專利名稱：磺酰芐基取代的吡啶酮的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及磺酰芐基取代的吡啶酮，它們的制備方法以及它們作為藥物，特別是作為降壓藥和抗動(dòng)脈粥樣硬化劑的應(yīng)用。
眾所周知，腎素，一種蛋白水解酶，在體內(nèi)從血管緊張素原中降解出十肽血管緊張素Ⅰ，而血管緊張素Ⅰ再在肺、腎或其它組織中降解為高血壓八肽血管緊張素Ⅱ。在提高血壓的意義上，血管緊張素Ⅱ的各種作用，例如血管收縮、腎中Na+保留、腎上腺醛甾酮釋放和交感神經(jīng)系統(tǒng)緊張性增加具有協(xié)同作用。
此外，血管緊張素Ⅱ具有促進(jìn)細(xì)胞(如心肌細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞)生長(zhǎng)和復(fù)制的作用，不同病態(tài)(如高血壓，動(dòng)脈粥樣硬化和心肌能不全)中這些細(xì)胞以增加的方式生長(zhǎng)和增殖。
除了抑制腎素活性之外，在腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)中介入的可能的起點(diǎn)是抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)的活性和阻斷血管緊張素Ⅱ受體。
本發(fā)明涉及通式(Ⅰ)的磺酰芐基取代的吡啶酮及其鹽
式中R1代表最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基任意地被有3-6碳原子的環(huán)烷基、羥基或被最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷氧基取代，或代表有3-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基，R2、R3和R4可相同或不同，代表氫、氰基或最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈全氟烷基，或代表最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基任意地被相同或不同的選自羥基、囟素、羧基和各最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基或烷氧羰基的取代基或被苯基、苯氧基或被最多有三個(gè)雜原子的5-7元飽和或不飽和的雜環(huán)單取代或雙取代，其中的各環(huán)系又可以被相同的或不同的選自三氟甲基、三氟甲氧基、囟素、硝基、氰基、羥基和羥甲基的取代基或被各最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或烷氧基單取代或二取代，或代表各最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈?；蛲檠豸驶?、芐氧羰基或羧基，或代表苯基，該苯基任意地被相同的或不同的選自囟素、硝基、氰基、羥基、羥甲基、三氟甲基和三氟甲氧基的取代基或被各最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或烷氧基單取代至三取代，或代表式-CO-NR6R7基團(tuán)，其中R6和R7相同或不同，代表氫、最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或各有6-10個(gè)碳原子的芳基或芳烷基，R5代表氫、囟素或最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或代表最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈全氟烷基，或代表式-OX基團(tuán)，其中X代表氫、芐基、羥基保護(hù)基，或代表最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，A代表3-8元飽和雜環(huán)，該雜環(huán)通過(guò)氮原子鍵接，另外最多含有2個(gè)選自S、N和O的雜原子，它任意地被相同或不同的選自最多有5個(gè)碳原子的全氟烷基和下列各式基團(tuán)的取代基單取代或二取代
式中R8代表氫、最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或三苯甲基，R9代表羥基、最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基、苯氧基、芐氧基或式-NR12R13基團(tuán)，其中R12和R13相同或不同，代表氫或最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基，R10和R11相同或不同，代表氫、最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基。
本發(fā)明的磺酰芐基取代的吡啶酮也可以其鹽形式存在，通常，在此可提及的是與有機(jī)或無(wú)機(jī)堿或酸形成的鹽。
在本發(fā)明的上下文中，優(yōu)選生理上可接受的鹽。磺酰芐基取代的吡啶酮的生理上可接受的鹽可以是本發(fā)明的物質(zhì)與無(wú)機(jī)酸、羧酸或磺酸形成的鹽。舉例來(lái)說(shuō)，特別優(yōu)選的鹽是與鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、檸檬酸、富馬酸、馬來(lái)酸或苯甲酸形成的鹽。
生理上可接受的鹽也可以是具有游離羧基的本發(fā)明的化合物的金屬鹽或銨鹽。舉例來(lái)說(shuō)，特別優(yōu)選的鹽是鈉、鉀、鎂或鈣鹽以及由氨或有機(jī)胺例如乙胺、二-或三-乙胺、二-或三-乙醇胺、二環(huán)己胺、二甲氨基乙醇、精氨酸、賴氨酸或乙二胺得到的銨鹽。
本發(fā)明的化合物可作為對(duì)映體或非對(duì)映異構(gòu)體以立體異構(gòu)的形式存在。本發(fā)明涉及這些對(duì)映體或非對(duì)映異構(gòu)體及其特定的混合物。跟非對(duì)映異構(gòu)體一樣，外消旋形式可按公知方法分離成立體異構(gòu)均一的組分[參見(jiàn)E.L.Eliel著的《碳化合物的立體化學(xué)》，Mc Graw Hill，1962]。
在R2、R3和R4的定義中的雜環(huán)通常代表可以最多含有2個(gè)氧、硫和/或氮原子作為雜原子的5-7元、優(yōu)選5-6元的飽和或不飽和的環(huán)。優(yōu)選具有1個(gè)氧、硫和/或最多2個(gè)氮原子的5和6元環(huán)。下述是可以優(yōu)選提及的噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或四唑基。
經(jīng)由氮原子鍵連的可另外含有最多2個(gè)氧、硫和/或氮原子作為雜原子的3-8元飽和雜環(huán)一般代表氮雜環(huán)丁烷基、哌啶基、嗎啉基、哌嗪基或吡咯烷基。優(yōu)選的是具有1個(gè)氧和/或最多2個(gè)原子的5和6元環(huán)如哌啶基、嗎啉基或吡咯烷基。特別優(yōu)選的是哌啶基和吡咯烷基。
