專利名稱：一種治療胃脘疼痛的藥物及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中醫(yī)藥領(lǐng)域，具體地說涉及一種用于治療胃脘疼痛的中成約，木發(fā)明還涉及該藥物的制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著現(xiàn)代社會(huì)的來臨，生活節(jié)奏越發(fā)緊張，以胃脘疼痛為主要病癥的胃腸疾病也就越見明顯增多，而止痛效果確切，服用方便，無毒副作用的或副作用少的藥物更是人們的需求。胃脘痛的西醫(yī)治療，主要為對(duì)癥治療為主，多采用胃腸解痙藥物以止痛，其止痛效果雖然迅速和確實(shí)，但也常給患者帶來較多的不良反應(yīng)和副作用，同時(shí)也只能是治標(biāo)不能治本。
而歷代中醫(yī)藥對(duì)此病的治療積累了豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)，古代名方更是其精華。目前純中藥制劑治療以胃脘部疼痛為主的胃寒疼痛的使用方式，最多的是水煎煮法和水提醇沉法，得到的藥液直接使用或加工成所需劑型，原料藥的活性成分中易揮發(fā)部位或水溶性部位則很難保留，也就是說原料中的活性成分難以最大程度的提取和保留。

發(fā)明內(nèi)容
木發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有胃腸疾病治療上存在的問題，提供一種副作用小、療效顯著、原料活性成份提取效率高的治療胃脘疼痛的純中藥藥物。
本發(fā)明的另一種目的是提供上述藥物的軟膠囊制劑的制備方法。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述藥物在制備用于抗?jié)兗翱刮刚衬p傷，抑制胃液分泌、胃液酸度和胃蛋白酶活性，解痙，鎮(zhèn)痛，抗炎藥物中的應(yīng)用。
為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案本發(fā)明基于祖國(guó)醫(yī)學(xué)對(duì)胃脘部疼痛為主的胃寒疼痛的認(rèn)識(shí)及治療原則，參考現(xiàn)代藥理研究成就，在查閱了大量的古代文獻(xiàn)和現(xiàn)代中醫(yī)藥研究資料的基礎(chǔ)上，從祖國(guó)醫(yī)藥寶庫中選擇了古代名方二姜丸。本方由溫中散寒，回陽通脈，燥濕消痰的中藥干姜和溫胃散寒，消食止痛的中藥高良姜組成。并在傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，采用現(xiàn)代生物醫(yī)藥技術(shù)，最大限度的提取中藥材(干姜和高良姜)的有效活性成分，并經(jīng)過最佳配比的篩選，制成純中藥制劑，治療胃脘部疼痛為主的胃寒疼痛，具有良好的效果。
一種治療胃脘疼痛的藥物，由下列組分按重量百分比組成干姜提取物10％～70％高良姜提取物30％～90％。
上述治療胃脘疼痛的藥物，其優(yōu)選重量百分比是干姜提取物40％～60％高良姜提取物60％～40％。
上述治療胃脘疼痛的藥物，其最佳重量百分比是干姜提取物50％高良姜提取物50％。
所述干姜提取物是由以下步驟制備而成(1)將干姜清洗干凈；(2)將干姜在40～60℃下烘干；(3)將烘干后的干姜粉碎至20目細(xì)粉；(4)將粉碎后的干姜粉采用超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，萃取溫度為40～50℃，萃取壓力25～30mPa，萃取時(shí)間為1.5～2.5小時(shí)，得到超臨界提取物；(5)超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，乙醇濃度為60～90％，醇提溫度為60～80℃，醇提液濃縮至相對(duì)密度1.0～1.2(在80℃條件下)，加5～7倍量的水充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置，濾過，取沉淀80℃真空干燥得干燥提取物；(6)合并干燥物提取物和超臨界提取物即得干姜提取物。
所述高良姜提取物是由以下步驟制備而成(1)將高良姜清洗干凈；(2)將高良姜在40～60℃下烘干；(3)將烘干后的高良姜粉碎至20目細(xì)粉；(4)將粉碎后的高良姜粉采用超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，萃取溫度為40～50℃，萃取壓力25～30mPa，萃取時(shí)間為1.5～2.5小時(shí)，得到超臨界提取物；(5)超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，乙醇濃度為60～90％，醇提溫度為60～80℃；醇提液濃縮至相對(duì)密度1.0～1.2(在80℃條件下)，加5～7倍量的水充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置，濾過，取沉淀80℃真空干燥得干燥提取物；(6)合并干燥物提取物和超臨界提取物即得高良姜提取物。
所述治療胃脘疼痛的藥物的軟膠囊制劑的方法包括如下步驟(1)將干姜、高良姜清洗干凈；(2)將干姜、高良姜分別在40～60℃下烘干；(3)將烘干后的干姜、高良姜粉碎至20目細(xì)粉；(4)將粉碎后的干姜粉、高良姜粉合并采用超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，萃取溫度為40～50℃，萃取壓力25～30mPa，萃取時(shí)間為1.5～2.5小時(shí)，得到超臨界提取物；(5)超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，乙醇濃度為60～90％，醇提溫度為60～80℃。醇提液濃縮至相對(duì)密度1.0～1.2(在80℃條件下)，加5～7倍量的水充分?jǐn)嚢杈鶆颍o置4小時(shí)以上，濾過，取沉淀80℃真空干燥得干燥提取物。
(6)取干燥物與適量PEG400微熱攪拌溶解后，加入超臨界提取物，甘油適量，尼泊金乙酯0.3‰，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笥眯D(zhuǎn)式扎囊機(jī)壓制成軟膠囊。
