專利名稱：過氧化物酶體增殖劑應(yīng)答性受體δ的活化劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及過氧化物酶體增殖劑應(yīng)答性受體δ的活化劑。
背景技術(shù)：
過氧化物酶體(peroxisome)是動植物的細(xì)胞中可見的小器官，其基質(zhì)中含有以過氧化氫酶為首的各種酶。過氧化物酶體增殖劑(peroxisome proliferator)是誘發(fā)該過氧化物酶體增殖的物質(zhì)，已知有抗血脂藥(fibrate類)、除草劑、鄰苯二甲酸鹽增塑劑等多種化合物組。
Isseman等鑒定了通過該過氧化物酶體增殖劑活化的核內(nèi)受體，并命名為過氧化物酶體增殖劑應(yīng)答性受體(peroxisome proliferatoractivated receptorPPAR)。(Nature，347，p645-650，1990)迄今為止確認(rèn)PPAR存在PPARα、PPARγ和PPARδ3種亞型。(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，91，p7335-7359，1994)已經(jīng)確認(rèn)上述fibrate類藥物對其中的PPARα具有配體效果，在臨床上有較強(qiáng)的血清TG(甘油三酯)降低作用。
另外，屬于糖尿病治療藥的噻唑烷二酮類化合物(Troglitazone，Rosiglitazone，Pioglitazone)作為PPARγ的配體是已知的。
作為具有PPARδ活化作用的藥物，已知下述化合物下式表示的GW-2433(Glaxo Wellcome)、
下式表示的L-165041(Merck)、 或者下式表示的YM-16638(山之內(nèi)制藥)等。
GW-2433作為動脈硬化癥的預(yù)防和治療藥的用途記載于WO92/10468中，L-165041作為糖尿病治療藥和抗肥胖藥的用途記載于WO97/28115中，而且，關(guān)于YM-16638，在WO99/04815中記載了具有血清膽固醇降低作用、LDL-膽固醇降低作用的主旨。
而且，最近報道PPARδ的配體有望作為抗癌劑和抗炎劑應(yīng)用。(JBC，272(6)，p3406-3410，1997；Cell，99，p335-345，1999)。
另一方面，作為具有與本發(fā)明化合物的下述通式(I)所示苯并異噁唑衍生物類似結(jié)構(gòu)的化合物，已知下述化合物。
化合物A(特許2581523號)、 化合物B(WO98/28254)、 化合物C(特開平8-311065號公報)、 化合物D(WO97/27190)、以及
化合物E(WO9620935)上述化合物A、B和C均在苯并異噁唑環(huán)或苯并呋喃環(huán)的右側(cè)通過亞烷基鍵結(jié)合有羧基、氰基，或者在α位乙氧基或丙硫基取代的羧基。
另一方面，本發(fā)明化合物是苯并異噁唑環(huán)的5～7位通過醚鍵或硫醚鍵結(jié)合的乙酸或2-烷基丙酸類，與上述A、B和C具有結(jié)構(gòu)上的差別。
另外，已報道了上述化合物A、B和C記載的化合物具有胰島素抗性改善作用、降血糖作用等，但是沒有關(guān)于這些化合物作為PPARδ的配體有用的詳細(xì)記載。
另外，上述化合物D是吲哚環(huán)的1位與苯并呋喃環(huán)通過亞烷基鏈結(jié)合，與噻唑環(huán)或噁唑環(huán)通過亞烷基鏈結(jié)合在苯并異噁唑環(huán)的3位上的本發(fā)明化合物在結(jié)構(gòu)上不同，而且在WO97/27190中記載了具有ACAT(?；o酶A-膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶)抑制作用的內(nèi)容，但是沒有關(guān)于作為PPARδ的配體有用的詳細(xì)記載。
另一方面，化合物E僅用苯乙基取代了噁唑環(huán)的4位，同樣苯并呋喃環(huán)的苯環(huán)部分僅具有甲氧基羰基甲氧基，而本發(fā)明化合物在噁唑環(huán)(噻唑環(huán))上具有取代苯基和異丙基等2個取代基，而且在苯并呋喃環(huán)(苯并異噁唑環(huán))的苯環(huán)部分，除羧基取代烷氧基以外，還具有丙基或丙稀基等取代基，在結(jié)構(gòu)上不同。另外，WO9620935中記載了化合物E具有TXA2受體拮抗作用，但是沒有記載作為PPARδ的配體有用。
另外，作為關(guān)于苯并異噁唑衍生物的專利申請，本發(fā)明人等申請了WO0179197，該專利的實(shí)施例化合物在其苯并異噁唑環(huán)上不存在取代基。相對于此，本發(fā)明化合物在苯并異噁唑環(huán)上具有至少1個取代基。
本發(fā)明的目的在于提供具有過氧化物酶體增殖劑應(yīng)答性受體δ的活化作用的下述通式(I)表示的化合物。
發(fā)明公開即，本發(fā)明涉及下述通式(I)表示的化合物或其鹽。
(式中，A表示O、S或NR7，其中，R7表示氫原子或碳原子數(shù)1～8的烷基，B1表示CW或N，其中，W表示氫原子或化學(xué)鍵，B2表示O、S或NR8，其中，R8表示氫原子或碳原子數(shù)1～8的烷基，X1和X2表示O、S、NH、NHC(＝O)、C(＝O)、C(＝N-OR9)、CH(OR10)、C＝C、C≡C或化學(xué)鍵，其中，R9和R10表示氫原子或碳原子數(shù)1～8的烷基，Y表示可以具有碳原子數(shù)1～8的烷基或1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基作為取代基的碳原子數(shù)1～8的亞烷基鏈，Z表示NH、O或S，R1表示可以具有從碳原子數(shù)1～8的烷基、碳原子數(shù)1～8的烷氧基、1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基、羥基、硝基、氨基、苯基、吡啶基或鹵素原子中選擇的基團(tuán)或原子作為取代基的芳基，或者由作為成環(huán)原子的1～3個從氮原子、氧原子或硫原子中選擇的雜原子以及剩余的碳原子構(gòu)成的5～8元的雜環(huán)基團(tuán)(而且，該雜環(huán)上可以縮合苯環(huán))，R2表示碳原子數(shù)2～8的烷基、1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基、碳原子數(shù)3～7的環(huán)烷基、碳原子數(shù)2～8的烯基或碳原子數(shù)2～8的炔基，或者可以具有從碳原子數(shù)1～8的烷基、碳原子數(shù)1～8的烷氧基、1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基、羥基、硝基、氨基、苯基、吡啶基或鹵素原子中選擇的基團(tuán)或原子作為取代基的芳基取代的烷基(烷基部分的碳原子數(shù)為1～4)或者5～8元的雜環(huán)取代的烷基(雜環(huán)由作為成環(huán)原子的1～3個從氮原子、氧原子或硫原子中選擇的雜原子以及剩余的碳原子構(gòu)成，且烷基部分的碳原子數(shù)為1～4)，R3表示鹵素原子、三氟甲基、碳原子數(shù)1～8的烷基、碳原子數(shù)2～8的烯基或碳原子數(shù)2～8的炔基，R4和R5表示氫原子、碳原子數(shù)1～8的烷基、或1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基，而且，R6表示氫原子、氨基取代的碳原子數(shù)1～8的烷基、碳原子數(shù)1～8的烷基、或堿金屬。
其中，Z和R3與苯環(huán)結(jié)合，X2不與苯環(huán)結(jié)合。)另外，本發(fā)明還涉及含有上述通式(I)表示的化合物或其鹽作為有效成分的過氧化物酶體增殖劑應(yīng)答性受體δ的活化劑。
下面，詳細(xì)說明本發(fā)明。
在上述通式(I)中，作為R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9和R10、以及Y的亞烷基鏈可以具有的取代基、R1的芳基和雜環(huán)基團(tuán)可以具有的取代基、及R2的被芳基取代的烷基和被雜環(huán)取代的烷基可以具有的取代基中的碳原子數(shù)1～8的烷基，可以例舉甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基或己基。
作為R2的碳原子數(shù)2～8的烷基，可以例舉乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基或己基。
作為R2、R4和R5、以及Y的亞烷基鏈可以具有的取代基、R1的芳基和雜環(huán)基團(tuán)可以具有的取代基、及R2的被芳基取代的烷基和被雜環(huán)取代的烷基可以具有的取代基中的1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基，可以例舉1～3個氟原子、氯原子或溴原子等鹵素原子取代的甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或叔丁基，優(yōu)選三氟甲基、氯甲基、2-氯乙基、2-溴乙基、2-氟乙基等。
作為R2和R3的碳原子數(shù)2～8的烯基，可以例舉乙烯基、烯丙基。
作為R2和R3的碳原子數(shù)2～8的炔基，可以例舉丙炔基。
作為R3的鹵素原子，可以例舉氟原子、氯原子或溴原子等。
作為R2的碳原子數(shù)3～7的環(huán)烷基，可以例舉環(huán)丙基、環(huán)戊基或環(huán)己基等。
作為R1的芳基和雜環(huán)基團(tuán)可以具有的取代基、以及R2的被芳基取代的烷基和被雜環(huán)取代的烷基可以具有的取代基中的碳原子數(shù)1～8的烷氧基，可以例舉甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、戊氧基或己氧基等。
作為R1的芳基和R2的被芳基取代的烷基的芳基部分，可以例舉苯基或萘基。
作為R1的5～8元的雜環(huán)基團(tuán)以及R2的被5～8元雜環(huán)取代的烷基的雜環(huán)部分，可以例舉吡啶基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、喹啉基等。
而且，R1的作為成環(huán)原子的1～3個從氮原子、氧原子或硫原子中選擇的雜原子與剩余的碳原子構(gòu)成的5～8元的雜環(huán)基團(tuán)與苯環(huán)縮合而成的雜環(huán)基團(tuán)，可以例舉喹啉環(huán)或苯并噻吩基環(huán)。
作為Y的碳原子數(shù)1～8的亞烷基鏈，可以例舉亞甲基、亞乙基。
R3可以是1～3個相同或不同的基團(tuán)。
另外，作為R6的氨基取代的碳原子數(shù)1～8的烷基，可以例舉哌啶子基、吡咯烷基、二甲基氨基或二乙基氨基等氨基取代的甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基或己基等。
①作為本發(fā)明化合物，優(yōu)選上述通式(I)的化合物中，R1結(jié)合在噁唑環(huán)、噻唑環(huán)或咪唑環(huán)的2位的化合物或其鹽。
②作為本發(fā)明化合物，優(yōu)選上述通式(I)的化合物或上述①中，B1為N，B2為O的化合物或其鹽。
③作為本發(fā)明化合物，優(yōu)選上述通式(I)的化合物或上述①、②中，R6為氫原子的化合物或其鹽。
④作為本發(fā)明化合物，優(yōu)選上述通式(I)的化合物或上述①～③中，X2為化學(xué)鍵的化合物或其鹽。
⑤作為本發(fā)明化合物，優(yōu)選上述通式(I)的化合物或上述①～④中，X1為化學(xué)鍵的化合物或其鹽。
⑥作為本發(fā)明化合物，優(yōu)選上述通式(I)的化合物或上述①～⑤中，R1為具有從碳原子數(shù)1～8的烷基、碳原子數(shù)1～8的烷氧基、1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基、羥基、硝基、氨基、苯基、吡啶基或鹵素原子中選擇的基團(tuán)或原子作為取代基的芳基的化合物或其鹽。
⑦作為本發(fā)明化合物，優(yōu)選上述通式(I)的化合物或上述①～⑥中，R2為碳原子數(shù)2～8的烷基的化合物或其鹽。
⑧作為本發(fā)明化合物，優(yōu)選上述通式(I)的化合物或上述①～⑦中，R3為碳原子數(shù)1～8的烷基或碳原子數(shù)2～8的烯基的化合物或其鹽。
上述通式(I)表示的化合物可以是藥理學(xué)上允許的鹽，R6可以例舉鈉、鉀、鋰等的堿金屬鹽。
上述通式(I)表示的化合物中，苯并異噁唑衍生物的合成方案如下所示。
(合成方法1) (反應(yīng)式中，R表示甲基、乙基等碳原子數(shù)1～6的烷基，Q表示氯原子、溴原子等離去基團(tuán)，而且R1、R2、R3、R4、R5、A、X1、Y、X2和Z與上述相同。)通式(III)表示的羥基(或巰基)苯并異噁唑衍生物可以通過在冰冷條件下，用亞硝酸鈉、礦物酸(硫酸)將通式(II)表示的氨基苯并異噁唑衍生物重氮化后，Z為氧原子的場合用硫酸等分解，Z為硫原子的場合使乙基黃原酸鉀等作用后加熱得到。
通式(v)表示的本發(fā)明的苯并異噁唑衍生物可以通過在碳酸鉀等堿的存在下，使通式(IV)表示的乙酸酯衍生物對上述通式(III)表示的化合物作用得到。
而且，通式(VI)表示的本發(fā)明的苯并異噁唑衍生物可以通過在氫氧化鋰、氫氧化鉀等的存在下，使上述通式(V)表示的本發(fā)明的苯并異噁唑衍生物進(jìn)行水解反應(yīng)得到。
另外，R3＝烯丙基的場合，作為原料的上述通式(III)表示的化合物可以通過以下的反應(yīng)方案合成。
(反應(yīng)式中，A、R1、R2、X1、X2和Y與上述相同。)(合成方法2)另外，本發(fā)明的苯并異噁唑衍生物也可以通過下述反應(yīng)方案得到。
(反應(yīng)式中，A、R1、R2、R3、R4、R5、Z、Q和R與上述相同。)(合成方法3)另外，本發(fā)明化合物也可以通過下述反應(yīng)方案得到。

