專利名稱：：用作平滑肌細(xì)胞增殖抑制劑的2－取代苯并咪唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及可用作平滑肌細(xì)胞增殖抑制劑的2-取代苯并咪唑衍生物，并涉及用于治療與平滑肌細(xì)胞過(guò)度增殖有關(guān)的疾病如再狹窄的這些化合物及其藥物組合物，本發(fā)明還涉及這些化合物的制備方法。在這些如高血壓誘發(fā)的血管改型，血管再狹窄，和動(dòng)脈粥樣硬化的病理過(guò)程中，血管平滑肌細(xì)胞的增殖和定向遷移是造成血管閉塞的重要因素(Gibbons，G.H.；Dzau，V.J.；NEJM，1994；3301431)?；谥虏∵^(guò)程的病因?qū)W，所有這些病理過(guò)程均稱之為過(guò)度增殖性血管病。血管閉塞發(fā)生在內(nèi)膜平滑肌細(xì)胞增殖引起的狹窄之后(Clowes，A.W.；Reidy，M.A.；血管外科學(xué)雜志(J.Vasc.Surg.)，1991，13885)。內(nèi)膜平滑肌細(xì)胞增殖的根本原因在于導(dǎo)致內(nèi)皮和細(xì)胞外基質(zhì)破壞的血管平滑肌細(xì)胞損傷(Schwartz，S.M.，Human人體病理學(xué)(HumanPathology)，1987；18240；Fingerle，J.，動(dòng)脈硬化癥(Arteriosclerosis)，1990；101082)。通常，動(dòng)脈壁細(xì)胞處于封閉負(fù)控制之下并處于低基礎(chǔ)增殖狀態(tài)或處于靜止非增殖狀態(tài)。在血管損傷后，生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的釋放導(dǎo)致平滑肌細(xì)胞增殖和遷移(Fagin，J.A.；Forrester，J.S.，TrendsinCardiovascularMed.，1992；290.；Shiratani，M.，；Yui，Y.；Kawai，C.，Endothelium，1993；15)。致使內(nèi)膜增生的血管損傷可由免疫反應(yīng)或由浸入性心血管手術(shù)引起。動(dòng)脈粥樣硬化癥是生物物質(zhì)介導(dǎo)的血管損傷的常見(jiàn)形式，并繼發(fā)成狹窄。血管平滑肌細(xì)胞的異常增生具有在內(nèi)皮損傷部位上產(chǎn)生導(dǎo)致阻塞性新內(nèi)膜損傷的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的病理特征(Ross，R.，自然(Nature)，1993362；801；Cascells，W.，循環(huán)(Circulation)，1992；86723)。引起內(nèi)膜增殖的物理?yè)p傷可能發(fā)生在血管成形手術(shù)，器官移植外科手術(shù)和其它破壞血管完整性的血管浸入手術(shù)之后(Clowes，A.W.；Reidy，M.A.，血管外科學(xué)雜志(J.Vasc.Surg.)，1991；13885；Isik，F(xiàn).F.；McDonald，T.O.；Ferguson，M.；Yanaka，E.，美國(guó)病理學(xué)雜志(Am.J.Pathol.)，1992；1411139)。對(duì)于冠狀動(dòng)脈狹窄的治療，經(jīng)皮經(jīng)腔冠狀動(dòng)脈成形術(shù)已被廣泛接受。在這種手術(shù)中，內(nèi)皮被損傷并與各種造血性的或在損傷部位釋放的化學(xué)引誘劑和促細(xì)胞分裂劑接觸。這些物質(zhì)中，血小板衍生所生長(zhǎng)因子(PDGF)被認(rèn)為在平滑肌細(xì)胞增殖和趨化性過(guò)程中起著重要作用(Reidy，M.A.；Fingerle，J.；Lindner，V.