT-1001 (乳糜瀉/糖尿病)、JPD-003、PTH(7-34)脂質(zhì)粒乳膏(Novasome)、耐久霉素(眼用，干眼病)、CAB-2、CTCE-0214、糖聚乙二醇化紅細胞生成素、EPO-Fc, CNTO-528、AMG-114, JR-013、因子 XII1、氨基康定(aminocandin)、PN-951、716155、SUN-E7001、TH-0318、BAY-73-7977、替維瑞克(立即釋放)、EP-51216、hGH(控制釋放，Biosphere)、OGP-1> (sifuvirtide)、TV-4710、ALG-889、0rg-41259、rhCCI0、F-991、胸腺五肽(thymopentin)(肺病)、r(m)CRP、肝選擇性胰島素、蘇巴林(subalin)、L 19-1L-2融合肽、內(nèi)生多肽(elafin)、NMK-150、ALTU-139、EN-122004、rhTP0、血小板生成素受體促效劑(血小板減少癥)、AL-108、AL_208、神經(jīng)生長因子拮抗劑(疼痛)、SLV-317、CGX-1007、INN0-105、口服特立帕肽(eligen)、GEM-OSl, AC-162352、PRX-302、LFn_p24 融合物疫苗(Therapore)、EP-1043、肺炎鏈球菌(S pneumoniae)兒科疫苗、_疾疫苗、腦膜炎奈瑟菌(Neisseriameningitidis)B類疫苗、新生兒B類鏈球菌疫苗)、炭疽熱疫苗、HCV疫苗(gpEl+gpE2+MF-59)、中耳炎療法、HCV疫苗(核心抗原 +ISCOMATRIX) ,hPTH(l-34)(經(jīng)皮，ViaDerm)、7689了4、SYN-101、PGN_0052、阿維庫明(aviscumine)、BIM-23190、肺結(jié)核疫苗、多表位酪氨酸酶肽、癌癥疫苗、恩卡斯替母(enkastim)、APC-8024、G1-5005、ACC-001、TTS_CD3、血管靶向性 TNF(實體腫瘤)、去氨加壓素(desmopressin)(經(jīng)頰控制釋放)、奧那西普(onercept)、TP-9201。在其它例示性實施方式中，SABA與選自(但不限于)以下的部分融合FGF21(成纖維細胞生長因子21)、GLP-1 (胰高血糖素樣肽I)、EXendin4、胰島素、胰島素受體肽、GIP (葡萄糖依賴性促胰島素多肽)、脂連蛋白、IL-1Ra(白介素I受體拮抗劑)、VIP (血管活性腸肽)、PACAP(垂體腺苷酸環(huán)化酶激活多肽)、瘦素、INGAP(胰島新生相關(guān)蛋白)、BMP-9 (骨形態(tài)發(fā)生蛋白_9)、胰淀素、PYY3-36 (肽YY3_36)、ΡΡ (胰多肽)、IL-21 (白介素21)、菌絲霉素、PRGN (顆粒蛋白前體)、Atstrrin、IFN (干擾素)、Apelin及骨鈣蛋白(OCN)。 在其它例示性實施方式中，SABA與一或多個其它uiFr^結(jié)構(gòu)域融合。舉例而言，SABA可與一個、兩個、三個、四個或四個以上其它uiFr^結(jié)構(gòu)域融合。此類其它kiFM結(jié)構(gòu)域可結(jié)合除血清白蛋白外的相同或不同靶。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-Y融合物AABA-X1-Y或Y-X1-SABA,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ ID N0:65-88、216-221或397中的任一者)，且Y為如本文所述的治療性部分。在某些實施方式中，本申請案提供一種可由下式表示的SABA-Y融合物SABA-X1-Cys-X2-Y或Y-X1-Cys-X2-SABA,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸，X1S 4任選的多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ ID NO:65-88,216-221或397中的任一者)，Cys為半胱氨酸殘基，X2為化學衍生的間隔物(適合間隔物的實例展示于表I中)，且Y為如本文所述的治療性部分。在例示性實施方式中，該化學衍生的間隔物含有馬來酰亞胺部分，其可用于藉由如本文進一步所述的邁克爾加成(Michaeladdition)使治療性部分綴合于SABA多肽的C端Cys，或使SABA多肽綴合于治療性部分的C 端 Cys。在其它方面中，SABA可結(jié)合于兩個或兩個以上治療性部分。舉例而言，兩個部分可以以多種排列結(jié)合SABA，例如下述自融合物序列的N端至C端X-Y-SABA、X-SABA-Y或SABA-X-Y，其中X及Y表示兩個不同治療性部分。該兩個不同治療性部分可選自本文公開的任一部分。1. FGF21成纖維細胞生長因子21(FGF21)為信號傳導蛋白質(zhì)的FGF家族的成員。這些蛋白質(zhì)藉由結(jié)合并活化FGF受體(細胞表面酪氨酸激酶家族的成員)來起作用。FGF21為該家族的非典型成員，因為其不結(jié)合肝素，而需要β-klotho (其為單向跨膜蛋白)作為活性的共受體。這些受體具有廣泛組織的分布，但β-klotho表達局限于某些組織(肝臟、脂肪及胰臟)，并且恰恰是β -klotho的組織選擇性表達賦予FGF21靶特異性的。體外研究表明FGFRlc (FGFR1的一種同型物)及FGFR4分別為白脂肪組織及肝臟中的優(yōu)選受體。FGF21充當代謝調(diào)節(jié)因子，且FGF21的失調(diào)可導致各種代謝病癥。FGF21藉由誘導ERK磷酸化及GLUTl表達而增加3T3-L1脂肪細胞及原代人類脂肪細胞培養(yǎng)物的葡萄糖攝取。在INS-1E細胞及分離的胰島中，F(xiàn)GF21誘導ERK及AKT磷酸化。在肝細胞系中，F(xiàn)GF21刺激典型FGF信號傳導(ERK磷酸化)且減少葡萄糖產(chǎn)生。如下文進一步所述，本文所述的SABA-FGF21融合物可用于治療或預防各種代謝疾病及病癥。在一個方面，本申請?zhí)峁┡c血清白蛋白結(jié)合性uiFr^ (亦即SABA)融合的FGF21及此類融合物(本文通常稱為FGF21-SABA融合物)的用途。FGF21-SABA融合物指具有各種排列的融合物，包括例如SABA-FGF21、FGF21-SABA、FGF21-SABA-FGF21等。某些例示性構(gòu)建體展示于表2中。然而，應(yīng)了解如本文所揭示的FGF21包括保留FGF21功能活性的FGF21變體、截短形式及任何經(jīng)修飾形式。亦即，如本文所述的FGF-21亦包括經(jīng)修飾形式,包括某些氨基酸已缺失或經(jīng)取代的片段以及變體，及一或多個氨基酸已變?yōu)榻?jīng)修飾的氨基酸或非天然存在的氨基酸的修飾，及諸如糖基化的修飾，只要經(jīng)修飾形式保留FGF-21的生物活性 即可。舉例而言，野生型全長FGF21如SEQ ID N0:117所示。表2中所呈現(xiàn)的所有FGF21變體均含有SEQ ID NO: 118所示的核心FGF21序列。各種N端序列(諸如SEQ ID NO: 119-124中的任一者所示的那些序列)可添加至核心FGF21序列(SEQ ID NO: 118)的N端并保留功能活性。另外，His6標簽可添加至N端(例如SEQ ID NO: 128-131)。核心FGF21序列缺乏C端絲氨酸，其可或可不添加至核心序列的C端而不影響其活性。此外，F(xiàn)GF21與SABA融合分子可以按照FGF21-SABA或SABA-FGF21的次序(包括如本文所述且現(xiàn)有技術(shù)中已知的任何任選的末端延伸及接頭序列)連接而不影響FGF21功能活性(參見例如實例B6)。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-FGF21融合物，其中該FGF21部分包含 SEQ ID NO: 117-118 或 125-131 的序列，或與 SEQ ID NO: 117-118 或 125-131 中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的序列。在某些實施方式中，SABA-FGF21融合物包含SEQ ID NO: 132-174中的任一者的序列，或與SEQ ID NO: 132-174中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-FGF21融合物SABA-XrFGF21或FgFZ1-X1-SABA,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQID N0:65-88、216-221或397中的任一者)，且FGF21為如本文所述的FGF21肽。2.胰島素在另一方面中，本發(fā)明描述SABA與胰島素融合分子。胰島素為調(diào)節(jié)體內(nèi)能量及葡萄糖代謝的激素。這種多肽由胰β_胰島細胞分泌于血液中，在血液中該多肽刺激肝臟、肌肉及脂肪細胞自血液攝取葡萄糖并促進糖原生成及脂質(zhì)生成。胰島素分泌及/或活動中的任何步驟失靈可導致許多病癥，包括氧利用、脂肪生成、糖原生成、脂質(zhì)生成、葡萄糖攝取、蛋白質(zhì)合成、熱生成及維持基礎(chǔ)代謝率的失調(diào)。此失靈導致包括但不限于下述的疾病及/或病癥高胰島素血癥、胰島素抗性、胰島素缺乏、高血糖癥、高脂質(zhì)血癥、高酮血癥、糖尿病及糖尿病性腎病。因此，本文所述的SABA-胰島素融合多肽可適用于治療患有此類疾病及/或病癥的受試者。