本發(fā)明的藥物在抗?jié)兗翱刮刚衬p傷，抑制胃液分泌、胃液酸度利胃蛋白酶活性，解痙，鎮(zhèn)痛，抗炎藥物中有顯著的療效。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)1、采用二氧化碳超臨界流體萃取裝置分別提取干姜、高良姜的親脂性有效活性成分(揮發(fā)油)，提取效率高，無濟(jì)劑殘留毒性，天然活性成分熱敏成分不易分解破壞，能最大限度的保持提取物天然特征；2、超臨界提取后的藥渣進(jìn)一步采用醇提水沉法提取親水性活性成分，各種性質(zhì)的有效成分提取完全。3、本發(fā)明的組分少，制備工藝十分簡(jiǎn)單；4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示抗?jié)兗翱刮刚衬p傷作用，抑制胃液分泌、胃液酸度和胃蛋白酶活性作用，解痙作用，鎮(zhèn)痛作用，抗炎作用顯著。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1藥物軟膠囊的制備用清水分別將干姜0.8kg、高良姜2.4kg清洗干凈，然后在50℃下烘干，將烘干后的干姜、高良姜粉碎至20目細(xì)粉，將粉碎后的干姜粉、高良姜粉合并采用漢維(HANDWAY)公司制造的型號(hào)為100ml-SPE的超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，萃取溫度為45℃，萃取壓力30mPa，萃取時(shí)間為2小時(shí)；超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，乙醇濃度為75％，醇提溫度為80℃。醇提液濃縮至相對(duì)密度1.2(在80℃條件下)，加5.5倍量的水充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置5小時(shí)，濾過，取沉淀80℃真空干燥得干燥提取物。取干燥提取物與350gPEG400微熱攪拌溶解后，加入超臨界提取物，甘油50g，尼泊金乙酯0.18g，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笥眯D(zhuǎn)式扎囊機(jī)壓制成軟膠囊。
實(shí)施例2藥物軟膠囊的制備用清水分別將干姜1.92kg、高良姜1.28kg清洗干凈，將干姜、高良姜分別在40℃下烘干，將烘干后的干姜、高良姜粉碎至20日細(xì)粉，將粉碎后的干姜粉、高良姜粉合并采用漢維(HANDWAY)公司制造的型號(hào)為100ml-SPE的超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，萃取溫度為50℃，萃取壓力26mPa，萃取時(shí)間為2.2小時(shí)；超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，乙醇濃度為80％，醇提溫度為70℃；醇提液濃縮至相對(duì)密度1.1(80℃)，加6倍量的水充分?jǐn)嚢杈鶆颍o置6小時(shí)，濾過，取沉淀80℃真空干燥得干燥提取物。取干燥提取物與360gPEG400微熱攪拌溶解后，加入超臨界提取物，甘油40g，尼泊金乙酯0.18g，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笥眯D(zhuǎn)式扎囊機(jī)壓制成軟膠囊。
實(shí)施例3藥物軟膠囊的制備用清水分別將干姜1.6kg、高良姜1.6kg清洗干凈，將干姜、高良姜分別在60℃下烘干，將烘干后的干姜、高良姜粉碎至20目細(xì)粉，將粉碎后的干姜粉、高良姜粉合并采用漢維(HANDWAY)公司制造的型號(hào)為100ml-SPE的超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，萃取溫度為47℃，萃取壓力25mPa，萃取時(shí)間為1.9小時(shí)；超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，乙醇濃度為75％，醇提溫度為75℃。醇提液濃縮至相對(duì)密度1.0(80℃)，加5倍量的水充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置4小時(shí)以上，濾過，取沉淀80℃真空干燥得干燥提取物，取干燥提取物與350gPEG400微熱攪拌溶解后，加入超臨界提取物，甘油50g，尼泊金乙酯0.18g，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笥眯D(zhuǎn)式扎囊機(jī)壓制成軟膠囊。
實(shí)施例4藥物軟膠囊的制備用清水分別將干姜0.48kg、高良姜2.72kg清洗干凈，將干姜、高良姜分別在55℃下烘干，將烘干后的干姜、高良姜粉碎至20目細(xì)粉，將粉碎后的干姜粉、高良姜粉合并采用漢維(HANDWAY)公司制造的型號(hào)為100ml-SPE的超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，萃取溫度為45℃，萃取壓力28mPa，萃取時(shí)間為2小時(shí)；超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，乙醇濃度為70％，醇提溫度為70℃，醇提液濃縮至相對(duì)密度1.1(80℃)，加5倍量的水充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置4小時(shí)以上，濾過，取沉淀80℃真空干燥得干燥提取物；取干燥提取物與340gPEG400微熱攪拌溶解后，加入超臨界提取物，甘油60g，尼泊金乙酯0.18g，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笥眯D(zhuǎn)式扎囊機(jī)壓制成軟膠囊。
實(shí)施例5藥物軟膠囊的抗?jié)兗翱刮刚衬p傷作用1、對(duì)大鼠急性胃潰瘍的影響(幽門結(jié)扎型)選取健康大鼠，體重為200～250g，隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)前，大鼠先禁食48小時(shí)，自由飲水。實(shí)驗(yàn)時(shí)用乙醚將動(dòng)物輕度麻醉，固定，常規(guī)消毒，自胸骨劍突下沿腹中線剪開腹壁(2-3cm)，將胃輕輕鉤出，在胃幽門下穿線并將幽門結(jié)扎(注意不損傷及結(jié)扎鄰近血管)，并于十二指腸給藥一次，對(duì)照組給等量蒸餾水?？p合腹壁切口，術(shù)后禁食禁水，18小時(shí)后處死動(dòng)物取出胃后用1％甲醛溶液固定10分鐘，沿胃大彎剪開胃壁，記錄每組產(chǎn)生潰瘍數(shù)、并計(jì)算潰瘍面積。結(jié)果見表1。
表1、藥物軟膠囊對(duì)大鼠幽門結(jié)扎型潰瘍的影響(X±S)