優(yōu)選的式(Ⅰ)化合物是各基團(tuán)如下的那些化合物及其鹽，其中R1代表各最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基任意地被環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、羥基或被最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基取代，或代表環(huán)丙基、環(huán)戊基或環(huán)己基，R2、R3和R4可相同或不同，代表氫、氰基或最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈全氟烷基，或代表最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基被羥基、氟、氯、溴、羧基和各最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基或烷氧羰基或被苯基、苯氧基或噻吩基取代，其中的各環(huán)系又可以被三氟甲氧基、三氟甲基、羥甲基、氟、氯、溴或被各最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或烷氧基取代，或代表各最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈酰基或烷氧羰基、芐氧羰基或羧基，或代表任意地被相同或不同的選自氟、氯、溴、三氟甲基、三氟甲氧基和羥甲基的取代基或被各最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或烷氧基單取代或二取代的苯基，或代表或-CONR6R7基團(tuán)，其中R6和R7相同或不同，代表氫、最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、苯基或芐基，R5代表氫、氟、氯、溴或最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或代表最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈全氟烷基，或代表式-OX基團(tuán)，其中X代表氫、芐基或乙?；虼碜疃嘤?個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，A代表經(jīng)由氮原子鍵連的哌啶基、吡咯烷基或嗎啉基，這些基團(tuán)中的每一個(gè)都可任意地被三氟甲基或被下列各式基團(tuán)取代，
式中R8代表氫、最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或三苯甲基，R9代表羥基、最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基、苯氧基、芐氧基或式-NR12R13基團(tuán)，其中
R12和R13相同或不同，代表氫或最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，及R10和R11相同或不同，代表氫、最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基。
特別優(yōu)選的通式(Ⅰ)化合物是下列化合物及其鹽，其中R1代表最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基可任意地被環(huán)丙基取代，或代表環(huán)丙基，R2、R3和R4相同或不同，代表氫、氰基或最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈全氟烷基，或代表最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基被羥基或各最多有3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基或烷氧羰基取代，或代表各最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈?；蛲檠豸驶?、芐氧羰基或羧基，或代表式-CONR6R7基團(tuán)，其中R6和R7相同或不同，代表氫、最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、苯基或芐基，R5代表氫、氟、氯、最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或代表最多有3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈全氟烷基，或代表式-OX基團(tuán)，其中X代表氫、芐基或乙?；?，或代表最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，A代表經(jīng)由氮原子鍵連的哌啶基或吡咯烷基，這些基團(tuán)中的每一個(gè)都可任意地被三氟甲基或被下列各式基團(tuán)取代，
式中R8代表氫、甲基、乙基或三苯甲基，R9代表羥基、最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基、苯氧基、芐氧基或式-NR12R13基團(tuán)，其中R12和R13相同或不同，代表氫或最多有3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，R10和R11相同或不同，代表氫、最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基。
此外，已找到了本發(fā)明的式(Ⅰ)化合物的制備方法，其特征在于在有機(jī)溶劑中，在堿和適當(dāng)時(shí)催化劑存在下使式(Ⅱ)的吡啶酮與式(Ⅲ)化合物反應(yīng)，
式中R1、R2、R3和R4具有上述意義，
式中R5和A具有上述意義，B代表囟素，優(yōu)選溴，并且在R8≠氫的情況下，還進(jìn)行烷基化，而在酸的情況(R9＝OH)下對(duì)相應(yīng)的酯進(jìn)行水解，并且在酯或酰胺的情況下，適當(dāng)時(shí)經(jīng)由活化的羧酸步驟進(jìn)行酯化或酰胺化，并且按常規(guī)方法改變?nèi)〈鵕2、R3、R4和R5。
本發(fā)明的方法可以通過(guò)舉例方式用下列反應(yīng)式說(shuō)明
該方法所用的合適的溶劑是在反應(yīng)條件下不變化的常用有機(jī)溶劑。這些溶劑優(yōu)選包括醚類，例如乙醚、二噁烷、四氫呋喃或乙二醇二甲醚、1，2-二甲氧基乙烷，或烴類，例如苯、甲苯、二甲苯、己烷、環(huán)己烷或礦物油餾分，或囟代烴類，例如，二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、二氯乙烯、三氯乙烯或氯苯，或乙酸乙酸、三乙胺、吡啶、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺、六甲基磷酸三酰胺、乙腈、丙酮或硝基甲烷。同樣，也可以使用所述溶劑的混合物。優(yōu)選四氫呋喃和1，2-二甲氧基乙烷。
一般來(lái)說(shuō)，無(wú)機(jī)或有機(jī)堿可用作本發(fā)明方法的堿。這些堿優(yōu)選包括堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋰、氫氧化鋇、堿金屬或堿土金屬碳酸鹽如碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸鈣或碳酸銫，或堿金屬或堿土金屬醇鹽，例如甲醇鈉或甲醇鉀或叔丁醇鉀，或二異丙基氨基鋰(LDA)，或有機(jī)胺(三烷基(C1-C6)胺)，例如三乙胺，或雜環(huán)化合物，例如，1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷(DABCO)、1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、吡啶、二氨基吡啶、甲基哌啶或嗎啉。也可以把堿金屬例如鈉或其氫化物例如氫化鈉用作堿。優(yōu)選碳酸鉀、氫化鈉、叔丁醇鉀和碳酸銫。
一般來(lái)說(shuō)，堿的用量為每摩爾式(Ⅲ)化合物0.05-10摩爾、優(yōu)選1-2摩爾。
一般來(lái)說(shuō)，本發(fā)明的方法是在-100℃-+100℃、優(yōu)選0℃-40℃下進(jìn)行的。