(反應(yīng)式中，R、Q、R1、R2、R3、R4、R5、B2、A和Z與上述相同。)上述反應(yīng)方案中的原料羥基吲哚醛和羥基苯并噻吩醛可以采用例如WO96/35688、EP505322記載的方法等得到。
(合成方法4)R3＝丙基的本發(fā)明化合物可以按照以下的合成方案制備。
(反應(yīng)式中，A、R1、R2、R4、R5、X1、X2、Y、Z和R與上述相同。)其他上述通式(I)表示的化合物也可以通過同樣的方法得到。
這樣得到的本發(fā)明化合物實(shí)例如表1～20所示。
(代表化合物1)本發(fā)明化合物中，X2＝化學(xué)鍵、B1＝N、B2＝O、R6＝H的下述化合物實(shí)例如表1～5所示。(R1、R2分別取代咪唑環(huán)、噁唑環(huán)、噻唑環(huán)的2位和4位)

表1


表2


表3


表4


表5


(代表化合物2)在本發(fā)明化合物中，X2＝化學(xué)鍵、B1＝N、B2＝O、R6＝H的下述化合物實(shí)例如表6～10所示。(R1、R2分別取代咪唑環(huán)、噁唑環(huán)、噻唑環(huán)的2位和4位)

表6

表7

表8

表9

表10

(代表化合物3)在本發(fā)明化合物中，X2＝化學(xué)鍵、R6＝H的下述化合物實(shí)例如表11～15所示。(R1、R2分別取代咪唑環(huán)、噁唑環(huán)、噻唑環(huán)的2位和4位)

表11

表12

表13

表14

表15

(代表化合物4)在本發(fā)明化合物中，X2＝化學(xué)鍵、R6＝H的下述化合物實(shí)例如表16～20所示。(R1、R2分別取代咪唑環(huán)、噁唑環(huán)、噻唑環(huán)的2位和4位)

表16

表17

表18

表19

表20

(代表化合物5)通式(I)中，A＝S、X1＝化學(xué)鍵、X2＝化學(xué)鍵、Y＝CH2CH2、B1＝N、B2＝O，R1的取代位置為2位，R2的取代位置為4位(因此，Y結(jié)合在5位)時的本發(fā)明化合物，如表21和22所示。
表21

表22

(代表化合物6)通式(I)中，A＝O、R2＝異丙基、X1＝化學(xué)鍵、X2＝化學(xué)鍵、Y＝CH2CH2、B1＝N、B2＝O，R1的取代位置為2位，R2的取代位置為5位(因此，Y結(jié)合在4位)的本發(fā)明化合物，如表23所示。
表23

(代表化合物7)通式(I)中，R3為甲基，其取代位置為5位，X1＝化學(xué)鍵、X2＝化學(xué)鍵、Y＝CH2CH2、B1＝N、B2＝O，R1的取代位置為2位，R2的取代位置為5位(因此，Y結(jié)合在4位)的本發(fā)明化合物，如表24所示。
表24