注與對(duì)照組比較，*P＜0.05**P＜0.01(下同)表1結(jié)果提示，藥物軟膠囊各劑量組均可使大鼠幽門結(jié)扎型潰瘍的發(fā)生數(shù)明顯減少(P＜0.05-0.01)，并顯著縮小潰瘍面積(P＜0.01)。
2、對(duì)大鼠應(yīng)激性胃潰瘍的影響(水浸拘束法)選取健康大鼠，體重為160～180g，隨機(jī)分組，每天灌胃給藥一次，對(duì)照組灌等量蒸餾水，連續(xù)3天。實(shí)驗(yàn)前，大鼠禁食12小時(shí)，自由飲水。實(shí)驗(yàn)時(shí)將動(dòng)物固定在金屬網(wǎng)制的小籠內(nèi)，浸于20℃±1℃的水槽中，12h后取出動(dòng)物并處死，取出胃后用1％甲醛溶液固定10分鐘，沿胃大彎剪開胃壁，記錄潰瘍數(shù)，以胃粘膜損傷長(zhǎng)度總和計(jì)算潰瘍指數(shù)。結(jié)果見表2。
表2、藥物軟膠囊對(duì)大鼠應(yīng)激性潰瘍的影響(X±S)

表2結(jié)果提示，藥物軟膠囊各劑量組均可使大鼠應(yīng)激性潰瘍的潰瘍指數(shù)明顯減少(P＜0.01)，高劑量組還可明顯減少潰瘍的發(fā)生數(shù)(P＜0.01)。
3、對(duì)大鼠慢性胃潰瘍的影響(醋酸損傷型)選取健康大鼠，體重為200～250g，隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)前，大鼠先禁食12小時(shí)，自由飲水。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天用乙醚將動(dòng)物輕度麻醉，固定，常規(guī)消毒，自胸骨劍突下沿腹中線剪開腹壁(2-3cm)，將腺胃部輕輕鉤出，在胃的腹側(cè)面，胃體部與幽門竇交界處，將微量注射器平刺入漿膜下0.4-0.5mm注入20％醋酸0.05ml，形成丘疹。將胃輕輕送回腹內(nèi)，縫合腹壁肌層及皮膚。術(shù)后常規(guī)飼養(yǎng)，從手術(shù)次日起，每天灌胃給藥一次，對(duì)照組灌等量蒸餾水，連續(xù)治療14天。第15天處死動(dòng)物，取出胃后用1％甲醛溶液固定10分鐘，沿胃大彎剪開胃壁，用潰瘍的最長(zhǎng)徑和最短徑的均值表示潰瘍指數(shù)，并計(jì)算潰瘍愈合百分率。結(jié)果見表3表3、藥物軟膠囊對(duì)大鼠醋酸損傷型胃潰瘍的影響(X±S)


