專(zhuān)利名稱(chēng)：一類(lèi)治療乙型肝炎的嘌呤類(lèi)衍生物、其制備方法與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物合成和藥理學(xué)領(lǐng)域。具體地，涉及含有L-氨基酸和非留類(lèi)抗炎藥 基團(tuán)的非環(huán)核苷膦酸酯類(lèi)化合物及其組合物的制備方法，以及該類(lèi)化合物在制備抗病毒藥 物中的用途。
背景技術(shù)：
乙型肝炎病毒Ofepatitis B Virus, HBV)，是最易感染人類(lèi)的病毒之一。WHO報(bào) 告認(rèn)為全球有超過(guò)20億人曾被感染，目前仍約有3. 5-4億為慢性HBV感染者。統(tǒng)計(jì)表明 世界上有80%的肝癌病例都是由于乙肝病毒感染而引起的，此外乙肝病毒感染也是引起 肝衰竭的主要原因，全世界每年約有一百萬(wàn)人死于與乙型肝炎病毒感染相關(guān)的肝疾病。當(dāng) 前，治療乙型肝炎病毒感染主要有兩個(gè)途徑一是免疫治療，如α干擾素；二是針對(duì)病毒 靶點(diǎn)進(jìn)行抗病毒治療，如核苷類(lèi)化合物(包括核苷類(lèi)似物和非環(huán)核苷膦酸酯)。目前已有 三個(gè)非環(huán)核苷膦酸酯類(lèi)藥物上市，其中阿德福韋酯(Adefovir Dipivoxil, ADV)是2002 年經(jīng)FDA批準(zhǔn)第一個(gè)用于治療慢性乙肝的小分子非環(huán)核苷膦酸前藥，該藥能明顯改善乙 型肝炎患者肝臟組織學(xué)性質(zhì)，降低血清HBV-DNA及轉(zhuǎn)氨酶水平，增加e抗原(HBeAg)轉(zhuǎn)化 率(Yuen，M.-F. Expert Opin Pharmacother 2004,5, (11) :2361)。盡管阿德福韋酯具 有以上優(yōu)點(diǎn)，但是臨床研究發(fā)現(xiàn)其不足是產(chǎn)生劑量依耐性腎毒性，釋放出具有細(xì)胞毒性 的特戊酸和甲醛，同時(shí)化合物在胃腸液中穩(wěn)定性較差，不能有效增加作用靶點(diǎn)的藥物濃 it (RouIa B.Clinical Therapeutics 2003,25(12) 3084 ；Nozomu Τ.Human Pathology 2001,32(7)734 ；Douglash, H. S. Am J Physiol RenalPhysiol. 2001,281, F 197)。研究表 明Adefovir Dipivoxil設(shè)計(jì)上是將外源性的片段與非環(huán)核苷膦酸通過(guò)酯鍵相連接，因而在 釋放原藥阿德福韋的過(guò)程中可能會(huì)產(chǎn)生有細(xì)胞毒性的載體片段；另外該前藥設(shè)計(jì)上沒(méi)有考 慮到如何降低載體裂解后形成的膦酸雙負(fù)離子所產(chǎn)生的劑量依賴(lài)性腎毒性，從而在一定程 度上可能限制這些前藥的臨床應(yīng)用。在前期研究中我們根據(jù)小腸黏膜肽轉(zhuǎn)運(yùn)體(PEPTl)對(duì)寡肽的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)理和已 報(bào)道的核苷L-氨基酸酯類(lèi)抗病毒前藥的設(shè)計(jì)原理(Isabel，Rubio-A. TrendsPharmacol Sci 2003,23,(9) :434)，設(shè)計(jì)、合成了未見(jiàn)報(bào)道的新型阿德福韋雙L-氨基酸酯前藥?？笻BV 活性研究發(fā)現(xiàn)該類(lèi)化合物具有較阿德福韋酯更強(qiáng)的抗HBV活性，更低的細(xì)胞毒性和更高的 血菜穩(wěn)定性(Xiaozhong Fu. Bioorg MedChem Lett. 2007,17(2) :465-470)。通過(guò)對(duì)阿德福韋酯產(chǎn)生劑量依賴(lài)性腎毒性的病因?qū)W機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，藥物進(jìn)入血 液循環(huán)后裂解形成的阿德福韋膦酸雙負(fù)離子能被存在于腎小管基底膜上的有機(jī)陰離子轉(zhuǎn) 運(yùn)體l(hOATl)跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)而沉積于腎臟近曲小管內(nèi)，后者通過(guò)抑制近曲小管上皮細(xì)胞線粒 體DN(mtDNA)的復(fù)制從而使mtDNA耗碣，并最終降低由mtDNA編碼的細(xì)胞色素C氧化酶 (COX)水平，破壞上皮細(xì)胞氧化呼吸過(guò)程是藥物產(chǎn)生腎毒性的根本原因(Edmund，S. H.J Am Soc Nephrol. 2000,11,383 ；Roula B. Clinical Therapeutics 2003,25(12) :3084)。藥理 學(xué)研究發(fā)現(xiàn)在阿德福韋的治療濃度下，非留體抗炎藥(NSAIDs)如布洛芬(Ibuprofen)，酮洛芬(Ketoprofen)，氟比洛芬(Flurbiprofen)，萘普生(Naproxen)等能有效抑制hOATl 介導(dǎo)的阿德福韋跨腎小管基底膜轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程并降低后者產(chǎn)生的腎細(xì)胞毒性，非甾體抗炎藥 對(duì)阿德福韋的轉(zhuǎn)運(yùn)抑制機(jī)理與丙磺舒相同，且其半數(shù)抑制濃度低于丙磺舒，研究同時(shí)還發(fā) 現(xiàn)NSAIDs不影響阿德福韋酯的抗病毒活性。另外上述NSAIDs對(duì)表達(dá)hOATl的中國(guó)倉(cāng)鼠 卵巢細(xì)胞(CHOmat)生長(zhǎng)的半數(shù)抑制濃度遠(yuǎn)大于其對(duì)hOATl介導(dǎo)的阿德福韋跨腎小管基底 膜轉(zhuǎn)運(yùn)的半數(shù)抑制濃度(Andrew，S.M.J Pharmacol Exp The. 2000,295,10 ；Tomas Cihlar Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids, 2001, 20 (4-7) :641)。