專利名稱：雷公藤內(nèi)酯酮在抗血管新生藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體地涉及雷公藤內(nèi)酯酮在抗血管新生藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
每年全球癌癥死亡人數(shù)達(dá)1000萬，目前全球四分之一人口死亡的原因是癌癥所致，惡性腫瘤已成為嚴(yán)重危害人類生命的元兇。臨床防治腫瘤的藥物大致分為兩大類:第一類直接殺死腫瘤的各種化療藥物，在臨床應(yīng)用最多，但在發(fā)展中已遇到毒副作用大、易產(chǎn)生耐藥性、治療費(fèi)用昂貴等諸多瓶頸制約；第二類抑制腫瘤血管生成和腫瘤轉(zhuǎn)移的藥物，如血管生成抑制劑。腫瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移必需完整的血管系統(tǒng)，因此阻止腫瘤血管生成和破壞腫瘤血管就能有效地抑制腫瘤生長和腫瘤轉(zhuǎn)移，甚至治愈腫瘤。大量研究表明，腫瘤新生血管形成(neovascularization)在腫瘤生長和轉(zhuǎn)移中起著舉足輕重的作用，而腫瘤細(xì)胞又在腫瘤新生血管形成中至關(guān)重要。腫瘤細(xì)胞除了通過分泌多種血管生長因子促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的血管新生(angiogenesis)外,還可以通過血管生成擬態(tài)(vasculogenic mimicry)和腫瘤細(xì)胞向腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化等多種方式，直接參與腫瘤的新生血管形成。腫瘤的快速生長和多點(diǎn)轉(zhuǎn)移與腫瘤血管異常增生有著密切的關(guān)系，而腫瘤新生血管形成是惡性腫瘤的一個(gè)重要標(biāo)志。目前，公認(rèn)的腫瘤新生血管形成方式有六種:(1)內(nèi)皮細(xì)胞介導(dǎo)的血管新生(sprouting angiogenesis)； (2)骨髓來源細(xì)胞的血管發(fā)生(vasculogenesis); (3)血管化生(intussusception) ； (4)腫瘤細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞共同形成血管的血管生成協(xié)同(vascularcooption) ； (5)腫瘤細(xì)胞主導(dǎo)的血管生成擬態(tài)以及(6)腫瘤細(xì)胞向腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化(trans-differentiation)。其中，腫瘤細(xì)胞直接參與的腫瘤新生血管形成的方式就有三種；此外，腫瘤細(xì)胞還間接參與了 血管新生，它是血管新生的啟動(dòng)者和促進(jìn)者。可見，內(nèi)皮細(xì)胞介導(dǎo)的血管新生僅僅是腫瘤血管形成的六種方式之一，而腫瘤細(xì)胞在腫瘤新生血管形成的啟動(dòng)和發(fā)展中起舉足輕重的作用。1971年，全球著名學(xué)者Folkman首先提出腫瘤血管新生學(xué)說，認(rèn)為腫瘤血管是正常血管向腫瘤組織的延伸，而腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)等生長因子，可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞活化，并向腫瘤組織遷移，在腫瘤組織中形成新的血管分枝；并提出以VEGF和血管內(nèi)皮細(xì)胞為靶標(biāo)的抗腫瘤血管新生療法來治療惡性腫瘤，為抗腫瘤治療另辟蹊徑。Folkman的腫瘤血管新生學(xué)說引起了很大的反響，眾多研究者聞風(fēng)而動(dòng)，相繼以VEGF-VEGFR-下游蛋白激酶和血管內(nèi)皮細(xì)胞為靶標(biāo)，研發(fā)抗腫瘤血管新生藥物。迄今已有5種抗腫瘤血管新生藥物被用于臨床治療癌癥，如Avastin、Sutent和Endostar (恩度)等；另有10多種同類藥物正在進(jìn)行臨床I至III期試驗(yàn)。在這些抗腫瘤血管新生藥物中，最值得一提的是Avastin (VEGF單抗)。