在例示性實施方式中，可應(yīng)用于本發(fā)明的胰島素部分包括天然存在的胰島素、生物合成胰島素、胰島素衍生物及類似物。胰島素類似物為天然存在的胰島素蛋白質(zhì)(諸如人類胰島素或動物形式的胰島素)的類似物，其中已經(jīng)取代、添加及/或移除了至少一個氨基酸殘基。此類氨基酸可為合成或經(jīng)修飾氨基酸。胰島素衍生物為天然存在的胰島素或胰島素類似物的衍生物，其已經(jīng)過了化學修飾，例如藉由向一個或多個氨基酸添加一個或多個特定化學基團來化學修飾。例示性胰島素類似物描述于美國專利第7，476，652號中，該案以全文引用的方式并入本文中。3.胰島素受體肽在一個方面，本發(fā)明描述SABA與胰島素受體肽的融合分子。在某些實施方式中，該胰島素受體肽包含胰島素受體的氨基酸687至710 (KTDSQILKELEESSFRKTFEDYLH ；SEQ IDNO: 175)。胰島素受體是一種由激素胰島素活化的跨膜受體酪氨酸激酶。胰島素受體活化引發(fā)信號級聯(lián)反應(yīng)，最終使得葡萄糖轉(zhuǎn)運體轉(zhuǎn)運至細胞表面，以使得細胞可自血液攝取葡萄糖。葡萄糖攝取主要在脂肪細胞及肌細胞中進行。胰島素受體的功能障礙與胰島素不敏感性或抗性相關(guān)，其通常導致2型糖尿病及當細胞無法吸收葡萄糖時所引起的其它并發(fā) 癥。與胰島素受體基因突變相關(guān)的其它病癥包括多諾霍綜合征(Donohue Syndrome)及羅布森-曼登赫爾綜合征(Rabson-MendenhallSyndrome)。因此,本文所述的SABA-胰島素受體肽融合物的例示性用途可包括治療患有如2型糖尿病或與細胞葡萄糖攝取不足相關(guān)的其它病癥、多諾霍綜合征及羅布森-曼登赫爾綜合征的病癥的受試者。4. BMP-9在某些方面中，本發(fā)明描述SABA與BMP-9融合分子。各種BMP-9組合物描述于美國專利第5，661，007號及第6，287，816號中，此類專利以全文引用的方式并入本文中。骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)屬于生長因子及細胞激素的TGF-β家族。BMP誘導骨及軟骨形成并介導許多其它組織中的形態(tài)生成變化。BMP信號傳導為胚胎發(fā)育以及出生后組織的生長及維持所必需的。信號傳導路徑亦與從脊椎病癥至癌癥乃至反流誘發(fā)性食管炎等疾病相關(guān)。已發(fā)現(xiàn)超過二十種BMP。在這些分子中，BMP-9主要在非實質(zhì)性肝細胞中表達，且與肝細胞的增殖及功能(尤其肝葡萄糖產(chǎn)生)有關(guān)。BMP-9還似乎在癌細胞凋亡、內(nèi)皮細胞中的信號傳導、骨生成、軟骨生成、認知等中起其它作用。因此，本文所述的SABA-BMP-9融合多肽可適用于治療各種疾病及病癥，例如治療各種類型的傷口及展現(xiàn)肝臟退化的疾病，以及治療包括骨及/或軟骨缺損、牙周病及各種癌癥的其它疾病及/或病癥。5.胰淀素(amylin)在一些方面中，本發(fā)明描述SABA與胰淀素的融合分子。胰淀素(或胰島淀粉樣蛋白多肽，IAPP)為由胰β細胞分泌的具有37個氨基酸的小肽激素。胰淀素與胰島素同時分泌，且被認為在控制胰島素分泌、葡萄糖穩(wěn)態(tài)、胃排空及向腦部傳達飽腹感信號中起作用。胰淀素形成原纖維，后者與胰β細胞的凋亡性細胞死亡有關(guān)。與此發(fā)現(xiàn)一致的是，胰淀素通常見于罹患2型糖尿病或具有胰島素瘤(一種神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤)的患者的胰島中。胰淀素可用作糖尿病患者的治療劑。胰淀素肽的制備描述于美國專利第5，367，052號中，該申請全文以引用的方式并入本文中。類似地，美國專利第6，610，824號及第7，271，238號(全文以引用的方式并入本文中)描述藉由Asn、Ser及/或Thr殘基的糖基化所形成的胰淀素的激動劑類似物，其可用于治療或預防低血糖狀況。因此，本文所述的SABA-胰淀素融合多肽可例如適用于治療患有低血糖癥、肥胖、糖尿病、飲食障礙、胰島素抗性綜合征及心血管疾病的受試者。SABA-胰淀素融合物的制備描述于實施例中。在一個方面，本申請?zhí)峁┡c血清白蛋白結(jié)合性1°Fn3(亦即SABA)融合的胰淀素及此類融合物(本文中統(tǒng)稱為SABA-胰淀素融合物)的用途。SABA-胰淀素融合物指具有各種排列的融合物，包括例如SABA-胰淀素及胰淀素-SABA。在例示性實施方式中，SABA-胰淀素融合物是如此排列的，以使得胰淀素肽的C端游離，這允許羧基端進行酰胺化。某些例示性SABA-胰淀素融合構(gòu)建體展示于表2中。然而，應(yīng)了解如本文所公開的胰淀素包括保留胰淀素功能活性的胰淀素變體、截短形式及任何經(jīng)修飾形式。亦即，如本文所述的胰淀素亦包括經(jīng)修飾形式，包括某些氨基酸已缺失或經(jīng)取代的片段以及變體，及一或多個氨基酸已變?yōu)榻?jīng)修飾的氨基酸或非天然存在的氨基酸的修飾，及諸如糖基化的修飾，只要經(jīng)修飾形式保留胰淀素的生物活性即可。例示性胰淀素序列以SEQ ID N0:296-303呈現(xiàn)于表2中。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-胰淀素融合物，其中該胰淀素部分包含SEQ ID N0:296-303中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:296-303中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的序列。在某些實施方式中，SABA-胰 淀素融合物包含SEQ IDN0:304-328中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:304-328中的任一者具有至少 70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-胰淀素融合物SABA-X1-胰淀素，其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ ID N0:65-88、216-221或397中的任一者)，且胰淀素為如本文所述的胰淀素肽。胰淀素肽優(yōu)選在C端經(jīng)酰胺化。胰淀素肽可另外包含Cys1’7 或 Cys2’7 二硫鍵。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-胰淀素融合物SABA-X1-Cys-X2-胰淀素，其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為任選的多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ IDN0:65-88,215-221或397中的任一者)，Cys為半胱氨酸殘基，X2為化學衍生的間隔物(適合間隔物的實例展示于表I中)，且胰淀素為如本文所述的胰淀素肽。胰淀素肽優(yōu)選在C端經(jīng)酰胺化。胰淀素肽可另外包含Cys1'7或Cys2，7 二硫鍵。在例示性實施方式中，化學衍生的間隔物含有馬來酰亞胺部分，其可用于藉由如本文進一步所述的邁克爾加成使胰淀素肽結(jié)合于SABA多肽的C端Cys。6. PYY3-S6在其它方面中，本發(fā)明描述SABA與PYY融合分子。肽YY (亦稱為PYY、肽酪氨酸酪氨酸，或胰肽YY)為由回腸及結(jié)腸中的細胞響應(yīng)進食而釋放的具有36個氨基酸的蛋白質(zhì)。PYY分泌于胰臟中且通過抑制胰臟分泌(例如胰島素)來幫助控制能量穩(wěn)態(tài)，由此使得血糖水平提高并傳導需要減少進食的信號。存在PYY的兩種主要形式，即全長形式(1-36)及截短形式(3-36)。循環(huán)PYY免疫反應(yīng)性的最常見形式為PYY3_36。PYY3_3f^#Y2受體的親和力高于PYY1-P另外，ΡΥΥ13-36對Υ2受體具有類似高效力，從而表明殘基4-12對于此受體并不重要(K. McCrea 等人，2-36 [Κ4, RYYSA (19-23) ] PP a novelY5_receptor preferringligand with strong stimulatory effect on food intake, Regul. Pept 87 1-3(2000)，第47-58頁)。此外，已描述基于PYY (22-36)及(25-36)的結(jié)構(gòu)的更短的PYY片段類似物，其顯示相對于其它NPY受體(Y1、Y4及Υ5)的Υ2選擇性。參見例如美國專利第5，604, 203號及第6，046，167號，這些專利以引用的方式并入本文中。PYY肽及偶連于反應(yīng)性基團的功能衍生物描述于美國專利第7，601，691號中，該專利以引用的方式并入本文中。已發(fā)現(xiàn)PYY與許多生理活性有關(guān)，包括營養(yǎng)攝取、細胞增殖、脂肪分解及血管收縮。具體的，已顯示PYY3-36降低人類的食欲及食物攝取(參見例如Batterham等人，Nature418:656-654, 2002)。因此，本文所述的SABA-PYY融合多肽的例示性用途可包括治療肥胖、糖尿病、飲食障礙、胰島素抗性綜合征及心血管疾病。在一個方面，本申請?zhí)峁┡c血清白蛋白結(jié)合性1QFn3(亦即SABA)融合的PYY及此類融合物(本文通常稱為SABA-PYY融合物)的用途。SABA-PYY融合物指具有各種排列的融合物，包括例如SABA-PYY及PYY-SABA。在例示性實施方式中，SABA-PYY融合物具有如此的排列，使得PYY肽的C端游離，這允許羧基端進行酰胺化。某些例示性SABA-PYY融合構(gòu)建體展示于表2中。然而，應(yīng)了解如本文所公開的PYY包括保留PYY功能活性的PYY變體、截短形式及任何經(jīng)修飾形式。亦即，如本文所述的PYY亦包括經(jīng)修飾形式，包括某些氨基酸已缺失或經(jīng)取代的片段以及變體，及一或多個氨基酸已變?yōu)榻?jīng)修飾的氨基酸或非天然存在 的氨基酸的修飾，及諸如糖基化的修飾，只要經(jīng)修飾形式保留PYY的生物活性即可。例示性PYY序列以SEQ ID NO: 329-337及408-418呈現(xiàn)于表2中。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-PYY融合物，其中該PYY部分包含SEQ ID NO: 329-337 或 408-418 中的任一者的序列；與 SEQ ID NO: 329-337 或 408-418 中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的序列；具有SEQ IDNO:329-333 或 335-337 中的任一者的殘基 3-36、13_36、21-36、22-36、24_36 或 25-36 的序列；與具有 SEQ IDNO:329-333 或 335-337 中的任一者的殘基 3-36、13-36、21_36、22_36、24-36 或 25-36 的序列具有至少 70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一1注的序列；或具有V31L取代的任一上述序列。