研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)可 以利用hOATl介導(dǎo)的非甾體抗炎藥與阿德福韋之間的相互轉(zhuǎn)運(yùn)拮抗關(guān)系實(shí)現(xiàn)臨床上降 低兩類(lèi)藥物腎毒性而不降低其治療效果的策略(Douglas H. S. Toxicology andApplied Pharmacology 2005，204，198)。這些研究表明NSAIDs在不產(chǎn)生細(xì)胞毒性的前提下可以有 效抑制腎小管上皮細(xì)胞對(duì)阿德福韋吸收，減少阿德福韋的腎細(xì)胞毒性。本專(zhuān)利以降低阿德福韋酯臨床應(yīng)用中產(chǎn)生的劑量依耐性腎毒性為關(guān)鍵突破口，以 具有較高抗HBV活性與較低細(xì)胞毒性的阿德福韋雙L-氨基酸酯為先導(dǎo)化合物，運(yùn)用藥物設(shè) 計(jì)中的結(jié)構(gòu)拼合原理將L-氨基酸與非甾體抗炎藥物結(jié)構(gòu)片段同時(shí)引入阿德福韋的膦酸基 團(tuán)上設(shè)計(jì)、合成阿德福韋單L-氨基酸酯，單非留體抗炎藥物羧酸酯前藥，旨在利用前藥結(jié) 構(gòu)中的L-氨基酸酯片段提高其抗HBV活性與作用選擇性，利用非留體抗炎藥物片段降低其 腎毒性，以期發(fā)現(xiàn)具有較高抗病毒活性、較低腎毒性的抗HBV阿德福韋前藥。從而實(shí)現(xiàn)降低 阿德福韋酯臨床應(yīng)用中出現(xiàn)的劑量依賴(lài)性腎毒性同時(shí)提高藥物的抗HBV活性的目的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一類(lèi)具有抗乙肝病毒活性的嘌呤類(lèi)化合物及其藥理上可以 接受的無(wú)機(jī)或有機(jī)鹽結(jié)晶水合物、溶劑合物。本發(fā)明的另一目的是提供上述化合物的制備方法本發(fā)明的再一目的是提供包含上述化合物的藥物組合物本發(fā)明的再一目的是提供上述化合物的醫(yī)藥用途本發(fā)明的再一目的是提供上述組合物的醫(yī)藥用途本發(fā)明提供了一類(lèi)具有以下結(jié)構(gòu)式I所示結(jié)構(gòu)的嘌呤類(lèi)化合物及其藥理上可以 接受的無(wú)機(jī)或有機(jī)鹽結(jié)晶水合物、溶劑合物。
權(quán)利要求
1. 一類(lèi)具有以下結(jié)構(gòu)式(I)所示的嘌呤類(lèi)化合物及其藥理上可以接受的有機(jī)、無(wú)機(jī)鹽 結(jié)晶水合物、溶劑合物。
2.如權(quán)利要求1所述的嘌呤類(lèi)化合物，其特征再于，所述化合物為1)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-纈氨酸丙基酯，單阿司匹 林丙基酯2)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-亮氨酸丙基酯，單阿司匹 林丙基酯3)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-異亮氨酸丙基酯，單阿司 匹林丙基酯4)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-苯丙氨酸丙基酯，單阿司 匹林丙基酯5)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基甘氨酸丙基酯，單布洛芬丙基6)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-丙氨酸丙基酯，單布洛芬 丙基酯7)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-纈氨酸丙基酯，單布洛芬 丙基酯8)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-亮氨酸丙基酯，單布洛芬 丙基酯9)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-異亮氨酸丙基酯，單布洛 芬丙基酯10)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-苯丙氨酸丙基酯，單布洛 芬丙基酯11)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基甘氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯12)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-丙氨酸丙基酯，單氟比洛 芬丙基酯13)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-纈氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯14)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-亮氨酸丙基酯，單氟比洛 芬丙基酯的合成15)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-異亮氨酸丙基酯，單氟比 洛芬丙基酯16)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-苯丙氨酸丙基酯，單氟比 