Avastin在惡性腫瘤的治療中取得了一定的療效，為抗腫瘤治療帶來了一線生機(jī)。Avastin是目前臨床應(yīng)用最多、療效相對較好的抗腫瘤血管新生藥物之一。然而，抗腫瘤血管新生療法治療惡性腫瘤的道路，并非一帆風(fēng)順。近年來的研究顯示，Avastin等抗腫瘤血管新生藥物雖有一定抗癌療效，但病人容易產(chǎn)生耐藥性，部分病人出現(xiàn)腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，長期抗癌療效較差。因此，現(xiàn)有抗血管新生藥物的抗腫瘤效果亟需提高。由于目前抗腫瘤血管新生藥物，主要是以VEGF-VEGFR-下游蛋白激酶和血管內(nèi)皮細(xì)胞為靶標(biāo)，不能有效地消除腫瘤細(xì)胞，而殘留的腫瘤細(xì)胞及其產(chǎn)生的多種血管生長因子，再度啟動(dòng)和促進(jìn)腫瘤血管新生。由此看來，單純抑制或破壞腫瘤血管的治療方法，并不是抗腫瘤血管治療中標(biāo)本兼治的良策。2001年，Jan等系統(tǒng)地提出了使腫瘤血管正?；目鼓[瘤血管新策略，其核心是通過改變血管內(nèi)皮細(xì)胞的血管新生特性,使腫瘤組織血管功能恢復(fù)正常,血流通暢,從而有利于藥物和免疫細(xì)胞及其因子進(jìn)入腫瘤組織，抑制腫瘤生長。近年來，人們對腫瘤血管正?；_展了一系列的研究，已取得了一定的進(jìn)展:①脯氨酰羥化酶-2 (PHD2)為靶標(biāo)的腫瘤血管正?；?，能在一定程度上糾正紊亂的腫瘤血管和減小腫瘤體積；②利用VEGF和VEGFR拮抗劑使失常的內(nèi)皮細(xì)胞功能恢復(fù)，也能使腫瘤血管正?；?，抑制腫瘤生長T2-色氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)RNA合成酶(T2-TrpRS)能夠特異性地抑制糖尿病視網(wǎng)膜血管新生，還能促進(jìn)正常血管生長，使增生性病變的糖尿病新生血管正常化。發(fā)明人以腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞為模型，證實(shí)T2-TrpRS具有選擇性抑制腫瘤血管形成的作用，闡明了 T2-TrpRS通過與其細(xì)胞膜受體VE-cadherin(血管內(nèi)皮細(xì)胞鈣粘著蛋白)結(jié)合，誘導(dǎo)新生血管正?；闹匾獧C(jī)制。然而，十多年來腫瘤血管正?；幬镅邪l(fā)道路仍是困難重重。目前，對于PHD2能否作為腫瘤血管正?；陌袠?biāo)這一問題，亦是眾說紛紜。有研究認(rèn)為PHD2基因缺陷可使腫瘤血管正?；?，但也有研究報(bào)道稱激活PHD2可促進(jìn)腫瘤血管正常化?，F(xiàn)有的針對VEGF-VEGFR和血管內(nèi)皮細(xì)胞的抗腫瘤靶向藥物，雖然能在一定程度上使腫瘤血管正?；?，但對腫瘤細(xì)胞的抑制作用不明顯，對腫瘤細(xì)胞主導(dǎo)的新生血管形成療效有限。由此可見，如果單純針對VEGF-VEGFR和血管內(nèi)皮細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤血管正?；雎阅[瘤細(xì)胞主導(dǎo)的腫瘤新生血管形成，就有可能事倍功半。因此，目前腫瘤血管正?；幬锏难邪l(fā)需要廣開思路，尋找新的策略。近年來，發(fā)明人對現(xiàn)有抗腫瘤血管新生療法所面臨的挑戰(zhàn)，進(jìn)行了深入的探討和分析?？鼓[瘤血管新生療法是一把雙刃劍，其一面阻斷或破壞了腫瘤血管，抑制了腫瘤生長；另一面卻加劇了腫瘤組織缺氧，`促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向鄰近有氧組織遷移，導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移。如上所述，目前的腫瘤血管正?；呗噪m然能在一定程度上糾正紊亂的腫瘤血管和改善血液循環(huán)，有利于抗癌藥物進(jìn)入腫瘤組織，減小腫瘤體積；但難以有效地消除腫瘤細(xì)胞，殘留的腫瘤細(xì)胞往往會死灰復(fù)燃，導(dǎo)致腫瘤的復(fù)發(fā)。2013年初，在美國舉行的第15屆國際抗血管新生藥物大會上,來自全球的眾多研究者對現(xiàn)有抗腫瘤血管新生藥物和抗腫瘤血管療法，進(jìn)行了深入的探討。