；循環(huán)(Circulation)，199386(supplIII)III-43；Ferns，G.A.A.；Raines，E.W.；Sprugel，K.H.；Montani，A.S.；Reidy，M.A.；Ross，R.；科學(xué)(Science)，1991；2531129.；Jawien，A.等人，臨床研究雜志(J.Clin.Invest.)，1992；89507；Nabel，E.G.等人，臨床研究雜志(J.Clin.Invest.)，1993；911822)。在血管成形手術(shù)后的3至6個(gè)月內(nèi)，大約有30-40％患者的血流量明顯降低，這是由于應(yīng)答此手術(shù)過(guò)程中造成的血管損傷而引起的再狹窄的結(jié)果。這些患者隨后需要進(jìn)行第二次手術(shù)(Pepine，C.，循環(huán)(Circulation)，1990；811753.；Hardoff，R.J.，美國(guó)心臟學(xué)院雜志(J.Am.Coll.Cardiol.)，1990；151486)。因此，限制再狹窄過(guò)程的藥物具有顯著優(yōu)點(diǎn)。能抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖、特別是能抑制PDGF刺激增殖的藥物將用于治療血管增殖性疾病(Molloy，C.J.，DrugDev.Res.，1993；29148；Newby，A.C.；George，S.J.，心血管研究(cardiovasc.Res.)，1993；271173)。美國(guó)專利5,387,600中公開(kāi)了用作ACAT抑制劑的式I2-烷基或雜環(huán)基-苯并咪唑類化合物U.S.5,128,359公開(kāi)了用于治療動(dòng)脈粥樣硬化的1-芐基苯并咪唑-2-鏈烷酸衍生物。U.S.4,814,329公開(kāi)了用作抗血脂過(guò)多藥的下述式II的2-硫代苯并咪唑類化合物其中R是C1-C4烷基和C2-C4羥烷基DE4212748公開(kāi)了用作AII拮抗劑的N-聯(lián)苯基甲基苯并咪唑類化合物。本發(fā)明提供了一組2-取代苯并咪唑衍生物，它們適用作平滑肌細(xì)胞增殖抑制劑，并用作治療平滑肌細(xì)胞過(guò)度增殖表征的病癥如再狹窄的治療組合物。因此，本發(fā)明提供了式I化合物或其可藥用鹽其中R1代表含有1至6個(gè)碳原子的烷基，三氟甲基或吡啶基；R2代表H，含有1至6個(gè)碳原子的烷基或含有7至10個(gè)碳原子的取代芳烷基，其中所述取代基獨(dú)立地代表一個(gè)或兩個(gè)鹵原子、羧基或含有2至7個(gè)碳原子的烷氧羰基；R3和R4代表H，含有1至6個(gè)碳原子的烷基，鹵素或硝基。當(dāng)R1、R2、R3或R4代表烷基時(shí)，它可以是支鏈或直鏈的，并優(yōu)選含有1至4個(gè)碳原子，特別是為甲基、乙基、正-或異-丙基或?yàn)檎?、異-、仲-或叔-丁基。當(dāng)R2代表取代芳烷基時(shí)，優(yōu)選為取代芐基。當(dāng)R2被烷氧基羰基取代時(shí)，烷氧基羰基優(yōu)選為甲氧基羰基或乙氧羰基。當(dāng)R3和R4代表烷基時(shí)，它們各自最優(yōu)選為甲基。當(dāng)R3和R4為鹵素時(shí)，它們各自優(yōu)選為氯或氟。特別優(yōu)選的化合物是·1-(3，4-二氯芐基)-2-吡啶-2-基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽?！?-[2-(吡啶-2-基)-苯并咪唑-1-基甲基]-苯甲酸甲酯或其可藥用鹽?！?-(5，6-二甲基-2-三氟甲基-苯并咪唑-1-基甲基)苯甲酸甲酯或其可藥用鹽?！?-(5-硝基-2-丙基苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸乙酯或其可藥用鹽。