一般來(lái)說(shuō)，本發(fā)明的方法是在常壓下進(jìn)行的。但是，也可以在加壓或減壓下(例如0.5-5巴)實(shí)施該方法。
三苯甲基的除去是用乙酸或三氟乙酸和水或上述醇之一或在兩酮存在下或也在醇存在下用鹽酸水溶液進(jìn)行。
該脫除反應(yīng)通常在0℃-150℃、優(yōu)選20℃-100℃的溫度范圍內(nèi)在常壓下進(jìn)行。
合適的催化劑是碘化鉀或碘化鈉，優(yōu)選碘化鈉。
烷基化一般用烷基化劑進(jìn)行，該烷基化劑的例子有(C1-C6)烷基囟化物、磺酸酯或取代或未取代的(C1-C6)二烷基-或(C1-C6)二芳基磺酸酯，優(yōu)選甲基碘或硫酸二甲酯。
烷基化一般在上述溶劑之一中進(jìn)行，優(yōu)選二甲基甲酰胺，所用的溫度為0℃-+70℃、優(yōu)選0℃-+30℃，所用的壓力為常壓。
適用于水解的堿是常用的無(wú)機(jī)堿。這些堿優(yōu)選包括堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋇，或堿金屬碳酸鹽，例如碳酸鈉或碳酸鉀或碳酸氫鈉，或堿金屬醇化物，例如甲醇鈉、乙醇鈉、甲醇鉀、乙醇鉀或叔丁醇鉀。特別優(yōu)選使用氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋰。
適用于水解的溶劑是水或常用于水解的有機(jī)溶劑。這些溶劑優(yōu)選包括醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇或丁醇，或醚，例如四氫呋喃或二噁烷，或二甲基甲酰胺或二甲亞砜。特別優(yōu)選使用醇，例如甲醇、乙醇、丙醇或異丙醇，也可以使用所述溶劑的混合物。優(yōu)選四氫呋喃和甲醇。
水解也可用酸進(jìn)行，酸的例子有三氟乙酸、乙酸、鹽酸、氫溴酸、甲磺酸、硫酸或高氯酸，優(yōu)選三氟乙酸。
水解一般在0℃-+100℃、優(yōu)選+20℃-+80℃進(jìn)行。
水解一般在常壓下進(jìn)行。但是，也可以在減壓或加壓(如0.5-5巴)下進(jìn)行水解。
在進(jìn)行水解時(shí)，堿的用量一般為每摩爾酯1-3摩爾、優(yōu)選1-1.5摩爾。采用反應(yīng)物的摩爾量特別優(yōu)選。
叔丁酯的水解一般在上述溶劑之一和/或水或它們的混合物存在下用酸如鹽酸或三氟乙酸進(jìn)行，優(yōu)選使用二噁烷或四氫呋喃。
酰胺化和磺酰胺化反應(yīng)一般在上述溶劑之一中、優(yōu)選在四氫呋喃或二氯甲烷中進(jìn)行。
酰胺化和磺酰胺化反應(yīng)可任意地經(jīng)由酰囟的活化階段進(jìn)行，后者可以通過(guò)相應(yīng)的酸與亞硫酰氯、三氯化磷、五氯化磷、三溴化磷或草酰氯反應(yīng)而從相應(yīng)的酸制得。
酰胺化和磺酰胺化反應(yīng)通常在-20℃-+80℃、優(yōu)選-10℃-+30℃的溫度范圍內(nèi)在常壓下進(jìn)行。
除了上述堿之外，用于此目的的合適的堿優(yōu)選為三乙胺和/或二甲氨基吡啶、DBU或DABCO。
相對(duì)于1mol相應(yīng)的酸或酯，堿的用量為0.5-10mol，優(yōu)選1-2mol。
對(duì)于磺酰胺化反應(yīng)來(lái)說(shuō)可用的酸結(jié)合劑是堿金屬或堿土金屬的碳酸鹽如碳酸鈉、碳酸鉀，堿金屬或堿土金屬的氫氧化物例如氫氧化鈉或氫氧化鉀，或有機(jī)堿如吡啶、三乙胺，N-甲基哌啶，或雙環(huán)脒如1，5-二氮雜雙環(huán)[3.4.0]壬-5-烯(DBN)或1，5-二氮雜雙環(huán)[3.4.0]+--5-烯(DBU)。優(yōu)選碳酸鉀。
合適的脫水劑是碳化二亞胺類如二異丙基碳化二亞胺、二環(huán)己基碳化二亞胺或N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽或羰基化合物如羰基二咪唑或1，2-噁唑鎓化合物如2-乙基-5-苯基-1，2-噁唑鎓-3-磺酸鹽或丙烷膦酸酐或氯甲酸異丁酯或苯并三唑氧基-三(二甲氨基)鏻六氟磷酸鹽或氨基磷酸二苯酯或甲磺酰氯，適當(dāng)時(shí)在堿如三乙胺或N-乙基嗎啉或N-甲基哌啶或二環(huán)己基碳化二亞胺和羥基琥珀酰亞胺存在下使用[參見(jiàn)J.C.Sheehan，S.L.LEdis，J.Am.Chem.Soc.，95，875(1973);F.E.Frerman等人，J.Biol.Chem.，225，507(1982)和N.B.Benoton，K.Kluroda，Int.Pept.Prot.Res.，13，403(1979)，17，187(1981)]。
酸結(jié)合劑和脫水劑的用量相對(duì)于1mol相應(yīng)的羧酸通常為0.5-3mol，優(yōu)選1-1.5mol。
通式(Ⅱ)化合物在一些情況下是已知的[參見(jiàn)，例如，DE3，406，329 Al，R.P.Mariella，R.Stansfield，J.Am.Chem.Soc.，731368(1951)和O.Isler等人，Helv.Chim.Acta 38，1033(1955)Bull.Soc.Chim.Fr.，687(1958)]，或是新的，那么，它們可以按與上述所引用的公開(kāi)物中所述方法相似的方法制備。
通式(Ⅲ)化合物是新的，可以通過(guò)在上述溶劑之一和堿中，優(yōu)選在二氯甲烷中用三乙胺，使通式(Ⅳ)的取代的芐基磺酰氯與通式(Ⅴ)化合物反應(yīng)進(jìn)行制備，
式中B和R5具有上述意義，H-A (Ⅴ)，式中A具有上述意義。
通常，該反應(yīng)在常壓下進(jìn)行。然而，也可以在減壓或加壓下(例如0.5-5巴)進(jìn)行。
當(dāng)實(shí)施該反應(yīng)時(shí)，相對(duì)于1mol通式(Ⅳ)化合物來(lái)說(shuō)，堿的用量通常為1-3mol，優(yōu)選1-1.5mol。特別優(yōu)選使用反應(yīng)物的摩爾量。
該反應(yīng)通常在-40℃-+40℃、優(yōu)選在-30℃-0℃的溫度范圍內(nèi)在常壓下進(jìn)行。
通式(Ⅳ)和(Ⅴ)化合物是已知的，或者可以用常規(guī)方法制備。
本發(fā)明的通式(Ⅰ)化合物顯示了出乎意料的有用的藥理活性譜。
由于本發(fā)明的化合物能抑制血管緊張素Ⅱ結(jié)合到AⅡ受體上，因此具有特異性的AⅡ拮抗活性。它們抑制血管緊張素Ⅱ的血管收縮和醛甾酮分泌刺激作用。此外，它們還抑制平滑肌細(xì)胞的增殖。
因此，本發(fā)明的化合物可用作用于治療動(dòng)脈高血壓和動(dòng)脈粥樣硬化的藥物。此外，它們還可用于治療冠心病、心肌能不全、大腦功能障礙、大腦局部缺血、外周循環(huán)障礙、腎和腎上腺功能性障礙、支氣管疾病和脈管源的呼吸道疾病、鈉滯留和浮腫。
此外，這類物質(zhì)具有促尿鈉排泄和利尿作用。在心源和非心源的病理流體增加期間，這種作用本身表明在水腫液體的流動(dòng)性中。
激動(dòng)劑引起的收縮抑制試驗(yàn)往兩種性別的兔的頸部猛擊并放血，或在某些情況下用Nembutal(約60-80mg/kg i.v.)麻醉并開(kāi)胸處死。取出胸主動(dòng)脈，剔除粘連組織，并分成1.5mm寬的環(huán)形切片。在約3.5g的初始負(fù)荷之下，把諸切片分別放入10ml含95% O2/5% CO2充氣的Krebs-Henseleit營(yíng)養(yǎng)液的器官浴中，所述營(yíng)養(yǎng)液恒溫控制在37℃，并具有以下組成119mmol/l NaCl;2.5mmol/l CaCl2·2H2O;1.2mmol/l KH2PO4;10mmol/l葡萄糖;4.8mmol/l KCl;1.4mmol/l MgSO4·7H2O和25mmol/l NaHCO3。