以下敘述本發(fā)明的藥理效果。
本發(fā)明化合物的PPARδ活化作用通過下述方法求出，通過DMRIE-C將受體質(zhì)粒(GAL4-hPPARδLBD)、蟲熒光素酶表達(dá)質(zhì)粒(UASx4-TK-LUC)和β-半乳糖苷酶(β-GAL)表達(dá)質(zhì)粒基因?qū)隒V-1細(xì)胞后，在本發(fā)明化合物存在下培養(yǎng)40小時后，測定溶解細(xì)胞的蟲熒光素酶活性和β-GAL活性。
另外，蟲熒光素酶活性用β-GAL活性補(bǔ)正，以用L-165041處理的細(xì)胞的蟲熒光素酶活性作為100％，計算出相對的配體活性。(下述另外，從表27可以確認(rèn)，實(shí)施例6得到的化合物具有優(yōu)良的HDL膽固醇增加作用。(實(shí)施例13)因此，本發(fā)明的通式(I)表示的化合物具有優(yōu)良的PPARδ活化作用，因而可以期待成為降血糖劑、降脂質(zhì)劑、肥胖、X綜合癥、高膽固醇血癥、高脂蛋白血癥等代謝異常疾病、高脂血癥、動脈硬化癥、循環(huán)系統(tǒng)疾病、過食癥、缺血性疾病、肺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、大腸癌、卵巢癌等惡性腫瘤、阿耳茨海默氏病、炎癥性疾病、骨質(zhì)疏松(Mano H.等，(2000)J.Biol.Chem.，2758126-8132)、突眼性甲狀腺腫、腎上腺皮質(zhì)營養(yǎng)障礙等的預(yù)防或治療劑。
本發(fā)明化合物對于人可以通過一般的口服給藥或非口服給藥等適當(dāng)?shù)慕o藥方法給藥。
為了制成制劑，可以按照制劑技術(shù)領(lǐng)域的常規(guī)方法制成片劑、顆粒劑、散劑、膠囊劑、懸濁劑、注射劑、栓劑等劑型。
配制這些劑型時，可以使用常規(guī)的賦型劑、崩解劑、粘合劑、潤滑劑、色素、稀釋劑等。其中，作為賦型劑，可以例舉乳糖、D-甘露醇、結(jié)晶纖維素、葡萄糖等，作為崩解劑，可以例舉淀粉、羧甲基纖維素鈣(CMC-Ca)等，作為潤滑劑，可以例舉硬脂酸鎂、滑石等，作為粘合劑，可以例舉羥丙基纖維素(HPC)、明膠、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等。
給藥量通常對于成人，按照有效成分的本發(fā)明化合物計，注射劑的場合為1日約0.1mg～100mg，口服給藥的場合為1日1mg～2000mg，可以根據(jù)年齡、癥狀等增減。
以下，結(jié)合實(shí)施例更詳細(xì)地說明本發(fā)明，但是本發(fā)明并不受這些實(shí)施例實(shí)施例1[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]乙酸(1)6-乙酰氨基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑?qū)?-乙酰氨基-3-甲基-1，2-苯并異噁唑(571mg，3.00mmol)溶解于干燥THF(18mL)后，在氮?dú)猸h(huán)境下，在-78℃，用10分鐘滴加2M的LDA(3.1mL，6.2mmol)。接著，用7分鐘滴加4-碘代甲基-5-異丙基-2-(2，4-二氯苯基)噁唑(1.19g，3.00mmol)的THF(3.0mL)溶液。滴加后，在相同條件下攪拌1小時后，恢復(fù)到室溫，加入飽和的氯化銨水溶液和乙酸乙酯。分離收集有機(jī)層后，用水、食鹽水洗滌后，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸餾除去乙酸乙酯后，用硅膠柱色譜法(氯仿/甲醇＝80/1)精制殘渣，得到上述標(biāo)題化合物，為微黃色油狀物(904mg)。(收率70％)1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.10(d，6H，J＝7Hz)，2.22(s，3H)，2.93(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.06(t，2H，J＝7Hz)，3.34(t，2H，J＝7Hz)，7.12(dd，1H，J＝2，9Hz)7.32(dd，1H，J＝2，9Hz)7.37(d，1H，J＝2Hz)，7.43(d，1H，J＝9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝9Hz)，8.05(s，1H).
(2)6-羥基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑?qū)⑸鲜?-乙酰氨基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑(900mg，1.96mmol)懸濁于3N鹽酸(45mL)后，將反應(yīng)溫度提高到100℃，加熱4小時。確認(rèn)反應(yīng)結(jié)束后，恢復(fù)到室溫，加入飽和的碳酸氫鈉水溶液進(jìn)行中和。加入乙酸乙酯，分離收集有機(jī)層后，用食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸餾除去溶劑，在殘渣中得到6-氨基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑(770mg)，為褐色油狀物。將該氨基體(770mg，1.85mmol)懸濁于25％硫酸(9.3mL)后，用冰冷卻。接著，用5分鐘滴加亞硝酸鈉水溶液(166mg，2.41mmol/1.3ml)后，在相同條件下攪拌45分鐘。將該反應(yīng)溶液用5分鐘滴加到加熱回流中的75％硫酸水溶液(7.4mL)中，再在相同條件下加熱回流4小時。放冷后，用乙醚萃取，用飽和的氯化銨水溶液和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸餾除去乙醚后，用硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝3/1)精制殘渣，得到上述標(biāo)題化合物，為微黃色油狀物(138mg)。(2步收率17％)1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(d，6H，J＝7Hz)，2.93(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.06(t，2 H，J＝7Hz)，3.32(t，2 H，J＝7Hz)，5.36(s，1H)，6.75(dd，1H，J＝2，8Hz)6.92(d，1H，J＝2Hz)7.30(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.35(d，1H，J＝8Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝8Hz).
(3)6-烯丙氧基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑?qū)⑸鲜?-羥基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑(500mg，1.20mmol)、碳酸鉀(249mg，1.80mmol)懸濁于丙酮(30mL)后，在冰冷條件下用1分鐘滴加烯丙基溴(217mg，1.80mmol)。恢復(fù)到室溫，攪拌20小時后，過濾不溶物，再用丙酮洗滌，蒸餾除去溶劑。用硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝4/1)精制該殘渣，得到上述標(biāo)題化合物，為無色油狀物(420mg)。(收率77％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.11(d，6H，J＝7Hz)，2.92(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.06(t，2H，J＝7Hz)，3.32(t，2H，J＝7Hz)，4.5-4.6(m，2H)，5.3-5.5(m，2H)，6.0-6.1(m，1H)，6.86(dd，1H，J＝2，8Hz)6.96(d，1H，J＝2Hz)7.32(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.36(d，1H，J＝8Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.90(d，1H，J＝8Hz).
(4)7-烯丙基-6-羥基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑?qū)?-烯丙氧基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑(70mg，0.153mmol)在180℃下加熱4小時?；謴?fù)到室溫，直接用硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝3/1)精制反應(yīng)混合物，得到上述標(biāo)題化合物，為白色粉末(47mg)。
(收率67％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.11(d，6H，J＝7Hz)，2.92(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.05(t，2H，J＝7Hz)，3.31(t，2H，J＝7Hz)，3.65-3.70(m，2H)，5.15-5.25(m，2H)，5.41(s，1H)，6.0-6.1(m，1H)，6.76(d，1H，J＝8Hz)，7.25(d，1H，J＝8Hz)7.32(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝8Hz).
(5)[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]乙酸乙酯將上述7-烯丙基-6-羥基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑(45mg，0.098mmol)、碳酸鉀(20mg，0.147mmol)懸濁于丙酮(5.0mL)后，在冰冷條件下加入溴代乙酸乙酯(25mg，0.147mmol)的丙酮溶液。恢復(fù)到室溫，攪拌20小時后，過濾不溶物，再用丙酮洗滌后，蒸餾除去溶劑。用硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝4/1)精制該殘渣，得到上述標(biāo)題化合物，為無色油狀物(43mg)。(收率80％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.11(d，6H，J＝7Hz)，1.28(t，3H，J＝7Hz)，2.91(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.05(t，2H，J＝7Hz)，3.32(t，2H，J＝7Hz)，3.65-3.70(m，2H)，4.25(q，2H，J＝7Hz)4.70(s，2H)4.95-5.15(m，2H)，6.0-6.1(m，1H)，6.74(d，1H，J＝9Hz)，7.30(d，1H，J＝9Hz)7.32(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝9Hz).
(6)[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]乙酸將上述酯體(40mg，0.074mmol)溶解于乙醇-水(3.0mL-1.5mL)的混合溶劑后，加入氫氧化鋰的一水合物(8mg)，攪拌20小時。在反應(yīng)溶液中加入冰，接著加入3N鹽酸進(jìn)行中和。過濾收集析出的晶體后，用水洗滌，然后風(fēng)干一夜，再減壓干燥，得到標(biāo)題化合物(25mg)。(收率66％)白色粉末
mp80-85℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.13(d，6H，J＝7Hz)，2.94(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.06(t，2H，J＝7Hz)，3.31(t，2H，J＝7Hz)，3.65-3.75(m，2H)，4.73(s，2H)5.0-5.2(m，2H)，5.9-6.1(m，1H)，6.76(d，1H，J＝9Hz)，7.32(d，1H，J＝9Hz)7.32(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝9Hz).