本發(fā)明的1，2-二取代苯并咪唑類化合物可按照下述流程中所列的一般反應(yīng)步驟制備亞氨基醚鹽酸鹽(1)通過(guò)在0℃下使適當(dāng)?shù)碾媾c醇和氯化氫反應(yīng)制備。在回流的乙醇中反應(yīng)1和適當(dāng)取代的1，2-二氨基苯，得到相應(yīng)的2-取代苯并咪唑(2)。在二甲基甲酰胺中，采用氫化鈉作為堿，用適當(dāng)取代的芳烷基鹵(n代表1、2或3)烷基化2，得到本發(fā)明的1，2-二取代苯并咪唑(3)。R代表直鏈或支鏈烷基，優(yōu)選為含1至4個(gè)碳原子的烷基，特別是乙基。因此，本發(fā)明的另一方面提供了制備本發(fā)明所述的式I化合物或其可藥用鹽的方法，該方法包括(a)將式R1CN的腈與醇在鹽酸中反應(yīng)，產(chǎn)生定義如上的式1化合物，和(b)使式1化合物與如上定義的式2取代1，2-二氨基苯反應(yīng)，產(chǎn)生式I化合物，其中R2代表H，以及(c)任選地將其中R2代表H的式I化合物與合適的烷基化劑反應(yīng)，產(chǎn)生其中R2代表烷基或取代芳烷基的式I化合物，并任選地形成它們的可藥用鹽?？伤幱玫乃峒映甥}衍生自這些有機(jī)和無(wú)機(jī)酸乙酸，乳酸，檸檬酸，富馬酸，酒石酸，琥珀酸，馬來(lái)酸，丙二酸，鹽酸，氫溴酸，磷酸，硝酸，硫酸，甲磺酸，甲基苯磺酸，以及已知的可接受的類似酸。對(duì)于具有酸性取代基的化合物如羧酸化合物，可藥用鹽還包括堿金屬鹽(鈉或鉀鹽)，堿土金屬鹽(鈣或鎂鹽)以及銨鹽。本發(fā)明包括僅由本發(fā)明苯并咪唑類化合物本身或它們與賦形劑(即無(wú)藥理作用的可藥用物質(zhì))一起組成的藥物組合物。這種組合物適用于治療平滑肌細(xì)胞過(guò)度增殖表征的疾病，其中所述的增殖最常見(jiàn)的是由血管整復(fù)外科和移植，如氣囊插入血管成形術(shù)，血管移植外科，冠狀動(dòng)脈分流術(shù)，和心臟移植引起的。其它其中存在有不希望的血管增殖的病癥包括高血壓，哮喘，和充血性心力衰竭。因此，本發(fā)明化合物適于治療這些疾病和病癥。本發(fā)明化合物可系統(tǒng)施用，例如可通過(guò)靜脈注射方式，典型的劑量為0.1-10mg/kg/h，連續(xù)施用5-30天，或以低于靜脈注射的劑量皮下注射施用或以高于靜脈注射的劑量口服施用。如果合適的話，采用適當(dāng)?shù)倪B續(xù)釋放裝置如支持基質(zhì)，采用經(jīng)膜、經(jīng)皮或其它局部施用途徑，還可實(shí)現(xiàn)本發(fā)明化合物的定域傳送。本發(fā)明的組合物可與常規(guī)賦形劑一同配制，所述賦形劑是例如填料、崩解劑、粘結(jié)劑、潤(rùn)滑劑、矯味劑等。它們按常規(guī)方式配制。本發(fā)明化合物可單獨(dú)或與固體或液體藥用載體一同施用于需要這種治療的患者。適用的固體載體可包括一種或多種還可以作為矯味劑、潤(rùn)滑劑、增溶劑、懸浮劑、填料、助流劑、壓片助劑、粘結(jié)劑或片劑崩解劑的物質(zhì)或膠囊包封材料。對(duì)于粉劑，載體為能與細(xì)碎活性成分混合的細(xì)碎固體。而就片劑而言，可將活性成分以適當(dāng)比例與具有需要壓制特性的載體混合，并壓制成具有所需形狀和大小的片劑。粉劑和片劑優(yōu)選含有多至99％活性成分。合適的固體載體包括，例如，磷酸鈣、硬脂酸鎂、滑石、蔗糖、乳糖、糊精、淀粉、纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮、低熔點(diǎn)蠟和離子交換樹(shù)脂。液體載體可用于制備溶液、懸浮液、乳劑、糖漿和酏劑。本發(fā)明的活性成分可溶于或懸浮在可藥用液體載體中，這些載體是例如水、有機(jī)溶劑、它們的混合物或可藥用的油或脂肪。