表3結(jié)果表明，藥物軟膠囊中、高劑量使大鼠醋酸損傷型胃潰瘍模型的潰瘍指數(shù)明顯減少(P＜0.01)，潰瘍愈合率分別為36.49％和39.73％，低劑量對(duì)潰瘍指數(shù)無明顯影響(P＞0.05)，潰瘍愈合率為15.41％。
4、對(duì)鹽酸--乙醇致大鼠急性胃粘膜損傷的影響選取健康大鼠，體重為180～220g，隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)前，大鼠先禁食48小時(shí)，自由飲水。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天灌胃給藥一次，對(duì)照組灌等量蒸餾水，1h后每只大鼠灌胃鹽酸—乙醇混合液(150mmo/L鹽酸—60％乙醇)1ml/只，再過1h脫頸椎處死動(dòng)物，取出胃后用1％甲醛溶液固定10分鐘，沿胃大彎剪開胃壁，以損傷長(zhǎng)度(寬度大于1mm加倍)總和作為胃粘膜損傷指數(shù)，并計(jì)算抑制率。見表4。
表4、藥物軟膠囊對(duì)鹽酸-乙醇致大鼠急性胃粘膜損傷的影響(X±S)

表4結(jié)果表明，藥物軟膠囊各劑量均可明顯減輕鹽酸—乙醇所致大鼠急性胃粘膜損傷(P＜0.01)，抑制率分別為64.15％、68.54％和65.47％。藥物軟膠囊對(duì)大鼠幽門結(jié)扎型急性胃潰瘍、水浸拘束型大鼠應(yīng)激性胃潰瘍以及醋酸損傷型慢性胃潰瘍均有明顯抑制作用；并對(duì)鹽酸—乙醇所致大鼠急性胃粘膜損傷有明顯的保護(hù)作用。表明藥物軟膠囊具有抗?jié)兗翱刮刚衬p傷的作用。
實(shí)施例6藥物軟膠囊對(duì)胃腸功能的影響1、對(duì)胃液、胃酸、胃蛋白酶活性的影響選取健康大鼠，體重為200～250g，隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)時(shí)，大鼠先禁食24小時(shí)，自由飲水。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天用乙醚將動(dòng)物輕度麻醉，固定，常規(guī)消毒，自胸骨劍突下沿腹中線剪開腹壁(2-3cm)，將胃輕輕鉤出，在胃幽門下穿線并將幽門結(jié)扎(注意不損傷及結(jié)扎鄰近血管)，并于十二指腸給藥一次，對(duì)照組給等體積蒸餾水?？p合腹壁切口，術(shù)后禁食禁水，5小時(shí)后處死動(dòng)物，取出胃后收集胃液于刻度離心管，以3000轉(zhuǎn)，分離心15分鐘，汲取上清液計(jì)算胃液量，并進(jìn)行胃液分析。采用NaOH滴定法測(cè)定并計(jì)算胃液游離酸、總酸度、總酸排出量；采用麥特氏毛細(xì)玻管法測(cè)定胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量。結(jié)果見表5。
表5、藥物軟膠囊對(duì)大鼠胃液、胃酸分泌和胃蛋白酶活性的影響(X±S)

表5結(jié)果提示，藥物軟膠囊中、高劑量對(duì)大鼠胃液分泌均有顯著抑制作用(P＜0.01)；高劑量能顯著降低胃液總酸度、總酸排出量，并明顯降低胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量(P＜0.05～0.01)，對(duì)游離酸的影響不明顯(P＞0.05)；中劑量對(duì)總酸排出量、胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量有顯著抑制作用(P＜0.05～0.01)，而對(duì)游離酸和總酸度的影響不明顯(P＞0.05)；低劑量則對(duì)人鼠胃液、胃酸分泌和胃蛋白酶活性均無明顯影響(P＞0.05)。胃乃安對(duì)大鼠門液分泌和總酸排出量亦有抑制作用(P＜0.05)，對(duì)游離酸、總酸度和胃蛋白酶活性、胃蛋白酶排出量無明顯影響(P＞0.05)。
3、藥物軟膠囊對(duì)胃排空的影響選取健康小鼠，體重為18～22g，隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)前，動(dòng)物禁食12小時(shí)，自由飲水。實(shí)驗(yàn)時(shí)各組動(dòng)物灌胃給藥一次，對(duì)照組灌服等量蒸餾水。給藥后一小時(shí)，各組動(dòng)物灌服0.3％酚紅溶液0.2ml，10min后頸椎脫門處死動(dòng)物，迅速剖腹取胃，用濾紙吸干外壁，置小燒杯中并加入10ml蒸餾水，沿胃人彎剪開胃壁，以蒸餾水洗出內(nèi)容物，以3000r/min離心5min，在500nm處測(cè)OD值，對(duì)照管用10ml蒸餾水加0.3％酚紅液0.2ml為標(biāo)準(zhǔn)液對(duì)照。并計(jì)算胃中酚紅殘留率。結(jié)果見表6。