與會者認(rèn)識到以往人們對惡性腫瘤新生血管形成的機(jī)理缺乏全面和深刻的了解，從而導(dǎo)致在藥物研發(fā)的靶標(biāo)選擇上有所偏頗，對腫瘤細(xì)胞等在新生血管形成中的作用沒有給予足夠的重視。因此，抗腫瘤血管治療需要廣開思路，高度重視腫瘤細(xì)胞等多種細(xì)胞的作用，研發(fā)高效的抗腫瘤新生血管形成藥物；抗腫瘤血管需多靶點(diǎn)、多箭齊發(fā)，才有可能取得更好的抗癌療效。腫瘤細(xì)胞形成的新生血管也具有“返祖現(xiàn)象”，與胚胎發(fā)育早期形成的血管在形態(tài)學(xué)和基因表達(dá)譜等諸多方面具有相似之處。在目前公認(rèn)的腫瘤新生血管形成的六種方式中，腫瘤細(xì)胞介導(dǎo)的血管生成擬態(tài)和腫瘤細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的研究取得了驚人的進(jìn)展，給抗腫瘤新生血管帶來了新的希望。越來越多的研究顯示惡性腫瘤血管并非都由血管內(nèi)皮細(xì)胞組成，腫瘤細(xì)胞也可形成腫瘤血管。1999年，Hendrix領(lǐng)導(dǎo)的研究小組發(fā)現(xiàn)黑色素瘤細(xì)胞能夠直接形成腫瘤血管，而不依賴于血管內(nèi)皮細(xì)胞，提出了血管生成擬態(tài)的新概念。隨后，國內(nèi)外不少學(xué)者相繼報(bào)道了血管生成擬態(tài)在多種高轉(zhuǎn)移性的癌癥中存在，包括黑色素瘤、腦膠質(zhì)瘤、肺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、膀胱癌、子宮頸癌、結(jié)直腸癌、淋巴瘤、垂體瘤、腎癌、骨髓瘤及急性白血病(骨髓)等15種惡性腫瘤；并證明血管生成擬態(tài)與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)，以及腫瘤病人的5年生存率低密切相關(guān)。腫瘤血管生成擬態(tài)的發(fā)現(xiàn)，拓寬了人們在腫瘤新生血管形成方面的視野，加深了人們對腫瘤新生血管形成復(fù)雜性的認(rèn)識，亦為抗腫瘤新生血管藥物的研發(fā)提供了新的靶標(biāo)。2008年，Gao等首先報(bào)道了前腫瘤干細(xì)胞(2C4)直接參與了腫瘤新生血管形成。發(fā)明人曾與Gao研究小組進(jìn)行科研協(xié)作，并通過實(shí)驗(yàn)證明PIWIL2的異常高表達(dá)在腫瘤血管和腫瘤發(fā)生中起著重要作用。2010年，四個(gè)研究團(tuán)隊(duì)，先后報(bào)道了腦膠質(zhì)瘤干/祖細(xì)胞能形成腫瘤血管，結(jié)果令人震驚:膠質(zhì)瘤干/祖細(xì)胞來源的血管占腦膠質(zhì)瘤血管總數(shù)的61.8%，提示腫瘤干/祖細(xì)胞在人惡性腫瘤新生血管形成中起重要作用。腫瘤干/祖細(xì)胞通過轉(zhuǎn)分化產(chǎn)生腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞,進(jìn)而形成腫瘤血管。這些研究成果使人們對腫瘤新生血管形成的認(rèn)識為之一新，也更加清楚地認(rèn)識到腫瘤細(xì)胞主導(dǎo)的新生血管形成的重要性。細(xì)胞生物學(xué)研究顯示腫瘤組織中存在腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞，并具有如下特性:①表達(dá)多種腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物，②與腫瘤細(xì)胞一樣，細(xì)胞染色體常有非整倍體、缺失、移位和基因突變等異常，③異常高表達(dá)V EGFR、FGFR和TOGFR等多種生長因子受體。腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞形成的血管與正常血管在形態(tài)學(xué)和功能學(xué)等諸多方面存在截然不同的特征。腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞形成的腫瘤血管在腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)中起了重要作用。