專利名稱：組織因子拮抗劑及其使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥學(xué)活性化合物以及含有該化合物的藥物組合物及治療方法。本發(fā)明優(yōu)選的化合物可用以治療或預(yù)防不良性血栓形成。本發(fā)明具有廣泛的應(yīng)用范圍，包括其用于篩選治療或預(yù)防血栓形成的候選化合物的用途。
組織因子(TF)為263個氨基酸組成的完整膜蛋白，負(fù)責(zé)激活凝血蛋白酶級聯(lián)反應(yīng)。血管損傷會使血液暴露于表現(xiàn)于皮下細(xì)胞表面上的組織因子，導(dǎo)致與血漿因子VII(FVII)或活化的因子VII(FVIIa)形成鈣依賴性的高親和性的復(fù)合體。與TF的結(jié)合促使酶原FVII被數(shù)種蛋白酶(如因子Xa或凝血酶)迅速地蛋白質(zhì)水解為活性絲氨酸蛋白酶FVIIa。TF作為FVIIa的必需輔因子而大幅提升FVIIa對其蛋白質(zhì)底物因子IX及X的催化效率。TF/VIIa復(fù)合體通過有限的蛋白質(zhì)水解而活化因子IX(FIX)及X(FX)，最后導(dǎo)致凝血酶產(chǎn)生及纖維蛋白分解。在疾病狀態(tài)下，例如動脈粥狀硬化或微血管移植、血管造形術(shù)、部署植入裝置(例如移植模、導(dǎo)管或動靜脈分流器)或動脈內(nèi)切開術(shù)的類侵入性外科程序后，TF引起的凝血可能引發(fā)血栓形成障礙而導(dǎo)致諸如心臟病發(fā)作、中風(fēng)、不穩(wěn)定性心絞痛、移植片衰竭或其它冠狀動脈疾病。
血栓形成同時亦可能并發(fā)各種血栓栓塞障礙及凝塞，分別例如肺栓塞(例如心房纖維顫動及栓塞、深度靜脈血栓形成等)及播散性血管內(nèi)凝血。體液操作亦可能引起不良性血栓，特別是在輸血或體液抽樣及涉及體外循環(huán)(例如心肺迂回補(bǔ)助外科手術(shù))及透析過程中。
有些抗凝血劑被用以減輕或避免與血栓形成有關(guān)的血凝塊。給予適當(dāng)?shù)目鼓獎┗蚱浠旌衔锍？山档突蛉コ?，它包含使用一種或多種香豆素衍生物(例如華法令(warfin)及二香豆醇)或帶電聚合物(例如肝磷脂、水蛭素或水蛭素類(hirulog))(參考例如上述的Gilman等人，R.J.Beigering等人，血液學(xué)年報，72177(1996)；J.D.Willerson，循環(huán)，94866(1996))。
有些具有抗血小板活性的抗體亦可用以減輕各種血栓形成。例如一種治療抗體ReoProTM即常用以減輕各種由血管造形術(shù)、心肌梗塞、不穩(wěn)定性心絞痛及冠狀動脈狹窄癥所引起的血栓栓塞障礙。此外，ReoProTM可作為降低心肌梗塞及心絞痛危險性的預(yù)防劑(J.T.Willerson，循環(huán)，94866(1996)；M.L.Simmons等人，循環(huán)，89596(1994))。
然而，使用先前的抗凝劑經(jīng)常會并發(fā)一些副作用例如出血、血栓形成復(fù)發(fā)、「白血塊」癥候群、過敏、新生兒缺陷、血小板減少及肝功能障礙。特別是長期給予抗凝劑可能提高患致命性疾病的危險性(參考例如上述的Gilman等人)。
蛋白質(zhì)性藥劑在本質(zhì)上較為安全，但一般限于用在急性癥狀的處理上，且給藥常限于非腸道用藥。此類藥劑一般認(rèn)為較不適合于慢性疾病(例如動脈粥狀硬化，即心臟病發(fā)作的主因)的長期治療，由于蛋白質(zhì)治療可以增加免疫反應(yīng)產(chǎn)生機(jī)率，其生產(chǎn)成本較高及/或有限的口服生物有效性。
因此亟需新式抗凝血藥劑。特別是需要可長期給藥以治療慢性癥狀如動脈粥狀硬化的新式抗凝血藥劑。
本發(fā)明更特別的方法包括給予治療上有效量的至少一種本發(fā)明的化合物或組合物。本發(fā)明化合物或組合物典型是給予需要此種治療的哺乳類動物，例如易患不良性血栓形成、已患該病或正從該病復(fù)原的人類患者，或已患由組織因子導(dǎo)致的疾病或障礙(例如心血管疾病、細(xì)胞增殖障礙、手術(shù)后并發(fā)癥或免疫功能障礙)、由該病復(fù)原或?qū)σ谆荚摬〉牟溉轭悇游铩?yōu)選化合物或組合物亦可用于治療或預(yù)防各種血栓形成所導(dǎo)致的公知障礙，例如公開于此的特別的障礙。
本發(fā)明亦包含一種可阻斷或抑制因子X及/或IX的組織因子依賴性活化作用的方法。該方法一般包含以TF阻斷化合物與組織因子接觸，從而抑制因子X或因子IX與組織因子或TF/VIIa的功能性復(fù)合體的形成。優(yōu)選TF阻斷化合物與組織因子結(jié)合從而抑制該功能性復(fù)合體的形成。根據(jù)本發(fā)明的抑制或防止該功能性復(fù)合體的形成，其應(yīng)用范圍相當(dāng)廣泛，包括哺乳類動物的上述疾病或障礙的治療，特別是已患該疾病或障礙或易患該病癥的人類。
在用于檢測的至少一項(xiàng)測試中，本發(fā)明的化合物一般具有優(yōu)良的阻斷活性，優(yōu)選的檢測方法為測量TF介導(dǎo)的血液凝集。更特別的測試為測量特異凝血因子的標(biāo)準(zhǔn)體外分析，其中該分析是公認(rèn)的在TF或TF相關(guān)復(fù)合體(如人類TF/VIIa復(fù)合體)存在下可提供最理想結(jié)果的分析。該分析中所提供的TF可為重組分子或由天然來源純化的分子，一般取決于所選擇的特異分析。
更特別的體外分析是檢測及測量特異凝血因子的活性，該凝血因子具有公認(rèn)的在人類TF或人類TF/VIIa復(fù)合體存在下會增強(qiáng)的活性。較令人感興趣的是測量因子X至Fxa和因子IX至FIXa的TF依賴性活化作用的標(biāo)準(zhǔn)體外分析。在此有時這些分析稱為“初級篩選分析”，或相關(guān)術(shù)語或詞組如“發(fā)現(xiàn)方法”，以意指它在篩選化合物分析中的優(yōu)選用途。
例如本發(fā)明的特別優(yōu)選化合物在測量因子X至FXa的TF依賴性激活作用的初級篩選分析中具有優(yōu)良的阻斷活性。另外的優(yōu)選化合物在測量因子IX至FIXa的TF依賴性激活作用的初級篩選分析中具有優(yōu)良的阻斷活性。
需了解詞組“優(yōu)良的阻斷活性”或相關(guān)詞組意為優(yōu)選使用本發(fā)明化合物以降低或抑制因子X至Fxa和/或因子IX至FIXa的凝血激活作用。優(yōu)選化合物為合成或半合成化合物，如以下公開的小分子化合物。以下提供關(guān)于初級篩選分析的更特別公開。
本發(fā)明優(yōu)選的小分子化合物的IC50(相對于適當(dāng)對照，抑制50％因子X活化作用所需濃度)約為100μM或更小，優(yōu)選約10μM或更小。另外對TF或TF/VIIa依賴性激活作用，在分析中優(yōu)選的化合物具有與其同等或大于約70％的抑制作用。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，初級篩選分析包含以下所有步驟1)在導(dǎo)致因子Xa形成的條件下將TF/VIIa復(fù)合體與因子X在適當(dāng)分析溶液中混合，2)將該溶液與可經(jīng)檢測標(biāo)識的因子Xa底物接觸；及3)檢測溶液中標(biāo)識的產(chǎn)物，此即為因子X活化作用的指標(biāo)。
該初級篩選分析的優(yōu)選用途是可有效地測量候選化合物降低或消除TF或TF/VIIa依賴性因子X活化作用的能力。該分析一般是有彈性的，且可根據(jù)需要修改，以測試化合物的阻斷因子X活化作用的能力。例如可在上述任一或多個步驟中加入候選化合物，但對許多篩選應(yīng)用來說在步驟1)中加入化合物是優(yōu)選的。
該方法中使用的優(yōu)選TF/VIIa復(fù)合物包括暴露于利于較好的暴露的TF阻斷位點(diǎn)狀況的TF。用于TF的分離及使用的更特異的條件提供如下。
如上所述，另一初級篩選分析為測量TF或TF/VIIa對因子IX的活化作用的標(biāo)準(zhǔn)體外分析。在此實(shí)施例中，優(yōu)選化合物具有約200μM或更小，優(yōu)選約10μM或更小的IC50(相對于適當(dāng)對照，抑制50％因子IX活化作用所需濃度)。在一優(yōu)選的實(shí)施方案中，測量因子IX活化作用的標(biāo)準(zhǔn)分析包含以下所有步驟1)在有利于因子FIXa形成的條件下將TF/VIIa復(fù)合體與因子IX在適當(dāng)分析溶液中混合，2)將該溶液與可經(jīng)檢測標(biāo)識的因子FIXa底物接觸；及3)檢測溶液中的標(biāo)識產(chǎn)物，此即為因子IXa活化作用的指標(biāo)。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，該篩選分析可有效地測量候選化合物的降低或消除因子IX活化作用的能力。該分析一般對TF或TF/VIIa依賴性FIXa形成作用敏感，可用于多種方面以測試所需化合物的阻斷因子IX活化作用的能力。例如可在上述任一或多個步驟中加入欲進(jìn)一步測試的化合物，但對大多數(shù)篩選應(yīng)用來說，在步驟1)中加入化合物是優(yōu)選的。典型的本發(fā)明優(yōu)選化合物在此篩選分析的實(shí)施例中具有優(yōu)良的阻斷活性。