在某些實施方式中，SABA-PYY融合物包含SEQ IDNO:338-344中的任一者的序列，或與SEQ IDNO:338-344中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-PYY融合物SABA-X1-PYY,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ ID N0:65-88、216-221或397中的任一者)，且PYY為如本文所述的PYY肽。PYY肽優(yōu)選在C端經(jīng)酰胺化。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-PYY融合物SABA-X1-Cys-X2-PYY,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為任選的多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ IDN0:65-88,215-221或397中的任一者)，Cys為半胱氨酸殘基，X2為化學衍生的間隔物(適合間隔物的實例展示于表I中)，且PYY為如本文所述的PYY肽。PYY肽優(yōu)選在C端經(jīng)酰胺化。在例示性實施方式中，化學衍生的間隔物含有馬來酰亞胺部分，其可用于藉由如本文進一步所述的邁克爾加成使PYY肽結(jié)合于SABA多肽的C端Cys。7.胰多肽在一些方面中，本發(fā)明描述SABA與胰多肽融合分子。胰多肽(PP)為胰多肽激素家族的成員，該家族亦包括神經(jīng)肽Y (NPY)及肽YY (PYY)。PP為由胰多肽細胞響應(yīng)進食、運動及禁食而釋放的具有36個氨基酸的蛋白質(zhì)。PP見于胰臟、胃腸道及CNS中，在其中其影響膽囊收縮、胰臟分泌、腸運動以及諸如糖原分解及降低脂肪酸水平等代謝功能。PP亦與食物攝取、能量代謝及下視丘肽及胃內(nèi)激素的表達有關(guān)。另外，PP在與食物攝取增加相關(guān)的狀況中減少。PP亦可與腫瘤發(fā)生有關(guān)，諸如胰肽細胞的罕見惡性腫瘤。PP可投與患者，例如用來減少肝葡萄糖產(chǎn)生(美國專利第5，830，434號)。本文所公開的SABA-PYY融合多肽的例示性用途可包括治療肥胖、糖尿病、飲食障礙、胰島素抗性綜合征及心血管疾病。在一個方面，本申請?zhí)峁┡c血清白蛋白結(jié)合性1QFn3(亦即SABA)融合的PYY及此類融合物(本文統(tǒng)稱為SABA-PP融合物)的用途。SABA-PP融合物指具有各種排列的融合物，包括例如SABA-PP及PP-SABA。在例示性實施方式中，SABA-PP融合物具有這樣的排列，使得PP肽的C端游離，這允許羧基端進行酰胺化。某些例示性SABA-PP融合構(gòu)建體展示于表2中。然而，應(yīng)了解如本文所公開的PP包括保留PP功能活性的PP變體、截短形式及任何·經(jīng)修飾形式。亦即，如本文所述的PP亦包括經(jīng)修飾的形式，包括某些氨基酸已缺失或經(jīng)取代的片段以及變體，及一或多個氨基酸已變?yōu)榻?jīng)修飾的氨基酸或非天然存在的氨基酸的修飾，及諸如糖基化的修飾，只要經(jīng)修飾形式保留PP的生物活性即可。例示性PP序列以SEQID NO:345-357呈現(xiàn)于表2中。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-PP融合物，其中該PP部分包含SEQID NO: 345-357中的任一者的序列，或與SEQ ID NO: 345-357中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的序列。在某些實施方式中，SABA-PP融合物包含SEQ ID N0:358-364中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:358-364中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-PP融合物SABA-X1-PP,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ ID N0:65-88、216-221或397中的任一者)，且PP為如本文所述的PP肽。PP肽優(yōu)選在C端經(jīng)酰胺化。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-PP融合物SABA-X1-Cys-X2-PP,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為任選的多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ ID N0:65-88,215-221或397中的任一者)，Cys為半胱氨酸殘基，X2為化學衍生的間隔物(適合間隔物的實例展示于表I中)，且PP為如本文所述的PP肽。PP肽優(yōu)選在C端經(jīng)酰胺化。在例示性實施方式中，化學衍生的間隔物含有馬來酰亞胺部分，其可用于藉由如本文進一步所述的邁克爾加成使PP肽結(jié)合于SABA多肽的C端Cys。8.白介素 21 (IL-21)在另一方面中，本發(fā)明描述SABA與IL-21融合分子。IL-21為I型細胞因子，其與IL-2、IL-4、IL-7、IL-9及IL-15享有共同的受體Y鏈。IL-21在活化的人類CD4+T細胞中表達，在T輔助細胞的Th2及Thl7亞群、T濾泡細胞及NK T細胞中上調(diào)。這種細胞因子在調(diào)節(jié)所有這些細胞類型的功能中均具有作用。B細胞亦由IL-21調(diào)節(jié)。視與協(xié)同刺激信號的相互作用及B細胞的發(fā)育階段而定，IL-21可在小鼠與人類中誘導增殖、向產(chǎn)生Ig的漿細胞的分化，或細胞凋亡。單獨的IL-21及IL-21與Th細胞衍生的細胞因子的組合可調(diào)節(jié)向IgG、IgA或IgE同型的類別轉(zhuǎn)換重組，表明其在塑造B細胞的效應(yīng)物功能中的重要作用。因此，經(jīng)由其對免疫細胞的多種作用，IL-21在正常免疫反應(yīng)的許多方面中起作用。
作為免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)劑，已研究了 IL-21作為用于癌癥療法的免疫刺激劑(單獨地或與其它療法組合)的用途、作為免疫療法的輔助療法的用途，及作為病毒療法的用途，以及其他期望上調(diào)免疫系統(tǒng)的用途。臨床與臨床前治療的具體癌癥已有轉(zhuǎn)移性黑色素瘤、腎細胞癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳癌、胸腺瘤、頭頸部鱗狀細胞癌及神經(jīng)膠質(zhì)瘤(綜述參見 Sondergaard 及 Skak, TissueAntigens, 74(6):467-479，2009)。另夕卜，IL-21上調(diào)與各種人類T細胞介導T細胞相關(guān)的炎性病理有關(guān)，包括克羅恩氏病(Crohn’s disease,⑶)、潰瘍性結(jié)腸炎、炎性腸病(IBD)的主要形式、幽門螺旋桿菌相關(guān)胃炎(Helicobacterpy lor1-related gastritis)、乳糜灣、特應(yīng)性皮炎(AD)、全身性紅斑狼瘡、類風濕性關(guān)節(jié)炎及銀屑病(綜述參見Monteleone等人，Trends PharmacolSci, 30 (8)，441-7，2009)。例示性IL-21蛋白描述于美國專利第6，307，024號及第7，473，765號中，這些專利以引用的方式并入本文中。本文所述的SABA-1L21融合多肽的例示性用途包括治療某些類型的癌癥、病毒相關(guān)疾病以及各種T細胞介導或T細胞相關(guān)的炎性病癥，諸如克羅恩氏病(CD)、潰瘍性結(jié)腸炎、炎性腸病(IBD)的主要形式、幽門螺旋桿菌相關(guān)胃炎、乳糜瀉、特應(yīng)性皮炎(AD)、全身性 紅斑狼瘡、類風濕性關(guān)節(jié)炎及銀屑病。在一個方面，本申請?zhí)峁┡c血清白蛋白結(jié)合性uiFr^ (亦即SABA)融合的IL-21及此類融合物(本文通常稱為SABA-1L21融合物)的用途。SABA-1L21融合物指具有各種排列的融合物，包括例如SABA-1L21及IL21-SABA。某些例示性SABA-1L21融合構(gòu)建體展示于表2中。然而，應(yīng)了解如本文所公開的IL-21包括保留IL-21功能活性的IL-21變體、截短形式及任何經(jīng)修飾形式。亦即，如本文所述的IL-21亦包括經(jīng)修飾的形式，包括某些氨基酸已缺失或經(jīng)取代的片段以及變體，及一或多個氨基酸已變?yōu)榻?jīng)修飾的氨基酸或非天然存在的氨基酸的修飾，及諸如糖基化的修飾，只要經(jīng)修飾形式保留IL-21的生物活性即可。例示性IL-21序列以SEQ ID NO:286-287呈現(xiàn)于表2中。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-1L21融合物，其中該IL21部分包含SEQ ID NO:286-287中的任一者的序列，或與SEQ ID NO: 286-287中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的序列。在某些實施方式中，SABA-1L21融合物包含SEQ ID N0:290-295中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:290-295中的任一者具有至少 70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-1L21融合物SABA-X1-1I^l或II^l-X1-SABA,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ IDN0:65-88、216-221或397中的任一者)，且IL21為如本文所述的IL-21肽。9.胰高血糖素樣肽 I (GLP-1)/Exendin-4在另一方面中，本發(fā)明描述SABA與GLP-1融合分子。