借助于橋接放大器(ifd Mulheim或DSM Aalen)，用Statham UC2細(xì)胞等長(zhǎng)地記錄收縮情況，并利用A/D變換器(System 570，Keithley Munich)數(shù)字化和分析。按小時(shí)繪制激動(dòng)劑劑量/響應(yīng)曲線(DRC)。對(duì)于每條DRC來(lái)說(shuō)，是以4分鐘間隔將3或4個(gè)單個(gè)濃度加到浴中。DEC和隨后清洗循環(huán)(用上述營(yíng)養(yǎng)液清洗16次，每次約5秒/分鐘)結(jié)束后，經(jīng)過(guò)28分鐘靜置或保溫期，一般在此期間內(nèi)收縮再次達(dá)到起始值。
在正常情況下，第三DRC的高度用作評(píng)估以后待測(cè)試驗(yàn)物的參比量，該試驗(yàn)物在保溫時(shí)間開(kāi)始時(shí)以增加的劑量加到進(jìn)行后面DRC的浴中。在整個(gè)一天中總是用相同的激動(dòng)劑刺激每一主動(dòng)脈環(huán)。
激動(dòng)劑及其標(biāo)準(zhǔn)濃度(每單個(gè)劑量所加體積＝100μl)KCl 22.7;32.7;42.7;52.7 mmol/l
g/ml5-羥色胺 10-8;10-7;10-6;10-5g/mlB-HT920 10-7;10-6;10-5g/ml甲氧胺 10-7;10-6;10-5g/ml血管緊張素II 3×10-9;10-8;3×10-8;10-7g/ml為了計(jì)算IC50(被測(cè)物產(chǎn)生50%抑制率的濃度)，在每種情況下，效果都是基于第三(次最大)激動(dòng)劑濃度。
本發(fā)明的化合物以依賴于劑量的方式抑制血管緊張素Ⅱ引起的離體兔主動(dòng)脈收縮。在高濃度下，因鉀去極化或其它激動(dòng)劑引起的收縮未被抑制或僅被稍微抑制。
表A在體外對(duì)離體兔動(dòng)脈環(huán)的血管收縮的體外抑制抑制由以下物質(zhì)引起的收縮的IC50[nM]實(shí)施例編號(hào) AII6 280對(duì)輸注了血管緊張素Ⅱ輸液的大鼠的血壓測(cè)定體重300-350g的雄性Wistar大鼠(Moellegaard，Copenhagen，Denmark)用硫噴妥鈉麻醉(100mg/kg i.p.)。氣管切開(kāi)術(shù)之后，把測(cè)定血壓用的導(dǎo)管插入股動(dòng)脈，并將輸注血管緊張素Ⅱ用的插管和給待測(cè)物用的插管插入股靜脈，在給予封阻神經(jīng)節(jié)用的戊雙吡銨(5mg/kg，i.v.)之后，開(kāi)始輸注血管緊張素Ⅱ(0.3μg/kg/分鐘)。一旦血壓值達(dá)到一穩(wěn)定的平臺(tái)，則靜脈注射試驗(yàn)化合物，或以0.5%纖基醋酸鈉的懸浮液或溶液給予試驗(yàn)物質(zhì)。受該物化合物影響的血壓的變化情況在表中以平均值±SEM給出。
對(duì)清醒的高血壓大鼠的抗高血壓活性的測(cè)定對(duì)外科術(shù)誘發(fā)的單測(cè)腎動(dòng)脈狹窄的清醒的大鼠測(cè)定本發(fā)明化合物的口服抗高血壓活性。為此，用內(nèi)徑0.18mm的銀鉗止住右腎動(dòng)脈。對(duì)于這種類型的高血壓，術(shù)后頭一個(gè)六星期中血漿腎素活性增加。在給予該物質(zhì)之后，以一定時(shí)間間隔用“尾套”以無(wú)血方式測(cè)定這些動(dòng)物的動(dòng)脈血壓。待試的物質(zhì)以在纖基乙酸鈉懸浮液中懸浮的不同劑量，通過(guò)胃管胃內(nèi)給藥(“口服”)。本發(fā)明的化合物以臨床相關(guān)劑量降低高血壓大鼠的動(dòng)脈血壓。
此外，本發(fā)明的化合物以依賴濃度的方式抑制放射性的血管緊張素Ⅱ的特異結(jié)合。
在腎上腺皮質(zhì)的膜級(jí)分(牛)上本發(fā)明化合物與血管緊張素Ⅱ受體的相互作用新取出的并仔細(xì)去除了囊髓的牛腎上腺皮質(zhì)(AGC)借助于Ultra-Turrax(Janke & Kunkel，Staufen i.B.)細(xì)分成在蔗糖溶液(0.32M)中的粗膜組織均漿，并將均漿兩步離心，部分純化成膜級(jí)分。用放射性的血管緊張素Ⅱ?qū)Σ糠旨兓呐GC膜級(jí)分進(jìn)行受體結(jié)合分析，所用的試驗(yàn)液體積為0.25ml，具體含有部分純化的膜(50-80μg)、3H-血管緊張素Ⅱ(3-5nM)、試驗(yàn)緩沖液(50mM Tris，pH 7.2)、5mM MgCl2和被測(cè)物。在室溫60分鐘保溫時(shí)間之后，利用濕潤(rùn)過(guò)的玻璃纖維濾器(Whatman GF/C)分離樣品的非結(jié)合放射性，并在蛋白質(zhì)用冰冷緩沖液(50mM Tris/HCl，pH7.4，5% PEG 6000)清洗之后，在閃爍雞尾酒狀液中用分光光度測(cè)定法測(cè)定結(jié)合的放射性。利用計(jì)算機(jī)程序分析原始數(shù)據(jù)得到Ki和IC50值(Ki所用放射性的校正IC50值;IC50值被測(cè)物質(zhì)引起放射性配位體特異結(jié)合的50%抑制率的濃度)。
本發(fā)明的化合物抑制平滑肌細(xì)胞增殖的試驗(yàn)將通過(guò)培養(yǎng)基外殖技術(shù)[R.Ross，J.Cell.Biol.50，172，1971]由大鼠或豬主動(dòng)脈得到的平滑肌細(xì)胞用于測(cè)定化合物的抗增殖活性。
將細(xì)胞分布在一般24孔板的合適的培養(yǎng)皿中，在含有7.5%FCS和7.5%NCS、2mM L-谷氨酰胺和15mM HEPES(pH7.4)的培養(yǎng)基199中，于37℃ 5%CO2中培養(yǎng)2-3天。然后，通過(guò)取出清液的方法將細(xì)胞同步培養(yǎng)2-3天，而后用AⅡ、血清或其它因素刺激生長(zhǎng)。同時(shí)，加入試驗(yàn)化合物。16-20小時(shí)之后，加1μCi3H-胸苷，再4小時(shí)后測(cè)定該物質(zhì)結(jié)合到細(xì)胞的TCA-可沉淀的DNA中的結(jié)合率。
促尿鈉排泄活性試驗(yàn)用口服試驗(yàn)物(懸浮在纖基乙酸鈉溶液中)的方法處理禁食Wister大鼠。然后，在利尿籠中收集排泄出的尿6小時(shí)。利用火焰光度計(jì)法測(cè)定尿中的鈉和鉀的濃度。
按已知方法，使用惰性、無(wú)毒的適宜藥用的賦形劑或溶劑，可將該新的活性化合物加工成常用制劑，例如片劑、包衣片劑、丸劑、粒劑、氣溶膠、糖漿、乳劑、混懸液和溶液。在每種情況下，治療活性化合物以占混合物總重約0.5-90%的濃度存在，這就是說(shuō)，其含量足以達(dá)到規(guī)定劑量范圍。
舉例來(lái)說(shuō)，制劑的制備方法是把活性化合物與溶劑和/或賦形劑摻混，合適的話，使用乳化劑和/或分散劑，例如在使用水作為溶劑的情況下，可任意地使用有機(jī)溶劑作為助溶劑。
活性化合物以傳統(tǒng)方式給藥，優(yōu)選口服或腸胃外給藥，特別是經(jīng)舌給藥或靜脈注射。
就腸胃外給藥而言，可以使用合適的液體賦形劑物質(zhì)的活性化合物溶液。
一般來(lái)說(shuō)，已證明以下給藥量比較有利就靜脈注射而言，給藥量為約0.001-1mg/kg、優(yōu)選約0.01-0.5mg/kg體重，以取得有效的結(jié)果;就口服給藥而言，給藥劑量為約0.01-20mg/kg、優(yōu)選0.1-10mg/kg體重。
不僅如此，有時(shí)必須背離上述用量，特別是隨體重或給藥途徑的類型、個(gè)體對(duì)藥物的反應(yīng)，其制劑的性質(zhì)和給藥的時(shí)間或間隔而變化時(shí)，更是如此。因此，在某些情況下，不到上述最低用量便可足以解決問(wèn)題;而在另一些情況下，必須超過(guò)上述上限。在較大給藥量的情況下，將藥物在一天內(nèi)分成幾個(gè)單個(gè)劑量給藥比較有利。
溶劑a＝CH2Cl2/CH3/OH＝10∶1b＝CH2Cl2/CH3OH/CH3CO2H＝10∶1∶0.5c＝CH2Cl2/CH3OH＝5∶1起始化合物實(shí)施例Ⅰ6-丁基-4-甲氧羰基-2-氧代-1，2-二氫吡啶