實(shí)施例22-[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸(1)2-[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸乙酯將上述7-烯丙基-6-羥基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑(92mg，0.20mmol)、2-溴-2-甲基丙酸乙酯(196mg，1.00mmol)、碳酸鉀(138mg，1.00mmol)懸濁于甲乙酮(5.0mL)后，加熱回流20小時?；謴?fù)到室溫后，過濾不溶物，再用甲乙酮洗滌，蒸餾除去溶劑。用硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝5/1)精制殘渣，得到上述標(biāo)題化合物，為無色油狀物(100mg)。(定量收率)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.09(d，6H，J＝7Hz)，1.23(t，3H，J＝7Hz)，1.60(s，6H)，2.90(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.04(t，2H，J＝7Hz)，3.31(t，2H，J＝7Hz)，3.65-3.70(m，2H)，4.23(q，2H，J＝7Hz)，4.95-5.15(m，2H)，6.0-6.1(m，1H)，6.65(d，1H，J＝9Hz)，7.19(d，1H，J＝9Hz)，7.32(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝9Hz).
(2)2-[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]-2-甲基-丙酸按照與實(shí)施例1之(6)同樣的方法，得到標(biāo)題化合物。(收率73％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.10(d，6H，J＝7Hz)，1.63(s，6H)，2.92(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.06(t，2H，J＝7Hz)，3.31(t，2H，J＝7Hz)，3.65-3.70(m，2H)，5.00-5.15(m，2H)，5.9-6.1(m，1H)，6.80(d，1H，J＝8Hz)，7.21(d，1H，J＝8Hz)，7.30(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.49(d，1H，J＝2Hz)，7.85(d，1H，J＝8Hz).
實(shí)施例3[[7-丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]乙酸(1)[[7-丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]乙酸乙酯將[[7-烯丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]乙酸乙酯(65mg，0.12mmol)溶解于乙醇(7.0mL)后，加入10％Pd-C(6mg)。在氫氣環(huán)境下(常壓)攪拌3小時后，過濾不溶物。濃縮濾液，在殘渣中得到上述標(biāo)題化合物，為無色油狀物(63mg)。(收率97％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ0.97(t，3H，J＝7Hz)，1.09(d，6H，J＝7Hz)，1.26(t，3H，J＝7Hz)，1.7-1.8(m，2H)，2.9-3.0(m，3H)，3.05(t，2H，J＝7Hz)，3.32(t，2H，J＝7Hz)，4.25(q，2H，J＝7Hz)，4.70(s，2H)，6.71(d，1H，J＝8Hz)，7.25(d，1H，J＝9Hz)，7.33(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.89(d，1H，J＝8Hz).
(2)[[7-丙基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]乙酸按照與實(shí)施例1之(6)同樣的方法，得到標(biāo)題化合物。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ0.96(t，3H，J＝7Hz)，1.12(d，6H，J＝7Hz)，1.7-1.8(m，2H)，2.9-3.0(m，3H)，3.06(t，2H，J＝7Hz)，3.30(t，2H，J＝7Hz)，4.25(q，2H，J＝7Hz)，4.74(s，2H)，6.74(d，1H，J＝8Hz)，7.26(d，1H，J＝9Hz)，7.33(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.87(d，1H，J＝8Hz).
實(shí)施例42-[[7-烯丙基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-異丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸下述(1)～(5)按照與實(shí)施例1同樣的方法合成，另外(6)和(7)按照與實(shí)施例2同樣的方法合成。
(1)6-乙酰氨基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-異丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑微黃色油狀物收率20％
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，2.23(s，3H)，3.03(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.25-3.40(m，4H)，7.20(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.36(d，1H，J＝2Hz)，7.44(d，1H，J＝9Hz)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，7.99(d，2H，J＝8Hz)，8.07(s，1H).
(2)6-氨基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-異丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑微黃色油狀物收率93％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，3.04(dq，1H，J＝7Hz，7Hz.)，3.15-3.40(m，4H)，4.0-4.05(br，2H)，6.61(dd，1H，J＝2，9Hz)，6.73(d，1H，J＝2Hz)，7.27(d，1H，J＝9Hz)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，8.00(d，2H，J＝8Hz)，(3)6-羥基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-異丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑微黃色油狀物收率32％
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，3.03(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.2-3.4(m，4H)，5，95-6.00(br，1H)，6.83(dd，1H，J＝2，9Hz)，6.79(d，1H，J＝2Hz)，7.38(d，1H，J＝9Hz)，7.64(d，2H，J＝8Hz)，7.99(d，2H，J＝8Hz)，(4)6-烯丙氧基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-異丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑微黃色油狀物收率49％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，3.04(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.2-3.4(m，4H)，4.60-4.65(m，2H)，5.30-5.50(m，2H)，6.00-6.15(m，1H)，6.93(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.00(d，1H，J＝2Hz)，7.40(d，1H，J＝9Hz)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，8.00(d，2H，J＝8Hz).
(5)7-烯丙氧基-6-羥基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-異丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑白色粉末收率71％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，3.03(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.2-3.4(m，4H)，3.65-3.75(m，2H)，5.15-5.30(m，2H)，5.56(s，1H)，6.00-6.10(m，1H)，6.84(d，1H，J＝9Hz)，7.28(d，1H，J＝9Hz)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，8.00(d，2H，J＝8Hz)，(6)2-[[7-烯丙基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-異丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸乙酯微黃色油狀物收率48％
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(t，3H，J＝7Hz)，1.23(d，6H，J＝7Hz)，1.62(s，6H)，3.02(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.2-3.4(m，4H)，3.65-3.75(m，2H)，4.23(q，2H，J＝7Hz)，5.0-5.15(m，2H)，5.95-6.10(m，1H)，6.71(d，1H，J＝9Hz)，7.22(d，1H，J＝9Hz)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，7.99(d，2H，J＝8Hz)，(7)2-[[7-烯丙基-3-[2-[2-[(4-三氟甲基)苯基]-4-異丙基-5-噻唑基]乙基]-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸無色油狀物收率81％