本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的初級篩選為測量外源凝血途徑的凝血酶原時間(PT)測試或分析。該測試在領(lǐng)域中是標(biāo)準(zhǔn)的并且通常用于測量生物樣品如血漿的凝血。
本發(fā)明更特別優(yōu)選的化合物在PT分析中具有優(yōu)良的抑制活性。典型的優(yōu)選化合物在PT分析中可增加至少約5％至約10％(秒)的血漿凝集時間(相對于適當(dāng)對照)。優(yōu)選的PT分析用途是測量TF調(diào)節(jié)的血漿凝集時間，其實(shí)施如下1)在導(dǎo)致血漿凝血的條件下提供在適當(dāng)分析溶液中的經(jīng)檸檬酸鹽處理的血漿，2)在適于引發(fā)血漿凝血的條件下在該溶液中混合適當(dāng)?shù)慕M織因子制劑及鈣，及3)測量在該溶液中的凝血時間以測定凝血酶原凝血時間。
PT分析的優(yōu)選用途為測量受試化合物延長凝血酶原凝血時間的能力。PT分析為本領(lǐng)域已知的，可以以單獨(dú)或合并方式使用，測量化合物增加或阻斷凝血酶原凝血時間的能力或潛力。
本發(fā)明的特別優(yōu)選化合物在至少一種上述初級分析(因子X、因子IX活化作用及/或PT測試)中具有優(yōu)良的活性。
在任一種或多種上述初級篩選分析中，至少在許多案例中的優(yōu)良的TF或TF/VIIa依賴性抑制作用可歸因于該化合物對TF/VIIa及/或FXa活性的效果。正如所討論的那樣，本發(fā)明的優(yōu)選化合物為TF拮抗劑，且在測量TF介導(dǎo)的優(yōu)選體外凝血分析中具有優(yōu)良的阻斷活性。因此一般希望進(jìn)一步測量在一種或多種上述初級篩選分析中，且在至少一種及優(yōu)選多于一種的下述“二級篩選分析”中具有優(yōu)良阻斷活性的受試化合物。這些二級分析可促進(jìn)對具有所需TF拮抗劑活性的化合物進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定與選擇，例如刪除具有非期望的其它活性的化合物，如具有蛋白酶活性者。
可根據(jù)本發(fā)明施行多種二級分析以進(jìn)一步評估初級分析所鑒定的化合物，例如進(jìn)一步評估初級分析所鑒定的活性，或測定某種非期望活性的存在。例如，本發(fā)明另外優(yōu)選的化合物在其它非最理想化測量TF拮抗性的二級篩選分析中，具有降低的或可忽略的活性。也就是說，這些二級分析未必是TF依賴性的。這些分析的特別實(shí)例包括那些設(shè)定為測量凝血酶、胰蛋白酶或被活化的因子如FXa、FIXa或FVIIa的。優(yōu)選化合物在活化部份促凝血酶原激酶時間(APTT)測試或分析中具有可以忽略的活性。這些二級篩選分析的更特異的實(shí)例將在以下的討論及實(shí)施例中提供。
在此公開的任一或全部分析(包含上述一級篩選及二級測試中)中，侯選化合物可作為該分析中唯一的活性藥劑或可與其它試劑(包含本發(fā)明的其它化合物或組合物)合并提供。在該實(shí)施方案中，篩選分析在檢測中特別有用，優(yōu)選化合物、藥劑或組合物之間的定量協(xié)同作用。
此處公開了多種人類組織因子的抑制物。這些化合物可用于此處所述的篩選分析及本發(fā)明的治療及預(yù)防方法。
例如，此處公開的某些化合物是此處有時稱為“TF拮抗劑”、“TF阻斷化合物”或類似的詞組。本發(fā)明的優(yōu)選化合物為小分子，不包括肽類。
優(yōu)選TF拮抗劑見美國專利申請案第09/406269號(1999年9月24日申請)，及相應(yīng)的PCT申請案第PCT/US99/22238號(1999年9月24日申請)，二者在此引入以供參考。該申請案公開了特別的磷酸酯化合物，包含芳基取代的磷酸酯化合物。
發(fā)明人等已經(jīng)發(fā)現(xiàn)可用于本發(fā)明方法中的其它有用的TF拮抗劑化合物。
更特別的，本發(fā)明優(yōu)選的化合物包含一個或多個特定極性官能基，特別是羧基(-COOH)、酰胺基(即在非環(huán)狀或環(huán)狀基團(tuán)中的-C(＝O)-N-及其互變異構(gòu)物)、硫代酰胺基(即在非環(huán)狀或環(huán)狀基中的-C(＝S)-N-及其互變異構(gòu)物)、亞磺?；?-S(O)-)、磺?；?-S(O)2-)、磺酸根(SO3)或硝基(NO2)。本發(fā)明優(yōu)選的化合物包括帶有芳族基團(tuán)的極性官能基，特別是碳環(huán)芳基如苯基、萘基等，或具有1至3個分離或稠合環(huán)，每環(huán)有5至8個原子及1至3個雜(N、O或S)原子的雜芳基。本發(fā)明還包括非芳族化合物。
更特別地，本發(fā)明的優(yōu)選化合物包含下列通式I所示的Ar-(CXY)m-(Het)0 or 1-(CX1Y1)n-C(Z)p-(T)3-pIAr為選擇性取代的碳環(huán)芳基或選擇性取代的雜芳基；Het為選擇性取代的N、O或S；各T獨(dú)立為極性官能基如酰胺基(即在非環(huán)狀或環(huán)狀基中的-C(＝O)-N-及其互變異構(gòu)物)、硫代酰胺基(即在非環(huán)狀或環(huán)狀基中的-C(＝S)-N-及其互變異構(gòu)物)、羧基、亞磺?；?、磺酰基、磺酸根(SO3)或硝基；各X、各Y、各X’、各Y’及各Z個別獨(dú)立為氫原子；鹵原子；羥基；氫硫基；胺基；優(yōu)選具有1至約12個碳原子，更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷基；優(yōu)選具有約2至12個碳原子，更佳具有約2至6個碳原子的選擇性取代的烯基；優(yōu)選具有約2至12個碳原子，更佳具有約2至6個碳原子的選擇性取代的炔基；優(yōu)選具有1至約12個碳原子，更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷氧基；優(yōu)選具有約1至12個碳原子，更佳具有約1至6個碳原子的選擇性取代的烷硫基；優(yōu)選具有約1至12個碳原子，更佳具有約1至6個碳原子的選擇性取代的烷基亞磺?；?；優(yōu)選具有約1至12個碳原子，更佳具有約1至6個碳原子的選擇性取代的烷基磺?；?；或優(yōu)選具有約1至12個碳原子，更佳具有約1至6個碳原子的選擇性取代的烷胺基；m為0(其中雜原子直接取代于芳基上)至4的整數(shù)，優(yōu)選為0、1或2；n為0至4的整數(shù)，優(yōu)選為1或2；p為1(其中該化合物具有兩個T基)或2(其中該化合物具有單個T基)；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
另外的優(yōu)選化合物包含上列化學(xué)式其中Ar為碳環(huán)芳基，特別是苯基者，如下列化學(xué)式II化合物 其中X、Y、Het、T、X’、Y’、Z、m及p的定義均同上述化學(xué)式I；其中各R1獨(dú)立為鹵原子(F、Cl、Br、I)；胺基；羥基；硝基；羧基；氫硫基；優(yōu)選具有1至約20個碳原子，更佳具有1至約10個碳原子，再更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷基；優(yōu)選具有2至約20個碳原子，更佳具有2至約10個碳原子，再更佳具有2至約6個碳原子的選擇性取代的烯基；優(yōu)選具有2至約20個碳原子，更佳具有2至約10個碳原子，再更佳具有2至約6個碳原子的選擇性取代的炔基；優(yōu)選具有1至約20個碳原子，更佳具有1至約10個碳原子，再更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷氧基；優(yōu)選具有1至約20個碳原子，更佳具有1至約10個碳原子，再更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷硫基；優(yōu)選具有1至約20個碳原子，更佳具有1至約10個碳原子，再更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷基亞磺?；粌?yōu)選具有1至約20個碳原子，更佳具有1至約10個碳原子，再更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷基磺酰基；優(yōu)選具有1至約20個碳原子，更佳具有1至約10個碳原子，再更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷胺基；優(yōu)選具有1至約20個碳原子，更佳具有1至約10個碳原子，再更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷?；贿x擇性取代的碳環(huán)芳基；或選擇性取代的芳烷基；q為0(其中苯環(huán)位置完全被氫原子取代)至5的整數(shù)，m優(yōu)選為0、1、2或3；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