在冰冷卻下，將12.5ml(0.17mol)亞硫酰氯滴加到29.25g(0.15mol)6-丁基-2-氧代-1，2-二氫異煙酸在200ml甲醇中的懸浮液中，并將混合物在室溫下攪拌過(guò)液。濃縮至干，殘留物在硅膠(450g，230-400目)上用二氯甲烷→二氯甲烷/甲醇10∶1洗脫進(jìn)行層析，經(jīng)二氯甲烷、乙醚和石油醚結(jié)晶后，得到29.6g(94%)無(wú)色晶體，m.p.106℃。
實(shí)施例Ⅱ
6-丁基-吡啶-2(1H)-酮
將4.9g(25mmol)6-丁基-2-氧代-1，2-二氫-異煙酸與1.79g(12.5mmol)氧化銅(Ⅰ)在50ml的喹啉中于237℃回流1.5小時(shí)。過(guò)濾后，真空蒸餾(在17mbar下110℃，然后在9mbar下67℃)除去揮發(fā)性組分。殘餾物在硅膠上用二氯甲烷/甲醇(40∶1)→(20∶1)洗脫層析兩次，產(chǎn)物在石油醚中攪拌。收率1.95g(52%)，棕色晶體，m.p.68℃。
實(shí)施例Ⅲ4-(溴甲基)苯-磺酰氯
將38.1g(0.2mol)4-甲基苯磺酰氯溶于300ml四氯化碳中，用35.6g(0.2mol)N-溴代琥珀酰亞胺處理，加入0.2g(1.2mmol)偶氮雙異丁腈(ABU)后，將混合物加熱回流4小時(shí)。冷卻后，濾出固體物，除去濾液中的溶劑。閃式層析(石油醚/甲苯4∶1，50μm粒度)后，用100ml環(huán)己烷重結(jié)晶，得到24.0g(理論量的45%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.75(甲苯)。
實(shí)施例Ⅳ4-(溴甲基)-3-氯苯磺酰氯
將45.9g(0.2mol)3-氯-4-甲基苯磺酸鈉與83.3g(0.4mol)五氯化磷混合，在140℃的油浴溫度下加熱30分鐘。用500ml甲苯處理熱混合物，將所得溶液加熱至沸，冷卻后倒到冰上。分出有機(jī)相，用水(2×200ml)洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，真空下汽提掉所有揮發(fā)物。所得殘留物經(jīng)閃式層析(石油醚/甲苯4∶1，50μm粒度)純化，得到24.9g產(chǎn)物，直接進(jìn)一步反應(yīng)。
將所得產(chǎn)物溶于200ml四氯化碳中，加入19.6g(0.11mol)N-溴代琥珀酰亞胺和0.1g(0.6mmol)ABN后，加熱回流6小時(shí)。冷卻后，濾除固體物，除去濾液中的溶劑。閃式層析(石油醚/甲苯4∶1，50μm粒度)后，得到21.2g(35%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.32(石油醚/二氯甲烷4∶1)。
實(shí)施例ⅤN-[4-(溴甲基)苯磺?；鵠吡咯烷
將5.3g(0.02mol)實(shí)施例Ⅲ化合物溶于200ml二氯甲烷和4.0g(0.04mol)三乙胺中，加入1.4g(0.02mol)吡咯烷后，將混合物在50ml二氯甲烷中于0℃下攪拌1小時(shí)。將混合物用2N HCl(2×100ml)、H2O(2×100ml)萃取，用MgSO4干燥后過(guò)濾，真空下蒸發(fā)掉所有揮發(fā)性組分。收率5.4g(理論量的89%)。Rf＝0.09(甲苯)。
實(shí)施例ⅥN-[4-(溴甲基)-苯磺酰基]哌啶
按照與實(shí)施例Ⅴ相似的步驟，從1.1g(4mmol)實(shí)施例Ⅲ的化合物和0.34g(4mmol)哌啶得到1.0g(理論量的81%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.14(甲苯)。
實(shí)施例Ⅶ(S)-N-[4-(溴甲基)苯磺?；鵠-2-(叔丁氧羰基)吡咯烷
按照與實(shí)施例Ⅴ相似的步驟，從7.25g(27mmol)實(shí)施例Ⅲ的化合物和4.6g(27mmol)S-脯氨酸叔丁酯得到9.1g(理論量的84%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.66(石油醚/乙酸乙酯7∶3)。
實(shí)施例Ⅷ外消旋-N-[4-(溴甲基)-苯磺酰基]-2-(叔丁氧羰基)哌啶
按照與實(shí)施例Ⅴ相似的步驟，從8.0g(30mmol)實(shí)施例Ⅲ的化合物和5.5g(30mmol)外消旋-哌啶甲酸叔丁酯得到7.4g(理論量的59%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.53(石油醚/乙酸乙酯5∶1)。
實(shí)施例Ⅸ(S)-N-[4-(溴甲基)-3-氯苯磺酰基]-2-(叔丁氧羰基)吡咯烷
按照與實(shí)施例5相似的步驟，從10.0g(33mmol)實(shí)施例Ⅳ的化合物和5.7g(33mmol)的S-脯氨酸叔丁酯得到13.9g(理論量的96%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.55(石油醚/乙酸乙酯7∶3)。
實(shí)施例Ⅹ外消旋-N-[4-(溴甲基)-3-氯苯磺?；鵠-2-(叔丁氧羰基)哌啶
按照與實(shí)施例5相似的步驟，從10.0g(33mmol)實(shí)施例Ⅳ化合物和6.1g(33mmol)外消旋-哌啶甲酸叔丁酯得到14.6g(理論量的98%)的標(biāo)題化合物。Rf＝0.6(石油醚/乙酸乙酯7∶3)。
實(shí)施例Ⅺ6-丁基-4-芐氧羰基-2-氧代-1，2-二氫吡啶
將13.3g(123mmol)芐醇和4.7g(31mmol)的羥基苯并三唑加到6.0g(31mmol)6-丁基-2-氧代-1，2-二氫-異煙酸在100ml DMF中的溶液中。將所得的透明溶液冷卻至0℃，接著加入7.0g(34mmol)二環(huán)己基碳化二亞胺和4.2ml(31mmol)三乙胺。允許混合物升至20℃，再攪拌2小時(shí)，進(jìn)行水相后處理，得到6.8g(理論量的77%)的標(biāo)題化合物。m.p.139℃。
實(shí)施例Ⅻ4-甲氧羰基-2-氧代-6-丙基-1，2-二氫吡啶
按照與實(shí)施例Ⅰ相似的步驟，從14.5g(80mmol)2-氧代-6-丙基-1，2-二氫-異煙酸和甲酸得到了13.7g(理論量的88%)標(biāo)題化合物。m.p.144℃。
實(shí)施例ⅫⅠN-三氟乙?；?L-脯氨酰胺
在保護(hù)性氣體下，先將30g(0.142mol)三氟乙?；彼嵋?50ml DMF中。在-20℃，加入在乙酸乙酯中的142.6ml(0.1704mol)的38%濃度的PPA。引入氨氣，使混合物飽和，30分鐘后沉出白色沉淀。在輕輕的氨氣流下使該批產(chǎn)物緩和，然后將整個(gè)反應(yīng)混合物加到600ml H2O中，用濃乙酸酸化至pH4，通過(guò)與200ml二氯甲烷振搖，提取4次，再用200ml乙醚振搖提取3次。合并有機(jī)相，用MgSO4干燥，汽提掉溶劑。殘留物一起在硅膠60F 254上用二氯甲烷/甲醇(10∶1)洗脫層析。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去含產(chǎn)物的級(jí)分中的溶劑。得到17.12g標(biāo)題化合物(理論量的57%);Rf＝0.345(T/EA/CH3COOH)20∶20∶1。
實(shí)施例ⅪⅤ2-氰基-N-三氟乙酰基-吡咯烷
在保護(hù)性氣體下，先將40g(0.19mol)實(shí)施例ⅩⅢ的產(chǎn)物和45g(＝46ml，0.57mol)吡啶引入300ml THF中。在0℃，加入48g(＝32.25ml，0.228mol)三氟乙酸酐。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌30分鐘，然后在室溫下攪拌90分鐘。將該批反應(yīng)物加入1升1N鹽酸中，通過(guò)與200ml二氯甲烷振搖提取3次。合并有機(jī)相，通過(guò)用200ml飽和氯化鈉溶液振搖提取，用MgSO4干燥。汽提掉溶劑，殘留物在硅膠60 F254上層析，用石油醚/乙酸乙酯/乙酸(1600∶200∶5)洗脫。濃縮含產(chǎn)物的級(jí)分，得到32.4g標(biāo)題化合物(理論量的88%)。Rf＝0.57(PE/EA 7∶3)。