胰高血糖素樣肽I (GLP-1)為由腸內(nèi)分泌L細胞響應(yīng)營養(yǎng)攝取而釋放的具有30或31個氨基酸的肽(SEQ ID N0:226及227)。此激素可藉由多種機制起作用以調(diào)節(jié)葡萄糖穩(wěn)態(tài)及發(fā)揮抗糖尿病作用。GLP-1信號傳導在動物模型中可增強葡萄糖依賴性胰島素分泌，以葡萄糖依賴性方式抑制胰高血糖素分泌，延緩胃排空，使得食物攝取及體重降低，并引起β細胞質(zhì)量增加。天然GLP-1的治療性效用是有限的，因為其活體內(nèi)半衰期小于2分鐘，原因是其被普遍存在的蛋白酶二肽基肽酶IV(DPP-1V)快速降解。因為DPP-1V優(yōu)先切割在第二位置具有丙氨酸或脯氨酸的氨基端二肽，所以一種增加半衰期的策略是改變活性GLP-1中的第二氨基酸(第8位)以使得該肽不再為DPP-1V底物。第8位的丙氨酸可經(jīng)各種天然(或非天然)氨基酸置換，包括甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或纈氨酸，以產(chǎn)生具有DPP-1V抗性的GLP-1類似物。然而，具有DPP-1V抗性的GLP-1類似物仍具有相對短的藥物動力學半衰期，因為它們經(jīng)由腎臟清除而被消除。舉例而言，有效且具有DPP-1V抗性的GLP-1受體激動劑——合成Exendin-4 (SEQ ID NO: 228 ;Byetta中的有效藥物成分)仍必須對人類糖尿病患者每日投與兩次，因為其被腎臟快速清除。另一種產(chǎn)生長效GLP-1受體激動劑的方法是在與長壽命蛋白質(zhì)(諸如白蛋白或轉(zhuǎn)鐵蛋白)相同的開放閱讀框中表達具有DPP-1V抗性的GLP-1類似物。一種這樣的融合蛋白，阿必魯泰(albiglutide)，是與人類血清白蛋白融合的DPP-1V抗性GLP-1類似物，目前正在III期臨床試驗中接受評估。在所有報導的情況下，活性融合蛋白中DPP-1V抗性GLP-1受體激動劑均位于融合蛋白的氨基端；C端融合物的功效顯著較低。
在例示性實施方式中，SABA-GLP-1融合蛋白自N端至C端包含DPP_IV抗性GLP-1受體激動劑(可能包括基于GLP-1或Exendin-4的序列)、接頭、及SABA。SABA-GLP-1及SABA-Exendin融合多肽的例示性用途包括治療糖尿病、肥胖、腸易激綜合征及將其他可得益于降低血漿葡萄糖、抑制胃及/或腸運動及抑制胃及/或腸排空或抑制食物攝取的病狀。在一個方面，本申請?zhí)峁┡c血清白蛋白結(jié)合性1°Fn3(亦即SABA)融合的GLP-1或Exendin及此類融合物(本文統(tǒng)稱為SABA-GLP-1或SABA-Exendin融合物)的用途。SABA-GLP-1或SABA-Exendin融合物指具有各種排列的融合物，包括例如SABA-GLP-1、GLP-1-SABA、SABA-Exendin 及 Exendin-SABA。某些例示性 SABA-GLP-1 及 SABA-Exendin 融合構(gòu)建體展示于表2中。然而，應(yīng)了解如本文所公開的GLP-1及Exendin包括保留GLP-1或Exendin功能活性的GLP-1及Exendin變體、截短形式及任何經(jīng)修飾形式。亦即，如本文所述的GLP-1及Exendin亦包括經(jīng)修飾形式，包括某些氨基酸已缺失或經(jīng)取代的片段以及變體，及一或多個氨基酸已變?yōu)榻?jīng)修飾的氨基酸或非天然存在的氨基酸的修飾，及諸如糖基化的修飾，只要經(jīng)修飾形式保留GLP-1或Exendin的生物活性即可。例示性GLP-1序列以SEQ ID NO:226-227呈現(xiàn)于表2中，且例示性Exendin序列以SEQ ID N0:228呈現(xiàn)于表2中。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-GLP-1融合物，其中該GLP-1部分包含SEQ ID N0:226-227中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:226-227中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，SABA-GLP-1融合物包含SEQ IDN0:229-232中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:229-232中的任一者具有至少 70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-GLP-1融合物SABA-X1-GLP-1或GLP-1-X1-SABA,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQID N0:65-88、216-221或397中的任一者)，且GLP-1為如本文所述的GLP-1肽。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-Exendin融合物,其中該Exendin部分包含 SEQ ID NO: 228，或與 SEQ ID NO: 228 具有至少 70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的序列。在某些實施方式中，SABA-Exendin融合物包含SEQ ID NO:233-236中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:233-236中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%,97%,98%或99%同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-Exendin融合物SABA-X1-Exendin或Exendin-X1-SABA,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ ID N0:65-88、216-221或397中的任一者),且Exendin為如本文所述的Exendin肽。10.菌絲霉素在另一方面中，本發(fā)明描述SABA與菌絲霉素融合分子。菌絲霉素(Plectasin)為自真菌腐生子囊菌假黑盤菌(Pseudoplectania nigrella)分離的新殺菌性抗微生物肽。在活體外，菌絲霉素可以以與萬古霉素(vancomycin)與青霉素(penicillin)相當?shù)乃俾士焖贇⑺澜瘘S色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)及肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumonia)，包括對常規(guī)抗生素具有抗性的多種菌株，但對哺乳動物細胞無細胞毒性作用。在活體內(nèi)，菌絲霉素亦顯示在小鼠中的極低毒性且可與萬古霉素及青霉素同樣有效地治愈由肺炎鏈球菌引起的腹膜炎及肺炎。參見例如Mygind PH等人，Plectasin is apeptide antibioticwith therapeutic potential from a saprophytic fungus, Nature437:975-980(2005) ；Brinch KS 等人，Plectasin shows intracellular activityagainstStaphyIococcus aureus in human THP-1monocytes and in the mouseperitonitismodel, Antimicrob Agents Chemother 53:4801-4808(2009) ；3. Hara S 等人，Plectasin has antibacterial activity and no effect on cell viability orIL-8production, Biochem Biophys Res Commun 374:709-713(2008);及 OstergaardC 等人，High cerebrospinal fluid(C SF)penetration and potent bactericidalactivityin C SF of NZ2114, a novel plectasin variant, during experimentalpneumococcalmeningitis, Antimicrob Agents Chemother 53:1581-1585(2009)?？紤]到這些特征，菌絲霉素是有希望的抗生素產(chǎn)品的具有吸引力的候選者。參見例如Xiao-Lan J等人,High-Level Expression ofthe Antimicrobial PeptidePlectasin in Escherichiacoli, Curr Microbiol 61:197-202(2010)。因此，本文所述的SABA-菌絲霉素融合多肽可用作抗細菌劑。在一個方面，本申請?zhí)峁┡c血清白蛋白結(jié)合性1°Fn3(亦即SABA)融合的菌絲霉素及此類融合物(本文統(tǒng)稱為SABA-菌絲霉素融合物)的用途。SABA-菌絲霉素融合物指具有各種排列的融合物，包括例如SABA-菌絲霉素及菌絲霉素-SABA。某些例示性SABA-菌絲霉素融合構(gòu)建體展示于表2中。然而，應(yīng)了解如本文所公開的菌絲霉素包括保留菌絲霉素功能活性的菌絲霉素變體、截短形式及任何經(jīng)修飾形式。亦即，如本文所述的菌絲霉素亦包括經(jīng)修飾的形式，包括某些氨基酸已缺失或經(jīng)取代的片段以及變體，及一或多個氨基酸已變?yōu)榻?jīng)修飾的氨基酸或非天然存在的氨基酸的修飾，及諸如糖基化的修飾，只要經(jīng)修飾形式保留菌絲霉素的生物活性即可。例示性菌絲霉素序列以SEQ ID N0:237呈現(xiàn)于表2中。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-菌絲霉素融合物，其中該菌絲霉素部分包含 SEQ ID N0:237，或與 SEQ ID NO:237 具有至少 70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%,98%或99%同一性的序列。