專利名稱：竹節(jié)參皂苷Ⅳa在制備α-糖苷酶抑制劑中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及竹節(jié)參皂苷IV a在制備α -糖苷酶抑制劑和/或α-淀粉酶抑制劑中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
糖尿病(Diabetes Mellitus)是一種以復(fù)雜病因?yàn)樘卣鞯拇x紊亂性疾病，常伴隨多種慢性并發(fā)癥，造成多器官、多系統(tǒng)損傷，具有較高的致殘率，其發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)。主要是由于胰島素分泌缺陷或相對(duì)不足而引起的糖、脂肪、蛋白質(zhì)代謝紊亂為特征的疾病，表現(xiàn)為多食、多飲、多尿、消瘦的三多一少癥狀。隨著生活方式的改變和脂肪攝入量的增加，曾經(jīng)的富貴病目前已悄然平民化，2000年全球有I. 71億人患有糖尿病，到2030年， 這個(gè)數(shù)字將至少增加到3. 66億人，已成為繼心血管疾病和惡性腫瘤之后第三大嚴(yán)重威脅人類健康的非傳染性疾病。發(fā)病后若未得到及時(shí)有效治療，隨著病程的延長(zhǎng)，可出現(xiàn)廣泛的微血管及大血管病變，出現(xiàn)神經(jīng)、泌尿、循環(huán)等多系統(tǒng)的病理改變。α -葡萄糖苷酶抑制劑是目前治療2型糖尿病口服降糖藥的一類。此類藥物有阿卡波糖(acarbose)、米格列醇(miglitol)和伏格列波糖(voglibose)等。阿卡波糖是由拜耳公司推出的第I個(gè)α-糖苷酶抑制劑，1990年在德國(guó)上市。它們通過(guò)抑制小腸粘膜上皮細(xì)胞表面的α-葡萄糖苷酶抑制劑而延緩和減少碳水化合物的消耗和葡萄糖的吸收，并降低餐后血糖，從而達(dá)到控制血糖的目的。主要適應(yīng)于肥胖或超重的2型糖尿病飲食控制和運(yùn)動(dòng)治療，療效不佳者，可單用此類藥。大量的臨床研究表明，抑制α -糖苷酶和α _淀粉酶對(duì)降低空腹及餐后血糖有明顯療效，在改善糖尿病患者體質(zhì)，調(diào)節(jié)胰島素、膽固醇、甘油三脂和高密度脂蛋白(HDL)代謝等方面也有明顯作用。抑制α-糖苷酶從而降低糖化血紅蛋白(HbAlc)的作用提示可能有益于預(yù)防糖尿病并發(fā)癥。α-糖苷酶抑制劑已被第三次“亞太地區(qū)糖尿病治療藥物指南”推薦降低餐后血糖的一線藥物，醫(yī)學(xué)界也將其列為第三類口服降糖藥。阿卡波糖(Acarbose,拜糖平)、米格列醇(Miglitol,奧怡蘋)、伏格列波糖(Voglibose,倍欣)是目前已經(jīng)用于臨床的α-糖苷酶抑制劑藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供竹節(jié)參皂苷IV a作為α-糖苷酶抑制劑和/或α -淀粉酶抑制劑的用途。本發(fā)明的竹節(jié)參皂苷IV a是從太白惚木純中草藥中分離得到，其提取純化方法包括以下步驟
(1)將太白惚木用粉碎機(jī)粉碎，稱量約20g藥粉，加入10倍量80%乙醇(料液比為1:10，w/v)，在80 ° C下回流提取60 min，回流提取3次，過(guò)濾、合并，濃縮回收乙醇得粗浸膏；
(2)粗浸膏用蒸餾水分散，分別用氯仿1:3(v/v)萃取除去脂溶性雜質(zhì)，用水飽和的正丁醇萃取3次(1:3，v/v)，合并3次萃取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在60 ° C下減壓回收，在60° C水浴上蒸干得到正丁醇萃取物；
(3)正丁醇萃取物利用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜、ODS反相柱色譜、Lobar柱色譜和反相HPLC制備等手段進(jìn)行分離，從中得到13個(gè)化合物。太白惚木皂苷分子量較大，結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜。利用ID NMR (1H和13C NMR), 2D NMR(DQCOSY、TOCSY、HMQC、HMBC、NOESY 和 R0ESY)和 MS (ESI-MS)等波譜技術(shù)對(duì)分離得到的皂苷成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析，并結(jié)合化學(xué)手段(酸水解、堿水解、酶解、甲基化和乙酰化等)確定了其平面及立體化學(xué)結(jié)構(gòu)。竹節(jié)參皂苷IV a單體對(duì)α -糖苷酶的抑制作用的操作方法包括以下步驟
I)藥品與試劑的配制
A 0. 2 M 磷酸氫二鉀，pH = 6. 8，T = 37。C
4.5644 g磷酸氫二鉀用去離子水溶解，IM氫氧化鈉調(diào)pH至6. 8,并定容至100 mL。B :1 mg/mL還原型谷胱甘肽
精密稱取2 mg的還原型谷胱甘肽，用2 mL去離子水溶解。C 5 mM對(duì)硝基苯基a -D-糖苷酶
精密稱取4. 5 mg的對(duì)硝基苯基a -D-糖苷酶，用3 mL去離子水溶解。D:200 mM 碳酸鈉
精密稱取I. 0599 g的碳酸鈉，用50 mL去離子水溶解。E 1 u/mL α -糖苷酶
用冷的去離子水配制成I u/mL α-糖苷酶。F:取50 mg阿卡波糖I片，用研缽研碎，精密稱取10 mg置于10 mL容量瓶中，力口甲醇適量，搖勻，并定容，即得I mg/mL陽(yáng)性對(duì)照品溶液。2)實(shí)驗(yàn)原理
權(quán)利要求
1.竹節(jié)參皂苷IV a在制備α -糖苷酶抑制劑和/或α -淀粉酶抑制劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了從太白楤木純中草藥中分離得到的竹節(jié)參皂苷Ⅳa對(duì)α-糖苷酶和α-淀粉酶具有高的抑制活性，證明其可用于制備α-糖苷酶抑制劑和α-淀粉酶抑制劑。
文檔編號(hào)A61K31/704GK102824355SQ201210299319
公開(kāi)日2012年12月19日 申請(qǐng)日期2012年8月22日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月22日
發(fā)明者文愛(ài)東, 竇芳, 湯海峰, 奚苗苗 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)