表6、藥物軟膠囊對(duì)小鼠胃排空的影響(X±S)

表6結(jié)果表明，藥物軟膠囊各劑量對(duì)有對(duì)小鼠胃排空均抑制作用，使胃中酚紅殘留率明顯提高(P＜0.05)。藥物軟膠囊可明顯減少大鼠胃液分泌量，并降低胃液中總酸排出量，抑制胃蛋白酶活性，減少胃蛋白酶排出量。表明藥物軟膠囊具有抑制胃液分泌、胃液酸度和胃蛋白酶活性作用。
實(shí)施例7藥物軟膠囊對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)功能的影響1、對(duì)正常小鼠腸推進(jìn)的影響選取健康小鼠，體重為18～22g，隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)前，動(dòng)物禁食12小時(shí)，自由飲水。實(shí)驗(yàn)時(shí)各組動(dòng)物灌胃給藥一次(均含10％活性炭)，對(duì)照組灌服等量蒸餾水(含10％活性炭)。給藥后45min處死小鼠，剪取幽門至回盲部的腸管，測(cè)量小腸全長(zhǎng)及炭末在腸內(nèi)推進(jìn)的距離，計(jì)算炭末推進(jìn)百分率。結(jié)果見表7。
表7、藥物軟膠囊對(duì)正常小鼠小腸推進(jìn)的影響(X±S)


表7結(jié)果提示，藥物軟膠囊中、高劑量對(duì)正常小鼠小腸推進(jìn)功能有顯著促進(jìn)作用，可明顯增加推進(jìn)距離和推進(jìn)率(P＜0.05～0.01)，低劑量和胃乃安對(duì)正常小鼠小腸推進(jìn)功能均無明顯影響(P＞0.05)。
2、對(duì)推進(jìn)亢進(jìn)小鼠小腸推進(jìn)的影響選取健康小鼠，體重為18～22g，隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)前，動(dòng)物禁食12小時(shí)，白由飲水。實(shí)驗(yàn)時(shí)各組動(dòng)物灌胃給藥一次(均含10％活性炭)，正常對(duì)照與模型對(duì)照組灌服等量蒸餾水(含10％活性炭)。灌胃同時(shí)按20ml/kg的給藥體積皮下注射新斯的明(正常對(duì)照組給予生理鹽水)，30min后處死小鼠，剪取幽門至回肓部的腸管，測(cè)量小腸全長(zhǎng)及炭末在腸內(nèi)推進(jìn)的距離，計(jì)算炭末推進(jìn)百分率。結(jié)果見表8。
表8、藥物軟膠囊對(duì)推進(jìn)亢進(jìn)小鼠小腸推進(jìn)的影響(X±S)

注與模型組比較，*P＜0.05**P＜0.01表8結(jié)果提示，藥物軟膠囊各劑量對(duì)推進(jìn)亢進(jìn)小鼠小腸推進(jìn)功能有顯著抑制作用，可明顯降低推進(jìn)距離和推進(jìn)率(P＜0.01)。
3、對(duì)離體腸管運(yùn)動(dòng)的影響3.1對(duì)正常離體兔腸管運(yùn)動(dòng)的影響取生理鹽水加聚乙二醇400(PGE400)配至5％濃度作為空白對(duì)照液。取藥物軟膠囊浸膏10mg，加PGE400 0.5ml，在研缽中充分研磨混勻，加蒸餾水配至10ml，使充分乳化，久置不分層。分別稀釋至不同濃度(以浴槽內(nèi)藥物終濃度表示)，并調(diào)節(jié)PH值使PH≈7。取新西蘭兔一只，禁食24h后空氣栓塞處死，剖腹取出空腸及回腸上段，置于充氧冷臺(tái)氏液中，洗去內(nèi)容物，置冰箱備用。實(shí)驗(yàn)時(shí)剪2cm腸段，置于充滿30ml臺(tái)氏液(36.5±0.5℃)的麥?zhǔn)显〔壑?，持續(xù)通氧，腸段兩端分別固定于通氣鉤及張力換能器上。實(shí)驗(yàn)前，張力換能器進(jìn)行定標(biāo)處理，并加以1g前負(fù)荷，連接腸機(jī)標(biāo)本后，調(diào)整張力換能器及生理記錄儀，待腸段自發(fā)性舒縮穩(wěn)定后描記腸管正常運(yùn)動(dòng)曲線。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，用微量加樣器往浴槽中加入各種藥液，每次給藥體積0.2ml，描記舒縮曲線后，立即用新鮮臺(tái)氏液沖洗2~3次，待腸段舒縮恢復(fù)正常后才可進(jìn)行下一次給藥，無法恢復(fù)正常舒縮的腸段棄去。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后保存記錄文件，用軟件提供的區(qū)間測(cè)量方法測(cè)量第3min的平均張力，并根據(jù)平均張力值計(jì)算抑制率。結(jié)果見表9