在某些實施方式中，SABA-菌絲霉素融合物包含SEQ IDNO:238-239中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:238-239中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-菌絲霉素融合物SABA-X1-菌絲霉素或菌絲霉素-X1-SABA,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ ID N0:65-88、216-221或397中的任一者)，且菌絲霉素為如本文所述的菌絲霉素肽。11.顆粒蛋白前體(PRGN)及 Atstrrin在另一方面中，本發(fā)明描述SABA與顆粒蛋白前體或SABA與Atstrrin融合分子。顆粒蛋白前體及Atstrrin ( 一種經(jīng)工程改造的包含來自顆粒蛋白前體的3個片段的蛋白質(zhì))為腫瘤壞死因子(TNF)受體結(jié)合物，其拮抗TNF信號傳導。顆粒蛋白前體及Atstrrin 在小鼠關(guān)節(jié)炎模型中預防炎癥。參見例如Tang, W等人，The Growth Factor ProgranulinBinds to TNF Receptors and IsTherapeutic Against Inflammatory Arthritis inMice, Science, ScienceExpress, 2011年3月10曰，補充數(shù)據(jù)。任一蛋白質(zhì)的SABA融合物可為TNFa介導性疾病的潛在治療劑。在一個方面，本申請?zhí)峁┡c血清白蛋白結(jié)合性％113(亦即SABA)融合的顆粒蛋白前體或Atstrrin及此類融合物(本文統(tǒng)稱為SABA-PRGN或SABA-Atstrrin融合物)的用途。SABA-PRGN或SABA-Atstrrin融合物指具有各種排列的融合物，包括例如SABA-PRGN、PRGN-SABA, SABA-Atstrrin 及 Atstrrin-SABA。某些例示性 SABA-PRGN 及 SABA-Atstrrin融合構(gòu)建體展示于表2中。然而，應(yīng)了解如本文所公開的顆粒蛋白前體及Atstrrin包括保留顆粒蛋白前體或Atstrrin功能活性的顆粒蛋白前體及Atstrrin變體、截短形式及任何經(jīng)修飾形式。亦即，如本文所述的顆粒蛋白前體及Atstrrin亦包括經(jīng)修飾形式,包括某些氨基酸已缺失或經(jīng)取代的片段以及變體，及一或多個氨基酸已變?yōu)榻?jīng)修飾的氨基酸或非天然存在的氨基酸的修飾，及諸如糖基化的修飾，只要經(jīng)修飾形式保留顆粒蛋白前體或Atstrrin的生物活性即可。例示性顆粒蛋白前體序列以SEQ ID NO:240-241呈現(xiàn)于表2中，且例示性Atstrrin序列以SEQID NO: 242呈現(xiàn)于表2中。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-PRGN融合物，其中該PRGN部分包含SEQ ID N0:240-241中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:240-241中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的序列。在某些實施方式中，SABA-PRGN融合物包含SEQ IDN0:243-246中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:243-246中的任一者具有至少 70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-PRGN融合物SABA-X1-PRGn或PRGn-X1-SABA,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQID N0:65-88、216-221或397中的任一者)，且PRGN為如本文所述的顆粒蛋白前體肽。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-Atstrrin融合物,其中該Atstrrin部分包含 SEQ ID NO:242，或與 SEQ ID NO:242 具有至少 70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%,98%或99%同一性的序列。在某些實施方式中，SABA-Atstrrin融合物包含SEQ IDNO:247-250中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:247-250中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-Atstrrin融合物SABA-X1-Atstrrin或Atstrrin-X1-SABA,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQID N0:65-88,216-221或397中的任一者),且Atstrrin為如本文所述的Atstrrin肽。12.骨鈣蛋白(OCN)在某些方面中，本發(fā)明描述SABA與骨鈣蛋白的融合分子。骨鈣蛋白(0CN，亦稱為骨Gla蛋白或BGP)是一種具有49個氨基酸的蛋白質(zhì)，由成骨細胞產(chǎn)生并分泌于血流及骨基質(zhì)中。血漿OCN水平經(jīng)受生物學變化，包括晝夜循環(huán)、季節(jié)、性別、年齡及月經(jīng)周期。OCN以羧化、未羧化及羧化不全形式存在，未羧化及羧化不全形式通過刺激胰島素 分泌、胰β細胞增殖及增強胰島素敏感性(部分經(jīng)由脂連蛋白介導)而參與能量代謝調(diào)節(jié)。胰島素促進骨重塑，且其在成骨細胞中的信號傳導可增加未羧化及/或羧化不全OCN釋放至循環(huán)中，進而改善葡萄糖處理。因此，本文所述的SABA-OCN融合多肽可用于治療胰島素相關(guān)病癥，包括氧利用、脂肪生成、糖原生成、脂質(zhì)生成、葡萄糖攝取、蛋白質(zhì)合成、熱生成及基礎(chǔ)代謝率維持的失調(diào)。上述機能障礙導致包括(但不限于)高胰島素血癥、胰島素抗性、胰島素缺乏、高血糖癥、高脂質(zhì)血癥、高酮血癥、糖尿病及糖尿病性腎病的疾病及/或病癥。在一個方面，本申請?zhí)峁┡c血清白蛋白結(jié)合性kiFM (亦即SABA)融合的OCN及此類融合物(本文統(tǒng)稱為SABA-OCN融合物)的用途。SABA-OCN融合物指具有各種排列的融合物，包括例如SABA-OCN及0CN-SABA。某些例示性SABA-OCN融合構(gòu)建體展示于表2中。然而，應(yīng)了解如本文所公開的OCN包括保留OCN功能活性的OCN變體、截短形式及任何經(jīng)修飾形式。亦即，如本文所述的OCN亦包括經(jīng)修飾形式，包括某些氨基酸已缺失或經(jīng)取代的片段以及變體，及一或多個氨基酸已變?yōu)榻?jīng)修飾的氨基酸或非天然存在的氨基酸的修飾，及諸如糖基化的修飾，只要經(jīng)修飾形式保留OCN的生物活性即可。例示性O(shè)CN序列以SEQ IDNO:365-378呈現(xiàn)于表2中。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-OCN融合物，其中該OCN部分包含SEQID NO:365-378中的任一者的序列，或與SEQ ID NO: 365-378中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性的序列。在某些實施方式中，SABA-0CN融合物包含SEQ ID Ν0:379-396中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:379-396中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-OCN融合物SABA-X1-OCN或OCN-X1-SABA,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ IDN0:65-88、216-221或397中的任一者)，且OCN為如本文所述的OCN肽。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-OCN融合物SABA-X1-Cys-X2-OCN 或 OCN-X1-Cys-X2-SABA,其中 SABA 為如本文所述的 SABA 多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為任選的多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ ID NO:65-88、216-221或397中的任一者)，Cys為半胱氨酸殘基，X2為化學衍生的間隔物(適合間隔物的實例展示于表I中)，且OCN為如本文所述的OCN肽。在例示性實施方式中，該化學衍生的間隔物含有馬來酰亞胺部分，其可用于藉由如本文進一步所述的邁克爾加成使OCN肽綴合于SABA多肽的C端Cys，或使SABA多肽綴合于OCN肽的C端Cys。13.干擾素 λ (IFNA)在另一方面中，本發(fā)明描述SABA與干擾素-λ (IFN-λ)融合分子。人類干擾素(IFN)分成三個主要類型1型、II型及III類型。I型IFN被表達作為針對病毒感染的第一道防御。I型IFN的主要作用為在病毒感染的最先數(shù)日內(nèi)限制病毒擴散，從而給予足夠時間產(chǎn)生針對感染的強適應(yīng)性免疫反應(yīng)。II型及III型IFN顯示I型IFN的一些抗病毒性質(zhì)。IFN- λ 是一種 III 型 IFN。人類編碼三種 IFN- λ 分子IFN_ λ I (IL-29)、IFN- λ 2 (IL-28A)及 IFN-λ 3 (IL-28B)。如 US 7，135，170 中所述，已顯示 IL-28 及 IL-29適用于治療肝炎病毒感染。重要的是，顯示IL-28及IL-29具有這些抗病毒活性，而沒有與使用其它先前已知IFN療法相關(guān)的一些毒性。與I型IFN療法相關(guān)的毒性之一是骨髓抑制。這是由于骨髓祖細胞的I型IFN抑制。