洛芬丙基酯17)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單L-纈氨酸丙基酯，單阿司匹林丙基酯18)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-亮氨酸丙基酯，單阿司匹林丙基酯19)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-異亮氨酸丙基酯，單阿司匹林丙基酯20)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-苯丙氨酸丙基酯，單阿司匹林丙基酯21)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單甘氨酸丙基酯，單布洛芬丙基酯22)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-丙氨酸丙基酯，單布洛芬丙基酯23)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單L-纈氨酸丙基酯，單布洛芬丙基酯24)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-亮氨酸丙基酯，單布洛芬丙基酯25)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-異亮氨酸丙基酯，單布洛芬丙基酯26)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-苯丙氨酸丙基酯，單布洛芬丙基酯27)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單甘氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯28)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-丙氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯29)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-纈氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯30)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-亮氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯的合成31)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-異亮氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯32)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單L-苯丙氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯
3. 一種用于制備權(quán)利要求1的嘌呤類(lèi)化合物的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟(1)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤(PMEA)與N-叔丁氧羰基-L-氨基酸3-溴丙 基酯在極性非質(zhì)子溶劑中，以N，N' -二環(huán)己基-4-嗎啉基-脒(DCMC)或1，8_ 二氮雜雙 環(huán)[5、4、0]十一烷-7烯為堿，反應(yīng)得到化合物。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，在步驟1)中N-叔丁氧羰基-L-氨基酸 3-溴丙基酯加入量與9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤的比例為1.0 5. 5 Imol, 在30-90°C下反應(yīng)4 48小時(shí)，優(yōu)選N-叔丁氧羰基-L-氨基酸3-溴丙基酯與9-[2-(膦酰 基甲氧基)乙基]腺嘌呤的比例為1.0 2.0 Imol以N，N' -二環(huán)己基_4_嗎啉基-脒 (DCMC)為堿，在N，N- 二甲基甲酰胺為溶劑條件下，在30 60°C下反應(yīng)4 10小時(shí)。
5.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，在步驟2)中非留體抗炎藥3-溴丙基酯加入 量與9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤的比例為1.0 5. 5 lmol，在60 120°C下 反應(yīng)10 48小時(shí)，優(yōu)選非留體抗炎藥3-溴丙基酯與9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌 呤比例為1.0 2.0 lmol，體系在60 100°C反應(yīng)10 18小時(shí)。
6.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，在步驟3)溶劑可以選用氯仿、二氯甲烷或四 氫呋喃，或者在乙酰氯/甲醇體系中，在-10 25°C下反應(yīng)0. 2 16小時(shí)，優(yōu)選在氯仿為溶 劑條件下，體系用85%磷酸在_5°C 室溫下反應(yīng)8 12小時(shí)，或乙酰氯/甲醇體系0°C 25°C反應(yīng)5-12小時(shí)，獲得目標(biāo)化合物。
7.—種藥物組合，其特征在于包括有效治療劑量的權(quán)利要求1的嘌呤類(lèi)化合物、以及 輔劑。
8.權(quán)利要求1所述的嘌呤類(lèi)化合物在制備用于治療乙型肝炎的藥物中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求1所述的嘌呤類(lèi)化合物在治療乙型肝炎的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明設(shè)計(jì)藥物化學(xué)領(lǐng)域。具體地本發(fā)明涉及一類(lèi)能夠治療乙型肝炎的具有以下結(jié)構(gòu)通式I所示結(jié)構(gòu)的嘌呤類(lèi)化合物及其藥理上可接受的無(wú)機(jī)或有機(jī)酸鹽、及其制備方法與用途。藥理實(shí)驗(yàn)證明，這類(lèi)化合物具有明顯的抗乙肝病毒活性，可用于制備抗病毒藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P1/16GK102070670SQ20091010287
公開(kāi)日2011年5月25日 申請(qǐng)日期2009年11月20日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月20日
發(fā)明者傅曉鐘, 蘭燕宇, 周雯, 李勇軍, 歐瑜, 王永林, 王愛(ài)民, 羅春, 鄭林, 黃勇 申請(qǐng)人:貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院