上列化學(xué)式I及II化合物中，另外優(yōu)選化合物包含Het基為選擇性取代的氮原子或氧原子者，例如下列化學(xué)式III及IV化合物 其中各化學(xué)式III及IV中，T、R1、X、Y、X’、Y’、Z、q、m、n及p的定義均同上列化學(xué)式I及II中的定義；W為氫原子；優(yōu)選具有1至約8個碳原子，更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷基；優(yōu)選具有2至約8個碳原子，更佳具有2至約6個碳原子的選擇性取代的烯基；優(yōu)選具有2至約8個碳原子，更佳具有2至約6個碳原子的選擇性取代的炔基；優(yōu)選具有1至約8個碳原子，更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷氧基；優(yōu)選具有1至約8個碳原子，更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷硫基；優(yōu)選具有1至約8個碳原子，更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷基亞磺酰基；選擇性取代的烷基磺?；?；選擇性取代的烷胺基；優(yōu)選具有1至約8個碳原子，更佳具有1至約6個碳原子的選擇性取代的烷?；?；選擇性取代的碳環(huán)芳基；或選擇性取代的芳烷基；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
另外的化學(xué)式III化合物包含其中氮原子直接為(中間無碳原子或其它原子)苯環(huán)取代基者，化學(xué)式IV的特別優(yōu)選化合物包含其中氧原子直接為環(huán)取代基或具有單個亞甲基者，例如下列化學(xué)式IIIa及Iva的化合物 其中T、R1、X’、Y’、n及q的定義均同在上列化學(xué)式I及II中的定義；及這些化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。
另外的本發(fā)明的優(yōu)選化合物包括那些具有選擇性取代的胺部份的化合物，例如下列化學(xué)式V的化合物(R2)2N-(CXY)m1-(Het)0 or 1-(CX1Y1)n-C(Z)p-(T)3-pV其中X、Y、Het、X’、Y’、Z、T、n、g、p各定義均同在上列化學(xué)式I中的定義；各R2獨(dú)立為氫原子、烷基，典型為C1-8烷基、芳基，典型為碳環(huán)芳基如苯基或萘基、等；m1為0(其中雜原子直接由胺基取代)至4的整數(shù)，優(yōu)選為0、1或2。依照化學(xué)式V的更佳化合物包括其中各X、Y、X’及Y’獨(dú)立為氫原子；Het為O；Z為羥基；及各m1、n及p為1者。也包含化學(xué)式V所示化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的化合物包括具有至少兩個芳環(huán)的多環(huán)基結(jié)構(gòu)的多環(huán)基。更佳為下列化學(xué)式VI化合物Ar1-(CXY)m2-(Het)0 or 1-(CX1Y1)n-C(Z)p-(T)3-pVI其中各X、Y、X’、Y’、Z、n及p的定義同在上列化學(xué)式I中的定義，且Ar1表示多環(huán)芳基，優(yōu)選為具有介于約2至約3個芳環(huán)如萘基、苊基(acenapthyl)等的選擇性取代的碳環(huán)芳基或雜芳基，m2為0(其中多環(huán)基直接由雜原子取代)至4的整數(shù)，優(yōu)選為0、1或2；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
另外的上列化學(xué)式V的優(yōu)選化合物包括其中Ar1基表示選擇性取代的聯(lián)苯基者，例如下列化學(xué)式VIa的優(yōu)選化合物(R1)q1-Ar1-(CXY)m2-(Het)0 or 1-(CX1Y1)n-C(Z)p-(T)3-pVIa其中R1的定義同在上列化學(xué)式II中所定義的；各X、Y、X’、Y’、Z、g、n及p的定義同上列化學(xué)式I中的定義；m2的定義同在上列化學(xué)式VI中的定義；q1為0(其中聯(lián)苯基完全為氫原子取代)至7的整數(shù)，優(yōu)選為0、1、2、3或4；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
在上列化學(xué)式VIa的一個更優(yōu)選的實(shí)施方案中，Ar1為取代的聯(lián)苯基，R1為羥基，m2及n各為0，Het為氮原子，Z為氫，p為1，及q1為1、2或3；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
另外的本發(fā)明的優(yōu)選化合物包括脂環(huán)或雜脂環(huán)部份，例如下列化學(xué)式VII的化合物B-(CXY)m3-(Het)0 or 1-(CX1Y1)n-C(Z)p-(T)3-pVII其中B為優(yōu)選具有約5至約8位環(huán)，可能有一或多個內(nèi)環(huán)雙鍵的選擇性取代的脂環(huán)族或雜脂環(huán)族基；各T、X、Y、X’、Y’、Z、n及p的定義同上列化學(xué)式I，m3為0(其中雜原子直接由環(huán)狀烴基取代)至4的整數(shù)，優(yōu)選為0、1或2；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
另外的優(yōu)選化合物包括上列化學(xué)式VII的那些化合物，其中B基優(yōu)選為環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)戊二烯基、環(huán)己二烯基、環(huán)戊炔基或環(huán)己炔基，例如下列化學(xué)式VIIa化合物(R1)q2-B-(CXY)m3-(Het)0 or 1-(CX1Y1)n-C(Z)p-(T)3-pVIIa其中R1的定義同上列化學(xué)式II，各X、Y、X’、Y’、Z、g、n及p的定義同上列化學(xué)式I，m3的定義同上列化學(xué)式VII，q2為0(其中B基環(huán)原子完全由氫原子取代)至10的整數(shù)，優(yōu)選為0、1、2或3；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
在上列化學(xué)式VIIa的一個更佳實(shí)施方案中，R1為羥基；B為環(huán)己基或環(huán)戊基；m3及n各為0；g為1；Het為氮原子；Z為氫原子；q2為1；p為2；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
另外的本發(fā)明的優(yōu)選化合物除了上述的T基外，還包括二酰亞胺如丁二酰亞胺或苯鄰二甲酰亞胺。例如本發(fā)明的優(yōu)選二酰亞胺化合物包含下列化學(xué)式VIII者(T’)q3-D-(T”)q4VIII其中T’及T”各為相同或不同，其定義同上列化學(xué)式I中的T；D為選擇性取代的二酰亞胺基如丁二酰亞胺、苯鄰二甲酰亞胺或二甲酰亞胺，選擇性在D與T’或T’’基中的一個或二個之間具有C1-6亞烷基連接；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
上列化學(xué)式VIII的特別優(yōu)選化合物包括其中T’含有直接連接至D基的氮原子的氧原子者；T”為羧基、亞磺?；蚧酋；?；q3及q4各為1；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
進(jìn)一步的本發(fā)明優(yōu)選化合物為下列化學(xué)式IX者(V)-(C＝O)-(Het)0 or 1-Ar-(R1)q5IX其中V為具有1至3個分離或稠合環(huán)，每環(huán)有5至8個原子及1至3個雜(N、O或S)原子的雜脂環(huán)或雜芳基；Ar、Het各定義同上列化學(xué)式I；R1定義同上列化學(xué)式II；q5為0(其中Ar基完全為氫原子取代)至5的整數(shù)，優(yōu)選為0、1、2或3；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
化學(xué)式IX的特別優(yōu)選化合物包含其中V為選擇性取代的呋喃基、異噁唑基、吡咯基(pyrole)、咪唑基、吡唑基、噻吩基、異噻唑基、呋咱基或三唑并苯基；及/或若有Het則為氧原子。