液體載體中可包含其它合適的藥用添加劑如增溶劑、乳化劑、緩沖劑、防腐劑、甜味劑、調(diào)味劑、懸浮劑、增稠劑、著色劑、粘度調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑或滲透調(diào)節(jié)劑。適合口服和非腸道給藥用的液體載體的合適例子包括水(特別是含有上述添加劑如纖維素衍生物，優(yōu)選羧甲基纖維素鈉溶液)，醇(包括一元醇和多元醇如二元醇)及其衍生物，以及油(如精制椰子油和花生油)。對(duì)于非腸道給藥，載體還可以為油酯如油酸乙酯和肉豆蔻酸異丙酯。無(wú)菌液體載體可用于非腸道給藥用的滅菌液態(tài)組合物中。滅菌溶液或懸浮液形式的液體藥物組合物可通過(guò)如肌內(nèi)，腹膜內(nèi)或皮下注射施用。滅菌溶液還可以通過(guò)靜脈內(nèi)注射施用?？诜┯玫慕M合物可以是液體或固體組合物形式。優(yōu)選的藥物組合物為單位劑量形式，如片劑或膠囊。在這種形式中，組合物可被細(xì)分成含有適當(dāng)量活性成分的均分單位劑量；單位劑量形式可以是包裝組合物，例如包裝粉劑、小瓶、安瓿、預(yù)填裝注射器或含有液體的小囊(sachets)。單位劑量形式可以是，例如，膠囊或片劑本身，或可以是適當(dāng)數(shù)量任何這類組合物的包裝形式。因此，本發(fā)明的另一方面提供了藥物組合物，其中包括本文所定義的式I化合物或其可藥用鹽，和可藥用載體。治療患有平滑肌細(xì)胞增殖相關(guān)疾病的特定患者所用的劑量必須由主治醫(yī)生本人決定。其它可變影響因素包括特定病癥和疾病的嚴(yán)重程度、患者的年齡和反應(yīng)情況。因此，本發(fā)明的再一方面提供了用于治療哺乳動(dòng)物，更具體講是用于治療與平滑肌細(xì)胞增殖相關(guān)的病癥的本文所定義的式I化合物。如下所述，采用離體豬主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，按照改進(jìn)的Castellot等人(J.Biol.Chem257(19)11256(1982))的方法，測(cè)定本發(fā)明化合物抑制平滑肌細(xì)胞增殖的能力將已仔細(xì)去除了脂肪組織的新鮮豬主動(dòng)脈用含2％抗生素-抗菌素(100x)液體(每毫升含10,000單位青霉素(堿)，10,000μg鏈霉素(堿)，和25μg兩性霉素B；此溶液通過(guò)使用青霉素G(鈉鹽)，硫酸鏈霉素和商標(biāo)為Fungizone的兩性霉素B溶于0.85％鹽水配成，購(gòu)自GibcoLaboratories，GrandIslandBiologicalCo.，GrandIsland，NY)的無(wú)菌磷酸鹽緩沖的鹽水溶液沖洗。然后將組織在含有I型膠原酶，165U/mL；III型彈性蛋白酶，15U/mL；BSA，2mg/mL；和大豆胰蛋白酶，0.375mg/mL的10-15mL酶溶液中消化，接著在5％CO2氣氛中于37℃溫育10至15分鐘。經(jīng)過(guò)此處理之后，通過(guò)用鑷子去皮除去外表面外膜。爾后沿縱向切割動(dòng)脈并鋪展開(kāi)，刮去內(nèi)皮層。將細(xì)胞的中層在酶溶液中沖洗并置于含有10mL酶溶液的新制100mm培養(yǎng)皿內(nèi)。用小剪刀將細(xì)胞中層切碎并在30mL新鮮酶溶液中于37℃下酶切消化2-3小時(shí)。消化之后，利用帶火焰拋光吸頭的無(wú)菌巴氏吸管或帶200-1000μL無(wú)菌吸管吸頭的Eppendorf吸管均化中層組織。隨后以8000rpm離心懸浮液10分鐘，將沉淀懸浮在4-6mL新鮮酶溶液內(nèi)并移入到4-6個(gè)帶有通氣瓶塞的100mm瓶?jī)?nèi)。然后使細(xì)胞生長(zhǎng)至融合用0.25％胰蛋白酶分裂。采用SMC肌動(dòng)蛋白的抗體測(cè)定細(xì)胞的純度和總數(shù)量。在次融合條件下，在早期傳代(一般3-7次傳代)階段測(cè)定細(xì)胞。