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(d，6H，J＝7Hz)，1.65(s，6H)，3.01(dq，1H，J＝7Hz，7Hz)，3.2-3.4(m，4H)，3.65-3.75(m，2H)，5.0-5.15(m，2H)，5.95-6.10(m，1H)，6.85(d，1H，J＝9Hz)，7.27(d，1H，J＝9Hz)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，7.99(d，2H，J＝8Hz)，實(shí)施例5[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]-乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧代乙酸(1)6-乙酰氨基-3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑?qū)?-乙酰氨基-3，5-二甲基-1，2-苯并異噁唑(9.18g，45.0mmol)溶解于干燥THF(315mL)后，在氮?dú)猸h(huán)境下，在-78℃用40分鐘滴加2M的LDA(53mL，106.0mmol)。接著，在相同條件(-78℃)下攪拌15分鐘后，用45分鐘滴加4-異丙基-5-碘代甲基-2-(4-三氟甲基)苯基-噻唑(18.51g，45.0mmol)的THF溶液(100mL)。在相同條件(-78℃)下攪拌1小時后，恢復(fù)到室溫，加入飽和氯化銨水溶液和乙酸乙酯。分離收集乙酸乙酯層后，用水、食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾。蒸餾除去乙酸乙酯后，用硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝1/1)精制殘渣，得到上述標(biāo)題化合物，為微黃色晶體(7.40g)。(收率34％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，2.26(bs，3H)，2.32(s，3H)，3.04(m，1H)，3.26(dd，2H，J＝6，8Hz)，3.37(dd，2H，J＝6，8Hz)，7.12(bs，1H)，7.65(d，2H，J＝8Hz)，7.99(d，2H，J＝8Hz)，8.40(bs，1H).
(2)6-氨基-3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑?qū)⑸鲜鲺０敷w(18.0g，36.9mmol)懸濁于4M鹽酸(360mL)、乙酸(180mL)后，加熱回流24小時。確認(rèn)反應(yīng)結(jié)束后，恢復(fù)到室溫，注入到冰冷的水中，加入10N氫氧化鈉水溶液進(jìn)行中和。加入乙酸乙酯，分離收集有機(jī)層后，用飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾。蒸餾除去溶劑后，過濾收集殘渣的粗晶體，用己烷洗滌，得到標(biāo)題化合物，為微褐色晶體(16.8g)。(收率94％)1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，2.21(s，3H)，3.05(m，1H)，3.21(dd，2H，J＝6，9Hz)，3.35(dd，2H，J＝6，9Hz)，
4.01(bs，2H)，6.75(s，1H)，7.14(s，1H)，7.64(d，2H，J＝8Hz)，8.00(d，2H，J＝8Hz).
(3)6-羥基-3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑?qū)⑸鲜霰桨敷w(15.4g，34.6mmol)懸濁于25％硫酸(170ml)后，在冰冷條件下，加入亞硝酸鈉水溶液(3.10g，45mmol)。在相同條件下攪拌20分鐘后，用20分鐘滴加到加熱至130℃的75％硫酸中。在相同條件下加熱回流3小時后，恢復(fù)到室溫，倒入冰冷的水中。加入乙酸乙酯，分離收集有機(jī)層，用無水硫酸鈉干燥，過濾。蒸餾除去溶劑后，過濾收集殘渣的粗晶體，用己烷洗滌，得到標(biāo)題化合物，為微褐色晶體(8.36g)。(收率54％)1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，2.30(s，3H)，3.04(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，5.31(s，1H)，6.93(s，1H)，7.22(s，1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
(4)[3-[2-[4-異丙基 2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧代乙酸乙酯按照與實(shí)施例1之(5)同樣的方法，得到標(biāo)題化合物。
微黃色油狀物 收率65％
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，1.31(t，3H，J＝7Hz)，2.33(s，3H)，3.04(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，4.12(q，2H，J＝7Hz)4.71(s，2H)，6.83(s，1H)，7.25(s，1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
(5)[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧代乙酸按照與實(shí)施例1之(6)同樣的方法，得到標(biāo)題化合物。
白色粉末 收率71％mp(dec)180-190℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，2.33(s，3H)，3.03(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，4.77(s，2H)，6.87(s，1H)，7.26(s，1H)，7.64(d，2H，J＝9Hz)，7.99(d，2H，J＝9Hz).
IR(KBr)cm-12960，2930，1740，1620，1520，1450，1420，1320，1280，1250，1160，1120，1060，840.
實(shí)施例62-[[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸(1)2-[[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸乙酯按照與實(shí)施例2之(1)同樣的方法，得到標(biāo)題化合物。
微黃色油狀物 收率85％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(d，6H，J＝7Hz)，1.24(t，3H，J＝7Hz)，1. 67(s，6H)2.26(s，3H)，3.02(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，4.25(q，2H，J＝7Hz)6.77(s，1H)，7.25(s，1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
(2)2-[[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸按照與實(shí)施例2之(2)同樣的方法，得到標(biāo)題化合物。
白色晶體 收率94％
mp(dec)166-168℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(d，6H.J＝7Hz)，1.72(s，6H)2.28(s，3H)，3.02(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，6.93(s，1H)，7.25(s，1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
IR(KBr)cm-13000，1720，1620，1520，1450，1370，1320，1280，1160，1120，1060，850，820.
實(shí)施例7[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]硫代乙酸(1)3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]-乙基]-6-巰基-5-甲基-1，2-苯并異噁唑?qū)?-氨基-3-[2-[異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑(475mg，1.07mmol)溶解于乙醇(3.3mL)中。在冰冷條件下(外部溫度為0℃)，加入濃鹽酸(1.68mL)后，加入亞硝酸鈉(81mg，1.17mmol)。30分鐘后，用5分鐘滴加黃原酸鉀(430mg，2.68mmol)的水溶液，然后使反應(yīng)溫度為45℃，攪拌18小時。放冷后，將反應(yīng)溶液倒入水中，用乙酸乙酯萃取，分離收集有機(jī)層，用飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾。蒸餾除去溶劑后，用硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝5/1)精制殘渣，得到二硫代碳酸酯體的粗產(chǎn)物(131mg)。接著，將該二硫代碳酸酯體溶解于乙醇后，在室溫下加入氫氧化鉀(36mg)的水溶液，加熱回流3小時。確認(rèn)原料消失后，將反應(yīng)溶液倒入冰冷的水中，加入1N鹽酸進(jìn)行中和。加入乙酸乙酯，分離收集有機(jī)層后，用飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾。蒸餾除去溶劑后，用硅膠柱色譜法(己烷乙酸乙酯/乙酸乙酯＝5/1)精制殘渣，得到標(biāo)題化合物(65mg)。(收率7％)(2步收率)1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(d，6H，J＝7Hz)，2.38(s，3H)，3.04(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，3.60(s，1H)，7.26(s，1H)，7.49(s，1H)7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
(2)[[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]硫]乙酸乙酯按照與實(shí)施例1之(5)同樣的方法，得到目的物。
微黃色油狀物 收率69％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，1.27(t，3H，J＝7Hz)，2.41(s，3H)，3.03(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，3.76(s，2H)，4.22(q，2H，J＝7Hz)7.27(s，1H)，7.45(s，1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，7.99(d，2H，J＝9Hz).
(3)[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]硫代乙酸按照與實(shí)施例1之(6)同樣的方法，得到目的物。
微黃白色粉末 收率73％mp(dec)170℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.24(d，6H，J＝7Hz)，2.42(s，3H)，3.03(m，1H)，3.2-3.4(m，4H)，3.81(s，2H)，7.28(s，1H)，7.46(s.1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
實(shí)施例8[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氨基乙酸(1)[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氨基乙酸乙酯將6-氨基-3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑(445mg，1.00mmol)、溴代乙酸乙酯(154mg，1.20mmol)、二異丙基乙胺(142mg，1.10mmol)溶解于DMF(10mL)中。加熱回流18小時后，將反應(yīng)溶液倒入水中，用乙酸乙酯萃取。分離收集有機(jī)層后，用飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾。蒸餾除去溶劑后，用硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝3/1)精制殘渣，得到茶褐色粉末狀的標(biāo)題化合物(160mg)。(收率30％)