因為IL-29并不如I型IFN治療所見的顯著抑制骨髓細胞擴增或B細胞增殖，所以IL-29將具有較小的與治療相關(guān)的毒性。預期IL-28A 及IL-28B具有類似結(jié)果。因此，本文所述的SABA-1FN-λ融合多肽的例示性用途包括治療病毒感染的受試者，包括例如諸如甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎及丁型肝炎的病毒感染。本文所述的SABA-1FN-λ融合多肽亦可用作治療與以下相關(guān)的病毒感染的抗病毒劑呼吸道合胞病毒、皰疫病毒、埃-巴二氏病毒(Epstein-Barrvirus)、流感病毒、腺病毒、副流感病毒、鼻病毒、柯薩奇病毒(coxsackie virus)、痘苗病毒、西尼羅河病毒(west nile virus)、登革熱病毒、委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒(Venezuelan equine encephalitis virus)、伯欽特病毒(pichinde virus)及脊髓灰質(zhì)炎病毒。本文所述的SABA-1FN-λ融合多肽可用于治療具有慢性或急性病毒感染的受試者。在某些實施方式中，本文所述的SABA-1FNX融合物可提供優(yōu)于與其它藥物動力學部分(例如PEG)融合的IFNX多肽的益處。具體的，本文所提供的SABA-1FNX融合物可使得與PEG-1FNX綴合物相比IFNX分子的血清半衰期得到顯著改善。此類半衰期的增加可允許降低頻率的給藥方案，例如與使用其它IFNX治療劑(如PEG-1FN λ綴合物)的更頻繁的給藥(諸如每周給藥一次)相比，SABA-1FNX融合物可允許每月給藥一次。在一個方面，本申請?zhí)峁┡c血清白蛋白結(jié)合性％113(亦即SABA)融合的IFNA及此類融合物(本文統(tǒng)稱為SABA-1FN λ融合物)的用途。SABA-1FNA融合物指具有各種排列的融合物，包括例如SABA-1FNX及IFNA-SABA。某些例示性SABA-1FNX融合構(gòu)建體展示于表2中。然而,應(yīng)了解如本文所公開的IFNX包括保留IFNX功能活性的IFNX變體、截短形式及任何經(jīng)修飾形式。亦即，如本文所述的IFNX亦包括經(jīng)修飾形式，包括某些氨基酸已缺失或經(jīng)取代的片段以及變體，及一或多個氨基酸已變?yōu)榻?jīng)修飾的氨基酸或非天然存在的氨基酸的修飾，及諸如糖基化的修飾，只要經(jīng)修飾形式保留IFNX的生物活性即可。例示性IFNA序列以SEQ ID NO:251-257呈現(xiàn)于表2中。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-1FNA融合物，其中該IFNA部分包含SEQ ID N0:251-257中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:251-257中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，SABA-1FN λ融合物包含SEQ ID Ν0:258-285中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:258-285中的任一者具有至少 70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-1FNA融合物SABA-X1-1FN λ或IFN λ -X1-SABA,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQ IDN0:65-88、216-221或397中的任一者)，且IFNA為如本文所述的IFNA肽。14. Apelin在另一方面中，本申請?zhí)峁㏒ABA與Apelin的融合分子。Apelin為G蛋白偶聯(lián)受體APJ的內(nèi)源性配體。Apelin基因編碼具有77個氨基酸的前原蛋白，其被切割為較短的活性片段。全長成熟肽為Apelin-36,但Apelin_17及Apelin_13亦具有活性(M Kleinz 等人,Pharmacol. Ther. 107:198-211 (2005))。Apelin 在中樞神經(jīng)系統(tǒng)及外周組織中廣泛表達，且細胞表達包括內(nèi)皮細胞及脂肪細胞(見上)。已顯示Apelin在臨床前模型中使得血管擴張且改善心臟衰竭患者的血液動力學及心臟概況，以及預防 動脈粥樣硬化(AG Japp 等人，Circ. 121:1818-1827(2010);及 HY Chun 等人，J. Clin.1nvest. 118:3343-3354(2008)) 0另外，Apelin投藥與在糖尿病臨床前模型中胰島素敏感性的改善相關(guān)(C Dray等人，Cell Metabolism 8:437-445(2008))。因此，本文所述的SABA-Apelin融合多肽的例示性用途可包括治療糖尿病、肥胖、飲食障礙、胰島素抗性綜合征及心血管疾病(例如心臟衰竭、動脈粥樣硬化及高血壓)。在一個方面，本申請?zhí)峁┡c血清白蛋白結(jié)合性1QFn3(亦即SABA)融合的Apelin及此類融合物(本文統(tǒng)稱為SABA-APLN融合物)的用途。SABA-APLN融合物指具有各種排列的融合物，包括例如SABA-APLN及APLN-SABA。某些例示性SABA-APLN融合構(gòu)建體展示于表2中。然而，應(yīng)了解如本文所公開的Apelin包括保留Apelin功能活性的IFNX變體、截短形式及任何經(jīng)修飾形式。亦即，如本文所述的Apelin亦包括經(jīng)修飾形式，包括某些氨基酸已缺失或經(jīng)取代的片段以及變體，及一或多個氨基酸已變?yōu)榻?jīng)修飾的氨基酸或非天然存在的氨基酸的修飾，及諸如糖基化的修飾，只要經(jīng)修飾形式保留Apelin的生物活性即可。例示性Apelin序列以SEQ ID NO:419-423呈現(xiàn)于表2中。在例示性實施方式中，本申請?zhí)峁┮环NSABA-APLN融合物，其中該Apelin部分包含SEQ ID N0:419-423中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:419-423中的任一者具有至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，SABA-APLN融合物包含SEQ IDN0:424-430中的任一者的序列，或與SEQ ID NO:424-430中的任一者具有至少 70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列。在某些實施方式中，本申請?zhí)峁┮环N可由下式表示的SABA-APLN融合物SABA-X1-APLn或APLn-X1-SABA,其中SABA為如本文所述的SABA多肽(包括任何N端及/或C端延伸)，X1為多肽接頭(適合的接頭包括例如SEQID N0:65-88、216-221或397中的任一者)，且APLN為如本文所述的APLN肽。15.其它 Adnectin 在某些方面中，本申請?zhí)峁┡c結(jié)合除血清白蛋白(例如HSA)外的標靶分子的10Fn3結(jié)構(gòu)域融合的SABA，產(chǎn)生SABA」°Fn3或1QFn3_SABA構(gòu)型的Adnectin 二聚體融合分子。在其它方面中，本申請?zhí)峁┡c兩個或兩個以上kiFM結(jié)構(gòu)域融合的SABA，由此形成多聚體。舉例而言，在一個實施方式中，本申請?zhí)峁┡c兩個kiFM結(jié)構(gòu)域C°Fn3a&wFr^b)融合的SABA，其中uiFr^a及wFMb各自結(jié)合不同的靶分子，且皆不結(jié)合血清白蛋白(例如 HSA)。所得 Adnectin 三聚體的構(gòu)型可為或
10Fn3a-lclFn3b-SABA。在例示性實施方式中，SABA與包含SEQ ID NO: 1_3中的任一者或與SEQ ID NO: 1-3中的任一者具有至少 50%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98% 或 99% 同一性的序列的kiFM結(jié)構(gòu)域融合，其中BC、DE及FG環(huán)分別相對于野生型BC、DE及FG環(huán)的序列經(jīng)修飾，且其中該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合靶(除整聯(lián)蛋白外)的Kd為小于500 μ M。kiFM結(jié)構(gòu)域可進一步包含如本文所述的N端及/或C端延伸。在某些實施方式中，kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合如本文所述的治療性部分的靶。在例示性實施方式中，在包含一個額外kiFM結(jié)構(gòu)域的融合物中，該1QFn3結(jié)構(gòu)域結(jié)合VEGFR2、TNF α、IGFlR或EGFR。在例示性實施方式中，在包含兩個額外1QFn3結(jié)構(gòu)域的融合物中，所述1QFn3結(jié)構(gòu)域結(jié)合VEGFR2及IGF1R，或EGFR及IGF1R。