本發(fā)明更進(jìn)一步優(yōu)選的化合物包含下列化學(xué)式IXa、IXb、IXc及IXd者 其中各R3a、R3b、R3c及R3d的定義均同上列化學(xué)式II中的R1，但R3a、R3b、R3c及R3d可以相同或不同；Het1及Het2個別獨(dú)立為N、O或S，為相同或不同；各Ar2a、Ar2b、Ar2c及Ar2d獨(dú)立為選擇性取代的碳環(huán)芳基或選擇性取代的雜芳基，可相同或不同；V的定義同上列化學(xué)式IX；q6為0(其中Ar2a基為氫原子取代)至5的整數(shù)，優(yōu)選為0、1、2或3；q7與q6相同，且q6+q7不大于5；q8為0(其中Ar2b基為氫原子取代)至5的整數(shù)，優(yōu)選為0、1、2或3；q9與q8相同，但q7+q8不大于5；及其藥學(xué)上可接受的鹽。 其中R3e的定義同上列化學(xué)式II的R1，但R3a、R3b、R3c、R3d及R3e可以相同或不同；q10為0(其中Ar2a基為氫原子取代)至5的整數(shù)，優(yōu)選為0、1、2或3；q11及q12個別獨(dú)立定義同于上述q10且q10+q11+q12不大于5；q13為0(其中Ar2c基為氫原子取代)至5的整數(shù)，優(yōu)選為0、1、2或3；q14與上述q13相同，但q13+q14不大于5；及其藥學(xué)上可接受的鹽。 其中R3f的定義同上列化學(xué)式II中的R1，但R3f也可以是具有約5至約8個碳原子，優(yōu)選具有約5至約6個碳原子的選擇性取代的環(huán)烷基，及R3f與上述R3a、R3b及R3c可以相同或不同；q7為0(其中Ar2a基為氫原子取代)至5的整數(shù)，優(yōu)選為0、1、2或3，但化學(xué)式IXc中的q6+q7不大于5；q15為0(其中碳原子與氫原子連接)至2的整數(shù)；m4為0(其中Ar2a基被Het1取代或(CXY)基與連接至Ar2a、Het1及R3f基的碳原子取代)至4的整數(shù)，優(yōu)選為0、1或2；及其藥學(xué)上可接受的鹽。 其中各(V2a)及(V2b)的獨(dú)立定義同上列化學(xué)式Ixb中的V，但V2a及V2b可以相同或不同，但V2a及V2b二者皆不為0；m6為0(其中Ar2a基直接連接至-CH-基)至4的整數(shù)，優(yōu)選為0、1或2；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
上列化學(xué)式IXa的特別優(yōu)選化合物包括那些其中的V包括被選擇性取代的碳環(huán)芳基或選擇性取代的雜芳基(優(yōu)選為苯基)取代的吡啶基、吡嗪基、嘧啶基或三嗪環(huán)的化合物。
上列化學(xué)式IXb的特別優(yōu)選化合物包括其中Ar2a、Ar2b及Ar2c各為經(jīng)取代的苯基；V為選擇性取代的4-或5-吡唑啉酮基；q10、q11、q12及q13各為1；Het1及Het2各為氮原子；R3a、R3b及R3c各為鹵原子，優(yōu)選為氯原子；各R3d及R3e為-NO2+基者；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
上列化學(xué)式IXc的特別優(yōu)選化合物包括其中Ar2a及Ar2b各為苯基，R1f為選擇性取代的環(huán)戊基或環(huán)己基，各q1、q2、q3、q4、q5、q6為1，各Het1及Het2為氮原子，X及Y均為氫原子；m、m1及m2各為1，R1a、R1b及R1c各為羥基者；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
上列化學(xué)式IXd的特別優(yōu)選化合物包含其中Ar3a為選擇性取代的苯基；R3a為鹵原子，優(yōu)選為溴原子；X及Y均為氫原子；m6為1；各V1a及V1b包括至少一個氮原子，優(yōu)選為吲哚基、異吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、或三唑并苯基者；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明附加優(yōu)選的TF拮抗劑化合物包括芳基及脂環(huán)基，例如下列化學(xué)式X的化合物Ar3-(CXY)m7-(Het)0 or 1-(V)X
其中Ar3為選擇性取代的碳環(huán)芳基或雜芳基，優(yōu)選為選擇性取代的喹啉基；各X、Y及Het定義同于上列化學(xué)式I，且X及Y亦可共同形成羰基；m7為0(其中Ar3基直接連接至Het)至4的整數(shù)，優(yōu)選為0、1或2；V定義同于上列化學(xué)式IXa；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明還包括不含芳基取代的磷酸酯化合物。該磷酸酯化合物在上述的美國專利申請案第09/406269號(1999年9月24日申請)有公開。優(yōu)選的非芳族磷酸酯化合物具有一、二或三個磷酸根(即PO3)及3、4、5或6至約25個碳原子，且非環(huán)狀及/或脂環(huán)部份具有一或多個非芳族碳-碳雙鍵或三鍵，典型為零、一、二或三個碳-碳雙鍵或三鍵。該化合物亦可能含有一個或多個雜原子(N、O或S)，典型為零、一、二或三個雜原子。例如在美國專利申請案第09/406269號公開的alendronic acid(Fosamax)，是為有效的TF拮抗劑化合物。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物亦包含氮環(huán)化合物，特別是含有至少一個另外的雜原子(N、O或S)的含氮環(huán)化合物，典型為一個雜原子且其它環(huán)中成員為碳原子。典型地，該環(huán)狀化合物為非芳族，雖然它可能包含一或多個另外的分離或稠合的芳族或非芳族環(huán)。典型地，含氮環(huán)具有5至約10個環(huán)原子，更典型為5、6、7或8個環(huán)原子，再更典型為5或6個環(huán)原子。該氮環(huán)化合物含有下列化學(xué)式XI 其中R1、R2、R3、X及Y的各自獨(dú)立定義同上列化學(xué)式II中的R1；或本化學(xué)式XI的R1及R2可共同形成稠合的具有1-3個稠環(huán)或分離環(huán)的碳環(huán)芳基(例如苯基或萘基)、脂環(huán)基(例如環(huán)己基)、雜脂環(huán)基或雜芳基。該雜脂環(huán)基或雜芳基具有適當(dāng)?shù)碾s芳基，或雜芳基具有1至3個環(huán)，每環(huán)有3至8個環(huán)成員以及1至約3個雜原子(N、O或S)，包括例如，香豆素基、喹啉基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、吲哚基、苯并呋喃基及苯并噻唑基；
Het為氧原子、選擇性取代的N、S、S(O)或S(O)2，優(yōu)選為氧原子；X為1(5員環(huán))、2(6員環(huán))、3(7員環(huán))或4(8員環(huán))；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物亦包含經(jīng)取代的哌嗪化合物，例如下列化學(xué)式XII的化合物 其中各R1的獨(dú)立定義同上述化學(xué)式II的R1；x為由1至10的整數(shù)；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明另外的化合物可與組織因子(TF)結(jié)合而使FX無法有效地與TF/因子VIIa復(fù)合體結(jié)合，因此FX無法有效地轉(zhuǎn)變?yōu)槠浠罨男问?FXa)。本發(fā)明的優(yōu)選化合物通過有效地阻斷FX與TF分子結(jié)合，抑制TF的功能。此處提及的“本發(fā)明化合物”包括所有化學(xué)式I至XII的化合物。
在優(yōu)選的方面，本發(fā)明提供抑制哺乳類動物的凝血及血凝塊形成的方法、抑制哺乳類動物的凝血酶生成的方法及治療及預(yù)防哺乳類動物的血栓栓塞障礙的方法。本發(fā)明方法一般包括將治療上有效量的本發(fā)明化合物給予哺乳類動物如靈長類動物，特別是人類。
本發(fā)明化合物特別可用以減輕受組織因子(TF)影響的各種疾病?！坝绊憽币辉~是指該疾病的嚴(yán)重性或持續(xù)期間因?yàn)門F的存在(依照公認(rèn)的分析或測試)而增加。特別的疾病包含血栓形成(尤其是再狹窄的預(yù)防或抑制)，或侵入性醫(yī)療程序(如動脈或心臟外科手術(shù)，例如血管造形術(shù))后的其它血栓形成，包含矯形或其它外科手術(shù)并發(fā)的深度靜脈血栓形成的預(yù)防。本發(fā)明化合物亦可用以降低或甚至有效地消除使用醫(yī)療器材(例如導(dǎo)管、移植?；蚱渌t(yī)療裝置)所引發(fā)的凝血。本發(fā)明化合物亦可用于預(yù)防心肌梗塞的長期危險性。本發(fā)明化合物亦可用以治療下列疾病并發(fā)的血栓形成情形急性前骨髓細(xì)胞白血病、糖尿病、多發(fā)性骨髓瘤、膿毒性休克并發(fā)的播散性血管內(nèi)凝血、感染并發(fā)的暴發(fā)性紫癬病、成人呼吸窘迫綜合征、不穩(wěn)定性心絞痛、及主動脈瓣或血管修復(fù)術(shù)并發(fā)的血栓形成并發(fā)癥。
本發(fā)明化合物的另外用途包含其在動脈粥狀硬化、炎癥的預(yù)防與治療中的應(yīng)用，及其作為抗血管生成劑，尤其是對癌癥的治療，特別是固著性癌癥例如存在于肺、乳房、肝、腦或其它組織中的癌癥。
本發(fā)明化合物亦可用作哺乳類動物(特別是人類)的體外循環(huán)的抗凝血劑。在該方法中，在體外循環(huán)之前或期間，如可能伴隨心肺旁路外科手術(shù)、器官移植外科手術(shù)或其它長時間性外科手術(shù)，給予哺乳類動物以足以抑制凝血的量的本發(fā)明的一種或多種化合物。