使培養(yǎng)物在16mm(24孔)多孔培養(yǎng)板中于補(bǔ)加有10％胎牛血清和2％抗生素/抗菌素的199培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。在次融合條件下，將細(xì)胞在已知成分的無(wú)血清淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基(AIM-V；Gibco)中靜置培養(yǎng)24-48小時(shí)，隨后開(kāi)始試驗(yàn)。通過(guò)向除去血清的同步細(xì)胞中加入試驗(yàn)化合物、3H-胸苷和血清或特異性生長(zhǎng)因子，啟動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)步驟。對(duì)于每種細(xì)胞類型，使生長(zhǎng)因子和血清刺激物最佳化。將試驗(yàn)化合物以50倍稀釋加到每一孔中(20μL/孔)并將培養(yǎng)板在5％CO2氣氛下于37℃溫育24-36小時(shí)。將試驗(yàn)化合物溶于50％乙醇中并以1，10和100μM濃度進(jìn)行測(cè)定。作為對(duì)照，在其中RG50872為5μM濃度的每一細(xì)胞標(biāo)本條件下，常規(guī)測(cè)定RG50872(Bilder，G.A.等人，Am.J.CellPhysiol.，1991；260C721)。當(dāng)實(shí)驗(yàn)完成時(shí)，將培養(yǎng)板置于冰上，用冰冷的PBS洗滌三次，并在冰冷的10％三氯乙酸(TCA)中孵育30分鐘以除去酸溶蛋白。將每孔中的溶液移入到含有0.4NHCl(500μL/瓶，用于中和NaOH)的閃爍瓶?jī)?nèi)，并用水(500μL)沖洗每孔兩次，達(dá)到2mL/閃爍瓶總體積。將閃爍瓶在閃爍計(jì)數(shù)器上計(jì)數(shù)測(cè)定，無(wú)論是對(duì)照組還是試驗(yàn)樣品，均一式三份。對(duì)照組(100％)值由最大刺激細(xì)胞得到(由生長(zhǎng)因子或血清刺激物產(chǎn)生的結(jié)果)。試驗(yàn)值由經(jīng)生長(zhǎng)因子或血清最大刺激并被試驗(yàn)化合物處理過(guò)的細(xì)胞得到(測(cè)定中所用的血小板衍生生長(zhǎng)因子為人重組PDGF-AB，購(gòu)自UpstateBiotechnologyInc.，LakePlacid，NY)。數(shù)值以對(duì)照的百分?jǐn)?shù)表示，并由這些數(shù)值測(cè)定IC50。為辨別細(xì)胞毒性和化合物預(yù)防增殖的能力，采用商業(yè)化改進(jìn)的MTT測(cè)定法測(cè)試受試化合物。簡(jiǎn)短地說(shuō)，是將細(xì)胞在24孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)至70-80％融合。在開(kāi)始試驗(yàn)之前，將細(xì)胞除血清24-48小時(shí)。為確保MTT測(cè)定法監(jiān)測(cè)的是細(xì)胞毒性而不是增殖作用，在潮濕的CO2培養(yǎng)箱中，于37℃下，將細(xì)胞與50mM受試化合物在不含血清的新鮮培養(yǎng)基中溫育24小時(shí)。當(dāng)化合物處理完成后，加入MTT指示染料在37℃溫育4小時(shí)。然后加溶細(xì)胞，并將每孔中的等份液樣轉(zhuǎn)移到96孔培養(yǎng)板中供分析用。采用ELISA平板讀數(shù)器記錄570nm波長(zhǎng)處的吸光度(參考波長(zhǎng)630nm)。結(jié)果用存活百分率報(bào)道，采用無(wú)藥物(100％存活率)和預(yù)加溶(0％存活率)標(biāo)準(zhǔn)。如表I中的數(shù)據(jù)所示，本發(fā)明化合物為有效的平滑肌細(xì)胞增殖抑制劑。