實(shí)施例ⅩⅤ2-四唑基-N-三氟乙?；?吡咯烷
在保護(hù)性氣體下，將31.35g＝32.6ml(0.26mol)氯化二乙基鋁先引入到65ml甲苯中。在室溫下加入29.95g＝34.04ml(0.26mol)三甲基硅基疊氮，并在室溫下將混合物攪拌10分鐘。在0℃下加入溶解在65ml甲苯中的25g(0.13mol)的實(shí)施例ⅪⅤ的產(chǎn)物。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌30分鐘，在室溫下攪拌120分鐘，然后在40℃下攪拌60分鐘。冷卻后，將該批反應(yīng)物用飽和氟化鉀溶液處理，直接不再能檢測(cè)到氣體放出。
將反應(yīng)混合物加到600ml H2O中，酸化至pH4，用3×100ml乙酸乙酯提取。合并有機(jī)相，用50ml正己烷處理。為了除去疊氮化物，用不帶冷卻的蒸餾橋蒸餾除去約1/3的溶劑。殘留物用硫酸鎂干燥，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑，得到18.54g標(biāo)題化合物(60.6%理論量)。Rf＝0.4(甲苯/乙酸乙酯1∶1)。
實(shí)施例ⅩⅥN-三氟乙?；?2-[N-三苯甲基四唑基]吡咯烷
先將16.23g(0.069mol)實(shí)施例ⅩⅤ的產(chǎn)物和10.47g＝14.35ml(0.1035mol)的三乙胺引入70ml二氟甲烷中。然后加入19.83g(0.069mol)三苯甲基氯。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1.5小時(shí)。用二氯甲烷稀釋，用pH5的緩沖液(3×50ml)提取。用硫酸鎂干燥有機(jī)用。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上汽提掉溶劑。殘留物與乙醚一起攪拌。抽濾出產(chǎn)生的晶體，干燥。得到24.65g標(biāo)題化合物(75%理論量)。Rf＝0.53(石油醚/乙酸乙酯7∶3)。
實(shí)施例ⅩⅤⅡ2-(N-三苯甲基-四唑基)吡咯烷
在保護(hù)性氣體下，先將24g(0.05mol)實(shí)施例ⅩⅤⅠ的產(chǎn)物引入100ml乙醇中。在0℃下分批加入2.84g(0.075mol)硼氫化鈉。使該批反應(yīng)物緩和并在室溫下攪拌1小時(shí)。用6ml乙酸處理，將整個(gè)反應(yīng)混合物加到500ml緩沖液pH9中。用3×75ml二氯甲烷提取該批反應(yīng)物。合并有機(jī)相，用硫酸鎂干燥，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑。殘留物在硅膠60 F254上層析，用石油醚/乙酸乙酯7∶3洗脫。濃縮相應(yīng)的級(jí)分，干燥。得到7.16g標(biāo)題化合物(37.5%理論量)。Rf＝0.22(乙酸乙酯)。
實(shí)施例ⅩⅤⅢN-[4-溴甲基-3-氯-苯磺酰基]-2-[三苯甲基四唑基]吡咯烷
按照與實(shí)施例Ⅲ相似的步驟，從3.19g(10.5mmol)實(shí)施例Ⅳ化合物和4g(10.5mmol)實(shí)施例ⅩⅤⅡ化合物得到6.49g標(biāo)題化合物(95%理論量)。Rf＝0.53(石油醚/乙酸乙酯7∶3)。
實(shí)施例ⅪⅩ4-(溴甲基)-3-氟苯磺酰氯
將20.9g(0.1mol)3-氟-4-甲基苯磺酰氯溶于200ml四氯化碳中，加入19.6g(0.11mol)N-溴代琥珀酰亞胺和0.3g過(guò)氧化二苯甲酰物后，將混合物加熱回流5小時(shí)。冷卻后，濾出固體物，除去濾液中的溶劑。閃式層析(石油醚/甲苯(4∶1)，50μm粒度)后，得到12.4g(理論量的44%)。標(biāo)題化合物。Rf＝0.42(石油醚/甲苯3∶1)。
實(shí)施例ⅩⅩ4-(溴甲基)-3-三氟甲基苯磺酰氯
將64.6g(0.25mol)3-三氟甲基-4-甲基苯磺酰氯溶于500ml四氯化碳中，加入44.5g(0.25mol)N-溴代琥珀酰亞胺和0.4g ABN后，將混合物加熱回流24小時(shí)。冷卻后，濾出固體物，除去濾液中的溶劑。閃式層析(石油醚/甲苯(4∶1)，50μm粒度)后，得到33.9g(理論量的40%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.41(石油醚/甲苯3∶1)。
實(shí)施例ⅩⅩⅠ(S)-N-[4-(溴甲基)-3-氟苯磺?；鵠-2-(叔丁氧羰基)吡咯烷
按照與實(shí)施例Ⅲ相似的步驟，從8.6g(30mmol)實(shí)施例ⅪⅩ化合物和5.1g(30mmol)的S-脯氨酸叔丁酯得到12.7g(理論量的100%)的標(biāo)題化合物。Rf＝0.57(石油醚/乙酸乙酯7∶3)。
實(shí)施例ⅩⅩⅡ(S)-N-[4-(溴甲基)-3-三氟甲基苯磺酰基]-2-(叔丁氧羰基)吡咯烷
按照與實(shí)施例Ⅲ相似的步驟，從16.9g(50mmol)實(shí)施例ⅩⅩ化合物和8.6g(50mmol)S-脯氨酸叔丁酯得到23.6g(100%理論量)的標(biāo)題化合物。Rf＝0.63(石油醚/乙酸乙酯7∶3)。
實(shí)施例ⅩⅩⅢ(S)-N-[4-羧基-3-羥基苯磺酰基]-(2-叔丁氧羰基)吡咯烷
按照與實(shí)施例Ⅴ相似的方法，從23.7g4-羧基-3-羥基苯磺酰氯(100mmol)和17.1g(100mmol)S-脯氨酸叔丁酯得到30.0g(理論量的81%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.18(丙酮)。
實(shí)施例ⅩⅩⅣ(S)-N-[4-芐氧羰基-3-芐氧基苯磺酰]-2-(叔丁氧羰基)吡咯烷
將28.3gK2CO3(204mmol)和25.7g(150mmol)芐基溴加到25.3g(68mmol)溶解在200ml DMF中的實(shí)施例ⅩⅩⅢ化合物中。將反應(yīng)混合物再在75℃下攪拌2小時(shí)，冷卻。然后加入1升水，用乙酸乙酯(3×400ml)提取混合物，提取液用水(5×400ml)洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，真空下汽提掉所有揮發(fā)性組分。通過(guò)閃式層析(石油醚/CH2Cl25∶1和石油醚/乙酸乙酯(6∶1，粒度50μ)純化產(chǎn)物，再通過(guò)用600ml混合溶劑(石油醚/乙酸乙酯6∶1)重結(jié)晶進(jìn)一步純化，得到35.5g(理論量的95%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.53(石油醚/乙酸乙酯7∶3)。
實(shí)施例ⅩⅩⅤ(S)-N-[4-(羥甲基)-3-芐氧基苯磺酰]-2-(叔丁氧羰基)吡咯烷
將11.0g(20mmol)實(shí)施例ⅩⅩⅣ的化合物溶解于100ml二甘醇二甲醚中，加入1.51g(40mmol)硼氫化鈉和1.68g(40mmol)LiCl，將混合物在70℃下攪拌4小時(shí)。冷卻后，向反應(yīng)混合物中加入500ml水，然后用INHCl酸化至pH3。用乙醚(3×300ml)提取混合物，提取液用水(6×300ml)洗滌，用MgSO4干燥，除去濾液中的溶劑。殘留物在硅膠60F 254上層析(石油醚/乙酸乙酯(7∶3))。蒸發(fā)濃縮相應(yīng)的級(jí)分，干燥，得到5.0g(理論量的56%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.36(石油醚/乙酸乙酯7∶3)。