本發(fā)明化合物亦可用于體內(nèi)診斷方法，包含患者的體內(nèi)診斷影象。
本發(fā)明化合物亦可用于體外分析，例如選擇性抑制因子X活化作用。本發(fā)明的該分析可用以測定患者是否存在或有可能存在凝血或血凝塊。
本發(fā)明還提供了包括有效量的一種或多種本發(fā)明化合物及藥學(xué)上可接受的載劑的藥學(xué)組合物。
本發(fā)明的其它方面論述于下。
圖2(表1)顯示本發(fā)明的各種化合物的測試數(shù)據(jù)。
發(fā)明的詳細(xì)說明如上所述，本發(fā)明的特征為化合物，如醫(yī)藥活性的化合物，尤其是利用或包括一種或多種該化合物的醫(yī)藥組合物。優(yōu)選化合物是這里公開的標(biāo)準(zhǔn)體外篩選分析測定證實(shí)有效的TF拮抗劑。尤其優(yōu)選的化合物可以用于治療及預(yù)防不良性血栓形成。本發(fā)明具有廣泛的應(yīng)用范圍，包含用于篩選具有顯著TF拮抗活性的候選化合物。
如上所述，本發(fā)明的優(yōu)選化合物及組合物為優(yōu)良的TF拮抗劑，在至少一種及優(yōu)選全部初級篩選分析(因子X或因子IX的TF或TF/VIIa依賴性活化作用及PT分析)中具有顯著的阻斷活性。尤其優(yōu)選的化合物在前述活化部份促凝血酶原激酶時間(APTT)分析中不具有顯著的阻斷活性。本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的化合物為在其它二級分析(如測量胰蛋白酶、凝血酶、因子Xa、因子IXa、因子VIIa的活性者)中具有不顯著的活性，如下所述。
這里公開的標(biāo)準(zhǔn)體外分析是本領(lǐng)域中已知的且一般是有一定自由度的。此外，該分析可根據(jù)需要方便地操作以檢測及定量TF拮抗活性。即使在其它具有優(yōu)良抗血小板、抗血栓形成或抗凝血活性的治療或?qū)嶒?yàn)藥劑存在下，該分析與本發(fā)明的受試化合物或組合物的分析是一致的。此外，該分析可用以測試公認(rèn)的抗TF抗體的效果。在這些實(shí)施方案中，標(biāo)準(zhǔn)體外分析尤其可用以檢測，優(yōu)選測量本發(fā)明化合物或組合物顯示的顯著的合作或協(xié)同效果。
更特別的前述初級篩選分析的實(shí)施例如下。該分析為測量TF/VIIa依賴性因子X活化作用的標(biāo)準(zhǔn)。在該分析中優(yōu)選的化合物的IC50低于約100μM，優(yōu)選低于約10μM，該化合物具有優(yōu)良的阻斷活性的例證。在一個更佳的實(shí)施方案中，初級篩選優(yōu)選包含下列步驟1)在適當(dāng)分析溶液中混合約0.1nM(脂化的)人類重組TF/VIIa復(fù)合體、約180nM人類FX以及介于約0.5微升至約10微升之間的至少一種受試物(選擇性溶解于適當(dāng)載劑如水或二甲基亞砜(DMSO)中，在37℃培養(yǎng)數(shù)分鐘至約一小時或更久，2)以適當(dāng)螯合劑如乙二胺四乙酸(EDTA)與溶液接觸以停止因子X活化作用，3)用可檢測含量的FXa的特異色原底物(例如Spectrozyme FXa或S-2765)與溶液接觸，在37℃培養(yǎng)；及4)檢測溶液中產(chǎn)生的發(fā)色基團(tuán)，即為因子X活化作用的指示劑。
此處提及的“測量TF/VIIa依賴性因子X活化作用的標(biāo)準(zhǔn)分析”或類似詞組優(yōu)選是指以上步驟1)-4)。涉及該分析的較特異的公開見以下實(shí)施例1，其中測量TF/VIIa依賴性因子X活化作用的標(biāo)準(zhǔn)分析特別適用于FXa產(chǎn)生的發(fā)色團(tuán)在405nm的分光光度檢測。
用于該方法的優(yōu)選TF/VIIa復(fù)合體含有已經(jīng)暴露于適于展示較好的TF阻斷位點(diǎn)的TF。該TF分子可以以一種或幾種方法的結(jié)合得到。在一種方法中，人類TF是從生產(chǎn)過剩的不死細(xì)胞株或來自人腦的丙酮粉末所得到。TF優(yōu)選是在至少一種非離子性界面活性劑如TRITON_X-100(聚氧乙烯(10)異辛基苯基醚)的存在下在適當(dāng)?shù)柠}及pH條件(例如100mM NaCl及pH8.0)下分離的。非離子性界面活性劑的優(yōu)選量根據(jù)其用途而不同，但一般為約0.05％至約0.5％(w/v)之間的量。關(guān)于分離人類TF的較特異信息見以下實(shí)施例1。
另外優(yōu)選的TF暴露于標(biāo)準(zhǔn)分析的條件，以測量TF/VIIa依賴性因子X的活化作用。關(guān)于該標(biāo)準(zhǔn)分析的較明確公開見以下實(shí)施例1。
另外的本發(fā)明優(yōu)選化合物于測量TF/VIIa依賴性因子IX活化作用的其它初級篩選分析中具有優(yōu)良的阻斷活性。于該分析中具有小于約200μM及優(yōu)選小于約10μM的IC50的優(yōu)選化合物即為該分析的優(yōu)良阻斷活性的例證。于一較特別實(shí)施方案中，標(biāo)準(zhǔn)分析優(yōu)選是包含下列步驟1)在適當(dāng)分析溶液中混合約0.7nM TF/VIIa復(fù)合體和300nM因子IX及1000nm因子X，及介于約0.5微升至約10微升之間的至少一種受試物(選擇性溶解于適當(dāng)載劑如水或二甲基亞砜(DMSO)，溶液在適于形成FIXa及FXa的條件下于37℃培養(yǎng)數(shù)分鐘至約一小時；2)以適當(dāng)螯合劑如EDTA與溶液接觸以停止FIX活化作用；3)以FXa特定性色原底物(例如Spectrozyme FXa)與溶液接觸，于37℃培養(yǎng)；及4)檢測溶液中的發(fā)色基團(tuán)，作為因子IX活化作用的指標(biāo)。
此處提及的“測量TF/VIIa依賴性因子X活化作用的標(biāo)準(zhǔn)分析”或類似術(shù)語或詞組是明確指以上步驟1)-4)。特別適于優(yōu)選發(fā)色基團(tuán)在405nm的分光光度檢測的標(biāo)準(zhǔn)分析的較明確的舉例見于以下實(shí)施例1。
如上所述，另外的本發(fā)明優(yōu)選化合物于PT分析中具有優(yōu)良的對凝血時間的抑制作用。凝血時間優(yōu)選是相對于適當(dāng)對照組增加約20％至至少100％，更佳是增加約20％至至少500％。凝血時間一般是以秒測量。優(yōu)選的PT分析典型是通過加入適量(例如約1至3nM)的脂化的組織因子至包含傳統(tǒng)經(jīng)檸檬酸鹽處理的血漿的分析溶液而施行的。PT分析是測量TF介導(dǎo)的血漿凝血時間，優(yōu)選是通過實(shí)施下列步驟而施行的1)在適當(dāng)分析溶液中提供約0.1毫升的經(jīng)檸檬酸鹽處理的人類血漿，并將其與介于0.5微升至10微升之間的至少一種受試化合物(選擇性溶解于適當(dāng)載劑如水或二甲基亞砜(DMSO))混合，將其在室溫下培養(yǎng)約3至10分鐘，
2)將約0.2毫升(約1-3nM重組人類組織因子)及約5-10mM的鈣混入該溶液中以引發(fā)血漿凝血；及3)測量血漿凝血時間以測定凝血酶原凝血時間(PT)。
此處提及的“標(biāo)準(zhǔn)PT分析”或類似詞組或術(shù)語是特別指以上步驟1)-3)。較明確的關(guān)于進(jìn)行PT分析的公開亦見于威廉血液學(xué)，第5版(Beutler，E.等人編著)，McGraw-Hill，Inc.健康職業(yè)部門，紐約。
如上所述，本發(fā)明提供各種用于檢測的分析，優(yōu)選測量本發(fā)明的優(yōu)選化合物拮抗優(yōu)良TF活性的能力。亦如上所述，體外篩選分析的特定標(biāo)準(zhǔn)在此有時是稱為“二級篩選分析”，以表示前述一種或多種或全部的初級篩選分析的優(yōu)選用途。該特別的二級篩選分析與一種或多種初級篩選分析聯(lián)合實(shí)施可提供廣大范圍的具有優(yōu)良抗TF活性的有用化合物。
這里公開的是二級篩選分析，它包括那些最優(yōu)檢測及優(yōu)選測量因子VIIa(FVIIa)、因子IXa(FIXa)、因子Xa(FXa)、凝血酶、胰蛋白酶或盧賽爾氏(Russell’s)蛇毒(RVV)的催化活性者。在大多數(shù)例子中，這些分析的最理想實(shí)施不需加入TF。本發(fā)明的優(yōu)選化合物是特異的TF拮抗劑，且在這些分析中一般具有實(shí)質(zhì)上降低或可忽略的活性。前述的二級篩選測試與初級及優(yōu)選二級篩選分析的聯(lián)合實(shí)施可促進(jìn)具有特異抗TF活性的優(yōu)選化合物的選擇。此處提及的關(guān)于這些二級篩選分析的“降低”或“可忽略”的活性是指由適當(dāng)對照組(如水或DMSO)顯示的約2％至約10％之間的活性。
如上所述，本發(fā)明提供廣大范圍的用以治療或預(yù)防不良性血栓形成的醫(yī)藥活性化合物及組合物。優(yōu)選的化合物為組織因子(TF)拮抗劑，且優(yōu)選可明確阻斷由人類組織因子/因子VIIa復(fù)合體催化的人類因子X及IX的活化作用。本發(fā)明的舉例化合物包含上述化合物，包含于上列化學(xué)式中。