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，1.34(t，3H，J＝7Hz)，2.25(s，3H)，3.05(m，1H)，3.2-3.3(m，4H)，3.97(d，2H，J＝3Hz)4.6-4.7(br，1H)4.12(q，2H，J＝7Hz)6.51(s，1H)，7.15(s，1H)，7.64(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
(2)[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氨基乙酸按照與實(shí)施例1之(6)同樣的方法，得到標(biāo)題化合物。
微褐色晶體 收率73％mp(dec)180-185℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，6H，J＝7Hz)，2.25(s，3H)，3.04(m，1H)，3.2-3.3(m，4H)，4.07(s，2H)，6.54(s，1H)，
7.15(s，1H)，7.64(d，2H，J＝9Hz)，7.99(d，2H，J＝9Hz).
IR(KBr)cm-13425，2950，2925，1740，1620，1520，1440，1380，1370，1320，1220，1160，1060，840.
實(shí)施例9[3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧代乙酸(1)6-乙酰氨基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑按照與實(shí)施例5之(1)同樣的方法，得到標(biāo)題化合物。
褐色油狀物 收率34％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.10(d，6H，J＝7Hz)，2.24(bs，3H)，2.26(s，3H)，2.92(m，1H)，3.05(t，2H，J＝7Hz)，3.33(t，2H，J＝7Hz)，7.16(bs，1H)，7.28(s，1H)，7.32(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.91(d，1H，J＝9Hz)，8.34(bs，1H).
(2)6-氨基-3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑按照與實(shí)施例5之(2)同樣的方法，得到標(biāo)題化合物。
收率42％
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.10(d，6H，J＝7Hz)，2.14(s，3H)，2.92(m，1H)，3.03(t，2H，J＝7Hz)，3.27(t，2H，J＝7Hz)，3.97(bs，2H)，6.72(s，1H)，7.13(s，1H)，7.32(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.92(d，1H，J＝8Hz).
(3)3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-6-羥基-5-甲基-1，2-苯并異噁唑按照與實(shí)施例5之(3)同樣的方法，得到標(biāo)題化合物。
淡黃色晶體 收率44％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.11(d，6H，J＝7Hz)，2.22(s，3H)，2.92(m，1H)，3.05(t，2H，J＝7Hz)，3.29(t，2H，J＝7Hz)，6.15(bs，1H)，6.88(s，1H)，7.19(s，1H)，7.32(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.90(d，1H，J＝9Hz).
(4)[[3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧代乙酸乙酯按照與實(shí)施例5之(4)同樣的方法，得到標(biāo)題化合物。
收率97％1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.11(d，6H，J＝7Hz)，1.30(t，3H，J＝7Hz)，2.23(s，3H)，2.91(m，1H)，3.04(t，2H，J＝7Hz)，3.31(t，2H，J＝7Hz)，4.28(q，2H，J＝7Hz)，4.69(s，2H)，6.80(s，1H)，7.24(s，1H)，7.33(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.51(d，1H，J＝2Hz)，7.91(d，1H，J＝8Hz).
(5)[3-[2-[2-(2，4-二氯苯基)-5-異丙基-4-噁唑基]-乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧代乙酸按照與實(shí)施例5之(5)同樣的方法，得到標(biāo)題化合物。
收率88％淡黃色晶體
mp(dec)180-184℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.11(d，6H，J＝7Hz)，2.26(s，3H)，2.93(m，1H)，3.04(t，2H，J＝7Hz)，3.30(t，2H，J＝7Hz)，4.76(s，2H)6.84(s，1H)，7.23(s，1H)，7.33(dd，1H，J＝2，8Hz)，7.64(d，1H，J＝2Hz)，7.99(d，1H，J＝8Hz).
IR(KBr)cm-11749，1718，1625，1562，1521，1457，1446，1429，1388，1361，1317，1284，1251，1162，1103，1087，1041，898，863，831，817，775，732，674，667，611.
實(shí)施例102-[[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸2-哌啶子基乙酯鹽酸鹽將2-[[3-[2-[4-異丙基2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸(247mg，0.463mmol)溶解于二氯甲烷(10.0mL)后，在冰冷條件下，加入草酰氯(0.053mL，0.60mmol)、DMF(1-drop)?；謴?fù)到室溫，在氮?dú)猸h(huán)境下攪拌3小時后，減壓蒸餾。將殘渣的酰氯體溶解于二氯甲烷(10.0mL)后，加入哌啶2-乙醇(90mg，0.70mmol)、三乙胺(71mg，0.70mmol)、4-二甲氨基吡啶(3mg)。在室溫下攪拌20小時后，注入到冰冷的水中。加入乙酸乙酯，分離收集有機(jī)層后，依次用飽和食鹽水、水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾。在減壓條件下蒸餾除去溶劑，用硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝3/1)精制殘渣，得到無色油狀的2-[[3-[2-[4-異丙基 2-(4-三氟甲基)苯基-5-噻唑基]-乙基]-5-甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基]氧]-2-甲基丙酸2-哌啶子基乙酯(190mg)。將該酯體溶解于乙醚(4.0mL)后，加入氯化氫-乙醚溶液。過濾收集析出的晶體，得到標(biāo)題化合物160mg。(收率51％)白色晶體mp75-80℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ(フリ一體)1.24(d，6H，J＝7Hz)，1.3-1.4(m，2H)，1.5-1.6(m，4H)1.68(s，6H)，2.26(s，3H)，2.3-2.4(m，4H)，2.55(t，2H，J＝6Hz)，3.04(m，1H)，3.23(t，2H，J＝8Hz)，3.34(t，2H，J＝8Hz)，4.31(t，2H，J＝6Hz)，6.86(s，1H)，7.23(s，1H)，7.65(d，2H，J＝9Hz)，8.00(d，2H，J＝9Hz).
實(shí)施例11 藥理試驗(yàn)1PPARα、γ、δ活化能力的測定(1)如下所述測定試驗(yàn)化合物(實(shí)施例1～4)的PPARα、γ和δ活化能力。
I.測定方法1)材料非洲綠猴(アフリカミドリザル)腎成纖維細(xì)胞(CV-1細(xì)胞)由東北大學(xué)加齡醫(yī)學(xué)研究所醫(yī)用細(xì)胞資源中心購得。所有試驗(yàn)化合物均溶解于二甲基亞砜(DMSO)，最終以DMSO濃度0.1％用于試驗(yàn)。
2)質(zhì)粒受體表達(dá)質(zhì)粒(GAL4-hPPARαLBD、GAL4-hPPARγ LBD、GAL4-hPPARδ LBD)、報道質(zhì)粒(UASx4-TK-LUC)、β-半乳糖苷酶表達(dá)質(zhì)粒(βGAL)使用與Kliewer，S.A.等，((1992)Nature，358771-774)同樣的質(zhì)粒。
3)轉(zhuǎn)染將CV-1細(xì)胞以每1孔2×105個的細(xì)胞濃度接種在24孔培養(yǎng)皿中，用添加了4％胎牛血清(FCS)的OPTI-MEM I Reduced SerumMedium(Life Technologies)500μl/well培養(yǎng)24小時。然后，用未添加血清的OPTI-MEM洗滌細(xì)胞，添加含DNA溶液〔每1孔(250μl添加溶液)含有以下成分的溶液；0.03μg的GAL4-hPPARδLBD、0.25μg的UASx4-TK-LUC、0.35μg的βGAL、2μl的lipofection試劑DMRIE-C(Life Technologies)，將這些物質(zhì)溶解于OPTI-MEM中，在室溫下靜置30分鐘得到的溶液〕，在37℃下培養(yǎng)5小時。
4)添加試驗(yàn)化合物進(jìn)行的細(xì)胞處理除去含DNA溶液，新更換為含有試驗(yàn)化合物(溶解于100％DMSO中使終濃度達(dá)到10-6M的溶液)的4％FCS-OPTI-MEM 500μl，再在37℃下培養(yǎng)40小時。
5)報道基因表達(dá)水平的測定除去培養(yǎng)基，用PBS洗滌2次后，進(jìn)行1次冷凍融解，每1孔添加蟲熒光素酶活性測定用溶解緩沖液(25mM Tris-PO4(pH7.8)、15％v/v Glyserol、2％CHAPS、1％Lecithin、1％BSA、4mM EGTA(pH8.0)、8mM MgCl2、1mM DTT)100μl，在室溫下放置10分鐘。分別取其中20μl到96孔測定用板上，添加蟲熒光素酶基質(zhì)溶液100μl(Piccagene，Nippon Gene公司制)，使用MLR-100型microluminoreader(Corona電氣公司制)，求出1秒內(nèi)的發(fā)光量(蟲熒光素活性)。測定添加蟲熒光素基因的同時加入的βGAL的細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入引起的活性表達(dá)量，用導(dǎo)入基因的轉(zhuǎn)染效率補(bǔ)正添加化合物引起的蟲熒光素酶活性的變化。β-半乳糖苷酶活性的測定方法是，分別取50μl的溶解試樣到另一96孔板上，添加ONPG(2-硝基苯基-β-D-吡喃半乳糖苷)溶液100μl，在室溫下溫育5分鐘。加入反應(yīng)停止液(1M碳酸鈉溶液)50μl，測定414nm處的吸光度。以僅用作為溶劑使用的DMSO(0.1％濃度)處理后的細(xì)胞的蟲熒光素酶活性值(對照值)為0％，以用對照藥(PPARα10-4M WY-165041，PPARγ10-5MRosiglitezone、PPARδ10-4M L-165041)處理后的細(xì)胞的蟲熒光素酶活性值為100％，計算出相對的PPAR活化能力。
II.試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果如表25所示。
表25