表1</tables>對(duì)于本發(fā)明代表性化合物的制備，下面提供了非限制性的說(shuō)明實(shí)施例。實(shí)施例11-(3，4-二氯芐基)-2-吡啶-2-基-1H-苯并咪唑氮?dú)夥障?，?-吡啶-2-基-1H-苯并咪唑(1.95g，0.01mol)溶于DMF(50mL)。然后加入氫化鈉(60％油分散體，0.48g，0.012mol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物0.5小時(shí)。隨后加入3，4-二氯芐基溴(2.4g，0.01mol)。將混合物在80℃下攪拌4小時(shí)。冷卻混合物并用水稀釋。爾后將混合物用乙酸乙酯提取。有機(jī)提取液水洗兩次，然后蒸發(fā)。殘留物用少量乙酸乙酯/己烷研制。收集固體并用乙醇合氯化氫結(jié)晶。收集固體，得到標(biāo)題化合物(1.3g，收率36.7％)，為一鹽酸鹽，淺棕色固體，m.p.227-229℃。元素分析C19H13Cl2N3·HCl計(jì)算值C，58.41；H，3.61；N，10.76.實(shí)測(cè)值C，58.21；H，3.54；N，10.80.質(zhì)譜(+FAB，[M+H]+)m/z354/356/358.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ8.78(d，1H)，8.52(d，1H)，8.15(t，1H)，7.9(d，1H)，7.77(d，1H)，7.65(d，2H)，7.54(d，1H)，7.48-7.52(m，2H)，7.23(d，1H)，和6.22ppm(s，2H).實(shí)施例24-[2-(吡啶-2-基)-苯并咪唑-1-基甲基]-苯甲酸甲酯采用2.29g(0.01mol)4-溴甲基苯甲酸甲酯，按上實(shí)施例1中所述的方法，制備標(biāo)題化合物。用乙酸乙酯/己烷混合物結(jié)晶，得到1.3g(收率37.9％)標(biāo)題化合物，為棕色固體，m.p.158-159℃。元素分析C21H17N3O2計(jì)算值C，73.45；H，4.99；N，12.24.實(shí)測(cè)值C，73.47；H，5.07；N，12.21.質(zhì)譜(+FAB，[M+H]+)m/z344.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ8.63(d，1H)，8.38(d，1H)，7.98(t，1H)，7.84(d，2H)，7.77(m，1H)，7.54(m，1H)，7.47(m，1H)，7.28(m，2H)，7.24(d，2H)，6.28(s，2H)，和3.78ppm(s，3H).實(shí)施例34-(5，6-二甲基-2-三氟甲基-苯并咪唑-1-基甲基)苯甲酸甲酯將5，6-二甲基-2-三氟甲基-1H-苯并咪唑(2.14g，0.01mol)溶于DMF(50mL)。在氮?dú)夥障录尤霘浠c(60％油分散體，0.48g，0.012mol)并室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物0.5小時(shí)。然后加入4-溴甲基苯甲酸甲酯(2.29g，0.01mol)。在80℃下攪拌混合物18小時(shí)。蒸除去大部分溶劑。殘留物用水稀釋并用乙酸乙酯提取。水洗有機(jī)相并用無(wú)水硫酸鈉干燥，隨后蒸發(fā)，殘留物用乙酸乙酯/己烷結(jié)晶兩次，得到純凈標(biāo)題化合物(0.85g，收率23.5％)，為白色固體，m.p.150-152℃。元素分析C19H17F3N2O2計(jì)算值C，62.98；H，4.73；N，7.73.實(shí)測(cè)值C，62.96；H，4.73；N，7.56.質(zhì)譜(+FAB，[M+H]+)m/z363.