上列化學(xué)式中，本發(fā)明化合物(包括例如化學(xué)式I至XII，包含定義如上的“次”化學(xué)式IIIa、IVa、VIa、VIIa、IXa、IXb、IXc、IXd)的鹵原子取代基為F、Cl、Br及I。用于此處的術(shù)語烷基，除非另行更改，否則即指環(huán)狀及非環(huán)狀基這兩者，但環(huán)狀基包括至少三個碳環(huán)原子。脂環(huán)烷基一般為優(yōu)選。本發(fā)明化合物的烯基及炔基具有一或多個不飽和鍵，典型的是1至約3或4個不飽和鍵。用于此處的術(shù)語“烯基”及“炔基”亦指環(huán)狀及非環(huán)狀基這兩者，但一般優(yōu)選的是直鏈或分枝的非環(huán)狀基。本發(fā)明化合物的烷氧基具有一個或多個氧原子連接，典型的是1至約5或6個氧原子連接。本發(fā)明化合物的烷硫基具有一或多個硫醚連接，典型的是1至約5或6個硫醚連接。本發(fā)明化合物的烷基亞磺酰基具有一個或多個亞磺?；?SO)連接，典型的是1至約5或6個亞磺?；B接。本發(fā)明化合物的烷基磺?；哂幸粋€或多個磺酰基(SO2)連接，典型的是1至約5或6個磺酰基連接。本發(fā)明化合物的優(yōu)選烷胺基包括具有一個或多個一級、二級和/或三級胺基者，優(yōu)選是1至約3或4個胺基。適當(dāng)?shù)耐轷；哂幸换蚨鄠€羰基，典型是1至約4或5個羰基。適當(dāng)?shù)耐檠趸?、烷硫基、烷基亞磺酰基、烷基磺?；?、烷?；捌渌倌芑蔀橹辨溁蚍种?。用于此處的碳環(huán)芳基指具有1至3個分離或稠合環(huán)及6至約18個碳環(huán)成員的非雜芳基，可包含如苯基、萘基、聯(lián)苯基、苊基(acenaphthyl)、菲酰基等。苯基及萘基通常優(yōu)選。適當(dāng)?shù)碾s芳基具有1至3個環(huán)、每環(huán)3至8個環(huán)成員及1至約3個雜原子(N、O或S)。明確的適當(dāng)雜芳基包含例如香豆素基、喹啉基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、吲哚基、苯并呋喃基及苯并噻唑基。
如上所述，上列化學(xué)式化合物的各種取代基可為選擇性取代。存在于“經(jīng)取代”部份的適當(dāng)?shù)墓倌芑ɡ琨u原子如氟、氯、溴及碘；氰基；羥基；硝基；疊氮基；氫硫基；烷?；鏑-6烷?；缫阴；?；羧酰胺基；烷基包含具有1至約12個碳原子，優(yōu)選1至約6個碳原子者；烯基及炔基包含具有一或多個不飽和連接及含2至約12個碳原子，優(yōu)選含2至約6個碳原子者；具有一個或多個氧原子連接及1至約12個碳原子，優(yōu)選1至約6個碳原子的烷氧基；烷硫基包含具有一或多個硫醚連接及1至約12個碳原子，優(yōu)選1至約6個碳原子的部份；烷基亞磺酰基包含具有一個或多個亞磺?；B接及1至約12個碳原子，優(yōu)選1至約6個碳原子的部份；烷基磺?；哂幸换蚨鄠€磺?；B接及1至約12個碳原子，優(yōu)選1至約6個碳原子的部份；胺烷基例如具有一或多個氮原子及1至約12個碳原子，優(yōu)選1至約6個碳原子者；具有6個或更多個碳原子的碳環(huán)芳基，特別是苯基；芳氧基例如苯氧基；具有1至3個分離或稠合環(huán)及6至約18個環(huán)成員的芳烷基，優(yōu)選為芐基；具有1至3個分離或稠合環(huán)及6至約18個碳環(huán)員的芳烷氧基，優(yōu)選為O-芐基；或具有1至3個分離或稠合環(huán)及每環(huán)3至約8個環(huán)員及一個或多個N、O或S原子的雜芳基或雜脂環(huán)基，例如香豆素基、喹啉基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、吲哚基、苯并呋喃基及苯并噻唑基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、哌啶基、嗎啉代基及吡咯烷基。本發(fā)明化合物的“經(jīng)取代”的R’、W、X、Y及Z取代基或其它取代基可于一個或多個可用的位置(典型是1、2或3個位置)，由一或多個如上列的適當(dāng)官能基所取代。
本發(fā)明特異優(yōu)選的化合物包括化合物1至19(化合物編號在所繪的結(jié)構(gòu)下方)，及這些化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。這些化合物編號亦用于本公開其他地方，明確指具有下列所示結(jié)構(gòu)的化合物。 Compound1Compound2Compound3 Compound4Compound5Compound6 Compound7Compound8 Compound9Compound10Compound11 Compound12Compound13Compound14 Compound15Compound16 Compound17Compound18Coumpound19本發(fā)明優(yōu)選化合物可通過本領(lǐng)域已知程序制備。見March，高等有機(jī)化學(xué)(第4版，1992)。例如，化學(xué)式I至IV(包含化學(xué)式IIIa及IVa)可通過芳族化合物的極性官能基(例如取代酚型、苯胺或芐基化合物，或其它具有如適合取代反應(yīng)的親電官能基的取代芳族化合物)適當(dāng)?shù)厝〈铣?。本發(fā)明其它化合物可類似地加以制備。例如，化學(xué)式VIII的酰亞胺化合物可經(jīng)直接取代市售化合物而制備。
此處提及的“TF阻斷化合物”、“TF拮抗劑”或相關(guān)術(shù)語一般包括此處公開的化合物，所述的化合物在至少一種初級篩選分析如FX活化作用分析或PT分析中具有良好阻斷活性。較特別的TF阻斷化合物與TF特異結(jié)合。在不限于推測的情況下，相信該化合物可以以一種足以降低或阻斷FX或FIX活化作用的方式，阻斷FX或FIX與TF的結(jié)合。
提及組合物的“治療上有效量”是例如在宿主如哺乳類動物，尤其是靈長類動物如人類患者中可產(chǎn)生預(yù)期效果的量。該效果優(yōu)選可使用幾個本領(lǐng)域已知的終點(diǎn)加以監(jiān)測。例如，一種預(yù)期效果是增加或穩(wěn)定心血管功能，其測量可通過增加心功能，特別是在受試者血管內(nèi)的血流。就療效(例如改善的心血管功能，已受損害的心功能或相關(guān)血管功能的一種或多種指示性癥狀，或其它特別的生理分析)而言該影響是可監(jiān)測及通?？蓽y量的。這些特異的方法無意限制包含范圍，適于特異應(yīng)用(如凝血酶、癌癥或動脈粥狀硬化)的進(jìn)一步方法對本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員來說是顯而易見的。
如上所述，本發(fā)明化合物可給予哺乳類動物，優(yōu)選為靈長類動物如人類，以預(yù)防或降低血栓形成。使用本發(fā)明化合物的療法包含下列疾病的治療及預(yù)防靜脈血栓形成及肺栓塞、動脈血栓形成如心肌梗塞、不穩(wěn)定性心絞痛、血栓形成性中風(fēng)及周圍動脈血栓形成。本發(fā)明化合物亦可用以治療及預(yù)防動脈粥樣硬化性疾病，例如冠狀動脈疾病、腦動脈疾病及周圍動脈疾病。本發(fā)明化合物亦可用于抗凝血治療，包含人工器官、心瓣膜、醫(yī)療器材(例如留置裝置如導(dǎo)管、移植模等)等。本發(fā)明化合物亦可用于其它障礙或疾病的治療，其中可能包含凝血相關(guān)障礙，例如癌癥、炎癥性疾病特別是關(guān)節(jié)炎及糖尿病。
在一個特別療法中，也可給予一種或多種TF拮抗劑化合物作為唯一治療劑，或可將本發(fā)明化合物與其它治療劑(例如目標(biāo)為凝血機(jī)制中相互作用的醫(yī)藥，如鏈激酶、tPA、尿激酶及其它溶解血凝塊的藥劑)一同給予。本發(fā)明化合物亦可與其它藥劑一同給予，例如一種或多種其它抗凝血劑(例如肝磷脂、水蛭素或類水蛭素)或抗血小板劑(例如ReoPro或阿司匹林)。在該組合療法中，本發(fā)明化合物可在給予一種或多種其它適當(dāng)抗凝血劑、抗血小板劑、血栓溶解劑或其它藥劑之前或之后給予，以促進(jìn)或延長期望的抗凝血活性。
本發(fā)明化合物可經(jīng)鼻內(nèi)、口服或注射(例如肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下或靜脈內(nèi)注射)給藥，或以經(jīng)皮、眼內(nèi)或腸內(nèi)的方法。靜脈內(nèi)或非腸內(nèi)給藥包含例如皮下、腹膜內(nèi)或肌肉內(nèi)給藥。一般優(yōu)選是口服給藥。最理想劑量是通過傳統(tǒng)方法測定的。本發(fā)明化合物適合以質(zhì)子化或水溶形式(例如藥學(xué)上可接受的有機(jī)或無機(jī)酸鹽，如鹽酸鹽、硫酸鹽、半硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、醋酸鹽、草酸鹽、檸檬酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲磺酸鹽等)給予對象。