表9、藥物軟膠囊對(duì)正常離體腸管的影響(X±S)

表9表明藥物軟膠囊不同劑量對(duì)正常離體兔腸的收縮均有明顯抑制作用(P＜0.01)。并且其抑制作用呈劑量依賴性增加。
3.2對(duì)乙酰膽堿所致離體兔腸痙攣的影響離體腸肌制備、離體腸管張力描記方法及實(shí)驗(yàn)藥物的制備方法同前。在浴槽中加入乙酰膽堿7.34×10-6mol/L致痙后，加入不同濃度藥物或阿托品，記錄給Ach后和給受試藥后第3min的平均張力，計(jì)算抑制率并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果見表10。
表10、藥物軟膠囊對(duì)乙酰膽堿所致離體兔腸痙攣的影響(X±S)

表10表明藥物軟膠囊不同劑量和阿托品對(duì)乙酰膽堿所致離體兔腸痙攣均有明顯的抑制作用(P＜0.01)。并且其抑制作用呈劑量依賴性增加。
3.3對(duì)大鼠在體回腸活動(dòng)的影響取健康SD系大鼠三只，稱重，以20％烏來糖液(10ml/kg)皮下注射，待其眼瞼反射消失后，背位固定于大鼠固定板上，剪毛，沿腹中線作一長(zhǎng)約3~4cm切口，打開腹腔，找到十二指腸，在其下穿線備用。另找到回盲部，在回盲部以上約10cm處選一段回腸段，將應(yīng)變片小心縫合在腸肌表面，縫合線穿過應(yīng)變片四角硅膠小孔，不觸及其所包埋的應(yīng)變片，應(yīng)變片壓敏感應(yīng)方向與腸肌推進(jìn)運(yùn)動(dòng)方向垂直。然后把回腸放回腹腔內(nèi)，用縫合線把應(yīng)變片導(dǎo)線縫合固定在腹腔切口的腹壁上，以防滑脫?？p合下腹部切口，導(dǎo)線引出體外，分別連接到生理機(jī)能記錄儀三個(gè)通道，用沾有生理鹽水的紗布蓋好切口，調(diào)節(jié)生理機(jī)能記錄儀先描記一段正常回腸運(yùn)動(dòng)曲線后，用溫生理鹽水(約25℃)十二指腸給藥10ml/kg，避免干擾回腸蠕動(dòng)曲線，繼續(xù)描記曲線，待其穩(wěn)定后經(jīng)十二指腸給予受試藥(10ml/kg)。10min后在大鼠后肢處注射新斯的明0.03mg/kg，并繼續(xù)描記曲線。記錄給藥前與給藥后1h內(nèi)的回腸蠕動(dòng)曲線，用軟件提供的區(qū)間測(cè)量方法測(cè)量給藥前2min內(nèi)、注射新斯的明前2min內(nèi)以及給藥后第20~21min內(nèi)回腸活動(dòng)的峰峰值，計(jì)算注射新斯的明后峰峰值凈增百分率。結(jié)果見表11。

表11、藥物軟膠囊對(duì)新斯的明所致大鼠在體回腸活動(dòng)增強(qiáng)的影響(X±S)


表11說明，肌注新斯的明可致大鼠在體回腸蠕動(dòng)顯著增強(qiáng)，藥物軟膠囊各劑量可顯著抑制大鼠在體回腸活動(dòng)(P＜0.01)。藥物軟膠囊能明顯抑制小鼠胃排空；抑制小腸功能亢進(jìn)小鼠的小腸推進(jìn)作用；對(duì)正常離體兔腸及乙酰膽堿所致離體兔腸平滑肌痙攣有明顯抑制作用，并對(duì)新斯的明所致大鼠在體同腸蠕動(dòng)增強(qiáng)有明顯的抑制作用。表明藥物軟膠囊具有解痙作用。
實(shí)施例8藥物軟膠囊的鎮(zhèn)痛作用1、對(duì)熱刺激所致小鼠疼痛的影響(熱板法)依熱板法選取體重18～20g、基礎(chǔ)痛閾在5～30秒的健康雌性小鼠，隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)時(shí)，先灌胃給藥于藥后30、60、120分鐘置小鼠于熱板上(溫度為55℃±0.50)，以舔后足作為疼痛指標(biāo)，觀察藥后小鼠痛閾的變化。結(jié)果見表12。
表12、對(duì)熱刺激所致小鼠疼痛的影響(X±S)