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ7.90(d，1H)，7.63(s，1H)，7.45(s，1H)，7.15(d，2H)，5.74(s，2H)，3.81(s，3H)，2.33(s，3H)和2.30ppm(s，3H).實(shí)施例4步驟1丁亞氨酸乙酯鹽酸鹽將丁腈(15g，0.21mol)的乙醇(150mL)溶液在冰浴中冷卻。然后用氯化氫飽和此冷溶液。再冷凍反應(yīng)混合物18小時(shí)。真空蒸除乙醇。然后用乙醚處理殘留的油狀物，得到標(biāo)題化合物(15.5g，收率48％)，該產(chǎn)物用于下步反應(yīng)。步驟22-丙基-5-硝基吲哚將丁亞氨酸乙酯鹽酸鹽(7.6g，50mmol)和4-硝基-1，2-苯二胺(7.6g，50mmol)在乙醇(100mL)中的混合物回流18小時(shí)。真空蒸除乙醇。將粘性固體懸浮在水(100mL)中。分離黃色固體，得到標(biāo)題化合物(5.3g，收率52％).1HNMR(DMSO-d6；200MHz)δ12.9(s，1H)，8.4(s，1H)，8.0-8.05(d，1H)，7.6-7.64(d，1H)，2.8-2.85(t，2H)，1.7-1.85(m，2H)，0.9-1.0ppm(t，3H)。步驟34-(5-硝基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸乙酯10分鐘內(nèi)，向氫化鈉(60％油分散體)(1.0g，25mmol)的DMF(30mL)懸浮液內(nèi)滴加入2-丙基-5-硝基吲哚(4.2g，20mmol)的DMF(30mL)溶液。加完之后，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物30分鐘，然后加入4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(4.7g，20mmol)。將反應(yīng)混合物在80℃加熱18小時(shí)，隨后濃縮至粘稠油。將油用乙酸乙酯和水提取。濃縮乙酸乙酯層至干。殘留物(1.3g)進(jìn)行硅膠快速色譜(己烷/乙酸乙酯；7∶3)提純，得到365mg黃色固體。用己烷/乙酸乙酯重結(jié)晶，得標(biāo)題化合物，m.p.136-138℃。元素分析C20H21N3O4計(jì)算值C，65.38；H，5.74；N，11.44.實(shí)測(cè)值C，65.15；H，5.75；N，11.26.質(zhì)譜(EI；M+)m/z367.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ8.5(d，1H)，8.1(dd，1H)，7.9(d，2H)，7.7(d，1H)，7.2(d，2H)，5.7(s，2H)，4.3-4.3(q，2H)，2.8(t，2H)，1.7-2.0(m，2H)，1.24-1.3(t，3H)，和0.90-0.95ppm(t，3H).權(quán)利要求1.下式化合物或其可藥用鹽其中R1代表含有1至6個(gè)碳原子的烷基，三氟甲基或吡啶基；R2代表H，含有1至6個(gè)碳原子的烷基或取代的C7-C10-芳烷基，其中所述取代基獨(dú)立地代表一個(gè)或兩個(gè)鹵原子、羧基或含有2至7個(gè)碳原子的烷氧羰基；R3和R4代表H，含有1至6個(gè)碳原子的烷基，鹵素或硝基。2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1代表丙基、三氟甲基或吡啶-2-基，R2代表取代芐基，以及R3和R4代表H、甲基或硝基。3.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物為1-(3，4-二氯芐基)-2-吡啶-2-基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。4.