由表25可以看出，實(shí)施例化合物顯示優(yōu)良的PPAR活化作用。特別是實(shí)施例1和2得到的化合物顯示選擇性的PPARδ活化作用。
實(shí)施例12 藥理試驗(yàn)2PPARα、γ、δ活化能力的測定(2)關(guān)于實(shí)施例5～10的化合物，按照與實(shí)施例11同樣的方法，測定PPARα、γ、δ活化能力，其結(jié)果如表26所示。
表26

PPAR活化能力以對照藥為100％時的相對值PPARα、γ、δ活化能力的測定是試驗(yàn)化合物濃度為10-7M的值，其中僅實(shí)施例5、6、7的δ活性為10-8M的值對照藥α WY-14643 10-4Mγ rosiglitazone 10-5Mδ L-165041 10-4M由表26可以看出，實(shí)施例6～10得到的化合物顯示優(yōu)良的選擇性PPARδ活化作用。
實(shí)施例13 藥理試驗(yàn)3HDL膽固醇增加作用的測定(試驗(yàn)方法)使用遺傳性肥胖小鼠db/db小鼠研究HDL膽固醇增加作用。以血清中HDL膽固醇量為標(biāo)準(zhǔn)將db/db小鼠(10周齡)分組，將懸濁于1％甲基纖維素溶液中的本發(fā)明化合物(后期的各實(shí)施例合成的化合物)和GW-501516口服給藥，1日2次，給藥1周。對照組(非藥物給藥組)同樣口服給予1％甲基纖維素溶液。最終給藥16小時后取血，測定血清中HDL膽固醇量。測定如下進(jìn)行，使用Chol/Trig Combo(株式會社Helena研究所)按照瓊脂糖電泳法求出アポ蛋白膽固醇比率，將其代入按照使用Pure Auto TCHO(第一化學(xué)藥品)的酶法用自動分析裝置(7060E型，株式會社日立制作所制)求出的總膽固醇量，計算得到。
(結(jié)果)求出各化合物給藥組的血清中HDL膽固醇量，計算出該值相對于對照的比例(百分比)，其結(jié)果如表27所示。
表27HDL膽固醇增加作用