因此，以腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞為靶標(biāo)研發(fā)抗腫瘤血管藥物，為今后特異性抗腫瘤新生血管藥物的研發(fā)指明了新的方向。雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)是衛(wèi)矛科雷公藤屬植物，以全根或去皮根木質(zhì)部入藥。雷公藤性味苦，具有活血化瘀、清熱解毒、消腫散結(jié)、祛風(fēng)除濕、殺蟲止血的作用，臨床用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、腎炎、強(qiáng)直性脊柱炎、牛皮癬等疾病，但有大毒，而且上述臨床應(yīng)用的有效劑量和中毒劑量之間比較接近，因而雷公藤全藥迄今未能得到廣泛的臨床應(yīng)用。為了提高藥效，降低毒副作用，研究者已分離出多種雷公藤有效成分(單體)。國內(nèi)外學(xué)者已從雷公藤屬植物中分離出幾十種化學(xué)成分，主要有二萜、三萜、倍半萜、生物堿、苷類、糖類、醇類和微量元素等。其中雷公藤甲素(Triptolide)和雷公藤紅素已被應(yīng)用于臨床治療腫瘤和自身免疫性疾病，雖然取得了一定的療效，但由于毒性作用較大，尚未被廣泛用于臨床治療上述疾病。雷公藤的其它幾十種活性物質(zhì)的藥用價(jià)值正在研究和評估中。雷公藤內(nèi)酯酮(Triptonide)，又叫雷公藤羰內(nèi)酯、雷公藤酮，是從雷公藤中分離得到的一個(gè)二菇類化合物。1972年Kupchan首次報(bào)道了下式(I)的雷公藤內(nèi)醋酮的化學(xué)結(jié)構(gòu)。雷公藤內(nèi)酯酮與雷公藤甲素同屬于環(huán)氧二萜內(nèi)酯化合物，也具有3個(gè)環(huán)氧和α，β-不飽和醛酮內(nèi)酯環(huán)的基本骨架，但結(jié)構(gòu)上相差一個(gè)基團(tuán)，即雷公藤內(nèi)酣酮C-14位為羰基，而雷公藤甲素為羥基。雷公藤內(nèi)酷酮的分子式為C2tlH22O6，分子量為358，為無色結(jié)晶，熔點(diǎn)252-253。。。
權(quán)利要求
1.雷公藤內(nèi)酯酮在制備抗血管新生藥物中的應(yīng)用。
2.一種抗血管新生藥物制劑，其特征在于:其由有效量的雷公藤內(nèi)酯酮和一種或多種藥學(xué)上可接受的輔料組成，所述的雷公藤內(nèi)酯酮含有重量比為51 99.5%的活性成分。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗血管新生藥物制劑，其特征在于:所述的雷公藤內(nèi)酯酮含有重量比為51 95%的活性成分。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗血管新生藥物制劑，其特征在于:所述的藥物制劑為片劑、顆粒劑、膠囊劑、懸浮劑、糖漿劑或乳劑。
5.含有雷公藤內(nèi)酯酮的 提取物在制備抗血管新生藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，公開了雷公藤內(nèi)酯酮在抗血管新生藥物中的應(yīng)用。采用雷公藤內(nèi)酯酮進(jìn)行了抑制腫瘤新生血管形成的體外和體內(nèi)試驗(yàn)，結(jié)果顯示中草藥單體雷公藤內(nèi)酯酮能誘導(dǎo)腫瘤新生血管形成的關(guān)鍵基因沉默，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞老化、分化和凋亡，消除或降低腫瘤細(xì)胞的新生血管形成能力，使腫瘤血管正常化和消除，提高抗癌療效，由有效量的雷公藤內(nèi)酯酮和藥學(xué)上可接受的輔料組份可制備片劑、顆粒劑、膠囊劑、懸浮劑、糖漿劑或乳劑等常用藥物制劑，能夠用于抗血管新生，此外含有雷公藤內(nèi)酯酮的提取物也可用于制備抗血管新生的藥物制劑。
文檔編號A61P35/00GK103230401SQ20131015582
公開日2013年8月7日 申請日期2013年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月28日
發(fā)明者周泉生, 曹志飛 申請人:蘇州大學(xué)