綴合/接頭SABA融合物可以是共價或非共價連接的。在一些實施方式中，血清白蛋白結(jié)合性10Fn3可直接或經(jīng)由多肽接頭間接連接于異源分子。適合于使SABA連接于所關(guān)注的蛋白質(zhì)的接頭是這樣的接頭，它們使得各個結(jié)構(gòu)域彼此獨立地折疊，形成不會破壞融合蛋白的任一成員的功能性的三維結(jié)構(gòu)。例示性接頭以SEQ ID N0:65-88,216-221及397提供于表2中。本公開提供許多適合的接頭，包括基于甘氨酸-絲氨酸的接頭、基于甘氨酸-脯氨酸的接頭以及具有氨基酸序列PSTSTST(SEQ ID NO:85)的接頭。在一些實施方式中，接頭為基于甘氨酸-絲氨酸的接頭。這些接頭包含氨酸甘氨酸及絲氨酸殘基，且長度可為8至50、10至30及10至20個氨基酸。實例包括具有氨基酸序列(GS)7(SEQ ID NO:72),G(GS)6(SEQ ID NO:67)及G(GS)7G(SEQ ID NO:69)的接頭。其它接頭含有谷氨酸，包括例如(GSE)5(SEQ ID N0:74)及GGSE GGSE(SEQ ID NO:78)。其它例示性甘氨酸-絲氨酸接頭包括(GS)4(SEQ ID NO:71), (GGGGS)7(SEQ ID NO:80)、(GGGGS)5(SEQ ID NO:81)及(GGGGS)3G(SEQID NO:82)。在一些實施方式中，接頭為基于甘氨酸-脯氨酸的接頭。這些接頭包含甘氨酸及脯氨酸殘基且長度可為3至30、10至30及3至20個氨基酸。實例包括具有氨基酸序列(GP) 3G(SEQID NO:83)、(GP)5G(SEQ ID NO:84)及GPG的接頭。在其它實施方式中，接頭可為長度為3至30、10至30及3至20個氨基酸的基于脯氨酸-丙氨酸的接頭?；诟彼岜彼岬慕宇^的實例包括例如(PA) 3 (SEQ ID NO: 86), (PA)6 (SEQ ID NO: 87)及(PA)9 (SEQID N0:88)。預期最佳接頭長度及氨基酸組成可藉由現(xiàn)有技術(shù)中熟知的方法使用常規(guī)實驗來確定。在一些實施方式中，本文所述的融合物經(jīng)由具有可由血液或靶組織中的蛋白酶切割的蛋白酶位點的多肽接頭連接于SABA。此類實施方式可用于釋放治療性蛋白質(zhì)以實現(xiàn)更好的投遞或治療性質(zhì)或更有效的產(chǎn)生?？稍贔n3結(jié)構(gòu)域的C端、Fn3結(jié)構(gòu)域與多肽接頭之間引入其它接頭或間隔物?？稍贔n3結(jié)構(gòu)域的N端、Fn3結(jié)構(gòu)域與多肽接頭之間引入其它接頭或間隔物。在一些實施方式中，治療性部分可直接或經(jīng)由聚合物接頭間接連接于SABA。聚合物接頭可用于最優(yōu)地改變?nèi)诤衔锔鹘M分之間的距離以形成具有一或多種以下特征的蛋白質(zhì)融合物1)當結(jié)合所關(guān)注的蛋白質(zhì)時，一或多個蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域的結(jié)合位阻降低或增加；2)蛋白質(zhì)穩(wěn)定性或溶解度增加；3)蛋白質(zhì)聚集減少；及4)蛋白質(zhì)的總親合力(avidity)或親和力增加。在一些實施方式中，治療性部分經(jīng)由生物相容性聚合物(諸如聚合糖)連接于SABA。該聚合糖可包括酶切割位點，其可被血液或靶組織中的酶切割。此類實施方式可用于釋放治療性蛋白質(zhì)以實現(xiàn)更好的投遞或治療性質(zhì)或更有效的產(chǎn)生。SABA-神經(jīng)肽融合物在某些實施方式中，本申請?zhí)峁㏒ABA-神經(jīng)肽融合物。例示性神經(jīng)肽包括例如胰淀素、PYY及pp。SABA-神經(jīng)肽融合物可以構(gòu)建為多肽融合物，或構(gòu)建為經(jīng)化學衍生的間·隔物連接的綴合物。在一個實施方式中，SABA-神經(jīng)肽融合物為包含SABA、氨基酸接頭及神經(jīng)肽的多肽融合物。因為許多神經(jīng)肽在C端經(jīng)酰胺化，所以融合蛋白的一個例示性排列自N端至C端為SABA、氨基酸接頭及神經(jīng)肽。在另一個實施方式中，SABA-神經(jīng)肽融合物含有將SABA連接于神經(jīng)肽的化學衍生的間隔物。SABA-神經(jīng)肽綴合物的例示性排列如下(I) SABA-Cys-化學衍生的間隔物-神經(jīng)肽；或(2) SABA-氨基酸接頭-Cys-化學衍生的間隔物-神經(jīng)肽。SABA-神經(jīng)肽融合物可在宿主細胞中產(chǎn)生，諸如如本文進一步所述的微生物或哺乳動物細胞。由化學衍生的間隔物連接的SABA-神經(jīng)肽融合物的肽組分可由宿主細胞或由化學合成或其組合產(chǎn)生。在一個例示性實施方式中，由化學衍生的間隔物連接的SABA-神經(jīng)肽融合物是由宿主細胞(諸如大腸桿菌)中產(chǎn)生的SABA及由化學合成產(chǎn)生的神經(jīng)肽組裝而成的。下文及實施例中描述了產(chǎn)生SABA-神經(jīng)肽融合物的進一步詳情。許多神經(jīng)肽含有C端α-酰胺基，對于其生物活性很重要。舉例而言，胰淀素、PYY及PP肽均具有C端酰胺化。在哺乳動物細胞中，α -酰胺化可由肽基-甘氨酸α -酰胺化單加氧酶(PAM)( 一種催化肽基-甘氨酸底物轉(zhuǎn)化為α -酰胺化產(chǎn)物的雙功能酶)處理。存在多種制備C端酰胺化肽的技術(shù)。舉例而言，可在體外用純化的PAM酶處理肽前體(具有C端甘氨酸或甘氨酸-賴氨酸-精氨酸或其它延伸)。PAM及使用PAM制備C端酰胺化肽的方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員所已知。參見例如US4，708，934、US 5，789，234及US 6，319，685。C端酰胺化亦可在表達內(nèi)源性PAM的哺乳動物表達系統(tǒng)中完成。融合蛋白可表達為具有甘氨酸或甘氨酸-賴氨酸-精氨酸序列延伸的前體分子。當在真核細胞(例如CHO、NIH 3Τ3及BHK)中表達為分泌性蛋白質(zhì)時，該蛋白質(zhì)可被內(nèi)源性PAM酶切割且產(chǎn)生 C 端羧酰胺。參見例如 Endocrinology (1991) V129:553-555 (1991) ;andMolecular andCellular Endocrinology 91:135-141(1993)。C 端酸胺化亦可在共表達人類PAM的哺乳動物表達系統(tǒng)中完成。參見例如Chinese Journal of Biotechnology (2002)vl8:20-24(2002)。除從COOH到CONH2的活體外PAM酶促轉(zhuǎn)化外，可使用馬瑞費德合成(Merrifieldsynthesis)形成所關(guān)注的蛋白質(zhì)上的羧酰胺末端。馬瑞費德合成容許在馬瑞費德合成過程期間馬來酰亞胺部分連接于肽的N端。馬來酰亞胺部分允許使用位于兩個多肽結(jié)構(gòu)域之間且可用作間隔物的各種非氨基酸部分在兩個氨基酸序列(包括例如SABA及羧基酰胺化神經(jīng)肽)之間形成綴合物。可用作間隔物的適宜的非氨基酸部分的實例展示于下表I中。馬來酰亞胺綴合反應(yīng)的益處在于其可容易地對蛋白質(zhì)實施，其在有利于蛋白質(zhì)分子的溫和條件下得到高產(chǎn)率，且其具有高度特異性，幾乎沒有副產(chǎn)物。表1.用于使SABA分子綴合于在N端具有馬來酰亞胺部分的肽的例示性接頭/間隔物。

權(quán)利要求
1.一種包含纖連蛋白III型第十C°Fn3)結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域以ΙμΜ或更小的Kd結(jié)合人血清白蛋白的結(jié)構(gòu)域I或2，且其中在白蛋白存在下該多肽的血清半衰期是在血清白蛋白不存在下該多肽的血清半衰期的至少5倍。
2.權(quán)利要求1的多肽，其中相對于野生型uiFr^結(jié)構(gòu)域，該kiFM結(jié)構(gòu)域在BC、DE及FG環(huán)中的一或多者中包含經(jīng)修飾的氨基酸序列。
3.權(quán)利要求1或2的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域在5.5至7. 4的pH范圍結(jié)合血清白蛋白。
4.權(quán)利要求1-3中任一項的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域在pH5. 5以200nM或更小的Kd結(jié)合HSA。
5.一種包含纖連蛋白III型第十C°Fn3)結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合人血清白蛋白且包含與SEQ ID NO:2至少70%同一的氨基酸序列。
6.權(quán)利要求5的多肽，其中該uiFr^結(jié)構(gòu)域包含以下一或多者包含SEQIDNO:5所示氨基酸序列的BC環(huán)、包含SEQ ID NO: 6所示氨基酸序列的DE環(huán)、及包含SEQ ID NO: 7所示氨基酸序列的FG環(huán)。
7.權(quán)利要求5的多肽，其中該1QFn3結(jié)構(gòu)域包含選自SEQID NO:8、12、16、20及24-44的序列。
8.權(quán)利要求5至7中任一項的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域還結(jié)合獼猴血清白蛋白(RhSA)、食蟹猴血清白蛋白(CySA)或鼠血清白蛋白(MuSA)中的一或多者。
9.權(quán)利要求5至7中任一項的多肽，其中該1QFn3結(jié)構(gòu)域不與RhSA、CySA或MuSA中的一或多者交叉反應(yīng)。
10.權(quán)利要求5至9中任一項的多肽，其中該wFM結(jié)構(gòu)域以Iμ M或更小的Kd結(jié)合HSA。
11.權(quán)利要求5至10中任一項的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域以500ηΜ或更小的Kd結(jié)合HSA。
12.權(quán)利要求5至11中任一項的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合HSA的結(jié)構(gòu)域I或II。
13.權(quán)利要求5至12中任一項的多肽，其中該uiFr^結(jié)構(gòu)域在5.5至7. 4的pH范圍結(jié)合血清白蛋白。
14.權(quán)利要求5至13中任一項的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域在pH5. 5以200nM或更小的Kd結(jié)合HSA。
15.權(quán)利要求5至14中任一項的多肽，其中在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期是在血清白蛋白不存在下該多肽的血清半衰期的至少5倍。
16.權(quán)利要求5至15中任一項的多肽，其中在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期為至少2小時。
17.一種包含纖連蛋白III型第十C°Fn3)結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合人血清白蛋白，且包含包含SEQ ID NO:5所示氨基酸序列的BC環(huán)、包含SEQ ID NO:6所示氨基酸序列的DE環(huán)、及包含SEQ ID NO: 7所示氨基酸序列的FG環(huán)。