由表27可以看出，實(shí)施例6得到的化合物顯示優(yōu)良的HDL膽固醇增加作用。
權(quán)利要求
1.下述通式(I)表示的化合物或其鹽。 (式中，A表示O、S或NR7，其中，R7表示氫原子或碳原子數(shù)1～8的烷基，B1表示CW或N，其中，W表示氫原子或化學(xué)鍵，B2表示O、S或NR8，其中，R8表示氫原子或碳原子數(shù)1～8的烷基，X1和X2表示O、S、NH、NHC(＝O)、C(＝O)、C(＝N-OR9)、CH(OR10)、C＝C、C≡C或化學(xué)鍵，其中，R9和R10表示氫原子或碳原子數(shù)1～8的烷基，Y表示可以具有碳原子數(shù)1～8的烷基或1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基作為取代基的碳原子數(shù)1～8的亞烷基鏈，Z表示NH、O或S，R1表示可以具有從碳原子數(shù)1～8的烷基、碳原子數(shù)1～8的烷氧基、1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基、羥基、硝基、氨基、苯基、吡啶基或鹵素原子中選擇的基團(tuán)或原子作為取代基的芳基，或者由作為成環(huán)原子的1～3個從氮原子、氧原子或硫原子中選擇的雜原子以及剩余的碳原子構(gòu)成的5～8元的雜環(huán)基團(tuán)(而且，該雜環(huán)上可以縮合苯環(huán))，R2表示碳原子數(shù)2～8的烷基、1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基、碳原子數(shù)3～7的環(huán)烷基、碳原子數(shù)2～8的烯基或碳原子數(shù)2～8的炔基，或者可以具有從碳原子數(shù)1～8的烷基、碳原子數(shù)1～8的烷氧基、1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基、羥基、硝基、氨基、苯基、吡啶基或鹵素原子中選擇的基團(tuán)或原子作為取代基的芳基取代的烷基(烷基部分的碳原子數(shù)為1～4)或者5～8元的雜環(huán)取代的烷基(雜環(huán)由作為成環(huán)原子的1～3個從氮原子、氧原子或硫原子中選擇的雜原子以及剩余的碳原子構(gòu)成，且烷基部分的碳原子數(shù)為1～4)，R3表示鹵素原子、三氟甲基、碳原子數(shù)1～8的烷基、碳原子數(shù)2～8的烯基或碳原子數(shù)2～8的炔基，R4和R5表示氫原子、碳原子數(shù)1～8的烷基、或1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基，而且，R6表示氫原子、氨基取代的碳原子數(shù)1～8的烷基、碳原子數(shù)1～8的烷基、或堿金屬，其中，Z和R3與苯環(huán)結(jié)合，X2不與苯環(huán)結(jié)合。)
2.如權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽，R1結(jié)合在噁唑環(huán)、噻唑環(huán)或咪唑環(huán)的2位。
3.如權(quán)利要求1或2所述的化合物或其鹽，B1為N，B2為O。
4.如權(quán)利要求1～3中任意一項(xiàng)所述的化合物或其鹽，R6為氫原子。
5.如權(quán)利要求1～4中任意一項(xiàng)所述的化合物或其鹽，X2為化學(xué)鍵。
6.如權(quán)利要求1～5中任意一項(xiàng)所述的化合物或其鹽，X1為化學(xué)鍵。
7.如權(quán)利要求1～6中任意一項(xiàng)所述的化合物或其鹽，R1為具有從碳原子數(shù)1～8的烷基、碳原子數(shù)1～8的烷氧基、1～3個鹵素原子取代的碳原子數(shù)1～8的烷基、羥基、硝基、氨基、苯基、吡啶基或鹵素原子中選擇的基團(tuán)或原子作為取代基的芳基。
8.如權(quán)利要求1～7中任意一項(xiàng)所述的化合物或其鹽，R2為碳原子數(shù)2～8的烷基。
9.如權(quán)利要求1～8中任意一項(xiàng)所述的化合物或其鹽，R3為碳原子數(shù)1～8的烷基或碳原子數(shù)2～8的烯基。
10.一種過氧化物酶體增殖劑應(yīng)答性受體δ的活化劑，含有權(quán)利要求1～9中任意一項(xiàng)所述的化合物或其鹽作為有效成分。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(I)表示的化合物或其鹽以及含有其作為有效成分的PPARδ活化劑。(式中，A表示O或S等，B
文檔編號A61P3/10GK1568323SQ0282024
公開日2005年1月19日 申請日期2002年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2001年10月12日
發(fā)明者佐久間詔悟, 山川富雄, 神田貴史, 增井誠一郎 申請人:日本化學(xué)醫(yī)藥株式會社