本發(fā)明化合物可單獨(dú)或與一種或多種上述其它治療劑組合使用，與傳統(tǒng)的賦形劑混合而作為藥物組合物，該賦形劑即適合于非腸內(nèi)、腸內(nèi)或鼻內(nèi)應(yīng)用的藥學(xué)上可接受的有機(jī)或無機(jī)載劑，它不會有害地與活性成份作用且對其接受者也無害。
適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)上可接受的載劑包含(但不限于)水、鹽溶液、醇類、蔬菜油、聚乙二醇、明膠、乳糖、直鏈淀粉、硬脂酸鎂、滑石粉、硅酸、粘性石蠟、精油、脂肪酸單甘油及雙甘油酯、石油醚脂肪酸酯、羥甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等。醫(yī)藥制劑可加以消毒且可依需要與下列不會有害地與活性化合物作用的輔劑混合例如潤滑劑、防腐劑、安定劑、濕潤劑、乳化劑、影響滲透壓的鹽類、緩沖劑、著色劑、香味劑及/或芳族物質(zhì)等。
此處提及的藥學(xué)上可接受的平衡離子意指帶有負(fù)電或正電，可與化合物形成離子鍵的原子或分子。可接受的帶負(fù)電原子或分子包含氯、溴、碘、醋酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、順丁烯二酸鹽等。舉例的藥學(xué)上可接受的帶正電原子或分子包含鈉、鉀及銨離子。另外的藥學(xué)上可接受的對離子實(shí)例見于下述的雷明頓氏(Remington’s)醫(yī)藥科學(xué)。
對于非腸內(nèi)應(yīng)用，特別適合的是溶液，優(yōu)選為油性或水性溶液及懸浮液、乳液或植入物，包含塞劑。安瓿為方便的單位劑量。
對于腸內(nèi)應(yīng)用，特別適合的是具有滑石粉及/或碳水化合物載劑、黏結(jié)劑等的錠劑、糖衣錠或膠囊，該載劑優(yōu)選為乳糖及/或玉米淀粉及/或馬鈴薯淀粉。使用甜的載劑時可使用糖漿、酏劑等。可配制緩釋組合物，包含其中活性成份用不同的降解涂層(例如微封膠囊、多層涂層等)保護(hù)。
關(guān)于合適給藥配方的討論一般見于雷明頓氏(Remington’s)醫(yī)藥科學(xué)，(Mack出版公司，Easton PA，(1980))。
可以理解在一種給定療法中應(yīng)用實(shí)際優(yōu)選數(shù)量的活性化合物將根據(jù)所用的特異化合物、配制的特別組合物、應(yīng)用模式、給藥的特別位置、等而不同。本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員依照上述方針施行傳統(tǒng)的劑量測定試驗(yàn)即可容易地確定最理想的給藥方式。一般來說，化學(xué)式I的一種或多種化合物的適當(dāng)有效劑量是介于約0.01至100毫克/公斤接受者體重/天之間，優(yōu)選是介于約0.01至20至50毫克/公斤接受者體重/天之間。
此處提及的所有文件全部并入以供參考。下列非限制性的實(shí)施例為本發(fā)明的舉例。實(shí)施例1 篩選在本實(shí)施例中，純化的人類因子VIIa、IX及X、凝血酶及盧賽爾氏蛇毒是得自酵素研發(fā)實(shí)驗(yàn)室公司。胰蛋白酶是得自BoehrigerMannheim。發(fā)色團(tuán)底物S-2222、S-2288、S-2238及S-2765是得自DiaPharma集團(tuán)公司，Spectrozyme FXa是得自美國診斷公司。截切的重組人類組織因子(例如由243個氨基酸組成)是表現(xiàn)于大腸桿菌中并以免疫親和層析法純化的。優(yōu)選截切的重組人類組織因子缺少細(xì)胞質(zhì)區(qū)域。天然的人類TF是以50mM Tris-HCl(pH8.0，含有0.1M NaCl，1mM EDTA，0.3％Triton X-100)由人類癌細(xì)胞株J82提取而得。天然的其它來源的TF是以相同緩沖溶液由動物的腦丙酮粉末提取而得。所有其它試劑皆得自Sigma。
抑制組織因子/因子VIIa(TF/VIIa)的化合物的初級篩選是基于TF/VIIa依賴性FX活化作用(見圖式第1圖的流程圖)。在本分析中，TF/VIIa復(fù)合體活化FX的能力是在兩個不連續(xù)階段中測定。在第一階段(FX活化作用)中，不具活性的FX被TF/VIIa在磷脂及鈣的存在下轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚越退匦问?FXa)。在第二階段(FXa活性分析)中，在指示時間加入EDTA到FX活化作用混合物中以螯合鈣，導(dǎo)致FX→FXa轉(zhuǎn)變的終止。TF/VIIa的活性需要鈣。接著藉FXa依賴性發(fā)色團(tuán)底物如S-2222、S-2765或Spectrozyme FXa以測量TF/VIIa的活性。在初級篩選中，來自以前制備的化學(xué)藥品庫的化合物首先在TF/VIIa依賴性FX活化作用分析中以高濃度(～0.833mM)測試，以鑒定潛在的TF途徑拮抗劑的效果(見第1圖)。然而，化合物在該結(jié)合酵素的分析中對TF/VIIa依賴性FX活化作用的抑制作用明確地可歸因于化合物對TF/VIIa及/或FXa活性的效果。因此，二級篩選測試的目的是測定抑制反應(yīng)是如何發(fā)生及抑制機(jī)制。在二級篩選實(shí)驗(yàn)中，初級篩選所鑒定的化合物的效果以下列化合物的催化活性測試因子VIIa(FVIIa)、因子IXa(FIXa)、因子Xa(FXa)、凝血酶、盧賽爾氏(Russell’s)蛇毒(RVV)及胰蛋白酶。施行另外的測試如TF/VIIa依賴性因子IX活化作用分析及凝血酶原時間(PT)分析以確認(rèn)期望的活性，并施行二級測試以進(jìn)一步選擇具有優(yōu)良TF拮抗活性且不具非期望活性的化合物。
A.初級篩選TF/VIIa依賴性FX活化作用初級篩選是使用TF/VIIa依賴性FX活化作用分析在96孔盤中重復(fù)操作。所有篩選化合物皆溶解于二甲基亞砜(DMSO)中，其它試劑則制備或稀釋于25mM HEPES-NaOH(含5mM CaCl2，150mM NaCl，0.1％BSA，pH7.5)中。在使用TF的分析中，純化的人類重組TF(100nM)首先于50mMTris-HCl(pH7.5，含0.1％牛血清白蛋白(BSA))中以磷脂酰膽堿(0.07毫克/毫升)及磷脂酰絲胺酸(0.03毫克/毫升)在37℃脂化30分鐘。然后將等體積的100nM脂化的TF與100nM FVIIa結(jié)合以制備TF/VIIa復(fù)合體的庫存溶液。該復(fù)合體于37℃培養(yǎng)30分鐘，然后分裝并儲存于-70℃供未來使用。
在篩選分析時，將5微升各化合物(約10mM于DMSO中)或DMSO置于96孔盤的各孔中，接著加入45微升TF/VIIa復(fù)合體(0.1nM)。以微量吸管尖端混合各孔中的成份，或于Lab-Line滴定盤震蕩器上使該盤震蕩30秒。將該盤于37℃培養(yǎng)15分鐘后，加入10微升人類FX(180nM)至各孔中，并如上述方法混合。然后將該盤于37℃培養(yǎng)3至15分鐘，接著加入10微升EDTA(400mM于144mM HEPES，864mM NaCl，0.576％BSA中，pH調(diào)整至7.5)至各孔中以終止FX活化作用。加入10微升FXa底物(5mM Spectrozyme FXa或3.2mM S-2765)至各孔中以測量FXa活性。該盤混合如上，約于37℃培養(yǎng)15分鐘后，以20微升50％醋酸抑制FXa活性。然后以ELISA讀取機(jī)讀取405nm的吸收度。將OD405nm值轉(zhuǎn)換為微軟Excel檔案，并以下列公式計(jì)算TF/VIIa依賴性FX活化作用的抑制作用百分比抑制作用％＝100-(100×A/B)其中A及B分別為化合物存在及不存在下的OD值。任何具有等于或大于70％TF/VIIa依賴性FX活化作用的抑制作用的化合物便指定為二級篩選測試的候選者。
B.二級篩選初級分析所鑒定的化合物于10、50或100倍稀釋濃度以TF/VIIa依賴性FX活化作用分析再次測試(見圖式第1圖的流程圖)。在稀釋濃度不具有顯著抑制作用的化合物表示其抑制作用為非特異性或非常微弱，即不須再進(jìn)一步測試的。在稀釋濃度仍可抑制TF/VIIa依賴性FX活化作用的化合物即進(jìn)一步測試其對下列蛋白酶活性的抑制能力胰蛋白酶、RVV、凝血酶、FXa、FVIIa及FIXa。目標(biāo)為鑒定可明確防止FX(及FIX)與TF/VIIa復(fù)合體結(jié)合，或干擾TF與VIIa的相互作用而阻斷FX(及FIX)活化作用的化合物。然而，本發(fā)明并未進(jìn)一步研究具有抑制數(shù)種蛋白酶活性的廣泛能力(非特異性)的化合物。選擇了適合指定標(biāo)準(zhǔn)，也就是可在較低濃度(＜0.1mM)下抑制TF/VIIa依賴性FX活化作用，但對蛋白酶活性不具有顯著效果的化合物，它包括上述結(jié)構(gòu)的化合物1至19，這些化合物即被鑒定為強(qiáng)TF拮抗劑并進(jìn)一步研究的。這些化合物的測試數(shù)據(jù)見圖2的表I。