18.權(quán)利要求17的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域還結(jié)合獼猴血清白蛋白(RhSA)、食蟹猴血清白蛋白(CySA)或鼠血清白蛋白(MuSA)中的一或多者。
19.權(quán)利要求17的多肽，其中該uiFr^結(jié)構(gòu)域不與RhSA、CySA或MuSA中的一或多者交叉反應(yīng)。
20.權(quán)利要求17至19中任一項的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域以Iμ M或更小的Kd結(jié)合HSA。
21.權(quán)利要求17至20中任一項的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域以500ηΜ或更小的Kd結(jié)合HSA。
22.權(quán)利要求17至21中任一項的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合于HSA的結(jié)構(gòu)域I或II。
23.權(quán)利要求17至22中任一項的多肽，其中該uiFr^結(jié)構(gòu)域在5.5至7. 4的pH范圍結(jié)合血清白蛋白。
24.權(quán)利要求17至23中任一項的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域在pH5. 5以200nM或更小的Kd結(jié)合HSA。
25.權(quán)利要求17至24中任一項的多肽，其中在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期是在血清白蛋白不存在下該多肽的血清半衰期的至少5倍。
26.權(quán)利要求17至25中任一項的多肽，其中在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期為至少2小時。
27.一種包含纖連蛋白III型第十C°Fn3)結(jié)構(gòu)域及異源蛋白質(zhì)的融合多肽，其中該10Fn3結(jié)構(gòu)域以I μ M或更小的Kd結(jié)合人血清白蛋白。
28.權(quán)利要求27的融合多肽，其中該1QFn3結(jié)構(gòu)域包含與SEQID N0:4至少70%同一的氨基酸序列。
29.權(quán)利要求27或28的融合多肽，其中該1QFn3結(jié)構(gòu)域包含選自SEQIDNO:8、12、16、20及24-44的氨基酸序列。
30.權(quán)利要求27或28的融合多肽，其中該uiFr^結(jié)構(gòu)域包含具有SEQIDNO:5所示氨基酸序列的BC環(huán)、具有SEQ ID NO: 6所示氨基酸序列的DE環(huán)、及具有SEQ ID NO: 7所示氨基酸序列的FG環(huán)。
31.權(quán)利要求27或28的融合多肽，其中該異源蛋白質(zhì)選自成纖維細胞生長因子21 (FGF21)、胰島素、胰島素受體肽、骨形態(tài)發(fā)生蛋白9 (BMP-9)、胰淀素、肽YY (PYY3_36)、胰多肽(ΡΡ)、白介素21(IL-21)、胰高血糖素樣肽l(GLP-l)、菌絲霉素、顆粒蛋白前體、Atstrrin、骨I丐蛋白(OCN)、Apelin或包含1QFn3結(jié)構(gòu)域的多肽。
32.權(quán)利要求31的融合多肽，其中該異源蛋白質(zhì)為FGF21。
33.權(quán)利要求32的融合多肽，其中該異源蛋白質(zhì)包含SEQID N0:118所示的序列。
34.權(quán)利要求27-30中任一項的融合多肽，其中該異源蛋白質(zhì)包含第二kiFM結(jié)構(gòu)域，所述第二 kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合HSA以外的靶蛋白質(zhì)。
35.權(quán)利要求34的融合多肽，其進一步包含結(jié)合靶蛋白質(zhì)的第三kiFM結(jié)構(gòu)域。
36.權(quán)利要求35的融合多肽，其中該第三uiFr^結(jié)構(gòu)域與該第二kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合相同的靶。
37.權(quán)利要求35的融合多肽，其中該第三uiFr^結(jié)構(gòu)域與該第一kiFM結(jié)構(gòu)域和該第二10Fn3結(jié)構(gòu)域結(jié)合不同的靶。
38.權(quán)利要求27-37中任一項的融合多肽，其中所述uiFr^結(jié)構(gòu)域還結(jié)合于獼猴血清白蛋白(RhSA)、食蟹猴血清白蛋白(CySA)或鼠類血清白蛋白(MuSA)中的一或多者。
39.權(quán)利要求27-37中任一項的多肽，其中所述1QFn3結(jié)構(gòu)域不與RhSA、CySA或MuSA中的一或多者交叉反應(yīng)。
40.權(quán)利要求27-39中任一項的融合多肽，其中所述kiFM結(jié)構(gòu)域以Iμ M或更小的Kd結(jié)合HSA。
41.權(quán)利要求27-40中任一項的融合多肽，其中所述uiFr^結(jié)構(gòu)域結(jié)合HSA的結(jié)構(gòu)域I或II。
42.權(quán)利要求27-41中任一項的融合多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域在5.5至7. 4的pH范圍結(jié)合血清白蛋白。
43.權(quán)利要求27-42中任一項的融合多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域在pH5. 5以200nM或更小的Kd結(jié)合HSA。
44.權(quán)利要求27-43中任一項的融合多肽，其中在血清白蛋白存在下該融合物的半衰期是單獨的該異源蛋白質(zhì)的半衰期的至少5倍。
45.權(quán)利要求27-44中任一項的融合多肽，其中在血清白蛋白存在下該多肽的血清半衰期為至少2小時。
46.一種包含纖連蛋白III型第十C°Fn3)結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域(i)相對于野生型uiFr^結(jié)構(gòu)域，在AB、BC、⑶、DE、EF及FG環(huán)的一或多者中包含經(jīng)修飾的氨基酸序列；(ii)結(jié)合野生型kiFM結(jié)構(gòu)域不結(jié)合的靶分子 '及(iii)包含具有序列(ED)n的C端尾部，其中η為3至7的整數(shù)。
47.權(quán)利要求46的多肽，其中該uiFr^結(jié)構(gòu)域包含與SEQID NO:1的殘基9_94所示的氨基酸序列具有至少60%同一性的氨基酸序列。
48.權(quán)利要求46或47的多肽，其中該C端尾部進一步在N端包含E、I或EI。
49.權(quán)利要求46-48中任一項的多肽，其中該C端尾部提高溶解度，或減少聚集，或提高溶解度并減少聚集。
50.權(quán)利要求46-49中任一項的多肽，其中相對于該野生型wFM結(jié)構(gòu)域，該kiFM結(jié)構(gòu)域在BC、DE及FG環(huán)的每一者中包含經(jīng)修飾的氨基酸序列。
51.權(quán)利要求46-50中任一項的多肽，其中該多肽以Iμ M或更小的KD結(jié)合所述靶。
52.權(quán)利要求32的融合多肽，其中該多肽包含選自SEQID NO: 132-174的序列。
53.權(quán)利要求31的融合多肽，其中所述異源蛋白質(zhì)為PYY3_36、PP或胰淀素。
54.一種包含纖連蛋白III型第十C°Fn3)結(jié)構(gòu)域的多肽，其中該kiFM結(jié)構(gòu)域結(jié)合人血清白蛋白，且包含與SEQ ID N0:8、12、16、20及24-44至少70%同一的氨基酸序列。
55.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1至54中任一項的多肽。
56.權(quán)利要求55的藥物組合物，其進一步包含生理學上可接受的擔載體。
57.—種治療糖尿病、治療或降低胰島素抗性、治療肥胖、減輕體重或防止體重增加、治療血脂異常、增加脂肪組織中的葡萄糖攝取或減慢糖尿病進展的方法，包括對受試者施用治療有效量的權(quán)利要求32-33或52中任一項的融合多肽。
58.一種治療低血糖、肥胖、糖尿病、飲食障礙、胰島素抗性綜合征或心血管疾病的方法，包括對受試者施用治療有效量的權(quán)利要求53的融合多肽。
59.一種核酸，其編碼如權(quán)利要求1-26、45-51或53中任一項的多肽或權(quán)利要求27-45或52中任一項的融合多肽。
60.權(quán)利要求58的核酸，其中該核酸包含表3中所示的序列。
61.—種載體,其包含權(quán)利要求59或60的核酸。
62.權(quán)利要求61的載體，其中該載體為表達載體。
63.—種宿主細胞,其包含權(quán)利要求61或62的載體。
64.權(quán)利要求63的宿主細胞，其中該細胞為細菌細胞。
65.權(quán)利要求63的宿主細胞，其中該細胞為哺乳動物細胞。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種基于結(jié)合血清白蛋白的纖連蛋白III型第十(10Fn3)結(jié)構(gòu)域的抗體樣蛋白質(zhì)。本發(fā)明進一步關(guān)于包含結(jié)合血清白蛋白的10Fn3連接于異源蛋白質(zhì)的融合分子，其用于診斷及治療應(yīng)用。
文檔編號A61K38/39GK103003301SQ201180033246
公開日2013年3月27日 申請日期2011年5月3日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月3日
發(fā)明者M.L.戈斯林, D.法布里齊奧, J.F.斯萬, T.S.米切爾, R.坎福森, S.T.克洛德, E.弗法恩, P.E.莫林, R.穆克赫吉, S.I.泰勒 申請人:百時美施貴寶公司