實(shí)施例ⅩⅩⅥ(S)-N-[4-(溴甲基)-3-芐氧基苯磺酰]-2-(叔丁氧羰基)吡咯烷
先在惰性氣體下，將2.24g(5mmol)實(shí)施例ⅩⅩⅤ化合物引入20ml無(wú)水DMF中。在0℃下加入2.53g(6mmol)三苯膦二溴化物。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。加入200ml水。用乙酸乙酯(3×80ml)提取混合物，提取液用水(5×60ml)洗滌，用MgSO4干燥。過(guò)濾，真空下汽提掉所有揮發(fā)性組分。產(chǎn)物用閃式層析純化(CH2Cl2，粒度50μ)，得到2.55g(理論量的100%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.56(石油醚/乙酸乙酯7∶3)。
制備實(shí)施例實(shí)施例1外消旋-N-[4-[4-芐氧羰基-6-丁基-2-氧代-1，2-二氫吡啶-1-基]甲基-3-氯-苯磺酰基]-(2-叔丁氧羰基)哌啶
將500mg(1.75mmol)實(shí)施例Ⅹ產(chǎn)物和570mg(1.75mmol)Cs2CO3懸浮在10ml無(wú)水1，2-二甲氧基乙烷中，在20℃下攪拌10分鐘。加入溶解在10ml 1，2-二甲氧基乙烷中的790mg(1.75mmol)實(shí)施例ⅤⅡ產(chǎn)物，將混合物在20℃攪拌5小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，加到100ml水中，用乙酸乙酯(4×60ml)提取，用MgSO4干燥，真空下汽提掉溶劑。粗產(chǎn)物在硅膠上純化(50μ粒度，洗脫劑石油醚/乙酸乙酯10∶1→7∶3)。得到78mg(8%理論量)的標(biāo)題化合物。Rf＝0.09(石油醚/乙酸乙酯5∶1)。
實(shí)施例2外消旋-N-〔4-[4-芐氧羰基-6-丁基-2-氧代-1，2-二氫吡啶-1-基]甲基-3-氯苯磺酰基]-(2-羧基)哌啶
將400ml三氟乙酸加到76mg(126μmol)實(shí)施例1化合物在2ml二氯甲烷中的溶液中，將混合物在20℃攪拌5小時(shí)。用10ml二氯甲烷稀釋，用水(4×20ml)洗滌，再用飽和氯化鈉溶液(1×20ml)洗滌，MgSO4干燥，真空下汽提掉溶劑。殘留物在20g硅膠上進(jìn)行閃式層析(50μ粒度，洗脫劑甲苯/乙酸乙酯/三氟乙酸10∶40∶1)，得到63mg(理論量的83%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.66(二氯甲烷/甲醇10∶1)。
實(shí)施例3外消旋-N-[4-[6-丁基-4-羧基-2-氧代-1，2-二氫吡啶-1-基]甲基-3-氯苯磺酰基]-(2-羧基)哌啶
將58mg(96μmol)實(shí)施例1化合物溶于0.5ml THF、0.5ml水和0.1ml CH3OH中。加入12mg(129μmol)LiOH，將該溶液在室溫下攪拌2.5小時(shí)。濃縮溶液，用水和乙酸乙酯處理，用乙酸酸化至pH＝3。分相，水相再用乙酸乙酯提取三次。合并有機(jī)相，用水(7×20ml)洗滌，再用飽和NaCl溶液(1×20ml)洗滌，用MgSO4干燥，濃縮。得到36mg(74%)標(biāo)題化合物。Rf＝0.16(二氯甲烷/甲醇10∶1)。
表1 所示的化合物按照與制備實(shí)施例1-3相似的步驟制備
實(shí)施例15外消旋-N-[4-[6-丁基-4-羧基-2-氧代-1，2-二氫吡啶-1-基]-4-甲基苯磺酰基]-(2-羧基)哌啶二鈉
將120mg(0.25mmol)實(shí)施例11的化合物在5ml THF和2.5ml水中于室溫下用0.25ml 1N氫氧化鈉溶液處理1小時(shí)，濃縮反應(yīng)液，在高真空中用P2O5干燥殘留物。收率115mg(91%理論量)。Rf＝0.286，。
表2 所示的化合物按照與實(shí)施例14相似的步驟用1摩爾當(dāng)量的NaOH制備。
表權(quán)利要求
1.式(Ⅰ)的磺酰芐基取代的吡啶酮及其鹽
式中R1代表最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基任意地被有3-6碳原子的環(huán)烷基、羥基或被最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷氧基取代，或代表有3-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基，R2、R3和R4可相同或不同，代表氫、氰基或最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈全氟烷基，或代表最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基任意地被相同或不同的選自羥基、鹵素、羧基和各最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基或烷氧羰基的取代基或被苯基、苯氧基或被最多有三個(gè)雜原子的5-7元飽和或不飽和的雜環(huán)單取代或雙取代，其中的各環(huán)系又可以被相同的或不同的選自三氟甲基、三氟甲氧基、鹵素、硝基、氰基、羥基和羥甲基的取代基或被各最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或烷氧基單取代或二取代，或代表各最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈?；蛲檠豸驶?、芐氧羰基或羧基，或代表苯基，該苯基任意地被相同的或不同的選自鹵素、硝基、氰基、羥基、羥甲基、三氟甲基和三氟甲氧基的取代基或被各最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或烷氧基單取代至三取代，或代表式-CO-NR6R7基團(tuán)，其中R6和R7相同或不同，代表氫、最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或各有6-10個(gè)碳原子的芳基或芳烷基，R5代表氫、鹵素或最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或代表最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈全氟烷基，或代表式-OX基團(tuán)，其中X代表氫、芐基、羥基保護(hù)基，或代表最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，A代表3-8元飽和雜環(huán)，該雜環(huán)通過(guò)氮原子鍵接，另外最多含有2個(gè)選自S、N和O的雜原子，它任意地被相同或不同的選自最多有5個(gè)碳原子的全氟烷基和下列各式基團(tuán)的取代基單取代或二取代