已經(jīng)詳細(xì)敘述了關(guān)于本發(fā)明的優(yōu)選的實(shí)施方案。然而，在考慮到本公開的內(nèi)容上，本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員可以在本發(fā)明的精神及范圍內(nèi)作修改和改進(jìn)是可以理解的。
權(quán)利要求
1.一種治療易患、已患由組織因子(TF)引起的疾病或正從該病恢復(fù)的哺乳動物的方法，該方法包括使用治療上有效量的至少一種TF阻斷化合物以治療該病。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的方法，其中所述的疾病選自心血管疾病、凝血障礙、細(xì)胞增殖障礙、手術(shù)后并發(fā)癥或免疫功能紊亂。
3.一種阻斷或抑制組織因子依賴性因子X及/或因子IX活化作用的方法，它包括將組織因子與TF阻斷化合物接觸，從而抑制因子X或因子IX與組織因子或TF/VIIa的活化或功能性的復(fù)合體的形成。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的的方法，其中所述的TF阻斷化合物是與組織因子結(jié)合從而抑制功能性復(fù)合體的形成。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4項(xiàng)的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的組織因子阻斷化合物的IC50較在測量TF/VIIa依賴性因子X活化作用的標(biāo)準(zhǔn)分析中的IC50低約100μM。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4項(xiàng)的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的組織因子阻斷化合物的IC50較在測量TF/VIIa依賴性因子X活化作用的標(biāo)準(zhǔn)分析中的IC50低約200μM或更低。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6項(xiàng)的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的組織因子阻斷化合物包括一種選自羧基、硫酰胺基、亞磺酰基、磺酰基、亞硫酸根、酰胺基或硝基的取代基。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述的組織因子阻斷化合物進(jìn)一步包括選擇性取代的碳環(huán)芳基或選擇性取代的雜芳基。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述的組織因子阻斷化合物進(jìn)一步包括選擇性取代的苯基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-6項(xiàng)的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的組織因子阻斷化合物具有下列任一如本文所定義的化學(xué)式的結(jié)構(gòu)I、II、III、IIIa、IV、IVa、V、VI、VIa、VII、VIII、IX、IXa、IXb、IXc、IXd、X、XI、或XII。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-6項(xiàng)的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的組織因子阻斷化合物為下列之一 Compound1Compound2Compound3 Compound4Compound5Compound6 Compound7Compound8 Compound9Compound10Compound11 Compound12Compound13Compound14 Compound15Compound16 Compound17Compound18Coumpound19
12.一種如本發(fā)明所定義的化學(xué)式I、II、III、IIIa、IV、IVa、V、VI、VIa、VII、VIII、IX、IXa、IXb、IXc、IXd、X、XI、或XII任一化合物。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的化合物，其中所述的化合物的IC50較在測量TF/VIIa依賴性因子X活化作用的標(biāo)準(zhǔn)分析中低約100μM。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的化合物，其中所述的化合物的IC50較在測量TF/VIIa依賴性因子X活化作用的標(biāo)準(zhǔn)分析中低約100μM或更低。
15.一種具下列結(jié)構(gòu)的化合物， Compound1Compound2Compound3 Compound4Compound5Compound6 Compound7Compound8 Compound9Compound10Compound11 Compound12Compound13Compound14 Compound15Compound16 Compound17Compound18Coumpound19
16.一種藥劑學(xué)組合物，它包括如權(quán)利要求12或15所述的化合物和藥劑學(xué)活性的載體。
17.一種治療哺乳動物已患或易患由組織因子影響的疾病的治療方法，它包括給所述的哺乳類動物使用有效量的如權(quán)利要求12至16中任一項(xiàng)所述的化合物或組合物。
18.一種治療哺乳動物已患或易患心血管疾病、凝血障礙、細(xì)胞增殖障礙、手術(shù)后并發(fā)癥、免疫功能紊亂、動脈粥狀硬化、炎癥、或癌癥的治療方法，所述的方法包括給該哺乳類動物使用有效量的如權(quán)利要求12至16項(xiàng)任一項(xiàng)所述的化合物或組合物。
19.一種抑制哺乳類動物的凝血的方法，它包括給所述的哺乳動物使用有效量的如權(quán)利要求12至16項(xiàng)中的任一項(xiàng)所述的化合物或組合物。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的哺乳動物是已患血栓形成、懷疑患有該病或由該病復(fù)原者。
21.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的哺乳類動物是已患、易患與侵入性醫(yī)療程序相關(guān)的再狹窄或由該疾患復(fù)原者。
22.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的侵入性醫(yī)療程序?yàn)檠艹尚涡g(shù)、動脈內(nèi)切開術(shù)、應(yīng)用移植模、導(dǎo)管的使用、移植片的植入或動靜脈分流器的使用。
23.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的哺乳類動物是已患--有繼續(xù)發(fā)展的危險--與心血管疾病、傳染性疾病、腫瘤疾病或使用血栓溶解劑相關(guān)的血栓栓塞狀態(tài)或正從這類疾病復(fù)原者。
24.根據(jù)權(quán)利要求19-23中的任一項(xiàng)所述的方法，其中至少一種抗血小板組合物、血栓溶解組合物或抗凝血組合物與在測量TF/VIIa依賴性因子X活化作用的標(biāo)準(zhǔn)分析中的IC50低于約100μM的組織因子阻斷化合物合并使用。
25.一種治療或預(yù)防哺乳動物血栓栓塞性疾病的方法，它包括給所述的哺乳動物使用有效量的根據(jù)權(quán)利要求12至16中的任一項(xiàng)所述的TF阻斷化合物或組合物。
26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述的哺乳類動物是已患--有繼續(xù)發(fā)展的危險--與心血管疾病、傳染性疾病、腫瘤疾病或使用血栓溶解劑或抗血小板制劑相關(guān)的血栓栓塞狀態(tài)或正從這類疾病復(fù)原者。
27.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中至少一種抗血小板、血栓溶解或抗凝血組合物與在測量TF/VIIa依賴性因子X活化作用的標(biāo)準(zhǔn)分析中的IC50低于約100μM的組織因子阻斷化合物合并使用。
28.根據(jù)權(quán)利要求17-27中的任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的哺乳類動物是人類。
全文摘要
本發(fā)明包括組織因子(TF)阻斷化合物,以及利用或包括一種或多種該化合物的治療方法和藥物組合物。本發(fā)明化合物可特別用于治療及預(yù)防不良性的血栓形成。
文檔編號A61K31/24GK1390122SQ00814765
公開日2003年1月8日 申請日期2000年10月27日 優(yōu)先權(quán)日1999年10月27日
發(fā)明者焦進(jìn)安, L·K·露帕斯其, E·L·尼威斯, H·C·望, D·P·泰勒 申請人:蘇諾爾分子公司