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物為4-[2-(吡啶-2-基)-苯并咪唑-1-基甲基]-苯甲酸甲酯或其可藥用鹽。5.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物為4-(5，6-二甲基-2-三氟甲基-苯并咪唑-1-基甲基)苯甲酸甲酯或其可藥用鹽。6.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物為4-(5-硝基-2-丙基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸乙酯或其可藥用鹽。7.一種藥物組合物，包括下式化合物或其可藥用鹽以及可藥用載體其中R1代表含有1至6個(gè)碳原子的烷基，三氟甲基或吡啶基；R2代表H，含有1至6個(gè)碳原子的烷基或取代的C7-C10-芳烷基，其中所述取代基獨(dú)立地代表一個(gè)或兩個(gè)鹵原子、羧基或含有2至7個(gè)碳原子的烷氧羰基；R3和R4代表H，含有1至6個(gè)碳原子的烷基，鹵素或硝基。8.用于治療哺乳動(dòng)物的下式化合物或其可藥用鹽其中R1代表含有1至6個(gè)碳原子的烷基，三氟甲基或吡啶基；R2代表H，含有1至6個(gè)碳原子的烷基或取代的C7-C10-芳烷基，其中所述取代基獨(dú)立地代表一個(gè)或兩個(gè)鹵原子、羧基或含有2至7個(gè)碳原子的烷氧羰基；R3和R4代表H，含有1至6個(gè)碳原子的烷基，鹵素或硝基。9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其中式I化合物用于治療與平滑肌細(xì)胞增殖有關(guān)的疾病或病癥。10.預(yù)防哺乳動(dòng)物平滑肌細(xì)胞增殖的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服或非腸道施用下式化合物或其可藥用鹽其中R1代表含有1至6個(gè)碳原子的烷基，三氟甲基或吡啶基；R2代表H，含有1至6個(gè)碳原子的烷基或取代的C7-C10-芳烷基，其中所述取代基獨(dú)立代表一個(gè)或兩個(gè)鹵原子、羧基或含有2至7個(gè)碳原子的烷氧羰基；R3和R4代表H，含有1至6個(gè)碳原子的烷基，鹵素或硝基。11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述平滑肌細(xì)胞增殖在血管成形術(shù)之后表現(xiàn)為再狹窄。12.制備式I化合物或其可藥用鹽的方法其中R1代表含有1至6個(gè)碳原子的烷基，三氟甲基或吡啶基；R2代表H，含有1至6個(gè)碳原子的烷基或取代的C7-C10-芳烷基，其中所述取代基獨(dú)立地代表一個(gè)或兩個(gè)鹵原子、羧基或含有2至7個(gè)碳原子的烷氧羰基；R3和R4代表H，含有1至6個(gè)碳原子的烷基，鹵素或硝基，該方法包括(a)將式R1CN的腈與醇在鹽酸中反應(yīng)，產(chǎn)生其中R代表烷基的式1化合物；(b)使式1化合物與具有下式結(jié)構(gòu)的取代1，2-二氨基苯反應(yīng)產(chǎn)生式I化合物，其中R2代表H；(c)任選地將其中R2代表H的式I化合物與烷基化劑反應(yīng)，產(chǎn)生其中R2代表烷基或取代芳烷基的式I化合物；和(d)任選地形成它們的可藥用鹽。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了式Ⅰ化合物或其可藥用鹽:其中R文檔編號(hào)A61P9/00GK1192204SQ96195885公開(kāi)日1998年9月2日申請(qǐng)日期1996年6月3日優(yōu)先權(quán)日1995年6月7日發(fā)明者H·M·艾羅達(dá),C·西-伊爾,T·S·蘇爾科斯基申請(qǐng)人:美國(guó)家用產(chǎn)品公司