式中R8代表氫、最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或三苯甲基，R9代表羥基、最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基、苯氧基、芐氧基或式-NR12R13基團(tuán)，其中R12和R13相同或不同，代表氫或最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基，R10和R11相同或不同，代表氫、最多有8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的磺酰芐基取代的吡啶酮及其鹽，其中R1代表各最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基任意地被環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、羥基或被最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基取代，或代表環(huán)丙基、環(huán)戊基或環(huán)己基，R2、R3和R4可相同或不同，代表氫、氰基或最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈全氟烷基，或代表最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基被羥基、氟、氯、溴、羧基和各最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基或烷氧羰基或被苯基、苯氧基或噻吩基取代，其中的各環(huán)系又可以被三氟甲氧基、三氟甲基、羥甲基、氟、氯、溴或被各最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或烷氧基取代，或代表各最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈?；蛲檠豸驶?、芐氧羰基或羧基，或代表任意地被相同或不同的選自氟、氯、溴、三氟甲基、三氟甲氧基和羥甲基的取代基或被各最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或烷氧基單取代或二取代的苯基，或代表或-CONR6R7基團(tuán)，其中R6和R7相同或不同，代表氫、最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、苯基或芐基，R5代表氫、氟、氯、溴或最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或代表最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈全氟烷基，或代表式-OX基團(tuán)，其中X代表氫、芐基或乙酰基，或代表最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，A代表經(jīng)由氮原子鍵連的哌啶基、吡咯烷基或嗎啉基，這些基團(tuán)中的每一個(gè)都可任意地被三氟甲基或被下列各式基團(tuán)取代，
式中R8代表氫、最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或三苯甲基，R9代表羥基、最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基、苯氧基、芐氧基或式-NR12R13基團(tuán)，其中R12和R13相同或不同，代表氫或最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，及R10和R11相同或不同，代表氫、最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的磺酰芐基取代的吡啶酮及其鹽，其中R1代表最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基可任意地被環(huán)丙基取代，或代表環(huán)丙基，R2、R3和R4相同或不同，代表氫、氰基或最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈全氟烷基，或代表最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基被羥基或各最多有3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基或烷氧羰基取代，或代表各最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈?；蛲檠豸驶?、芐氧羰基或羧基，或代表式-CONR6R7基團(tuán)，其中R6和R7相同或不同，代表氫、最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、苯基或芐基，R5代表氫、氟、氯、最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或代表最多有3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈全氟烷基，或代表式-OX基團(tuán)，其中X代表氫、芐基或乙?；?，或代表最多有6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，A代表經(jīng)由氮原子鍵連的哌啶基或吡咯烷基，這些基團(tuán)中的每一個(gè)都可任意地被三氟甲基或被下列各式基團(tuán)取代，
式中R8代表氫、甲基、乙基或三苯甲基，R9代表羥基、最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基、苯氧基、芐氧基或式-NR12R13基團(tuán)，其中R12和R13相同或不同，代表氫或最多有3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，及R10和R11相同或不同，代表氫、最多有4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基。
4.用于治療應(yīng)用的權(quán)利要求1的磺酰芐基取代的吡啶酮。
5.制備權(quán)利要求1的磺酰芐基取代的吡啶酮的方法，其特征在于，在有機(jī)溶劑中，在堿和適當(dāng)時(shí)催化劑存在下使式(Ⅱ)的吡啶酮與式(Ⅲ)化合物反應(yīng)，
式中R1、R2、R3和R4具有上述意義，
式中R5和A具有上述意義，B代表囟素，優(yōu)選溴，并且在R8≠氫的情況下，還進(jìn)行烷基化，而在酸的情況(R9＝OH)下對(duì)相應(yīng)的酯進(jìn)行水解，并且在酯或酰胺的情況下，適當(dāng)時(shí)經(jīng)由活化的羧酸步驟進(jìn)行酯化或酰胺化，并且按常規(guī)方法改變?nèi)〈鵕2、R3、R4和R5。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其特征在于，反應(yīng)在-100℃-+100℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。
7.含有至少一種權(quán)利要求1的磺酰芐基取代的吡啶酮的藥物。
8.用于治療動(dòng)脈高血壓和動(dòng)脈粥樣硬化的權(quán)利要求7的藥物。
9.權(quán)利要求1的磺酰芐基取代的吡啶酮在生產(chǎn)藥物中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求1的磺酰芐基取代的吡啶酮在生產(chǎn)用于治療動(dòng)脈高血壓和動(dòng)脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
磺酰芐基取代的吡啶酮可通過(guò)吡啶酮與磺酰芐基化合物反應(yīng)制備?；酋ＦS基取代的吡啶酮可用作藥物中的活性化合物，特別是用于治療動(dòng)脈高血壓和動(dòng)脈粥樣硬化。
文檔編號(hào)A61K31/4427GK1078468SQ9310223
公開(kāi)日1993年11月17日 申請(qǐng)日期1993年2月27日 優(yōu)先權(quán)日1992年2月27日
發(fā)明者R·漢科, J·德雷塞爾, P·費(fèi), W·胡布什, T·克雷默, U·E·米勒, M·米勒-格里曼, M·博克, S·卡茨達(dá), C·赫思-迪特里希, A·克諾爾, J·-P·施塔什, S·沃爾費(fèi)爾, O·亞爾金諾格魯 申請(qǐng)人:拜爾公司