表12結(jié)果提示，藥物軟膠囊低、中劑量可顯著提高30～60min熱刺激小鼠痛閾值(P＜0.05～0.01)，高劑量可顯著提高30～120min熱刺激小鼠痛閾值(P＜0.05～0.01)。
2、對(duì)醋酸所致小鼠疼痛的影響(扭體法)選取健康雄性小鼠，體重為20～22g，隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)時(shí)，小鼠先禁食12小時(shí)，然后灌胃給藥，并于藥后1小時(shí)腹腔注射0.8％醋酸生理鹽水溶液0.2ml/只，觀察記錄20分鐘內(nèi)小鼠的扭體次數(shù)，比較各組差異。結(jié)果見表13。
表13對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響(X±S)

表13結(jié)果提示，藥物軟膠囊低、中、高劑量均能顯著減少醋酸所致小鼠扭體次數(shù)(P＜0.01)。
3、對(duì)甲醛足跖皮下注射所致小鼠疼痛的影響選取健康小鼠，體重20～22g，雌雄各半，隨機(jī)分組，試驗(yàn)時(shí)，先灌胃給藥，藥后1小時(shí)，各組小鼠左后足足跖皮下注射2.5％甲醛生理鹽水溶液0.05ml/只，立即計(jì)時(shí)，記錄5分鐘內(nèi)小鼠舔左后足累積時(shí)間，比較各組差異。結(jié)果見表14。
表14對(duì)甲醛足跖皮下注射所致小鼠疼痛的影響(X±S)

表14結(jié)果提示，藥物軟膠囊各劑量均能顯著減少甲醛足跖皮下注射所致疼痛小鼠的舔足累積時(shí)間(P＜0.01)。藥物軟膠囊對(duì)醋酸、熱刺激以及甲醛所致小鼠疼痛均有明顯的抑制作用。提示藥物軟膠囊具有鎮(zhèn)痛作用。
實(shí)施例9藥物軟膠囊的抗炎作用1、對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高的影響選取健康雄性小鼠，體重為20～22g，隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)時(shí)，按文獻(xiàn)方法于藥后1小時(shí)由小鼠尾靜脈注入2％伊文思藍(lán)生理鹽水溶液0.1ml/10g體重，同時(shí)于腹腔注射0.8％醋酸生理鹽水溶液0.2ml/只，20分鐘后斷頭放血處死小鼠，剖開腹腔用適量生理鹽水反復(fù)沖洗，并收集洗出液，濾紙濾過，并調(diào)整容積至10ml，于722型光柵分光光度計(jì)中(波長(zhǎng)590nm)測(cè)定OD值，比較各組的差異。結(jié)果見表15。
表15、對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高的影響(X±S)

表15結(jié)果提示，藥物軟膠囊各劑量均能顯著抑制醋酸所致小鼠毛細(xì)血管通透性增高(P＜0.01)。
2、對(duì)大鼠蛋清性足腫脹的影響選取健康雄性大鼠，體重為130-150g。實(shí)驗(yàn)時(shí)，先測(cè)定右后足踝關(guān)節(jié)以下容積(作為基礎(chǔ)值)，然后灌胃給藥(對(duì)照組給以等量蒸餾水)，藥后1小時(shí)，于大鼠右后足跖腱膜下注射100％新鮮雞蛋清(0.1ml/只)致炎，測(cè)量致炎后1、2、3、4小時(shí)的足腫容積，減去基礎(chǔ)值，作為足腫脹度。結(jié)果見表16。
表16、藥物軟膠囊對(duì)大鼠蛋清性足腫脹的影響(X±S)


表16結(jié)果提示，藥物軟膠囊低劑量可顯著抑制1h的足腫脹度(P＜0.01)，中、高劑量可顯著抑制1～4小時(shí)各時(shí)間點(diǎn)的足腫脹度(P＜0.05～0.01)。可見，藥物軟膠囊對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高以及大鼠蛋清性足腫脹均有明顯抑制作用。提示藥物軟膠囊具有抗炎作用。
本研究結(jié)果表明，藥物軟膠囊具有抗?jié)?，胃腸解痙，抑制胃液和胃酸分泌，抑制胃蛋白酶活性，以及鎮(zhèn)痛、抗炎的作用。
權(quán)利要求
1.一種治療胃脘疼痛的藥物，其特征是由下列組分按重量百分比組成干姜提取物10％～70％高良姜提取物30％～90％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療胃脘疼痛的藥物，其特征在于各組分的重量百分比是干姜提取物40％～60％高良姜提取物60％～40％。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的治療胃脘疼痛的藥物，其特征在于各組分的重量百分比是干姜提取物50％高良姜提取物50％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的治療胃脘疼痛的藥物，其特征在于所述干姜提取物是由以下步驟制備而成(1)將干姜清洗干凈；(2)將干姜在40～60℃下烘干；(3)將烘干后的干姜粉碎；(4)將粉碎后的干姜粉采用超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，得到超臨界提取物；(5)超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，加水?dāng)嚢杈鶆?，靜置，濾過，取沉淀真空干燥得干燥提取物；(6)合并干燥物提取物和超臨界提取物即得干姜提取物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的治療胃脘疼痛的藥物，其特征在于所述高良姜提取物是由以下步驟制備而成(1)將高良姜清洗干凈；(2)將高良姜在40～60℃下烘干；(3)將烘干后的高良姜粉碎；(4)將粉碎后的高良姜粉采用超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，得到超臨界提取物；(5)超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，加水?dāng)嚢杈鶆?，靜置，濾過，取沉淀真空干燥得干燥提取物；(6)合并干燥物提取物和超臨界提取物即得高良姜提取物。
6.一種制備權(quán)利要求1或2或3所述藥物的軟膠囊制劑的方法，其特征在于包括如下步驟(1)將干姜、高良姜清洗干凈；(2)將干姜、高良姜分別在40～60℃下烘干；(3)將烘干后的干姜、高良姜粉碎；(4)將粉碎后的干姜粉、高良姜粉合并采用超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，萃取溫度為40～50℃，萃取壓力25～30mPa，萃取時(shí)間為1.5～2.5小時(shí)，得到超臨界提取物；(5)超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，乙醇濃度為60～90％，醇提溫度為60～80℃；醇提液濃縮至相對(duì)密度1.0～1.2，加5～7倍量的水充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置，濾過，取沉淀真空干燥得干燥提取物。(6)取干燥物與PEG400微熱攪拌溶解后，加入超臨界提取物，甘油，尼泊金乙酯，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝髩褐瞥绍浤z囊。
7.如權(quán)利要求4所述的藥物，其特征在于步驟(4)為將粉碎后的干姜粉采用超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，萃取溫度為40～50℃，萃取壓力25～30mPa，萃取時(shí)間為1.5～2.5小時(shí)，得到超臨界提取物；步驟(5)為超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，乙醇濃度為60～90％，醇提溫度為60～80℃，醇提液濃縮至相對(duì)密度1.0～1.2，加5～7倍量的水充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置，濾過，取沉淀真空干燥得干燥提取物。
8.如權(quán)利要求5所述的藥物，其特征在于步驟(4)為將粉碎后的高良姜粉采用超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，萃取溫度為40～50℃，萃取壓力25～30mPa，萃取時(shí)間為1.5～2.5小時(shí)，得到超臨界提取物；步驟(5)為超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，乙醇濃度為60～90％，醇提溫度為60～80℃；醇提液濃縮至相對(duì)密度1.0～1.2，加5～7倍量的水充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置，濾過，取沉淀真空干燥得干燥提取物。
9.權(quán)利要求1或2或3所述藥物在制備用于抗?jié)兗翱刮刚衬p傷，抑制胃液分泌、胃液酸度和胃蛋白酶活性，解痙，鎮(zhèn)痛，抗炎藥物中的應(yīng)用。
10.如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物在制備用于抗?jié)兗翱刮刚衬p傷，抑制胃液分泌、胃液酸度和胃蛋白酶活性，解痙，鎮(zhèn)痛，抗炎藥物軟膠囊中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療胃脘疼痛的藥物及其制備方法與應(yīng)用。該藥物由干姜提取物10％～70％和高良姜提取物30％～90％組成。該藥物的制備方法為將干姜、高良姜清洗干凈，烘干，粉碎，超臨界二氧化碳流體萃取裝置提取親脂性有效活性物質(zhì)，得到超臨界提取物；超臨界萃取后的藥渣采用醇提水沉法提取親水性有效活性物質(zhì)，醇提液濃縮，加5～7倍量的水充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置，濾過，取沉淀真空干燥得干燥提取物；取干燥物與PEG
文檔編號(hào)A61P1/00GK1733291SQ20051003663
公開日2006年2月15日 申請(qǐng)日期2005年8月19日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月19日
發(fā)明者蔡健聰 申請(qǐng)人:深圳市東方泰格生物醫(yī)藥有限公司